Professional Documents
Culture Documents
TRNG I HC CN TH
VIN NGHIN CU V PHT TRIN CNG NGH SINH HC
BO CO THC HNH
VI SINH VT CNG NGHIP
CN B HNG DN
TRN V PHNG
Trng HCT
MC LC
Trang
MC LC ...................................................................................................................... i
DANH SCH HNH ..................................................................................................... ii
DANH SCH BNG .................................................................................................... ii
BI 1: LN MEN RU NHO ...................................................................................1
I. GII THIU ........................................................................................................1
II.
III.
IV.
1.
Kt qu: .........................................................................................................3
2.
V.
KT LUN .......................................................................................................6
III.
IV.
1.
Kt qu: .........................................................................................................8
2.
V.
KT LUN .......................................................................................................9
III.
IV.
1.
Kt qu: .......................................................................................................13
2.
V.
KT LUN .....................................................................................................14
i
Chuyn ngnh Vi Sinh Vt Hc
Trng HCT
ii
Chuyn ngnh Vi Sinh Vt Hc
Trng HCT
Bi 1:
LN MEN RU NHO
I.
GII THIU
II.
PHNG TIN
Nho chnh
1
Chuyn ngnh Vi Sinh Vt Hc
III.
Trng HCT
ng ct
Nm men kh Saccharomyces cerevisiae
B dng c p nc tri cy
Bnh tam gic 500 ml
Waterlock
T
My li tm
H thng chng ct cn
Cn k
pH k
Khc x k cm tay (Brix k)
PHNG PHP
Nho chnh (khong 600g)
o Brix v pH
B sung lng
ng t
Brix yu cu
Saccharomyces
cerevisiae
Chng ct
100ml dch
ln men
Li tm phn
cn li
Chng ct
100ml dch
ln men
Thnh phm
Li tm phn
cn li
Thnh phm
o ru
o ru
IV.
KT QU V THO LUN
2
Trng HCT
1. Kt qu:
Bng 1: S thay i pH qua cc giai on
Brix ban u
Nhm
Nm men (%)
pH ban u
pH ru thnh phm
0
1
4,06
20,8
3,81
0,1
3,96
4,12
27
3,96
0,1
4,10
0
3
4,06
32
3,91
0,1
4.05
Brix ban u
20,8
Nm men (%)
0,1
11,5
0,1
11
26
0,1
16
27
32
Brix
ban u
Nm men
(%)
Ngy 1
Ngy 2
Ngy 3
Ngy 4
Ngy 5
Ngy 6
Ngy 7
10
0,1
15
11
18
11
20,8
27
3
Chuyn ngnh Vi Sinh Vt Hc
Trng HCT
0,1
30
16
10
0,1
20
15
11
32
Nhm
Nm men (%)
9,95
0,1
11,78
12,21
0,1
11,18
7,675
0,1
11,35
20,8
27
32
Bng 5: Kt qu nh gi cm quan
Nhm
Brix
ban u
20,8
Nm men
(%)
trong
v mu sc
Mi
thch
Trung bnh
cht lng
0,1
0,1
0,1
4,5
27
32
2. Tho lun:
C ch ln men ru:
Ru c to ra ch yu nh cc t bo nm men phn gii glucose thng qua
con ng EM (Embden-Meyerhoff). Qu trnh ln men ru l mt qu trnh phc
tp. u tin, ng thm thu vo t bo nm men. , ng c chuyn ha
qua hng lot sn phm trung gian v to thnh acid pyruvic. Acid pyruvic di tc
4
Chuyn ngnh Vi Sinh Vt Hc
Trng HCT
Ln men
V nhit :
Nm men hot ng tt nht 20-300C, di 160C ln men rt chm, trn 350C
cc h enzym trong c th nm men b gim hot lc n mc ti thiu, hot ng trao
i cht b ngng tr. Nu nhit trn 400C nm men do khng tng hp c nng
lng d tr cn thit nn s cht. Trong thc nghim ta ln men nhit phng
khng qu 300C thuc trong khong nhit thch hp cho ln men.
