PRACTICA de Histopato

Dr. edison suarez beltran.
Histopatologa
CARRERA PROFESIONAL
DE TECNOLOGIA MDICA
INFORME 1
RECONOCIMIENTO DEL LABORATORIO DE ANATOMIA
PATOLOGICA

UNIVERSIDAD PERUANA
LOS ANDES
FACULTAD DE CIENCIAS DE
LA SALUD

CATEDRA: Histopatologa
CATEDRATICO: Dr. Edison Suarez Buitron
ALUMNOS: Lavado Arce Joaquin
Lozano Avila Mariaelena
Manrique Meza Josselyn
Muoz Bryan
Rodriguez Garay Jaime
Veliz Orga Dayana
Yachachin Vargas Sally

Hyo-2013

Histopatologa
INTRODUCCIN

La Anatoma Patolgica estudia las alteraciones morfolgicas, tanto macro-
micro y ultramicroscpicas que se producen durante la enfermedad, y se
diferencia de la patologa general que estudia las alteraciones fisiolgicas
asociadas a la enfermedad.
La utilidad de la Anatoma Patolgica es a diferentes niveles, como el
diagnstico y el estudio de la patogenia de las lesiones: el conjunto de los
procesos que conducen a la aparicin de las lesiones, por qu se producen y
sus consecuencias. Las lesiones pueden ser ms o menos especficas a
enfermedades por tanto ms o menos tiles a la hora del diagnstico.
La Anatoma Patolgica utiliza ciertas herramientas, como el exmen de
necropsia, biopsia y la citolgia.
La necropsia consta en abrir el cadver ; esta ha de ser ordenada, sistemtica
y completa.
La biopsia consta de la extraccin de un fragmento de rgano o tejido con el
fin de su estudio diagnstico. Diferentes tipos de biopsias:
- Cutneas
- Internas o parenquimatosas
- rganos internos o tubulares

Histopatologa

MARCO TEORICO
RECONOCIMIENTO DEL LABORATORIO DE ANATOMIA PATOLOGICA
ESTRUTURA DEL SERVICIO:
El servicio de Anatoma Patolgica est estructurado de la siguiente forma:
-Recepcin de Muestras.

-Laboratorio general
-Sala de tallado
-Archivo hmedo
-Archivo seco

Parafina

Histopatologa

AREA DE PROCESAMIENTO DE LOS TEJIDOS:
Los fragmentos de tejidos para su estudio se colocan lo ms rpido posible en
un lquido fijador. Un fijador es una solucin cuyos compuestos alteran la
estructura qumica de las protenas dndole mayor rigidez a sus cadenas poli
peptdicas por el establecimiento de nuevos enlaces entre ellos, principalmente
di sulfricos. Por esta razn mantienen los tejidos con la apariencia muy
cercana al estado en que tenan en vida, deteniendo casi en su totalidad los
fenmenos lticos que ocurriran si se mantuvieran en estado normal. Esto
permite la conservacin y posterior estudio.
Los fijadores pueden ser simples (Alcohol, formaldehido) o compuestos cuando
se utiliza la mezcla de diferentes reactivos qumicos.
COLORANTES:
Existen una gran variedad de tcnicas de coloracin para los diferentes tejidos
y estructuras celulares, siendo las mas utilizadas la de hematoxilina y eosina.
Hematoxilina tie el ncleo de color azul oscuro (basfilo) y la eosina tie el
citoplasma de color rosa (eosinofilo) tambin se usan colorantes como PAS,
tricromcas, Sudan II , IV y otras que permiten una alta especificidad al
diagnstico microscpico.

EQUIPOS USADOS EN ANATOMIA PATOLOGICA
MICROTOMO:
Alta Tecnologa: Micrtomo de rotacin diseado y fabricado para conseguir los
ms altos estndares de precisin y calidad.
Seguridad: Diseado para trabajo medio-pesado en Hospitales, Laboratorios.
Construido en aluminio slido y acero inoxidable, lo que proporciona estabilidad
y distribucin uniforme del peso.
Facilidad de uso: Su diseo ergonmico, tamao y facilidad de uso hace del
RH-950 un atractivo y amigable equipo para el Laboratorio.

