COLORIMETRA.

LEY DE LAMBERT-BEER UNIVERSIDAD MARIANA PASTO FACULTAD DE INGENIERIA PROGRAMA: INGENIERIA DE PROCESOS SEMESTRE V PERIODO: AGOSTO-DICIEMBRE 2012 CURSO: QUIMICA ANALITICA E INSTRUMENTAL DOCENTE: ALEXANDER PORTILLA INTEGRANTES: Lina MariaBenavides Mara Fernanda Escobar Daniela Sierra Delgado Leidy Patricia Leiton OBJETIVOS Adquirir los conocimientos bsicos sobre espectrofotometra de absorcin visible, incluyendo la Ley de Lambert-Beer y sus aplicaciones en Qumica. Para ello se realizar un experimento en el laboratorio que muestre cmo utilizar un espectrofotmetro para llevar a cabo la determinacin cuantitativa de un compuesto. MARCO TEORICO COLORIMETRIA Muchos experimentos bioqumicos incluyen la medicin de un compuesto o grupo de c o m p u e s t o s q u e h a c e n parte de una mezcla. Una de las tcnicas ms u s a d a s p a r a determinar la concentracin de dichos compuestos es la Colorimetra . El fundamento de la t c n i c a s e b a s a e n q u e s i s e p a s a l u z b l a n c a a t r a v s d e u n a s o l u c i n c o l o r e a d a , a l g u n a s longitudes de onda se absorben con preferencia sobre las otras. Figura 2.1Para el caso de la absorcin de radiacin visible, muchos iones o molculas o son coloreados, o pueden reaccionar con una substancia coloreada o pueden formar en algunas de sus reacciones una substancia coloreada. Cada una de estas situaciones presenta la posibilidad de efectuar una determinacin analtica cuantitativa. La mayor ventaja de este mtodo consiste en que no es necesario el aislamiento del compuesto y as se pueden determinar los constituyentes de una mezcla compleja tal como la sangre La luz blanca emitida por una lmpara de tungsteno pasa a travs de una rendija (apertura), y luego a travs de un lente condensador que vuelve paralelos estos rayos que van a incidir sobre la solucin problema (generalmente es coloreada o tiene la capacidad de absorber la luz) la cual se coloca en la celda o cubeta.

La cubeta es generalmente de vidrio de paredes paralelas con 1 cm de separacin entre ellas en la mayora de los casos, esta distancia se conoce como paso de luz. El Filtro puede estar colocado antes o despus de la cubeta y su color se selecciona para permitir la transmitancia mxima del color no absorbida. El color del filtro debe ser complementario al de la solucin que se estudia, por ejemplo, si se quiere examinar una solucin de color azul, se selecciona el filtro rojo que es complementario y permite la transmisin mxima del color no absorbido (azul) o dicho de otra forma el filtro rojo no absorbe luz azul permitiendo la mxima transmitancia de este ltimo. Los filtros producen bandas angostas de transmisin y por lo tanto luz aproximadamente monocromtica Cada color corresponde a una regin del espectro de luz blanca y posee una longitud de onda () caracterstica que se mide en nanmetros (nm) y puede ser seleccionada mediante el uso delos filtros en los colormetros. La luz llega a una fotocelda que genera corriente elctrica en proporcin directa a la intensidad de la luz incidente, se amplifica la seal y finalmente pasa a un galvanmetro que proporciona directamente medidas de porcentaje de Transmitancia y Absorbancia Principio de la Colorimetra. Cuando se pasa un rayo de luz monocromtica de intensidad inicial a travs de una solucin coloreada en un recipiente transparente parte de la luz es absorbida por la solucin de manera que la intensidad de la luz transmitida () es menor que la inicial (o)

Ley de Lambert Cuando un rayo de luz monocromtica pasa a travs de un medio absorbente, su intensidad disminuye exponencialmente a medida que la longitud del medio absorbente aumenta, esto es: = o . e-k1 . l Ley de Beer

