P. 1
Cay đỏ ngọn

Cay đỏ ngọn

|Views: 1,418|Likes:
Được xuất bản bởiNguyen Tien Hoa

More info:

Published by: Nguyen Tien Hoa on Jun 09, 2011
Bản quyền:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

11/19/2012

pdf

text

original

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM
---------------------------------





BÙI VĂN BÌNH






NGHIÊN CỨU HOÁ HỌC VÀ
NHẬN DẠNG MỘT SỐ NHÓM CHẤT
CÓ TRONG CÂY ĐỎ NGỌN
(CRATOXYLUM PRUNI FOLI UM KURTZ)






L LU UẬ ẬN N V VĂ ĂN N T TH HẠ ẠC C S SĨ Ĩ H HO OÁ Á H HỌ ỌC C










THÁI NGUYÊN - 2008

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN
TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM
---------------------------------




BÙI VĂN BÌNH




NGHIÊN CỨU HOÁ HỌC VÀ
NHẬN DẠNG MỘT SỐ NHÓM CHẤT
CÓ TRONG CÂY ĐỎ NGỌN
(CRATOXYLUM PRUNI FOLI UM KURTZ)

Chuyên ngành: Hoá hữu cơ
Mã số: 60.44.27



L LU UẬ ẬN N V VĂ ĂN N T TH HẠ ẠC C S SĨ Ĩ H HO OÁ Á H HỌ ỌC C



Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS PHẠM VĂN THỈNH





THÁI NGUYÊN - 2008
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DÙNG TRONG LUẬN VĂN

SKLM : Sắc kí lớp mỏng
UV : Ultraviolet spectrocopy
MS : Mass Spectroscopy
EI-MS : Electron Impact Mass Spectroscopy
LC-MS : Liqud chromatography - Mass Spectroscopy
FT-IR : Fourier Transform Infrared Spectroscopy
NMR : Nuclear Magnetic Resonance
1
H-NMR :
1
H-Nuclear Magnetic Resonance
13
C-NMR :
13
C- Nuclear Magnetic Resonance
DEPT : Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer
COSY : Correlated Spectroscopy
HSQC : Heteronuclear Spectroscopy- Quantum Coherence
HMBC : Heteronuclear multiple - Bond Correlation
HIV : Human Immunodeficiency Virus
U : Unit


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
1
MỞ ĐẦU
Việt Nam nằm trong vùng nhiệt đới, gió mùa, mưa thuận gió hoà nên
hệ thực vật rất phong phú, đa dạng. Đó là nguồn tài nguyên sinh học quý giá
thuộc loại có thể tái tạo được. Ngay từ xa xưa cha ông ta đã biết khai thác
nguồn tài nguyên quý báu này để làm đồ ăn, thực phẩm, thuốc chữa bệnh, vật
liệu xây dựng và nhiên liệu phục vụ cuộc sống.
Trong thế giới thực vật ấy có những loài cung cấp thức ăn cho chúng ta,
có những loài cung cấp vật liệu, có loài cung cấp hương thơm, quả ngọt, có
nhiều loài được dùng để làm thuốc chữa bệnh, thuốc trừ sâu, cung cấp nguyên
liệu cho các ngành công nghiệp thực phẩm, mĩ phẩm và dược phẩm.
Việt nam có một vị trí thuận lợi về thiên nhiên như vậy nên nền Y học
dân tộc cổ truyền phát triển từ lâu đời, chiếm vị trí đặc biệt trong việc bảo vệ
sức khoẻ nhân dân trong suốt hàng ngàn năm đấu tranh dựng nước và giữ
nước. Tiếp thu truyền thống quý báu của các thế hệ cha ông, ngày nay Đảng
và Nhà nước ta đã xây dựng nhiều chính sách, nhiều hình thức động viên
nhằm kế thừa và phát huy tốt nguồn tài nguyên quý báu có thể tái tạo được
phục vụ con người có hiệu quả nhất.
Nhiều cây cỏ đã được trồng để dùng làm thuốc, nhiều loài dùng làm
nguyên liệu cung cấp tinh dầu cho công nghiệp dược phẩm và mỹ phẩm như
bạc hà, thanh hao hoa vàng, hoa hồi…, có loại được dùng làm thực phẩm
chức năng đồ uống như các loại trà, các loại sâm v.v... Trong số đó có cây đỏ
ngọn (Cratoxylum prunifolium) thuộc loại cây mọc hoang dại và phổ biến
khắp các vùng trên lãnh thổ nước ta. Đặc biệt cây đỏ ngọn có nhiều ở các
tỉnh miền núi phía Bắc, Tây Nguyên và Nam Bộ.


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
2
Cây đỏ ngọn đã và đang được dùng để làm thuốc và làm nước uống
trong phạm vi dân gian một cách khá phổ biến ở các nước châu Á, ở Việt
Nam đặc biệt vùng đồng bào dân tộc miền núi phía Bắc nước ta. Gần đây
người ta phát hiện dịch chiết của lá cây đỏ ngọn có tác dụng chữa bệnh gan,
có tác dụng tốt với hệ thần kinh và tác dụng của nó không thua kém gì các
thuốc nhập ngoại.
Cây đỏ ngọn được dùng trong dân gian đã có từ lâu, nghiên cứu hoá
thực vật cây đỏ ngọn thì mới chỉ được các nhà khoa học chú ý đến trong một
số năm gần đây, để góp phần làm rõ thêm thành phần hoá thực vật của cây đỏ
ngọn tạo thuận lợi cho việc dùng, sử dụng cây thuốc này làm dược liệu và
nguyên liệu cho các mục đích khác, chúng tôi chọn đề tài: “Nghiên cứu hóa
học và nhận dạng một số nhóm chất có trong cây đỏ ngọn (Cratoxylum
prunifolium). Đối tượng nghiên cứu là cây đỏ ngọn mọc hoang, thu hái vào
tháng 11 năm 2007 tại xã Thịnh Đức thành phố Thái Nguyên .


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
3
Chương 1
TỔNG QUAN
1.1. Mô tả thực vật
Theo tài liệu về phân loại thực vật, cây đỏ ngọn còn gọi là cây thành
ngạnh, lành ngạnh tuỳ thuộc vào từng địa phương tên khoa học là
“Cratoxylum prunifolium Kurtz” thuộc họ Ban “Hypericaceae” [1, 2, 5, 8, 11]
Cây đỏ ngọn phân bố rộng rãi ở vùng Nhiệt đới, Cận Nhiệt đới, Ôn đới,
chủ yếu ở vùng ôn đới bán cầu Bắc. Chi Cratoxylum ở Việt Nam có 5 loài:
Cratoxylum maingayi Kurz có tên là lành ngạnh nhỏ, phân bố ở Bắc Trung Bộ
và Lâm Đồng; Cratoxylum prunifolium Kurz lành ngạnh lá hẹp phân bố ở
vùng Đông Nam Bộ trên lãnh thổ VIệt Nam; Cratoxylum prunifolium Kurtz
cây đỏ ngọn, còn gọi là thành ngạnh đẹp mọc phổ biến ở vùng Đông Bắc
nước ta; Cratoxylum polyanthum Korth hay Cratoxylum ligustrinum Blume
lành ngạnh; Cratoxylum cochinchinense Blumer còn gọi là lành ngạnh Nam
Bộ. Hai loài cuối chủ yếu mọc ở Nam Bộ song cũng khá phổ biến ở các tỉnh
Đông Bắc Bộ.
Cây đỏ ngọn - Cratoxylum prunifolium Kurtz thường thấy mọc tự nhiên
ở hầu hết các tỉnh miền núi và trung du phía Bắc Việt Nam có nhiều ở Xuân
Mai - Ba Vì, Hà Tây, Sapa, Phú Thọ, Thái Nguyên, Bắc Cạn, Lạng Sơn, Vĩnh
Phú. Cây đỏ ngọn cũng phân bố phổ biến ở các nước Châu Á như: Trung
Quốc, Malaysia, Philippin, Ấn Độ, Indonexia, Myanma, Thái Lan.
Đặc điểm sinh trưởng và phát triển của cây đỏ ngọn:
Cây đỏ ngọn là loại cây nhỏ, thân gỗ, có gai ở gốc (trong rừng lâu năm
cây có thể cao và to) cành non có lông tơ, màu đỏ nên gọi là đỏ ngọn [11]. Lá
hình mác dài 12 - 13 cm, rộng 3,5 - 4 cm, mọc đối xứng, cuống ngắn 3 - 5
mm. Mặt gân chính màu đỏ đến 1/3 lá non, gân lá và lá có màu đỏ đến quá


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
4
nửa. Hoa mọc trên những cành ở kẽ lá màu trắng hoặc hồng có lông màu tía.
Quả nang dài 15mm, rộng 7 - 8mm. Hạt hình trứng dài 6mm, rộng 3mm












Hình 1.1. Ảnh cây đỏ ngọn (Cratoxylum Prunifolium Kurt, Hypericaceae)
1.2. Một số công dụng của chi Cratoxylum
Hầu hết các loài thực vật thuộc chi Cratoxylum đều được nhân dân
sử dụng làm các bài thuốc dân gian để chữa bệnh, để chăm sóc và bồi
dưỡng sức khoẻ.
Cây đỏ ngọn Cratoxylum prunifolium mới thấy dùng trong phạm vi
nhân dân, làm thuốc kích thích tiêu hoá, ăn ngon hàng ngày hoặc sau khi đau
yếu, sau khi sinh. Kinh nghiệm cho thấy ngày uống chừng 15 - 30 g lá khô
dưới hình thức sắc hoặc pha như trà. Có khi phối hợp với lá vối nấu nước
uống cho tiêu cơm đã đem lại hiệu quả cao cho sức khoẻ con người [11].
Nhân dân ta ở các vùng đã thu hái lá cây đỏ ngọn vào dịp tết Đoan Ngọ phơi
khô để nấu nước uống mỗi khi cảm thấy cơ thể mệt mỏi..


