1.1.1 Lch s pht t!"n c#ng t$. c cp giy phep kinh doanh vao nm 1995 vi tn gi la Cng ty TNHH thong mai Tong Minh, co tru so tai Gia Lai, la mt cng ty lin doanh vi Phong thong mai huyn Chprng, tinh Gia Lai, vi mt xi nghip san xut tinh bt khoai mi co tn gi la Xi nghip ch bin tinh bt tng hp Gia Tong dt tai x Bau Can, huyn Chprng. Sau hai nm xy dung co so ha tng, cng ty di vao hoat dng chinh thuc la san xut tinh bt khoai mi. Nm 1999, tach khoi Phong thong mai huyn Chprng va chinh thuc co tn la Cng ty TNHH Gia Tong cho dn nay. Tu nm 1999, d giai quyt lng b thai qua ln, bn canh vic sy kh b d ban cho cac cng ty san xut thuc n chn nui, Cng ty TNHH Gia Tong d hp tac vi Vin Sinh Hc Nhit i du t nghin cuu, xy dung phn xong mi nhm san xut enzyme tu b khoai mi nho mt s loai vi sinh vt kha nhau d b sung vao khu phn n cua vt nui. n nm 2000, thi phn xong san xut enzyme cung chinh thuc di vao san xut sau hon mt nm nghin cuu va d cho ra doi loat san phm enzyme du tin nm 2001. Nm 2002, Cng ty TNHH Gia Tong du t xy dung thm mt chi nhanh phn xong san xut enzyme va hn hp vi sinh vt tai qun 6, thanh ph H Chi Minh nhm tng cong vic san xut va da dang hoa san phm. Tuy nhin, qua trinh san xut san phm co mui dc trng do qua trinh nui cy nn chi nhanh nay d dc di doi vao khu cng nghip Song Thn 1, huyn Di An, tinh Binh Dong vao nm 2003. Bn canh do, cng ty cung thanh lp mt chi nhanh giao dich tai thanh ph H Chi Minh nhm phuc vu tt cng tac kinh doanh cac san phm tinh bt. 1 1.1.%. Q& tnh pht t!"n s'n (&)t. 1.1.%.1. *'n (&)t t!nh +,t t- .h/0! 1. Tu vic thanh lp va phat trin cng ty vi muc dich ban du la san xut cac loai san phm tinh bt tu khoai mi d cho ra cac loai san phm nh: Tinh bt nguyn liu. Tinh bt bin tinh. Tinh bt chua. Nhung san phm nay chu yu xut khu sang ai Loan. 1.1.%.%. *'n (&)t ch2 ph31 s!nh h4c ph5c v5 t6ng t4t7 ch8n n&#! th9 $ v n&#! t6ng th:$ s'n. giai quyt lng b thai qua ln, cng ty d du t, nghin cuu cac ch phm sinh hc nh: Enzyme: u-amylase, protease, cellulase, lipase, phytase... Cac probiotic dung trong chn nui. Cac hn hp vi sinh xu ly mi trong nui thuy san. Cac san phm tri bnh cho tm. 1.1.%.;. <=ng s'n (&)t t/ng tng >0!. Hin nay cng ty dang du t nghin cuu cac san phm co gia tri cao nh: Cac san phm tri bnh cho tm, ca. Cac san phm siu dinh dng kich thich tiu hoa. Cac san phm sinh hc phuc vu san xut phn huu co vi sinh... 1.%. ?0 @!"1 (A$ BCng. Tru so cng ty dt tai: Quc l 19- Bau Can- Chprng- Gia Lai, rng 3 hecta va din tich xy dung co ban la 10.000 m 2 . Gm co: Phn xong tach chit - xu ly bt. Phn xong sy, hoan thin san phm bt. Phn xong san xut enzyme. Kho nguyn liu. Phong k thut. Vn phong. Khu tp th cho cng nhn vin. Cn tin. Khu giai tri. Cac chi nhanh: Chi nhanh tai TP.H Chi Minh: 78-80-82, Hu Giang, lu 2, phong 6, qun 6. Chi nhanh tai Binh Dong: Kho C, L D, Tng kho Song Thn, Khu Cng Nghip Song Thn 1, huyn Di An. 2 1.D. * @6 tE chFc nhAn sC. 3 1.D.1. TG! c#ng t$ chHnh. 