DETERMINACION DE EXISTENCIA Y CUANTIFICACION DE
BACTERIAS SULFATO REDUCTORAS EN SEDIMENTOS DEL
LAGO DE XOCHIMILCO.
Méndez González José Fernando.
RESUMEN.
El SH2 es un compuesto excretado por las
bacterias sulfato-reductoras, estas bacterias son
anaerobias por lo que regularmente se
encuentran en el fondo de los lagos o en
ambientes marinos donde hay mucha materia
orgánica de desecho. Se tomaron muestras de
sedimento del lago de Xochimilco los cuales se
llevaron a una columna de Winogradsky y
posteriormente a un medio con sulfatos, para
comprobar la existencia de bacterias sulfato
reductoras, estas mismas se llevaron a una
cuantificación con el método del número mas
probable, se encontró que si había bacterias
sulfato reductoras en nuestro sedimento y con la
técnica de cuantificación se calculo que había
60,893,714.29 M.O. / gr. Nuestra columna es un
microecosistema, pero refleja claramente lo que
podría pasar en el lago si las condiciones de
contaminación continúan, es necesario mantener
un equilibrio en los ciclos biogeoquímicos para
que el lago mantenga sus características
naturales.
HIPOTESIS: En el lago de Xochimilco se
albergan bacterias reductoras del azufre.
PALABRAS CLAVE: bacterias sulfato
reductoras, reducción desimilativa, ácido
sulfhídrico, lago de Xochimilco.
OBJETIVO.
Mediante toma de muestras de sedimentos
obtenidos de la mezcla del lago y agua de
Xochimilco, tierra de cultivo (el faro) y CaSO4,
se comprobará la presencia de bacterias sulfato-
reductoras. Demostrando que están involucradas
reducción de sulfatos en medios acuosos con
deficiencias de oxígeno.
Mediante la técnica de conteo del número más
probable se hará un aproximado cuantitativo de
las bacterias sulfato-reductoras en el sedimento.
INTRODUCCION:
Las bacterias reductoras de SO4= son los
principales responsables de la generación de
H2S bajo condiciones anaerobias. El sulfato que
llega al hipolimnio y los sedimentos es reducido
por bacterias reductoras de sulfato, las cuales lo
utilizan como aceptador de electrones en la
oxidación de materia orgánica (respiración
anaerobia). En algunas zonas costeras, donde se
acumulan grandes cantidades de materia
orgánica, se produce una reducción intensa del
sulfato a sulfuro de hidrógeno (Stanier et al.,
1992). Estas zonas se tornan virtualmente
inhabitables por causa del olor fétido y del
efecto tóxico del H 2S. Cuando en dichos
ambientes coinciden altas concentraciones de
H2S con altas concentraciones del ión ferroso
(Fe2+) se generan grandes cantidades de FeS, el
cual es altamente insoluble. Este último no
puede ser utilizado y escapa a la acción
biológica ulterior. La acumulación del ión
ferroso imparte un color negro brillante y un
olor fétido a los sedimentos. Los sedimentos
ricos en FeS se conocen con el nombre de
Sapropel. Cuando se produce una deficiencia de
hierro en los sedimentos o cuando las
concentraciones de H2S exceden la cantidad
necesaria para precipitar todo el ión ferroso
(Fe2+) presente, entonces el H2S podrá ser
oxidado por bacterias. En zonas anaerobias de
cuerpos de agua dulce estratificados donde hay
buena penetración de la energía radiante pueden
crecer bacterias fotosintéticas. Estas utilizan
H2S como donante de electrones produciendo
gránulos de azufre intracelulares o
extracelulares (Figura 1). El H2S también es
generado a través de procesos de putrefacción y
desulfurilación de compuestos
organosulfurados. Las emanaciones volcánicas
y los depósitos de gas natural representan
fuentes menores del H2S.
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BACTERIAS SULFATO REDUCTORAS EN SEDIMENTOS DEL
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Méndez González José Fernando.

El CaSO4 es una fuente de sulfato que nos

permitirá observar de manera más marcada la
acción de las bacterias sulfato-reductoras.

PROCEDIMIENTO.

CREACION DEL SISTEMA DE ESTUDIO.

Se preparó una columna de Winogradsky con

los siguientes sustratos.

Componente Cantidad
Suelo ( el faro) 6g
Lodo 4g
CaSO4 1g
CaCO3 1g
Sustrato Orgánico .2g
(sémula de trigo)
Al seguir el ciclo del azufre nos damos cuenta
que existen dos procesos para la reducción de Agua de lago Hasta rellenar tubo
TABLA 1. Composición del microecosistema.
sulfatos: a asimilativa y la desimilativa.
- Se pesaron todos los componentes
sólidos, se añadieron a una columna de
vidrio y se mezclaron con el agua de
lago.
- Se adicionó agua hasta el 2 cm antes
del borde de la columna.
- Las columnas se dejaron en la
oscuridad a 28ºC durante 7 semanas
para que se realizaran procesos de
mineralización bacteriana.

FIGURA 2. Esquema de la reducción del sulfato: muestra la reducción

asimilativa llevada a cabo por bacterias, levaduras y plantas, y la
desimilativa llevada a cabo por bacterias sulfato-reductoras en sistemas
anaerobios.