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
5
Trong những năm gần đây một số tác giả đã nghiên cứu tác dụng chữa
bệnh của dịch chiết toàn phần lá và thân cây đỏ ngọn. Nhóm nghiên cứu của
Học viện Quân Y - Hà Nội cho biết cây đỏ ngọn ít độc, dịnh chiết toàn phần
của lá và thân cây đỏ ngọn có tác dụng chống ôxi hoá tốt, hoạt tính đạt 69%
trong khi tanakan chỉ đạt 48% [9] và có tác dụng hoạt huyết, làm lưu thông
máu, giảm đông ở những trường hợp tăng đông [12].
Bộ môn Dược học quân sự - Học Viện Quân Y trên cơ sở nghiên cứu lâm
sàng dịnh chiết của lá đỏ ngọn Cratoxylum prunifolium trên chuột nhắt trắng và
thỏ có so sánh với thuốc tanakan do hãng Beaufour Ipsen của Pháp sản xuất đã
đưa ra kết luận:
Dịch chiết toàn phần lá đỏ ngọn và dịch chiết etylaxetat lá đỏ ngọn đều
có ảnh hưởng lên hoạt động của hệ thần kinh ở các mức độ khác nhau:
- Dịch chiết etylaxetat và dịch chiết toàn phần lá đỏ ngọn, Tanakan đều
có tác dụng hoạt hoá hệ thần kinh thực vật, thể hiện ở sự tăng rõ hàm lượng
Catecholamin trong máu động vật thí nghiệm sau khi uống các thuốc này.
- Dịch chiết etylaxetat lá đỏ ngọn có tác dụng tương đương Tanakan
gây hoạt hoá đồng bộ các tế bào não ở thỏ thực nghiệm, thể hiện làm giảm
thành phần sóng chậm delta, tăng thành phần sóng alpha trên điện não đồ, còn
dịch chiết toàn phần lá đỏ ngọn không thể hiện rõ tác dụng hoạt hoá hệ thần
kinh trung ương.
- Dịch chiết etylaxetat lá đỏ ngọn có tác dụng làm tốt cả hai quá trình
hưng phấn và ức chế có điều kiện ở não bộ động vật thí nghiệm (thông qua
hoạt động phản xạ có điều kiện), tương đương với Tanakan và tốt hơn tác
dụng này của dịch chiết toàn phần lá đỏ ngọn.
- Mức độ ảnh hưởng làm tăng cường chức năng hệ thần kinh trung
ương của các chất theo thứ tự giảm dần: dịch chiết etylaxetat lá đỏ ngọn,
Tanakan, dịch chiết toàn phần lá đỏ ngọn [4].


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
6
Đối với cao nước (cặn tổng) 30 - 80 mg/kg có hoạt tính kháng khuẩn
với các vi khuẩn staphylococcus auresu, Escherichia coli, Salmonella typhi.
DÞch chiÕt tæng sè tõ l¸ c©y Cratoxylum cochinchinense ë Th¸i Lan ®·
được ng-êi ta thö nghiÖm vµ cho thÊy chóng cã t¸c dông chèng nhiễm khuẩn,
chống ôxi hoá, những hoạt động của tế bào [22, 23, 24].
Ở Singapo dịch chiết cây Cratoxylum cochinchinense được sử dụng
trong nhân dân có tác dụng chống các gốc tự do để chữa các bệnh liên quan đến
sự căng thẳng, mệt mỏi [25].
Tại Nhật Bản, từ rễ cây của một số loài thuộc chi Cratoxylum người ta
bào chế thành thuốc làm tăng trí nhớ, chống lão hoá, mất ngủ ở người già.
Ở Trung Quốc, lá của cây đỏ ngọn người ta chế biến thành trà pha
nước uống hàng ngày và sử dụng một cách rộng rãi. Từ phần dịch chiết
etylaxetat của lá cây đỏ ngọn đã tách được các xanthone có tác dụng kháng ấu
trùng của muỗi gây sốt da vàng hơn cả chất rotenon, không những thế các
chất này còn có nhiều triển vọng làm thuốc chống mối [28].
Phần dịch chiết etylaxetat của Cratoxylum cochinchinense có tác dụng
kìm hẵm peroxit hoá lipit màng tế bào gan, kìm hãm sự xuất hiện lipit ác tính
gây viêm gan và có tác dụng bảo vệ gan tốt [27].
Theo các lương y, cây đỏ ngọn có vị ngọt, tính mát bộ phận dùng lá
non, vỏ cây, vỏ rễ. Người bị đau bụng ăn không tiêu, uống nước nấu của lá
lành ngạnh giúp tiêu hoá tốt thường dùng 100g lá non nấu một lít nước, thay
nước uống hàng ngày. Khi bị cảm nắng, sốt thì dùng lá non 50g nấu với 1 lít
nước uống.
Trong dân gian Việt Nam, cây đỏ ngọn mới thấy dùng trong phạm vi nhân
dân làm thuốc kích thích tiêu hóa, phục hồi sức khoẻ khi ốm đau, sinh đẻ, bảo vệ
thành mạch, chống lão hoá, tăng trí nhớ ở người cao tuổi. Người ta thu hái lá đỏ
ngọn vào dịp Tết mồng 5 tháng 5 (Tết Đoan Ngọ) để làm thực vật nấu nước


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
7
uống hoặc có thể ủ sau đó đem phơi khô mới dùng. Gần đây có một vài tác giả ở
Việt Nam đã nghiên cứu và cho thấy lá đỏ ngọn có tác dụng chữa bệnh, có tác
dụng chống gốc tự do, bảo vệ thành mạch, bảo vệ tế bào gan chống mù loà,
chống ôxi hoá và miễn dịch invitro khá rõ [7].
Tại cơ sở sản xuất kinh doanh thuốc thành phẩm, thực phẩm chức năng
Y học cổ truyền Thái Nguyên, Bác sĩ Hoàng Sầm đã sử dụng dịch chiết của lá
đỏ ngọn để làm thực phẩm chức năng, thay chè làm nước uống, chữa các bệnh
nan y như: ngứa, ghẻ lở, ronan thần kinh, mất ngủ, miệng đắng ăn không
ngon, giảm trí nhớ…
1.3. Tình hình nghiên cứu hóa học thực vật chi Cratoxylum
1.3.1. Các hợp chất có khung triterpen
Theo tài liệu [19] từ dịch chiết n-hexan của thực vật Cratoxylum
cochinchinense đã tách được ngoài các triterpen có 5 vòng ngưng tụ nhóm
lupeol và β-mangostin còn phân lập được các triterpen có hai vòng ngưng tụ.
Sau khi tách bằng các phương pháp sắc kí và dựa vào kết quả phân tích các
phổ của các chất được tách ra người ta đề nghị công thức cấu tạo của 7 hợp
chất triterpen hai vòng là:

R

I.a: (13E,17E)-polypoda-8 (26),13,17,21-tetraen-3β-ol; (R= β-OH).
I.b: -polypodatetraene; (R= H).


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
8
30
27 28 29
26
R
25


II.a: (13E,17E)-polypoda-7,13,17,21-tetraen-3β-ol; (R= β - OH).
II.b:  - polypodatetraene; (R = H).
II.c: (13E,17E)-3β-axetoxypolypoda-7,13,17,21-tetraene; (R= β - OAc).
II.d: (13E,17E)-polypoda-7,13,17,21-tetraen-3-one; (R= O).

R

III.a: Polypoda-13,17,21-trien-8-ol; (R=H).
III.b: Polypoda-13,17,21-trien-3-one; (R =β - OH).
III.c : Polypoda-13,17,21-trien-3β, 8-diol; (R= O).
1.3.2. Các chất axit hữu cơ
Từ lá một loại rau thuộc loài Cratoxylum formosum ở Thái Lan Pilchaon
Maisuthisakul [23] đã phân lập được hai axit hữu cơ IV, V và cho biết các
hợp chất ấy đều có hoạt tính chống oxi hóa. Sau khi tách, phân lập tác giả
đã đề nghị cấu trúc của nó có công thức là:


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
9
COOH
HO
OH
HO O
O
OH
OH

IV: Acid chlorogenic

HO
HO
O
OH
OH
O
HO
O
OH HO
O
O

V: Acid dicaffeoylquinic
1.3.3. Các chất có khung xanthone
Các xanthone là nhóm chất lớn nhất, phổ biến nhất có ở hầu hết các
loài thuộc chi Cratoxylum [6, 14, 17, 19, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 29, 30].
Đã phát hiện ra là các xanthone và dẫn xuất dưới dạng C-glycoside của
chúng. Từ loài Cratoxylum cochinchinense [25] Soon Yew Tang cùng với các
cộng sự đã phân lập được C-glicoside của xanthone và xác định được công
thức cấu tạo của nó có dạng VI.


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
10

O OH
OH
HO
OH O
O
HO
HO
OH

VI: 1,3,6,7-tetrahydroxyxanthone- C
2
-β-D-glycoside.
Từ loài Cratoxylum formosum Nawong Boonnak cùng các cộng sự [22]
cũng đã phân lập được các xanthone có cấu trúc VII dưới đây:
O OCH
3
HO
O
O OH

O HO
O OH
MeO
R
1

VII.a: Dulxis-xanthone VII.b: Β-mangostin; (R
1
= OMe)
VII.c: -mangostin; (R
1
= OH)

O OH
R
1
O OH
OH

VII.d: Formoxanthone A; (R
1
= ).


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
11
O O
MeO
HO
O OH R
1

VII.e: 3-isomangostin; (R
1
= ).
VII.e
1
: 3,4-dihidro- 5,9-dihidroxy-8-methoxy-7-(3-methoxy-3-methylbutyl)-
2,2- dimethyl-2H,6H-pyrano-[3,2-β] xanthen-6-one; (R
1
= ).
VII.e
2
: 3,4-dihidro-5,9-dihidroxy-7-(3- hidroxy-3-methybutyl)-8-methoxy-
2,2- dimethyl-2H,6H-pyrano-[3,2-β] xanthen-6-one; (R
1
= ).

O R
2
R
1
O OH
OH
HO

VII.f: Isocudraniaxanthone B; (R
1
= H; R
2
= OMe).
VII.f
1
: Gerontoxanthone I; (R
1 =
; R
2
= OH).

O O R
2
O OH
OH R
1

VII.g: 10-O-methylmaclur-xanthone; (R
1
= ; R
2
= OMe).
VII.g
1
: Macluraxanthone; (R
1
= ; R
2
= OH).
OMe
OH


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
12
VII.g
2
: Xanthone V
1
. (R
1
= ; R
2
= OH).

VII.g
3
: 6 - deoxyjacreubin; (R
1
= H; R
2
= H).

O
R
1
O OH
OH
O


VII.h: Formoxanthone B; (R
1
= ).
Từ loài Cratoxylum cochinchinese của miền Nam nước ta Lê Thị Diệu
Nguyên và Leslie J. Harrison [19] đã phân lập được ngoài các triterpen I, II và
III. Hai nhà nghiên cứu xác định được các xanthone có cấu trúc VIII.a,VIII.b.

O
R
O OH
HO
OH

VIII.a: 1,3,7-trihydroxy-2,4-di (3-methyl-but-2-enyl) xanthone; (R = prenyl).
VIII.b: 2-geranyl-1,3,7- trihydroxy-4-3- methylbut-2-enyl) xanthone; (R=geranyl).
Từ loài Cratoxylum maingayi [14] người ta cũng phân lập được một số
hợp chất xanthone (IX), các chất này có cấu trúc đơn giản nhưng đều có tác
dụng như các chất có hoạt tính chống oxi hoá tốt.


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
13
O
O OH
R
HO

IX.a: 1-7- dihidroxyxanthone; (R = H).
IX.b: 1,7- dihidroxy - 4- methoxyxanthone; (R = OMe).

O
O OMe
OH
OH
8
7
6
5
8
'
10
'
4
'
9
'
1
3
2
4

IX.c: 2,8 - dihidroxy - 1- methoxyxanthone.

