Inhibidores de tripsina en complejo soja: Relevamiento

Azcona, JO ; Iglesias, BF ; Morao, L y Charrire, MV . 1 2 INTA, EEA Pergamino, Seccin Aves. Evonik Argentina.
1 1 2 1

Introduccin
El conocimiento cada vez ms preciso del valor nutricional de las materias primas utilizadas en la alimentacin de aves permitir incrementar la eficiencia de utilizacin de los alimentos, reducir el impacto ambiental consecuencia de las excretas provenientes de producciones intensivas y minimizar costos de alimentacin. En este sentido, el INTA, adems del anlisis proximal clsico, ha implementado la tcnica propuesta por Sibbald para determinar energa metabolizable verdadera (EMV) (Sibbald, 1976) y aminocidos digestibles (Sibbald, 1979) y los resultados obtenidos han sido publicados en distintas oportunidades (Bonino, 1991; Azcona, 1995; Schang, 1999). Ms recientemente, y en relacin al complejo soja, se han realizado estudios referidos al efecto de los inhibidores de tripsina sobre la EMV y aminocidos digestibles (Azcona, 2007; 2009).

Objetivo
El objetivo de este estudio fue presentar valores actualizados sobre la composicin nutricional del complejo soja (harina, poroto desactivado y expeller), representativos para la industria avcola argentina, analizando la relacin con los indicadores tradicionales de calidad (actividad uresica, protena soluble) y no tradicionales (factores inhibidores de tripsina).

Materiales & Mtodos

Estos estudios se hicieron en colaboracin con Evonik (determinaciones de aminocidos en materias primas y excretas) y Labonet de Alimental (determinaciones de inhibidores de tripsina y parmetros indirectos de control de calidad de desactivado). Las muestras fueron recolectadas en un perodo de 4 meses directamente de los productores de alimento. Se intent abarcar la mayor cantidad de zonas y proveedores para garantizar la representatividad de las mismas. La informacin que a continuacin se presenta est referida a un contenido de materia seca del 88 o 92% segn corresponda a fin de poder comparar los procesos o calidades. Para uso en formulacin es necesario corregir cada material en funcin del contenido de materia seca. Las materias primas han sido ordenadas de acuerdo a su contenido proteico o proceso.

Resultados & Discusin

Harinas de Soja
Asociado a una reduccin en el contenido de fibra cruda, se observ un aumento en el contenido de protena y de EMV, esto ltimo debido a una mejor utilizacin de la energa bruta de casi dos puntos porcentuales (Cuadro 1). El bajo contenido de inhibidores de tripsina (IT), menor a 5UTI/mg, muestra que hubo un buen desactivado. Los resultados de solubilidad de protenas (SP) y actividad uresica (AU) (indicadores indirectos de uso corriente) corroboraron este resultado. El tratamiento trmico aplicado a las harinas 46 sera de mayor magnitud, lo que se reflej en el menor contenido de IT y valores ms bajos en los restantes indicadores de calidad de desactivado.

Cuadro 1: Anlisis proximal, energa y calidad de desactivado en harina de soja (datos referidos a 88% MS) Tipo de harina Diferencia Parmetro (46-44) 44 46 Materia Seca Analizada(%) 88,00 89,00 1,00 Extracto Etreo (%) 2,23 2,51 0,28 Fibra Cruda (%) 5,97 4,06 -1,91 Cenizas (%) 6,16 6,16 Protena (%) 43,40 46,00 2,60 Energa Bruta (kcal/kg) 4127 4172 45 EMV (kcal/kg) 2712 2819 107 EMV/EB (%) 65,70 67,60 1,90 Solubilidad de Protenas (%) 80,40 74,80 Actividad Uresica (pH) 0,10 0,01 Inhibidores de Tripsina (UTI/mg) 4,00 2,80
EMV: Energa Metabolizable Verdadera; EB: Energa Bruta; UTI Unidades de Tripsina Inhibida.

