MBITO FARMACUTICO

BIOQUMICA

Apoptosis: muerte celular programada

JOAQUN JORDN
Doctor en Farmacia y profesor titular de Farmacologa. Centro Regional de Investigaciones Biomdicas. Universidad de Castilla-La Mancha (joaquin.jordan@uclm.es)

En todo organismo multicelular adulto debe existir un equilibrio entre la generacin o proliferacin y la desaparicin o muerte de las clulas que lo componen, con el fin de mantener un tamao constante. La alteracin de este equilibrio conduce a situaciones patolgicas como el cncer, cuando la proliferacin se encuentra aumentada, o las enfermedades degenerativas, cuando los procesos de muerte celular estn incrementados.

esde el embrin hasta el organismo adulto fisiolgicamente sano, millones de clulas mueren sin dejar cicatrices ni activar clulas inflamatorias. Este fenmeno no tiene lugar de una forma aleatoria, sino que se trata de un proceso activo, bien definido genticamente, en el que las clulas estn destinadas a morir en un tiempo fijado. As, los episodios que rodean a la muerte celular programada entran a formar parte de los procesos fisiolgicos que resultan necesarios para el funcionamiento normal de un organismo. Durante la historia, la muerte celular fisiolgica ha sido conocida por varios nombres. Virchow, en 1858, fue el primer investigador en describir los procesos de muerte celular y, basndose slo en parmetros macroscpicos, los defini como degeneracin, mortificacin y necrosis. En 1879, utilizando observacio-

nes microscpicas se introducen los trminos Karyorhesis y Karyolysis, que hacen referencia a la desintegracin y desaparicin del ncleo. Diez aos ms tarde, Arnheim, propone los trminos piknosis y marginacin de la cromatina. Flemming, estudiando los folculos de los ovarios de los mamferos, observ y describi la desaparicin de clulas, denominando a este proceso chromatolisis, trmino que fue reutilizado por Grper, en 1914, como antnimo de los procesos de mitosis. Pero no fue hasta 1972 cuando Kerr, Wyllie y Currie implantan el trmino apoptosis, ampliamente utilizado en nuestros das, que evoca a la cada de las hojas desde los rboles en otoo o la de los ptalos de las flores. En la ltima dcada, hemos sido testigos de un crecimiento exponencial de los trabajos de investigacin realizados sobre los procesos que rodean a la

muerte celular y parece que se ha llegado al consenso de englobarlos en dos grandes grupos: necrosis y apoptosis. El trmino necrosis rene los procesos violentos y catastrficos, donde la degeneracin celular es pasiva sin un requerimiento de energa en forma de ATP. Aparece frecuentemente como consecuencia de un dao traumtico o por la exposicin a toxinas. En ella tiene lugar la prdida aguda de la regulacin y de la funcin celular que conlleva un proceso osmtico desmesurado y finaliza con la lisis de la membrana celular, liberando el contenido intracelular. Este fenmeno conduce a las clulas vecinas tambin hacia la muerte, atrayendo, al mismo tiempo, a las clulas inflamatorias, lo que hace que en las reas donde se observan clulas necrticas sea frecuente encontrar nuevas cluVOL 22 NM 6 JUNIO 2003

100 OFFARM

BIOQUMICA

las que desarrollan este tipo de muerte celular, adems de originar una reaccin de inflamacin y una cicatriz fibrosa que deforma el tejido y el rgano afectado. El segundo tipo de muerte celular es conocido como apoptosis o muerte celular programada. En este proceso las clulas se autodestruyen sin desencadenar reacciones de inflamacin ni dejar cicatrices en los tejidos. La apoptosis es por tanto considerada como una muerte natural fisiolgica, resultando en un mecanismo de eliminacin de clulas no deseadas, daadas o desconocidas y que desempea un papel protector frente a posibles enfermedades. Las rutas apoptticas, por tanto, intervienen en algunos procesos fisiolgicos, a saber: Las etapas de desarrollo donde se producen clulas en exceso. En el refinamiento de la inervacin al retirar aquellas neuronas menos capacitadas, a modo de seleccin celular darwiniana en el sistema nervioso, en la apertura de los orificios en el tubo digestivo, en la formacin de rganos como los riones o en la remodelacin de los huesos y cartlagos y durante la morfognesis de los dedos en la eliminacin de las reas interdigitales. Como dato curioso, mencionaremos que los procesos de apoptosis son los responsables de que los humanos tengamos cinco dedos en cada extremidad y que su ausencia, por ejemplo, en las aves palmpedas les hace conservar su caracterstica pata palmeada. La seleccin de linfocitos . Al mediar en la eliminacin de aquellos que reconocen antgenos propios y en la eliminacin de clulas infectadas o tumorales por histlisis y tambin, en los mecanismos de defensa frente a tumores en que intervienen clulas que incluyen los linfocitos T citolticos, las natural killer y los macrfagos.