O
O OMe
OMe
OMe
OMe
RO
1
2
3
4
5
6
7
9
'
4'
10
'
8
'
8


IX.d: 7-hidroxy-1,2,3,8 -tetramethoxyxanthone; (R = H).
Từ loài Cratoxylum formosanum người ta cũng phát hiện được các
xanthone có cấu trúc phân tử như sau [21, 22] .
O
OMe
OMe
R
3
R
1
R
2
O

X.a: 1,7-dihidroxy-5,6-dimethoxy xanthone; (R
1
= R
2
=R
3
= OMe).
X.a
1
: 1,2,3,8-tetramethoxy xanthone; (

R
1
= R
3
= OH; R
2
= H).
X.a
2
: 1,2,3,4,8-pentamethoxy xanthone; (R
1
=R
3
=OMe;R
2
=H).


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
14
O
OH
R
1
O
HO
R
2

X.b: 1,7-dihidroxy-4-methoxy xanthone; (R
1
= OMe; R
2
= H).
X.b
1
: 1,7-dihidroxymethoxy xanthone; (R
1
= R
2
= H).
X.b
2
: 1,7-dihidroxy-8-methoxy xanthone; (

R
1
= H; R
2
= OMe).
O
O OH
O
OH
HO

O
OMe O
MeO
MeO
OMe

X.c: Maclurathone X.d: 1,5,6,7-tetramethoxy xanythone
O
O
OH HO
OMe OMe

X.e: 2,7-dihidroxy-1,8-dimethoxy xanthone.

O
O
HO
OMe OH
OH

X.f: 1,4,7-trihidroxy-8-methoxy xanthone.


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
15

O
O
HO
OH
OH

O
O OH
HO
OH
OH

X.g: 1,4,7-trihydroxy xanthone. X.h: 1,3,5,6-tetrahidroxy xanthone.
O
O O
HO OCH
3
R
H
3
CO
2
'
1
' 1
A
3 4' 4
''
9
'
8
'
B


X.i: Fruniflorone; (R= ) [22]
1.3.4. Một số đại diện của khung anthraquinon
Từ loài Cratoxylum formosum ngoài việc xác định các xanthone
Nawong Boonnak, Chatchanok Karalai và các cộng sự [22] còn phân lập
được các anthraquinon có các cấu trúc XI. Các tác giả còn cho biết các chất
này có hoạt tính sinh học rất cao. Chúng có tác dụng tốt trong việc điều trị
bệnh tiểu đường, viêm nhiễm, hạ đường huyết [20].

OH O OH
OR
O

XI.a: 3-geranyloxy-6-methyl-1,8-dihidroxy-anthraquinon;
(R= )
XI.a
1
: madagascin; (R = )
5
''
4
'''
OH
2
''
1''
3''


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
16
XI.a
2
: physcion; (R = Me)
XI.a
3
: emodin; (R = H )







XI.b: 11-hidroxyl-5-methoxy-2,2,9-trimethyl-2H-anthra-[1,2-β] pyran-7, 12-dion.


OMe
OH O
O
OH

O
O OH
O
OH
HO

XI.c: Vismiaquinon XI.d: 3,4 - dihidrojacareubin
1.3.5. Một số đại diện của khung flavonoit
Từ loài Cratoxylum cochinchinense, Cratoxylum formosanum nhiều tác
giả đã phân lập được 2 flavonoit XII.a và XII.b [18, 13, 15]. Chúng có hoạt
tính kìm hãm peroxit hoá lipit màng tế bào gan, có tác dụng tăng khả năng
thải độc của gan, có tác dụng kìm hãm sự xuất hiện lipit ác tính.

O HO
OH O
OH
OH

O HO
OH O
OH
OH
OH

XII.a: Đihiđrokampherol XII.b: Taxifolin
O O OH
OMe
O


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
17
1.4. Những nghiên cứu hoá thực vật loài Cratoxylum prunifolium.
Từ lá của loài Cratoxylum prunifolium, Xue-Li-Cao, Yoichiro Ito đã
dùng phương pháp sắc kí khí lỏng tốc độ cao phân lập được epigallocatechin
gallat (XIII.a) và epicatechin gallat (XIII.b) [27].
O
C
O
OH
OH
OH
OH
OH
OH
OH
HO
O

XIII.a: Epigallocatechin-3-O- gallate
O
C
O
OH
OH
OH
OH
OH
OH
HO
O

XIII.b: Epicatechin-3-O-gallate
Theo Nguyễn Liêm và các cộng sự [10], bằng các phản ứng định tính
cho biết Cratoxylum prunifolium có chứa các flavonoit, tanin pyrocatechic
phitosterol saponin triterpen và các axit hữu cơ, đường khử. Tác giả còn cho
biết ở cây đỏ ngọn của Việt Nam không thấy có ancaloit và anthraquinon
Từ vỏ cây đỏ ngọn Cratoxylum prunifolium. Phạm Đình Hùng, Nguyễn
Diệu Liên Hoa và các cộng sự tại Đại học Quốc gia thành phố Hồ Chí Minh
đã phân lập được macluraxanthone, 1,7-đihidroxanthone và hai xanthone mới


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
18
[6] và cho biết chúng đều có tác dụng diệt muỗi gây sốt rét và có tác dụng tốt
trong việc diệt mối.
Từ vỏ và rễ cây Cratoxylum prunifolium trồng ở tỉnh Nông Khai miền
Nam Thái Lan, Nawong Boonnak và các cộng sự đã chiết bằng điclometan,
phân lập các chất bằng sắc kí đã tách được 10 xanthone với sự khác nhau chỉ
là ở các mạch nhánh (R
1
và R
2
) [22] và tác giả đã gọi tên chúng là các
prunifloron được đánh số từ 1 đến 10. Công thức của chúng có cấu trúc XIV.
O
O R
1
R
2
OH
OR
RO
HO

Prunifloron XIV; R
1
≠ R
2
và đều là gốc ankyl hoặc dẫn xuất của nó.
R: là H hoặc CH
3

Tên của chúng lần lượt là: XIV.1 Pruniflorone A; XIV.2 Pruniflorone
B; XIV.3 Pruniflorone C; XIV.4 Pruniflorone D; XIV.5 Pruniflorone E;
XIV.6 Pruniflorone F; XIV.7 Pruniflorone G; XIV.8 Pruniflorone H; XIV.9
Pruniflorone I; XIV.10 Pruniflorone J.
Cũng từ rễ của thực vật Cratoxylum prunifolium các tác giả Thái Lan
lại phát hiện được một anthraquinon mà cấu trúc của nó được tác giả mô tả có
dạng XV.
O OH OH
O
O
OH

XV: Anthraquinon


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
19
Chương 2
PHẦN THỰC NGHIỆM
2.1. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu
2.1.1. Thu mẫu cây, xác định tên khoa học và phương pháp xử lý mẫu
Nguyên liệu để nghiên cứu gồm lá cây đỏ ngọn, thu hái vào tháng 11
năm 2007 tại xã Thịnh Đức - Thành phố Thái Nguyên.
Cây đỏ ngọn, còn gọi là cây thành ngạnh đẹp, lành ngạnh đẹp, có tên
khoa học là: “Cratoxylum prunifolium Kurtz ”, họ Hyperaceas hay họ Ban.
Mẫu cây tươi thu hái gồm cả cành nhỏ và lá được đem sấy ở 80
0
C để
diệt men, sau đó sấy khô ở nhiệt độ 50
0
C cho tới khi khô hoàn toàn. Mẫu khô
được chia riêng thành các phần lá, và cành. Chọn mẫu lá làm đối tượng
nghiên cứu. Nghiền nhỏ mẫu ngâm, chiết trong etanol 90
o
ở nhiệt độ phòng
nhiều lần.
Sau khi cất loại dung môi, cặn cô được dưới dạng xiro, chiết lần lượt
bằng các loại dung môi có độ phân cực tăng dần: clorofom, etylaxetat,
n-butanol, metanol, các dịch chiết được bay hơi dung môi bằng thiết bị cất
quay ở nhiệt độ 50
0
C dưới áp suất thấp. Các cặn thô được phân chia bằng sắc
kí cột với các hệ dung môi rửa giải có độ phân cực tăng dần để phân lập các
chất có độ phân cực gần giống nhau, kết tinh phân đoạn và kết tinh lại trong
hệ dung môi thích hợp để thu được các chất sạch .
2.1.2. Phương pháp phân lập các hợp chất từ các dịch chiết
Để phát hiện, phân lập được những hợp chất sạch từ các dịch thô khác
nhau của cây đỏ ngọn chúng tôi đã phối hợp sử dụng các phương pháp sắc kí
và kết tinh lại trong dung môi thích hợp, các phương pháp gồm:
- Sắc kí lớp mỏng (SKLM).
- Sắc kí cột silicagen thường dùng Merck 63- 200nm.
- Kết tinh phân đoạn và kết tinh lại.


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
20
2.1.3. Phương pháp khảo sát và xác định cấu trúc hoá học các hợp chất
Các chất kết tinh phân lập ra được xác định những tính chất vật lý đặc
trưng: màu sắc, mùi vị, hệ số R
f
, điểm nóng chảy, ghi các loại phổ như: phổ tử
ngoại (UV), phổ hồng ngoại (FT-IR), phổ cộng hưởng từ hạt nhân
1
H- NMR,
phổ
13
C- NMR, tuỳ theo từng loại chất. Các số liệu phổ thực nghiệm của các
chất sạch được dùng để nhận dạng cấu trúc hoá học của chúng.
2.2. Dụng cụ, hoá chất và thiết bị nghiên cứu
2.2.1. Dụng cụ và hoá chất
Các loại dung môi dùng để ngâm, chiết mẫu là các loại tinh khiết
(pure), còn các loại dung môi dùng để sắc kí cột, sắc kí lớp mỏng hay dùng
trong phân tích là loại tinh khiết phân tích (PA).
Sắc kí lớp mỏng dùng tấm mỏng đế nhôm DC - Alufolien Kiesegel 60
F
254
Art.5554 tráng sẵn, độ dày 0,2mm được sử dụng để xác định sơ bộ số
thành phần có trong các dich chiết, các phân đoạn chạy cột và kiểm tra sơ bộ
độ sạch của sản phẩm thu được.
Các hệ dung môi khai triển SKLM:

1. n-Hexan - etylaxetat 90:10 Hệ A
2. n-Hexan - etylaxetat 95:10 Hệ B
3. Clorofom - metanol 90:10 Hệ C
4. Clorofom - metanol 50:10 Hệ D
5. Clorofom - metanol 20:10 Hệ E
Các tấm SKLM sau khi sấy khô được soi dưới đèn tử ngoại (UV-
BIOBLOCK ) ở bước sóng  = 254nm và 365nm. Thuốc thử để hiện màu là
vanilin 1% trong dung dịch metanol-H
2
SO
4
, sau đó sấy ở nhiệt độ trên 100
0
C



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
21
Các giá trị R
f
trong hệ dung môi triển khai có biểu thức:


