THC TP NGH NGHIP 2

Sinh vin thc hin: Nguyn Th Ha

PHN I: TM HIU HOT NG NGH NGHIP CA N V N THC TP

Gii thiu chung v Vin cng ngh sinh hc Vin Cng ngh sinh hc (Institute of Biotechnology, IBT) trc thuc Vin Khoa hc v Cng ngh Vit Nam. Vin c i ng cn b ng o cc nh khoa hc c o to chuyn su c trong v ngoi nc. Hin ti c 328 cn b bao gm 2 gio s, 20 ph gio s, 65 tin s, 70 thc s, 171 c nhn/ k s /k thut vin. a ch lin h: 18 Hong Quc Vit, Cu Giy, H Ni

GII THIU CHUNG V PHNG CNG NGH SINH HC

MI TRNG

Tn phng: Cng ngh sinh hc mi trng Tn ting anh: Environmental Biotechnology a ch: Phng 306-307, 202-203, nh A15, Vin Cng ngh sinh hoc, 18 Hong Quc Vit, Cu Giy, H Ni. in thoi: 04 39947243 Trng phng: PGS. TS. Nghim Ngc Minh Ph trng phng: TS. Th T Uyn Phng Cng ngh Sinh hc Mi trng c thnh lp ngy 24/06/2004.

Lnh vc nghin cu

Lnh vc Cng ngh sinh hc mi trng

Lnh vc Y-Sinh hc

Nhng kt qu t c

ti KC-02-12 to ra quy trnh cng ngh phn hy sinh hc u tin ti Vit Nam quy m hin trng cng cc ch phm, cht hot ng b mt sinh hc x l lm sch du m t hiu qu cao.

Sn phm thng mi ha: thit b lc sinh hc NIREF x l nc n ung nhim amoni, thit b NIOREF x l nc nui thy sn khng cn thay nc

Xc nh cu trc, phn loi v tm kim c mt s chng vi sinh vt c kh nng phn hy mt s loi ha cht gy nhim mi trng nh cc k thut sinh hc phn t.

Cc quy trnh sn xut sinh khi vi khun ta quang hp nhm ng dng trong nui trng thy sn

Phng hng

Tip tc nghin cu, p dng trin khai cc quy trnh cng ngh phn hy sinh hc kh c, lm sch ph hp i vi tng loi hnh nhim khc nhau.

pht

Nghin cu c bn phc v trc tip cng ngh mc phn t. c bit ch trng n a dng cc gen chc nng tham gia cc c ch chuyn ha bi tp on vi sinh vt lin quan trc tip n cht nhim v vng nhim nng cao hiu qu kh c.

Trin

Nghin cu pht trin th h cm bin sinh hc mi (Biosensor) pht hin cc hp cht gy ung th v tin ung th ng dng trong kim sot v sinh an ton thc phm v nhim mi trng.

PHN II: TI NGHIN CU THC HIN

Xy dng th chun v phng trnh tng quan thng qua xc nh hm lng amoni trong nc ngt theo phng php Nessler.

MC TIU C k nng thc hnh v lm vic trong phong thi nghim, c th: Bit pha long cc dung dch. Thc hnh phng php o OD xc nh hp th quang ca tng dung dch. Xy dng th chun v phng trnh tng quan xc nh hm lng amoni ca mu nghin cu.

c k phng php trc khi thc hin. Tm hiu thm cc phng khc vi cung mc tiu, t la chn phng php phu hp v chinh xc

Phng php

Tinh ton v qui i cc nng dung dch mt cch chinh xc phc v cho phng php lm th chun.

Hm lng cc cht cha trong mu c xc nh da vo th chun hoc lp phng trnh tng quan gia nng chun v mu nghin cu.

THC TRNG NGUN NC NHIM NIT

Theo nh gi ca nhiu bo co v hi tho khoa hc th trnh trng nhim amoni trong nc ngm c pht hin ti nhiu vung trong c nc: +Khu vc phia Nam ca nc ta, kt qu quan trc nc ngm tng nng gn y cho thy, lng nc ngm khu vc ngoi thnh ang din bin ngy cng xu i. C th, nc ngm trm ng Thch (huyn Hooc Mn) b nhim amoni ti 68,73 mg/l cao gp 1,9 ln so vi nm 2005. +Theo kt qu kho st ca mt s trung tm nc th phn ln nc ngm khu vc ng bng Bc B gm cc tinh nh: H Ty, H Nam, Nam nh, Ninh Bnh, Hi Dng, Hng Yn, Thi Bnh v phia nam H Ni u b nhim bn amoni rt nng. Phn ln cc ngun c nng cao hn tiu chun nc sinh hot khong 3 mg/l. Trong khi tiu chun nc v sinh n ung 1329/BYT-2002 i vi nng NH4+ ti a cho phep l 1,5 mg/l .