4 Chu tich Hi dng thanh vin Giam dc Quan dc 1 (tach va xu ly bt) Quan dc 2 (sy va thu hi tinh bt) Quan dc 3 (san xut enzyme) Trong phong k thut Trong chi nhanh Tp.HCM Trong chi nhanh Binh Dong T trong T trong T trong Cng nhn Cng nhn Cng nhn 1.D.%. TG! Inh Jng Chng % NGUYKN LLMU *NN OUPT 5 Trong chi nhanh K toan Kinh doanh Kho Trong PTN T trong 1 T trong 2 (sx Pilot) T trong 3 (sx VSV) Nhn vin PTN Cng nhn Cng nhn Cng nhn %.1. Ng&$Qn >!R&. Nguyn liu san xut chu yu la ng, b khoai mi va du nanh. %.1.1. Ng#. Co nhiu loai ng: ng da, ng bt, ng rng nhua, hat ng co mau trng, mau vang hay mau hng, ng mau vang co su hin din cua carotenoid va zeaxanthine o trong ni nhu. Ng co hat mau hng la do ni nhu ng co anthocyanin. O dy, ta su dung ng con nguyn hat, loai 1. Sau do, ta s xay nhuyn ng va sang qua ray co kich thc 3 mm, d trong it nht 30 ngay mi dc dem ra su dung san xut. %.1.%. ?S& nnh. u nanh vi d dc su dung trong chn nui tu rt lu, do co gia tri dinh dng kha hoan hao di vi ca heo va ga, chng han nh: protein, lipit, mui khoang, cellulose...Tuy nhin, trong du nanh cung co kha nhiu yu t khang dinh dng. Ngoai anti - trypsin (protease inhibitor) vn d bit dn tu lu, hat du nanh con chua mt loat cac dc t khac nh lectin, phytoestrogen, saponin, goitrogen va khoang 5 - 6 oligosaccharide khng tiu hoa dc di vi thu da day don. Mt s dc t va cac dong oligosaccharide khng bi phn huy khi su ly bng nhit. %.1.;. IT .h/0! 1. Lng b khoai mi tu qua trinh san xut tinh bt tai tru so san xut dt tai Gia Lai dc sy kh d tn dung lam nguyn liu san xut cac ch phm sinh hc phuc vu chn nui. %.%. Uhng php vSn ch&$"n7 @nh g! v +'/ V&'n ng&$Qn >!R&. %.%.1. Uhng php vSn ch&$"n. B khoai mi sy kh s dc dong goi va vn chuyn bng xe tai co mai che dn chi nhanh san xut tai Binh Dong. Cac nguyn liu khac nh cam ng, du nanh cung dc vn chuyn bng xe tai co mai che. %.%.%. ?nh g! ng&$Qn >!R&. Nguyn liu sau khi vn chuyn dn co so san xut phai trai qua khu danh gia cht lng nguyn liu. 6 Nguyn liu du vao phai dap ung cac chi tiu v mau sc, mui vi, ham lng cac cht dinh dng cho vt nui, phai dat cac tiu chun v d m, tap cht, vi sinh... Nhung nguyn liu dat tiu chun s dc nhp kho trc khi dem san xut hoc du tru. Nhung nguyn liu cha dat chun s dc xu ly bng cach sy hoc chiu xa trong nhung trong hp cn thit. %.%.;. I'/ V&'n ng&$Qn >!R&. Vic giu gin sach s kho tang, dung cu thit bi, phong tin bao quan la bc co ban trong vic bao quan tt ca cac loai nguyn liu. V sinh kho tang co th ngn ngua dc su pha hoai cua cn trung vi sinh vt, cac loai gm nhm. Lam v sinh va sat trung trc theo dung yu cu ki thut d dam bao kh rao, sach s, khng co mui la.Sau do mi nhp nguyn liu vao kho bao quan. Nguyn liu trong kho dc xp theo tung l ring bit, o di co lot bao pallete va phai co bang ghi chep thoi gian nhp kho d xu dung hp ly. Cac l hang xp cach tong 20-30cm va khoang cach giua cac l hang ring bit tao nhung khoang trng cho thng thoang va co li di d ngoi di kim tra d dang va thun ti n trong cng tac Phong chay chua chay. Trc va sau mi ln xut, nhp phai tng v sinh kho tang ( co th dung hoa cht xu ly). kip thoi ngn chn nhung bin di xu xay ra trong qua trinh bao quan, phai co ch d kim tra theo di phm cht nguyn liu mt cach h thng. 7 Chng ; QUY TWXN< *NN OUPT YNZY[Y ;.1.