Tabla 1. Diferencias entre los procesos de necrosis y apoptosis Necrosis Condiciones Tamao celular Membrana citoplasmtica Mitocondria Degradacin del ADN Requerimiento energtico Reaccin inflamatoria Patolgica Edema Lisis, rotura Hinchazn, rotura Aleatoria No S Apoptosis Fisiolgica Alteraciones patolgicas Retraccin Expresin de glucoprotenas Funcional Ordenada S No

No obstante, dependiendo de la etiologa, los procesos apoptticos pueden resultar perjudiciales, siendo responsables de diversas afecciones (ver tabla) y su desregulacin conduce a situaciones patolgicas. As, aumenTcnicas de determinacin tos en reas del sistema cardiovascular Caractersticas morfolgicas como el nodo sinusal, pueden causar arritmias paroxsticas en el nodo AV o Los procesos apoptticos se caracteri- Las tcnicas utilizadas para la en el haz de His pueden originar blo- zan por cambios morfolgicos como: deteccin de la participacin de los
VOL 22 NM 6 JUNIO 2003

queos o reentradas y en el miocardio contrctil conducir a miocardiopatas dilatadas o displasia arritmognica. En los vasos con lesiones arteriosclerticas, un aumento de los procesos apoptticos, puede ocasionar inestabilidad de las placas y contribuir, asimismo, en la respuesta a la lesin postangioplastia y originar una displasia fibromuscular focal y degeneracin de la capa media de las arterias coronarias. En pacientes con enfermedades neurodegenerativas se ha observado una disminucin en el nmero de clulas en determinadas poblaciones neuronales, por ejemplo, en la enfermedad de Alzheimer (EA) aparece una deplecin en neuronas colinrgicas del hipocampo, amgdala y corteza. En la enfermedad de Parkinson (EP) son las neuronas dopaminrgicas de la sustancia nigra y ganglios basales las afectadas, mientras que en enfermedades como la de Huntington son las neuronas de los ganglios basales y del tlamo y, por ltimo, en la esclerosis lateral amiotrfica (ELA) se han descrito disminuciones en la poblacin de motoneuronas. Esta prdida neuronal se refleja en la aparicin de disfunciones como alteraciones en los procesos de memoria y lenguaje en la EA, modificacin en el control y la coordinacin del movimiento en la EP, disminucin en las capacidades intelectuales y aparicin de movimientos irregulares e involuntarios de las extremidades o de los msculos de la cara en la enfermedad de Huntington y la progresiva paralizacin de los msculos que intervienen en la movilidad, el habla, la deglucin y la respiracin en la ELA.

Aumento brusco de la densidad intracelular. El retculo endoplasmtico se dilata, formando vesculas y fusionndose con la membrana plasmtica, eliminando as su contenido al medio extracelular. Esta rpida, pero selectiva, salida de fluidos de iones intracelulares se encuentra mediada por transportadores inicos (cotransportador cloro-potasio-sodio, que inhibe la prdida de agua y sodio de las clulas afectadas). Incremento moderado, pero sostenido, de la concentracin de calcio libre citoplasmtica ([Ca+2]i), diferencia clara frente a los procesos de necrosis, donde su aumento es drstico. Cambios en la composicin de la membrana celular. Translocacin de grupos glicanos a la superficie celular que van a actuar como seal de reconocimiento, permitiendo la unin de fagocitos y, de esta manera, evitando la liberacin del contenido celular y la posible reaccin de inflamacin. Alteracin en la conformacin de elementos del citoesqueleto. Como consecuencia aparece una deformacin, resultado de la actividad de las proteasas, modificndose el transporte intracelular retrgrado de factores de crecimiento y de protenas. Aumento y activacin de la sntesis de determinadas protenas necesarias en las rutas metablicas de los procesos de muerte celular. Condensacin y fragmentacin de la cromatina, por accin de endonucleasas endgenas, en fragmentos denominados oligonucleosomas.

