TR

NG

IH CYD

C THI NGUYN C MI N NI PHA B C-01/2012

H I NGH KHOA KHOA H C & CNG NGH Y D

HI U QU C A K THU T PCR TRONG CH N ON LAO PH I

Nguy n c Trung v c ng s B mn Vi sinh Tr ng i h c Y D c Thi Nguyn

1

Ph n I.

n .

TV N

Vi t Nam, b nh lao l m t b nh truy n nhi m n ng

 Vi t Nam: 12/22 qu c gia c s b nh nhn lao cao

nh t th gi i.

 Hng n m c 18.000 BN lao (6.000 BN lao a khng

thu c v 7.400 BN lao/HIV), kho ng 60% BN c pht hi n.

c tnh l

 T ng c

ng pht hi n cc tr ng h p m c lao v cc th b nh lao l u tin hng u trong cng tc ch ng lao.

 T i Vi t Nam, ch n on lao ph i ch y u d a vo
nhu m soi m tm AFB.

 Lao ph i AFB (-) c n s

Xquang ph i chu n.

tr

c a nui c y/phim

 Nui c y c

c hi u cao nh ng th i gian cho k t

qu lu (6-8 tu n).

 PCR l m t cng c c gi tr trong ch n on.  K thu t PCR v i th ng quy ring c s d ng

ch n on v pht hi n s m nh ng tr lao.

ng h p m c

 IS6110 l gen

c s d ng ph bi n nh t trong pht hi n vi khu n lao b ng PCR.

3

M c tiu nghin c u 1. Pht hi n nhanh vi khu n lao Mycobacterium tuberculosis trong cc m u m thu c t nh ng tr ng h p nghi m c lao ph i b ng k thu t PCR. 2. Xc nh hi u qu c a k thu t PCR trong vi c pht hi n vi khu n lao Mycobacterium tuberculosis

Ph n II. 2.1. it

IT

NG V PH

NG PHP NGHIN C U

ng nghin c u

Cc m u m t 117 tr ng h p nghi m c lao ph i n khm n khm v i u tr t i B nh vi n Lao v B nh ph i Thi Nguyn t thng 01/2010 n thng 02/2011.

2.2. Quy trnh nghin c u

B nh nhn nghi m c lao ph i M u m

Nhu m soi Ziehl-Neelsen

Nui c y trn mi tr ng Ogawa Pht hi n vi khu n lao M. tuberculosis

PCR (gen IS6110)

So snh v xc

nh hi u qu ph

ng php ch n on

K thu t PCR pht hi n vi khu n lao M u X l Tch chi t & tinh s ch DNA PCR nm i m Trnh t gen IS6110 Thi t k primer INS1 INS2

i n di & ki m tra s n ph m trn gel agarose 1% (gen IS6110)

So snh v xc

nh hi u qu pht hi n vi khu n lao:

- Ph ng php nui c y c s d ng nh l chu n vng khi xc nh hi u qu pht hi n vi khu n lao c a ph ng php nhu m soi v PCR. - Hi u qu ch n on c a m i ph ng php c xc nh d a trn nh y, c hi u, gi tr d bo d ng tnh v gi tr d bo m tnh.

Ph n III. K T QU V TH O LU N B ng 3.1. K t qu pht hi n vi khu n lao trong K t qu D ng tnh m tnh Nhu m soi n (%) 57 (48,72) 60 (51,28) Nui c y n (%) 87 (74,36) 30 (25,64) m

PCR n (%) 83 (70,94) 34 (29,06)

B ng 3.2. So snh k t qu pht hi n vi khu n lao trong m b ng nhu m soi v nui c y

K t qu nui c y VK m c K t qu nhu m soi T ng s (+) (-) VK khng m c T ng s

49 38

8 22

57 60

87
nh y: c hi u: - GTDBDT: - GTDBAT: 56,32% 73,33% 85,96% 36,67%

30

117

10

B ng 3.3. So snh k t qu pht hi n vi khu n lao trong m b ng PCR v nui c y

K t qu nui c y K t qu PCR T ng s (+) (-) VK m c 83 4 VK khng m c 0 30 T ng s

83 34

87

30

117

nh y: 95,4% c hi u: 100%

- GTDBDT: 100% - GTDBAT: 88,24%

 4 tr ng h p nui c y (+) nh ng PCR (-) p khuy t gen IS6110 S d ng Multiplex PCR

11

IS6110 (249bp)

Hnh 3.1.

i n di

gen IS6110 trn gel agarose 1%

12

Hnh 3.2. Vi khu n AFB trn tiu b n nhu m Ziehl-Neelsen

13

Hnh 3.3. Vi khu n lao m c trn mi tr

ng Ogawa
14

K T LU N
Hi u qu c a ph ng php nhu m soi v PCR trong pht hi n vi khu n lao M. tuberculosis: nm i

 Ph

ng php nhu m soi: nh y: c hi u: GTDBDT: GTDBAT: ng php PCR: nh y: c hi u: GTDBDT: GTDBAT:

56,32% 73,33% 85,96% 36,67% 95,4% 100% 100% 88,24%

15

 Ph

KHUY N NGH
Nghin c u v xy d ng ph n d ng nhi u c p m i t t ch pht hi n ng Muliplex PCR s ng th i nhi u trnh

c hi u c a vi khu n lao nh m kh c ph c hi n m t s ch ng vi khu n ny.

ng khuy t gen IS6110

16

17