Cuando un rayo de luz monocromtica pasa a travs de un medio absorbente, su intensidad disminuye exponencialmente a medida que la concentracin del medio absorbente aumenta: =o . e-k 2.c Dado que las dos caractersticas de la solucin influyen en la magnitud de la intensidad emergente, surge la ley combinada de Beer-Lambert =o . e-k 3.c.l Transmitancia y abosorbancia La concentracin de la sustancia desconocida, puede calcularse en % transmitancia o en unidades de Absorbancia. El cociente de las dos intensidades, I/Io, se conoce como TRANSMITANCIA y se expresa como un porcentaje. %T=/o = luz transmitida (solucin problema) Luz incidente (solucin blanco) Expresado en trminos de Logaritmos: -Log/o = k.c.l Logo /= k.c.l. = Absorbancia = A k = Constante que depende de la longitud de onda, de la naturaleza del medio y del espesor. Conociendo %T de una solucin coloreada se puede determinar su ABSORBANCIA. T = 100 (I/Io) Expresando en Logaritmos: Log % T = Log 100 + Log/o; como A = Log o , y Log 100 = 2 Entonces: Log %T = 2 A, por lo tanto: A = 2 Log % T Limitaciones de la Ley Beer Lambert Para que se cumpla la Ley combinada deben darse las siguientes condiciones: 1. La luz preferiblemente debe ser monocromtica o la longitud de onda debe estar entre lmites muy estrechos. 2. La longitud de onda de la luz empleada debe coincidir con el mximo de absorcin de la solucin. Esto permite conseguir la sensibilidad ptima.

3. No debe haber ionizacin, asociacin, disociacin o solvatacin del soluto con respecto a la concentracin o el tiempo. 4. La ley slo se cumple hasta cierto lmite mximo de concentracin, caracterstico de cada sustancia (Linealidad). ESPECTROFOTOMETRIA Un Espectrofotmetro es un colormetro ms sofisticado en el cual la luz monocromtica se difracta mediante una rendija o prisma. La banda de longitudes de onda de la luz que pasa a travs del filtro, en el caso del colormetro es muy ancha, por lo cual puede ser difcil distinguir entre dos compuestos que tengan absorcin parecida; en este caso, es recomendable usar un Espectrofotmetro ya que permite separar picos de absorcin muy juntos debido a la presencia del monocromador. Los Espectrofotmetros son aparatos ms sofisticados cuyas 2 ventajas principales son: a) Abarcan todo el espectro de luz. b) Permite mayor poder de resolucin: esto es medir exactamente dos compuestos que absorben a longitudes de onda muy cercanas

La absorbancia est relacionada con la concentracin de la sustancia, c, por la ley de Lambert-Beer, que se resume con la ecuacin: A = b c , donde c se expresa en mol/L, b es la longitud del camino ptico (anchura de la clula que contiene la disolucin de la sustancia) y se expresa en cm, y es la absortividad molar, propiedad caracterstica de cada sustancia correspondiente a la cantidad de radiacin que absorbe a una longitud de onda determinada por unidad de concentracin, siendo sus unidades L mol-1cm-1(tngase en cuenta que la absorbancia no tiene unidades

RESULTADOS

ANALISIS DE RESULTADOS Para buscar la concentracin de una sustancia desconocida por colorimetra las lecturas deben hacerse en %T ya que la escala de lectura es lineal porque est dividida homogneamente en 100 partes iguales lo que hace su medicin ms exacta; la escala de Absorbancia o extincin es logartmica, se extiende de cero a dos con divisiones desiguales haciendo poco exacta la lectura principalmente en los valores altos. La relacin entre la concentracin y el % T no es lineal, por lo cual se requiere muchos puntos para lograr una medicin exacta; en contraposicin existe una relacin lineal entre la concentracin y la Absorbancia.