You are on page 1of 45

1

MC LC
DANH MC HNH V ....................................................................................... 2 DANH MC BNG ............................................................................................ 3 M U ............................................................................................................. 4 CHNG I: C S L LUN 1.1. Tm hiu chung v cy qut ...................................................................... 8 1.2. Tm hiu chung v tinh du ..................................................................... 9 1.3. Phng php chng ct li cun hi nc ................................................ 14 1.4. Ly trch bng chiu x vi sng ................................................................. 16 1.5. nh gi cht lng tinh d u bng phng php ha l ........................... 18

CHNG 2: THC NGHIM 2.1. Ha ch t v dng c ................................................................................ 24 2.2. Nguyn liu v x l nguyn liu .............................................................. 26 2.3. Ly trch tinh du t v qu qut .............................................................. 26 2.4. Kh o st cc ch s ha l v thnh phn ha hc ca tinh du v qu qut .......................................................................... 29 2.5. Kh o st th nh phn ha hc ngoi tinh d u ca v qu qut ................... 31 2.6. Kh o st th nh phn ha hc ca nc qu qut ...................................... 32

CHNG 3: KT QU V THO LUN 3.1. m nguyn liu .................................................................................. 33 3.2. Ly trch tinh du t v qu qut ............................................................... 33 3.3. Kh o st th nh phn ha hc ngoi tinh d u ca v qu qut ................... 39 3.4. nh tnh s b thnh phn ha hc ca nc qu qut ............................ 41

KT LUN V KIN NGH .............................................................................. 43 KT LUN .......................................................................................................... 43 KIN NGH ......................................................................................................... 43 TI LIU THAM KHO .................................................................................... 45 PH LC

DANH MC HNH V
Hnh 1.1. c im hnh thi cy qut v qu qut ............................................... 8 Hnh 2.1. Quy trnh ch ng ct li cun hi nc theo phng php un nng c in ........................................................ 27 Hnh 2.2. H thng chng ct li cu n hi nc theo phng php un nng c in ........................................................ 27 Hnh 2.3. Quy trnh ch ng ct li cun hi nc theo phng php chiu x vi sng ......................................................... 28 Hnh 2.4. H thng chng ct li cun hi nc theo phng php chiu x vi sng ....................................................... 28 Hnh 2.5. Quy trnh ly trch cc hp cht ngoi tinh du ca v qu qut.............. 31 Hnh 2.6. Sc k ct hai mu v qu qut dng xc nh thnh ph n ha hc ngoi tinh du. ........................................... 32 Hnh 3.1. Sc k tinh du v qu qut thu c t phng php chng ct li cun hi nc c in. ............................. 36 Hnh 3.2. Sc k tinh du v qu qut thu c t phng php chng ct li cun hi nc kt hp vi chiu x vi sng. ...................... 36

DANH MC BNG
Bng 1.1. Thnh phn ha hc ca tinh du v qu qut........................................12 Bng 1.2. Thnh phn ha hc ca tinh du v qu qut........................................12 Bng 1.3. Cc ch s ha- l ca tinh du .............................................................13 Bng 3.1. m ca v qu qut ..........................................................................33 Bng 3.2. Cc ch s ha l ca tinh du...............................................................34 Bng 3.3. Thnh phn ha hc ca tinh du v qu qut qua chp ph GC/MS .....37 Bng 3.4. Kt qu th hot tnh sinh hc ca mu tinh du thu c t phng php chng ct li cun hi nc c in..................38 Bng 3.5. Kt qu th hot tnh sinh hc ca mu tinh du thu c t phng php chng ct li cun hi nc kt hp vi chiu x vi sng ....39 Bng 3.6. Thnh phn ha hc ngo i tinh du ca v qu qut qua chp ph GC/MS.................................................................................40

M U
1. L do chn ti V cc loi cy citrus: cam, chanh, bi t lu c s dng sn xut tinh du cc nc cng nghip trn th i gii nh M, . Tinh du citrus c mi thm d chu, hm lng limonen cao c s dng rng ri trong th c phm v m phm. Trong cc nghin cu gn y cn cho thy limonen cn c tc dng tn si, ph khi uNgoi ra theo m t vi nghin cu mi y cho thy thnh phn ca nc qu qut c li th nh cao qut c cha flavonoid, phytostereol, steroid, carotenoidc bit c cha ankaloit dc tnh cao. nc ta, c bit l vng ng bng sng Cu Long trong c tnh ng Thp, mt lo i cy thuc lo i Citrus h Rutaceae (h cam) khc l cy qu t ph bin l loi citrus japonica Thumb. (fortunella japonica Swing) c trng khp ni. Cy qut (cy tc, cy hnh) tr n n quen thuc vi chng ta vi cng dng lm cy cnh. T xa xa, trong dp tt Nguyn n, ngi ta bit dung cy qut trang tr khng phi bng hoa m bng qu. Nhng qu qut trn trnh vi mu cam hp dn khng nhng lm p cnh quan ngy tt m cn l v thuc hay trong y hc c truyn v kinh nghim dn gian. Theo ng y qu qut v ngt chua, tnh m vo cc kinh ph , v, can. C cng nng ha m, tr ho, l kh, gii ut, tiu th c, gii ru. V qut c nhiu tc dng nh khng khun, gim tress gip ng ngon, tr au u, kh mi, tr y hi, h ng huyt Qu qut c thu hi quanh nm v c th dng ti, kh hay ng lnh tch ly tinh du. Cc nghin cu v tinh du qut c thc hin kh nhiu trn thi gii nhng ti Vit Nam cn rt hn ch, gn y mi c mt s t cng trnh nghin cu v tinh d u qu t. Tuy nhin tt c ch tp trung nghin cu thnh ph n ha hc ca tinh d u, cc nghin cu v hot tnh sinh hc ca tinh du qut t c quan tm. c bit vic nghin cu tch chit cc hp cht c dc tnh cao ngoi tinh du t qu qut l vn mi m, cha c quan tm nghin cu. Vic nghin cu tch chit tinh du v cc hp cht ngoi tinh d u c dc tnh cao ng thi th hot tnh sinh hc ca tinh du qut l vic lm cn thit gp phn vo vic s dng cc hp cht thin nhin trong cc lnh vc thc phm, dc phm v m phm. Qua nghin

5 cu ca ti s lm tng gi tr kinh t ca cy qut tnh ng Thp, gp phn vo vic pht trin nn nng nghip ca tnh nh . gp phn xc nh thnh phn ha hc v kho st hot tnh sinh hc ca qu qut chng ti chn ti: Kho st thnh phn ha hc ca qu qut trn a bn tnh ng Thp. 2. Mc tiu nghin cu Kho st thnh ph n ha hc ca tinh du v ngoi tinh d u ca qu qut, th hot tnh sinh hc ca tinh du qut. 3. Nhim v nghin cu - Nghin cu c s l lun v thc tin ca ti. - Tin hnh thc nghim ly trch tinh du t v qu qut bng phng php chng ct li cun hi nc v chng ct li cun hi nc kt hp chiu x vi sng. - Xc nh mt s ch s ha l v thnh phn ha hc ca tinh du t hai phng php chng ct trn. - Chit, sc k bn mng v sc k ct t dung mi t phn cc n phn cc kho st thnh phn ha hc ngo i tinh du. - nh tnh s b v xc nh th nh phn ha hc ngoi tinh d u c trong qu qut qua cc thuc th hu c, GCMS. - Th hot tnh sinh hc v kh nng khng khun ca tinh du qut t hai phng php chng ct li cun hi nc v chiu x vi sng. 4. Cc phng php nghin cu - Nghin cu l thuyt: thu thp, phn tch, tng hp ti liu - Th c nghim ha hc: + Cc phng php tch chit cc hp cht hp c: Phng php chng ct li cu n hi nc c in v chng ct li cun hi nc kt hp vi chiu x vi sng. + Cc phng php xc nh cc hp cht hu c: Sc k bn mng, sc k ct, Ph UV, GC-MS. + Phng php sinh ha: Th hot tnh sinh hc ca tinh du 5. i tng v phm vi nghin cu Qu qut Cao lnh ng thp

6 6. Lch s ca vn nghin cu Cc nghin cu v tinh du qut c thc hin kh nhiu trn thi gii nh M nhng ti Vit Nam cn rt hn ch, gn y mi c mt s t cng trnh nghin cu v tinh du qut 1. Kho st tinh du v tri ging Citrus h rutaceae - ThS. Nguyn Minh Hong i hc M Tp HCM -2006. Ni dung ca cng trnh l kho st thnh phn ha hc ca tinh du bi da xanh, cam snh, chanh giy v th hot tnh khng khun ca cc loi tinh du ny. 2. Tch chit tinh du v ankaloit t qu qut- Nguyn Th L, L Th Oanh, Phan Th Bo Vy. Khoa Cng ngh Ha Hc HBK TP HCM 2009 tch v xc nh thnh phn ha hc ca tinh du qut, bc u chit v nh tnh ankaloit c trong nc qu qut. 3. Ly trch tinh d u v tri v l tc- Trnh Hong Hiu, Nguyn Th Bo trn, L Ngc Thch. Tp ch pht trin khoa hc v cng ngh , tp 12, s 10 -2009. Nhm tc gi nghin cu ly trch tinh du t l v v qu tc bng hai phng php chng ct li cun hi nc v chng ct li cun hi nc c s kt hp ca chiu x vi sng, th hot tnh sinh hc ca tinh du l v v tc thu c t hai phng php chng ct trn. 4. Duong Phuoc An, Huynh Thi Bich Tuyen, Nguyen Ngoc Khoi * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 14 - Supplement of No 1 - 2010: 35-40. Ni dung ca cng trnh l kho st thnh phn ha hc v th hot tnh gii lo u ca tinh du bi, cam, chanh, qut, qut, kt qu cho thy tinh ch c tinh du qut c hot tnh gii lo u l do s khc bit v thnh phn ha hc ca tinh du. tinh du qut c s hin din ca 7,7-dimethyl-2-methylen bicyclo[2.2.1]heptan (0,21%) v 1,2,3,4a,5,6,8a-octahydro-7-methyl-4-methylen-1-(methylethyl)

naphthalen (1,32%) m khng pht hin 4 loi tinh du cn li. Tuy nhin hai ch t ny khng tm thy trong thnh ha hc ca tinh du qut ti liu (2) v (3) 7. Nhng ng gp mi ca ti Kt qu nghin cu ca ti s b sung vo kt qu nghin cu thnh ph n ha hc ca tinh du qut v th hot tnh sinh hc ca tinh du qut.