2.2.2. Thiết bị nghiên cứu
- Nhiệt độ nóng chảy đo trên máy Boetus (Đức) hoặc trên máy
Eletronthermal IA - 9200.
- Phổ hồng ngoại ghi trên máy IMPACT - 410.
- Phổ UV đo trên máy UV 1700 Phamaspec.
- Phổ khối ghi trên máy MS- Engine - 5989- HP ion hoá bằng va chạm
eletron (LC- MS) 70ev và sử dụng ngân hàng dữ liệu DATABASE/
WILLEY 250L.
- Phổ
1
H- NMR và
13
C- NMR ghi trên máy Bruker 500MHz nội chuẩn
TMS, dung môi CDCl
3
, MeOD.
2.3. Các dịch chiết từ cây đỏ ngọn (Cratoxylum prunifolium Kurtz)
2.3.1. Các dịch chiết
Lá cây đỏ ngọn đã sấy khô, nghiền nhỏ được ngâm chiết kiệt bằng
etanol 90
0
ở nhiệt độ phòng cho đến khi thu được dịch không màu. Dịch chiết
được cất loại hết dung môi ở áp suất giảm cho đến dạng cao lỏng, xác định
khối lượng cặn khô, sau đó thêm nước vào cặn và lần lượt chiết với các loại
dung môi clorofom, etylaxetat, n-butanol, cuối cùng đuổi hết nước và hoà tan
bằng metanol.
Các dịch chiết trên được làm khô bằng Na
2
SO
4
lọc và cất dung môi
bằng thiết bị cất quay dưới áp suất giảm ở nhiệt độ 50
0
C. Cặn được sấy khô
và cân để xác định trọng lượng.
chiều dài di chuyển của chất thử
chiều dài di chuyển của dung môi
R
f
=


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
22
Như vậy từ lá cây đỏ ngọn đã thu nhận được 04 phân đoạn cặn là: cặn
trong clorofom (ĐC), cặn trong etylaxetat (ĐE), cặn trong butanol (ĐB) và
cặn trong metanol (ĐM). Sơ đồ 2.1


1. Etanol
2. Cặn trong nước

CHCl
3
EtOAc BuOH MeOH








Sơ đồ 2.1. Quy trình ngâm chiết

Bảng 2.1. Khối lượng chất tổng số được chiết từng phân đoạn lá cây đỏ
ngọn (Cratoxylum prunifolium Kurtz)

Khối lượng mẫu lá
(gam)
Cặn chiết
Clorofom Etylaxetat n-Butanol Metanol
787,4 52,264 34,654 40,411 26,604
100% 6,63% 4,40% 5,13% 3,38%

MẪU KHÔ
Cặn CHCl
3

(ĐC)
Cặn BuOH
(ĐB)
Cặn EtOAc
(ĐE)

Cặn MeOH
(ĐM)
ĐC
1
ĐE
1

ĐC
2
ĐC
3


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
23
2.3.2. Khảo sát định tính các dịch chiết
Dùng các thuốc thử đặc hiệu để phát hiện các nhóm hợp chất thiên
nhiên có trong hoạt tính sinh lí cao trong thực vật [3] chúng tôi thu được kết
quả thử định tính với các nhóm chất, kết quả được chỉ ra ở bảng 2.2.
Bảng 2.2. Phát hiện các nhóm chất trong cây đỏ ngọn
Stt Nhóm chất Thuốc thử đặc hiệu Hiện tượng Kết quả
1 Saponin Tạo bọt Bọt bền trong axit ++
2 Glicozttim Kelle-Kiliani Vàng nâu -
3 Cumarin Axit và kiềm Kết tủa bông ++
4 Poliphenol (FeCl
3
+K
3
[Fe(CN)
6
]) 1% Xanh thẫm +++
5 Flavonoit Xianidin Từ hồng đến đỏ ++
6 Steroit Liberman-Bourchard Màu xanh vàng ++
7 Ancaloit Dragendorf Màu vàng da cam -
8 Đường khử Felinh
Cho kết tủa màu
đỏ gạch
++
Ghi chú: Dấu (+) là có phản ứng dương tính, (++) là có phản ứng tính
rất rõ, (-) là không có phản ứng.
2.3.3. Thử hoạt tính sinh học
Thử hoạt tính vi sinh vật kiểm định bằng định tính theo phương pháp
khuyếch tán trên thạch, sử dụng khoang giấy lọc tẩm chất thử theo nồng độ
tiêu chuẩn tại bộ môn Vi Sinh trường Đại học Y Thái Nguyên.
Các chủng vi sinh vật thử gồm đại diện các nhóm:
 Vi khuẩn Gr (-) Escherichia coli.
 Vi khuẩn Gr (+) Staphylococcus auresu.
 Vi khuẩn: Salmonella typhi.



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
24





Hình 2.1. Ảnh được gây ức chế xung quanh giếng thạch



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
25
Chúng tôi còn tiến hành thử các ứng dụng làm thực phẩm chức năng
tại cơ sở sản xuất kinh doanh thuốc thành phẩm, thực phẩm chức năng Y học
cổ truyền Thái Nguyên. Kết quả thử hoạt tính các dịch chiết thô được trình
bày trong bảng 2.3.
Bảng 2.3. Kết quả thử hoạt tính sinh học của dịch chiết thô
từ lá cây đỏ ngọn (Cratoxylum prunifolium)
Dịch chiết
Đường kính vùng ức chế xung quanh giếng thạch(mm)
Staphylococcus auresu Escherichia coli Salmonella typhi
Đường
kính
(mm)
Hoạt tính
Đường
kính
(mm)
Hoạt
tính
Đường
kính
(mm)
Hoạt
tính
Cặn tổng (H
2
O) 30 + 26 + 27 +
Cặn EtOAc 29 + 17 + 18 +
Chú ý: Dấu (+) là phản ứng có hoạt tính.
2.4. Chiết suất, phân lập và tinh chế các chất từ cây đỏ ngọn
Từ 787,4g lá Cratoxylum prunifolium khô chiết nhiều lần bằng etanol
90
0
đến khi dịch chiết trong suốt không màu, loại bỏ bớt dung môi rượu bằng
máy cất quay ở nhiệt độ 50
0
C đến khi dịch chiết còn lại ở dạng xiro đặc, thêm
nước, lắc cặn tổng số này với clorofom đến khi thu được tất cả các chất có thể
tan được trong CHCl
3
đều được lấy ra hết, cô cạn dung dịch CHCl
3
ở nhiệt độ
thấp thu đuợc 52,264g chất (kí hiệu các chất ĐC).
Phần cặn không tan trong CHCl
3
được lắc nhiều lần với EtOAc cho đến
khi dịch chiết EtOAc hoàn toàn không màu và trong suốt, cô cạn dịch EtOAc
trong máy cất quay thu được 34,654g chất tổng số (kí hiệu là các chất ĐE).
Phần không tan được trong EtOAc, được lắc với n-butanol sau đó
cũng cô cạn trong điều kiện áp suất thấp được 40,410g chất (kí hiệu là các
chất ĐB).


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
26
Các chất cặn còn lại không tan trong các dung môi trên cho tan trong
MeOH thu đựoc 32,346g chất (kí hiệu là các chất ĐM).
2.4.1. Dịch chiết clorofom
Từ 11g cặn từ dịch clorofom của lá đỏ ngọn kí hiệu (ĐC) được phân
chia trên sắc kí cột silicagel với các hệ dung môi n-hexan - clorofom với các
tỷ lệ tăng dần clorofom từ 0% đến 100% kiểm tra các phân đoạn trên sắc kí
lớp mỏng, các phân đoạn giống nhau đem gộp lại và cất loại dung môi thu
được ba chất ĐC-1, ĐC-2, ĐC-3.
2.4.1.1. Taraxeron (Friendoolean - 14- en-3-on) (ĐC
1
)
Rửa giải với các hệ dung môi n- hexan-clorofom (50:1), sau khi cất loại
dung môi, cặn thu được kiểm tra trên SKLM trong hệ dung môi B và phát
hiện bằng vanilin 1% trong dung dịch CH
3
OH- H
2
SO
4
, kết tinh lại trong dung
môi trên thu được 21mg chất rắn, tinh thể hình kim, màu trắng có nhiệt độ
nóng chảy 278-280
0
C và cho các đặc trưng của một tritecpen.
Phổ FT-IR (KBr); ν
max
(cm
-1
): 1720 (C=O); 1500 (C=C); 3050 (CH
3
);
2940 (CH).
Phổ LC- MS, m/z (%) 424 [M
+
]; 408 [M-O]
+
.
PHổ
1
H- NMR (500MHz, CDCl
3
):  (ppm) 0,762ppm (3H, s, CH
3
);
0,84ppm (3H, s, CH
3
); 0,885ppm (3H, s, CH
3
); 0,996ppm (3H, s, CH
3
);
1,011ppm (3H, s, CH
3
); 1,02ppm (3H, s, CH
3
); 1,07ppm (3H, s, CH
3
)
5,48ppm (1H, dd, 3,21 và 8,17Hz).
Phổ
13
C - NMR (500MHz, CDCl
3
);  (ppm): 38,35 (Cl); 33,08 (C
2
);
217,3 (C
3
); 47,56 (C
4
); 55,77 (C
5
); 19,91 (C
6
); 33,57 (C
7
); 38,87 (C
8
); 48,80
(C
9
); 33,57 (C
10
); 17,44 (C
11
); 36,67 (C
12
); 37,74 (C
13
); 157,59 (C
14
); 117,19
(C
15
); 34,12 (C
16
); 35,57 (C
17
); 48,70 (C
18
); 40,64 (C
19
); 28,79 (C
20
); 35,11
(C
21
); 37,69 (C
22
); 29,56 (C
23
); 21,57 (C
24
); 14,79 (C
25
); 25,56 (C
26
); 29,92
(C
27
); 26,12 (C
28
); 33,39 (C
29
); 21,47 (C
30
).


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
27
2.4.1.2. Stigmast- 5,22- đien-24R-3β-ol
Rửa giải cột với hệ dung môi n-hexan- clorofom (50:5), sau khi cất loại
dung môi cặn thu được kiểm tra trên SKLM trong hệ dung môi A, phát hiện
bằng vanilin 1% trong dung dịch CH
3
OH- H
2
SO
4
, kết tinh lại trong hệ dung
môi trên thu được 29mg tinh thể hình kim, không màu, không mùi, có nhiệt
độ nóng chảy 152-155
0
C, R
f 
100 =61.
Phổ FT-IR (KBr); ν
max
(cm
-1
): 3429,2 (OH); 2864,7 (C-H); 1651 (C=C).
Phổ EI- MS; m/z (%): 412 [M
+
] (7); 300 (7); 255 (11); 231 (4); 213
(8); 173 (7); 145 (20); 133 (20); 83 (49,3).
Phổ
1
H- NMR (500MHz, CDCl
3
);  (ppm): 5,33 (1H, dd, j = 5Hz và
2H, H
6
); 515 (1H, dd, j
22,23
= 15, Hz, j
22,20
= 5Hz, H-22); 5,01 (1H, dd, j
23,22
=
15Hz, j
23,24
= 5Hz, H-23).
Phổ
13
C- NMR (500MHz, CDCl
3
);  (ppm): 36,4 (t, C
1
); 29,67 (t, C
2
);
71,8 (d, C
3
); 42,3 (t, C
1
); 139,2 (s, C
5
); 121,4 (d, C
6
); 37,3 (t, C
7
); 31,85 (d,
C
8
); 51,15 (d, C
9
); 36,12 (s, C
10
); 24,35 (t, C
11
); 42,18 (t, C
12
); 31,4 (s, C
13
);
56,83 (d, C
14
); 25,38 (t, C
15
); 31,6 (t, C
16
); 55,9 (d, C
17
); 12,01 (q, C
18
); 18,95
(q, C
19
); 40,47 (d, C
20
); 21,03 (q, C
21
); 138,4 (d, C
22
); 129,2 (d, C
23
); 50,01 (d,
C
24
); 33,9 (t, C
25
); 21,19 (q, C
26
); 19,79 (d, C
27
); 28,89 (q, C
28
); 12,22 (q, C
29
).
2.4.1.3. β- Sitosterol
Tiếp tục rửa giải trên cột với hệ dung môi n-hexan- clorofom (40:10),
sau khi cất loại dung môi, cặn thu được kiểm tra trên sắc kí lớp mỏng trong hệ
dung môi B, phát hiện nó bằng vanillin 1% trong dung dịch CH
3
OH- H
2
SO
4
,
kết tinh lại thu được 27mg chất rắn, tinh thể hình kim, nóng chảy 140- 141
0
C,
R
f
.100 = 71.
Phổ FT-IR (KBr); ν
max
(cm
-1
): 3450 vân rộng (H
32
, C
3
); 3010- 1650
(liên kết đôi).