V pH:
Nhn chung, nm men c th pht trin trong mi trng c pH = 2 - 8, nhng
thch hp nht l t 4 - 4,5. Mt khc, vi khun bt u pht trin pH = 4,2 v cao
hn. V vy trong ln men ru ngn nga hin tng nhim khun, ngi ta thc
hin trong gii hn pH = 3,8 - 4,0. pH cn ph thuc vo nhiu yu t: loi, chng,
nm men, thnh phn ca mi trng ln men, iu kin ln men. Thc t pH o c
t dch nc nho ca ba nhm trnh by bng 1 giao ng cao nht l 3,96 v thp
nht l 3,81 thuc trong khong pH gii hn. pH ph thuc vo chng loi nho
nguyn liu dng ln men, gp phn vo hng v ca tng loi ru nho bn cnh
chng loi nm men c dng.
V nng ng trong dch ln men:
nh hng nhiu n hiu sut ln men, nm men Saccharomyces cerevisiae c
kh nng sinh enzyme invertase xc tc phn ng thu phn saccharose thnh glucose
v fructose (t l mol 1:1). V th nm men c kh nng ln men ng thnh ru
trong khong ph hp t 22 - 250 Brix. Trong gii hn ny, nu nng ng cao,
ru cng mnh do hm lng etylic cao, nn thm ng vo dch ln men l bin
php ph bin nng cao cn. Tuy nhin vic b sung vt qu lng trong khong
ph hp s dn n hin tng co nguyn sinh t bo nm men, lm gim kh nng
ln men, hiu sut khng cao. Lu trong khi tnh ton Brix bng Brix k ta cn
phi tnh lng ng ho tan vo ng lng dung dch nc nho v tr ra phn v
khng ho tan ng, v nu khng tr phn v ra th Brix s vt khi Brix
tnh ton (qu trnh ln men ru vang ).
b
ax
Cng thc tnh lng ng b sung :
100
100 x
Trong :
a: Brix dch qu
x : Lng ng cn b sung cho 100g dch qu
b: Brix cn t c.
Tng lng ng cn b sung l:
5
Chuyn ngnh Vi Sinh Vt Hc
Trng HCT
md . x .10 (kg)
(md: Khi lng dch qu ban u)
Bng 2 cho thy chng nm men s dng lng ng hiu qu nht vi Brix
27 ca nhm 2 (c v khng b sung nm men); Vi Brix 32 nhm 3 bnh
khng b sung nm men, da vo bng 3 th qu trnh ln men din ra kh chm n
ngy 3 mi xut hin bt kh m c trong 2 pht v n ngy th 7 vn cn tip
tc ln men hai bnh, trong khi bnh c b sung nm men nhm 1 v 2 sinh bt kh
rt t khng m c bt kh no trong 2 pht, du hiu ln men yu dn.
V thi gian ln men:
Ph thuc vo nhiu yu t nhit , nng ng, chng nm men. Trong bi
thc hnh th do khong thi gian gii hn nn ch ln men 7 ngy, hiu sut cha tht
s cao so vi khong trung bnh t 15 20 ngy. tng gi tr cm quan cn tr
ru 3 thng tr ln.
V nng ru etylic:
Lng ru to ra l hn hp khng thun khit etylic, c th c methanol, ester,
aldehyde, nh ch yu l ru etylic an ton cho ngi s dng. Bng 4 nng
ru cao nht l bnh ln men t nhin nhm 2 vi ru cao nht l 12,21 200C.
Nhn chung vic b sung nm men 3 nhm gip tng hiu sut ln men, tng nng
ru cho thnh phm. Vic nng ru tng trong qu trnh ln men cng lm c
ch nm men hot ng, khi ru t 7 - 8% th tch, s trao i cht trong nm
men b ngng tr hu nh ton phn, qu trnh ln men chuyn sang thi k ln men
thm lng.