OFFARM

101

BIOQUMICA

procesos de apoptosis estn basadas, fundamentalmente, en los cambios descritos en el apartado anterior. Entre ellas, las ms utilizadas son: El uso de fluorocromos capaces de intercalarse en el ADN que permiten visualizar, gracias a la ayuda del microscopio, la morfologa de la cromatina. Estos colorantes, como el etidio, propidio y hoechst, son utilizados con frecuencia en citometra de flujo y aplicaciones como la hipoploida hacen de ella una tcnica cuantitativa. La microscopia electrnica que permite la visualizacin en detalle de la cromatina sin necesidad de tincin especfica. La electroforesis en geles de agarosa de ADN aislado de tejidos o de cultivos celulares que, teidos con colorantes como el yoduro de etidio, permiten el anlisis de la integridad del genoma. La tincin TUNEL, basada en la capacidad que presentan los extremos del ADN hidrolizados por la endonucleasa a unirse a una cadena de dioxigenina dUTP. El uso de tcnicas immunolgicas permite su identificacin posterior. El marcaje de fostatidilserina en el lado extracelular de la membrana citoplasmtica con la protena annexina V. Durante los procesos de muerte celular se pueden distinguir tres etapas: activacin, propagacin y ejecucin. Fase de activacin Los procesos apoptticos pueden ser activados bien por una induccin negativa (como la prdida de una actividad supresora, la falta de factores de crecimiento o la disminucin de los contactos con las clulas que la rodean) o por una induccin positiva como es el resultado de la unin de un ligando a un receptor o la recepcin de seales conflictivas. Por otro lado, los mamferos presentan mecanismos que permiten al organismo dirigir a clulas individuales a la autodestruccin, apoptosis instructiva, especialmente importante en el sistema inmunolgico.
102 OFFARM

Ligando Receptor

Segundos mensajeros

Genes endonucleasas

Ncleo

Mitocondria

Complejos enzimticos

Marcadores

Fagocitosis

Fig 1. Rutas celulares activadas durante los procesos apoptticos.

Receptores Localizados preferentemente en la membrana citoplasmtica, los receptores establecen conexiones con el espacio extracelular y reciben continuamente seales desde el exterior y de las clulas vecinas. Los receptores que participan en los procesos de muerte celular se pueden clasificar en dos grupos: aquellos cuya activacin siempre conduce a la muerte de la clula, conocidos como receptores de muerte receptor Fas y receptor del factor de necrosis tumoral (TNF) y aquellos que desempean una funcin fisiolgica, pero su sobreactivacin puede conducir tambin a la muerte (receptores de glutamato, de trombina y canales inicos dependientes de voltaje). Los receptores de muerte se caracterizan por presentar un dominio extracelular, rico en cistena y un segundo dominio de localizacin citoplasmtica conocido como el dominio de la muerte que es el responsable de la activacin de la maquinaria apopttica. Una vez activados, los receptores transfieren la informacin al interior celular mediante un sistema complejo de interacciones protena-protena que activan diversas cascadas intracelulares. La protena transmembrana Fas, en su porcin intracelular, enlaza con FADD (factor associated death domain), activando las caspasas 8 y 10. Este receptor y su ligando

