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TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 BAI 1: DINH LUGNG DUGNG KHU, DUGNG TONG BANG PHUGNG PHAP CHUAN DO OXY HOA KHU VGI FERRYCYANURE I. Nguyén tae: Khi cho ferrycyanure K,Fe(CN), phdin ting vél dudng kht, san phdm thu dude Id ferrocyanure. Dua vdo phan ting nay, ta cé thé suy ra lugng dung kh cé mat trong dung dich cn xde dinh. Viée chudn d6 duge tiSn hanh trong méi trudng kiém NaOH, khi dun néng véi chf th) xanh metylen (methylen blue). Phugng trinh phan ting: CH,OH-(CHOH),-CHO + K;Fe(CN), + 2NaOH —+ CH,OH-(CHOH),-COONa + Nak;Fe(CN), + HO Phuong phdp nay don gidn hdn phudng phdp ding dung dich kiém ctia sulfat déng do khéng tao tla va phan ting két thiic 16 rang. Két qua tinh todn khéng dua vdo phusng trinh ly thuyét, ma dting céng thie thuc nghiém. Dé chinh xde cia két qué phy thuée nhiéu yéu t6, nhung tinh tu tlén hanh va thao tée 14 quan trong nhdt. Tét cd monosacarit va mét sé oligosacarit la dung knw. Cac oligosacarit va polysacarit dé bi thtiy phan thanh monosacarit vi vay cé Hé Dai Hoc 1 TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 thé dinh lugng duge dudng kh trude va sau thy phan dé tinh ham lugng cda chung. Il, Hod chdit-dung cu: 1.Dung cu: Bép dién, kep, ludi amiang, néi cach thy Phéu, dng dong, binh dinh mufc, becher, erlen, burette, pipette 2. Héa chat: K:Fe(CN), 1% Budng glucoza 05% (w/v) NaOH 5%; 2.5N HCI 5% CCI,COOH 10% Methyl red 1% Methylen blue 0,04% Ml. Tin hanh: 1. Xd ly nguyén liéu: + Nguyén liéu khéng chia nhiéu tinh b6t hode Inulin Dung nuge néng trich ly duéng. Can 1-2g mau néu la nguyén ligu khé (dy, IG hode qué kh6) hode 5 - 10g néu la nguyén liéu tus! cé ham dm cao (rau, qué tual), Cho vao él sti nghién that nhé vdi bét thiy tinh hay cat sach va 30mL nude cét néng 70 - 80°C. Trich ly nhiéu lén bang nude néng. Chuyén lugng dich vo binh dinh muc, bé phén ba da trich hét dudng Hé Dai Hoc 2 TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 + Nguyén liu giau protein (mé déng vat, dau) Két tUa protein va cdc tap chét bang dung dich acid tricloacetic 10%, sau dé trung hda bang dung dich NaOH 5% vél chi thi methyl red (mau dé chuyén sang vang) Thém nuéc cat tdi vach dinh mtic, lec qua gidy lec vdo cdc hay binh khé. Nuéc qua lgc I@ dung dich dinh lugng duéng khu. + Nguy6n liéu chia nhiéu tinh b6t hay inulin (khoal lang, sén, khoai tay.) Trich ly duéng bang rugu 70 - 80°. Bun cach thy hén hgp trong binh c6 lp Sng sinh han khéng khi. Trong trudng hgp nay khéng can két ta protein vi lugng protein chuy&n vao dung dich khéng dang ké. + Nguyén ligu chia nhiéu acid hitu cd (ed chua, atta, chanh, khé,...) Trong qua trinh trich ly dudng, sacaroza c6 thé bj thy phan mét phdin do su cé mat ctia acid hdu cd c6 san trong nguyén liéu, do dé khi cn xde dinh riéng dudng kh va dudng sacaroza, phdi trung héa acid hau co bding dung dich NaOH 5% hay Na,CO, bdo héa: Cn chinh xdc khoding 10g nguyén ligu, nghién nhuyén nguyén ligu trong céi st! véi