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
28
Phổ EI- MS; m/z (%): 414 [M
+
] (20); 413 [M-H]
+
(41); 398 (28); 397
(100); 395 (32); 383 (11); 361 (11); 257 (3); 255 (6,3); 151 (5,6); 139 (11).
Phổ
1
H-NMR (500MHz, CDCl
3
);  (ppm): 0,68 (3H, s, CH
3
-18); 1,01
(3H, s, CH
3
-19); 0,81 (3H, d, j, 7Hz, CH
3
-26); 0,88 (3H, d, j, 7Hz, CH
3
-27);
0,83 (3H, t, 7,32Hz, CH
3
-29); 0,92 (3H, d, j, 10Hz, CH
3
-21); 3,52 (1H, m, H-
3); 5,42 (1H, d, j, 5Hz, H-6).
Phổ
13
C- NMR (500MHz, CDCl
3
);  (ppm): 141,1 (s, C
5
); 121,8 (d,
C
6
); 71,8 (d, C
3
); 56,8 (d, C
14
); 56,1 (d, C
17
); 50,2 (d, C
9
); 45,7 (d, C
24
); 42,5
(s, C
13
); 42,4 (t, C
4
); 39,8 (t, C
12
); 37,3 (t, C
1
); 36,5 (s, C
10
); 36,2 (d, C
20
);
33,9 (d, C
8
); 31,9 (t, C
7
); 31,7 (t, C
2
); 29,2 (d, C
25
); 28,3 (t, C
16
); 26,2 (t, C
23
);
24,2 (t, C
15
); 21,1 (t, C
11
); 19,8 (q, C
26
); 19,4 (q, C
19
); 19,1 (q, C
27
); 18,8 (q,
C
21
); 11,9 (q, C
29
); 11,9 (q, C
18
); 23,2 (t, C
28
).
2.4.2. Dịch chiết trong etylaxetat (ĐE)
Từ 15g cặn chiết etylaxetat của lá cây đỏ ngọn (ký hiệu ĐE) được tiến
hành tách các chất trên sắc kí cột silicagel, rửa giải cột sắc kí bằng hệ dung
môi clorofom- metanol có tỷ lệ theo độ tăng dần của dung môi phân cực,
metanol 0% -100%, kiểm tra các phân đoạn trên sắc kí lớp mỏng, thuốc thử
phát hiện (F
e
Cl
3
+ K
3
[F
e
(CN)
6
]) 1% sau đó gộp các phân đoạn giống nhau,
đuổi hết dung môi và kết tinh lại thu đựơc chất (ĐE
1
).
* Axit gallic (ĐE
1
)
Rửa giải trên cột bằng hệ dung môi clorofom- metanol (90:10), sau khi
kiểm tra bằng SKLM với hệ dung môi C, cất loại dung môi, thu được cặn thô,
kết tinh lại trong hệ dung môi trên thu được 70mg chất rắn màu vàng, tinh thể
hình kim, có t
n/c
khoảng 248- 258
0
C.
Phổ FT-IR (KBr); ν
max
(cm
-1
): 1700 (C=O); 3100 (OH) rất tù.
Phổ
1
H-NMR (500MHz, MeOD); (ppm): 7,092 (2H, C
2
và C
6
).
PHổ
13
C-NMR (500MHz, MeOD); (ppm): 121,960 (C
1
); 139,559 (C
4
);
110,349 (C
2
, C
6
); 146,345 (C
3
, C
5
); 170,364 (C
7
).


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
29
Chương 3
THẢO LUẬN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
3.1. Nguyên tắc chung
Trong quá trình nghiên cứu hóa thực vật cần phải tôn trọng nguyên tắc
chung là không được làm thay đổi cấu trúc hóa học của các chất sẵn có trong
thực vật và không làm ảnh hưởng đến thành phần hoá học của chúng tại thời
điểm lấy mẫu. Như vậy, ngay sau khi mẫu thu hái xong phải được diệt men
để tránh sự chuyển hoá do các quá trình sinh tổng hợp xảy ra ở thực vật, sấy
khô ở nhiệt độ thích hợp, bảo quản mẫu trong điều kiện khô ráo.
Để tách các chất ra khỏi thực vật có thể được tiến hành bằng nhiều cách
khác nhau: ép lấy dầu béo, cất lôi cuốn bằng hơi nước để tách các tinh dầu,
ngâm chiết bằng dung môi hữu cơ v.v… Tuy nhiên có hai phương pháp phổ
biến hơn cả để tách các chất ra khỏi thực vật:
Cách 1: Trước tiên chiết bằng dung môi rượu-nước để tách hầu hết các
chất ra khỏi thực vật. Sau đó chiết sàng lọc bằng các dung môi từ không phân
cực đến các dung môi có độ phân cực tăng dần. Các dịch chiết chứa các hợp
chất có độ phân cực gần nhau sẽ được cất đuổi dung môi, bảo quản dùng cho
các quá trình tách tiếp theo.
Cách 2: Chiết và phân lập các chất mẫu thực vật bằng các loại dung
môi từ không phân cực đến có độ phân cực tăng dần như lần lươt là: n-hexan,
clorofom, etylaxetat, n-butanol, metanol(etanol), etanol-nước.
Việc chiết lấy chất từ lá thực vật (Cratoxylum prunifolium) được thực
hiện theo cách 1 (sơ đồ 2.1).
Các dịch chiết tổng số và các phần chiết thô đem thử nghiệm với các
tác động sinh học và độc tố tế bào nhằm giúp cho việc định hướng tìm kiếm
các chất có hoạt tính sinh lý cao trong những dịch chiết.
Kết quả thử hoạt tính với vi sinh vật kiểm định nêu trong bảng (2.2)


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
30
3.2. Phân tích định tính và phát hiện các nhóm chất
Dùng các thuốc thử đặc hiệu để phát hiện các nhóm hợp chất thiên
nhiên có hoạt tính sinh lý cao trong thực vật [3] cho thấy trong dịch chiết
bằng clorofom của lá cây đỏ ngọn có chứa các axit hữu cơ, streroit,
triterpenoit. Ở dịch chiết bằng etylaxetat của lá cây đỏ ngọn có chứa các hợp
chất polyphenol, các hợp chất flavonoit, cũng ở phần dịch chiết này đã tách
được axit gallic và dẫn xuất của nó. Trong dịch chiết n-butanol có chứa các
tanin, các đường khử. Không phát hiện thấy có ancaloit, các xianua trong các
dịch chiết của lá đỏ ngọn. Kết quả của các phản ứng định tính để xác định các
nhóm hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh lý cao được chỉ ra ở bảng 2.2.
3.3. Phân lập và nhận dạng các hợp chất có trong các dịch chiết khác nhau
của cây đỏ ngọn
Các dịch chiết từ cây đỏ ngọn (Cratoxylum prunifolium) đều là những
hỗn hợp phức tạp chứa các hợp chất khác nhau. Để phân lập từng chất ra khỏi
hỗn hợp đã sử dụng các phương pháp sắc kí cột, chất hấp phụ dùng là
silicagel, các hệ dung môi rửa giải thích hợp và thường phải lặp lại nhiều lần.
Việc tinh chế các chất thường dùng phuơng pháp kết tinh lại trong
dung môi hoặc hệ dung môi thích hợp. Nhờ cách làm đó đã thu được các đơn
chất có độ tinh khiết cao, đáp ứng các yêu cầu để khảo sát tính chất hoá lý và
xác định quang phổ của chúng.
Khi phân lập các thành phần hoá học từ lá cây đỏ ngọn được thực hiện
như trong sơ đồ 2.1. Bằng phương pháp phân lập trên, từ dịch chiết bằng
clorofom của lá cây đỏ ngọn chúng tôi đã thu được 3 hợp chất sạch là: một
tritecpen và hai steroit; còn dịch chiết etylaxetat phân lập được axit gallic và
hỗn hợp các xanthone với flavonoit.
3.3.1. Taraxeron ( hay Frendoolean-14-en-3-on) (ĐC-1)
Chất ĐC-1 là chất rắn tinh thể hình kim, màu trắng có nhiệt độ nóng
chảy ở 278-280
0
C nó được tách từ phần cặn chiết clorofom. Bằng sắc kí cột


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
31
silicagen với hệ dung môi n-hexan:clorofom thu được chất ĐC-1, chất này
cho các phản ứng định tính của terpenoit.
Khối lượng phân tử của chất ĐC-1 được xác định bằng phổ khối LC-
MS cho biết khối lượng phân tử của [M
+
] m/z bằng 424,2 tương ứng với khối
lượng phân tử bằng 424 u và tương ứng với công thức phân tử C
30
H
48
O.
Trong phổ LC-MS còn xuất hiện pic m/z 408,2 điều này tương ứng với
mảnh [M-O]
+

với m/z bằng 408
Phổ FT-IR: cho thấy các vân hấp thụ của nhóm xeton (C=O) ở ν
max
=
1720cm
-1
, liên kết đôi (C=C) ở ν
max
= 1500cm
-1
, các nhóm CH
3
ở ν
max
=
3050cm
-1
và các nhóm CH ở ν
max
= 2940cm
-1
, không phát hiện thấy các vân
hấp thụ của nhóm OH. Điều này có thể khẳng định được hợp chất ĐC-1
không có chức rượu mà là có chức xeton.
Phổ
1
H-NMR và phổ DEPT: cho biết hợp chất ĐC-1 có tín hiệu của 8
nhóm CH
3
đều ở dạng singlet (xem hình 3.2 và 3.4) có các độ chuyển dịch
hoá học như sau: ở độ chuyển dịch δ = 0,762ppm (3H, s, CH
3
); δ = 0,841ppm
(3H, s, CH
3
); δ = 0,847ppm (3H, s, CH
3
); δ = 0,885ppm (3H, s, CH
3
); δ =
0,996ppm (3H, s, CH
3
); δ = 1,011ppm (3H, s, CH
3
); δ = 1,021ppm (3H, s,
CH
3
); δ = 1,07ppm (3H, s, CH
3
). Độ dịch chuyển hoá học ở δ = 5,48ppm
(1H, d, J = 3,21 và 8,17Hz) là của proton liên kết tại cacbon ở liên kết đôi
(nhóm = CH tại C
15
).
Phổ
13
C-NMR: nhận thấy nguyên tử cacbon ở trạng thái lai hoá sp
2

thuộc nhóm =CH có độ chuyển dịch hoá học δ = 117,19ppm. Nguyên tử
cacbon bậc 4 cũng ở trạng thái lai hoá sp
2
tham gia vào liên kết đôi với
nguyên tử này có độ chuyển dịch hoá học ở δ = 157,59ppm.
Phổ
13
C-NMR còn cho một tín hiệu ở trường rất yếu tương ứng với độ
chuyển dịch hoá học δ = 217,43ppm đặc trưng cho cacbon trong nhóm
cacbonyl tại vị trí C-3.