desempean un papel importante en modelos apoptticos como son la supresin perifrica de las clulas T maduras al final de una respuesta inmune, la muerte de clulas diana (clulas infectadas por virus), la destruccin de clulas cancerosas mediada por clulas T citotxicas y por natural killer, as como la eliminacin de las clulas inmunes reactivas a tumores que expresan constitutivamente el ligando de Fas. El receptor para el TNF conecta con complejos como el TRADD (TNFR-associated death domain) que acta como una plataforma de adaptacin para reclutar molculas de sealizacin, como la protena de interaccin con el receptor, y activa factores de transcripcin (NFk B y el JNK/AP-1). A diferencia de Fas, el receptor de TNF raramente activa procesos de apoptosis, a menos que la sntesis de protenas se encuentre bloqueada, sugiriendo la existencia de factores celulares que suprimen los estmulos apoptticos generados por el TNF. El factor de crecimiento nervioso (NGF) es una neurotrofina que desempea un papel crucial en el desarrollo de determinadas reas del sistema nervioso. Sus acciones estn mediadas por receptores unidos a cinasas de tirosina (TrKA) y por el receptor p75. Este ltimo posee un dominio de muerte que activa rutas
VOL 22 NM 6 JUNIO 2003

BIOQUMICA

Tabla 2. Inductores de la apoptosis Fisiolgicos TNF Ligando de Fas TGF-beta Neurotransmisores (glutamato, dopamina) Ausencia de factores de crecimiento Prdida de fijacin de la matriz Ca2+ Glucocorticoides Asociados al dao celular Golpe trmico Infeccin viral Toxinas bacterianas Oncogenes: myc, rel, E1A Factores de transcripcin: p53 Linfocitos T citotxicos Agentes oxidantes Radicales libres Retirada de nutrientesantimetablicos Terapia Quimioteraputica (cisplatino, doxorubicina, pleomycina, cyticina arabinosida, metotrexato, vincristina) Radiacin Radiacin UV Toxinas Etanol Betaamiloide Veratridina 6-OHDA 3-NP Metanfetamina

paralelas, como la cascada de cinasas conocidas genricamente como cinasas de protenas activadas por estrs, o el factor de transcripcin NF-kB, conjuntamente con la cascada de caspasas y en algunos modelos es mediada por la ceramida. Por ltimo, los receptores del aminocido neurotransmisor glutamato participan en ms del 80% de las sinapsis excitadoras del SNC y se han relacionado con los procesos que rodean a la memoria y a la transmisin nerviosa. Sin embargo, su sobreestimulacin puede desencadenar la muerte neuronal excitotoxicidad descrita en los procesos como isquemia/reperfusin, infarto, esclerosis lateral amiotrfica o enfermedad de Parkinson. Rutas de sealizacin Entre los segundos mensajeros que participan en los procesos de muerte celular ms estudiados se encuentran el calcio y las especies reactivas del oxgeno, aunque recientemente estn adquiriendo gran importancia otros como la ceramida y algunas protenas tales como factores de transcripcin (p53) y oncogenes (c-myc, familia de bcl). La activacin de estos segundos mensajeros suele conducir a la disfuncin de las organelas citoplasmticas, como la mitocondria y el retculo endoplsmico, o la regulacin de la actividad de complejos enzimticos como cinasas y fosfatasas que a su vez regulan la funcin de otras protenas. Durante el procesamiento normal de seales (la contraccin de la fibra muscular, la secrecin de neurotransmisores) tienen lugar aumentos transitorios de la [Ca2+]i. Sin embargo, incrementos aberrantes pueden producir dao celular y en algunos casos su muerte. En estos procesos,
104 OFFARM