7 Tng cng hng nghin cu mi v thnh phn ha hc ngoi tinh du ca qu qut gp ph n tm ra hp cht cc hp cht thin nhin c dc tnh cao t qu qut.

CHNG I: C S L LUN
1.1. Tm hiu chung v cy qut Cy qut hay cn gi l cy tc, cy hnh. Cy Tc, Qut, Hnh thuc h cam Rutaceae, c tn khoa h c l Citrus microcarpa (Hassk) Bunge. Ting Anh, Php gi l Kumquat, Clementine. C ngun gc t chu nhit i, Trung Quc, Nht Bn, c trng t lu nc ta nht l Ci Mn, ly qu lm nc ung, lm m t n hoc lm cy cnh trang tr vo nhng dp Tt [4], [10]. 1.1.1. c im hnh thi cy qut Cy qu t l cy nh, cao c 1m - 1,5m, thn do mu xanh xm, phn nhiu cnh nhnh, l n hnh bu dc, m u xanh th m, cun c cnh rt nh, c t u. Hoa thng n c, n xe 5 cnh mu trng ti, rt thm, chm nhy rt ngn. Hoa u th nh qu hnh cu, lc cn non mu xanh bng, khi gi chn i thnh mu vng cam, rt p. Bn trong rut c nhiu mi mu vng nht, cha nhiu nc chua gt nn thng dng lm nc ung vi ng rt kht hoc lm mt n

Hnh 1.1. c im h nh thi cy qut v qu qut 1.1.2. Phn b v thng dng trong i sng Cy qu t mt loi cy thu c loi Citrus, h Rutaceae (h Cam), ph bin l lo i Citrus japonica Thumb (Fortunella jabonica Swing) c trng kh pni nc ta nht l Ci Mn. Qu qut c thu hi quanh nm, v c thdng v kh, ti ho c vo ma ng lnh tch ly tinh du l mt thu n li ln trong nghin cu v trong sn xut i tr thu tinh du Citrus [9]. Qu qu t c mi thm, v ngt, chua v tinh d u thm cay ca v. Qu qut c dng di dng qu cn non hoc chn. Theo ng y, qu qut v ngt chua, tnh m, vo cc kinh ph, v, can. N c cng nng ha m, tr ho, gii ut, tiu thc, gii ru. V c tc dng mnh hn. Qut cng lu cng tt. H t qut c tc dng gim ho, cm mu, chng nn, l qut c nhiu tinh d u, c tc dng cha cm mo phong h n rt tt [4].

9 1.2. Tm hiu chung v tinh du 1.2.1. Nhng nt c trng ca tinh du Tinh d u gm nhiu h p ch t d bay h i ( ch yu l cc tecpen v cc tritecpenonit), c mi c trng ty thu c vo ngun g c cung cp nguyn liu tinh d u. H thc vt c tinh d u kho ng 3000 loi, trong c 150- 200 loi c ngh a cng nghip. Tinh du l hn hp cc cht hu c tan ln vo nhau, c mi c trng. nhit thng hu ht tinh du th lng, c khi lng ring b hn 1 (tr mt vi tinh du nh qu, inh hng), khng tan trong nc hoc tan rt t, nhng li ha tan tt trong dung mi hu c nh ancol, ete, cht boTinh du bay hi vi hi nc, c v cay v ngt, nng bng v c tnh st trng mnh [15]. Tinh d u c hai loi: Nguyn cht v tinh d u hn hp. Tinh du nguyn cht: Hon ton khng c c t khng c cht bo qun ha hc nn rt an ton cho ngi s dng v mang li kt qu nhanh khi iu tr. Tinh du xut pht t nhiu quc gia. Mt trong cc nh cung cp tinh du ti Vit Nam l cng ty Tinh Du Thin Nhin. Tinh d u khng nguyn cht c pha trn vi cc loi tinh du khc nhau. Thnh phn ha hc ca tinh du gm tecpen v nh ng dn xut cha oxi ca tecpen (nh ancol, anehit, xeton, ete). Mc d c nhiu cu t nh vy nhng thng mt vi cu t chnh c gi tr v c mi c trng cho tinh du [4]. Ph ng php ph bin tch tinh d u t cy c l chng ct b ng li cu n hi n c. Nu cc ch t trong tinh du b phn h y b ng chng ct li cu n h i n c th n gi ta s d ng ph ng php chit bng dung mi h u c (v d nh ete d u h a, benzen). V m t th c hnh tinh d u c th xem nh mt hn h p thin nhin c mi, ph n ln c ngu n gc t thc vt, ch c m t s t ngun gc t ng vt. Tinh d u c phn b rn g trong h th c vt, c bit tp trung m t s h nh h hoa tn, h cc, h hoa mi, h long no, h sim, h cam, h gngTinh d u c chit t m i b ph n c a cy nh cnh hoa, l, cnh, r, v tri, h t, v cy Tinh du cha trong thc vt c thnh phn khng n nh. Hm lng tinh d u ph thu c vo nhiu yu t nh gi ng, di truyn, t trng, phn bn, th i tit,

10 nh sng, th i im thu hoch. Trong cc b phn ca cy hm lng tinh du cng khc nhau. Cn phi hiu bit nh vy xc nh thi gian thu hi cho hm lng tinh du nhiu nht v cht lng tt nht. Tinh d u l sn ph m cu i cng ca qu trnh trao i ch t v khng c s d n g tr li cho ho t ng sng ca cy [14]. 1.2.2 Tnh cht l-ha ca tinh du 1.2.3.1. Tnh cht vt l nhit thng, tinh du th lng, tr mt s trng hp c bit nh menthol, camphorl th rn. Tinh d u gn nh khng tan trong nc v d bay hi, do vy c th tch thu tinh du bng phng php chng ct li cun hi nc. Tinh du rt t tan trong nc, tan tt trong cn v cc dung mi hu c, cc loi du m, c th tan mt phn trong dung dch kim, a s tinh du khng c mu ho c mu vng nh t, mt s tinh du c mu, nh tinh du qu c mu nu sm, tinh du thymus c mu . Tinh du thng c v cay v hc. T trng ca tinh du thng khong 0,80 - 0,95, c mt s tinh du nng hn nc nh tinh du inh hng, tinh du qu. T trng thay i theo thnh phn ha h c. Nu tinh du c th nh ph n ch yu l hydrocarbon tecpenic th t trng th p, tinh du c hp cht cha oxi hoc nhn thm th t trng cao hn. Tinh du thng c ch s khc x vo kho ng 1,45 - 1,56. Ch s khc x cao hay th p ty theo thnh ph n cc cht cha trong tinh du l no, khng no hoc nhn thm. Nu trong tinh du c nhiu thnh phn c nhiu ni i th c ch s khc x cao. Ch s khc x b nh hng bi yu t nhit . Khi o ch s khc x nhng nhit khc nhau th cho kt qu khc nhau, nhit cng ln th ch s khc x bin thin theo hng gim v ngc li. Gc quay cc ()D ca tinh du th hin kh nng ha tan ca tinh du trong cc loi dung mi, nu ()D cng ln th c th ha tan tt trong dung mi phn cc, ngc li ()D cng b th c th h a tan tt trong dung mi khng phn cc. Nhit nh hng ti gc quay cc, nhit khi o gc quay cc tng th gc quay cc cng tng theo v ngc li [15].

11 V tinh du l h n hp nn khng c nhit si nht nh. im si ca tinh d u thay i ty theo thnh ph n hp cht. V d, hp cht tecpen c im si l 150-1600C, hp cht sesquitecpen c im si cao hn khong 250-2800C, cn cc hp cht polytecpen c im si trn 3000C. T , ta c th tch ring cc thnh ph n khc nhau trong tinh du bng phng php chng ct phn on. Khi h nhit mt s tinh du c th kt tinh nh tinh du hi, tinh du bc h , tinh d u x x 1.2.3.2. Tnh cht ha hc Di nh hng ca nhit , nh sng, khng kh, nc, tinh du d b oxi ha v c th b nha ha mt phn. Ancol trong tinh du b oxi ha bin thnh anehit, anehit bin th nh axit. Cc hp cht c ni i d b oxi ha hoc tham gia vo phn ng cng hp. Cc hp cht xeton v anehit d b ancol ha to nha khi c mt ca kim. Nhiu th nh phn c cc nhm chc khc nhau c th tham gia cc phn ng ha hc, lm thay i tnh cht ca tinh du. 1.2.3. Thnh phn v tnh cht l-ha ca tinh du v qu qut Tinh d u v qu qut l cht lng trong sut, c mu vng nht, c mi thm c trng rt d chu. Trong tinh du c cha khong 25 thnh phn, trong thnh phn ch yu ca tinh du l D Limomen chim trn 85%, bn cnh cn c m t s cht khc nh 1R-alpha-pinen, Beta-pinen, sabinen, limonen, b-ocimen, linalol... c bit l tinh du v qut c s hin din ca 7,7 -dimethyl-2-methylen bicyclo [2.2.1] heptan v 1,2,3,4a,5,6,8a-octahydro-7-methyl-4-methylen-1-

(methylethyl) naphthalen m khng pht hin 4 loi tinh du cam, chanh, bi, qut. Rt c th s khc bit trong thnh phn ha hc n y gp ph n vo s khc bit v hot tnh sinh hc, c th l tc d ng gii lo u ca tinh du qut. T cng trnh nghin cu Tch tinh du v alkaloid t qu qut trong Hi ngh Khoa hc v Cng ngh ln 9 tm ra thnh phn ha hc ca tinh du v qut.