* @6 t\1 t]t V&$ tnh s'n (&)t ^n_$1^ p/+!/t!c. 8 Ng du nanh Trn du Nc (60) Phu gia Hp chin Lam ngui Trn ging Trai nia U Sy KCS ong goi Ging gc Nhn ging Thi gio, phun m, tro nia Tan nhuyn Phi trn San phm ;.%. Th&$2t 1!nh V&$ tnh. ;.%.1. Ng&$Qn >!R&. Nguyn liu gm co Ng d dc nghin nho, u Nanh d ep du cung dc nghin nho. Ng va u Nanh trn du vi nhau. Sau do hn hp nay s dc ngm trong nc ( nc chim 60, hn hp Ng va u Nanh chim 40) cung vi cht phu gia d hoa tan trong nc, chinh pH. Phu gia gm cac cht khoang vi lng va da lng. ;.%.%. <)p chHn. Hn hp nguyn liu sau khi trn chung s dc ngm trong dung dich nc va phu gia it nht trong 30 phut, sau do s cho vao ni hp d thanh trung trong 2 gio 30 phut o 100 0 C. ;.%.;. L1 ng&,!. Hn hp sau khi hp xong s dc trai ra khay lam ngui dn nhit d thong, dn khi nhit d xung con khoang 30 35 0 C. Tt ca cac dung cu lam vic phai dc v sinh va khu trung bng cn trc khi thao tac. ;.%.D. T,n g!`ng. Sau khi mi trong d dc lam ngui, ta s thuc hin qua trinh trn ging. Ging sau khi cy tng sinh lc trong 24 gio, dc dung trong erlen s ti du ln mi trong. Dung cac dung cu d dc khu trung trn du mi trong vi ging, ty l khoang 30 mlkg mi trong. Tuy vao thoi dim trong ngay ma lng ging ta su dung nhiu hay it d dam bao su phat trin cua vi khun. Ngoi cng nhn thuc hin khu nay phai v sinh va khu trung tay trc khi thuc hin. ;.%.a. T'! n!0. Mi trong sau khi d trn ging ta s tin hanh trai nia. Nia phai dc v sinh sach s, tm lot nia phai dc ngm cn qua dm d tranh nhim tap cac vi khun la. Mi nia ta trai khoang 5kg mi trong, d day mi trong trn nia khoang 3 4 cm. ;.%.b. c. 9 Sau khi trai nia, ta dung mt tm vai mong phu ln ( tm vai nay cung phai dc thanh trung), d giu d m cho mi trong. Cac nia s dc u trong phong kin, o nhit d khoang 30 37 0 C, u trong 48 gio. Khi nhit d trong bung cao hon quy dinh, mo quat thng gio, d giai nhit cho mi trong, vi trong nui cy ban rn, gio la tac nhn giai nhit va cung cp oxy. Do do, gio cung cp cho qua trinh u tu tu va du dn la tt nht. Trong qua trinh u chung ta cn chu y dn d m, mt trn cua mi trong thong bi kh do qua trinh thng gio va phat nhit manh, vi vy cn phun m d giu d m cho mi trong. Sau khi u dc khoang 23 thoi gian quy dinh, tin hanh tro nia d vi khun mc dng du. ;.%.d. *)$. Sau khi u xong, canh trong dc ly ra khoi bung u va cho vao sy o nhit d sy khoang 45 50 0 C cho dn khi dat d m 12 (thong mt khoang 48 gio). ;.%.e. Tn nh&$fn. Canh trong sau khi dc sy kh ta thu nhn dc enzyme o dang canh trong th, kh cung va bi kt banh vi vy cn phai dc tan nhuyn. ;.%.g. Uh`! t,n. Muc dich cua vic phi trn d tao su dng nht cho san phm. ;.