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Estructura
La forma ms simple de incubadora es la de una caja isotrmica con un sistema
de calefaccin y termostato ajustable, que por lo general se regula con una
temperatura entre 60 y 65 C (de 140 a 150 F), aunque algunos modelos pueden
regularse a mayores temperaturas (generalmente menor de 100 C). La
temperatura ms utilizada, tanto para cultivo de bacterias como de E. Coli, de uso
frecuente, as como de clulas de mamferos es de aproximadamente 37 C, ya
que estos organismos se desarrollan bien en esas condiciones. Para otros
organismos utilizados en los experimentos biolgicos, como la levadura
Saccharomyces cerevisiae, para la cual es ptima una temperatura de crecimiento
de 30 C.
La mayora de las incubadoras de laboratorio tambin poseen la posibilidad de
bajar la temperatura (a travs de la refrigeracin), o la capacidad de controlar los
niveles de humedad o de CO2. Esto es importante en el cultivo de clulas de
mamferos, donde la humedad relativa es normalmente es del 95% y se consigue
un pH ligeramente cido manteniendo un nivel de CO2 del 5%.
La mayora de las incubadoras incluyen un cronmetro, y algunas tambin pueden
ser programadas para realizar un ciclo a travs de diferentes temperaturas,
diferentes niveles de humedad, etc. Las incubadoras pueden variar en tamao
desde una mesa a unidades del tamao de una habitacin pequea.
Hay maneras de sustituir una incubadora, cuando no est disponible. El famoso
cientfico Louis Pasteur utiliz como incubadora un pequeo hueco debajo de la
escalera.
La temperatura mxima para la esterilizacin es 200 C.
Tipos de incubadora:
INCUBADORA SECA: Cuando no disponemos
de un recinto cuya temperatura asegure el
crecimiento celular, es necesario adquirir una
incubadora seca equivalente. Incluso con una
habitacin caliente, a veces es conveniente
tener una incubadora para tripsinizacin. La
incubadora debe tener un tamao adecuado,
unos 50-200 L por usuario, y debe tener
circulacin de aire forzado, control de
celulares.
habitacin caliente, algunos recipientes, por ejemplo, las placas de Petri o las
placas de pocillos mltiples, requieren de un ambiente controlado con una
humedad alta y una presin parcial de CO2 elevada. La manera ms barata de
controlar la fase gaseosa es colocar los cultivos en una caja de plstico o en una
cmara (Bellco, MP Biomedicals), aadir al recipiente la mezcla correcta de CO2 y
luego sellarlo. Si la incubadora no est totalmente llena de placas, incluir un
recipiente abierto con agua permite aumentar la humedad dentro de la cmara.
Las incubadoras de CO2 son ms caras, pero su facilidad de uso y un control
superior de la presin de CO2 y de la temperatura justifican el gasto (los frascos
anaerbicos y los desecadores tardan ms en calentarse).Una atmsfera
controlada se logra mediante el uso de una bandeja de humidificacin y el control
de la presin de CO2 con un dispositivo de monitorizacin del CO2, que extrae el
aire de la incubadora en una cmara de muestra, determina la concentracin de
CO2, e inyecta CO2 puro en la incubadora para compensar cualquier deficiencia.
El aire circula alrededor de la incubadora por conveccin natural o mediante el uso
de un ventilador para mantener uniformes tanto el nivel de CO2 como la
temperatura. Se afirma que las incubadoras con ventiladores se recuperan ms
rpido despus de la apertura, a pesar de que las incubadoras de conveccin
natural tambin consiguen una recuperacin rpida y reducen considerablemente
los riesgos de contaminacin.Las incubadoras de paredes calientes secas tambin
sufren una menor contaminacin por hongos en las paredes, porque las paredes
tienden a permanecer secas, incluso con una humedad relativamente alta.
Algunos controladores de CO2 deben ser ajustados cada pocos meses, pero el
uso de hilo de oro o detectores de infrarrojos minimizan las desviaciones y muchos
modelos restablecen el cero del detector de CO2 de forma automtica. El tamao
de la incubadora requerida depender del uso previsto, tanto el nmero de
personas que lo usan como los tipos de cultivos.
Un incubador de este tipo dispone de:
CMARAS DE CULTIVO
BAO DE AGUA
Se emplea toda vez que se deba mantener la temperatura dentro de un
margen de tolerancia de + 0,2C. Se carga con agua destilada para evitar
depsitos calcreos, excepto los que estn conectados al grifo de agua
corriente porque tienen un dispositivo que mantiene el nivel constante. La
tapa tiene que estar bien ajustada para impedir una excesiva evaporacin.
Si no se utilizar en dos semanas, se drena el agua, se lava y seca el
interior. Se debe inspeccionar con frecuencia para impedir o retrasar los
daos causados por la corrosin.
La temperatura se suele controlar despus de un perodo de estabilizacin
de 3 horas, con un termmetro de inmersin total cuyo intervalo de
graduacin es de 0,1C. Generalmente se utiliza a 44,5 - 45,5C, rango en
el cual un cultivo deEscherichia coli incubado durante 24 hs produce gas y
el de Enterobacter aerogenes no lo forma en el medio EC (triptona 20g,
lactosa 5 g, sales biliares 1,5 g, fosfato dipotsico 4 g, fosfato
monopotsico 1,5 g, cloruro de sodio 5 g) .
REFRIGERADOR Y CONGELADORA
Los lentes se deben limpiar, despus de usarlos, con papel para lentes o
algodn muy suave.
-Conclusiones:
http://www.unsa.edu.ar/biblio/repositorio/malim2007/6%20calidad%20analitica.pdf