12 Bng 1.1. Thnh phn ha hc ca tinh du v qu qu t [6] STT 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 Thnh phn ha hc Limonen 1R-alpha-pinen Beta-pinen Beta-myrcen p-men-6,8-dien-2-one Bixylo [3.1.3]-heptan-6,6-imethyl-2-methylen m-Metha-4,8-dienee,(1S,3S)-(+)Santolia triene Germacrene D Hexanedioc axit, mono (2-ethylhexyl) este p-menth-8-ene-1,2-epoxy Axetic axit, geraniol este Diisooctyl phthalate Lauraldehyde 3-carene Pinal-2,3-epoxy Nonanal a (%) 93,12 1,16 2,21 0,23 0,32 1,71 1,25 b(%) 89,02 1,29 4,59 0,57 0,79 0,31 0,92 0,47 0,47 1,19 0,31 0,17

a (%): hm lng thnh phn theo phng php chng ct hi nc. b (%): hm lng th nh phn theo phng php chiu x vi sng. T vic kh o st hot tnh gii lo u ca mt s tinh du t v qu cy chi Citrus h Rutacece ca Dng Phc An, Hunh Th Bch Tuyn, Nguyn Ngc Khi cng tm ra c cc thnh ph n trong tinh du v qu qut Bng 1.2. Thnh phn ha hc ca tinh du v qu qu t [1] STT 1 2 3 Thnh ph n 4-methyl-(1-methylethyl) bicyclo[3.1.0]hex-2-en 1R-alpha-pinen 4-methylen-1-(1-methylethyl) cyclohexen Cng thc C10H16 C10H16 C10H16 Tc (%) 0,15 0,64 0,77

13 4 5 6 7 8 Beta-pinen Limonen 2-methyl-5,1-methylethyl bicyclo[3.1.0]hexan-2-ol 7,7-dimethyl-2-methylen bicyclo[2.2.1]heptan 1,2,3,4,4a,5,6,8a-octahydro-7-methyl-4-methylen1-(methylethyl) naphthalen C10H16 C10H16 C10H18 C10H16 C15H24 2,17 94,74 0,21 1,32

Bng 1.3. Cc ch s ha- l ca tinh du

Ch s ha-l T trng d25 Chit sut nD30 T l tinh du ha tan trong cn 900 250C si, 0C Nng sut quay cc, []D30 Ch s axit Ch s x phng Ch s este Ch s iod

Gi tr 0,84 1,4673 1:4,775 176 + 92,8 0,54 6,86 6,32 56,375

1.2.4. ng dng ca tinh du v qu qut Tinh du cam, chanh, qut, c mi hng thanh thn, d chu. Cy qut ngoi cng d ng lm cnh, tinh du t qu qut c rt nhiu cng dng, rt thit th c trong i sng nh: Chng nm mng tay, gip ng ngon, tr au u, to cm gic ngon ming, kh mi, h ng huyt, gim y hi Ngoi ra tinh du qu t cn gip ngn nga pht sinh ung th gan, thc qun, i trng, da... Cc nh khoa h c Nht Bn cho bit, n qut c v s cho vitamin C, cht x rt c li cho tiu ha v h c cholesterol, lm vng chc thnh mch, cha bnh tng huyt p Dng v qut hay qut ngm ru trong mt thi gian, ru s c mi thm d chu hn. Nu cho vo ly nc vi ming v qut, qut nc s rt thm ngon.

14 V cam, qut, bi, qut... kh khi t ln gip xua mu i. t v qut kh trong phng th mi kh chu s bin mt. 1.3. Phng php chng ct li cun hi nc 1.3.1. Nguyn tc chung Phng php li cun tinh du bng hi nc da trn nguyn l ca qu trnh chng ct mt hn hp khng tan ln vo nhau l nc v tinh du. Khi hn h p ny c gia nhit, hai cht n y du bay hi. Nu p sut ca nc cng vi p sut ca tinh du bng vi p sut ca mi trng, th hn hp si v tinh d u c ly ra cng vi hi nc. Phng php ny c u im v nng lng do nhit si ca hn hp th p hn nhit si ca nc (1000C) trong khi nhit si ca tinh du ln hn 1000C p sut kh quyn. V d, khi chng ct li cun tinh du thng bng hi nc p sut kh quyn, nhit si ca du thng l 1580C nhng nhit si ca hn hp khong 95 0C. Chng ct li cun hi nc khng i hi nhiu thit b phc tp, nhng c kh nng ct gn nh trit tinh du c trong nguyn liu. Ngoi ra, phng php cn cho php phn ly cc cu t c trong tinh du thnh nhng phn ring bit c tinh khit cao hn da vo s khc bit v tnh cht bay hi [15]. 1.3.2. Cc yu t nh hng chnh trong qu trnh chng ct [4] 1.3.2.1. S khuch tn Khi nguyn liu c lm v vn th ch c mt s m cha tinh du b v v cho tinh du thot t do ra ngoi theo hi nc li cun i. Phn ln tinh du cn li trong cc m thc vt s tin dn ra b mt nguyn liu bng s ha tan v thm th u. nhit nc si, mt phn tinh du ha tan vo trong nc c sn trong t bo thc vt. Dung dch ny s thm thu dn ra b mt nguyn liu v b hi nc cun i. Cn nc i vo nguyn liu theo chiu ngc li v tinh d u li tip tc ha tan vo lng nc ny. Quy trnh ny lp i lp li cho n khi tinh du trong cc m thot ra ngoi ht. ng thi nhng hp cht no d ha tan trong nc s c li cun trc. Nh vy, s hin din ca nc rt cn thit, cho nn trong chng ct phi s d ng hi nc qu nhit, ch trnh nguyn liu b kh. Nhng nu lng nc s dng tha qu th cng khng c li, nht l trong trng hp tinh du c cha

15 nhng cu phn d tan trong nc. Nguyn liu c lm v vn cng nhiu cng tt, cn cho lp nguyn liu c mt xp nht nh no hi nc c th i vo lp ny ng u v d dng hn. 1.3.2.2. S thy gii Nhng cu phn este trong tinh du thng d b thy gii cho ra axit v ancol khi un nng trong mt thi gian di vi nc. Do , hn ch hin tng ny, s chng ct li cun hi nc phi thc hin trong thi gian cng ngn cng tt. 1.3.2.3. Nhit Nhit cao lm phn hy tinh du. Do , khi tin hnh chng ct phi iu chnh nhit cho ph hp vi tng giai on. Sau khi cu phn d bay hi li cu n i ht c th dng hi nc qu nhit (trn 1000C) chng ct (nn th c hin vic n y giai on cui cng ca chng ct). Tuy nhin, hu ht cc tinh du u km bn di tc dng ca nhit n n ta phi hn ch thi gian chu nhit cao ca tinh du. Cc yu t trn u c mi lin h ln nhau khi tng nhit th s khuch tn th m thu s tng, s ha tan tinh du trong nc cng s tng nhng s phn h y tinh du cng s tng theo. 1.3.3. Chng ct li cun hi nc trc tip M t s ch t khng tan trong n c nhng d b h i n c nng cu n theo, n gi ta li d ng tnh ch t ny tch ch t ra kh i h n hp ph n ng. Cch tin hnh chng ct li cun hi nc trc tip: Cho ch t nh ct li cun h i n c vo bnh ct (t i a b ng 1/3 th tch c a bnh). N i h th ng bnh ct vi bnh un hi n c nng. Bnh n c nng c n i vi ng th y tinh di tn y theo di p su t c a h thn g ct. Khi p su t h thng cao th n c ng th y tinh tng ho c phun ra ngoi, lc cn m kha 3 thng thng vi p su t kh quyn. Sau khi lp xong h th ng, m kha 3 thng theo di p su t c a h thng, un n c si bnh n c. Nc bnh n c si ch kho ng 2/3 th tch bnh. M n c ng sinh hn lm lnh hi. ng kha 3 thng h i nc si qua bnh ct. Theo di lng ch t ct ra, khi kt thc ngng un, m kha 3 thng, ly ch t ct ra. [2].

16 Khi ch ng ct cn ch ch t c th ng rn trong sinh hn gy tc ng, d n nn cn ph i th n trong khi s d n g ng sinh hn. Nhng u nhc im chung ca phng php chng ct: * u im: - Thit b kh gn gng, d ch to, qui trnh sn xut n gin, - Trong qu trnh chng ct, c th phn chia cc cu t trong hn hp bng cch ngng t tng phn theo thi gian, - Thi gian chng ct tng i nhanh, nu thc hin gin on ch cn 5-10 gi, nu lin tc th 1 gi n 2 gi 30 pht. - C th tin hnh chng ct vi cc cu t tinh du chu c nhit cao. * Nhc im: - Khng p dng phng php chng ct vo nhng nguyn liu c hm lng tinh du thp v thi gian chng ct s ko di, tn rt nhiu hi v nc ngng t. - Tinh du thu c c th b gim cht lng nu c cha cc cu t d b thy phn. - Khng c kh nng tch cc thnh phn kh bay hi hoc khng bay hi trong thnh phn ca nguyn liu ban u m nhng thnh phn ny rt cn thit v chng c tnh cht nh hng rt cao nh sp, nha thm... - Tiu tn mt lng nc kh ln lm nhng t hn hp hi. - Kh iu chnh cc thng s k thut (nhit , p sut), thi gian chng ct ko di. - Nguyn liu d b chy, kht, do b thiu nc, b dnh vo thit b. 1.4. Ly trch bng chiu x vi sng [13] 1.4.1. i cng v vi sng Vi sng (micro-onde, microwave) l sng in t lan truyn vi vn tc nh sng. Sng in t ny c c trng bi: - Tn s f, tnh bng Hetz (Hz = cycles/s), l chu k ca trng in t trong m t giy, nm gia 300 MHz v 30 GHz. - Vn tc c l 300.000 km/giy. - d i sng (cm) l on ng i ca vi sng trong mt chu k, lin h vi tn s theo cng thc = c/f.