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
32
Như vậy, phổ NMR hoàn toàn phù hợp với phổ FT-IR không thấy có
vân đặc trưng của nhóm OH mà lại thấy xuất hiện vân đặc trưng của C=O.
Các nguyên tử H đối với nhóm C=O thấy chỉ có 2H với δ = 2,50ppm (2H,
dd, J = 7,1 và 11Hz), còn có 2 proton ở vị trí  của nhóm =CH (tại C
16
) có độ
chuyển dịch hoá học δ = 2,27ppm (2H, dd, J = 3,3 và 4,08 và 6,39).
Trên cơ sở phân tích các tính chất hoá học, nhất là phân tích các thông
tin có được từ phổ LC- MS, FT-IR, phổ cộng hưởng từ hạt nhân
1
H-NMR,
13
C-NMR, phổ DEPT, phổ HMBC, HSQC, phổ H-H COSY và phần mềm
ACD/HNMR ACD/CNMR mô phỏng phổ NMR cũng đã cho phép chúng tôi
quy kết hợp chất ĐC-1 là một triterpen phải có công thức cấu tạo như sau:

27
O
29 30
28
23
24
25 26
1
3
5
6
8
9
10
15
18
20
22
13
19 21
7
11
14
16
2
4
12
17

Taraxeron (hay Frendoolean-14-en-3-on)


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
33
Bảng 3.1. Phổ
13
C-NMR và
1
H-NMR của taraxeron (ĐC-1) từ lá đỏ ngọn

Vị trí
cacbon

13
C-NMR
(δ-ppm)
ACD/
13
C-
NMR (δ-ppm)

1
H-NMR
(δ-ppm)
1 38,35 38,4 Vùng (1,2 - 1,6)
2 33,08 34,1 2,5 (2H; dd; 7,1 và 11,0)
3 217,3 217,3 -
4 47,56 47,6 -
5 55,77 55,8 (1,99)
6 19,91 20,0 Vùng (1,2 - 1,6)
7 33,57 35,2 Vùng (1,2 - 1,6)
8 38,87 38,9 -
9 48,8 48,7 (1,78 - 1,87)
10 33,57 37,6 -
11 17,44 17,5 Vùng (1,2 - 1,6)
12 36,67 35,8 Vùng (1,2 - 1,6)
13 37,74 37,7 -
14 157,59 157,6 -
15 117,19 117,2 5,48 (1H; d; 3,21; 8,17)
16 34,12 36,7 2,27 (2H; dd; 3,3; 4;1; 6,4)
17 35,57 37,7 -
18 48,7 48,8 (1,78 - 1,87)
19 40,64 40,7 Vùng (1,2 - 1,6)
20 28,79 28,8 -
21 35,11 33,6 Vùng (1,2 - 1,6)
22 37,69 33,1 Vùng (1,2 - 1,6)
23 29,92 29,9
0,76 - 1,07
(24H của 8 nhóm CH
3
)
24 14,79 14,8
25 29,86 29,9
26 21,34 21,5
27 25,56 25,6
28 26,12 26,2
29 33,36 33,4
30 21,47 21,4


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
34

Hình 3.1


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
35

Hình 3.2


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
36


Hình 3.3


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
37

Hình 3.4


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
38
3.3.2. Stingmast -5,22-dien-24R-3β-ol (ĐC-2)
Chất ĐC-2 là chất rắn kết tinh, có nhiệt độ nóng chảy ở 152
0
-155
0
C,
tách được từ dịch chiết clorofom, phân lập bằng sắc kí cột silicagen, rửa giải
bằng hệ dung môi n-hexan-clorofom (90:10).
Phổ EI-MS cho pic ion phân tử [M
+
] ở 412 m/z. Các phổ FT-IR,
1
H-
NMR và
13
C-NMR đều khẳng định sự có mặt của nhóm hydroxyl, phổ FT- IR
có vân 3410cm
-1
rộng, còn ở phổ NMR cho δ
H-3α
= 3,47ppm và δ
C-3
=
71,6ppm). Phân tử có hai nối đôi không liên hợp (IR cho ν
max
ở 1622cm
-1
).
Phổ
1
H-NMR của các proton thuộc nhóm metyl (CH) cũng đã khẳng
định điều ấy, δ
H-6
= 5,33ppm (1H, dd, j =15Hz và 2Hz); δ
H-22
= 5,15ppm (1H,
dd, j =15Hz và 5Hz); δ
H-23
= 5,01ppm (1H, dd, j =15Hz và 5Hz). Phổ
13
C-
NMR cho thấy δ
C-5
= 139,2ppm; δ
C-6
= 121,4ppm; C
C-22
= 138,4ppm và δ
C-23

= 129,2ppm. So sánh các số liệu phổ
1
H-NMR và
13
C-NMR của chất ĐC-2
với số liệu phổ NMR của stingmasterol [16] hoàn toàn tương tự nhau và được
chỉ ra ở bảng 3.2.
Dựa trên phân tích các số liệu về phổ EI-MS, FT-IR và các phổ NMR của
hợp chất ĐC-2 hoàn toàn phù hợp với cấu trúc của chất Stingmast -5,22-dien-
24R-3β-ol.
HO
2
1
3
4
5
6
7
8
9
10
18
12
13
16
17
19
21
22 24
26
27
28
29
11
14
15
23 25
20

Stingmast -5,22-dien-24R-3β-ol


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
39
Bảng 3.2. Phổ
13
C-NMR của các chất ĐC-2 và stingmasterol [16]


Phổ
13
C-NMR của Stigmasterol
(ĐC-2)
Phổ
13
C-NMR của Stigmasterol
[16]
Vị trí
cacbon
13
C-NMR(δ-ppm)
Vị trí
cacbon
13
C-NMR(δ-ppm)
1 36 1 37,28
2 29 2 31,66
3 71 3 71,78
4 42 4 42,31
5 140 5 140,76
6 122 6 121,69
7 37 7 31,91
8 31 8 31,91
9 51 9 50,18
10 36 10 36,52
11 24 11 21,09
2 42 2 39,70
13 40 13 42,22
14 57 14 56,88
15 25 15 24,38
16 30 16 28,92
17 56 17 55,97
18 12 18 19,40
19 19 19 12,06
20 40 20 40,50
21 19 21 21,23
22 138 22 138,31
23 129 23 129,29
24 50 24 51,25
25 32 25 31,91
26 21 26 21,09
27 21 27 19,00
28 19 28 25,41
29 12 29 12,25


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
40

Hình 3.5


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
41



Hình 3.6


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
42

Hình 3.7


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
43

Hình 3.8


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
44
3.3.3. β-sitosterol (ĐC-3)
Chất ĐC-3 là chất rắn tinh thể hình kim, không màu, nóng chảy 140-
141
0
C, nó được tách từ dịch chiết clorofom, trong hệ dung môi n-hexan-
clorofom (40:10).
Phổ EI- MS, m/z (%) cho [M
+
] = 414 (23), [M-1]
+
= 413 (41).
Từ phổ EI-MS cho pic [M+] = 414 ứng với công thức phân tử C
29
H
50
O.
Phổ hồng ngoại, phổ
1
H-NMR và phổ
13
C-NMR cho thấy trong phân tử
có nhóm OH tại vị trí C-3 (IR có vân 3450 cm
-1
rộng, δ
H-3α
= 3,57ppm và δ
C-3

= 72,1ppm). Một liên kết đôi tại C
6
(phổ IR có ν
max
= 3010cm
-1
và 1650cm
-1

ứng với dao động hoá trị của liên kết đôi; còn trên phổ
1
H-NMR cho δ
H-6
=
5,42ppm (1H, d, J, 5,2Hz), phổ
13
C-NMR cho δ
C-5
= 141,1ppm và δ
C-6
=
121,7ppm). So sánh các số liệu phổ
1
H-NMR và
13
C-NMR của chất ĐC-3 với
số liệu phổ NMR của β-sitosterol [16] hoàn toàn tương tự nhau và được chỉ
ra ở bảng 3.3.
Dựa trên phân tích các số liệu về phổ EI-MS, FT-IR và các phổ NMR của
hợp chất ĐC-3 hoàn toàn phù hợp với cấu trúc của chất β-sitosterol.
HO
2
1
3
4
5
6
7
8
9
10
18
12
13
16
17
19
21
22 24
26
27
28
29
11
14
15
23 25
20

β-sitosterol



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
45
Bảng 3.3. Phổ
13
C-NMR của các chất ĐC-3 và β-sitosterol [16]

Phổ
13
C-NMR của β-sitosterol
(ĐC-3)
Phổ
13
C-NMR của β-sitosterol
[16]
Vị trí
cacbon
13
C-NMR(δ-ppm) Vị trí cacbon
13
C-NMR(δ-ppm)
1 37 1 37,27
2 31 2 32,54
3 71 3 71,77
4 42 4 42,29
5 140 5 140,75
6 121 6 121,69
7 32 7 31,92
8 32 8 31,92
9 50 9 50,15
10 36 10 36,51
11 21 11 21,10
12 40 2 39,80
13 42 13 42,23
14 57 14 56,78
15 24 15 24,31
16 28 16 28,25
17 56 17 56,08
18 12 18 19,39
19 19 19 11,89
20 36 20 36,16
21 19 21 18,80
22 34 22 33,96
23 26 23 26,11
24 46 24 45,85
25 29 25 29,18
26 19 26 18,82
27 19 27 19,05
28 23 28 23,08
29 12 29 11,99


