Manual de Limpieza y Des in Feccio N

Universidad de Pamplona Centro de Preparacin de Medios Manual de Limpieza y Desinfeccin
CENTRO DE PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO UNIVERSIDAD DE PAMPLONA
MANUAL DE LIMPIEZA Y DESINFECCION
INTRODUCCION
El objetivo de este manual es establecer una serie de procedimientos para llevar a cabo el programa de limpieza y desinfeccin en el centro de preparacin de medios con el fin de mantener el laboratorio libre de contaminacin ambiental y proporcionar un rea de trabajo limpia, saludable y segura. El cumplimiento de estos procedimientos asegurara la reduccin de la contaminacin del producto, mayor calidad y menos devoluciones de los medios de cultivos elaborados. Se realiza como un aporte para el proceso de certificacin de los laboratorios de microbiologa Este documento se realiza como un aporte para el proceso de certificacin de los laboratorios de microbiologa, y menciona algunos trminos relacionados con el proceso de limpieza y desinfeccin ,compuestos utilizados y los procedimientos bsicos de limpieza y desinfeccin de las reas que conforman el centro de preparacin de medios.
OBJETIVOS
GENERAL: Describir los procedimientos de limpieza y desinfeccin que deben aplicarse en las instalaciones del centro de preparacin de medios de cultivos para garantizar la inocuidad de los medios elaborados
ESPECIFICOS: Explicar los procesos de limpieza y desinfeccin de instalaciones, equipos y materiales del centro de preparacin de medios Disponer de un documento de consulta permanente para todos lo auxiliares que laboran en el centro Establecer dosificacin de detergentes y agentes desinfectantes para la adecuada realizacin de los protocolos de limpieza y desinfeccin
INTRODUCCION
Un programa de limpieza y desinfeccin , es un conjunto de actividades que son aplicadas a cada una de las reas de proceso para eliminar o disminuir a un mnimo aceptable la carga microbiana presente en los equipos, personal, planta fsica y en el ambiente donde se realiza el proceso; adems de mejorar la atmsfera de trabajo, hacindola , mas agradable, y optimizar la calidad sanitaria de los productos. Es importante mantener el laboratorios y el material limpios, ya que el propio trabajo crea un flujo microbiano. Estos microorganismos vienen del exterior: Con materias u objetos contaminados Con el aire, el agua Con el hombre mismo, que se comporta como reservorio natural de las bacterias
La implementacin del programa de limpieza y desinfeccin debe responder a las necesidades y exigencias de la empresa, por tanto es muy importante conocer los principios de limpieza y desinfeccin para evitar la contaminacin de los productos. Este programa de limpieza y desinfeccin debe permitir : Definir lo que se debe hacer y los fundamentos de los mtodos que se van a aplicar in situ
Asignar a cada uno sus funciones y responsabilidades, as como el tiempo necesarios para cada operacin
Asegurarse de que se ha realizado lo que se ha anotado en el registro
LIMPIEZA Y DESINFECCION La limpieza y la desinfeccin tiene como fin asegurar una buena higiene, tanto a nivel de los locales, los materiales, el personal y el ambiente. La limpieza regular y peridica permite mantener una flora microbiana ambiental reducida necesaria y suficiente para ciertas actividades.
A continuacin se mencionan algunas definiciones relacionadas con el proceso de limpieza y desinfeccin:
Desinfeccin: Es el conjunto de operaciones que tiene como objetivo la reduccin temporal del numero total de microorganismos vivos y la destruccin de los patgenos y alterantes; sin embargo , la esterilizacin busca la obtencin definitiva
de un medio completamente exento de grmenes
Desinfectante: Cualquier agente que limite la infeccin matando las vegetativas de los microorganismos.
Detergente:
Material tensoactivo diseado para remover y eliminar la contaminacin indeseada de alguna superficie de algn material
Eficiente:
Que produce realmente un efecto satisfactorio
Esterilizacin: Es la destruccin o eliminacin de todas formas de vida. Puede llevarse a cabo por procesos fsicos o qumicos.
Higiene:
Todas las medidas necesarias para garantizar la sanidad e inocuidad
Limpieza:
Es el conjunto de operaciones que permiten eliminar la suciedad visible o microscpica. Estas operaciones se realizan mediante productos detergentes elegidos en funcin del tipo de suciedad y las superficies donde se deposita
Solucin: Combinacin de un slido o de un producto concentrado con agua, para obtener una distribucin homognea de cada uno de los componentes.