Histopatologa
ESPECIFICACIONES Y CARACTERISTICAS
Rango de avance de 1 a 30 mm.
ndice de cuchilla de 20".
Expansin mxima de 26mm/1".
Protector de cuchilla incorporado.
Incrementos de 1 micra.
Retroceso de 50 mm.
Rueda de rotacin con seguro.
BAO DE FLOTACION:
Para fusin y conservacin de parafina en estado lquido que permite la
visualizacin de los cortes de tejido.
Cubeta interior con encimera y tapa en aluminio recubierto de P. T. F. E.
(tefln) en color negro mate indeleble con orificio para termmetro lector
de temperatura.
Panel de mandos: interruptor general.
Termostato regulador de la temperatura (40C hasta 80C, estabilidad:
+/-1C).
Sincronizado con lmpara de sealizacin.
Lmpara de sealizacin de la red.

Histopatologa

CONCLUSIONES

En las reas de anatoma patolgica existen riesgos biolgicos que
incluyen diferentes agentes biolgicos de elevados grupos de riesgos y
se documentan casos de infecciones adquiridas por stos trabajadores;
por lo que el desarrollo e implementacin de la bioseguridad es de vital
importancia.

Histopatologa

BIBLIOGRAFIA
http://escuela.med.puc.cl/paginas/publicaciones/AnatomiaPatologica/05
Genital_masc/5tubulares.html
Adams R, Victor M, Ropper A. Principios de Neurologa. 6 ed. Mxico:
McGraw-Hill Interamericana Editores; 1999. p. 679-680, 960-962.
Berne R, Levy M. Fisiologa. 2 ed. Espaa: Harcourt Brace de Espaa;
1998. p. 346, 504,517,518.
Cotran Kumar Robbins, Patologa Estructural y Funcional 9 Ed.
Mxico: McGraw-Hill Interamericana Editores; 1999 p 143 146, 1011 -
1013, 1354.
Fauci Braunwald Harrison, Principios de Medicina Interna. 14 Ed.
Mxico: McGraw-Hill Interamericana Editores; 1999 p 246 - 254, 2792 -
2793
Guytom Hall Tratado de Fisiologa Mdica Mxico: McGraw-Hill
Interamericana Editores; 1999p 310 - 314

Histopatologa
CARRERA PROFESIONAL
DE TECNOLOGIA MDICA
INFORME 2
ALCOHOLIMETRO

UNIVERSIDAD PERUANA
LOS ANDES
LA SALUD

Muoz Bryan
Veliz Orga Dayana

Hyo-2013

Histopatologa

INTRODUCCIN
El presente informe daremos a conocer el uso del alcoholmetro en el
laboratorio de histopatologa, aprendiendo de esta manera como debe ser
usada al momento de medir.
El alcoholmetro es un tipo especial de instrumento usado para determinar el
nivel de alcohol presente en un lquido o gas. Puede por tanto ser usado para
medir el porcentaje de alcohol en una bebida alcohlica o para determinar la
presencia de alcohol en la sangre o en un gas.
Con la ayuda del docente hallaremos el porcentaje del alcohol de acuerdo a los
materiales que nos pidi para esta prctica.

OBJETIVOS:
Aprender el uso del alcoholmetro en el laboratorio para hallar los
porcentajes del alcohol.
Aprender a leer con el alcoholmetro el porcentaje de alcohol.
Realizar control de calidad de la batera en los alcoholes ascendentes.

Histopatologa

MARCO TEORICO
Cuando nosotros escuchamos hablar acerca de los alcoholmetros lo ms
comn es oir que respondan que son utilizados por los agentes del orden
pblico cuando sospechan que algn conductor maneja bajo los efectos del
alcohol y quieren cerciorarse de la veracidad de esta sospecha. Los
alcoholmetros son slo uno de muchos tipos diferentes de mecanismos de
sobriedad utilizados por los funcionarios para determinar si una persona ha
violado la ley por conducir en estado de ebriedad.
Si un polica ve al conductor manejando en forma temeraria, es probable que
se le detenga y se le pida que respire en una mquina especial que mide el
contenido de alcohol en la sangre; pues esta respuesta es cierta pero tambin
el alcoholmetro tiene otros funciones como ser usado en la area de anatoma
patolgica para medir los alcoholes que se requieren para la fijacin de tejidos,
siendo muy til para este uso.
Existe una variedad de alcoholmetros usados.