%.1h. i!"1 t0. San phm trc khi dc dong goi phai dc ly mu d kim tra cac chi tiu: d min, tng s vi khun, hoat tinh cac enzyme, dam tng s, d m... Mu kim tra dc ly ngu nhin sau mi m trn khoang 300kg. ;.%.11. ?\ng g\!. Vic dong goi giup hoan thin san phm, bao quan san phm tt hon. 10 ;.;. <nh 'nh 1!nh h40 s'n (&)t. 11 12 ;.D. N,! V&$ .h& vCc s'n (&)t ^n_$1^. Khng dc tip khach khu sanh lam vic. Khng dc qua lai giua cac b phn khac khi khng dc cho phep. Khu trung tay bng cn va d kh cn trn tay trc khi thao tac nhung cng doan theo quy dinh. Khng deo cac loai trang suc ( nhn, vong, dng h...) khi lam vic. Khng d d thuc n ung va n ung trong khu vuc lam vic. Khng dc vut rac, khac nh bua bi trong khu vuc san xut. V sinh sach s, d rac sau mi ngay lam vic. Su dung bao quan dung cu, thit bi theo dung quy dinh, khng dung ln dung cu san xut cua cac san phm khac nhau. Sp xp ngn np, dung noi quy dinh cac dung cu thit bi trc va sau khi su dung. Chng D N<jN OkT Vl iLmN NG<n D.1. NhSn (ot. 13 Trong thoi gian thuc tp tai chi nhanh, chung em d dc tao mi diu kin d tim hiu quy trinh san xuy enzyme cung nh tinh hinh thuc t san xut tai Chi nhanh, di su hng dn cua cac anh chi cng nhn vin tai Chi nhanh, dc bit la Anh Chi cng nhn b phn san xut, phong k thut, KCS cua chi nhanh. Qua thoi gian thuc tp tai Chi nhanh em rut ra dc nhung nhn xet sau: Chi nhanh TNHH Gia Tong la cng ty co Ban Giam c cung di ngu CBCNV tu phn xong dn cac phong ban co tinh thn trach nhim cao, lam vic khoa hc, sang tao, co luc lng chuyn mn cao, dy nhit huyt. Ban lnh dao chi nhanh lun quan tm dn cng nhn vin, tao diu kin cho cac phong ban va phn xong quan h cht ch vi nhau. Mi b phn, phong ban, CBCNV du co lich lam vic r rang, hp ly, h tr va phi hp cht ch vi nhau trong cng vic. May moc thit bi trong chi nhanh con han hp, chi dap ung dc m hinh san xut pilot va do qua trinh san xut la nui cy ban rn nn hu ht cac cng doan la thu cng. D.% i!2n ngh. Qua qua trinh thuc tp, chung em co mt s kin nghi sau nhm gop phn nho d san xut thun li va dat hiu qua hon: Cn cai t may moc, trang thit bi san xut tai chi nhanh nhm hin dai hoa va chun hoa cac cng doan. Khu vuc san xut cn tach ring bit, d giam su nhim tap. Khu vuc dong gop phai trang bi thm may thng gio nhm giup thng thoang va giai nhit cho mi trong lam vic. U<p LpC CqC U<rsNG U<qU iLt[ TWA C<PT LruNG *NN U<v[ 1. Oc @nh h/Gt tHnh ^n_$1^ U/t^0s^ wPhng php Ansonx. 1.1. Ng&$Qn t]c. 14 Casein bi phn giai trong mi trong kim di tac dung cua protease tai san phm la cac doan peptide ngn hoa tan trong tricloroacetic acid (TCA), xac dinh lng Tyrosine va Tryptophan hoa phan boi thuc thu olin. 1.%. <\0 ch)t. Dung dich Na 2 HP 4 115M: hoa tan 5,9690g Na 2 HP 4. 