6.

ELMENTOS OBLIGADOS PARED CELULAR: Definicin: Tambin se conoce con el nombre de pared bacteriana; es una estructura fundamental para la bacteriana. Se ubica inmediatamente antes de la membrana citoplasmtica y se constituye en su elemento obligado mas externo. Es una cubierta rgida que le da forma peculiar a la bacteria y la protege de las injurias externas, principalmente de los posibles cambios de presin osmtica que pueden surgir en el medio donde se encuentra. La pared puede visualizarse mediante una tcnica de tincin bacteriana de tipo diferencial, descubierta por el cientfico dans Cristian Gram, la cual se conoce popularmente como coloracin de Gram, la cual se basa en la capacidad de las bacterias de retener el colorante primario (cristal de violeta), aun despus de haber sido decoloradas con alcohol acetona. Esta situacin se presenta por causa de las diferencias estructurales de las paredes celulares de las bacterias. Como esta coloracin se clasifica como compleja y diferencial, el resultado de la tcnica clasifica a las bacterias en bacterias Gram positivas (color violeta) y bacterias Gram negativas (color rojo o rosado). FUNCION: Protege a la bacteria de cambios externos adversos. Ayuda a mantener la morfologa de la clula. Proporciona a la bacteria resistencia a los antibiticos. Permite el paso selectivo de algunas sustancias. Proporciona la especificidad de grupo y de tipo en la sistemtica bacteriana. Est implicada en la patogenicidad de la bacteria.

CITOPLASMA DEFINICION: Es la porcion celular con mas contenido acuoso (80%), es como un coloide que tiene en suspensin protenas, azcares, lpidos, iones inorgnicos y compuestos de bajo peso molecular. En el citoplasma se encuentran los ribosomas y el nucloide. La zona donde se ubican los ribosomas es de aspecto granular y se llama citosol. FUNCION: Engloba los orgnulos celulares, incluyendo el ncleo, ribosomas, depsito, de reserva, llamados inclusiones, vacuolas, etc.

MEMBRANA CITOPLASMATICA DEFINICIN: Esta membrana, que esta situada, por dentro de la pared celular, unida o no al espacio periplasmatica, contiene el citoplasma con sus estructuras. Compuesta fundamentalmente por fosfolpidos y algunas protenas, es ms flexible que las membranas de los eucariotas. FUNCION: Acta como barrera selectiva. Interviene en la degradacin de nutrientes y en la produccin de energa. En algunas bacterias se encuentran pigmentos y enzimas implicados en la fotosntesis.

REGION NUCLEAR DEFINICION: Se le denomina indistintamente de cualquiera de estas formas para sealar que carece de membrana nuclear. Se trata de una sola molcula de DNA bicatenario larga, enrollada, cerrada, sin cubierta, ubicada en la parte central de la clula y adherida a la membrana citoplasmtica. Las cadenas del DNA se abren y cada una sirve de molde para que se produzca otra, con el auxilio de varias enzimas. En realidad, esta constituido en su mayor parte por DNA, pero tambin se detectan RNA y protenas. Ocupa aproximadamente el 20% del volumen de la clula. FUNCION: Consiste en la transmisin de la informacin gentica para conservar las estructuras y las funciones de cada especie. Algunos antimicrobianos actan a este nivel. Desde hace algunos aos las bacterias se tipifican por la secuencia y los tipos de genes, es decir, por el mapa gentico.

RIBOSOMAS DEFINICION: Son elementos esfricos o ligeramente aplanados, presentes en una cantidad de 10.000 o ms, lo que confiere al citoplasma el aspecto granuloso. Estn aislados o reunidos de a tres o de a cuatro mediante un trozo lineal de RNA mensajero (RNAm) y asi forman polisomas.

FUNCION: All se realiza la sntesis de protenas y tiene lugar la accin de antibacterianos, tales como las tetraciclinas. Otros antimicrobianos actan especficamente sobre cada una de las subunidades.