mét it nude cat. Nhé 3 giot chi thi metyl dé (methyl red) va cho tu tU tung giot NaOH 5% vao dén khi xudt hién mau héng nhat. Sau dé cho hén hgp vao binh dinh mic 100m! dé trich ly, Ide déu trong 10 phut, dinh mtc téi vach va dem lec 2. Dinh lugng duéng khit: - Sau khi loc, dy dung dich mau chtta dudng kht! , cho vao burette. - Cho vao binh nén 10m dung dich K3Fe(CN), 1% va 2,$mL dung dich NaOH 2,5N. Hé Dai Hoc 3 TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 - Bun s6i va chuén d6 ngay trén bép bang dung dich duéng khit td’ burette, cho ting giot mét, Ide manh. - Dung dich ban déu cé mau vang chanh cda ferrycyanure. Diém ding chudn dé xde dinh khi mau vang chanh bién mét, dung dich trong suét khéng mau trong khodng 30 gidy réi chuyén sang mau vang rém rat nhat cia ferrocyanure. Trong truéng hdp khé nhan diém chuyén mau, co thé kiém tra diém két thic bang cach nhé mét giot chi thi methylen blue va mé6t giot duéng thita ddu tién sé lam mat mau xanh cho biét phan tng da két thic. - Két qué ldn chudin 6 ddu tién chi c6 gid tri tham khdo cho Ién chudn d6 thit hal. Ldn nay, sau khi dun s6i dung dich ferycyanure, xd nhanh lugng duéng (theo két qué lén chudn dé tréc), chi dé Iai khodng dudi ImL dé chudn dé tiép fim chinh xac diém cuéi. - Két qua tinh toan chi sit dung td Ian chudn dé thi hai trd di. - Ldp Iai thi nghiém chudn dé 3 Ién. - Tinh két qué: Trong thi nghiém, Vk mL dung dich mu va Vg mL dung dich glucose 0,5% cling phén ting véi mét dung dich ferryeyanure é mdt néng dé xac dinh. Nhu vay, Vk mL dung dich mdu tudng tng véi Vg mL dung dich glucose 0,5% c6 (0,5 x Vg) / 100 g glucose. Luding duéng khd dud tinh bang céng thie: _05xVexV x100 100xVkxm Xk Trong d6 Hé Dai Hoc 4 TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 Xk - lugng duéng khu, g/100g hay g/100mL Vg - thé tich dung dich glucose 0,5% cho chudn dé, mL. Vk - thé tich dung dich dudng khtt cho chudn dé, mL V- thé tich binh dinh mtic, mL m - lugng mdu thi nghiém, g hode mL 3. Dinh lugng duéng téng: Dudng téng bao gém cdc gluxit hda tan trich ly duge trong nude. Cén chinh xde khodng 10g nguyén liéu, nghién nhuyén nguyén liéu trong céi st vdi mét it nude céit. Nhd 3 gigt chi thi metyl dé (methyl red) va cho tu tt tting git NaOH 5% vdo dén khi xudt hién mau héng nhat. Sau dé cho hén hgp véo binh dinh mule 100m! dé trich ly, Ide déu trong 10 phut, dinh mute tdi vach va dem lec. Lay chinh xde 50 mL dung dich mau cho véo binh tam gide 250mL . Thém 20mL dung dich HCI 5%, va dem dun cdch thiy hén h¢p trong 30 - 45 phut. Sau dé, lam ngudi nhanh va trung hoa hén hgp bang dung dich NaOH 2,5N hode dung dich Na,CO, bdo héa véi chi thi methyl red (dung dich tt! mau dé chuyén sang vaéng). Sau dé, cho véo binh dinh mute 250mL va dinh mu tdi vach: Tién hanh chudn dé tuong ty nhu dinh lugng dusng kh. Ham luging duéng téng dude tinh bang céng thie: 0,5xVg xVixV2x100 100xVix50xm Xt= Trong 6 Xt - ham lugng duéng téng, % Vg - thé tich dung dich glucoza 0,5% cho chudin dé, mL Hé Dai