12H 2 trong nc vua du 250ml. Dung dich KH 2 P 4 115M: hoa tan 0.9072g KH 2 P 4 trong nc vua du 100ml. Dung dich dm Sorensen 115M, pH 7,6: trn chung 177ml dung dich NA 2 HP 4 115M va 23ml dung dich KH 2 P 4 115M. Dung dich Casein 1: dun si cach thuy 1g Casein torng dung dich dm Sorensen cho dn khi tan hoan toan ri dinh muc lai cho du 100ml. Dung dich TCA 5: hoa tan 5g TCA trong nc cho du 100ml. Dung dich NaH 0,5N: hoan tan 10g NaH trong nc cho du 500ml. Thuc thu olin ( pha long vi nc ct theo ty l 1:2). Dung dich HCl 0,2N: trn 4,25ml HCl dd vi nc cho du 250ml. Dung dich Tyrosine 20 mMl: khuy nghin 1,8119g Tyrosine trong dung dich HCl 0,2N vua du 500ml. Dung dich Tyrosine chun 1mMl torng dung dich HCl 0,2N: pha long 5ml dung dich Tyrosine 20mMl torng dung dich HCl 0,2N thanh 100ml. 1.;. T!2n hnh thH ngh!R1. Dng ng chun Tyrosine: J&ng Bch h\0 ch)t yng ngh!R1 1 2 3 4 5 6 15 Dung dich Tyrosine chun (ml) 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0 Lng Tyrosine tng ng (M) 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0 Dung dich HCl 0,2N (ml) 2,4 2,3 2,2 2,1 2,0 2,5 Dung dich NaH 0,5N (ml) 5 5 5 5 5 5 Thuc thu olin (ml) 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 Lc manh, sau 10 phut do D o bc song 660 nm. ng s 6 la ng kim chung (KC), cac ng con lai la ng thi nghim (TN). V dong chun Tyrosine tong quan giua lng Tyrosine (M) va D (D D TN - D KC ). Xc nh lng Tyrosine trong dung dch nghin c!u: J&ng Bch h\0 ch)t yng ngh!R1 1 2 Dung dich Casein 1 (ml) 5 5 Dung dich TCA 5 (ml) 0 5 Dung dich enzyme mu (ml) 1 1 Lc du va giu o 35,50C trong 20 phut Dung dich TCA 5 (ml) 5 0 yn 30 phut, lc ly dich bn di Ly 2 ng nghim mi, sach, danh du A va B. Cho vao ng A 2,5ml dich lc ng nghim 1 va cho vao ng B 2,5 ml dich lc tu ng nghim 2. Thm vao mi ng 5 ml NaH 0,5N va 1,5ml thuc thu olin, lc manh, sau 10 phut, do D o bc song 660nm. Tinh D D TN D KC , dua vao d thi chun suy ra dc M Tyrosine. 1.D. Cch tHnh. 16 inh nghia don vi Anson: mt don vi Anson la lng enzyme ti thiu trong diu kin chun (35,5 0 C, pH 7,6.) thuy phn Casein trong 1 phut tao thanh san phm hoa tan trong TCA, phan ung vi thuc thu olin cho ta d hp thu D o bc song 660 nm tong ung vi 1M Tyrosine trong dong chun. Hd P (gCP) Vi: V : tng th tich hn hp trong ng nghim 1 hoc 2 (11ml) v : th tich dich lc dem phn tich (2,5 ml) t : thoi gian thuy phn (20 phut) m : khi lng mu enzyme dem xac dinh hoat tinh (g) L : d pha long mu enzyme M Tyrosine: Lng Tyrosine trong v (ml) suy ra tu dong chun. %. Oc @nh h/Gt tHnh ^n_$1^ z { A1$>0s^ w phng php <YLNiYLx %.1. Ng&$Qn t]c. Xac dinh lng tinh bt bi phn giai dua trn co so xac dinh muc d giam cong d mau cua hn hp phan ung vi dung dich od. %.%. <\0 ch)t. Dung dich NaCl 0,1 : hoa tan 0,1g NaCl trong nc thanh 100ml. Dung dich Sulosalicylic acid 20: hoa tan 20g Sulosacylic acid trong nc thanh 100ml. Dung dich od ( 2 ): hoa tan 1g od vao 5ml dung dich co chua 2g K, thm nc ct dn 100ml. Khi dung pha long dung dich nay 450 ln. Dung dich NaH 2 P 4 0,05M: hoa tan 1,9502g NaH 2 P 4 .2H 2 trong nc thanh 250ml. Dung dich NaHP 4 0,05M: hoa tan 0,8962g Na 2 HP 4. 