AMINOACIZII

CURSUL 1
Definiia i clasificarea aminoacizilor

Definiie: Aminoacizii sunt compui organici cu funciune
mixt; coninnd o grupare carboxilic (-COOH) i o
grupare amino (-NH
2
) legate la acelai atom de carbon,
numit C

.


Numrul de aminoacizi din natur este mare, dintre
acetia numai 20 sunt codificai genetic i astfel pot fi
prezeni n structura proteinelor din organismul uman.

Definiia i clasificarea aminoacizilor
Clasificare: Sunt mai multe criterii de clasificare a
aminoacizilor, cea mai uzual clasificare fiind n funcie de
natura radicalilor ataai de atomul de carbon - C

.

1. Aminoacizii codificai genetic
1.2. Aminoacizii cu radicali polari
1.2.2. Aminoacizii
nencrcai
electriv
1.2.1. Aminoacizii
ncrcai electric
pozitiv i negativ
1.1. Aminoacizii
cu radicali
nepolari
Noiuni
generale
AMINOACID NEESENIAL
aminoacidul care este sintetizat de
ctre organism n cantitate suficient
necesitilor biologice

AMINOACID ESENIAL
aminoacidul nu poate fi sintetizat de
ctre organism, i astfel aportul
alimentar este esenial pentru organism

AMINOACID SEMIESENIAL
aminoacidul este sintetizat de ctre
organism dar nu n cantitate suficient
Noiuni
generale
ACTIVITATEA OPTIC
este proprietatea unei substane de a
rotii planul luminii plan polarizate atunci
cnd este strbtut de ctre aceasta






Noiuni generale
activitate optic prezint
toi compuii capabili s
existe n 2 forme
(enantiomeri) care nu sunt
suprapozabile cu imaginea
lor n oglind, compui
chiralici

compuii chirali nu au n
structur nici un element
de simetrie

AMINOACIZII CODIFICAI
GENETIC
1.1. Aminoacizii cu radicali nepolari
sau hidrofobi
1.1. Aminoacizii cu radicali nepolari sau
hidrofobi

1.1.1. GLICINA, Gly

este un aminoacid
neesenial, optic inactiv,
avnd cel mai mic radical
(un atom de hidrogen)
este un neurotransmitor
inhibitor
particip la sinteza
bazelor purinice (adenina,
guanina) i a
componentei prostetice a
cromoproteinelor (hemul)

este tot al 3-lea aminoacid
din structura colagenului
particip la detoxifierea
hepatic prin conjugarea
acizilor biliari primari
formula chimic:
1.1. Aminoacizii cu radicali nepolari sau
hidrofobi
1.1.2. ALANINA, Ala
este un aminoacid
neesenial, optic activ
este substrat pentru
ALT/GPT (alanin
aminotransferaza/
glutamic-piruvic-
transaminaza) enzime
participante n etapa
inial a catabolismului
proteic
astfel, poate face legtura
dintre metabolismul
proteic i metabolismul
glucidic
formula chimic:

1.1. Aminoacizii cu radicali nepolari sau
hidrofobi
1.1.3. VALINA, Val
este un aminoacid
esenial, optic activ
este prezent n cantitate
mai mare n
ovalalbumine, cazein,
globuline serice
deficiena de metabolizare
determin afeciunea
numit boala urinii cu
miros de arar

nlocuirea restului de Glu
din poziia 8 a lanului al
Hb, lanul fiind normal,
cu un rest de Val conduce
la apariia HbS
HbS polimerizeaz
formnd polideoxi-HbS,
ce are ca rezultat apariia
eritrocitelor n form de
secer anemia
falciform
1.1. Aminoacizii cu radicali nepolari sau
hidrofobi
1.1.4. LEUCINA, Leu
este un aminoacid
esenial, optic activ
este un aminoacid
cetoformator; degradarea
scheletului hidrocarbonat
al Leu conduce la
formarea acetil-CoA,
substrat n sinteza corpilor
cetonici
este aditiv alimentar (E
641)
formula chimic:


1.1. Aminoacizii cu radicali nepolari sau
hidrofobi
1.1.5. IZOLEUCINA, Ile

este un aminoacid
esenial, prezint 2 centre
chirale
deficitul genetic n
metabolismul Leu i a Ile
determin boala urinii cu
miros de arar

formula chimic:


1.1. Aminoacizii cu radicali nepolari sau
hidrofobi
1.1.6. METIONINA, Met
este un aminoacid
esenial, optic activ
este donorul gruprii metil
n cadrul reaciilor de
transaminare ( exp.:
noradrenalinei primind o
grupare metil de la SAM
se transform n
adrenalin)



SAM este un derivat al
AMP, avnd caracter
macroergic ceea ce i
confer capacitatea de
metilare a unor compui
formula chimic:


1.1. Aminoacizii cu radicali nepolari sau
hidrofobi
1.1.7. PROLINA,Pro
este un aminoacid
neesenial
este singurul aminoacid
cu gruparea amino
secundar
aminele sunt clasificate n
funcie de gradul de
substituire a NH
3
n
primare, secundare,
teriare i cuaternare
are o structur rigid ceea
ce limiteaz rotirea liber
a nucleului n jurul
legturilor peptidice la
care particip i astfel
influennd plierea catenei
formula chimic:


1.1. Aminoacizii cu radicali nepolari sau
hidrofobi
1.1.8. FENILALANINA, Phe

este un aminoacid
esenial
este precursorul tirozinei,
aceasta putnd fi
convertit n dopamin,
noradrenalin i
adrenalin

formula chimic:

1.1. Aminoacizii cu radicali nepolari sau
hidrofobi
1.1.9. TRIPTOFAN, Trp

este un aminoacid
esenial, optic activ
este precursorul
serotoninei i al
melatoninei

formula chimic:


AMINOACIZII CODIFICAI
GENETIC
1.2. Aminoacizii cu radicali polari
1.2.1. Aminoacizii ncrcai electric
pozitiv i negativ
1.2.2. Aminoacizii nencrcai electriv
1.2.1. Aminoacizii cu radicali polari
ncrcai electric
1.2.1.1. ACIDUL ASPARTIC,
este un aminoacid
neesenial ncrcat
electric negativ, optic activ
este substrat pentru
AST/GOT (aspartat
aminotransferaza/
glutamic-oxalacetic
transaminaza)
este un neurotransmitor
excitator
Asp
particip la sinteza
bazelor purinice (adenina)
i pirimidinice (citozina,
timina i uracil)
este donorul uneia dintre
cele 2 grupri amino ale
ureei
formula chimic:


1.2.1. Aminoacizii cu radicali polari
ncrcai electric
1.2.1.2. ACIDUL GLUTAMIC,
este un aminoacid
neesenial ncrcat
electric negativ
este colectorul gruprilor
amino din aminoacizi,
facilitnd astfel iniierea
catabolismului acestora
este un neurotransmitor
excitator

Glu
formula chimic:

1.2.1. Aminoacizii cu radicali polari
ncrcai electric
1.2.1.3. LIZINA, Lys
este un aminoacid esenial
ncrcat pozitiv
oxidarea Lys, alturi de HO-
Lys, presupune
transformarea gruprii
amino n grupare
carbonilic, astfel existnd
posibilitatea condensrii lor
cu formarea de legturi
intercatenare cu importan
n stabilitatea colagenului


unele resturile de Lys din
structura enzimelor pot
lega coenzima acestora,
facilitnd desfurarea
reaciilor chimice
formula chimic:
1.2.1. Aminoacizii cu radicali polari
ncrcai electric
1.2.1.4. HISTIDINA, His
este un aminoacid
semiesenial, ncrcat
pozitiv
proteinele ce conin cantiti
mari de resturi de His, prin
prezena gruparilor imidazol,
constituie sisteme tampon la
pH fiziologic
prin decarboxilare conduce
la formarea histaminei,
implicat n procesele
alergice
2 dintre resturile de His
din structura Hb i
conferindu-i acestea
funcia de transport al O
2
formula chimic:

1.2.1. Aminoacizii cu radicali polari
ncrcai electric
1.2.1.5. ARGININA, Arg

este un aminoacid
semiesenial, ncrcat
pozitiv
este intermediar al
metabolismul azotului,
prin hidroliza sa
obinndu-se ornitina i
ureea


formula chimic:


1.2.2. Aminoacizii cu radicali polari
nencrcai electric
1.2.2.1. SERINA, Ser
este un aminoacid
neesenial
aparine centrului activ al
serin-enzimelor
(proteazele digestive,
tripsina, chimotripsina,
elastaza, au n comun
triada catalitic: His
57
-
Asp
102
-Ser
195
)
particip la reglarea
activitii enzimatice prin
defosforilare/fosforilare (n
aceast situaie Ser nu
aparine centrului activ)
formula chimic:

1.2.2. Aminoacizii cu radicali polari
nencrcai electric
1.2.2.2. TREONINA, Thr
este un aminoacid
esenial, prezint 2 atomi
de C asimetrici
este omologul superior al
serinei
apare la nivelul centrului
activ al treonin enzimelor
prin intermediul Thr se
poate ataa componenta
prostetic (oligozaharid) a
glicoproteinelor O-legate
formula chimic:


1.2.2. Aminoacizii cu radicali polari
nencrcai electric
1.2.2.3. TIROZINA, Tyr

este un aminoacid
neesenial, optic activ
este precursorul
catecolaminelor,
hormonilor tiroidieni i
melaninelor

formula chimic:

1.2.2. Aminoacizii cu radicali polari
nencrcai electric
1.2.2.4. CISTEINA, Cys
este un aminoacid
neesenial, optic activ
prin oxidarea blnd a
resturilor de cistein caten
polipeptidic conduce la
formarea legturilor
bisulfurice, acestea avnd
rolul de a o stabiliza
intr n structura unui peptid
cu funcie biologic
deosebit, glutationul
formula chimic:

1.2.2. Aminoacizii cu radicali polari
nencrcai electric
1.2.2.5. ASPARAGINA, Asn
este un aminoacid
neesenial
este amida acidului
aspartic
prin intermediul Asn se
poate ataa componenta
prostetic (oligozaharid) a
glicoproteinelor N-legate

formula chimic:

1.2.2. Aminoacizii cu radicali polari
nencrcai electric
1.2.2.6. GLUTAMINA,Gln
este un aminoacid
neesenial
este forma netoxic de
transport a NH
3
de la
celulele care folosesc
aminoacizii ca surs de
energie, la ficat sediul
ureogenezei
particip la sinteza
bazelor azotate purinice
formula chimic:


AMINOACIZII
NECODIFICAI GENETIC
2.1. Aminoacizii necodificai genetic
dar care intr n structura proteinelor
2.2. Aminoacizii necodificai genetic i
care nu intr n structura proteinelor
2.1. Aminoacizii necodificai genetic dar
care intr n structura proteinelor
numeroase proteine sunt sintetizate sub form de
molecule inactive din punct de vedere funcional

proteinele, att cele cu funcie enzimatic, ct i cele cu
funcie structural, pot fi activate sau inactivate prin
ataarea covalent a unei grupri funcionale:
hidroxilarea resturilor de prolin i lizin din structura
colagenului
cofactor pentru hidroxilaze este vitamina c
n deficiena de vitamin C poate s apar mobilizarea
dinilor n alveolele dentare, sngerri ale gingiilor, iar ca
form sever - scorbutul
2.1. Aminoacizii necodificai genetic dar
care intr n structura proteinelor
2.1.1. HIDROXIPROLINA
confer stabilitate termic
colagenului
prezena unui numr
mare de resturi de
hidroxiprolin n structura
colagenului face ca
temperatura la care din
structura acestuia este
denaturat s fie de 57C

formula chimic:

2.1. Aminoacizii necodificai genetic dar
care intr n structura proteinelor
2.1.2. HIDROXILIZINA
influeneaz rezisten
mecanic colagenului prin
legturile ncruciate
intercatenare
unele resturi de Lys se
transform sub aciunea
lizil oxidazei n allizin,
acestea se pot condensa
crotonic rezultnd legturi
intercatenare
5-HO-Lys poate constitui
locul de legare a unor
fragmente glucidice de
structuri proteice,
rezultnd glicoproteine
(exp.: colagenul)
formula chimic:

2.1. Aminoacizii necodificai genetic dar
care intr n structura proteinelor

proteinele pot fi activate prin ataarea covalent a unei
grupri funcionale carboxilice:

carboxilarea: gruprile carboxil ataate resturilor de
glutamat, printr-o carboxilare dependent de vitamina K,
determin formarea de -carboxi-glutamat
resturile Gla sunt eseniale pentru activitatea multor
proteine implicate n coagularea sngelui.