el calcio puede activar enzimas como proteasas y lipasas, induciendo la produccin de radicales libres, adems de regular y potenciar la expresin gnica al modular la actividad de factores de trasncripcin. El papel de las EROS fue revisado con detalle en el trabajo de Paredes y Roca en esta Revista. En condiciones fisiolgicas, las clulas presentan un equilibrio entre la generacin de radicales libres y los sistemas antioxidantes de defensa. En algunos procesos de muerte celular se ha descrito la ruptura de este equilibrio, observndose un aumento en la oxidacin de protenas con la formacin de grupos carbonilo y peroxidacin lipdica, habindose demostrado la existencia de una localizacin compartimentada de derivados carbonlicos libres a partir de lpidos, protenas, hidratos de carbono y cidos nucleicos (2,4dinitrofenilhidracina). La ceramida empieza a ser considerada como un segundo mensajero que participa en los procesos de muerte celular. Es un glucolpido sintetizado en el retculo plasmtico y en las mitocondrias, cuya mayor concentracin se localiza junto a la porcin interna de la membrana plasmtica. Su traslocacin a la mitocondria provoca cambios inicos entre la matriz mitocondrial y el citoplasma, produciendo un descenso del potencial transmembrana mitocondrial y la formacin del poro de permeabilidad transitoria mitocondrial, conduciendo a la apoptosis. Los valores de ceramida pueden ser aumentados tanto por factores externos (radiacin UV, agentes oxidantes), como a travs de receptores de membrana (FasR y TNFR) o directamente por glucocorticoides. Alteraciones no corregidas del

ADN, en especial mutaciones cancergenas, activan el p53 que provoca apoptosis a travs de un mecanismo mediado por ceramida. Durante algunos procesos de muerte celular es necesaria la sntesis de novo de protenas. Entre las familias de genes que median la destruccin controlada de la clula, destacan los conocidos como genes de respuesta inmediata, al que pertenecen protenas como c-jun y c-fos. Otros genes que participan activamente en los procesos apoptticos son p53, c-myc y la familia de Bcl2. El gran nmero y diversidad de genes envueltos en la muerte celular muestra la complejidad de los procesos de apoptosis en el mbito gentico (tablas 1 y 2). La protena p53 es un factor de transcripcin que es activado en respuesta al dao en el ADN. Aumentos en los valores p53 conducen a la induccin en la transcripcin de otros genes como p21/WAF1/Cip 1, un inhibidor de protenas cinasas reguladas por ciclinas, inhibiendo la entrada en fase S del ciclo celular. El resultado neto de estas interacciones es una parada en fase G1, la cual provee de una barrera cintica en la replicacin de un genoma potencialmente daado. Si la clula no puede reparar el dao gentico, p53 induce la muerte celular por un mecanismo que todava no se conoce. Se ha postulado que este proceso puede estar mediado por aumentos en la sntesis de Bax, una protena de la familia de Bcl-2 con propiedades proapoptticas. De esta manera, p53 se convierte en el guardin del genoma y, por extensin, del organismo, vigilando la correcta reparacin de las alteraciones genticas originadas por diversos factores externos. Un mal funcionamiento del gen p53
VOL 22 NM 6 JUNIO 2003

BIOQUMICA

puede promover el desarrollo de tumores al permitir la proliferacin de clulas que no han completado la reparacin del ADN. Bcl-2 da nombre a una familia de oncogenes en los que se encuentran miembros que favorecen la supervivencia celular (Bcl-X y Bcl-2) mientras que otros (Bid, Bad, Bax) ayudan al suicidio celular. Estas protenas antagonistas forman dmeros unos con otros, siendo su abundancia relativa la que determina el umbral de desencadenamiento de la muerte celular. La expresin de Bcl-xL es indispensable, por ejemplo, para la supervivencia de los linfocitos embrionarios, mientras que los linfocitos de los ratones que carecen de Bcl-2 perviven con normalidad hasta el nacimiento aunque desaparecen, todos ellos, pocos das despus. La sobreexpresin de bcl-2 y de bcl-xl confiere a las clulas proteccin frente a agentes txicos. Por ltimo, el protooncogn cmyc desempea un papel decisivo tanto en procesos de proliferacin celular como de apoptosis. As, se ha descrito que mientras su ablacin conduce a la parada de la proliferacin celular, su sobreexpresin es un estmulo apopttico. Fase de decisin Una vez que la clula recibe una seal de muerte, debe decidir si debe sobrevivir o desencadenar los procesos de muerte. En esta fase de decisin se ha situado a la mitocondria como organelo fundamental. La funcin de sta fue objeto de estudio por nuestro grupo de investigacin en una revisin previa en esta Revista. Uno de los acontecimientos principales que tienen lugar en la mitocondria es la alteracin de la permeabilidad de sus membranas debido a la formacin de un complejo multiproteico (poro de permeabilidad transitoria mitocondrial) que conduce a la liberacin del contenido intramitocondrial como el citocromo C, el factor inductor de apoptosis y miembros de la familia de caspasas. Otros episodios son alteraciones en la cadena transportadora de electrones, prdida del potencial
VOL 22 NM 6 JUNIO 2003