AL6000-PRESTIGE
Equipo Nuevo en el mercado que utiliza
tecnologa de sensor modular de ltima
generacin para obtener siempre precisin
de tres puntos decimales.
Los resultados son expuestos de manera
digital dentro de pocos segundos. Rpido,
fcil de usar y conveniente es este
alcoholmetro porttil recomendado para
Empresas, Centros Educativos, Servicios
Mdicos y Fuerzas del orden

Histopatologa

AL 7000-PREMIUM
Un alcoholmetro moderno para realizar
mltiples muestreos sin necesidad de
calibracin.
El AL7000 ha sido diseado para realizar
pruebas de alcohol en el aliento de manera
fcil, rpida y obteniendo resultados
confiables al tomar en cuenta las
necesidades especficas de empresas y
personas sin acceso o capacidad de
recalibrar y brindar servicios de
mantenimiento a sus alcoholmetros.

ALCOBLOW
Estos equipos son hoy en da el mximo
referente en cuanto a durabilidad,
precisin y rapidez de muestreo en
comparacin a cualquier otra tecnologa
porttil.
Alcoblow es un alcoholmetro porttil
eficiente y fcil de usar para determinar de
manera rpida si un individuo ha
consumido alcohol.

INTOXILAZER 400 PA
Un alcoholmetro compacto que utiliza la
ltima tecnologa en sensores de
combustibles.

ALCOHOLMETRO UNIVERSAL
Un alcoholmetro utilizado para medir el
grado alcohlico de un lquido. Aqu, el
lquido en el tubo es brandy, con un 44,5%
de alcohol.

Histopatologa
MATERIALES:

CERVEZA

WHISKY

RON DE QUEMAR

ALCOHOLIMETRO

FORMOL

- Alcohol 80-I
- Alcohol 80-II
- Alcohol 96-I
- Alcohol 96-II
- Alcohol absoluto I
- Alcohol absoluto II

BATERA DE LOS ALCOHOLES PARA REALIZAR
CONTROL DE CALIDAD

Histopatologa

PROCEDIMIENTO:
1. Abrimos la lata de cerveza y vertimos en una probeta para hallar el porcentaje
que tiene la lata de cerveza de la marca BRAHMA.
-Sumergimos el alcoholmetro en la probeta cuidadosamente para hallar el
porcentaje.
Resultado: el porcentaje de la cerveza es de: 0.5%

2. Abrimos la botella de whisky y vertimos en una probeta para hallar su
porcentaje.
-Sumergimos el alcoholmetro en la la probeta cuidadosamente para
hallar su porcentaje.

Resultado: el porcentaje del whisky es de: 40%
2. Vertimos ron de quemar en la probeta y cuidadosamente sumergimos el
alcoholmetro en ella.
Si llega a sobrepasar ms del 80 % se usa un dispositivo diferente
descartando la probeta. Se hace uso del embase del alcoholmetro para
medirlo.
Resultado: el porcentaje del ron de quemar es de: 90 %

Histopatologa

3. Medir el porcentaje de la batera de alcoholes, se realiza el mismo
procedimiento que el ron de quemar, vertimos en el dispositivo el alcohol a
medir y cuidadosamente sumergimos el alcoholmetro en ella.
- Alcohol de 80-I: 70%
- Alcohol de 80-II: 72%
- Alcohol de 96-I: 85%
- Alcohol de 96-II: 94%
- Alcohol absoluto I: 95%
- Alcohol absoluto II: 97%

4. Mediremos de la misma forma que el ron de quemar el formol, sumergiendo en
la probeta el alcoholmetro.

Histopatologa

DISCUSIONES:

- El inconveniente que sufrimos en la prctica fue que no hubo luz, y nos dificult
un poco para la visualizacin de los porcentajes en las medidas de los
alcoholes.
- Al momento de medir la cerveza no arrojo el resultado que esperamos que
debera ser 5% por teora general ya que esta presento 0.5% de alcohol.
- Al momento de medir la batera de los alcoholes estas arrojaron valores las
cuales nos indicaban que su concentracin estaba baja y necesitaba un cambio
ya que haba sido utilizada hace 2 o 3 semanas anteriores.
- Los valores de los alcoholes a pesar de tener una baja concentracin de
encontraban de manera ascendente, y era algo que queramos comprobar en
el control de calidad.
- Al momento de tomar el control de calidad al formol este arrojo que
efectivamente tena una concentracin de 40% ya que el estado del formol es
gas y su densidad baja de 1.
- Pero como a nosotros nos interesa el formal al 10% era necesario convertir del
40 % al 10%.

Histopatologa

CONCLUSIONES:

- El alcohol de 80-II nunca debe ser de menor concentracin ascendente, porque
en vez de avanzar este retrocede, y no funcionar en la deshidratacin, por eso
es necesario cambiar.
- Si el alcohol llega arrojar un resultado de 50 quiere decir que esta acuoso y no
sirve para la fijacin.
- Si el alcohol de 96 o el alcohol absoluto no est muy sucio por el uso, se puede
rebajar con agua destilada a 80 y ser usada para la batera.
- En el alcohol absoluto lo mnimo que puede bajar su concentracin es a 98, y
esta a su misma vez puede ser usada para preparar el hematoxilina y eosina
como la coloracin del Papanicolaou.

BIBLIOGRAFIA:
http://es.wikipedia.org/wiki/Alcohol%C3%ADmetro
www.interzona.mx Inicio Productos
espanol.answers.yahoo.com ... Ciencias y Matemticas Qumica
www.abs-cr.com/documentos/vision_general_alcoholimetros.pdf

Histopatologa
CARRERA PROFESIONAL
DE TECNOLOGIA MDICA
INFORME 3
FIJACION DE TEJIDOS

UNIVERSIDAD PERUANA
LOS ANDES
LA SALUD

Muoz Bryan
Veliz Orga Dayana

Hyo-2013

Histopatologa

Una vez que una pieza histolgica ha llegado al servicio de Anatoma Patolgica
comienza su estudio microscpico de biopsias y piezas quirrgicas, comprende un
conjunto de mtodos estructurados que configuran un sistema de actuacin constante
para cada muestra de forma que los resultados puedan ser reproducidos por
diferentes patlogos.
Aunque el tcnico en anatoma patolgica no est obligado a participar en el examen
microscpico, es conveniente conocer algunos aspectos del proceso, previamente a
ste estudio microscpico el tcnico ha realizado las siguientes tareas que son:
comprobar el volante, poner el nmero de entrada y registrar la muestra.

La fijacin es el proceso mediante el cual los elementos constitutivos de las clulas, y
por tanto de los tejidos, son fijados en su estado fsico y parcialmente en su estado
qumico, lo cual permite resistir el tratamiento sucesivo con diversos reactivos sin que
ocurra prdida, distorsin o descomposicin significativas. Su objetivo es detener el
proceso autoltico de las clulas y conservarlas, en la medida de lo posible, en el estado
en que se encontraban durante la vida. Por lo tanto, es un mtodo histolgico
destinado a facilitar la obtencin de preparaciones duraderas que conserven su
estructura morfolgica y qumica y que permita realizar posteriormente, los
procedimientos de coloracin, identificacin e interpretacin, que contribuyen al
conocimiento profundo de su morfologa, funcin y alteraciones en los diversos
procesos patolgicos.
Aprender a hacer un buen corte del rgano para su estudio.
Aprender a fijar la muestra.