Hoc 5 TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 Vt - thé tich dung dich duéng tong cho chudn dé, mL V,- thé tich binh dinh mUic cla dung dich xae dinh dudng kht, mL Vp - thé tich binh dinh mtic cia dung dich xde dinh dudng téng, mL m - lugng mau cGn thinghiém, g hode mL 4, Dinh lugng glucose chudn 0,5%: tién hanh thi nghiém tudng tu déi vdi dung dich duéng chudn 16 dung dich glucose 0,5%. Thay lugng duéng khtt trén burette bang dung dich glucose chudn 0.5% va chudin dé tugng tu nhu dinh ludng dudng khw. Hé Dai Hoc 6 TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 BAI 2: DINH LUGNG NITO TONG BANG PHUONG PHAP MICRO-KJELDAHL Phuong phdp Micro - Kjeldahl thudng duge dung dé xde dinh téng lugng Nitd trong cdc phdm vat cé nguén géc visinh vat. I. Nguyén tac: Khi dét néng phdm vat dem phan tich vdi H,SO, dam dace, cde hyp chdt hdu co b oxy héa, Carbon va Hydro tao thanh CO, va H,0. Cén Nita sau khi duge gidi phéng ra duéi dang NH; két hgp vdi H,SO, tao thanh (NH,).80, tan trong dung dich. Budi NH, khdi dung dich bang NaOH déng thdi cat va thu NH, béing mét lugng du H,SO, 0.1N. dinh phan lugng H,SO, 0.1N cén Iai bang dung dich NaOH 0.1N chudn, qua dé tinh duge lugng Nito 6 trong méu nguyén ligu thi nghlém I. Dung cy thiét bi: May cét dam ban ty déng GERHARDT, Tu Hotte Binh Kjeldahl 50mL Ong dong 25mL Pipette 2mL; 10mL Erlen 600mL Binh dinh mttc 100mL Burette 25mL Hé Dai Hoc 7 TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 Becher 100mL; 250mL II. Héa chat: H,$O, dace, NaOH 40%, HCIO, tinh khiét Dung dich NaOH 0,1N dung dich chudn H,$O, 0,1N Phenolphtalein 1% IV. Cach tién hanh: 1. V6 od héa mau: Tién hanh trong tu Hote. Ldy mdu cho vao binh Kjeldahl. Tuy logi nguyén liéu nhiéu hay it chat dam, mdu rén can 0,2 dén 0,5g mdu léng Idy tu 2 dén 5mL (nuée mam Idy 2 mL, sta Ildy 5mL). Thém vao tt tl 10 mL H,SO, dam dae (tf trong 1,84). Bé tang nhanh qué trinh v6 cd héa (dét chay) cdn phdi cho thém chét xc tac. Tét nhat la ding 0,5 g hén hgp K,SO,: CuSO, : Se (100:10:1) C6 thé dung Se kim logi (0,05g) hode ding hén hop CuSO, : K,8O, (1:3) Hdn hdp xtc tac c6 tac dung tang nhiét dé séi, lam tang van toc qua trinh phan Ung. C6 thé dung xtc tac Ia axit Perchloric HCIO,, gidi phéng ©, cho phdn Ung Oxyhda. Sau khi thém cde chat xc tac, dun nhe hén hgp tranh sél trao, va cht dun manh khi hén hop da hodn todn chuyén sang dich Ing. Trong qua trinh dun thinh thodng Idc nhe, trang khéo Ié0 sao cho khéng cén mét vét den nado cia mau nguyén liéu thi nghiém chua bj phan huy sot Iai tran thanh binh. Bun cho tdi khi dung dich trong binh hodn toan trang 2. CGt dam: Tin hanh trong may cat dam ban ty déng GERHARDT cua Ditc. Chudn bi may cat dam: cdm dién, bat may, man hinh sé hién lén “H", chd cho dén khi man hinh hién |én "P”, may da sdn sang lam viéc. Hé Dai Hoc 8 TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 Chuyén todn bé dung dich mdu sau khi da v6 cd héa xong 6 binh Kjeldahl vao binh dinh mUfc 100ml (chu y: lic ndy trong