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
46







Hình 3.9

















Hình 3.9



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
47

Hình 3.10


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
48

Hình 3.11


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
49

Hình 3.12


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
50
3.3.4. Axit gallic (ĐE-1)
Các chất thu được từ dịch chiết etylaxetat (ĐE) được phân chia trên sắc
kí cột với chất hấp phụ silicagel, rửa giải bằng hỗn hợp dung môi clorofom-
metanol với tỉ lệ metanol tăng dần từ 0% - 100% thu được nhiều phân đoạn
khác nhau trong đó có phân đoạn CHCl
3
:MeOH (9:1) chứa một chất sạch
được kí hiệu là chất ĐE-1.
Chất ĐE-1 là chất rắn, tinh thể hình kim có nhiệt độ nóng chảy ở
248
0
C-250
0
C.
Phổ IR cho vân hấp thụ mạnh ở ν
max
= 1700cm
-1
đặc trưng cho nhóm
cacboxyl có ν
max
= 1700cm
-1
, với vân rất tù có số sóng ν
max
= 3100cm
-1
đặc
trưng cho nhóm OH của phenol.
Phổ
1
H-NMR cho tín hiệu 7,092ppm ứng với hai proton ở hai vị trí C
2

và C
6
.
Phổ
13
C-NMR cho thấy các tín hiệu: δ
C-1
= 121,960ppm; δ
C-4
=139,559
ppm; δ
C-2
= δ
C-6
=110,349ppm; δ
C-3
= δ
C-5
=146,345ppm; δ
C-7
=170,364ppm.
Những số liệu về phổ NMR của chất ĐE-1 hoàn toàn phù hợp với phần
mềm ACD/NMR của axit gallic (xem bảng 3.4).
Bảng 3.4. Số liệu phổ NMR của ĐE-1 và số liệu phổ NMR trong
phần mềm ACD/NMR của axit gallic
Vị trí
cacbon
Phổ của chất ĐE-1 Phần mềm ACD của axit gallic
13
C-NMR
(δ-ppm)
1
H-NMR
(δ-ppm)
ACD/
13
C-
NMR (δ-ppm)
ACD/
1
H-NMR
(δ-ppm)
1 121,96 - 123,88 -
2 110,35 7,092 111,35 7,11
3 146,35 - 147,44 -
4 139,56 - 138,18 -
5 146,35 - 147,44 -
6 110,35 7,092 111,35 7,11
7 170,36 - 167,37 -



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
51
Trên cơ sở phân tích các số liệu về phổ FT-IR, NMR và phần mềm
ACD/NMR. Cấu trúc của axit gallic là:

COOH
OH
HO
OH
2
3
4
5
6
7
1

Axit gallic

Từ dịch chiết etylaxetat, ngoài axit gallic còn thu được một số phân
đoạn không sạch khác có chứa các chất cho phản ứng màu với xianidin; cho
phản ứng tạo màu xanh đen với FeCl
3
. Các mẫu này có chứa hỗn hợp các
flavonoit, các polyphenol có hệ số R
f
rất gần nhau và việc tách chúng bằng
cột silicagen chưa đạt được sự phân chia tốt.
Khi rửa giải bằng CH
3
OH 100% thu được phân đoạn cho các phản ứng
màu giống dịch chiết tổng số bằng n-butanol. Khi thực hiện phản ứng thuỷ
phân các mẫu này trong axit HCl 2N thu được glucozơ và axit gallic. Từ kết
quả thuỷ phân này có thể cho rằng các phân đoạn chiết bằng etylaxetat và
bằng n-butanol đều chứa các tannin và đó là galotanin. Tuy nhiên các tannin
ấy được tạo ra bởi liên kết C-glycoside hay O-glycoside cấu trúc và thứ tự
liên kết của chúng như thế nào, còn chưa được làm rõ vì chưa tách chúng
thành các đoạn sạch.





Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
52
Hình 3.13


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
53


Hình 3.14


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
54

Hình 3.15. Phổ
1
H-NMR của chất axit gallic


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
55

Hình 3.16. Phổ
13
C-NMR của chất axit gallic


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
56
3.4. Thử hoạt tính sinh học
Các chất tổng số được chiết, tách bằng dung môi có độ phân cực khác
nhau sau khi làm khô kiệt, loại bỏ hoàn toàn dung môi được gửi tới phòng thí
nghiệm vi sinh trường Đại học Y khoa Thái Nguyên để thử tác dụng sinh học
của chúng. Kết quả được nêu ở bảng 2.3 và hình 2.1 cho thấy tất cả các chất
thu được từ các dịch chiết của lá cây đỏ ngọn đều có tác dụng kháng khuẩn
đối với khuẩn Staphylococcus, E.coli, Salmonella typhi.
Chúng tôi cũng đã gửi mẫu chiết bằng etylaxetat và chiết bằng etanol
sau khi đã làm sạch dung môi đến cơ sở sản xuất kinh doanh thuốc thành
phẩm, thực phẩm chức năng Y học cổ truyền Thái Nguyên. Các mẫu đều có
tác dụng tốt đối với việc chăm sóc sức khoẻ con người, các chất có trong các
dịch chiết trên đều không gây độc đối với con người.


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
57
KẾT LUẬN
1. Nghiên cứu sàng lọc hoá thực vật của lá cây đỏ ngọn (Cratoxylum
prunifolium) đã phát hiện thấy nhiều nhóm hợp chất thiên nhiên có hoạt tính
sinh lý cao; đó là đường khử, tritecpenoit, steroit, saponin, cumarin, axit hữu
cơ, các flavonoit, các chất polyphenol, các tannin, các chất xanthone.
2. Từ lá cây đỏ ngọn lần đầu tiên đã phân lập và dựa vào các đặc trưng
hoá lý, các số liệu phổ EI-MS, NMR, FT-IR đã nhận dạng được cấu trúc của 4
hợp chất hữu cơ thuộc các nhóm polyphenol, steroit, terpenoit.
3. Phân tích các phổ IR, UV, MS và NMR các chất tinh khiết được
tách ra nói trên đã nhận dạng được chúng là: taraxeron, stigmasterol , β-
sitosterol và axit gallic.
4. Từ dịch chiết tổng của lá đỏ ngọn (Cratoxylum prunifolium) chúng
hoàn toàn không gây độc hại với con người, có thể chế biến thành thức uống
hằng ngày như một thực phẩm chức năng có tác dụng kháng các khuẩn
Staphylococcusauresu (Tụ cầu vàng), E.coli (Thực khuẩn đường ruột) và
Salmonella typhi (Thương hàn).

KIẾN NGHỊ

Cây đỏ ngọn là một cây thuốc quý có nhiều tác dụng trong y học vì vậy
tôi đề nghị với các cấp có thẩm quyền tiếp tục cho nghiên cứu một cách sâu
rộng hơn về cây đỏ ngọn nhằm phục vụ tốt trong đời sống nhân dân.






Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
58
TÀI LIỆU THAM KHẢO
Tiếng việt
1. Võ Văn Chi (1999), Từ điển cây thuốc Việt Nam, Nxb Y học, trang 969.
2. Trần Đình Đại (1998), “Khái quát về hệ thực vật Việt Nam”, Hội thảo
Việt - Đức về hoá học các hợp chất thiên nhiên, Hà Nội, trang 17-27.
3. Nguyễn Văn Đàn (1997), Các phương pháp nghiên cứu cây thuốc, Nxb
Y-Dược, TP Hồ Chí Minh .
4. Đề tài cấp bộ quốc phòng của Học viện Quân Y (2002) , “Nghiên cứu tác
dụng của dịch chiết từ cây đỏ ngọn lên một số chức năng của hệ thần
kinh trên động vật thực nghiệm”, Hà Nội
5. Phạm Hoàng Hộ (1999), Cây cỏ Việt Nam, Nxb Trẻ, Hà Nội.
6. PGS.TS Phạm Đình Hùng (2007), Nghiên cứu xác định cấu trúc các hợp
chất có hoạt tính sinh học cao, (Mã số đề tài 510402).
7. Hoàng Thanh Hương, Cầm Thị Ích, Hà Việt Sơn (2006), Khảo sát phần
dịch chiết etylaxetat của lá thành ngạnh, tạp chí Hoá học, T.44(1), trang
71-75.
8. Lê Khả Kế (1977), Cây cỏ thường thấy ở Việt Nam, tập 2, Nxb Khoa học
và kỹ thuật, trang 189.
9. Nguyễn Liêm, Triệu Duy Điệt, Đỗ Văn Bình (1996), Nghiên cứu tác dụng
chống oxi hoá (Antioxidant invitro) của một số cây thuốc Việt Nam, Công
trình nghiên cứu khoa học quân sự số 3, trang 30-33.
10. Nguyễn Liêm và cộng sự (1996), “Nghiên cứu tác dụng chống oxi hoá
(antioxydant), của cây đỏ ngọn để phòng và chứa các bệnh về rối loạn
huyết động”. Đề tài cấp Bộ quốc phòng, Hà Nội.
11. Đỗ Tất Lợi (2001), Những cây thuốc Việt Nam, Nxb Y học, trang 122-123.
12. Trần Cẩm Vinh (1997), “Tác dụng của cây đỏ ngọn trong quá trình đông
máu”, Công trình nghiên cứu y học quân sự, số 3, trang 7- 9.


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
59
Tiếng Anh
13. A.K.Ratty, N.P.Das (1988), “Biochemical medicine and metabolic
biologo”, 39, 69-79.
14. Anake Kijjoa, Maria Jose, T.G.Gonzalez, Madalena M.M.Ana M.Damas,
§Ing-on Mondranondra, Llartur M.S.Silva and Werner Herz (1998),
“Xanthones from Cratoxylum Maingayi”. Phytochemistry Vol 49, No.7,
2159-2162.
15. G.M.Kitanov, I.Assenov I and Dam The Van (1988), “Flavonols and
Xanthones from Cratoxylum prunifloum kurz”, Pharnazie 43, 879 .
16. Goat J.L, Akihisa T.Analysis of steroit frested, pp.324. Chapman & Hall.
London, New York - Tokyo.
17. Guat-Lee Sia, Graham J.Bennett, Leslie J.Harrison and Keng-Yeow Sim
(1995), “Minor xanthones from the Bark of Cratoxylum cochinchinense”.
Phytochemistry, Vol 38, No.6, pp.1521-1528.
18. J. Graham (1993), “et al, triterpenoids, tocotrienols and xanthones from the
Bark of cratoxylon cochinchinense”, phytochemistry, Vol 32, No 5, 1245.
19. Lien Hoa Dieu Nguyen, Le Li J. Harrison (1998), “ritecpenoid and
xanthone constituents fo Cratoxylum conchinchinese”, phytochemisty
50, 471-476.
20. Macias, M.Ulloa, M.Ulloa, M. Gamboa, A. and Mata, R. “Phytotoxic
comopounds from the new coprophilous fungus Gnanomyces polytlrix”.
21. Munekazu Iinuma, Hideki, Tðtero Ito, Toshiyuki Tanaka and Domingo
A.Madulid (1996), “Two xanthones from roots of Cratoxylum
formosanum”. Phytochemistry, Vol, 42, No 4, PP.1195-1198.
22. Nawong Boonnak, Chatchanok Karalai, Suchada Chantrapromma, Channita
Ponglimanont, Hoong-Kun Fun (2006), “Bioac tive prenylated xanthones
and anthraquinones from Cratoxylum formosun ssp.pruniflorum”.
Tetrahedron 62 ,8850-8859.