Histopatologa
Examen en freco.- Este mtodo tiene la ventaja de una gran simplicidad y por otra
parte no produce alteracin alguna en las muestras; en histologa animal se presentan
grandes inconvenientes para su uso, puesto que slo pueden utilizarse, bien para
organismos vivos de pequeo tamao o bien para piezas sumergidas durante un
tiempo limitado en lquidos fisiolgicos (solucin de Ringer, solucin de Locke, solucin
de Tyrode, etc.). Los vegetales presentan ventajas sobre los animales, ya que se
pueden fcilmente cultivar en el laboratorio o bien llevarlos desde el campo al mismo
sin que los procesos de lisis se presenten con la rapidez que ocurren en los tejidos
animales.
Aun teniendo estas ventajas sobre los tejidos animales, con mucha frecuencia debe
recurrirse en histologa vegetal al uso de fijadores, bine porque las muestras se recojan
lejos del laboratorio durante campaas botnicas ms o menos amplias o porque los
trabajos se prolonguen excesivamente debido a largos tratamientos, por lo que es
necesario recurrir a la fijacin de las muestras a estudiar.
Tambin queremos llamar la atencin sobre las tcnicas de fijacin que se van a
emplear y describir, ya que se refieren nicamente a tcnicas para microscopa ptica,
obviando las de microscopa electrnica, tanto de barrido como de transmisin.
Concepto de fijacin.- Se entiende por fijacin toda manipulacin sobre un ser vivo, o
bien sobre parte de l, que tiene por objeto mantener toda su arquitectura tanto
estructural como qumica lo ms inalterada posible, de tal forma que sus componentes
celulares mantengan las mismas caractersticas que cuando dicho ser o tejido estaban
vivos. Es claro que la mayora de la estructura celular se debe a la presencia de
protenas y por tanto todo proceso de fijacin debe tener en cuenta la naturaleza
qumica de stas, de forma que el fijador no reacciona con las mismas. Es cierto que
existen componentes muy distintos ms o menos lbiles que tambin se encuentran
formando parte de la estructura celular, pero son las protenas las que nos van a
reflejar fundamentalmente si un fijador es bueno o no bueno. Por otra parte, un
fijador prepara tambin de alguna forma el tejido o la clula para la posterior
manipulacin, bien en el proceso de inclusin, actuando como mordiente o como
fijador del colorante dependiendo de su naturaleza, por eso es importante la eleccin
del fijador.
Hay razones por las que los tejidos vegetales no deben fijarse como los animales.
Muchas veces las plantas estn cubiertas de sustancias creas en sus cutculas que son
hidrfobas e impiden la penetracin del fijador. Por otra parte el bajo contenido
proteico de las clulas vegetales, en comparacin con ls animales, vuelve al
glutaraldehido (un componente de un fijador que se tratar ms adelante), menos
efectivo en sus enlaces curzados con la protena. As mismo la pared de las clulas
vegetales supone una barrera parcial a la penetracin del mismo.

Histopatologa
Por otra parte hay que distinguir bien entre fijador y conservador, ya que con
frecuencia, y sobre todo en histologa vegetal, se tienen conceptos errneos al
respecto. Un conservador es aquella sustancia, o bien fenmeno fsico, que evita la
autolisis cadavrica, pero que una vez eliminada su accion, la muestra o la clula,
quedan a merced de sus propios enzimas lisgenos y son por tanto susceptible de
autodestruccin. Son conservadores: fro, ciertos lquidos como los de Petit, de Ripert,
etc. As pues, una pieza que se ha mantenido durante un tiempo en un conservador
debe ser fijada rpidamente antes de cualquier manipulacin, ya que de no hacerse
corre el peligro de que sufra graves alteraciones. Un fijador por el contrario inmoviliza
y estabiliza los elementos celulares, bien sea por precipitacin de las protenas y
dems sustancias celulares activas, ya sea mediante un bloqueo qumico de su
actividad, siendo estos fenmenos permanentes.
En resumen, un fijador tiene como misin:
* Evitar la autolisis debida a los propios enzimas.
* Proteger el corte o la pieza del ataque bacteriano.
* Insolubilizar los componentes celulares que se desean estudiar.
* Preparar a las distintas estructuras para posteriores tratamientos.
* Evitar la disolucin de determinados compuestos en el fijador.
* Conservar o provocar determinadas reacciones qumicas.
* Mantener las propiedades fsicas.