binh Kjeldahl cén du 1 lugng H,SO, dam dae trong dung dich mau ctia qué tinh v6 co hoa nén phdi cho trude 1 it nude cat vao binh dinh muc trudc khi dé dung dich mau vdo), thém nude cét cho dén vach dinh muc, Luc nay nhiét 16a ra rét manh lam nude bay hai mét phan. Lam nguéi binh dinh muc va diéu chinh Iai mule nude dé tranh sai s6, sau dé dé ra erlen dé dé Ide tron dung dich mau déng déu. - Lay 10mL dung dich H,S0, 0.1N cho vao erlen 250ml, Iép vao may. Chu y nhing ngdp Sng vao dich long. - Ly véo 6ng phdn ving 10 mL dung dich thinghiém tu binh dinh muc. Ldp vao hé théng, chu y khéng Idp léch, khi sé thodt ra ngodi, mat mau - Khi hét théi gian cat dam, Idy erlen ra dem chudn dé dé xde dinh lugng H,SO, 01.N thtta. 3. Dinh phan (chudn dé): Léy erlen ra khdi may sau khi da trang nude céit dé Idy hét mau bam trén Sng. Cho vo 10 gigt chi thi Phenolphtalein, va dinh phan bang dung dich NaOH 0,1N. 4. XGe dinh hé s& hiéu chinh K: = Ka ty 86 gia néng dé thy té va néng dé tinh todn ctia NaOH = Ldy vao erlen 10 mL H,SO, 0,1N chudn, thém vai giot chi thi Phenolphtalein 1% va dinh phan bang NaOH 0,1N. * Tinh néng dé thuc t& cla NaOH dem dinh phan Hé Dai Hoc 9 TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 5. Tinh két qua: Ham lugng phdn tram Nito téng cé trong mau duge tinh theo céng thie sau _ (@=bK)x0,0014xV x100 - vxXm N Trong dé N- ham lugng Nita tinh bang phan tram khél lugng a- sé ml dung dich chudin H,S0, 0,1N dem hdip thu NH; b -s6 MLNOOH 0,1N tiéu tén cho chudn d6 m -khdi lugng méu dem vé ca héa, g. V- téng thé tich dinh mUuc dung dich vé cd héa (100mL) v- thé tich dung dich v6 ed héa dung chung edit (10mL) 0,0014 - lugng gam Nitd Ung vai ImL H,S0, 0,1N K - H6 sé digu chinh néng dé NaOH 0,1N Hé Dai Hoc 10 TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 BAI3: PHAN |: BINH LUGNG LIPIT TONG THEO PHUONG PHAP SOXHLET I. Nguyén tac: Dung dung méi ky nude trich ly hodn ton lipit tt nguyén ligu da duge nghién nhé. Mét sé thanh phan héa tan trong chét béo cng duge ttich ly theo bao gém sdc 18, céc vitamin tan trong chdt béo, cdc chét mui.. tuy nhién ham lugng ctia chting thép. Do cé Idn tap chét, phan trich ly duge goi Id lipit tng hay déu thé Ham lugng lipit tng co thé tinh bang cach can truc tiép lugng déu sau khi chung cétt logi sach dung méi hod tinh gidn tiép tu khéi lugng ba cén Iqi. Uu diém ctia cach tinh gidn tiép la cé thé déng thai trich ly nhiéu méu trong clung mét try chiét I. Dung cy thiét bi: Bd Soxhlet (binh cdu, try chiét, Sng sinh han), TU sy 105°C, can phan tich Céi chay st, binh hut dm, gidy loc gdp thanh tui dung nguyén liéu. Mét béng dan 100w lam nguén nhiét Il, Hod chéit: Dung mi trich ly lipit: diethyl ether hodc ether petrol. Dung mdi ether phdi khéng chtia peroxyt, nudc, rudu va c6 dé s6i khoding 40 - 50°C. XU ly ether nhu sau Ether: 500mL Hé Dai Hoc " TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 Dung dich NaOH hay KOH 40%: SmL Dung dich KMnO, 4%:50mL Bé trong 24 gid, thinh thoding léc dau, sau