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
60
23. Pitchaon Maisuthisakul, Rungnaphar Pongsawatmanit, Michael H.Gordon
(2007), “Charaterization of the phytochemicals and antioxidant properties
of extracts from Teaw (Cratoxylum fromosum Dyer)”. Food chemistry
100 1620-1629.
24. Sompong Boonsri, Chatchanok Karalai, Chanita Ponglimanont, Akkharawit
Kanjana-Opas, Kan Chantrapromma (2006), “Anibac terial and cytotoxic
xanthones from the roots of Cratoxylum fomosum”. Phytochemistry 67,723-727.
25. Soon Yew Tang, Matthew Whiteman, Zhao Feng Peng, Andrew Jeniner, Eu
Leong Yong and Barry Halliwell (2004), “Charcterition of Antioxidant and
Antiglycation Properties and Isolation of Active Ing redients from
Traditional Chinese medicines”. Free Radical Biology & Medicine,
Vol.36, No.12, pp.1575-1587, .
26. Soon Yew Tang, Matthew Whiteman, Andrew Jeniner, Zhao Feng Peng
and Barry Halliwell (2004), “Mechanisin of cell death induced bi an
antioxidant extract of Cratoxylum cochinchinense”, Free Radical
Biology and Medicine, Vol 36, No.12,pp, 1588-1611.
27. Xue- Li Cao, Yu Tian, Tian-You Zhang, Yoichiro Ito (2000), “Supercritical
fluid extraction of catechins Cratoxylum prunifolium Dyer”. Joumal of
Chromatography A, 898, 75-81.
28. Xue- Li Cao, Yu Tian, Tian-You Zhang and Yoichiro Ito (2000),
“Beijing Institute of New Technology Application, Xizhimen
Southstree” No.16, Beijing 100035, China.
29. W. Mahabusaraka, W. Nuangnaowarat, W.C. Taylor (2006), “xanthone
derivativens from Cratoxylum cochinchinense roots”, Phytochemistry 67
470- 474.
30. K. Tawaraya, Y. Takaya, M. Turjaman, S.J. Tuah, S.H. Limin, Y. Tamai,
J.Y. Cha, T. Wagatsuma, M. Osaki (2003), “Arbuscular mycorrhizal
colonization of tree species grown in peat swamp forests of central
kalimantan, indonesia”, Forest Ecology and Management 182, 381- 386.


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
61
PHỤ LỤC
I. Chất taraxeron Trang
Phổ LC-MS của taraxeron…………………………………………………. 62
Phổ FT-IR của taraxeron................................................................................ 65
Phổ
1
H-NMR của taraxeron…………………………………………………66
Phổ
13
C-NMR của taraxeron………………………………………………...71
Phổ C13CPD & DEPT của taraxeron……………………………………….73
Phổ C13CPD-COSYGP của taraxeron……………………………………...78
Phổ C13CPD-HSQC của taraxeron…………………………………………81
Phổ C13CPD-HMBC của taraxeron………………………………………...82
II. Chất stigmasterol
Phổ EI-MS của stigmasterol…….……………………………………….......84
Phổ FT-IR của stigmasterol ………………………………………………...85
Phổ
1
H-NMR của stigmasterol………………………………………………86
Phổ
13
C-NMR của stigmasterol……………………………………………...87
III. Chất β- Sitosterol
Phổ EI-MS của β- Sitosterol…………………………………………………88
Phổ FT-IR của β- Sitosterol………………………………………………….89
Phổ
1
H-NMR của β- Sitosterol………………………………………………90
Phổ
13
C-NMR của β- Sitosterol……………………………………………...95
Phổ C13CPD & DEPT của β- Sitosterol…………………………………….97
IV. Chất axit gallic
Phổ FT-IR củaaxit gallic ……………………………………………………98
Phổ tử ngoại UV của axit gallic............... ................................................... 99
Phổ
1
H-NMR của axit gallic………………………………………………..100
Phổ
13
C-NMR của axit gallic………………………………………………101


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
62



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
63





Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
64



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
65


Phổ FT-IR của taraxeron


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
66

Phổ
1
H-NMR của taraxeron


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
67




Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
68



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
69



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
70











Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
71

Phổ
13
C-NMR của taraxeron


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
72



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
73

Phổ DEPT của taraxeron


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
74




Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
75
















Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
76











Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
77
















Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
78

Phổ COSYGP của taraxeron


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
79




Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
80


Hình…


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
81


Phổ HSQC của taraxeron


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
82

Hình…
Phổ HMBC của taraxeron


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
83




Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
84



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
85



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
86



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
87



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
88



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
89



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
90

Phổ
1
H –NMR của β - Sitosterol


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
91




Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
92



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
93



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
94






















Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
95

Phổ
13
C –NMR của β - Sitosterol


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
96



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
97

Phổ DEPT của β - Sitosterol


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
98

Phổ IR của axit gallic


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
99


Phổ UV của axit gallic


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
100

Phổ
1
H – NMR của axit gallic


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
101

Phổ
13
C – NMR của axit gallic


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
102



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
103






Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
104


Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
105
M MỤ ỤC C L LỤ ỤC C

MỞ ĐẦU .................................................................................................... 1
Chương 1. TỔNG QUAN........................................................................... 3
1.1. Mô tả thực vật .................................................................................. 3
1.2. Một số công dụng của chi Cratoxylum............................................... 4
1.3. Tình hình nghiên cứu hóa học thực vật chi Cratoxylum ...................... 7
1.3.1. Các hợp chất có khung triterpen ................................................. 7
1.3.2. Các chất axit hữu cơ .................................................................. 8
1.3.3. Các chất có khung xanthone ....................................................... 9
1.3.4. Một số đại diện của khung anthraquinon.................................. 15
1.3.5. Một số đại diện của khung flavonoit......................................... 16
1.4. Những nghiên cứu hoá thực vật loài Cratoxylum prunifolium. .......... 17
Chương 2. PHẦN THỰC NGHIỆM ........................................................ 19
2.1. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu ............................................ 19
2.1.1. Thu mẫu cây, xác định tên khoa học và phương pháp xử
lý mẫu ...................................................................................... 19
2.1.2. Phương pháp phân lập các hợp chất từ các dịch chiết ................ 19
2.1.3. Phương pháp khảo sát và xác định cấu trúc hoá học các
hợp chất................................................................................... 20
2.2. Dụng cụ, hoá chất và thiết bị nghiên cứu ......................................... 20
2.2.1. Dụng cụ và hoá chất ................................................................ 20
2.2.2. Thiết bị nghiên cứu .................................................................. 21
2.3. Các dịch chiết từ cây đỏ ngọn (Cratoxylum prunifolium Kurtz) ........ 21
2.3.1. Các dịch chiết .......................................................................... 21
2.3.2. Khảo sát định tính các dịch chiết .............................................. 23
2.3.3. Thử hoạt tính sinh học.............................................................. 23



Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
106
2.4. Chiết suất, phân lập và tinh chế các chất từ cây đỏ ngọn................... 25
2.4.1. Dịch chiết clorofom.................................................................. 26
2.4.1.1. Taraxeron (Friendoolean - 14- en-3-on) (ĐC
1
) ................... 26
2.4.1.2. Stigmast- 5,22- đien-24R-3β-ol .......................................... 27
2.4.1.3. β- Sitosterol....................................................................... 27
2.4.2. Dịch chiết trong etylaxetat (ĐE) ............................................... 28
Chương 3. THẢO LUẬN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU.............................. 29
3.1. Nguyên tắc chung........................................................................... 29
3.2. Phân tích định tính và phát hiện các nhóm chất ................................ 30
3.3. Phân lập và nhận dạng các hợp chất có trong các dịch chiết khác
nhau của cây đỏ ngọn ............................................................................ 30
3.3.1. Taraxeron ( hay Frendoolean-14-en-3-on) (ĐC-1) .................... 30
3.3.2. Stingmast -5,22-dien-24R-3β-ol (ĐC-2) .................................... 38
3.3.3. β-sitosterol (ĐC-3) ................................................................... 44
3.3.4. Axit gallic (ĐE-1) .................................................................... 50
3.4. Thử hoạt tính sinh học .................................................................... 56
KẾT LUẬN .............................................................................................. 57
KIẾN NGHỊ ............................................................................................. 57
TÀI LIỆU THAM KHẢO........................................................................ 58




Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
107
D DA AN NH H M MỤ ỤC C C CÁ ÁC C B BẢ ẢN NG G

Bảng 2.1. Khối lượng chất tổng số được chiết từng phân đoạn lá cây
đỏ ngọn (Cratoxylum prunifolium Kurtz) ..................................... 22
Bảng 2.2. Phát hiện các nhóm chất trong cây đỏ ngọn ................................. 23
Bảng 2.3. Kết quả thử hoạt tính sinh học của dịch chiết thô từ lá cây đỏ
ngọn (Cratoxylum prunifolium) ................................................... 25
Bảng 3.1. Phổ
13
C-NMR và
1
H-NMR của taraxeron (ĐC-1) từ lá đỏ ngọn ...... 33
Bảng 3.2. Phổ
13
C-NMR của các chất ĐC-2 và stingmasterol [16] ............... 39
Bảng 3.3. Phổ
13
C-NMR của các chất ĐC-3 và β-sitosterol [16] .................. 45
Bảng 3.4. Số liệu phổ NMR của ĐE-1 và số liệu phổ NMR trong phần
mềm ACD/NMR của axit gallic .................................................. 50




Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
108
D DA AN NH H M MỤ ỤC C C CÁ ÁC C H HÌ ÌN NH H

Hình 1.1. Ảnh cây đỏ ngọn (Cratoxylum Prunifolium Kurt, Hypericaceae) ... 4
Hình 2.1. Ảnh được gây ức chế xung quanh giếng thạch............................ 24
Hình 3.1 ................................................................................................... 34
Hình 3.2 ................................................................................................... 35
Hình 3.3 ................................................................................................... 36
Hình 3.4 ................................................................................................... 37
Hình 3.5 ................................................................................................... 40
Hình 3.6 ................................................................................................... 41
Hình 3.7 ................................................................................................... 42
Hình 3.8 ................................................................................................... 43
Hình 3.9 ................................................................................................... 46
Hình 3.10 ................................................................................................. 47
Hình 3.11 ................................................................................................. 48
Hình 3.12 ................................................................................................. 49
Hình 3.13 ................................................................................................. 52
Hình 3.14 ................................................................................................. 53
Hình 3.15. Phổ
1
H-NMR của chất axit gallic ............................................. 54
Hình 3.16. Phổ
13
C-NMR của chất axit gallic ............................................. 55

D DA AN NH H M MỤ ỤC C C CÁ ÁC C S SƠ Ơ Đ ĐỒ Ồ
Sơ đồ 2.1. Quy trình ngâm chiết ................................................................ 22

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM ---------------------------------

BÙI VĂN BÌNH

NGHIÊN CỨU HOÁ HỌC VÀ NHẬN DẠNG MỘT SỐ NHÓM CHẤT CÓ TRONG CÂY ĐỎ NGỌN (CRATOXYLUM PRUNIFOLIUM KURTZ)
Chuyên ngành: Hoá hữu cơ Mã số: 60.44.27

LUẬN V ĂN THẠ C SĨ HOÁ HỌC

Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS PHẠM VĂN THỈNH

THÁI NGUYÊN - 2008

You're Reading a Free Preview

Tải về
scribd
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->