Para la eleccin de un fijador, hay que tener en cuenta, adems de lo sealado
anteriormente, unas caractersticas que son intrnsecas al mismo, como son la
velocidad de penetracin, la velocidad de fijacin y el coeficiente de endurecimiento,
as como el efecto de la retraccin. Estos factores son de gran importancia a la hora de
elegir un fijador; sobre todo, en histologa vegetal. Es muy importante el coeficiente de
endurecimiento y el efecto de retraccin, ya que de por s los tejidos vegetales son
frecuentemente duros y estos dos fenmenos contribuyen a una mayor elasticidad de
los tejidos, con el consiguiente posible perjuicio a la hora de manipularlos para obtener
los cortes. Menor importancia tiene quizs el poder de penetracin y la velocidad de
fijacin, ya que como se ha indicado anteriormente los procesos de lisis en los tejidos
vegetales son ms lentos en trminos generales que en los tejidos animales; en cuanto
a la velocidad de penetracin y de fijacin, son muy distintas, ya que un fijador puede
tener una gran velocidad de fijacin y un bajo poder o velocidad de penetracin o
viceversa. Por tanto la eleccin de un fijador es un problema de suma importancia en
histologa vegetal. Un fijador ideal sera aquel que tuviera una gran velocidad de
penetracin y fijacin y unos coeficientes de retraccin y endurecimiento lo ms bajos
posibles.
Los fijadores que se usan para el tratamiento de los tejidos vegetales son
prcticamente los mismos que se utilizan en histologa animal; las clulas vegetales
presenta, sobre todo en la pared celular, una estructura celulsica o bien una
impregnacin o sustitucin de estas por compuestos distintos como la lignina,
suberina, etc., que diferencia totalmente a los vegetales de los animales. El

Histopatologa
comportamiento de los fijadores, al menos a niveles muy distintos; si a ello le unimos
que los estudios de los efectos sobre las estructuras celulares vegetales son
prcticamente nulos, nos encontramos con un problema serio a la hora de elegir un
fijador. En histologa animal se saben que la mayora de los efectos de retraccin,
endurecimiento, etc., que presentan cada uno de los fijadores utilizados, cosa que no
se conocen cuando de tejidos vegetales se trata. nicamente la experiencia y los
ligeros conocimientos de qumica permiten al histlogo vegetal poder elegir un fijador
que le ofrezca ciertas garantas; desgraciadamente, estos conocimientos no estn
reflejados en los textos de tcnicas histolgicas ni en los de histologa vegetal. Por ello
trataremos de ir incorporando a medida que avancen nuestros estudios y el acceso a la
informacin las tcnicas particulares de las que nos hagamos eco.
Vamos a dar un listado de los fijadores ms frecuentes y a discutir brevemente sus
distintas caractersticas. Los fijadores se pueden clasificar en dos grupos: fijadores
fsicos y fijadores qumicos.
Fijadores fsicos.- Son varios los fijadores fsicos que usualmente se utilizan en
histologa, sobre todo por su simplicidad, pero la mayora de ellos debemos
desecharlos, porque alteran gravemente la estructura de los vegetales.
El calor: Es el ms antiguo y ms utilizado de estos fijadores. Tanto en microbiologa,
como en el frotis de clulas animales, la fijacin se hace a la llama, con lo que se
obtiene una coagulacin rpida de las protenas y por tanto su estabilizacin. Esta
tcnica no es recomendable cuando se trata de tejidos vegetales, puesto que produce
alteraciones importantes y muy desiguales en las paredes celulares.
El fro: Como anteriormente hemos mencionado, el fro (congelacin), se ha tenido y
se tiene como agente de fijacin, pero es realmente un agente conservador y por tanto
no debe utilizarse como tal.
La criodesecacin (liofilizacin): Se trata de congelar a una temperatura inferior a -
50C y eliminar el agua a una presin baja. Este mtodo puede ser muy efectivo, si
despus la pieza se incluye en parafina o en plstico, pero es bastante complejo y
excesivamente caro; no produce deformaciones ni retracciones, ni tampoco
endurecimiento de las muestras. Su inconveniente es el precio y lo engorroso que
puede resultar el que, al manipular la muestra, no se rehidrate posteriormente.