ELEMENTOS FACULTATIVOS
FLAGELOS DEFINICION: Son filamentos extracelulares, largos, flexibles, ondulados y delgados que hacen que las bacterias que los poseen gocen de movilidad. Aparecen en algunos bacilos rectos o curvos, tanto grampositivos como gramnetivos. FUNCIONES: La principal funcin de os flagelos es la movilidad, que permite que las clulas se acerquen o se alejen del medio segn ste les sea favorable o no (quimiotaxis positiva o negativa). Esta facilidad para moverse las ayudara a extenderse a otras zonas en un organismo, lo que equivaldra a otorgarles mayor patogenicidad. Tambin como antgeno y se los denomina antgeno H (del vocablo alemn Hanch, que significa esparciado) por el tipo de cultivo que producen. ENDOSPORAS DEFINICION: Son elementos de resistencia, en general oviodes, que slo aparecen cinco gneros de bacterias grampositivas. Dos de esos gneros incluyen especies patgenos para el hombre. Las esporas presentan varias capas y todos los elementos constitutivos de la clulas, pero deshidratados. FUNCIONES: Los esporos le confieren a la bacteria, adems de la capacidad de supervivencia, una gran resistencia a los agentes fsicos y qumicos, y debido a esta particularidad algunas bacterias esporuladas se usan como indicadores (controles biolgicos) para saber si un ciclo de esterilizacin ha sido exitoso o no. Tambin se utilizan para determinar el nivel de efectividad de un antisptico o un desinfectante. De hecho resisten la ebullicin hasta por un periodo de diecinueve horas. Las caps superficiales de las esporas son muy antignicas.

FIMBRIAS O PILIS: Son prolongaciones delicadas o vellosidades semejantes a pelos que se presentan diversas bacterias, incluidos los cocos. Sin embargo, son mas comunes en las bcaterias grampositivas, son cortas, rgidas, muynumerosas y mas delgadas que los flagelos. Estn dispuestass tanto en los polos de los

bacilos como en el resto de su entorno. Slo se las visualiza con el microscopio electrnico. La constitucion es proteica; la protena constitutiva, que recibe el nombre de pilina, est dispuesta de tal modo que deja un hueco central. Es posible que una clula flagelada tambin posea fimbrias. Las fimbrias antes se denominaban pili counes y sirve para la adherencia. En su extremo pueden tener otra protena (lectina) que se fija a azcares especficos. FUNCIONES: Una de las funciones de las fimbrias es la adherencia (adhesina), habilida paa permanecer unidas, por ejemplo, a clulas de la mucosa y luego invadir tejidos mas profundos. Esto reviste importancia en patologa bucal y en otras enfermedades infecciosas. Los pili transmiten informacin gentica, por lo que se los relaciona con casos de resitencia a los antimicrobianos. Ambas estructuras son antignicas.

CAPSULA: Es la estructura mas externa en as clulas que cuentan con la informacin gentica necesaria para poseerla. Est situada por fuera de la pared celular. En genral, es de cnstitucion polisacardica, aunque las hay peptdicas. Est muy hidratada. Tiene un espesor uniforme y se encuentra firmemente adherida a la pared celular. No se colorea con las tcnicas comunes. Puede ser puesta en evidencia por tcnicas de tincin negativa. Es mas notoria en los microrganismos en vivo y en cultivos primarios. Por el tipo de cultivo que origina puede suponerse si una bacteria es capsulada o no, dado que las primeras producen colonias llamadas lisas o mucoides. FUNCIONES: La capsula les confiere a los microrganismos que la poseen una mayor capacidad de agresin o virulencia. Protege a la bacteria del mecanismo de fagocitosis que ejecutan las clulas encargadas de la defensa del organismo. Les permite resistir la accin de los antibacterianos. Actan favoreciendo la adhesin. Es fuente de reserva de nutrientes. Es muy antignica. El antgeno caspsular se denomina K de Kapsel o Vi de virulencia. La presencia de cpsula en algunas bacterias sirve para pruebas de identificacin.

7. FISION BINARIA En su mayora, las bacterias se reproducen mediante un mecnismo asexual en el cual la clula crece, dupica su material gntico, y luego se divide por la mitad; este proceso da origen a dos clulas, cada una de las cuales repite el proceso. Este tipo de reproduccin se denomina fision binaria. La fision binaria se lleva a cabo a travs de una serie de pasos sucesivos que se inician con la obtencin, por parte de la bacteria, de los nutrimentos que requiere a partir del ambiente en el que se encuentra. Utilizando estos nutrimentos, la clula crece (aumentan su masa y su tamao). Posteriormente, se sintetizan los componentes de la pared transversal y se inicia la fision que da como resultado dos clulas nuevas. La fisin, en las formas bacilares y espirilares, tiene lugar en un nico plano perpendicular al eje mayor de la celula.

