Introduction La spectroscopie dabsorption dans lUV et le visible est une mthode trs commune dans les laboratoires.

Elle est base sur la proprit des molcules dabsorber des radiations lumineuses de longueur donde dtermine. Principe Cette mthode consiste tudier lexcitation dune molcule soumise un rayonnement UV-visible. Lorganicien utilisera en gnral le domaine compris entre 175 nm et 800 nm cest--dire le proche ultra-violet et le visible (nergies variant de 630 kJmol1 2 520 kJmol1). Considrons deux niveaux dnergie E1 et E2 dune molcule

Supposons un lectron dans son tat fondamental cest--dire occupant le niveau E1 de plus basse nergie. Irradions cette molcule avec un rayonnement dnergie E = h. Pour une longueur donde donne 12 correspondant une frquence 12 lnergie envoye sur cette molcule correspond exactement la diffrence photon. On dira que lon a une transition lectronique. Les diffrents types de transitions Un spectre est une reprsentation de labsorption en fonction de la Dans les composs organiques -transitions -> * : max < 150 nm (UV lointain) -transitions n -> * : 150 nm < max < 250 nm, intensit moyenne (50 < < 2000 L.mol-1.cm-1)
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E = E2 E1.

Llectron passera alors du niveau E1 au niveau E2 par absorption dun

-transitions ->* : max > 190 nm (> 400 nm pour systmes trs conjugus), forte intensit (1000 < < 10000 L.mol-1.cm-1) -transitions n->* : max > 190 nm, faible intensit (10 < < 100 L.mol-1.cm-1

Comment se prsente un spectre UV-visible Un spectre est une reprsentation de labsorption en fonction de la longueur donde On sattendrait observe un simple signal la longueur donde dabsorption. En fait un spectre UV ou visible dans sa forme la plus simple est une courbe proche dune gaussienne

Ce spectre prsente donc un maximum dabsorption la longueur donde considre note max caractristique dune transition dans une molcule donne. Ce phnomne est li aux vibrations des liaisons de la molcule qui font que la valeur de la diffrence dnergie E Application de la spectroscopie UV-visible en chimie organique Comme nous lavons mentionn, les transitions que lon observe usuellement sont principalement les transitions et n. La spectroscopie UV-visible permettra donc de dceler des nuages . Un nuage responsable de labsorption porte le nom de chromophore. Donc Chromophore : groupement prsentant une absorption caractristique dans lUV ou le visible

Par ailleurs la conjugaison (donc le nombre de formes limites) diminue lnergie de transition lectronique donc toutes autres choses tant gales par ailleurs plus la molcule est conjugue, plus les maxima dabsorption sont dplacs vers les grandes longueurs dondes. Ce phnomne porte le nom deffet bathochrome. Nous indiquons quelques exemples sur le tableau

La gure suivent reprsente quelques spectres qui montrent clairement que leffet bathochrome est li la conjugaison

Exemples de spectres UV. (a) Benzaldhyde (Ph-CHO), (b) Cinnamaldhyde (PhCH=CHCHO).

Mesure lintensit de labsorption cet effet considrons une cuve en quartz (donc transparente aux rayons ultraviolets) de longueur (L) traverse par un rayonnement de longueur donde () et dintensit (Io) Introduisons dans cette cuve un compos en solution. Soit (C) la valeur de sa concentration.

Sil ny a pas absorption la longueur donde considre, le rayon lumineux sortira de la cuve avec la mme intensit. Si par contre il y a absorption, lintensit du rayonnement transmis sera I avec I < Io. On dnit alors la transmittance par la relation : T = I/I0 et labsorbance par la relation : A = log (Io/I) = log (1/T). On a la loi de Beer-Lambert qui indique
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 une longueur donde donne labsorbance est proportionnelle la longueur de la cuve et la concentration en solut.

O (L) est la longueur de la cuve en cm, (c) la concentration de compose molL1 () le coefficient dextinction qui est un coefficient de proportionnalit caractristique dun compos une longueur donde donne dans un solvant donn. Validit de la loi de Beer-Lambert La loi de Beer-Lambert s'applique pour des radiations monochromatiques et sa validit est bonne lorsqu'on travaille avec des solutions suffisamment dilues pour ne pas modifier les proprits des molcules (association, complexation ). Intrts de la spectroscopie UV-Visible large domaine dapplications (Chimie minrale, organique, biochimie),90% des analyses mdicales - analyses quantitatives (loi de Beer-Lambert) - grande sensibilit : limite de dtection 10-5 M - prcision : 1 - 5% erreur - simplicit, rapidit. Appareillage et Fonctionnement La dtermination des longueurs donde des rayonnements lectromagntiques absorbs se fait grce lutilisation dun spectrophotomtre. Lappareil le plus utilis est le spectrophotomtre mono-faisceau, dont le schma de principe est prsent ci-dessous :

Une source polychromatique (mettant dans lUV ou le visible) est place devant un prisme. Ce systme dispersif va dcomposer le rayonnement polychromatique mis par la source. En orientant correctement le systme diaphragme-chantillon-photodtecteur, la solution contenue dans la cuve sera irradie avec un rayonnement quasi monochromatique. Le diaphragme, une simple fente fine, permet dclairer lchantillon avec un faisceau de faible largeur, donc de bonne qualit monochromatique, le photodtecteur mesurant quant lui lintensit du rayonnement transmis aprs traverse de la solution chantillon, note It,. Dun point de vue pratique, lchantillon est constitu de ldifice tudi, dissous dans un solvant et contenu dans une cuve. Il faut donc que solvant et cuve ninterfrent pas dans les donnes mesures. Ainsi on les choisira transparents dans le domaine choisi. Dans le commerce, il existe diffrentes cuves adaptes aux diffrents domaines spectraux rencontrs (plastique pour le visible, quartz de plus ou moins bonne qualit pour lUV). Pour ce qui est du solvant, son influence est neutralise en ralisant un blanc, c'est--dire en mesurant lintensit du rayonnement transmis aprs traverse de la cuve ne contenant que du solvant. Les chantillons doivent tre
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transparents afin dviter tout phnomne de diffusion : ne pourront tre analyses que les solutions limpides dans des cuves propres. Exprimentalement, lappareil extrait comme donne brute lintensit It,, obtenue aprs traverse de la solution. Celle-ci tant dpendante de la source, on prfre calculer deux grandeurs drives : labsorbance A et la transmittance T. APPLICATIONS DE LA SPECTROSCOPIE UV-VISIBLE Analyse qualitative Les spectres UV fournissent gnralement peu de renseignements sur la structure molculaire des composs compars aux spectres IR. Nanmoins, on les utilise soit pour une confirmation soit pour une identification grce aux rgles empiriques. Analyse quantitative Lanalyse quantitative par la spectromtrie UV-visible est trs employe (beaucoup plus que lanalyse qualitative) grce lutilisation de la loi de Beer-Lambert. Comme applications, on peut citer : Dosage du fer dans leau ou dans un mdicament Dosage des molcules actives dans une prparation pharmaceutique Dosage du benzne dans le cyclohexane Autres applications Dautres applications sont connues pour le Contrle Qualit ou le suivi de la cintique dune raction, la dtermination des constantes de dissociation des acides ou des constantes de complexation, la dtermination des masses molaires