17 Hu ht cc l vi sng gia dng u s dng tn s 2450 MHz, tn s ny = 12,24 cm. 1.4.2. Hin tng lm nng Mt s phn t, th d nh nc, phn chia in tch trong phn t mt cch b t i xng. Nh vy cc phn t n y l nhng lng cc c tnh nh hng trong chiu ca in trng. Di tc ng ca in trng mt chiu, cc phn t lng cc c khuynh hng sp xp theo chiu in trng ny. Nu in trng l mt in trng xoay chiu, s nh hng ca cc lng cc s thay i theo chiu xoay . C s ca hin tng pht nhit do vi sng l s tng tc gia in trng v cc phn t phn cc b n trong vt cht. Trong in trng xoay chiu c tn s rt cao (2,45x109 Hz), in trng n y s gy ra mt xo ng ma st rt ln gia cc phn t, chnh l ngun gc s nng ln ca vt cht. Vi mt c cu c s bt i xng cao, phn t nc c phn cc rt ln, do nc l mt cht rt l tng d un nng bng vi sng. Ngo i ra, cc nhm nh chc phn cc nh: -OH, -COOH, -NH2 trong cc hp cht hu c cng l nhng nhm chu s tc ng mnh ca trng in t. Do , nhng hp cht cng phn cc cng rt mau nng di s chiu x ca vi sng. Vic ny c lin quan n hng s in mi ca hp cht . Tm li, s un nng bi vi sng rt chn lc, trc tip v nhanh chng. 1.4.3. Tnh cht Vi sng c c tnh l c th i xuyn qua c khng kh, gm s, thy tinh, polimer v ph n x trn b mt cc kim loi. xuyn thu t l nghch vi tn s, khi tn s tng ln th xuyn th u ca vi sng gim. i vi mt vt cht c m 50% vi tn s 2450 MHz c xuyn l 10 cm. Ngoi ra, vi sng c th lan truyn trong chn khng, trong iu kin p sut cao Nng lng ca vi sng rt yu, khng qu 10 -6 eV, trong khi nng lng ca mt ni cng ha tr l 5 eV, do bc x vi sng khng phi l mt bc x ion ha. C mt s cng trnh kh ng nh c tnh v hi ca vi sng i vi sinh vt. Chng hn, khi nghin cu s pht trin ca enzim trong iu kin vi sng, ngi ta nhn thy rng nh hng ca vi sng rt ging nh hng ca cc gia nhit thng thng.

18 Vi sng cung cp mt kiu un nng khng dng s truyn nhit thng thng. Vi kiu un nng bnh thng, sc nng i t b mt ca vt cht ln vo bn trong, cn trong trng hp s dng vi sng, vi sng xuyn thu vt cht v lm nng vt cht ngay t bn trong. Vi sng tng hot nhng phn t phn cc, c bit l nc. Nc b un nng do hp thu vi sng bc hi to ra p sut cao ti ni b tc dng, y nc i t tm ca vt un ra n b mt ca n. 1.4.4. Ly trch di s h tr ca vi sng Di tc dng ca vi sng, nc trong cc t bo thc vt b nng ln, p sut bn trong tng t ngt lm cc m cha tinh du b v ra. Tinh du thot ra bn ngoi, li cun theo hi nc sang h thng ngng t (phng php chng ct hi nc) hoc ha tan vo dung mi hu c ang bao ph bn ngoi nguyn liu (phng php tm trch). Lu l m c chu nh hng vi sng ca cc loi m tinh du khng ging nhau do kin to ca cc loi m khc nhau, ngay khi nguyn liu c lm nh. Kt qu ny c phn nh qua thi gian ly trch. Trong s chng ct hi nc, vic ly trch tinh du c th thc hin trong iu kin c thm nc hay khng thm nc vo nguyn liu (trng hp nguyn liu cha nhiu nc, y l c im ca phng php chng ct hi nc di s h tr ca vi sng). Ngoi ra, nc c th thm m t ln hoc th m lin tc (trng h p lng nc thm m t ln khng li cun ht tinh du trong nguyn liu) cho n khi s ly trch chm dt. Ngoi vic nc b tc dng nhanh chng, cc cu phn phn cc (hp cht c cha oxigen) hin din trong tinh du cng b nh hng bi vi sng. Ngc li cc cu phn hidrocarbon t chu nh hng ca vi sng (do chng c phn cc km) nn s ly trch chng ta nh trong s chng ct hi nc bnh thng nhng vi vn tc nhanh hn rt nhiu v nc c un nng nhanh bi vi sng. 1.5. nh gi cht lng tinh du bng phng php ha l 1.5.1. Xc nh ch tiu cm quan 1.5.1.1. Xc nh dng b ngoi v mu sc [15] Xc nh dng b ngo i v mu sc ca tinh du bng cch quan st mt mu tinh du c th tch l 20ml ng trong ng nghim thy tinh xem tinh du trong hay c.

19 1.5.1.2. Xc nh v Xc nh v ca tinh du bng cch trn mt git du vi 1g ng knh ri n m. 1.5.1.3. Xc nh mi Xc nh mi ca tinh du bng cch nh vi git tinh du ln mt mnh giy thm ri ngi c 15 pht 1 ln trong khong 1 gi. 1.5.2. Xc nh ch tiu l-ha 1.5.2 .1. Xc nh t trng [2] T trng ca tinh du l t s ca khi lng tinh du 250C vi khi lng ca cng mt th tch nc ct cng nhit 250C. Cch xc nh: Ly l o t trng c ngn chun th tch 25ml hoc 50ml em ra sch bng h n hp sunfocromic, trng k bng nc ct ri trng li bng axeton hay bng cn v ete. t l v nt kh, ngu i ln a cn bn phi ca mt cn phn tch cng m t s qu cn c khi lng G cn bng mt bnh c nh t a cn bn tri. G xc nh chnh xc n 0,001g. Ly l ra, rt nc ct vo cho y qu ngn chun mt cht, ch ng cho bt kh bm vo thnh l. t l vo mi trng n nhit 250C ngp cho n c l. trong khong 20 30 pht cho nhit ca nc t n 250C ri ly giy lc hay giy thm ct th nh dy nh thm nc tha trong l va ng n ngn chun. Lau kh c l k c phn pha trn ngn chun ri y nt kn ri ly l ra khi mi trng u nhit. Lau kh bn ngoi l v yn trong khong 15 20 pht cho nhit tr li b nh thng. Sau t l ln a cn bn phi cng vi mt s lng qu cn c khi lng G1 cn bng vi b c nh t a cn bn tri. G1 xc nh vi chnh xc nh i vi G trn. Li ly l ra ht nc i, vy cho kh, trng li bng axeton hay bng cn ete ri lm cho kh nh ch dn trn. Qua ph u c cun nh (hoc ng tim ko di thnh phu) tinh du vo l cho y qu ngn chun mt cht, ch ng cho tinh du dy vo c l v ng bt kh bm vo thnh l. t vo mi trng u nhit 250C trong

20 khong 20 30 pht, u chnh tinh du cho n ng ngn chun, ly ra lau kh, em cn, tt c u lm nh ch dn trn. Kh i lng cc qu cn dung ln n y l G2 vi chnh xc nh trn . Tnh kt qu: T trng (d) tnh bng cng thc:
d G G2 G G1

Trong : G: khi lng ca cc qu cn ng vi khi cn l khng, tnh bng gam (g). G1: khi lng ca cc qu cn ng vi khi cn l c ng nc ct, tnh b ng gam (g). G2: khi lng ca cc qu cn ng vi khi cn l c ng tinh du, tnh b ng gam (g). Sai lch gia hai ln xc nh lin tip khng lch qu 0,001. Kt qu cui cng l trung bnh cng ca kt qu hai ln xc nh lin tip. Nu khng th xc nh t trng ca tinh du nhit 250C th xc nh nhit ghi trong bng tiu chu n v tinh du . 1.5.2.2. Xc nh ch s khc x [2] Xc nh ch s khc x 250C theo phng php o gc gii hn bng khc x k kiu Abbe c n natri hay b phn b chnh trit tiu hin tng tn sc. Cch xc nh: iu chnh my: Cho m t d ng nc c nhit thch hp chy qua b lng knh, ly bng ht nc hay vi mm tm ete hoc axeton lau sch mt lng knh. Nh hai n ba git nc ct ln m t lng knh m bn di, nhanh tay v nh nhng nng lng knh ny ln p vo lng knh bn trn ri kha li. Khi nhit k ch ng 250C vn nm xoay lng knh v vnh chia cho n khi s 1,3325 ca vnh chia trng vi vt chun. Nhn vo th knh, nu khng c n natri m dng nh sng thng th s c hin tng tn sc, khi o vn nm xoay b phn b chnh nh m trit tiu hin tng thy r ranh gii gia hai min sng v ti ca th trng. Ri xoay th knh nhn thy tht sc nt vch chun ch thp gia th trng. Nu ranh gii gia hai min sng v ti ca th trng ct ng ngay vch ch thp th my tt. Nu ct cha ng dng ch a kha ring km theo my

21 cm vo tr vung nh sn ng ngm v vn t t a ranh gii gia hai min sng v ti ct ng giao im ca vch ch thp. Rt cha kha ct i. Nh th l my iu chnh xong. o ch s khc x: M hp lng knh, ly bng ht nc (hay vi mm) lau kh mt lng knh ri li ly bng ht tm ete hoc axeton lau li mt ln na. R 2 -3 git tinh du ln m t lng knh m bn di ri lp lng knh ny vo lng knh bn trn nh ch dn. Khi nhit k ch ng 250 C th nhn vo th knh, sa hin tng tn sc n u c ri t t vn nm xoay b lng knh a ranh gii gia hai min sng ti ct ng giao im ca vch ch thp. Nhn sang vnh chia v c ch s khc x ngang vch chun. Xc nh li v tr gia hai ranh gii sng v ti v c ch s ba ln. Ly gi tr trung bnh lm kt qu. Sai s cho ph p ca kt qu l 0,0002. 1.5.2.3. Xc nh gc quay cc [2] Gc quay cc c xc nh nhit phng. Cch tin hnh: iu chnh my: nc ct vo y ng ca phn cc k, ch trnh c b t kh bn trong. Vn cht n p y ng. t ng vo mng ca phn cc k b t n sng. Nhn vnh th knh, lc s nh n thy nhng min sng khng ng u nhau. Xoay th knh cho va mt nhn ranh gii gia cc min cho tht sc nt. Xoay a chia (tc l xoay knh phn tch) cho nhng mn ca th trng u sng nh nhau. Xem vch chun trn vnh chia xc nh sai lch ca im 00 so vi im 0 ca du xch. o gc quay cc: Ly ng trong my ra, tho nc i v lau ng cho tht kh. tinh du cho y ng v tip tc lm nh khi iu chnh my. Sau khi chia da chia cho nhng min ca th trng sng iu nhau xem vch chun trn vnh chia v c kt qu. Hiu chnh vi sai lch ca im 00 so vi im 0 ca du xch (kt qu khi iu chnh my) c tr ng ca gc quay cc. 1.5.2.4. Xc nh ha tan trong etanol [2] T trng ca etanol 90% (% theo th tch) 25 0C l 0,8098 0,8117, etanol 96% l 0,8038 - 0,8063.