NH HNG CA NGUN NC NHIM NIT TI MI

TRNG V SC KHE CNG NG Nc b nhim amoni vi nng cao vt qu tiu chun cho phep vo c th s gy c i vi h thn kinh.

Khi amoni chuyn ho thnh nitrite (NO2-) s gy c ti con ngi, v n c th chuyn ho thnh tc nhn gy ung th. Hoc c th s hp thu nitrite vo mu s dn n trnh trng thiu mu, xanh da. Nitrite c bit nguy him i vi tre mi sinh di su thng tui, n c th lm chm s pht trin, gy nh hng n h hp. Bn cnh hm lng NH4+ trong nc cao c th gy mt s hu qu nh : lm gim hiu qu kh trung nc i rt nhiu. L ngun dinh dng ru to pht trin nh hng n h sinh thi.

NI DUNG
Pha long cc nng chun hp ly tin hnh dng th chun Xc nh hm lng cc cht trong mu nghin cu da vo th chun

PHNG PHP NGHIN CU Nguyn tc Xc nh hm lng NH4 theo phng php Nessler . 2 K2HgI4 + NH3 + 3KOH = Hg(HgIONH2) + 7KI + 2 H2O (mu vng) K2HgI4 + NH3 + KOH = Hg(HgI3NH2) + 5KI + H2O (mu nu) Gii hn nng so mu l 0,002 mg/ml, nng cao c kt ta vng dn n kt qu xc nh khng chinh xc.

PHNG PHP SO MU QUANG IN V XY DNG NG CHUN. So mu quang in l phng php phn tch da trn s so snh cng mu ca dung dch nghin cu vi cng mu ca dung dch tiu chun c nng xc nh. Phng php ny c dng ch yu xc nh lng nh ca cc cht, tn t thi gian so vi cc phng php ha hc khc. Khi s dng phng php so mu nh lng mt cht ngi ta phi dng tia n sc no m khi chiu qua dung dch gi tr OD o c l ln nht. Da vo s hp th bc x ca cc dung dch c m nht khc nhau m xc nh c gi tr OD ca mi dung dch pha long. Sau , chng ta c th tin hnh xy dng ng chun v tm ra phng trnh hi quy tng quan.

Vic xy dng hm tuyn tnh gia gi tr OD v nng dung dch tun theo nh lut Lambert Beer : Khi chiu mt chm tia sng n sc i qua mt mi trng vt cht th cng ca tia sng ban u ( Io ) s b gim i chi cn l I Khong tun theo nh lut Lambert Beer: Khi biu din nh lut Lambert Beer trn th ty theo cch thc hin php o, ta thng gp ng biu din s ph thuc hp thu (OD) vo nng C ca dung dch c dng: y = ax + b H s gc a cho bit nhy ca phng php, trong phng php trc quang ngi ta chi o dung dch trong khong tun theo nh lut Lambert Beer tc l khong nng m gi tr khng thay .H s gc a cng ln v khong tun theo nh lut Beer cng rng l iu kin thun li cho php xc nh. H s tng quan r bin i trong khong -1 r 1 (R2 = 0-1).

S lch khi nh lut Beer: OD Khong tuyn tnh (Limit of Linear Response) l khong nng tun theo nh lut Beer ngha l khi nng tng th hp th quang OD tng. Ngoi gii hn ca khong tuyn tnh l s lch khi nh lut Beer, ngha l khi nng tng th hp th quang OD hu nh khng tng na.

LOL

Gii hn ca nh lut Beer v s hp th quang

Sau khi thit lp ng chun, ta c dng phng trnh : y = ax + b trong : y l hp th quang (OD). x l nng . i vi dung dch xc nh, ta tin hnh phn ng v o c h s hp thu ca mu (OD mu = y), ta c th tnh c nng ca mu cn xc nh theo phng trnh:
x y b a

Ha cht KI NaOH HgCl2 bo ha Nc ct khng m NH4Cl

Thit b My o quang ph UV-1650PC (Nht Bn) Cn phn tch ( Sartourius, c)

TIN HNH
Pha dung dch nessler.