electroqumico de membrana y especficas de tetrapptidos que concambios del ciclo metablico de tienen un residuo aspartato. Entre xido/reduccin. sus sustratos se encuentran: elementos del citoesqueleto (actina, fodrina, protena Tau y catenina), enzimas Fase de ejecucin encargadas de reparar (PARP) o degradar (ADNasa) el ADN celular, Una vez que la clula ha tomado la factores de transcripcin (retinoblasdecisin de morir, en su interior se toma, HDM2), protenas reguladoproduce una serie de procesos bio- ras (protena cinasa C, fosfatasas 2A, qumicos que conducen a la degrada- cinasas de adhesin focal), as como cin de protenas y de la cromatina. miembros de la familia del oncogn La protelisis, a diferencia de la Bcl-2 (Bid). mayora de las modificaciones posLas calpanas son cistena proteatranslacionales, es irreversible y sas que requieren Ca2+ para su trasquizs por ello es altamente espe- locacin hasta la membrana citocfica. Regula fenmenos biolgi- plasmtica, rpida autlisis y acticos crticos en los que se ve involu- vacin. Entre sus sustratos se crado un grupo reducido de sustra- encuentran tambin factores de to. La mayora de las proteasas son transcripcin, oncogenes, protesintetizadas como precursores de nas de membrana y del citoesquemuy baja actividad cataltica que leto. stas estn sobreactivadas son activados por procesamiento durante procesos excitotxicos e proteoltico mediado por la unin isqumicos y en patologas como a un cofactor o por la retirada de la enfermedad de Alzheimer. un inhibidor. Entre las proteasas implicadas en los procesos de muerte celular se Dianas farmacolgicas encuentran las caspasas, las calpanas, la granzima B y el complejo multi- Estas diferencias entre apoptosis y necrosis son crticas en la observaproteico denominado proteosoma. Las caspasas son una familia de cin del desarrollo de los tratacistena-proteasas que han sido mientos clnicos. La naturaleza conreconocidas como los homlogos trolada de la va apopttica permite en mamferos del producto del gen la intervencin o interrupcin en la proapopttico ced-3 del nematodo progresin de las patologas degeC. elegans. stas se engloban en tres nerativas. Sin embargo, en los casos grupos: caspasas implicadas en la de necrosis, el dao celular es irreproduccin de citocinas (caspasas versible e imparable. El conocimiento del mecanismo 1, 4, 5 y 13), caspasas de sealizacin o de activacin de otras caspasas de sealizacin intracelular, desde la (caspasas 2, 8, 9 y 10) y caspasas efec- activacin de receptores hasta la fase toras de muerte o ejecutoras (caspa- ejecutora, est permitiendo establesas 3, 6 y 7) las cuales hidrolizan cer nuevas dianas farmacolgicas en diversas enfermedades como el cnsustratos selectivos. La activacin de las caspasas puede cer, enfermedades neurodegeneratitener lugar en respuesta a estmulos vas y el sida. El estudio de estas vas tanto extracelulares como intracelu- de sealizacin hace posible la interlares. stas hidrolizan secuencias vencin y, en algunos casos, la inteTabla 3. Inhibidores de la apoptosis Inhibidores fisiolgicos Genes virales Factores de crecimiento Matriz extracelular CD-40-L Aminocidos neutros Cinc Estrgenos Andrgenos Antioxidantes Adenovirus E1B Baculovirus (p35, IAP) Virus Vaccinia Virus Epstein-Barr, BHRF1, LMP1 Virus herpes Virus de la fiebre porcina africana Agentes farmacolgicos Inhibidores de las calpanas Inhibidores de las caspasas Promotores tumorales: PMA Inhibidores de cinasas