2.1. Aminoacizii necodificai genetic dar
care intr n structura proteinelor
2.1.3. ACID -CARBOXI
GLUTAMIC, Gla
2.1.4. N-FORMILMETIONINA
constituie captul
N-terminal al proteinelor
la procariote
formula chimic:


formula chimic:


2.2. Aminoacizii necodificai genetic i
care nu intr n structura proteinelor
2.2.1. ALANINA
intr n structura acidului
pantotenic, coenzimei A
transportori de grupri acil
n diferite ci metabolice
formula chimic:

Coenzima A
CH
2
NH
3
+
H C
COO
-
H
2.2. Aminoacizii necodificai genetic i
care nu intr n structura proteinelor
2.2.2. ACID AMINO BUTIRIC,
este un neurotransmitor
inhibitor
se obine prin
decarboxilarea Glu
din punct de vedere
medical deficitul de GABA
este uneori asociat cu
crizele de epilepsie
GABA
formula chimic:


2.2. Aminoacizii necodificai genetic i
care nu intr n structura proteinelor
2.2.3. HOMOCISTEINA
este un marker de risc
pentru ateroscleroz
este omologul superior al
cisteinei
poate constitui un
intermediar al
metabolismului
aminoacizilor cu sulf
formula chimic:


2.2. Aminoacizii necodificai genetic i
care nu intr n structura proteinelor
2.2.4. HOMOSERINA

este omologul superior al
serinei
este un intermediar al
biosintezei a trei
aminoacizi eseniali:
metionin, treonin i
izoleucin
formula chimic:


2.2. Aminoacizii necodificai genetic i care nu
intr n structura proteinelor
2.2.5. ORNITINA
este omologul inferior al
lizinei
este intermediar al
biosintezei ureei,
condensarea sa cu
carbamoil fosfatul iniiind
desfurarea ciclul
ureogenetic
formula chimic:


2.2. Aminoacizii necodificai genetic i care nu
intr n structura proteinelor
2.2.6. ACID PARA AMINO BENZOIC, PABA sau VITAMINA B
9
intr n structura acidului
folic
formula chimic:



Inel
pteridinic
PABA
Acid
glutamic
Acid folic
2.2. Aminoacizii necodificai genetic i care nu
intr n structura proteinelor
2.2.7. 3,5,3,5-TETRAIODTIRONINA, TIROXINA
este hormonul tiroidian T
4
formula chimic:


cteva dintre efecte biologice:
1. asigur un echilibru ntre
carabolismul i anabolismul
proteic
2. crete concentraia glucozei
prin creterea absorbiei
intestinale, intensificarea
GNG
3. intensific lipoliza
4. are rol major n
intensificarea metabolismului
avnd ca rezultat activarea
oxidrii biologice


PROPRITILE AMINOACIZILOR
1. Proprieti optice
2. Proprieti acido-bazice
3. Proprieti chimice
3.1. proprietile chimice ale gruprii carboxil
3.2. proprietile chimice ale gruprii amino
3.3. proprietile chimice ale radicalilor
1. Proprietile optice ale aminoacizilor
ENANTIOMERIA
este tipul de stereoizomerie caracteristic substanelor
care prezint activitate optic, i anume aceea de de a
roti planul luminii plan polarizate (radiaiei
electromagnetice)

1. Proprietile optice ale aminoacizilor
ENANTIOMERIA
radiaia electromagnetic nepolarizat are o infinitate de
plane de oscilaie a vectorului electric E



lumina plan polarizat are proprietatea de a se propaga n
spaiu prin oscilaii ale vectorului cmp electric ntr-un
singur plan numit planul de polarizare


1. Proprietile optice ale aminoacizilor
ENANTIOMERIA
substanele n stare de agregare lichid sau soluiile
substanelor solid, care rotesc n sens orar planul luminii
plan polarizate se numesc dextrogire (notate "+)





substanele n stare de agregare lichid sau soluiile
substanelor solid, care rotesc n sens antiorar planul
luminii plan polarizate se numesc levogire (notate ")

rotire n
sens
orar/+
rotire n
sens
antiorar/

2. Proprietile acido-bazice ale aminoacizilor
aminoacizii se gsesc n soluiile apoase neutre i
cristalizeaz din aceste soluii ca ioni dipolari sau amfiioni
H
2
NCH(R)COOH H
3
N
+
CH(R)COO
-


amfionii pot aciona att ca baze (acceptor de proton) ct
i ca acizi (donor de proton)
H
3
N
+
CH(R)COO
-


