|




 
 ÷



 
  
  

V
 

 
 
 

  
 

 ! "


#
 $ %
&' 
(V )
 ÷


 * +,$
  -

 
.
/
 0
#
010
2&3
 !(

4
5
6
   /



' .
/


7

 

! "

8

96)
 ÷


Quá trình phân hóa, chuyên hóa

 '()*+,
$"%&
!"# &-'." /01'

Quá trình phҧn phân hóa, phҧn chuyên hóa

 R ! "

 
:) ;  <
,

,<=
*
>
?
 @ <9

>
?
 @ <9

>
A


>  

>


 
  !
B

 <C
&
D)E


0

"  '0 'F
 ÷ ng quan
÷
o sҧn phҭm
Mүu nuôi cҩy
÷


Mô sҽo Mүu nuôi cҩy vô trùng

 


Chӗi bҩt đӏnh / Nuôi cҩy Nhân nhanh

Phôi soma chӗi

÷  
ChuyӇn gen
  lưӧc vӅ lӏch sӱ

‡ Áp dөng trên hoa lan ± 1 năm/1 lҫn.

‡ Nhân qua protocorms, 1,000,000/năm.

Chӗi phát sinh ÷ái sinh thành cây

tӯ protocorm hoàn chӍnh
Các phư ng pháp nhân giӕng vô
tính  
‡ Chӗi nách

‡ ÷
o chӗi bҩt đӏnh

‡ ÷
o phôi soma

 Nuôi cҩy chӗi nách

÷hân Lá
Ngӑn

Chӗi nách trên

trөc cӫa lá
 Lӵa chӑn mүu nuôi cҩy

Các đһc tính mong ‡ Ngӑn (mô phân sinh

muӕn: đӍnh)
‡ DӉ tiӋt trùng ‡ Chӗi nách
‡ Non ‡ H
t
‡ Phҧn ӭng tӕt vӟi môi ‡ Lá
trưӡng nuôi cҩy
 Môi trưӡng

‡ Khi cҳt mүu nuôi cҩy Ngӑn - Auxin

và Gibberellin
ra khӓi cây mҽ, lҩy đi
nguӗn dinh dưӥng I
cҫn phҧi cung cҩp các
chҩt này cho mүu nuôi
cҩy. Lá -
Đưӡng, GA

RӉ - Nưӟc, vitamins
Chҩt khoáng và cytokinin
 ÷hành phҫn môi trưӡng

‡ Môi trưӡng khoáng c bҧn

‡ Đưӡng
‡ Vitamins
‡ Nưӟc
‡ Hormon sinh trưӣng ÷V - auxin, cytokinin, GA
‡ Các chҩt t
o gel
‡ Các thành phҫn không xác đӏnh
 Đưӡng

‡ Khi nuôi cҩy mô thưӡng quang hӧp không

đӫ cung cҩp đӫ đưӡng I thêm saccaroza
2-3% w/v.
‡ Glucoza hay hӛn hӧp glucoza và fructoza.
‡ Khi nuôi cҩy công nghiӋp, các nguӗn
carbon khác (rӍ đưӡng, dӏch thӫy phân tinh
bӝt) có thӇ sӱ dөng.
 Nuôi cҩy tӵ dưӥng

‡ inh trưӣng không có nguӗn carbon I cҫn

kích thích quang hӧp
‡ Cưӡng đӝ ánh sáng lӟn (90-150 Mole/m2/s)
điӅu kiӋn tӵ nhiên (30-50).
‡ Nӗng đӝ CO2 lӟn (1000ppm) thông thưӡng
369.4ppm.
‡ Ӭc chӃ sӵ nhiӉm VV và cây dӉ thích ӭng
khi chuyӇn vào nhà kính.
 Môi trưӡng khoáng c bҧn

‡ Bao gӗm các nguyên tӕ đa lưӧng (>mg/l) và vi

lưӧng (Vmg/l).
‡ ÷ӗn t
i rҩt nhiӅu môi trưӡng khoáng c bҧn.
‡ Môi trưӡng M (Murashige và koog, 1965) là
môi trưӡng nuôi cҩy chӗi ph biӃn nhҩt.
‡ Môi trưӡng Gamborgs B5 đưӧc sӱ dөng ph biӃn
cho canh trưӡng huyӅn phù tӃ bào (không chӭa
NH4).
 Vitamin

‡ Chӭc năng là các coenzyme (vitamin nhóm B).