22 Cch pha: Mu n pha etanol 90% ly 937,5ml etanol 96% ri pha lo ng bng nc ct cho ti 1 lt, o t trng v iu chnh. Cch xc nh: Ngm l ng tinh du cn th cho n khi tinh du c nhit 250C. Dng pipet c ng nghim hay mt ng o dung tch 20ml c chia vch v c nt mi. Nu khng c ng chia vch c th dung mt bnh nn dung tch 50ml. T buret nh dn dn etanol c nng xc nh vo ng ng tinh du. ng n y phi ngm trong nc c nhit 200C. Sau mi ln nh khong 0,2ml vo y nt li v ly ng ra lc u cho n khi tan ht tinh du ri li ngm vo nc 25 0C. Tip tc nh etanol v lm nh trn cho n khi c mt dung dch trong su t. Ghi lng etanol dng. mt thi gi c th s dng s b bng cch cho mi ln 0,5 hay 1ml etanol bit ha tan khong no. Sau lm li xc nh ha tan chnh xc n 0,2ml. Trng hp nhit phng trn 25 0C c th ha tan mt cch bnh thng ngha l khng cn phi ngm ng sau mi ln nh dung mi. Ch sau khi dung dch tr n n trong su t mi cn ngm ng vo nc c nhit thch hp nhit ca dung dch tr v 250C. Nu khng c hin tng c tr li th coi l c v ghi th tch etanol dng. 1.5.2.5. Xc nh ch s axit [2] Phng php xc nh da trn s trung ha axit t do trong cht th dung d ch kim: RCOOH + KOH RCOOK + H2O

T lng kim dng, bit khi lng ca phn t axit, tnh ra lng axit. Hm lng axit c biu th bng ch s axit ngha l lng mg KOH cn trung ha 1g cht th hoc biu th bng phn trm. Cch tin hnh: Cn chnh xc 2g tinh du khng ln nc cho vo m t b nh cu v phng ha dung tch t 100 200ml c ng lm lnh bng khng kh di 1m, ng knh 0,1cm. Cho vo 10ml etanol trung tnh 96% 200C, nh vo 10 git dung dch phenolphthalein trung tnh 0,2g trong 100ml etanol.

23 Chu n n xut hin mu hng vng bn trong 30 giy. Tnh kt qu: Ch s axit (X1) tnh theo cng thc:
X1 v.5, 61 G

Trong : V (ml): th tch dung dch KOH 0,1N trong ru dng chun G: lng cht th cn tnh b ng gam. 5,61: s m g KOH c trong 1ml dung dch KOH 0,1N trong ru Hm lng axit theo phn trm (X2) tnh b ng cng thc:
X2 v.M .100 v.M 10.G.1000.b G.100.b

Trong : M: khi lng phn t ca axit b : baz ca axit G: lng cht th cn tnh b ng gam

24

CHNG 2: THC NGHIM


2.1. Ha cht v dng c 2.1.1. Ha cht - Na2SO4 rn - NaCl rn - KOH rn - HCl c - FeCl3 - [K3Fe(CN)6] - Silicagen 2.1.2. Dng c * Dng c - H thng chng ct li cun hi nc c in - H thng chng ct li cun hi nc vi l vi sng - Bn mng, ct sc k - Phu chit, b nh tam gic, v cc dng c c bn khc. * My mc - T sy, cn phn tch - H thng chng ct li cun hi nc theo phng php un nng c in - H thng chng ct bng chiu x vi sng - B c quay chn khng - My o ph GC-MS - Dietyl ete (CH3CH2)2O - Clorofom CHCl3 - Axeton - n-hexan - Thuc th To llens - Thuc th Felling - Thuc th Wagner

2.1.3. Cc thuc th dng cho nh tnh [7] Thuc th dng nhn bit Flavonoid Flavonoid c xc nh bi ph n ng Shibata cn gi l phn ng Ciandin ca Wilstatter. Thuc th l tp hp cc ha cht gm: dung dch HCl m c, bt Mg kim loi, ru isoamylic nu c mt vng mu hng xut hin ri t t chuyn sang mu cam hay tm th trong dch th c cha Flavonoid.

25 Kho st s hin din ca flavonoid bng thuc th st (III) clorua 3% trong etanol phn ng dng tnh khi dung dch c mu t xanh nht n nu (ty theo s lng nhm OH). Kho st s hin din ca flavonoid bng thuc th st (III) clorua 1% + kalihexaxianoferat (III) (K3[Fe(CN)6]) phn ng dng tnh khi dung dch c mu xanh thm. Mt s thuc th dng nhn bit Glycosid - Thuc th Felling: Dung dch A: 40g CuSO4.5H2O trong 1 lt nc ct Dung dch B: 150g NaOH trong nc ct, thm 50ml glyxerin vo NaOH. Thm nc ct n 1 lt dung dch Khi s dng trn 2 dung dch A v B vi th tch bng nhau. Hn hp ny cho kt ta vng nht vi dng dch c cha glycosid. - Thuc th Tollen: AgNO3 trong dung dch NH3 to kt ta khi tip xc dch etanol - Thuc th Baljet: Dung dch axit picric 1% 20ml hn hp vi dung dch NaOH 5% 10ml Nu c xut hin 1 vng mu vng dch cha glycosid. - Thuc th Molish: Dung dch thymol 2% 1-2 git, H2SO4 m c 1ml Thuc th c mu tm nh t, cho d ch etanol vo chuyn sang tm m hn. Trong dch etanol c glycosid. Mt s thuc th dng nhn bit ankaloit C ba thuc th thng dng - Thuc th Mayer: Ha tan 1.36g HgCl2 trong 60ml nc ct v ha tan 5g KI trong 10ml nc ct. Hn hp hai dung dch v thm nc cho 100ml. Cch th : Nh vi git thuc th Mayer vo dung dch axit lo ng c ch a alkaloid, ph n ng dng tnh s cho kt ta mu trng hoc vng nh t. Cn lu lng kt ta to thnh c th ha tan tr li trong lng d thuc th hoc ha tan b i metanol, etanol c sn trong dung dch th. - Thu c th Wagner: Ha tan 1.27g I2 v 2g KI trong 20ml nc ct thm nc cho va 100ml. Cch th: Nh vi git thuc th Wagner vo dung d ch axit long c ch a alkaloid, ph n ng dng tnh s cho kt ta mu nu.

26 - Thuc th l axit picric bo ha trong n c Cch th: Nh vi git axit picric vo ng nghim cha 1ml mu th, phn ng dng tnh s cho kt ta mu vng. 2.2. Nguyn liu v x l nguy n liu 2.2.1. X l nguy n liu Qu qu t c mua t vn x Tn Tch - phng 6 Thnh ph Cao Lnh, tnh ng Thp. Chng ti tin hnh la chn s b, b nhng qu b dp, non, la chn nh ng qu va chn ti da lng mn, cng mng. Sau , em s qu qu t la chn ra sch, ro nc, b cung, bc ly phn mi qu v phn v qu ring. Mt kg qu qut ly c 115g v qu qut, phn v xay nhuyn tch ly tinh du v kh o st thnh phn ha hc ngoi tinh du. Phn rut ly nc dng nh tnh s b thnh ph n ha hc ca nc qu qut. 2.2.2. Xc nh m nguyn liu Xc nh m nguyn liu bng phng php sy, di tc dng ca nhit lm bay hi lng nc trong m u th nghim, cn mu trc v sau khi sy tnh khi lng v m ca nguyn liu. Nhit sy l 50 600C. m ca nguyn liu c tnh: (%) m = Trong : m 1: Khi lng ban u (g) m 2: Khi lng sau khi sy (g) 2.3. Ly trch tinh du t v qu qut 2.3.1. Chng ct li cun hi nc theo phng php un nng c in Cn 100 gam v qu qut ri xay nhuyn, ngm trong 500ml dung dch NaCl 10% trong 3 gi. T l khi lng v ti : th tch nc ti u thu ly tinh du l 1:2,5. Sau em chng ct li cun hi nc theo phng php c in trong 90 pht thu ly tinh du th. Tinh d u th c x l, tch chit, lm khan vi ietyl ete, NaCl, Na2SO4. Dch ete c c quay thu ly tinh du.
m1 m2 x 100% m1

27

V qu qut

Xay nhuyn

Ngm 3h trong dd NaCl 10% vi t l 1:2,5

Chng ct li cun hi nc 1,5 gi

Ngng t

Tinh d u th

Lng Tinh du

Lm khan bng Na2SO4

Chit vi ietyl ete

Hnh 2.1. Quy trnh chng ct li cun hi nc theo phng php un nng c in

Hnh 2.2. H thng chng ct li cun hi nc theo phng php un nng c in

28
2.3.2. Chng ct li cun hi nc k t hp vi chiu x vi sng Cn 100 gam v qu xay nhuyn, sau em chng ct li cun hi nc theo phng php chiu x vi sng trong 15 pht thu ly tinh du th. Tinh du th c x l, tch chit, lm khan vi ietyl ete, NaCl, Na2SO4. Dch ete c c quay thu ly tinh du. V qu qut