CRITERIOS PARA OBTENER UNA BUENA
FIJACIN.
a) Eleccin del fijador. La solucin fijadora a utilizar depende del estudio que se quiere
realizar. Para las preparaciones de tejidos y rganos, en las que interesa un estudio
topogrfico de los mismos, deben usarse fijadores con un buen poder de penetracin y
de difusin. Para estos casos se recomienda utilizar los lquidos de Zenker, Boin o
Helly: En caso contrario se emplear la solucin de formol al 10% 15% que permite

Histopatologa
obtener resultados satisfactorios. Lquido considerado como el fijador universal pues
facilita el empleo posterior de cualquier otro fijador (postfijacin) capaz de
complementar su accin.
b) Tamao de las muestras. El tamao y grosor de las muestras deben ser pequeas y
delgadas, de 1cm2 a 2 cm2 y con un espesor de 2 mm a 5 mm, especialmente si se
emplean fijadores con escaso poder de penetracin y de difusin.
c) Volumen del fijador. Una proporcin que es necesario emplear ser de 1 a 20
(muestra fijador). Ser la ms adecuada para garantizar una buena fijacin.
d) Tiempo de fijacin. El tiempo en la fijacin es importante en dos aspectos.

I. El intervalo que media entre la interrupcin del aporte sanguneo y la inmersin de
las muestras en la solucin fijadora. Lo deseable es que las muestras se fijen
inmediatamente despus de obtenidas mediante una biopsia o que la necropsia se
efecte al poco tiempo de producida la muerte.
Mientras ms largo es este lapso, los procesos autolticos que sufran los tejidos sern
ms evidentes.
II. Debe tenerse en cuenta el tiempo que permanecern las muestras sumergidas en
los fijadores. Este tiempo vara con relacin al tipo de fijador que se utiliza; al tamao y
la naturaleza de la muestra y la temperatura de fijacin. Por lo tanto los lapsos de
fijacin varan en rangos muy amplios. En cualquier circunstancia, siempre deben
respetarse los tiempos recomendados para cada tipo de fijador para garantizar la
conservacin de una buena estructura celular y tisular de los tejidos.
Despus de eliminar el fijador mediante un lavado, se guardan en una solucin de
alcohol al 70%. As los tejidos pueden guardarse por un tiempo bastante largo sin que
sufran modificaciones morfolgicas notorias.
Lavado de las muestras fijadas. Al concluir la fijacin, el fijador debe ser eliminado de
las muestras. Para tal fin se procede al lavado de los tejidos mediante agua o alcohol.
Se evita, as, que los tejidos se endurezcan demasiado o que ciertos componentes del
fijador introduzcan modificaciones en los tejidos e impidan una adecuada obtencin de
secciones delgadas o la coloracin correcta de sus componentes celulares.

C) INCLUSION.
Los tejidos fijados adquieren cierta consistencia y dureza, pero no la suficiente para
que, de ellos, se obtengan secciones delgadas. Estas secciones, del orden de algunas
milsimas de milmetro (5 a 10 mm), se conseguirn cuando los tejidos se infiltren con
sustancias denominadas de inclusin y adquieran tal dureza que sometidos al filo de

Histopatologa
una navaja produzcan secciones, cortes o lminas sumamente delgadas y
transparentes.
Las sustancias de inclusin tienen la propiedad de incorporarse e infiltrarse al interior
de las clulas y tejidos con la finalidad de servirles de soporte. As los tejidos y la
sustancia de inclusin forman un bloque homogneo en dureza y consistencia, a pesar
que sus componentes tuvieron originalmente distinta dureza.
Existen una serie de sustancias de inclusin que se han empleado o se utilizan
actualmente. Unas son solubles en agua (gelatina, carbowax, glicol metacrilato) otras,
solubles en solventes orgnicos (parafina, celoidina, resinas epxicas).