H
3
N
+
CH(R)COOH



H
3
N
+
CH(R)COO
-
H
2
NCH(R)COO
-
+ H
+

H
+
amfiion cation
amfiion anion
2. Proprietile acido-bazice ale aminoacizilor


n soluia unui acid monoamino-monocarboxilic, n funcie
de pH pot exista 3 specii ionice, nici una neionic:

H
3
N
+
CH(R)COOH - cation
H
3
N
+
CH(R)COO
-
- amfiion
H
2
NCH(R)COO
-
- anion


2. Proprietile acido-bazice ale aminoacizilor
Curba de titrare a unui litru de soluie de Gly 1M cu NaOH

pH-ul soluiei de glicin 1M este adus la pH = 1 prin
adugarea unui acid tare (HCl)


la pH acid, un aminoacid monoamino-monocarboxilic
este n form complet protonat (cation), acid bifazic, care
poate ceda 2 protoni n timpul titrrii sale cu o baz:

1. H
3
N
+
CH
2
COOH H
3
N
+
CH
2
COO
-
+ H
+
2. H
3
N
+
CH
2
COO
-
H
2
NCH
2
COO
-
+ H
+


Curba de titrare a
unui litru de soluie
de Gly 1M cu
NaOH
1. H
3
N
+
CH
2
COOH
H
3
N
+
CH
2
COO
-
+ H
+







2. H
3
N
+
CH
2
COO
-

H
2
NCH
2
COO
-
+ H
+


2. Proprietile acido-bazice ale aminoacizilor
Curba de titrare a unui litru de soluie de Gly 1M cu NaOH
la pH = 6,02 exist un punct de inflexiune ntre cele 2
trepte ale curbei de titrare a soluiei de glicin, unde
molecula de Gly nu prezint sarcin electric net i nu
migreaz n cmp electric (proprietate folosit pentru
separarea aminoacizilor)

pH = 6,02 este pH izoelectric reprezentnd media
aritmetic a pK
C
1
i pK
N
2

soluia de glicin are capaciti maxime de tamponare la
pH = 2,34 i la pH = 9,69


3. Propritile chimice
3.1. Proprietile chimice ale gruprii carboxil

gruprile carboxil ale aminoacizilor particip la reacii
chimice ce au ca rezultat formarea de derivai ai acizilor
organici: amide, esteri, halogenuri acide, anhidride


3. Propritile chimice
3.1. Proprietile chimice ale gruprii carboxil

Reacia de decarboxilare a aminoacizilor are ca rezultat
obinerea unor substane, amine biogene, care n
majoritatea cazurilor are importante proprieti biologice:
H
2
NCH(R)COOH RCH
2
NH
2
+ CO
2


exemple de amine biogene:
GABA acidul aminobutiric se obine prin
decarboxilarea Glu
HISTAMINA rezult prin decarboxilarea histidinei
ETANOL AMINA este obinut prin decarboxilarea
serinei, avnd importan la sinteza glicerofosfolipidelor


3. Propritile chimice
3.1. Proprietile chimice ale gruprii amino

Reacia de condensare a aminoacizilor cu formaldehida

st la baza METODEI SORENSEN de dozare a gruprilor
carboxil prin titrare cu NaOH

are ca rezultat formarea de baze Schiff, compui avnd
caracter acid

reacia chimic:
H
2
N-CH(R)-COOH + CH
2
O CH
2
= N-CH(R)-COOH + H
2
O


3. Propritile chimice
3.1. Proprietile chimice ale gruprii amino

Reacia de alchilare
se folosesc ca ageni de metilare iodura sau sulfatul de
metil

exemple:
monometilarea glicinei are ca rezultat obinerea de
SARCOZIN
metilarea pn la sruri cuaternare de amoniu produce
BETAINE

3. Propritile chimice
3.1. Proprietile chimice ale gruprii amino


Reacia de acilare

se folosesc ca ageni de acilare clorurile acide,
anhidridele sau clorocarbonaii de alchil

urmrete protejarea gruprii amino din structura
aminoacizilor de aciunea unor reactani, produii de
reacie rezultai ar avea ca urmare modificarea
propritilor chimice ale acestora