dé rtia 4 - § lan nude cat, logi bé nude bang phéu chiét, cho thém 50g Na,SO, khan va dé trong 24 gid, chung cét ether, bdo quan trong chai thily tinh mau. IV. Tién hanh trich ly lipit: Sdy khé nguyén liéu dén khéi lugng khéng déi. Can chinh xae 5g nguyén ligu da duge nghién nhé, cho vao bao gidy da duge sdy khé va bI&t khéi lugng. Chu y géi mu phdi cé b8 réng nhé hon dusng kinh éng try va chiu dai ngén hon chiéu cao Sng chdy tran. Dung but chi vist én bao gidy khéi lugng bi va mau. Dat bao gidy vdo try chiét. Ldp try chiét vao binh cdu va gén 6ng sinh han. Qua ddu éng sinh han, ding phéu cho dung méi vao try chiét sae cho mét lugng dung méi dé chay xuéng binh cdu va mét lugng trén phéu chiét con dd ngap mdu. Dung béng lam nut déu éng sinh han. Mé nuéc lanh vao Sng sinh han. Md céng téc dén va bét déu trich lipit. iéu chinh nhiét dé trich sao cho chu ky hodn luu cia dung méi dat tur § dén 8 ldn trong mét gid. Chiét trong 8 +12h cho én khi trich ly hoan todn hét chét béo. Th bang cach Idy vai giot ether 6 cUusi Sng xiphéng nhé Ién téim kinh hod gach men, dung méi bay hoi khéng dé Igi vét dau loang thi két thc. Cho ether chéy xudng hét binh cdu. Ldy bao gidy ra, dat dudi td hotte cho bay hdi hét ether nhiét dé thudng rdi cho vao tl sdy, sdy & 100 +105°C trong 1,$h. BS nguédi trong binh hut dm, can xde dinh khéi lugng, Hé Dai Hoc 12 TH HOA HQC THUC PHAM 2006-2007 eons jad Hinh : BS Soxhlet V. Tinh két qué: Ham lugng phan tram chét béo tinh theo céng thie: X= (M,-M,)x 100/ m Trong do: M;: khéi lugng ba idy va mau ban déu, g M,: khél lugng bao giéy va mau sau khi trich lipit va sdy kh6, g m: khéi lugng mau ban déu, g Hé Dai Hoc 13 TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 PHAN i: XAC BINH CAC CHi $6 CUA CHAT BEO |. XGe dinh chi sé axit: 1. Pham vi ap dung: Phuong phap nay dp dung cho déu mé déng, thuc vat, khéng ap dung cho cdc loal sap. 2. Binh nghia: Chi s6 axit (Av) duge tinh bang s6 mg KOH can dé trung héa hét lugng axit béo ty do c6 trong 1 gam chét béo. Chi sé axit du bdo vé khdé nang bdo qudn sdn phdm va cho biét muic d6 bi thuy phan cia chét béo. 3. Nguyén tdc: Trung héa lugng axit béo ty do cé trong chdt béo bdng dung dich KOH, phdin ting xdy ra: RCOOH + KOH——*RCOOK + HO 4, Dung cu: Burrettel0mL hod 26mL, c6 khoding chia dé 0,05mL, erlen 100mL nut nhdém, becher 100mL, Sng dong 25mL 5. Héa chat: Diethyl ether, rugu ethylic 96° Dung dich KOH 0,1N hode KOH 0,05N trong rugu, da duge chudn bi trude ft nhét ld mét ngdy va dude gan vao chai néu day kin. Dung dich phdi khéng mau hay ¢6 mdu vang nhat. Phenolphtalein (hode thymolphtalein) 1% trong rugu. Hé Dai Hoc 14 TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 6. Cach fin hanh: Léy vo erlen sach khé chinh xdc khodng 5g chét béo. Thém 20mL hén hgp ether ethylic-rugu ethylic (1:1) dé héa tan chét béo. Déi véi mau 1dn, khé tan c6 thé gia nhiét nhe trén nél cach thiiy, léc déu Chudn dé hén hgp bang dung dich KOH 0,05N trong rugu vdi § giot chI thi phenolphtalein 1% cho