OFFARM

105

BIOQUMICA

Tabla 4. Patologas asociadas con alteraciones en los valores de apoptosis Exceso Enfermedades neurodegenerativas (EA, EP, ELA) Sida Enfermedades autoinmunitarias Isquemia miocrdica Enfermedades inflamatorias Ictericia obstructiva Defecto Neoplasias malignas Enfermedades autoinmunes Enfermedades inflamatorias Infecciones virales

rrupcin de la progresin de los procesos de muerte celular. Son varias las lneas abiertas dentro de este campo de investigacin debido a que la mayora de las clulas estn programadas genticamente para el suicidio, hecho que se encuentra reforzado por los resultados obtenidos con la utilizacin de frmacos inhibidores de la sntesis de protenas que previene a las clulas frente a determinados estmulos. Otras se centran en el diseo y estudio de frmacos que bloquean los incrementos descontrolados de la [Ca2+] en el interior de la clula con el fin de ampliar el abanico de frmacos utilizados en patologas cardacas y neurodegenerativas. Destacan tambin los avances realizados en frmacos antioxidantes o en moduladores de la trascripcin habindose obtenido resultados esperanzadores en modelos experimentales. No podemos dejar de lado el gran avance realizado en el campo de las enzimas degradadoras, destacando algunos tetrapptidos sintticos inhibidores de caspasas. Por ltimo, recordaremos que el estudio de los procesos de muerte celular nos permite tambin poder activarla en poblaciones de clulas no deseadas, como es el caso del cncer. La activacin de los receptores de muerte para inducir apoptosis en clulas cancerosas resulta atractiva, ms an cuando, a diferencia de la mayora de los agentes quimioteraputicos o la radioterapia, los receptores de muerte inician la apoptosis de forma independiente a la protena p53, que se encuentra mutada en ms de la mitad de los cnceres. La utilidad clnica tanto de TNF como del ligando de Fas ha sido pobre debido a sus efectos txicos colaterales. La administracin sistmica de TNF puede ocasionar un sndrome de respuesta inflamatoria que
106 OFFARM

recuerda el golpe sptico y, por otro lado, la de un anticuerpo agonista de Fas resulta letal en ratones portadores de tumores, por la induccin de apoptosis en los hepatocitos. Sin embargo, Apo2L o TRAIL, un ligando para los subtipos de receptores de TNF implicados en apoptosis, presenta diferencias con el propio TNF y con el ligando de Fas que le convierten quizs en un agente ms adecuado. La diferente afinidad por los subtipos de receptores y la expresin diferencial de receptores seuelo y de muerte puede convertir a Apo2L en un inductor apopttico en clulas tumorales, pero no en clulas normales. I
Bibliografa general
Deigner HP, Kinscherf R. Modulating apoptosis: current applications and prospects for future drug development. Curr Med Chem 1999;6:399-414. Diez J. Apoptosis en enfermedades cardiovasculares. Rev Esp Cardiol 2000;53:267-74. Huang Z. Bcl-2 family proteins as targets for anticancer drug design. Oncogene 2000;19:6627-31. Jordn J. Avances en el tratamiento de las enfermedades neurodegenerativas. OFFARM 2003;22:102-12. Jordn J, Galindo MF, Cea V, GonzlezGarca C. Cistena proteasas y neurodegeneracin. Rev Neurol 2000;3:333-40. Kerr JF, Wyllie AH, Currie AR. Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implications in tissue kinetics. Br J Cancer 1972;26:239-57. Paredes F, Roca JJ. Influencia de los radicales libres en el envejecimiento celular. OFFARM 2002;21;7:96-100. Reed JC. Apoptosis-based therapies. Nat Rev Drug Discov 2002;1:111-21. Tornero D, Cea V, Jordn J. La mitocondria como diana farmacolgica en los procesos neurodegenerativos. OFFARM 2002;21(11):126-30. Van Cruchten S, Van Den Broeck W. Morphological and biochemical aspects of apoptosis, oncosis and necrosis. Anat Histol Embryol 2002;31:214-23.