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PREPARACION DE MEDIO CON • A cada tubo se le colocará un clavo de

SULFATOS. hierro pequeño estéril, y una gota de
nujol estéril (aceite mineral) para sellar
Ingredientes: Sulfatos el medio y no permitir la entrada de
Lactato de sodio al 50% 5.0 ml oxígeno que afecte nuestro
NH4Cl 1.0 g rendimiento.
K2HPO4 0.5 g • El procedimiento se repetirá 7 veces,
MgSO4.7H2O 2.0 g de manera que obtendremos 7
CaCl2 0.1 g diferentes muestras del mismo sustrato,
Na2SO4 0.1 g con las que mejoraremos la eficiencia
CaSO4 1.0 g de los cálculos de población.
Citrato férrico amoniacal 0.5g • Realizar los pasos del clavo y el nujol a
Acido ascórbico 0.1g un tubo testigo sin inocular, este
Acido tioglicólico 0.1g servirá como control.
Extracto de levadura 0.2 g • Incubar a 28ºC durante una semana.
Resarzurina sódica 0.001g
Agua de la llave 1000 ml RESULTADOS:
pH 7.0
TABLA 2: Componentes del medio para bacterias sulfato reductoras.
Para la evaluación de resultados se observaron
si había cambios significativos en el medio que
a. Disolver los componentes con
evidenciaran la presencia de bacterias sulfato-
agitación constante y ajustar el pH
reductoras, tomando como positivos los
siguientes cambios con respecto al control:
b. Distribuir 9 ml de medio en tubos de formación de gas, turbidez y cambio de color en
ensaye con tapón de rosca bien lavados y el medio, cambios de color en el clavo, olor, etc.
enjuagados con agua destilada

c. Esterilizarlos a 121°C durante

minutos.

TOMA DE MUESTRA, DILUCION E

INOCULACION.

• Se tomó un gramo del sedimento de la

columna y se añadió a un tubo de
ensaye con SSI (solución salina
isotónica), se llevó a agitación con
vortex durante 1 min.
• Se realizaron 5 diluciones más.
• Para el conteo se tomaron las
diluciones -4,-5,-6; con base 10
• Se inoculo .1ml de cada dilución en
tres tubos con medio de sulfatos. (estos
tubos no deben agitarse ya que las
bacterias sulfato reductoras son IMAGEN 1: Muestra respectivamente el control, y las diluciones 10-4,10-5 Y
10-6 realizadas en el ensayo, característico fue 3,3, 1. Aquí se pueden apreciar
anaerobias). cambios en el medio que a simple vista nos evidenciaba la existencia de
bacterias sulfato-reductoras.

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BACTERIAS SULFATO REDUCTORAS EN SEDIMENTOS DEL
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• El SH2 es un gas insoluble en agua por

Los cambios en cada dilución se representan en lo que se presentaron pequeñas
la siguiente tabla: burbujas.
• Mucho de SH2 producido por las
Ensayo Dil. 10-4 Dil. 10-5 Dil. 10-6 bacterias sulfato reductoras produjeron
1 3 3 3 FeS, evidenciado en los clavos por la
2 3 2 0 coloración negra.
3 3 3 3 • La cuantificación de bacterias sulfato
4 3 3 1 reductoras por número más probable se
5 0 1 2 realizo adecuadamente ya que en
6 3 3 3 diluciones de 10´-6 en algunos ensayos
7 3 1 3 no se presentaron la totalidad de éxitos,
TABLA 3: En cada ensayo se prepararon 3 tubos de medio con cada dilución, el
número de muestras positivas en cada ensayo y con cada dilución son lo que indica que las diluciones fueron
representadas por los números 0,1,2 y 3, refiriéndonos a 0 como número máx. de
fracasos y a 3 como el número máximo de éxitos.
las adecuadas.
• La presencia en altas cantidades de
CUANTIFICACION DE POBLACION bacterias sulfato reductoras en el lago
MICROBIANA. de Xochimilco se debe a la poca a
aeración, lo cual puede ser perjudicial
ya que el SH2 es tóxico además de
No. pestilente.
Característic No. • El SH2 puede ser oxidado por bacterias
Ensayo o M.O. Dilución M.O./gr.
fotosintéticas pero al no haber
1 333 140 1,00E-06 140000000
suficiente luz, su relación entre ellas y
2 320 15 1,00E-04 150000 las sulfato reductoras es muy
3 333 140 1,00E-06 140000000 desbalanceada.
4 331 45 1,00E-05 4500000
5 12 0,6 1,00E-04 6000
6 333 140 1,00E-06 140000000 CONCLUSIONES:
7 331 16 1,00E-05 1600000
Se encontraron bacterias sulfato reductoras en
Promedio 60893714,29
TABLA 4: En esta tabla se vaciaron los datos de número característico de cada
los sedimentos del lago de Xochimilco.
ensayo, con las tablas de Probabilidad de población para tres tubos de Mc Grady,
se encontró el número de M.O. en muestra que se tuvo que dividir por el factor
de dilución para darnos el no. De M.O./gr. en la muestra del sedimento. También La poca aeración en el agua aumenta la
contiene un promedio de los siete ensayos para mayor exactitud en los cálculos. concentración de bacterias sulfato reductoras,
estas producen SH2 muy reactivo con metales,
pestilente, además de ser muy tóxico. En el lago
DISCUSION DE RESULTADOS. de Xochimilco de encontraron este tipo de
bacterias, la acumulación de desechos orgánicos
• La presencia de H2S cambio el pH del y de flora que impide la aeración y el paso de la
medio, por lo que se presento luz necesaria para las bacterias fotosintéticas
decoloración de los medios que oxidan el SH2, lo cual va generando el
inoculados. aumento desmedido de la población de bacterias
• Al ser reducidos los sulfatos sulfato-reductoras y la inhabitabilidad del lago.
solubilizados en el medio, hubo un
cambio radical en los potenciales
eléctricos del mismo precipitando los
cationes complementarios.

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REFERENCIAS:

• Stanier Y. Roger et al. , Microbiología,

Ed. Reverté, segunda edición,
Barcelona, 1992, 750 p.p.
• Campbell R. , Ecología microbiana,
Ed. Limusa, México, 1987.