LA SUCIEDAD
El objetivo de la limpieza es la eliminacin de la suciedad , se debe llevar a la naturaleza de esta y a la manera en como se adhiere a la superficie que se desea limpiar.
ESTADO DE LA SUCIEDAD: Se consideran: SUCIEDAD LIBRE: Impurezas no fijadas en una superficie, fcilmente eliminables.
SUCIEDAD ADHERENTE: Impurezas fijadas que precisan una accin Mecnica o qumica para desprenderlas del soporte
SUCIEDAD INCRUSTADA: Impurezas introducidas
ETAPAS DE LA LIMPIEZA Y DESINFECCION
LIMPIEZA:
Recoger y desechar los residuos del producto, polvo o cualquier otra suciedad presentes en el lugar a limpiar
Humedecer con suficiente agua potable el lugar o superficie que se va a limpiar
Preparar la solucin de detergente que se va a usar
Enjabonar la superficie por limpiar, esparciendo la solucin de detergente con esponja o cepillo
Restregar la superficie fuertemente con ayuda de un pao o cepillo, eliminando toda la suciedad posible
Dejar la solucin de detergente aplicada por un tiempo corto para que este acte
Enjuagar con suficiente agua asegurndose de que todo el detergente se elimine
Observar detenidamente el lugar que se limpio para verificar que haya sido eliminada toda suciedad DESINFECCION:
Asegurarse de que la superficie este limpia, si no es as limpiar como se explico anteriormente Antes de proceder a desinfectar se debe tener lista la solucin Desinfectante Aplicar la solucin desinfectante sobre el lugar o superficie que se va a desinfectar La solucin desinfectante se deja sobre el lugar que se esta desinfectando por un tiempo mnimo de un minuto, dependiendo de la sustancia utilizada Durante este tiempo, se esta logrando eliminar la mayor cantidad posible de microorganismos, de modo que la superficie a limpiar queda bien desinfectada
LOS PRODUCTOS DE LIMPIEZA COMPOSICION DE LA SUCIEDAD AZUCARES SOLUBLES OTROS HIDRATOS DE CARBONO PROTEINAS FAMILIA Alcalinos Alcalinos Productos enzimaticos Alcalinos Productos MATERIAS GRASAS enzimaticos Tenso-activos Sosa potasa Proteasas Anionicos Cationicos Productos MINERALES enzimaticos ACIDOS No ionicos Lipasas Clorhidrico Nitrico SECUESTRANTE Fosforico EDTA Polifosfatos Gluconato Secuestrante EJEMPLOS DE PRODUCTOS Sosa potasa CARACTERISTIC AS PRINCIPALES Solubilizante Saponificante Hidrolizante Desengrasante Solubilizante saponificante Hidrolizante Desengrasante Humectante Emulsificante Hidrolizante Desengrasante Solubilizante
AGENTES DESINFECTANTES
AGENTE MECANISMO DE ACCION DESINFECTA NTE ALCOHOLES Los alcoholes actan

destruyendo la membrana celular y desnaturalizando las protenas. Su accin es rpida, incluso desde los 15 segundos, aunque no tiene efecto persistente. Sus efectos biolgicos de dao microbiano permanecen por varias horas.
ESPECTRO DE ACCION
Los alcoholes poseen una rpida accin y amplio espectro de actividad, actuando sobre bacterias gramnegativas y grampositivas, incluyendo micobacterias, hongos y virus pero no son esporicidas. El etanol al 70% destruye alrededor del 90% de las bacterias cutneas en dos minutos
USOS
El alcohol se utiliza muy frecuentemente para la desinfeccin o limpieza de la piel, Su aplicacin est tambin indicado en la desinfeccin de material no crtico como termmetros
ALDEHDOS
FORMALDEH DO
Actan mediante la alquilacin de los grupos qumicos de las protenas y cidos nucleicos de las bacterias, virus y hongos. El formaldehdo acta sobre las protenas por desnaturalizacin. El glutaraldehdo acta de forma similar en pH alcalino. Sobre la pared celular, el glutaraldehdo acta al nivel de los puentes cruzados del peptidoglicano
Los aldehdos tienen un amplio Esterilizacin de espectro de actividad contra objetos inanimados, microorganismos y virus. como instrumentos. Desinfeccin de El formaldehdo es bactericida, material de metal, esporicida y virucida, pero caucho y plstico. trabaja ms lentamente que el Desinfeccin de alto glutaraldehdo. nivel de hemodializadores El formaldehdo es un producto Al 20% a 30% es qumico extremadamente astringente. reactivo y que interacta con protenas, ADN y ARN in vitro. Su actividad biocida se debe a la alteracin del ARN, ADN y sntesis de protenas.