Tal como lo muestra el Cuadro 2, el contenido de aminocidos totales aument con el contenido de protena. La digestibilidad de estos aminocidos, en general, fue mayor en las harinas 46, comportamiento similar al observado en la utilizacin de la energa. Esto se debera al menor contenido de fibra, elemento que interfiere en la digestin de las protenas. Cuadro 2: Aminocidos totales y coeficientes de digestibilidad en harina de soja (datos referidos a 88% MS) Tipo de harina Diferencia Aminocidos (%) (46-44) 44 46 Metionina + Cistina 1,19 1,32 0,13 Lisina 2,63 2,80 0,17 Treonina 1,68 1,84 0,16 Arginina 3,15 3,37 0,22 Valina 1,99 2,07 0,08 Coef. de Digestibilidad (%) Metionina + Cistina Lisina Treonina Arginina Valina CDAA 88,9 93,4 87,1 95,0 89,9 90,6 89,7 93,4 87,8 94,7 90,5 91,0 0,8 0,0 0,7 -0,3 0,6 0,4

CDAA: Coeficiente de Digestibilidad promedio de todos los Aminocidos.

Como sntesis, de las muestras de harina de soja analizadas, la nica diferencia observada fue consecuencia del proceso de descascarado que permiti concentrar otros nutrientes como protena y quitar fibra que no es bien digerida por las aves. No habra inconvenientes con la calidad del desactivado de los IT.

Poroto de Soja Desactivado

El contenido de materia seca vari segn el proceso de desactivado utilizado. A un mismo nivel de materia seca (88%), no se observaron diferencias de magnitud en la composicin proximal del poroto de soja en funcin del mtodo de desactivado (Cuadro 3). El desactivado por Aire Caliente result en una menor utilizacin de la energa bruta (Cuadro 3). Se observ que en el proceso hubo sobrecalentamiento de parte del material y a su vez material que no alcanz a ser desactivado. Esto se vio reflejado en la baja SP, en el alto contenido de AU e IT (Cuadro 3). No obstante, este resultado no se observa en todos los equipos de aire caliente, dado que aquellos que trabajan con sistemas de radiadores y no superan los 100C no presentaran este inconveniente.

Cuadro 3: Anlisis proximal, energa y calidad de desactivado en poroto de soja (datos referidos a 88% MS) Tipo de Proceso Parmetro Aire Caliente Vapor Extrusado Materia Seca Analizada (%) 91,40 88,80 92,30 Extracto Etreo (%) 19,81 19,66 19,55 Fibra Cruda (%) 5,08 4,86 5,42 Cenizas (%) 4,93 4,95 4,88 Protena (%) 34,20 35,20 33,80 Energa Bruta (kcal/kg) 5033 5087 4967 EMV (kcal/kg) 3366 3442 3721 EMV/EB (%) 66,90 67,70 74,80 Solubilidad de Protenas (%) 70,00 76,80 85,10 Actividad Uresica (pH) 0,20 0,14 0,19 Inhibidores de Tripsina (UTI/mg) 19,40* 5,40 17,20
EMV: Energa Metabolizable Verdadera; EB: Energa Bruta; UTI Unidades de Tripsina Inhibida. * Parmetro susceptible de mejorar.