12H 2 trong nc thanh 50 ml. 17 Dung dich dm phosphate 0,005M, pH 6,0: trn chung 87,7 ml dung dich NaH 2 P 4 0,05M, 12,3ml dung dich Na 2 HP 4 va 100ml nc ct. Dung dich tinh bt 1: hoa tan 1g tinh bt trong dung dich dm phosphate 0,05M, pH 6,0 thanh 100ml. Dung dich tinh bt chun 1: hoa tan 1g tinh bt trong nc ct thanh 100ml. Tu dung dich nay, chun bi cac dung dich co chua 2, 4, 6, 8, 10 mg tinh bt trong 1 ml. Lp d thi tiu chun: ly 0,1 ml dung dich d chun bi nh trn, thm 0,1 ml dung dich NaCl 0,1, 0,2 ml dung dich dm phosphate, 0,1 ml nc ct va 0,5 ml dung dich Sulosalicyic acid 20, lc du ri thm 9 ml dung dich od d pha long 450 ln. So mau o bc song 560nm. V d thi tiu chun, trn truc hoanh ghi s mg tinh bt, truc tung ghi hiu s dc dc cua mu co tinh bt so vi mu khng co tinh bt. %.;. Cch t!2n hnh. Cho vao ng nghim 1 ml dung dich tinh bt 1, 1 ml dung dich NaCl 0,1 va 2 ml dung dich dm phosphate 0,05M, pH 6,0. Lc du, d o 30 0 C trong vong 15 20 phut dung dich dat dn 30 0 C, thm vao hn hp 1ml dung dich enzyme d dat dn 30 0 C. Lc du va tip tuc giu o 30 0 C trong 30 phut. Ly ng nghim ra khoi tu m cho ngay vao 5 ml dung dich Sulosacylic acid 20 d lam ngung phan ung. Song song vi mu thi nghim, lam mu kim chung cung tong nh trn nhng cho dugn dich acid vao trc ri mi cho enzyme vao sau. Ly 1 ml cua mu thi nghim cung nh mu kim chung cho vao ng nghim, thm vao 9ml dung dich od d pha long 450 ln. Lc du ri so mau o bc song 560 nm. Ly hiu s dc dc trn may giua mu kim chung va thi nghim, di chiu vi dong cong tiu chun, tinh s mg tinh bt d bi phn giai. %.D. Cch tHnh. on vi enzyme u amylase (HdA): la lng enzyme u amylase ti thiu trong diu kin chun (30 0 C, pH 6,0) thuy phn 1 mg tinh bt tan trong thoi gian 30 phut. Hd A S mg tinh bt bi phn giai pha long (g CP). ;. Oc @nh h/Gt tHnh ^n_$1^ Uh$t0s^ w phng php "is#e $% &u''(ro)*+ ;.1. Ng&$Qn t]c. Khi cho phosphate tac dung vi ammonium molybdat s tao ra phosphomolybdat co mau vang. Khi khu phosphomolybdat, mau vang s chuyn thanh mau xanh molybdat. dm cua mau sc ty l vi ham lng phosphor trong mu. Phan ung dc minh hc theo phong trinh sau: 18 2(Mo 2 .4Mo 3 ) H 3 P 4 4H 2 (Mo 2 .4Mo 3 ) 2 .H 3 P 4. 4H 2 . Cac cht khu thong dc su dung la SnCl 2 , hydrazine, ascorbic acid, eS 4 , quinon, oxalate, sulit. Cac cht khu co th su dung don dc hay phi hp vi nhau. Vi du, phi hp giua sulit va quinon. ;.%. <\0 ch)t. Dung dich co cht: sodium phytat 0,2 (mv) trong dm sodium acetat 0,1M, pH 5: cn 1g sodium phytat pha trong 500ml sodium acetat 0,1M, dung acid acetic dm dc chinh v pH 5. Dung dich phosphor mu 0,01M: cn 0,136 KH 2 P 4 hoa tan vi nc thanh 100ml. Dung dich phosphor 500 nmolml: hut 5ml dung dich phosphor 0,01M, pha thanh 100ml Dung dich ammonium molybdat 1,5 (v) trong H 2 S 4 5,5 ( ky hiu dung dich a) Dung dich eS 4 5: cn 5g eS 4 hoa vi nc ct lanh thanh 100 ml ( ky hiu dung dich b). Pha trong diu kin lanh va dung lin sau khi pha (dung dich eS 4 phai trong sut, khng mau hoc co mau vang rt nhat, nu co mau vang dm thi phai pha lai). Dung dich thuc thu phosphate (dung trong ngay): hn hp dung dich a va b ty l a:b 4:1. Dung dich TCA (acid trichloro acetic) 5: cn 25g TCA hoa vi