d&n khi dung dich cé mau héng bén trong 30 gidy Trudng hgp chét béo cé mau thdm thi dung chi thi thymolphtalein (mL), két thc chudn dé khi xuét hign mau xanh 7. Tinh két qua: Chi sé Axit tinh theo céng thie: _2.8055xV xT. m AV V - thé tich dung dich KOH ding dinh phan, mL T-hé s6 higu chinh néng dé cia dung dich KOH stt dung, T = 1 néu pha tu 6ng chudn. m -lugng mau thi nghiém, g 2.8055 - s6 mg KOH cé trong ImL KOH 0,05N Il XGe dinh chi sé peroxyt: (Theo TCVN 6021: 1996 ISO 3960: 1977) 1. Binh nghia: Chi s6 Peroxyt (PoV) Ia sé mili-dugng lugng cua oxy hogt héa cé trong 1 kilogram mdu thu. Chi s6 Peroxyt bidu thi cho mtic dé b| oxy héa cia chét béo. Hé Dai Hoc 15 TH HOA HQC THUC PHAM 2006-2007 2. Nguyén téc: Cac peroxyt tgo thanh trong qué trinh 61 hoa clia chét béo, trong méi trudng axit cd khd nang phdn Ung vdi KI gidi phéng lod theo phan ung: Rr CH-CH-R, + 2Kl+2CH,COOH —» Rr QR + 2CH,COOK + H,0 + |, oo oO Binh phan lod tqo thanh bang dung dich thiosulfate natri: 2Na,$,0, + |; —»2Nal +Na,S,0, Chi s6 peroxyt duge tinh bang sé mili dudng ludng natr thiosulfate két hgp hét vdilugng lod duge gidi phéng 3. Dung cu: Can phan tich, burrette 10mL hay 25mL, chia vach 0,1mL, erlen nuit nhdém 100mL, éng dong 50mL, pipette ImL 4. Héa chat: Cloroform (P). Axit Axetic bang (P). Dung dich hé tinh bét 0,1% Dung dich Na,S,0; 0,01N hay 0,002N, duge pha tu éng chuén. Dung dich KI béo héa, duge pha mdi va lam sach khdi lodat va |, tu do, Bé kiém tra dung dich KI bao héa, thém hai giot hé tinh bét vao 0,5mL dung dich KI trong 30mL dung dich CH,COOH:CHCI; theo ty Ié 3: 2,néucé mau xanh ma phdi thém hon mét giot Na, $,0; 0,01N thi bd dung dich KI nay va chudn bj dung dich mdi. $. Tin hanh: Cén vao erlen c6 nuit nhém chinh xdc khodng 3-5 g chdt béo. Héa tan méu tht? bang 10mL chloroform (CHCl), thém 15mL axit axetic hogc Hé Dai Hoc 16 TH HOA HQC THUC PHAM 2006-2007 cho vao 15 - 30 mL hén hgp chloroform - axit axetic bang (ty 16 1: 2). Thém ImL dung dich KI bao héa. Bay kin erlen ngay. Lac trong mét phut va dé yén chinh xdc 5 phut d ndi t6i T= 15 - 25°C (theo ISO) hode Ide va dé yén binh vao ché téi 1 phut (theo AOCS). Thém 30mL nude cét, Ide manh, thém 5 giot hd tinh bét 1% lam chat chT thi, Chudin dé lod tao thanh bang dung dich NatS,0, 0,002N nu méu 6 chi 86 Peroxyt nhd, hode dung dich Na,$,0, 0,01N cho mau cé chi sé Petoxyt lén hon 12 meq/kg, dén khi mat mau tim dae trung cia lod. Lép Igi thi nghigm 3 Ién. Tién hanh déng thé thi nghiém kiém chting, thay chét béo bang 3 - 5 mL nude cét. Néu két qud ctia mau tréng vugt qué 0,1mL dung dich Na,$,0; 0,01N thi déi hoa chat do khéng tinh khiét. 