V nh gi cm quan:
Da vo bng 5 nhn chung tt c cc thnh phm ru u t cc tiu ch v
trong, mu, mi, v, thch. Nhng nu c ln men thi gian di hn th thnh phm
s ngon hn.
V.
KT LUN
6
Chuyn ngnh Vi Sinh Vt Hc
Trng HCT
Bi 2:
SN XUT SINH KHI NM MEN
I.
GII THIU
Hnh 3: T bo S. cerevisiae
II.
PHNG TIN
7
III.
Trng HCT
PHNG PHP
Dung dch ng ma 10%
(NH4)2SO4 0,1%
Kh trng 115oC,
15 pht
KH2PO4 0,1%
Chuyn vo t c ch lc
Sy 1050C, 48h
Cn, tnh kt qu
Bnh 1
Cn, tnh kt qu
Bnh 1
IV.
KT QU V THO LUN
1. Kt qu:
8
Chuyn ngnh Vi Sinh Vt Hc
Trng HCT
Nhm
A: 0,9473
1
B: 0,6994
A: 0,7241
2
B: 0,6862
A: 0,6096
3
B: 0,6030
2. Tho lun:
Nm men Saccharomyces cerevisiae c coi l vi sinh vt sng hiu kh tu
nghi. Trong qu trnh nui tng sinh khi cn cung cp nhiu oxy qu trnh sinh sn
din ra mnh m hn, v vy lng sinh khi tng ln nhanh v tr thnh sn phm
ch yu trong mi trng ln men. Ngc li, trong iu kin thiu hoc khng c mt
O2, nm men s chuyn t hot ng h hp sang ln men k kh, khi sn phm
trong mi trng l etanol s tr thnh ch yu. Tuy nhin, hai kiu h hp trn u c
mi quan h chung vi ngun ng c trong mi trng. Qua thc t sn xut ru
vang cho thy: lng ng tiu hao cho h hp hiu kh chim khong 1/5, tiu hao
cho h hp k kh l 4/5 (thc cht l ln men to etanol).
ng ma cung cp ngoi lng sucrose chnh cn c nhiu khong vi lng
cn thit cho nm men pht trin. Ngoi ra cn b sung lng (NH4)2SO4 0,1%,
KH2PO4 0,1% vo mi trng dung dch ng ma 10% nhm cung cp ngun nit
v photpho v c cho nm men. Trong mi trng nui cy cn ch nguyn t a
lng khc. Ngoi ra cc yu t nh hng n chng nh nhit , pH, nng
ng cng trnh by bi 1.
Kt qu sinh khi nm men thu c cho thy sinh khi nm men thu c u
quanh mc 0,6 gram, c bit bnh A ca nhm 1 ln n 0,9473 gram. Xt thy nm
men pht trin tng sinh khi kh ng u gia cc bnh trong u kin nui cy
ging nhau. Trng hp bnh nui cy A ca nhm 1 v bnh nui cy A ca nhm 2
khi lng sinh khi thu c cao hn cc bnh con li, c th l do mt phn s tng
sinh trong mi trng ti u hn, nm men c sc sng cao hoc mt phn do sai st
thao tc ly men ging, chun b mi trng, sai st trong qu trnh chuyn sinh khi li
tm.
V.
KT LUN
thu c sinh khi nm men cao cn cung cp y oxy, cht dinh dng,
iu kin cn thit, hn ch qu trnh ln men k kh. Ngoi ra chng men ging phi
9
Chuyn ngnh Vi Sinh Vt Hc
Trng HCT
10
Chuyn ngnh Vi Sinh Vt Hc
Trng HCT
Bi 3:
SN XUT BO T MC TNG
(Aspergillus oryzae)
I.
GII THIU
Trng HCT
II.
III.
