CÔNG TY TNHH CNSH KHOA THƯƠNG

Số 17, Đường số 4, KDC Gia Hòa, Ấp 5

Phong Phú, Bình Chánh, TP. Hồ Chí Minh
ĐT: (08)37612606 / Fax: (08)37612603

ĐỀ TÀI TÌM HIỂU KỸ THUẬT SHPT TRONG CHẨN ĐOÁN

Bộ phận: Nghiên cứu – Phát triển Ngày ban hành: 21/01/2010
Người soạn thảo: Nguyễn Thành Khôi Lần ban hành: 02
Thời gian báo cáo dự kiến: 15/03/2010

Đề tài 1:Tìm hiểu qui trình định lượng virus gây viêm gan B (HBV) trong huyết thanh bằng kỹ
thuật real-time PCR với mẫu dò Taqman. Ứng dụng trong chẩn đoán và điều trị viêm gan B cấp
và mãn tính.

Đề tài 2: Tìm hiểu qui trình định genotype của Human Papillomavirus bằng kỹ thuật reverse dot
blot và real-time PCR. So sánh ưu và nhược điểm của hai kỹ thuật.

Đề tài 3: Tìm hiểu việc ứng dụng kỹ thuật Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification
(MLPA) trong chẩn đoán các bất thường di truyền ở người.

Gợi ý nội dung trình bày:

Đề tài 1:
- Tổng quan sinh học và chu trình xâm nhiễm của HBV (tóm lược)
- Phương pháp ly trích DNA bằng phenol/chloroform
- Kỹ thuật real-time PCR định lượng:
o Nguyên lý chung, nguyên lý vận hành hệ thống máy, thành phần phản ứng
PCR
o Cách xây dựng đường chuẩn, cách phân tích kết quả, hệ số nhân
- Phác đồ chẩn đoán viêm gan B
- Đánh giá và theo dõi điều trị viêm gan B

Đề tài 2:
- Tổng quan sinh học và chu trình xâm nhiễm của HPV (tóm lược); genotype HPV
độc và lành
- Phương pháp ly trích DNA bằng phenol/chloroform
- Kỹ thuật reverse dot blot:
o PCR với mồi gắn biotin
o Chuẩn bị màng lai với probe cố định
o Quy trình: biến tính, lai, rữa và phát hiện
- Kỹ thuật real-time PCR:
 o Nguyên lý chung của multiplex real-time PCR định tính.
o Sử dụng mẫu dò Taqman đặc hiệu cho genotype / primer đặc hiệu cho
genotype trong phản ứng với SYBR Green
- So sánh ưu và nhược điểm của 2 kỹ thuật với nhau; cách khắc phục nhược điểm

Đề tài 3:
- Tổng quan về 1 bất thường di truyền ở người (aneuploidy, bệnh di truyền, ung
thư…)
- Phương pháp xử lý mẫu (nước ối, sinh thiết, dịch…) và tách chiết nucleic acid
tương ứng
- Kỹ thuật MLPA:
o Nguyên lý chung
o Cách thiết kế probe
o Quy trình MLPA: biến tính, lai, nối, PCR, điện di tự động
o Cách đọc kết quả
- Một số ứng dụng khác (ngoài loại bệnh đã trình bày)

Người soạn thảo

Nguyễn Thành Khôi