6. Tinh két qua: (Vi=V2) xT XN 1000 m PoV Véi PoV - chi's6 peroxyt, Meq / Kg V, - 86 mL Na,S,0; dung dinh phan mau thi nghiém Vp - 86 mL Na,S,0; dung dinh phan méu kiém chting T-hé s6 higu chinh néng dé cia Na,S,0,, T=1 néu pha tu dng chuén m - khéi lugng méu thi nghiém. g N-néng dé duong lugng gam ctia Na,$,0, Phép thi duge tién hanh trong anh séng ban ngay khuyéch tan hoGe Gnh sang nhan tao, tranh tia cuc tim H@ Dai Hoc 7 TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 PHAN 1: XAC BINH HOAT TINH ENZYM AMYLASE THEO WOHLGEMUTH I Nguyén fac: Phuong phdp dua vdo fim néng dé enzym thdp nhét cé thé thay phan tinh bot dén erytrodextrin Don vj Wohlgemuth Id lugng enzym cén thist dé thdy phan 1 mg tinh bot sau 30 phut 6 37°C 6 Clam chét hogt hoa Hl. Dung cy va hod chét: 11 6ng nghiém, pipet Im (4 cai), ti dim, NaCL 0.5%, tinh bét 0,5%, H,SO, 10%, lod 0,3% trong KI 3%. WM. Tién hanh: 1. Chudn bj dich chiét amylase. Can 10 g malt hat dgi mach), dem nghién nhuyén, chuyén vao binh dinh muc 100ml, dinh mute an 100ml, Ic that ky Ng@m 15 phit, thinh thodng Ide déu binh dinh muc Loe qua 2 18 gidy lec min, thu duge dich trong suét cha enzym amylase. 2. Tién hanh khdo sat hoat tinh amylase. Léy 10 Sng nghiém danh sé thi ty. HUt vao méi Sng nghiém 1 ml dung dich NaCl 05%. Trong Sng nghiém 1 cho vao Im! dung dich amylase va léc ky. Sau dé Idy 1 ml te Sng nghiém 1 cho vao Sng nghiém Hé Dai Hoc 18 TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 2, dc ky va l&p Igi cho téi Sng nghiém 10 thi hut ImI va bé di, Trong méi ng nghiém cho vao 1 ml dung dich hé tinh bdt 0.5% Iéc déu, dé vao tu diéu nhiét 3 37°C. Sau 30 phuit Idy ra, thém vao méi Sng 1 mIH,SO, 10% va 2 glot lod trong KI Ide déu. Két qua duge thé hién trong bang, cé dénh ddu xanh (x), d6 (a) ,ndu (n ), vang (v) ng nghlém D6 pha 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024 loang Néng do n/2 | n/4 | n/8 | n/16 | n/32 | n/64 | n/128 | n/256 | n/512 | n/1024 enzym Mau Léy 1 Sng nghiém khde (Sng tht 11) cho vao 3 mi nude cét, 2 giot thuéc tht lod va so sénh vél mau cua 10 Sng nghiém trén dé xae dinh Eng cé néng dé enzym amylase théip nhét thy phan hodn toan tinh bét. 3. Tinh két qua: - Lugng enzym duge cho vao Sng nghiém (1) Trong dé Vi Thé tich dich chiét enzym cho vao éng nghiém (1) (im) V.- Thé tich dich chiét enzym (100 ml) m- Lugng mau can vat phém chtia enzym (mg) Hé Dai Hoc 19 TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 M6t dan vi Wohigemuth (W): FxXxs Trong dé : F- Bd pha lodng cla Sng nghiém cé néng dé enzym thép nhét thuy phén hodn toan tinh bét (Ong nghiém cé mau tring véi mau cla Sng nghiém 11). $6 don vi Wohlgemuth cé trong 1 ml dich chiét enzym (Ny): PHAN 2: XAC BINH HAM LUGNG VITAMIN C 1. Nguyén tdc: Acid ascorbic (Vitamin C) la mét hgp chét chua no cé chtta nhém endiol. Acid ascorbic bi pha hty rét nhanh dudi tac dung cia cdc chét oxy héa va bén trong méi trudng acid. Phung phép dua trén nguyén td Ia acid ascorbic 6 khé nang oxy héa khtt thuan nghich nhé trong phan td ca né chda nhém endiol. OH OH Vi v4y acid ascorbic duge xde dinh bang phugng phap chudn dé véI KIO,/KI theo cae phén Ung sau: Hé Dai Hoc 20 TH HOA HOC THUC PHAM 2006-2007 KIO, + SKI + 6HCI > 31, + 6KCI + 3H,0 + OHI (CH;OH Acid ascorbic Acid dehydroascorbie KIO3 + SKI + 6HCI + 3C.H,Os > 3C

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