Con el proceso de desactivado por Vapor, si bien se observ una menor utilizacin de la energa bruta respecto del Extrusado, se obtuvo un correcto desactivado como lo muestran los indicadores utilizados (Cuadro 3). El proceso de desactivado por Extrusin mostr un menor contenido de EB (Cuadro 3) comparado con los procesos de Aire Caliente y Vapor. Este resultado se ha observado en estudios anteriores (Azcona, 1995) y podra estar relacionado a una prdida de aceite durante la extrusin. Sin embargo, la EMV del poroto Extrusado fue ms alta comparada con la obtenida con los otros mtodos. Esta mejora en la utilizacin de la EB se debera al proceso de amasado y corte y consecuente liberacin de nutrientes, lo que facilitara el proceso de digestin. No obstante esta ventaja, se observ que no hubo un correcto desactivado del poroto como lo muestra el contenido de IT remanente (>17UTI/mg) y una SP por encima de 85% (Cuadro 3). Este resultado indicara que, ajustando el proceso, se podra mejorar an ms la utilizacin de la EB y que, de no controlarse este aspecto, podra verse afectado el desempeo de las aves al ser alimentadas con soja conteniendo altos niveles de IT. De acuerdo con estudios realizados por Penz (comunicacin personal), tanto la enzima ureasa como la mayora de los IT son sensibles al calor, no obstante, con niveles de actividad uresica de 0,2 unidades de pH, el remanente de IT super los 10 UTI/mg. Segn este trabajo, el nivel aceptable de IT debera situarse por debajo de 4 5UTI/mg de soja. En el presente relevamiento, los porotos de soja desactivados por Aire Caliente y Extrusados presentaron niveles de IT muy por encima de estos valores de referencia, lo que tambin se correlaciona con valores de AU de 0,2. En el Cuadro 4 se presentan muestras de poroto Extrusado con niveles de IT remanentes por encima de los valores observados en harinas de soja. No obstante, los valores de AU que en dos casos estaran dentro de lo aceptable ponen en evidencia que esta tcnica de medicin indirecta, que sera confiable para harinas o poroto desactivado por vapor, no lo sera en el caso de poroto Extrusado. Adems se observ un marcado efecto del contenido de IT sobre el CDAA lo que se explicara por la accin de estos IT sobre la digestin de las protenas. Cuadro 4: Variabilidad en la calidad de poroto de soja extrusado Material Extrusado # Parmetro 1 2 3 Solubilidad de Protenas (%) 86,20 82,30 86,70 Actividad Uresica (pH) 0,35 0,16 0,07 Inhibidores de Tripsina (UTI/mg) 22,80 16,90 11,90 CDAA (%) 85,20 87,80 91,90 EMV/EB (%) 75,00 73,00 76,50

Harinas 74,80 / 80,00 0,01 / 0,10 2,80 / 4,00

EMV: Energa Metabolizable Verdadera; EB: Energa Bruta; UTI Unidades de Tripsina Inhibida. CDAA: Coeficiente de Digestibilidad promedio de todos los Aminocidos.

En general el contenido de aminocidos no vari entre procesos de desactivado (Cuadro 5). Donde se observ un cambio importante en funcin del mtodo de desactivado fue en el CDAA (Cuadro 5) siendo el mtodo de Extrusin el que brinda los valores ms altos y el de Aire Caliente los ms bajos. Esta respuesta es coincidente con la observada en trminos de utilizacin de la EB.

Cuadro 5: Aminocidos totales y coeficientes de digestibilidad en poroto de soja desactivado (datos referidos a 88% MS) Tipo de Proceso Aminocidos (%) Aire Caliente Vapor Extrusado Metionina + Cistina 1,02 0,99 0,98 Lisina 2,19 2,22 2,04 Treonina 1,41 1,41 1,33 Arginina 2,65 2,72 2,43 Valina 1,69 1,67 1,60 Coef. de Digestibilidad (%) Metionina + Cistina Lisina Treonina Arginina Valina CDAA 85,5 90,2 83,9 92,0 85,9 87,1 88,8 92,5 86,2 93,2 89,0 89,8 89,3 92,2 87,2 99,0 89,7 91,1

CDAA: Coeficiente de Digestibilidad promedio de todos los Aminocidos.

En sntesis, se observaron diferencias en el valor nutricional de soja desactivada debidas a proceso. El orden de aporte de EMV y aminocidos digestibles fue Extrusado > Vapor > Aire Caliente. Se hallaron inconvenientes en el proceso de desactivado (materiales sobrecalentados, crudos o combinacin de ambos). Dado estos resultados, adems de AU y SP, sera conveniente cuantificar el contenido de IT remanentes para tener un indicador ms preciso de cmo result el proceso de desactivado particularmente en el caso de poroto desactivado por extrusin.