nc thanh 500 ml. ;.;. Cch t!2n hnh. Dng ng chun: Tin hanh pha dung dich phosphor vi nng d theo bang sau: yng ngh!R1 h 1 % ; D a Dung dich phosphor 500nmolml 0 1 2 3 4 5 Nc ct (ml) 5 4 3 2 1 0 Nng !hos!ho (n"o#$"#) 0 100 200 300 400 500 Thuc thu phosphate (ml) 5 5 5 5 5 5 Lc du d yn o nhit d phong (30 0 C), dem do mt d quang o bc song 700nm. Dung d thi biu din su bin thin cua mt d quang (D) theo nng d phosphor (nmolml) 19 Tin hanh phan ung: Cn m (g) ch phm enzyme nghin va hoa vi V (ml) nc ct, lc trn may lc 45 phut d enzyme hoan tan hoan toan vao nc, lc qua giy lc ta thu dc dich enzyme th. Xac dinh hoat tinh phytase trong dich enzyme nay. Thuc hin phan ung enzyme va phan ung mau nh sau: yng ngh!R1 Th thSt Th .h#ng Dung dich co cht phytat (ml) 2,0 2,0 Dung dich TCA 5 (ml) 0 2,5 Dung dich enzyme (ml) 0,5 0 Lc du d yn 39 0 C, trong 30 phut Dung dich TCA 5 (ml) 2,5 0 Dung dich enzyme (ml) 0 0,5 Dung dich phosphate (ml) 5 5 Lc du, d yn 5 phut do mt d quang o bc song 700nm ;.D. Cch tHnh. ?nh ngh|0 h/Gt tHnh ph$t0s^} 1 don vi hoat tinh (VHT) dc dinh nghia la lng enzyme giai phong 1nmol phosphor v co trong 1 phut tu sodium phytat o 39 0 C, pH 5.
HdpH (gCP) a: s mol phosphor suy ra tu dong chun V: th tich dung dich phosphor trc khi cho thuc thu (5ml) d: d pha long enzyme v: th tich enzyme cho vao phan ung (0,5 ml) m: khi lng ch phm enzyme phn tich t : thoi gian phan ung (phut) D. Oc @nh tEng v! .h&3n h!2& .hH wphng php ,- #hun l.c*. D.1. Ng&$Qn t]c. m s khun lac mc trn mi trong cao thit peptone tu mt lng mu xac dinh trn co so xem mi khun lac hinh thanh tu mt t bao duy nht. D.%. <\0 ch)t v 1#! t~ng. 20 Dung dich nc mui sinh ly (NaCl 0,85): hoa tan 0,85g NaCl trong nc ct thanh 100ml ri phn vao mi ng nghim 9 ml. Khu trung 1atm trong 30 phut. Mi trong cao thit peptone: Cao thit: 3g Peptone: 10g NaCl: 5g Agar: 20g Nc ct vua du: 1000ml pH: 6,0 Khu trung o 1atm trong 30 phut D.;. Cch t!2n hnh. Pha long mu cn xac dinh bng dung dich nc mui sinh ly. Cho vao dia petri (d khu trung) 1ml dung dich mu co d pha long xac dinh. vao dia petri 15 20ml mi trong d dun chay va d ngui dn 45 50 0 C. Xoay nh theo chiu ngc chiu kim dng h d dung dich mu dc trn du trong dung dich cy, d dng tu tu nhin. Thuc hin cho 2 dung dich mu co d pha long cac bc 10 tip theo. t o tu m 37 0 C trong 72 gio. m tt ca cac khun lac d mc trn dia petri. Ghi nhn cac nng d pha long co s khun lac tu 30 dn 300 khun lac trn dia. Nhn s khun lac dm dc trn dia petri vi h s pha long, tinh gia tri trung binh s khun lac tu 1ml hoc tu 1g mu. Cc th!2t + s'n (&)t chHnh I6n h9t +5! [$ t# n 21 [$ tn [$ s)$ TlL LLMU T<A[ i<N 1. Trn Linh Thuc (2001), Thuc tp Vi Sinh Nm 4, Khoa Sinh Hc, ai Hc Khoa Hc Tu Nhin Tp. H Chi Minh 2. Th.Nguyn Manh Khai (2006), Giao Trinh Bao Quan Nng San, NXB Giao Duc. 3. Nguyn Thi Thao va Hoang Thi Lan (2006), San Xut Enzyme Dung Trong Thuc n Gia Suc Tai Cng Ty TNHH Gia Tong, Bao Cao Thuc Tp, Trong ai Hc Cng Nghip Tp.H Chi Minh. 22