Desinfeccin y esterilizacin de plsticos y caucho de equipos de anestesia Desinfecta en 45 minutos a 25C,
GLUTARALDE HDO
El glutaraldehido, cuando la solucin es alcalina (pH 7,5 a 8,5) se activa y posee actividad esporicida. El glutaraldehdo alcalino al 2% es bactericida, fungicida, virucida, en cortos
periodos de tiempo, pero necesita 6 horas de contacto para destruir las esporas bacterianas. Tiene una accin moderada frente a micobacterias.
eliminando grmenes patgenos y vegetativos, incluyendo M. tuberculosis, Pseudomonas aeruginosa y VIH 1 y 2. Esteriliza en 10 horas, destruyendo todas las esporas. Activo contra virus en 10 minutos a 20C.
HALOGENADO El mecanismo de accin sobre S los microorganismos es poco conocido, pero se postula que actan inhibiendo las reacciones enzimticas y desnaturalizando las protenas
Los hipocloritos tienen un extenso espectro de actividad, son bactericidas, virucidas, fungicidas y esporicidas, pero actividad variable frente a micobacterias, segn la concentracin en que se use.
HIPOCLORITO S
El hipoclorito de sodio se presenta en solucin a una concentracin de 5,25%. Para las desinfecciones, las diluciones en uso son entre 0,1% y 1%. Limpieza de vajilla. Lavado de ropa en general. Cloracin del agua. Desinfeccin de algunos alimentos. Desinfeccin de desechos lquidos contaminados La desinfeccin de la piel sana. El tratamiento de afecciones de la piel causadas por bacterias y hongos. La limpieza de las heridas, en solucin acuosa.
COMPUESTO Los compuestos yodados son S YODADOS agentes oxidantes, se combina
irremediablemente con residuos tirosina de las protenas. Precipitan las protenas bacterianas y cidos nucleicos. Alteran las membranas celulares al unirse a los enlaces C=C de los cidos grasos. Acta disminuyendo los requerimientos de oxgeno de los microorganismos aerobios, interfiriendo la cadena
El yodo tiene una poderosa actividad germicida, ataca bacterias grampositivas y gramnegativas, micobacterias, esporas, hongos, virus, quistes y protozoos.
respiratoria por bloqueo del transporte de electrones a travs de reacciones electrolticas con enzimas.
YODOFOROS Tienen amplio espectro de
actividad contra bacterias y hongos y presentan el mismo mecanismo de accin y espectro de actividad de los yodados. El ms conocido de los yodforos es la yodopovidona compuesta de yodo y polivinil-pirrolidona
La yodopovidona es activa contra bacterias grampositivas, gramnegativas, hongos, virus y micobacterias. Es efectiva contra el S. aureus MRSA y especies de enterococo. Resistencia significativa a yodopovidona no ha sido reportada
El lavado de las manos, como antisptico. La limpieza de la piel sana en procedimientos quirrgicos. La limpieza de objetos de superficie dura. En la actualidad, slo se emplea para la desinfeccin de puntos crticos en la industria, aplicndolo a superficies, ropa blanca, instrumentos, sanitarios y excreta Su espectro de actividad es sobre bacterias vegetativas, virus, micobacterias y esporas.
FENOLES
Son bactericidas a bajas concentraciones, causando dao a las membranas con prdida de los constituyentes citoplasmticos, inactivando irreversiblemente las oxidasas y deshidrogenasas de membrana y produciendo desnaturalizacin de las protenas.
Los fenoles se utilizan ms como desinfectantes, tienen propiedades antibacterianas frente a estreptococos, estafilococos y Escherichia coli, y tambin propiedades antifngicas y antivirales
OXIDANTES
Los oxidantes (peroxgenos) son Su espectro de actividad es productos que liberan oxgeno sobre bacterias vegetativas, naciente. Considerados como virus, micobacterias y esporas. compuestos bactericidas tiles, su mecanismo de accin consiste en la inactivacin de protenas enzimticas actuando sobre los grupos -SH de las protenas de estructura y de las protenas de funcin de las bacterias.