8. La coloracin de Gram ha constituido, desde los albores de la Baxteriologia, un elemtoo fundamental para la taxoni

COLORACIN DE GRAM
COLORACIN DE GRAM: es la ms comnmente empleada en bacteriologa y micologa. Diferencia Gram+ (violeta) o Gram- (rosado) - BGP (Bacterias Gram+) BGN (Bacterias Gram-)

Fundamento o Principio: se basa en las diferencias de la pared celular existentes entre BGP (pared gruesa) y BGN (pared fina). Reactivos: 1. Cristal violeta o Violeta Genciana Colorante 1rio. de 3. Alcohol o Acetona Decolorante.

2. Lugol o Solucin yodada de KI 4.

Fuscina

(rosado) o

Safranina

Mordiente.

(amarillo) Colorante 2rio.

Tcnica: se realiza el frotis y extendido. cuando se aplica el colorante 1rio todas las clulas (G+ y G-) absorben el colorante. Cuando se aplica el mordiente, slo las cel. G+ formarn el complejo Yodo-Cristal Violeta dentro de la pared celular. Este complejo fija fuertemente el colorante 1rio a la pared celular de las clulas G+. Cuando se aplica el decolorante las clulas G- (que no han formado el complejo) pierden los lpidos de su pared (y con ellos el colorante 1rio) y sta se torna porosa dejando el paso libre a cualquier otra sustancia colorante para que ingrese a la clula. Finalmente, cuando se aade el colorante 2rio ste atraviesa fcilmente la pared celular (que qued muy porosa tras el decolorante) y tie todo el citoplasma de la clula de un color rosado

9. investigar los fundamentos de la coloracin de ziehl neelen

COLORACIN DE ZIEHL-NEELSEN
Se emplea para detectar la presencia de BAAR (Bacilos Acido-Alcohol Resistentes). Utilidad: diagnstico de enfermedades infecciosas producidas por: a. Micobacterias Micobacterium Mycobacterium leprae (Lepra). tuberculosis (Tuberculosis) y

b. Bacterias del gnero Nocardia Nocardiosis (similar a tuberculosis) y Micetoma actinomictico (micosis subcutnea). Reactivos: 1. Fuscina bsica, Carbofuscina o Fuscina 3. Azul de Metileno Colorante de Ziehl Colorante 1rio. 2rio o de Contraste. 2. Sn. de Acido (HCl) Alcohol (Etanol) Decolorante. Fundamento: los BAAR poseen una pared celular rica en lpidos y cidos carboxlicos (cido miclico) que tienen la propiedad de unirse excepcionalmente fuerte al colorante 1rio (fuscina de Ziehl) cuando se usa el calor como mordiente. Una vez que se forma este complejo colorante-pared, ni siquiera la accin conjunta del cido y del alcohol pueden deshacerlo, ya que las paredes retienen el colorante en forma "resistente".

Tcnica: se realiza el frotis. Se aplica el colorante 1rio sobre la muestra y se deja reposar. Luego se emplea la llama de un mechero para calentar la muestra hasta la aparicin de vapores blancos. El calor se emplea como mordiente, gracias al calor los lpidos de la pared dejan pasar el colorante para que se combine con los cidos carboxlicos de la pared, as se forma el complejo colorante-pared. Se deja reposar y se lava con agua. Las bacterias que no han formado el complejo en su pared (no BAAR) no retendrn el colorante, el exceso del mismo ser arrastrado por el agua. Se aplica el colorante 2rio, se deja reposar y se lava con agua. Coloracin en caliente (Tcnica de Ziehl-Neelsen): emplea el calor como mordiente para formar el complejo colorante-pared. Es la tcnica recin descrita. La principal desventaja consiste en que se puede llevar a cabo una decoloracin en caliente (tiempo prolongado). Esta consiste en aplicar el decolorante cido-alcohol y luego calentar la muestra, la capa lipdica se ablanda y el decolorante puede atravesar la pared celular retirando el decolorante 1rio y revirtiendo el proceso de formacin del complejo colorante-pared. Por esto se dice que la coloracin en caliente no brinda resultados diferenciales. Coloracin en fro (Tcnica de Kinyoun): utiliza un reactivo especial que adems de fascina agrega una [Fenol]. El fenol disuelve los lpidos de las paredes celulares permitiendo que el colorante 1rio entre el contacto con los cidos carboxlicos y forme el complejo cido-alcohol resistente. Esta tcnica permite obtener resultados diferenciales ya que no es posible la decoloracin en caliente. Informacin del resultado: se hace de acuerdo a la cantidad de BAAR observados en la muestra. 1-2 BAAR / 300 Dudoso, repetir. campos 1-9 BAAR / campo de inmersin (+++) Abundantes.