Inclusin en parafina. Despus de la fijacin y el lavado de las muestras, stas se
encuentran embebidas en agua o en alcohol, por lo que resulta imposible que se
infiltren con parafina, medio de inclusin insoluble en agua y alcohol.
Por lo tanto, para que los tejidos puedan ser incluidos en parafina se requiere
deshidratarlos e infiltrarlos con el solvente de la sustancia de inclusin.
Los pasos a seguir para la inclusin de las muestras en parafina son:
a) Deshidratacin
b) Impregnacin en el solvente (a este paso tambin se le denomina aclaracin o
diafanizacin)
c) Inclusin y formacin del bloque de parafina

a) Deshidratacin. Significa extraer o remover el agua de los tejidos fijados. La
deshidratacin debe ser completa porque, de lo contrario, el solvente no acta de
forma adecuada y el bloque de inclusin no alcanza la dureza requerida. Para tal fin se
utilizan lquidos deshidratadores en los cuales se sumergen los tejidos.
Los deshidratadores ms usados son el alcohol etlico, el alcohol isoproplico, el
dioxano y el cloroformo.
En el caso de la inclusin en parafina, las muestras se deshidratan en baos sucesivos
en soluciones de concentracin crecientes de alcohol etlico. El procedimiento de
rutina es el siguiente:
1) alcohol etlico al 70 % ------------------- 12 horas
2) alcohol etlico al 70 % ------------------- 12 horas
3) alcohol etlico al 95 % --------------------- 1 hora

Histopatologa
4) alcohol etlico al 95 % --------------------- 1 hora
5) alcohol etlico al 100 % (absoluto) --------1 hora
6) alcohol etlico al 100 % (absoluto)---------1 a 1.5 horas.
Nota: En cada caso es necesario agitar de vez en cuando los frascos que contienen las
muestras
Los tiempos indicados son los que se aplicarn a las muestras de tamao mediano (1
cm2 x 0.5 cm. de grosor).
Los tiempos pueden disminuirse o incrementarse si las piezas son ms pequeas o ms
grandes.

FIJACIN POR PERFUSIN.
Un mtodo de fijacin casi instantneo es aquel que consiste en perfundir los tejidos y
rganos de un animal con una solucin fijadora. Este procedimiento se utiliza
frecuentemente para fijar tejidos que sern procesados y examinados mediante el
microscopio electrnico.
La perfusin consiste en anestesiar el animal y, mediante un sistema especial de
inyeccin y drenaje, reemplazar la sangre con una solucin salina y despus se inyecta

Histopatologa
el fijador. La fijacin se hace en contados instantes para garantizar que los tejidos se
fijaron rpidamente.

Histopatologa

MATERIALES
Bistur

Tabla

Formol

Mascarilla

Histopatologa
Guantes

Lentes

Canastilla

Pinza

Muestras

Histopatologa

PROCEDIMIENTO
Obtencin de las diferentes muestras:
CEREBRO RIN HGADO CORAZN

PULMN TRQUEA OJO RETINA

Se procede a hacer los diferentes cortes:

Histopatologa

En las canastillas se coloca el nombre y fecha
Se procede a colocar en la canastilla el corte del rgano.

Se cierra la canastilla y se lleva a un frasco con formol al 10%.

Histopatologa

Aprendimos a hacer los diferentes tipos de cortes para realizar un corte
histolgico adecuado.
Aprendimos los diferentes pasos que se realiza para la fijacin de los tejidos.
Deberamos trabajar con una cmara de flujo laminar.
La mascarilla adecuada para realizar al practica es N 95.
Debemos utilizar las medidas de bioseguridad.

http://www.euita.upv.es/varios/biologia/tecnicas_de_histologia_vegetal/Docu
mentos/Fijacion.htm

http://www.facmed.unam.mx/deptos/biocetis/PDF/Portal%20de%20Recursos
%20en%20Linea/Apuntes/3_tecnica_histologica.pdf

http://webs.uvigo.es/mmegias/6-tecnicas/2-fijadores.php

http://webs.uvigo.es/mmegias/6-tecnicas/2-metodos-fijacion.php

http://www.ht.org.ar/fijacionmo.htm

http://www.dermato101.com.ar/tecnica.pdf

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Dr. edison suarez beltran.

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