Xay nhuyn

Chng ct bng s chiu x vi sng 15 pht Ngng t

Tinh d u th

Lng

Lm khan bng Na2SO4

Chit vi ietyl ete

Tinh du

Hnh 2.3. Quy trnh chng ct li cun hi nc theo phng php chiu x vi sng

Hnh 2. 4. H thng chng ct li cun hi nc theo phng php chiu x vi sng

29 2.4. Kho st cc ch s ha l v thnh phn ha hc ca tinh du v qu qut Sau khi thu c tinh du, chng ti tin hnh o t trng, ch s khc x, gc quay cc, ha tan trong etanol, ch s axit. 2.4.1. Xc nh t trng Do iu kin vt cht ca phng th nghim cha c bnh t trng nn chng ti tin hnh o t trng tinh du theo phng php th cng. Dng mt n g tim y t (loi 1ml), trn thn ng tim c vch mt ng lm du. Ban u, em cn ng tim khng v ghi s liu li (G). Tip theo: Ht nc ct n vch (lu trong ng tim khng c bong bng kh) em cn v ghi li s liu (G1). Ri x b nc trong ng tim, vy cho kh nc. Cui cng: Ht tinh d u khan n vch (lu khng cho c bong bng kh trong ng tim) em cn v ghi li s liu (G2). T trng (d) c o 250C c tnh bng cng thc:

d
Trong :

G G2 G G1

G: khi lng ca ng tim khng, tnh bng gam (g). G1: kh i lng ca ng tim cha nc ct, tnh bng gam (g). G2: kh i lng ca ng tim cha tinh du, tnh bng gam (g). C nh th lp li th nghim 3 ln v ly gi tr trung bnh.

d1 d 2 d3 3

2.4.2. Xc nh ha tan trong etanol Dng pipet (loi 1ml) hoc ng tim ht chnh xc 0,1ml tinh d u v qut khan vo m t ng nghim nh (ng nghim ra sch v dng cn trng qua sau lm bay hi ht cn). Th nghim: Kho st ha tan trong etanol 90%. Cho etanol 90% vo buret (buret c ra sch v trng qua etanol). Nh tng git etanol vo ng nghim chu n b sn tinh du, lc hn hp khong 30 giy ri yn 1 pht. Nu hn hp tinh du vn cn c th c tip tc nh etanol

30 n khi no c mt dung dch ng nht th ngng v ghi li th tch etanol dng. Lp li th nghim 3 ln ri ly gi tr trung bnh. 2.4.3. Xc nh ch s axit Lng tinh du c dng l 0,5gam tinh du khan. Chun b dung dch KOH 0,1N; phenolphthalein trung tnh; etanol 960. Ht 10ml etanol vo m t b nh tam gic (loi 50ml), cho 0,1ml tinh du khan vo bnh tam gic trn v lc cho n khi ha tan hon ton. Cho thm vo bnh tam gic khong 10 git phenolphthalein trung tnh. Do th tch dung dch KOH dng t nn th nghim ny chnh xc hn ti dng pipet (hoc ng tim) 1ml chun . Mi ln nh mt git KOH 0,1N vo hn hp v lc u cho n khi mu ca hn hp chuyn sang hng bn khng bin mt trong 30 giy th ngng, v ghi li th tch dung dch KOH dng. Lm li th nghm 3 ln v ly gi tr trung b nh. 2.4.4. o ch s khc x Ch s khc x ca tinh du v qu qut c o Vin Khoa hc Vt liu v ng dng Thnh ph H Ch Minh. 2.4.5. o gc quay cc Gc quay cc ca tinh du v qu qut c o Vin Khoa hc Vt liu v ng dng Th nh ph H Ch Minh. 2.4.6. o ph GC-MS xc nh thnh phn ha hc ca tinh du Thnh ph n ha hc c trong tinh du v qu qut c xc nh bng cch o ph GC/MS Vin Khoa hc Vt liu v ng dng Thnh ph H Ch Minh. My o l Sc k kh kh i ph k lin h p (GC MS) Hewlett Packard HP 6890N, ct HP 5MS (di 30m; ng knh cong 0,25mm; lp phim dy 0,25 m), lin hp vi HP 5973. kh mang He. Th vin ph: NIST (1998). 2.4.7. Th hot tnh sinh hc ca tinh du v qu qut Hot tnh khng khun ca tinh du c thc hin ti Phng Vi sinh Th c phm, Khoa Xt nghim, Vin Pasteur Tp.H Ch Minh theo phng php khuch tn trn a thch, o ng knh vng v trng to ra bi a giy (D = 6 mm) tm

31 tinh d u vi cc nng thay i t 100% (tinh du nguyn cht) n cc nng pha long dn. 2.5. Kho st thnh phn ha hc ngoi tinh du ca v qu qut 2.5.1. Qui trnh V qu qut Xay nhuyn Ngm trong etanol Lc, c quay ui dung mi Cao etanol n-hexan C kit Cao n-hexan Phn khng tan Clorofom C kit Cao clorofom 1. Sc k ct vi dung mi n -hexan: axeton Phn khng tan

2. Sc k lp m ng 3. C kit dung mi

Phn on 1 mu xanh lam

Phn on 2 mu vng

Phn on 3 mu

Hnh 2.5. Quy trnh ly trch cc hp cht ngoi tinh d u ca v qu qut 2.5.2. Thuyt minh qui trnh V qu qut xay nhuyn em ngm trong dung mi eanol trong 2 tun.Sau , tch ly dch lng, b b cn li, chit ly dch etanol. Dch etanol c em c quay thu ly cao etanol. Chit nhiu ln cao etanol vi n-hexan thu c dch n-hexan v phn khng tan. Phn khng tan c ln n -hexan c c quay c ui dung mi v chit tip vi clorofom, thu ly cao clorofom. Tip theo, chng ti s dng sc k ct vi silicagen v sc k lp mng (bn nhm vi silicagen) vi cao cloroform. H dung mi c s dng tin hnh sc k l n-hexan : axeton theo cc t l khc nhau vi phn cc t thp n cao tch ly cc phn on mu khc nhau.

32 nh tnh th nh ph n ha hc ca cc phn on thu c bng cc thuc th . Chn ly phn on c phn ng vi thuc th c trng xc nhn s hin din ca cc alkaloid, glycoside v flavonoid. Chn ly phn on c c 3 loi cht ny, chia mu ny lm 2 phn (mu 1) dng o ph GC-MS xc nh thnh phn ha h c; Mt phn c em sc k ct thm ln na, thu ly dch chit (mu 2). Xc nh thnh ph n 2 mu n y b ng GC-MS Vin Khoa hc vt liu Thnh ph H Ch Minh.

Hnh 2.6. Sc k ct hai mu v qu qut dng xc nh th nh phn ha hc ngoi tinh d u.

2.6. Kho st thnh phn ha hc ca nc qu qut Mi qu qut c vt ly nc thu c dch nc qu qut, dch nc qu qut sau khi lc loi b ht, cht nhy, tp c cho thm 300ml metanol vo 1000 ml nc qut, em c quay ui dung mi, c cao qut. em cao qut chit vi clorofom thu c dch cloro form, c quay ui bt dung mi. Sau em nh tnh thnh phn ha hc trong dch cloroform thu c.

33

CHNG 3: KT QU V THO LUN


3.1. m nguy n liu Tin hnh xc nh m nguyn liu, kt qu thu c nh sau: Bng 3.1. m ca v qu qut STT 1 2 m1 100 100 Trung bnh m2 27.80 27.30 X(%) 72.20 72.70 72.45

Nhn xt: m ca v qu qut tng i cao 72.45 %, chng t v qu qut ch a nhiu nc v nhiu cht d bay hi. 3.2. Ly trch tinh du t v qu qut 3.2.1. Khi lng v nh gi cm quan ca tinh du Sau khi nghin cu cc iu kin ti u thu ly tinh du cc ti liu [2], [3], [4] chng ti tin hnh chng ct tinh du v thu c kt qu sau: Tinh d u v qut l ch t lng trong sut, c mu vng nht, v cay v c mi thm c trng rt d chu, nh hn nc, tch lp kh r trong nc. Vi phng php chng ct li cun hi nc c in, sau 3 gi ngm nguyn liu trong dung d ch mui n 10%, thi gian chng ct l 90 pht, t 100g v chng ti thu c 3,33 ml tinh du. Vi phng php chng ct li cun hi nc kt hp vi chiu x vi sng khng cn phi ngm nguyn liu, thi gian chng ct l 15 pht, t 100g v chng ti thu c 3,14 ml tinh du. Nhn xt: Phng php chng ct li cun hi nc kt hp vi chiu x vi sng thi gian chng ct ngn, hiu qu ly trch gn nh tng ng vi phng php chng ct li cun hi nc c in l do di tc dng ca vi sng, nc trong cc t bo thc vt b nng ln nhanh chng, p sut bn trong tng t ngt lm cc m cha tinh du b v ra. Tinh du thot ra bn ngoi, li cu n theo hi nc sang h th ng ngng t.