1-9 BAAR / 100 campos (+) 9 BAAR / campo de inmersin (++++) Muy escaso. Muy abundantes. 1-9 BAAR / 10 campos (++) Muy pocos.

10. definir los diferentes mecanismos de variabilidad gentica en bacterias: La Transduccin es un proceso mediante el cual el ADN es transferido desde una bacteria a otra mediante la accin de un virus. Tambin se utiliza para designar al proceso mediante el cual ADN exgeno es introducido en una clula mediante un vector viral. Esta es una herramienta que usualmente utilizan los bilogos moleculares para introducir en forma controlada un gen extrao en el genoma de una clula receptora La CONJUGACIN es la fusin de los ncleos celulares con fines reproductores. Se conoce como conjugacin bacteriana al proceso de transferencia de informacin gentica que se inicia en una clula donadora y se dirige a una clula receptora. TRANSFORMACIN es el trmino utilizado para las alteraciones genticas resultantes de introducir ADN por virus (transduccin) o por contactos intercelulares entre bacterias(conjugacin). A la transformacin de clulas animales se le llama transfeccin. El trmino transformacin es tambin usado, de manera ms general, para describir mecanismos de transferencia de ADN o ARN en biologa molecular (es decir, teniendo en cuenta ms que las consecuencias genticas). Por ejemplo la produccin de transgnicos como maz transgnico requiere la insercin de nueva informacin gentica en el genoma del maz usando el mecanismo apropiado de transferencia de ADN; el proceso se le llama comnmente transformacin. El ARN tambin puede ser transferido en las clulas usando mtodos similares, pero esto no provoca normalmente cambios heredables y por lo tanto no es transformacin real. MUTACIN MOLECULAR o mutacin puntual a los cambios que alteran la secuencia denucletidos del ADN. No confundir con una mutacin gnica que se refiere a una mutacin dentro de un gen. Estas mutaciones en la secuencia de ADN pueden llevar a la sustitucin de aminocidos en las protenas resultantes. Un cambio en un solo aminocido puede no ser importante si es conservativo y ocurre fuera del sitio activo de la protena. De lo contrario puede tener consecuencias severas, como por ejemplo:

La sustitucin de valina por cido glutmico en la posicin 6 de la cadena polipptidica de la beta-globina da lugar a la enfermedad anemia falciforme en individuos homocigticos debido a que la cadena modificada tiene tendencia a cristalizar a bajas concentraciones de oxgeno.

Las protenas del colgeno constituyen una familia de molculas estructuralmente relacionadas que son vitales para la integridad de muchos tejidos, incluidos los huesos y la piel. La molcula madura del colgeno est compuesta por 3 cadenas polipeptdicas unidas en una triple hlice. Las cadenas se asocian primero por su extremo C-terminal y luego se enroscan hacia el extremo N-terminal. Para lograr este plegado, las cadenas de colgeno tienen una estructura repetitiva de 3 aminocidos: glicina - X - Y (X es generalmente prolina y Y puede ser cualquiera de un gran rango de aminocidos). Una mutacin puntual que cambie un solo aminocido puede distorsionar la asociacin de las cadenas por su extremo C-terminal evitando la formacin de la triple hlice, lo que puede tener consecuencias severas. Una cadena mutante puede evitar la formacin de la triple hlice, an cuando haya 2 monmeros de tipo salvaje. Al no tratarse de una enzima, la pequea cantidad de colgeno funcional producido no puede ser regulada. La consecuencia puede ser la condicin dominante letal osteognesis imperfecta.