3. Propritile chimice
3.1. Proprietile chimice ale gruprii amino

Reacia cu ninhidrina

este utilizat pentru dozarea unor cantiti mici
de aminoacizi
la cald, un aminoacid reacioneaz cu 2 molecule de
ninhidrin i rezult un compus intens colorat
aminoacizii i peptidele cu grupri amino libere, n urma
interaciunii cu ninhidrina, conduce la apariia unei
coloraii albastru-violet, excepie fcnd Pro i HO-Pro
este folosit n criminalistic pentru identificarea
amprentelor digitale
Reacia
aminoacizilor
cu ninhidrin

3. Propritile chimice
3.1. Proprietile chimice ale gruprii amino

Reaciile de derivatizare

Reacia cu 2,4 dinitro-fluor benzen (Reactivul Sanger)
a fost folosit pentru prima determinare a ordinei de legare a
aminoacizilor din structura insulinei
reacia chimic:
C
6
H
3
(NO
2
)
2
F + H
2
N-CH(R)-COOH C
6
H
3
(NO
2
)
2
NH-CH(R)COOH + HF

Reacia cu clorula de dabsyl
clorura de dabsyl a nlocuit reactivul Sanger n cadrul analizei
polipeptidelor i aminoacizilor deoarece rerivaii prezint o
intens fluorescen


3. Propritile chimice
3.1. Proprietile chimice ale gruprii amino




Reacia cu fenilizotiocianat
(Reactivul Edman)
este cel mai folosit reactiv
pentru determinarea
structurii primare a
proteinelor


SEPARAREA AMINOACIZILOR
1. Cromatografie pe hrtie
=> cromatografie pe hrtie bidimensional
2. Cromatografie de schimb ioni
3. Cromatografie de afinitate
4. Electroforeza
5. Cromatografie lichid de mare presiune (HPLC)
Separarea aminoacizilor
1. Cromatografie pe hrtie - definiie

este o cromatografie de reparie, n care coloana
coninnd silicagel sau amidon este nlocuit cu o hrtie
de filtru

este o tehnic de laborator de separare a unui amestec
de aminoacizi, i nu numai, folosind afinitatea specific a
componentele pentru faza mobil i faza staionar
Separarea aminoacizilor
1. Cromatografie pe hrtie
Cromatografie
pe hrtie
bidimensional
Separarea aminoacizilor
2. Cromatografie de schimb ionic - definiie
este o metod de separare a unui amestec de aminoacizi
pe baza propritilor acido-bazice ale acestora

pentru aceast tehinic de separare este nevoie de o
coloan umplut cu granulele unei rini sintetice avnd
ataate grupri ncrcate electric pozitiv sau negativ:
schimbtori de ioni cationici (CATIONIT)
conine grupri COO
-
, -SO
3
-

schimbtori de ioni anionici (ANIONIT)
conine grupri NH
3
+
Separarea aminoacizilor
2. Cromatografie de schimb ionic
Separarea aminoacizilor
3. Cromatografie de afinitate definiie


este o metod de separare a unui amestec de aminoacizii
avnd la baz mrimea acestora

folosete o coloan umplut cu granule ce prezint
anumite situsiri de fixare pentru aminoacizii avnd
anumit dimensiune, astfel ei pot fi reinui pe coloan iar
ceilali vor strbate coloana

Separarea aminoacizilor
3. Cromatografie de afinitate
Separarea aminoacizilor
4. Electroforeza definiie


este o metod de separare a amestecurilor de aminoacizi
avnd la baz proprietatea acestora de a migra ntr-un
cmp electric

datorit pK-urilor diferite, aminoacizii migreaz n direcii
diferite i cu viteze diferite, n funcie de pH-ul sistemului
tampon i de tensiunea aplicat




Separarea aminoacizilor
4. Electroforeza
Separarea aminoacizilor
5. HPLC definiie

HPLC este prescurtarea de la High Performance Liquid
Chromatography ( Cromatografia lichid de nalt
performan)


HPLC folosete o coloan ncrcat cu un material inert,
iar la suprafaa acestuia se gasete adsorbit un lichid care
este faza staionar, o pomp ce asigur fluxul fazei
mobile prin coloan i un detector care precizeaz
factorii de retenie ai aminoacizilor
Separarea aminoacizilor
5. HPLC