PHNG TIN
Nm mc Aspergillus oryzae
Go
T
Cn
Ni kh trng nhit t
Ti nilon c c ti v y nt gn
PHNG PHP
20g go
Hp
Kh trng1210C,
15, ngui
Thu hoch
0,2g bt bo t
Cho vo ti nilon
v quan st 7 ngy
Trn u
12
Chuyn ngnh Vi Sinh Vt Hc
Trng HCT
Phng php to iu kin thun li cho nm mc pht trin, quan st ghi nhn
s pht trin ca khun ty, s hnh thnh bo t, ghi nhn s thay i qua tng ngy,
thu hoch kt qu vo ngy th 7.
IV.
KT QU V THO LUN
1. Kt qu:
Qua ngy th 2 quan st ghi nhn thy c hnh thnh si khun ty ch yu bao
quanh ht cm, bt u hnh thnh bo t nhng t, nhiu ht cm o mu vng xung
quanh ht, mt s ht xut hin nhng m mu xanh nhng rt t. Mt trn ti nilon
hng ln trn khun ty pht trin nhiu hn so vi mt di ti nilon tip xc vi v
t t khun ty pht trin. V mt trn ti tip xc vi khng kh nhiu hn so vi mt
di tip xc vi v, cc ht cm ln nhau to iu kin khng thong kh.
Qua ngy th 7 quan st ghi nhn c a s hnh thnh rt nhiu bo t, mu
xanh chim a s bn cnh l mu vng cng xut hin nhiu hn ngy 2 quanh ht
cm trong ti nilon, mt trn ti nilon bo t pht trin nhiu hn mu xanh nhiu hn
mt di tip xc vi v t bo t pht trin t hn. Bo t pht trin mnh sau 7
ngy . V mt trn ti tip xc vi khng kh nhiu hn so vi mt di tip xc vi
v.
13
Chuyn ngnh Vi Sinh Vt Hc
Trng HCT
2. Tho lun:
Cm hp cung cp tng i y cc thnh phn cho nm mc pht trin,
m bo ngun cacbon, nitrogen, m, thnh phn khong,trong iu kin nhit
n nh ca t , pH ca cm hp trong gii hn cho php cng vi s hot ng
rng ca chng Asp. oryzae pH t 4 8 theo Michell (1988). Aspergillus oryzae m
bo c cc yu cu khng i hi iu kin v trng nghim ngt, d nui iu
kin t nhin, pht trin nhanh, c kh nng to nhiu bo t. V th trong iu kin
nui cy quy m th nghim trong bi to iu kin cho nm mc pht trin tng i
cao, hnh thnh h khun ty dy c vo ngy th 2 v nhiu bo t vo ngy thu
hoch.
Thm vo theo Lotong v Suwanarit, (1983) cho rng 3 ngy sau khi khi
c cht tm c bao ph bi nhng bo t Aspergillus oryzae mu vng xanh nht,
sau mu sc tr nn m hn theo thi gian, vic t 4 5 ngy cho lng bo t
cao nht. Cn theo V Th Hnh et al., (2000) cho rng thi gian thch hp sn xut
lng bo t Aspergillus oryzae l 5 7 ngy sau khi nui cy. Xt thy s pht trin
ca h khun ty v bo t kh ph hp vi m t ca cc nh nghin cu trc .
Nm mc l vi sinh vt hiu kh bt buc, do vic cung cp y oxi l cn
thit cho nm mc h hp v pht trin tng sinh khi. Thiu oxi s kim hm s pht
trin ca nm. Vic lm c ti v y nt gn trong phng php sn xut bo t
nhm gip cho s trao i kh vi mi trng bn ngoi mt cch tng i. Trong
quy trnh sn xut quy m thng mi cn to thong kh trong mi trng bn
cnh b sung cht dinh dng s pht trin ca nm c cao nht gia tng hiu
qu, nng sut cao.
V.
KT LUN
14
Chuyn ngnh Vi Sinh Vt Hc
Trng HCT
15
Chuyn ngnh Vi Sinh Vt Hc