Pha 10g KI trong 10 ml nc ct khng m, thm tng t mt va cho va khuy u dung dch HgCl2 bo ha n khi xut hin kt ta bn. b xung thm 30 gam KOH, khuy cho tan ht. Thm 10 ml dung dch HgCl2 bo ha. Cui cng thm nc ct cho va 200 ml. lng trong bng ti, sau lc ly phn dch trong v bo qun trong chai thy tinh mu nu c nt nhm.

Pha dung dch gc NH4+

Ha tan hon ton 29,7 gam NH4Cl vo nc ct khng m, sau thm nc ct khng m cho va 1000ml (vy dung dch gc c nng 2,97 % NH4Cl tng ng vi 10 mg NH4+ /ml).

TIN HNH PHA LONG V O OD

Ti l pha long

Hm

lng

Pha long dung dch gc dung dch chun vi NH4+ trong dung ra lm 100 ln. Ty thuc dch pha long vo nng c chn nc ct (ml/ml) lm chun m ta tip tc (mg/l) pha long theo cc ti l khc nhau. Ly 6 ng 0,05 +4,95 1 nghim tin hnh pha long theo cc ti l sau 0,1 + 4,9 2 y:
0,15 + 4,85 0,2 + 4,8 0,25 + 4,75 5 3 4 5 0

Phn ng to mu ca dung dch pha long vi thuc th Nessler: sau khi c c cc nng pha long tin hnh b sung 0,2 ml dung dch Nessler, khuy u v yn nhit phong 15 pht. Sau nh lng amoni bng cch o hp th A420 trn my quang ph k. Cc gi tr thc hnh trn c lp li 3 ln v ly gi tr trung bnh. S dng phn mm Excell lp th Da trn th chun xc nh hm lng amoni trong mu.

CHNG III: KT QU V THO LUN Gi tr OD ca tng dung dch c xc nh trn my quang ph bc sng 420 nm tng ng vi cc nng pha long, kt qu c th hin bng sau:
NH4+mg/l) 1 2 3 4 5

OD
=420 nm

0,21

0,45

0,62

0,82

0,94

XY D NG T H I C H U N AMONI D A V A O P H N MM

EXCELL

ng chun NH4 1.2 1 0.8

OD

y = 0.1914x + 0.0281 R = 0.9916

0.6 0.4 0.2 0

0 1 2 3 4 5 6

Series1 Linear (Series1)

nng NH4

Sau qu trnh thc hnh, ti xy dng thnh cng phng trnh ng chun: y= 0,191x + 0.028. Trong : y l gi tr OD v x l nng NH4+ . Do 2 gi tr c R = 0.991 cho thy hai gi tr ca phng trnh tng quan kh cht ch. Phng trnh tng quan c b = 0,028 > 0 nn hai gi tr OD v nng NH4+ t l thun vi nhau.

KT LUN V KIN NGH

Kt Lun thc hin cc thao tc c bn cho mc ich xy dng th chun. xy dng thnh cng th chun amoni (c R = 0.991) c chinh xc kh cao. xc nh c hm lng mu cha amoni thng qua th chun. Kin Ngh Thi gian thc hin trong phong thi nghim con rt it nn cc thao tc trong phong thi nghim cha thnh thc, do kt qu t c cha c chinh xc cao. ngh sau khi kt thuc thi gian hc trn trng, c tip tc lm vic v thc hnh cc ti trong phong thi nghim c k nng thc hnh cao hn.

TI LIU THAM KHO

Hong Phng H(2009). Lun n tin s: Nghin cu vi khun nitrate ha ng dng trong cng ngh x l nc nhim amoni. o Chnh Thun, n tt nghip: trung nghin cu cc yu t nh hng n qu trnh trao i amoni trn nha cationit K07 lp cng ngh mi trng - i Hc Khoa Hc T Nhin H Ni. Trn Vn Nh, (2003), Bo co tng kt d n: Xy dng m hnh p dng k thut sinh hc kh Nitlin kt trong nc n ung, 2002-2003, cp Vin Khoa hc v Cng ngh Vit Nam. L Vn Khoa, (1996), Phng php phn tch t- ncphn bn- cy trng. NXB Gio Dc, trang 17-20,101-102.

1.

2.

3.

4.