Ky thuat xet nghiem vi sinh lam sang cac benh pham khac nhau

KIEM TRA VI SINH KHONG KH

Muc tieu

a c viec kiem tra vi sinh khong kh vao thanh mot trong cac qui trnh giam sat nhiem
trung tai benh vien v biet ro muc ch va ch nh cua viec kiem tra khong kh.

La chon c phng phap kiem tra vi sinh khong kh nao tai benh vien cua mnh cho phu
hp vi ieu kien tai chanh cung nh phng tien tai phong th nghiem nh biet c nhieu
phng phap kiem tra vi sinh khong kh khac nhau.

Ap dung c phng phap lang bui cua Koch dung trong kiem tra vi sinh khong kh tai
benh vien cua mnh v ay la phng phap phu hp nhat hien nay.

Da tren ket qua kiem tra vi sinh khong kh, anh gia chat lng khong kh phong mo va
anh gia chat lng khong kh noi chung, tuy thuoc vao cac ch nh thc hien kiem tra
khong kh tai khoa phong nao.

Muc ch
Dung kiem tra chat lng khong kh phong mo cua cac benh vien. Cung co the dung kiem tra
chat lng khong kh tai cac benh phong trong cac chng trnh kiem soat nhiem trung tai
benh vien

Cac phng phap kiem tra vi sinh khong kh

Co nhieu phng phap:
1. Phng phap hut bui qua mang loc bang gelatine (dung mang loc cua hang Sartorius), sau
o at mang loc nay len mat moi trng, u trong ieu kien thch hp (37oC/kh trng
thng hay kh trng CO2 neu la thach mau/24 gi). Sau o oc ket qua em so lng
khum vi khuan moc e tnh ra so lng vi sinh trong the thch khong kh c hut qua
mang loc.
2. Phng phap hut bui trc tiep len mat hop thach moi trng dinh dng at trong may hut
(dung may MAS100 cua Merck), hop thach sau o c lay ra khoi may va u trong ieu
kien thch hp (37oC/kh trng thng hay kh trng CO2 neu la thach mau/24 gi). oc
143

Ky thuat xet nghiem vi sinh lam sang cac benh pham khac nhau
ket qua em so lng khum vi khuan moc e tnh ra so lng vi sinh trong the thch khong
kh c hut qua may.
3. Phng phap lang bui cua Koch da tren nguyen tac e bui lang tren mat cac hop thach
dinh dng trong mot thi gian nhat nh roi sau o u cac hop thach trong ieu kien thch
hp (37oC/kh trng thng hay kh trng CO2 neu la thach mau/24 gi). oc ket qua
em so lng khum vi khuan moc e tnh ra so lng vi sinh trong the thch khong kh qua
mot cong thc cho san.

Phng phap lang bui cua Koch e kiem tra vi sinh khong kh
1. Phng phap thc hien
ay la phng phap c nhieu benh vien s dung e kiem tra vi sinh khong kh phong
mo. Thng th moi phong mo se c kiem tra nam cum, mot cum gia va bon cum bon
goc. Moi cum at 3 hop thach dinh dng loai ng knh 90mm. Ba loai hop thach dinh
dng o la: Mot hop thach mau (BA) cho toan bo vi khuan hieu kh, mot hop thach MacConkey (MC) cho trc khuan Gram [-] de moc, va mot hop thach Sabouraud (SA) cho vi
nam. Tat ca cac hop thach se c m nap lan lt sau khi c at ay u tai 5 v tr cua
phong mo va e yen trong phong trong 10 phut; sau o c ay nap lai cung lan lt, hop
nao m nap trc th c ay nap trc. Tat ca c em ve phong th nghiem va u cac
ieu kien thch hp (37oC/kh trng thng cho cac hop thach MC va kh trng CO2 cho
cac hop thach BA, rieng hop thach SA th u nhiet o phong th nghiem). Thi gian u la 24
gi, rieng hop thach SA th u 48 gi mi oc ket qua. Lu y la khi thc hien at cac hop
thach kiem tra vi sinh khong kh trong phong mo th cac nhan vien thc hien viec nay phai
ra tay va mac o giong het phau thuat vien e tranh a vi trung tap nhiem vao phong
mo. Thi iem thc hien kiem tra tot nhat la vao buoi sang sau khi van hanh he thong en
cc tm va cac may loc khong kh kh trung phong mo va trc khi thc hien trng hp
mo au tien.
2. Phng phap tnh toan ket qua
em so khum vi khuan moc tren moi hop thach. Tong so vi khuan/m3 khong kh tai moi
cum c xac nh theo cong thc sau:

144

Ky thuat xet nghiem vi sinh lam sang cac benh pham khac nhau
X=

A 100 100
Sk

Vi: X la tong so vi khuan/m3 khong kh tai cum khao sat (CFU/m3); A la tong so khum vi
khuan moc tren ba loai moi trng; S la dien tch cua hop petri cha moi trng, c xac
nh bang cong thc S = pR2 (R tnh bang cm) = 3.1416 x 92; k la he so va phu thuoc vao
thi gian at hop thach (la 1 neu at 5 phut, la 2 neu at 10 phut, la 3 neu at 15 phut).
V du neu tren BA chung ta em co 32 khum, tren MC em co 2 khum, tren SA em co 10
khum; vay th A se la 32 + 2 + 12 = 46. Neu thi gian at hop thach la 10, va hop thach co
ng knh 90mm (9cm) th X se la:
X = 46 100 100
63.62 2

= 3615CFU/m3

So lng vi sinh co trong 1m3 khong kh trong phong c tnh bang so trung bnh cong cua
so lng vi sinh co trong 1m3 cua 5 cum khao sat. Can c vao ket qua so vi sinh co trong
1m3 khong kh cua phong, co the anh gia chat lng khong kh da theo tieu chuan cua V.
Omelanskii (Nga) sau ay:

Bang 10:

Tieu chuan anh gia chat lng khong kh phong mo theo V. Omelanski (Nga)

S lng vi sinh/m3 khong kh

Chat lng khong kh

<312

(< 5 khuan lac/3 a thach)

Tot

312 1250

(5 20 khuan lac/3 a thach)

Kha

1250 1562 (20 25 khuan lac/3 a thach)

Va

> 1562

Kem

(> 25khuan lac/3 a thach)

145

Ky thuat xet nghiem vi sinh lam sang cac benh pham khac nhau

Tieu chuan vi sinh khong kh

Cho en hien nay chung ta cha co tieu chuan qui nh chat lng khong kh da theo lng
vi sinh vat trong 1m3 khong kh. Sau ay la vai tieu chuan dung e tham khao:
Theo Preobrane (Phap), khong kh sach khi co so lng vi khuan 1000CFU/m3
Theo Ginokova (Nga), khong kh sach khi ch co 5 10 khum moc tren mat thach e trong
10 phut; va khi co 20 25 khum; xau khi co >25 khum.
Theo Romanovic, trong c s san xuat thc pham, khong kh rat tot khi ch co <20 khum
moc tren mat thach e trong 10 phut va khong co khum nam moc; tot khi co 20 50 khum
va 2 khum nam moc; va khi co 50 70 khum va 5 khum nam moc; xau khi co >70 khum
vi khuan va >5 khum nam moc.

Cau hoi on tap

1. Cho biet cac phng phap co the dung e kiem tra khong kh.
2. Trnh bay phng phap lang bui e kiem tra khong kh phong mo va tieu chuan e
anh gia chat lng khong kh phong mo.
3. Cho biet cac tieu chuan hien nay dung e anh gia chat lng khong kh.

146