34 Tuy nhin ngoi vic nc b tc dng nhanh chng, cc cu phn phn cc hin din trong tinh du cng b nh hng bi vi sng. Ngc li cc cu phn hidrocarbon t chu nh hng ca vi sng (do chng c phn cc km) nn phng php ly trch li cun hi nc c s h tr ca vi sng thng thch hp cho cc loi tinh du c thnh phn phn cc nhiu. 3.2.2 . Xc nh mt s ch s ha l ca tinh du Tinh d u sau khi chng ct, chng ti tin hnh xc nh mt s ch s ha l ti phng th nghim Hu c ca trng i hc ng Thp (tr ch s khc x o Vin Khoa hc Vt liu v ng dng Th nh ph H Ch Minh) v thu c kt qu nh sau: Bng 3.2. Cc ch s ha l ca tinh du Ch s ha l un nng c in Chiu x vi sng T trng 0,8753 (g/ml) 0,8736 g/ml Ch s khc x 1,47731-4772 (31,8-32,1 0C) 1,4719-1,4720 (31,5-31,7oC) Gc quay cc
30 D 92,8

ha tan trong etanol 90% 1:4,572 1:4,813

Ch s axit 0,5836 0,5713

30 D 93, 7

Nhn xt: - V ch s khc x Ch s khc x cao hay thp ty theo thnh phn cc cht cha trong tinh du l no, khng no hoc nhn thm. Nu trong tinh du c nhiu th nh ph n c nhiu n i i th c ch s khc x cao. Ch s khc x b nh hng bi yu t nhit . Khi o ch s khc x nhng nhit khc nhau th cho kt qu khc nhau, nhit cng ln th ch s khc x bin thin theo hng gim v ngc li. Ch s khc x ca mu tinh du v qu qut theo phng php chng ct li cu n hi nc c in l 1.477. Phng php chng ct li cun hi nc kt h p vi chiu x vi sng ch s khc x ca mu tinh du v qu qut l 1,472 khc nhau khng nhiu Ch s khc x ca tinh du thu c t hai phng php chng ct u nm trong khong 1,45 1,56. Ch s khc x mc trung b nh so vi khong gi tr

35 trn do trong thnh phn tinh du c cha mt s hp cht c ni i (s ni i khng nhiu). - V gc quay cc Gc quay cc ()D ca tinh du th hin kh nng ha tan ca tinh du trong cc loi dung mi, nu ()D cng ln th c th ha tan tt trong dung mi phn cc, ngc li ()D cng b th c th h a tan tt trong dung mi khng phn cc. Nhit nh hng ti gc quay cc, nhit khi o gc quay cc tng th gc quay cc cng tng theo v ngc li. Gc quay cc ca mu tinh du v qu qut theo phng php chng ct li cun hi nc c in l tng i thp hn phng php chng ct li cun hi nc kt hp vi chiu x vi sng c th l do thnh ph n ha hc ca tinh du thu c t phng php chng ct li cun hi nc kt hp vi chiu x vi sng cha nhiu hp cht phn cc hn mu tinh du thu c t phng php chng ct li cun hi nc c in. V ha tan trong etanol, t trng, ch s axit ha tan trong etanol, t trng, ch s axit ca tinh du v qu qut thu c t hai phng php chng ct khc nhau khng nhiu. T gi tr ha tan trong etanol cho th y, tinh du v qu qut ha tan tt trong dung mi khng phn cc iu ny ph h p vi kt qu o ch s khc x v gc quay cc trn. T trng ca tinh du v qu qut trong hai phng php chng ct l 0,873 0,875 thp v vy tinh du nh hn nc v ni trn mt nc. Ch s axit tnh c sau khi tin hnh th nghim chun tinh du bng KOH tng i nh n n tinh du v qu qut khng cha nhiu axit bo. 3.2.3. Xc nh thnh phn ha hc ca tinh du v qu qut Thnh phn ha hc ca hai mu tinh du v qu qut thu c t hai phng php un nng c in v chiu x vi sng c xc nh bng ph GC/MS Vin Khoa hc vt liu TPHCM, kt qu l trong mu tinh du c cha khong 29-33 ch t, trong c mt s cht l thnh phn chnh ca tinh du v qu qut.

36

Hnh 3.1. Sc k tinh du v qu qut thu c t phng php chng ct li cun hi nc c in.

Hnh 3.2. Sc k tinh du v qu qut thu c t phng php chng ct li cun hi nc kt hp vi chiu x vi sng

37 Bng 3.3. Thnh phn ha hc ca tinh du v qu qut qua chp ph GC/MS Thi gian lu STT Thnh phn ha hc
NC CXVS

un nng c in (%)

Chiu x vi sng (%) 77,28 1,667 1,612 1,037 1,417 4,239 0,618 2.341

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13

D - Limonene Beta-Myrcene 1R-alpha-pinene Beta-pinene Beta, cis - Ocimene 3-hexen-1-ol (E) 3-hexen-1-ol (Z) 1-octanol 1,6-octadien-3-ol-3,7-dimetyl Limonene oxit (cis) Limonene oxit (trans) 6-octen-1-ol-3,7-dimetyl 3-cyclohexen-1metanol,alpha.4trimetyl 2-cyclohexen-1-ol-2-metyl-5-(1metyletyl)-cis 2-cyclohexen-1-ol-2-metyl-5-(1metyletyl)-trans 2-cyclohexen-1-ol-2-metyl-5-(1metyletyl),(R) 2,6-octadien-1-ol-3,7-dimetyl,(E) 1,2,3,4,4a,5,6,8a-octahydro-7-

8,836 7,435 5,647 6,923 9,715 3,807 10,478 11,639 13,009 13,207 15,539

8,763 7,330 3,796 7,916 10,342 11,545 17,223 15,476

64,712 9,653 3,517 2,338 0,175 0,238 0,629 1,545 1,561 0,526 1,310

14

16,804

17,871

1,038

0,573

15

17,237

14,870

0,883

0,277

16 17

17,913

1,169 1,292

24,250 21,745

28,276

18

methyl-4-methylen-1-(1metyletyl) naphthalen

2,077

2,39

19 20

(1R,4R)-p-Menta-2,8-diene Cylohexen-1-metyl-4-(1-

21,374 11,158

0,574 0,326

38 metyletyliden) 21 22 decanal Caryophyllene 16,229 25,620 0,636 0,902

T kt qu th nh phn ha hc cho thy mu tinh du thu c bng phng php chng ct li cun hi nc c in c thnh phn hidrocacbon cao hn mu tinh d u thu c bng phng php chng ct li cun hi nc kt hp vi chiu x vi sng v hidrocacbon l nhng hp cht km phn cc nn t chu tc dng ca vi sng. Tuy nhin hm lng limonene trong mu tinh du thu c trong un nng c in thp hn trong chiu x vi sng v thp hn ti liu [4], c th l do trong qu trnh chng ct bin php k thut v iu kin bo qun ca chng ti cha tt nn m t phn limonene b oxi ha thnh limonene oxit. C hai phng php chng ct bng un nng c in v chiu x vi sng chng ti u thu c 1,2,3,4,4a,5,6,8a-octahydro-7-metyl-4-metylen-1-(1-metyletyl) naphthalen l mt hp cht theo nghin cu ti liu [1] th y l thnh phn ha h c c lin quan n kh nng th hin hot tnh gii lo u ca tinh du v qu qut m nhng loi tinh du khc khng c, v khng tm th y trong thnh phn ha h c ca tinh du ti liu [6], [11] 3.2.4. Kt qu th hot tnh sinh hc ca tinh du v qu qut Kt qu bc u th hot tnh sinh hc ca 2 mu tinh du thu c t un nng c in v chiu x vi sng u c kh nng khng khun vi cc chng vi khun l Bacilus subtilis v Staphylococus aureus ATCC 25923. Bng 3.4. Kt qu th hot tnh sinh hc ca mu tinh du thu c t phng php chng ct li cun hi nc c in.

Vi khun th nghim Staphylococcus aureus Bacillus Subtilis Nng (C) 13 14 C0

Bn knh vng v khun 10 11 C1 8 8 C2 6 7 C3 6 6 C4

C0: Nng cha pha long C1, C2, C3, C4: Cc nng pha long dn t 10 -1 n 10-4

39 Bng 3.5. Kt qu th hot tnh sinh hc ca mu tinh du thu c t phng php chng ct li cun hi nc kt hp vi chiu x vi sng. Vi khu n th nghim Staphylococcus aureus Bacillus Subtilis Nng (C) 8 9 C0 Bn knh vng v khun 6 6 C1 6 6 C2 6 6 C3 6 6 C4

T hai bng kt qu trn nhn thy mu tinh du v qu qut thu c t phng php chng ct li cun hi nc c in c hot tnh khng khun cao hn so vi mu tinh d u du thu c t phng php chng ct li cun hi nc kt h p vi chiu x vi sng. 3.3. Kho st thnh phn ha hc ngoi tinh du ca v qu qut 3.3.1. nh tnh s b thnh phn ha hc ngoi tinh du ca v qu qut Sau khi s dng sc k ct vi silicagen v sc k lp mng (bn nhm vi silicagen) vi cao chloroform. H dung mi c s dng tin hnh l n-hexan : axeton theo cc t l khc nhau vi phn cc t thp n cao tch ly cc phn on mu khc nhau. Kt qu sc k ct chng ti thu ly 3 phn on: Phn on 1 c mu xanh lam, phn on 2 c mu vng v phn on ba c mu . Tin hnh nh tnh phn on 1 (m u xanh lam) Khi dng thu c th gm st (III) clorua 1% + kalihexaxianoferat (III) (K3[Fe(CN)6]) phn on 1 cho ph n ng dng tnh, dung dch c mu xanh thm suy ra phn on 1 c flavonoid. xc nhn s hin din ca glycosid, chng ti s dng Thuc th Tollen (dung dch AgNO3 trong NH3) to kt ta khi tip xc dch cloroform suy ra phn on 1 c glycosid. Khi dng thuc th Wagner xc nhn s hin din ca alkaloid, kt qu khng c hin tng g nn trong phn on 1 khng c ankaloid. Chng ti tin hnh nh tnh phn on hai v phn on ba nh phn on m t kt qu cho thy: Phn on hai c c 3 loi hp cht: flavonoid, Glycosid v ankaloid. Phn on 3 ch c flavonoid