Expeller de Soja
Considerando la gran variabilidad en la composicin de los materiales analizados, se decidi agruparlos en funcin del contenido de lpidos (Cuadro 6). El contenido de energa (Cuadro 6) se increment en funcin del contenido de lpidos, lo mismo que la utilizacin de la EB. No obstante, la SP (Cuadro 6) en el caso de los materiales con ms aceite y provenientes de un mismo origen, fue muy baja. Este resultado indicara que hubo sobrecalentamiento, lo que se confirm con los bajos valores de AU e IT respecto de las otras categoras de Expeller evaluadas. Cuadro 6: Anlisis proximal, energa y calidad de desactivado en expeller de soja (datos referidos a 92% MS) Contenido de Lpidos Parmetro <7 7y8 9 y 10 >11 Materia Seca Analizada(%) 93,00 94,00 94,00 92,00 Extracto Etreo (%) 6,35 7,78 9,29 13,08 Fibra Cruda (%) 5,00 5,51 5,20 Cenizas (%) 5,64 6,24 5,27 5,93 Protena (%) 41,40 41,82 41,30 41,09 Energa Bruta (kcal/kg) 4513 4521 4667 4707 EMV (kcal/kg) 2991 3092 3264 3365 EMV/EB (%) 66,30 68,40 69,90 71,50 Solubilidad de Protenas (%) 74,80 82,00 83,90 64,30* Actividad Uresica (pH) 0,14 0,20 0,18 0,07 Inhibidores de Tripsina (UTI/mg) 3,80 6,50 10,90 3,50
EMV: Energa Metabolizable Verdadera; EB: Energa Bruta; UTI Unidades de Tripsina Inhibida. * Parmetro susceptible de mejorar (sobrecalentado).

El contenido de aminocidos totales (Cuadro 7) no difiri entre categoras, excepto para el Expeller >11% de lpidos. Este material, como se indicara anteriormente, sufri un sobrecalentamiento, impacto que se reflej en una cada en el contenido de algunos aminocidos, tales como lisina y cistina, dado que parte de los mismos se acomplejara con otros componentes y dejaron de ser detectables analticamente. Con respecto a los coeficientes de digestibilidad de cada aminocido en forma individual (Cuadro 7), el efecto del sobrecalentamiento se observ con mayor claridad en el caso de la lisina donde dicho

coeficiente fue el ms bajo dentro de todas las categoras de expeller consideradas. En el caso del CDAA, dicho efecto no fue tan marcado. La magnitud del sobrecalentamiento se observ cuando se consideraron los valores en trminos de aminocidos digestibles (Cuadro 7) que rene en un solo valor la prdida de aminocidos totales como la menor digestibilidad de los mismos. Cuadro 7: Aminocidos totales, coeficientes de digestibilidad y aminocidos digestibles en expeller de soja (datos referidos a 88% MS) Contenido de Lpidos Aminocidos (%) <7 7y8 9 y 10 >11 Metionina + Cistina 1,10 1,19 1,19 1,25 Lisina 2,59 2,53 2,66 2,27 Treonina 1,60 1,74 1,70 1,75 Arginina 3,15 2,97 3,27 2,76 Valina 2,11 1,98 2,05 2,00 Coef. de Digestibilidad (%) Metionina + Cistina Lisina Treonina Arginina Valina CDAA Aminocidos Digestibles (%) Metionina + Cistina Lisina Treonina Arginina Valina 85,6 90,6 84,6 93,8 92,7 90,4 1,02 2,34 1,46 2,95 1,96 87,2 93,0 85,3 94,6 87,6 89,4 1,05 2,35 1,45 2,80 1,74 92,8 96,1 90,7 96,5 92,6 94,0 1,16 2,55 1,59 3,16 1,89 87,5 89,3 85,6 94,4 95,5 91,9 0,96 2,03 1,37 2,61 1,81

CDAA: Coeficiente de Digestibilidad promedio de todos los Aminocidos.

En sntesis, fue necesario considerar distintas categoras de expeller en funcin del contenido de aceite. La EMV estuvo asociada a este parmetro. Tambin se observaron fallas en el proceso de desactivado (calentamiento excesivo) afectndose la EMV y contenido de aminocidos digestibles.

Conclusiones
No habra inconvenientes de calidad en las harinas de extraccin. El proceso de desactivado de soja por extrusin sera el ms promisorio desde un punto de vista biolgico debindose prestar especial atencin a la presencia de IT remanentes por lo que se sugiere hacer este tipo de determinaciones en el momento de instalar un equipo o para identificar proveedores que hagan un buen proceso. En el caso del expeller de soja hay que caracterizarlo en funcin del contenido de aceite remanente, controlar que no haya un sobrecalentamiento (SP) y chequear la presencia de IT remanentes dado que en muchos casos, previo a la extraccin del aceite se aplica extrusin con el fin de ayudar al proceso de extraccin y desactivar a los IT.

Bibliografa
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