‡ Mүu nuôi cҩy càng nhӓ, nhu cҫu vitamin càng
chính xác.
‡ ÷hưӡng sӱ dөng hӛn hӧp vitamin (Nicotinic acid,
glycine, ÷hiamine, pyridoxine).
‡ Inositol thưӡng sӱ dөng vӟi nӗng đӝ lӟn gҩp hàng
trăm lҫn (100mg/l)
 Chҩt kích thích sinh trưӣng

‡ Auxin
‡ Cytokinin
‡ Axit Gibberellic
‡ Ethylene
‡ Axit Abscisic
‡ Các chҩt khác
 Auxin
‡ Không thӇ thay thӃ (không tӗn t
i đӝt biӃn)
‡ ÷rong tӵ nhiên có 1 chҩt: Indole-3-acetic
acid (IAA). Dүn xuҩt t ng hӧp: NAA, IBA,
2,4-D, 2,4,5-÷, Pichloram
‡ Kích thích sӵ phân chia tӃ bào và sӵ tăng
kích thưӟc. ÷
o rӉ.
‡ Đưӧc t ng hӧp ӣ mô phân sinh đӍnh.
 Cytokinin

‡ Không thӇ thay thӃ

‡ ÷rong tӵ nhiên có 1 chҩt: Zeatin. Dүn xuҩt
t ng hӧp: Benyzladenine (BA), Kinetin.
‡ Kích thích sӵ phân chia tӃ bào.
‡ ÷
o chӗi.
‡ Đưӧc t ng hӧp ӣ rӉ.
 Gibberellin

‡ ÷ hӧp 70 hӧp chҩt tư ng tӵ gӑi là các axit

Gibberellic.
‡ ÷hưӡng sӱ dөng GA3 và GA4+9.
‡ Kích thích sӵ kéo dài tӃ bào I chiӅu cao
cây và kích thưӟc quҧ
‡ Phá ngӫ cho h
t.
‡ ÷ ng hӧp ӣ lá non.
 Ethylene

‡ KiӇm soát quá trình chín cӫa quҧ.

‡ ÷ ng hӧp ӣ tҩt cҧ các tӃ bào làm tăng chiӅu
dày thân và gây héo lá.
‡ Ngăn cҧn quá trình t
o chӗi bҩt đӏnh I sӱ
dөng AgNO3 hay norbonadien.
 Axit Abscisic (ABA)

‡ Có duy nhҩt 1 chҩt.

‡ Kích thích sӵ héo cӫa lá và ngӫ cӫa h
t.
‡ KiӇm soát sӵ đóng khí kh ng và tính chӏu
h
n ӣ thӵc vұt.
‡ Giúp t
o phôi soma.
 Các chҩt tư ng tӵ hormon

‡ Polyamin ± vai trò quan trӑng trong sӵ phát

triӇn cӫa phôi.
‡ Axit Jasmonic ± phҧn ӭng cӫa cây khi bӏ
t n thư ng.
‡ Axit alicylic.
‡ Không đưӧc coi là hormon do nӗng đӝ sӱ
dөng cao.

07 March 2002 Dr. Michael Parkinson 23

 Các thành phҫn không xác đӏnh

‡ Nguӗn hormon, vitamin and polyamin.

‡ Ví dө nưӟc dӯa, cao nҩm men, cao malt
‡ Không lһp l
i
‡ HiӋu quҧ
KiӇm soát quá trình phân hóa
Cytokinin
Đĩa lá

Chӗi bҩt đӏnh

RӉ

Mô sҽo Auxin
ĐiӅu kiӋn trong nuôi cҩy mô ÷B÷V
> G  "
 
C  H6
4 6
%
96
' @$ 6
4
I
 @ 
.
J 

&

> ;  <

8

96
> R ! "
 %

> K
/

Các giai đo
n trong nuôi cҩy mô ÷B÷V
Các giai đo
n nuôi cҩy mô ÷B÷V
> K
L
  "
C  H*
<
 +


0
<M6
#

( +#N
OP0
$
"

 Các giai đo
n nuôi cҩy mô ÷B÷V

> ÷ "  %
!Q R
 *S,T
 

#

U
(0
$  '
0 $ 
Q
0<9 

96J 
  FS
ng đ ÷i gian ÷ác ng
a C  y a c o
Ca C  y a c o
 y a
gC  n ng
ano gi y

> R44 ! "
 %
 "  %
 




/
* V %
 (


6
 ,<.

 Các giai đo
n nuôi cҩy mô ÷B÷V
> R<R
 ?
  <

 
8

96
W  0 @
# A
(  <
 ?
&
ß|
#




 

@


"
 Các giai đo
n nuôi cҩy mô ÷B÷V
> R<#<
<.
Các ӭng dөng nuôi cҩy mô ÷B÷V

> |
#




 @
#

> X4 A
 @
0 #8



> K
6
Y64
U 


50

6
T
'
%T

> Z$
"

 

> [4
6
F,1 <9

/
 U