PERXIDO DE El perxido de hidrgeno tiene HIDRGENO efectos oxidantes por producir OH y radicales libres, los cuales atacan a los componentes esenciales de los
Es activo frente a bacterias y Antisptico tpico virus, segn la concentracin y en solucin al 3%. condiciones de utilizacin. Estudios in vitro de soluciones de perxido de hidrgeno al 3%
microorganismos como lpidos, protenas y ADN. Es un agente oxidante de efecto fugaz por ser descompuesto por las catalasas de los tejido COMPUESTO S DE AMONIO CUATERNARI O (agentes activos catinicos) Son sustancias que lesionan la membrana celular debido a que desorganizan la disposicin de las protenas y fosfolpidos, por lo que se liberan metabolitos desde la clula, interfiriendo con el metabolismo energtico y el transporte activo.
han mostrado amplio espectro de eficacia, con mayor actividad frente a bacterias grampositivas Activos para eliminar bacterias grampositivas y gramnegativas, aunque stas ltimas en menor grado. Son bactericidas, fungicidas y virucidas, actuando sobre virus lipoflicos pero no sobre los hidrfilos. No tiene accin sobre las micobacterias, ni son esporicidas. Desinfeccin de superficies no crticas. Accin desodorante. Limpieza de superficies speras o difciles.
RECOMENDACIN DE CONCENTRACIONES A EMPLEAR SEGN EL ELEMENTO A DESINFECTAR
ELEMENTO A DESINFECTAR Agua potable Desinfeccin de manos Desinfeccin de mesas e instrumental de acero inoxidable Desinfeccin de pisos, mesones en baldosn, ropa, tiles de aseo y material plstico Desinfeccin de material orgnico
PARTES POR MILLN (PPM) 0.2 50 200 500
5000
PREPARACION DE DESINFECTANTES Para la preparacin de los agentes desinfectantes a las concentraciones deseadas se emplea la siguiente formula: V1C1=V2C2
DONDE:
V1= V2*C2/ C1 V1= Volumen deseado C1= Concentracin conocida V2= Volumen conocido C2= Concentracin deseada
Ejemplo: Hipoclorito comercial al 13% y se desea preparar al 6% un volumen de 50 mililitros = 50cc de hipoclorito al 6%.
V1C1=V2C2 V1 (13%) =( 50ml) (6%) V1= (50ml) (6%) (13)% V1= 24 ml
Se debe agregar 24 ml. de hipoclorito de sodio a 26 ml. de agua destilada para tener 50 ml. de una solucin al 6% FACTORES QUE AFECTAN LA EFICACIA DE LOS ANTISEPTICOS Y DESINFECTANTES
CONCENTRACIN DEL AGENTE Y TIEMPO DE ACTUACIN
Existe una estrecha correlacin entre la concentracin del agente y el tiempo necesario para matar una determinada fraccin de la poblacin bacteriana. Si se modifica la concentracin se provocan cambios en el tiempo para lograr un mismo efecto. Un ejemplo es con los fenoles: un pequeo cambio en la concentracin provoca cambios muy acentuados en el tiempo para lograr un mismo efecto, as, si reducimos la concentracin de fenol desde un valor dado a la mitad, necesitamos emplear 64 veces ms tiempo para conseguir matar una misma proporcin de bacterias. Refirindonos al tiempo, no todas las bacterias mueren simultneamente, ni siquiera cuando se aplica un exceso del agente.
pH Afecta tanto la carga superficial neta de la bacteria como el grado de ionizacin del agente. En general, las formas ionizadas de los agentes disociables pasan
mejor a travs de las membranas biolgicas y por lo tanto son ms efectivos. Los agentes aninicos suelen ser ms efectivos a pH cidos; los agentes catinicos muestran ms eficacia a pH alcalinos.
TEMPERATURA Normalmente, al aumentar la temperatura aumenta la potencia de los desinfectantes. Para muchos agentes el aumento en 10 C supone duplicar la tasa de muerte. NATURALEZA DEL MICROORGANISMO Y OTROS FACTORES ASOCIADOS A LA POBLACIN MICROBIANA. Segn la especie, fase de cultivo, presencia de cpsula o de esporas y nmero de microorganismos se afecta la potencia. El bacilo tuberculoso suele resistir a los hipocloritos mejor que otras bacterias. La presencia de cpsula o esporas suelen conferir ms resistencia.
PRESENCIA DE MATERIALES EXTRAOS La presencia de materia orgnica como sangre, suero o pus afecta negativamente la potencia de los antispticos y desinfectantes de tipo oxidantes, como los hipocloritos y de tipo desnaturalizante de protenas, hasta el punto de hacerlos inactivos en cuanto a su poder desinfectante y/o
esterilizante.

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