40 3.3.2. Thnh phn ha hc ngoi tinh du ca v qu qut Chng ti chn phn on 2 kho st thnh phn ha hc n goi tinh du ca v qu qut (mu qut 1). Chia phn on 2 lm hai phn, mt phn em o ph GC-MS xc nh thnh ph n ha hc. Mt phn tip tc chy ct v nh tnh tip sau mi tin hnh o ph GC-MS xc nh thnh phn ha hc (mu qut 2). Bng 3.6. Thnh ph n ha hc ngo i tinh du ca v qu qut qua chp ph GC/MS Thi gian lu STT Thnh phn ha hc Qut 1 2 3 4 5 6 7 8 9 2,4-Dimetyl hept-1-en 4-hidroxi-4-metyl Pentan-2-on 2,2,4,6,6-pentametyl heptan Limonen 2,6,10-trimetyl dodecan 2,7,10-trimetyl dodecan 3,7,11-trimetyl dodecan trans-p-Mentha-2,8-dienol 1-metyl-4-(1-metylethenyl)xiclohex-2-en-1-ol 5-(2-propenyl) benzo-1,3diozole 3,7,11-trimetyl dodecan-1-ol 2-metyl decan-1-ol 2,2,6-trimetylbixiclo[4.1.0]hept-1-yl)metanol 2,6,10-trimetyl tetradecan 4,6-di-tert-Butyl-m-cresol (Z)-3,7-dimetyl-2-octen-1-ol 21,639 27,861 28,630 20,779 21,136 21,493 11.087 19,993 3,837 3,926 7,746 9,117 10,220 11,079 12,766 13,391 Qut III 3,894 7,746 9,125 10,220 Mu 1 (Qut) (%) 0.384 0.591 0.949 1.466 1.082 0.948 3.192 0.744 Mu 2 (Qut III) (%) 10.851 1.809 16.953 1.607 -

10 11 12 13 14 15 16

9.227 1.698 2.318 1.980 1.242 3.260 2.321

1.462 -

41 isobutyrat 17 18 19 20 21 22 23 Butylate Hidroxytoluen 3,7,11-trimetyl-1,6,10dodecatrien-3-yl Formiat 2,6-dimetyl octa-2,6-dien-1,8-ol 30,998 Platambin 2,4-Dimetyl hexan Octan 5-(1-propenyl)-1,3benzodiozole 1-metyl-4-(1-metyletenyl) xiclohexan-1,2-diol 2,4-bis(1,1-dimetyletyl) phenol 2,6,10,14-Tetrametyl haxadecan Heptacosan 29,327 40,211 43,244 22.182 41,655 2,839 3,196 20,001 29,319 30,495 45.074 4.845 2.044 16.634 13.147 3.949 6.495

24 25 26 27

2.283 1.766 11.350 27.274

T bng kt qu o ph GC-MS xc nh thnh phn ha hc ca hai mu trn nh n thy thnh phn ha hc chnh cc hydrocacbon, cc hp cht c cha nhm hidroxi, khng tm thy s hin din ca flavonoid, glycosid v ankaloid nh nh tnh ban u. iu n y c th do chng ti cha tch ht c tinh du trong v qu qut, v cng c th hm lng cc cht ny rt nh m mu th cn ln nhiu tp cht n n chng khng th hin c trn ph . 3.4. nh tnh s b thnh phn ha hc ca nc qu qut 3.4.1. Nhn bit glycoside Khi cho thu c th Febling vo dch cloroform ca nc qu qut, c kt ta xut hin, chng t c glycoside. chc chn l c glycoside, chng ti s dng thm thuc th Baljet v Tollens. Trong ng nghim th vi thuc th Baljet c xut hin 1 vng mu vng, chng t c Glycosid. Trong ng nghim th vi thuc th Tollens, c xut hin kt ta, chng t dch cloroform ca nc qu qut c glycoside. Vy, qua cc hin tng khi s dng cc thuc th trn, chng ti kt lun rng trong dch chloroform ca nc qu qut c glycoside.

42 3.4.2. Nhn bit flavonoid nhn bit flavonoid, chng ti dng dung dch FeCl3 1% v K3Fe(CN)6], th y c xut hin mu xanh th m c trng. Kt lun rng trong dch cloroform ca nc qu qut c cha flavonoid 3.4.3. Nhn bit ankaloid Khi dng thuc th Wagner cho vo d ch chloroform ca nc qu qut, nhn thy c kt ta nu xut hin rt r, chng t rng trong dch cloroform c cha ankaloid. Vy qua cc kt qu nh tnh s b ban u dch clorofom ca nc qu qut chng ti c th kt lun rng thnh phn ha hc ca nc qu qut c cha flavonoid, glycosid v ankaloid.

43

KT LUN V KIN NGH


K T LUN Qua nghin cu ti kho st thnh phn ha hc t qu qut, chng ti rt ra c cc kt lun sau - Chng ti tin hnh ly trch c tinh du t v qu qut bng hai phng php chng ct li cun hi nc c in v chng ct li cun hi nc kt hp vi chiu x vi sng. - Tinh du v qu qut thu c t hai phng php chng ct u c mu vng nh t, v cay, mang mi thm c trng. Thnh phn ha hc ca tinh du qut ch yu l cc hydrocarbon terpenic vi hot cht chnh l D-Limonene, bn cnh cn c cu t 2,3,4,4a,5,6,8a-octahydro-7-methyl-4-methylen-1-(1-metyletyl) naphthalene, theo nghin cu ban u th y l thnh ph n ha hc c lin quan n kh nng th hin hot tnh gii lo u ca tinh du v qu qut m nhng loi tinh d u citrus khc khng c. - Phng php chng ct li cu n hi nc kt hp vi bng chiu x vi sng c u im rt ngn c thi gian chng ct, tit kim nng lng. - Kt qu th hot tnh sinh hc hai mu tinh du thu c t hai phng php chng ct khc nhau u c kh nng khng khun vi cc chng vi khun l Bacilus subtilis v Staphylococus aureus ATCC 25923, tuy nhin mu tinh du thu c t phng php ct li cun hi nc c in c hot tnh khng khun cao hn. - Chng ti tin h nh kh o st thnh phn ha hc ngoi tinh du ca v qu qut v nc qu qut, kt qu bc u cho thy trong v qu qut ngo i tinh d u cn c cc thnh phn khc l s hin din ca cc alkaloid, glycoside v flavonoid. Trong nc qu qut c li th nh cao qu t qua nh tnh ban u cho th y nc qu qut cng c cha cc th nh phn ha hc nh trn. KIN NGH Do iu kin v k thut, thi gian v kinh ph cn hn ch nn cn m t s vn chng ti cha gii quyt c nn chng ti xut cho hng nghin cu tip theo nh sau:

44 - Mu tinh du sau khi chng ct nn tin hnh o ph ngay xc nh thnh ph n ha hc khng nn lu s b cc tc nhn b n ngoi nh sng, nhit lm thay i th nh ph n nh tnh v nh lng ca mu tinh du. - Thay i dung mi dng trong chit tch v sc k ct tch c cc thnh phn ha hc ngoi tinh du l cc alkaloid, glycoside v flavonoid. - Nghin cu thit lp qui trnh tch chit cc loi hp cht cc alkaloid, glycoside v flavonoid c trong nc qu qut c dc tnh sinh hc cao v c nhiu ng dng trong thc tin. - Ly trch v c lp mt s hot cht chnh trong tinh du nh: tch DLimonene, Beta-pinene, c bit l tinh du qut c s hin din ca 7,7dimethyl-2-methylen bicyclo[2.2.1]heptan v 1,2,3,4,4a,5,6,8a-octahydro-7-methyl4-methylen-1-(methylethyl) naphthalen m khng pht hin 4 loi tinh du cam, chanh, bi, qut. Rt c th s khc bit trong thnh phn ha hc n y gp phn vo s khc bit v hot tnh sinh hc, c th l tc d ng gii lo u.

45

TI LIU THAM KHO


1. Dng Phc An, Hunh Th Bch Tuyn, Nguyn Ngc Khi, Kho st hot tnh gii lo u ca mt s tinh du t v qu cy chi Citrus h Rutacece. Y Hoc TP. H Ch Minh. 2. L Th Anh o, ng Vn Liu (2005), Th c hnh Ha hc hu c, NXB i h c S phm. 3. Vng Ngc Chnh (2005), Hng Liu M Phm, NXB i hc Quc gia TP. H Ch Minh. 4. L Th Ngc Duyn (2011), Nghin cu ly trch tinh du t v qu qut bng phng php chng ct li cun hi nc, Lun vn tt nghip i hc, Trng i h c ng Thp. 5. Vn nh (2002), Sn xut cht thm thin nhin tng hp , NXB KHKT. 6. Nguyn Th L, L Th Oanh, Phan Th Bo Vy, Hunh Mai Tho (Khoa Cng ngh Ha hc, i hc Bch Khoa, Thnh ph H Ch Minh, Vit Nam), Tch tinh du v alkaloid t qu qut, Hi ngh Khoa hc v Cng ngh ln 9. 7. Nguyn Th Cm Loan (2011), Nghin cu ly trch cc hp cht mu t cy cm tnh ng Thp, Kha lun tt nghip, i hc ng Thp. 8. Nguyn Th Trc Loan (2009), Ly trch tinh du ca cy rau m (hydrocotyle asiatica), Kha lu n tt nghip, i hc ng Thp. 9. V Ngc L (1996), Nh ng cy tinh du Vit Nam, NXB Khoa hc v K thut. 10. Tt Li (2006), Nhng cy thuc v v thuc Vit Nam, NXB Y dc. 11. Trnh Ho ng Hiu, Nguyn Th Tho Trn, L Ngc Thch (2009), Kho st tinh du v tri tc v l tc, Tp ch Pht trin Khoa hc v Cng ngh , (tp 12, s10). 12. Nguyn Minh Hong (2006), Kho st tinh du v tri ging Citrus h rutaceae. ti nghin cu khoa hc cp c s, i hc M Tp HCM. 13. Nguyn Vn Minh, Cc phng php sn xut tinh du, Bn tin khoa hc cng ngh, Vin nghin cu Du v cc cy c Du. 14. Nguyn Th Tm (2003), Nhng tinh du lu hnh trn th trng, NXB Khoa h c v K thut. 15. L Ngc Thch (2003), Tinh du, NXB HQG TP. H Ch Minh.

You might also like