Entre las mutaciones podemos distinguir:

Mutacin por sustitucin de bases: Se producen al cambiar en una posicin un par de bases por otro (son las bases nitrogenadas las que distinguen los nucletidos de una cadena). Distinguimos dos tipos que se producen por diferentes mecanismos bioqumicos:

Mutaciones transicionales o simplemente transiciones, cuando un par de bases es sustituido por su alternativa del mismo tipo. Las dos bases pricas son adenina (A) y guanina (G), y las dos pirimdicas son citosina (C) y timina (T). La sustitucin de un par AT, por ejemplo, por un par GC, sera una transicin. Mutaciones transversionales o transversiones, cuando un par de bases es sustituida por otra del otro tipo. Por ejemplo, la sustitucin del par AT por TA o por CG.

Mutaciones de corrimiento , cuando se aaden o se quitan pares de nucletidos alterndose la longitud de la cadena. Si se aaden o quitan pares en un nmero que no sea mltiplo de tres (es decir si no se trata de un nmero exacto de codones), las consecuencias son especialmente graves, porque a partir de ese punto, y no slo en l, toda la informacin queda alterada. Hay dos casos:

Mutacin por prdida o delecin de nucletidos: En la secuencia de nucletidos se pierde uno y la cadena se acorta en una unidad.

Mutacin por insercin de nuevos nucletidos: Dentro de la secuencia del ADN se introducen nucletidos adicionales, interpuestos entre los que ya haba, alargndose correspondientemente la cadena.

Mutaciones en los sitios de corte y empalme (Splicing)

Las mutaciones de corrimiento del marco de lectura tambin pueden surgir por mutaciones que interfieren con el splicing del ARN mensajero. El comienzo y final de cada intrn en un gen estn definidos por secuencias conservadas de ADN. Si un nucletido muta en una de las posiciones altamente conservada, el sitio no funcionar ms, con las consecuencias predecibles para el ARNm maduro y la protena codificada. Hay muchos ejemplos de estas mutaciones, por ejemplo, algunas mutaciones en el gen de la beta globina en la beta talasemia son causadas por mutaciones de los sitios de splicing. RECOMBINACION Como ya hemos dicho, la recombinacin gentica es un proceso que lleva a la obtencin de un nuevo genotipo a travs del intercambio de material gentico entre secuencias homlogas de DNA de dos orgenes diferentes. Las secuencias homlogas de DNA tienen la misma secuencia o casi la misma; por consiguiente, puede ocurrir apareamiento de bases en una longitud extensa de las dos molculas de DNA. Los cromosomas homlogos tienen los mismos genes ubicados en el mismo sitio. Sin embargo, los genes, aunque similares, pueden no ser necesariamente idnticos como ocurre cuando existe una mutacin en un gen. Para que aparezcan nuevos genotipos como consecuencia de la recombinacin, es esencial que las dos secuencias homlogas sean genticamente diferentes. Tal es el caso en una clula eucaritica diploide, que tiene dos juegos de cromosomas, uno procedente de cada padre. El punto donde los cromosomas se cruzan se denomina kiasma y el proceso de intercambio se llama entrecruzamiento. En las clulas procariotas slo existe un nico cromosoma. Por lo tanto, antes de que pueda ocurrir la recombinacin, un cromosoma homlogo (normalmente una parte de este) debe primero ser transferido desde una bacteria donadora a una bacteria receptora. Debido a que el cromosoma del donador debe ser homlogo con el receptor, las bacterias donadoras y receptoras generalmente pertenecen a la misma especie o a especies muy relacionadas. La recombinacin homloga ocurre despus de la transferencia es decir, cuando el fragmento de DNA del donador est en la clula receptora. Si no se produce recombinacin, el fragmento de DNA del donador se perder, debido a que no puede replicarse independientemente.

11. relaciones entre husped y microrganismo. Definir los siguientes trminos

MODELOS DE RELACIN: entre el husped y el microorganismo

puede darse una relacin simbitica.

Simbiosis: cualquier relacin o asociacin ntima, a largo plazo, entre dos o ms especies. Los miembros de la relacin se denominan simbiontes. Existen tres tipos de simbiosis:
o

Mutualismo: ambas partes se benefician. El ejemplo: el ser humano y las bacterias de la flora intestinal normal. Comensalismo: un organismo se beneficia y el otro no es perjudicado ni beneficiado. Parasitismo: uno de los miembros (el parsito), se beneficia, el otro (el husped), se perjudica. Ej.: garrapatas, tenias

MICROFLORA: Representada por hongos, algas unicelulares y vegetales microscpicos que se encuentran en un suelo . Las infecciones estn producidas por grmenes patolgicos, ya sean bacterias, virus u hongos microscpicos, que invaden el organismo y se multiplican en l, produciendo sustancias txicas. En la actualidad se combaten y previenen mediante los antibiticos, las vacunas, la higiene y la mejora de las condiciones sanitarias. Rara vez representan un peligro grave para la salud en los pases industrializados La PATOGENICIDAD de los microbios se define como su capacidad para producir enfermedad en huspedes susceptibles.1 Asimismo es un atributo 2 del gnero y especie. As por ejemplo: el gnero Salmonella es patgeno para los vertebrados pero Salmonella typhi es solo patgeno para el hombre. La patogenicidad se expresa clnicamente en proporcin variable segn los microbios y el hospedero, pero la regla es que hay convivencia pacfica. Infectividad en epidemiologa a la capacidad de una agente patgeno (bacteria, virus...) para invadir un organismo y provocar en l una infeccin. No debe ser confundido con el concepto epidemiolgico de virulencia, que hace alusin a la capacidad de provocar dao orgnico una vez se ha establecido la infeccin

INFECTIVIDAD en epidemiologa a la capacidad de una agente patgeno (bacteria, virus...) para invadir un organismo y provocar en l una infeccin. No debe ser confundido con el concepto epidemiolgico de virulencia, que hace alusin a la capacidad de provocar dao orgnico una vez se ha establecido la infeccin

LA TOXIINFECCIN ALIMENTARIA o enfermedades de transmisin alimentaria son enfermedades producidas por la ingesta de alimentos contaminados por agentes biolgicos (bacterias, virus, parsitos) o sus toxinas. Estos agentes y toxinas llegan a los alimentos por una inadecuada manipulacin o por una mala conservacin.

SAPROFITOS. MICRORGANISMOS, especialmente, bacterias que viven a expensas de la materia orgnica descompuesta, por tanto, no patgenos.

COLONIZACIN Definicin Proceso mediante el cual una especie se establece en territorios no habitados previamente.

Una ENFERMEDAD INFECCIOSA puede ser la manifestacin clnica consecuente a una infeccin provocada por un microrganismo como bacterias, hongos, virus, y a veces, protozoos, etc. o por priones. En el caso de agentes biolgicos patgenos de tamao macroscpico, como los gusanos, no se habla de infeccin sino de infestacin. En el caso de infeccin o infestacin por protozoos, vermes o artrpodos se habla de enfermedad parasitaria, ya que dichos grupos han sido estudiados tradicionalmente por la parasitologa.

LA VIRULENCIA es el grado de patogenicidad de un serotipo, de una cepa o de una clona microbiana en un husped susceptible. PATGENOS OPORTUNISTAS Este tipo de microorganismos no infecta habitualmente a individuos sanos, pero s infectan a individuos hospitalizados, con patologas basales previas, inmunodeprimidos o debilitados.Dentro de estos

patgenos, un porcentaje importante es el formado por bacterias de origen medioambiental, con frecuencia resistentes a los antibiticos.

EJEMPLO DE BACTERIAS DE IMPORTANCIA A NIVEL CLNICO

12. bacterias anaerobias es importante a nivel clinco ya que Flora bacteriana humana predominante, Causan infecciones e intoxicaciones serias, con frecuencia fatales, Patgenos oportunistas, En asocio con infecciones por aerobios

13. IMPORTANCIA DE LA BACTERIA A NIVEL INDUSTRIAL Microrganismo de uso industrial debe producir la sustancia de inters; debe estar disponible en cultivo puro; debe ser genticamente estable y debe crecer en cultivos a gran escala. Otra caracterstica importante es que el microrganismo industrial crezca rpidamente y produzca el producto deseado en un corto perodo de tiempo. El microrganismo debe tambin crecer en un relativamente barato medio de cultivo disponible en grandes cantidades. Adems, un microrganismo industrial no debe ser patgeno para el hombre o para los animales o plantas. .