You are on page 1of 35

1 Test per tube

Product Catalog No: 25197­00

Dry­Tri T­STAT
CD3/CD4/CD45
Reagent 

Manufactured by 
                                           

2
3
Dry­Tri T­STAT CD3/CD4/CD45 
Reagent
1. INTENDED USE

The   Dry­Tri   T­STAT   CD3/CD4/CD45   reagent   is   a   three   color 


immunofluorescence stain for the labeling, identification, and enumeration of 
mature   human   total   T­lymphocytes   (CD3+),   and   helper/inducer   T­
lymphocytes (CD3+CD4+) combined with a precise number of fluorescent 
counting   beads   for   absolute   CD4+   and   CD3+   T­Cell   counts   and 
percentages.   This   reagent   is   intended   to   be   used   in   a   “lyse­no   wash” 
protocol for flow cytometry analysis of erythrocyte­lysed human whole blood. 

2. SUMMARY AND EXPLANATION

The Dry­Tri T­STAT CD3/CD4/CD45 reagent contains fluorescently labeled 
antibodies that bind to CD45, CD3, and CD4 antigens found on the surface 

4
of   circulating   leukocytes.   The   CD3   antigen   is   a   complex   of   at   least   six 
proteins   known   collectively   as   the   T­cell   receptor   (TCR)   complex.   The 
antibody used in this reagent binds to the 20kDa  ε   chain of this complex 
(1).

The CD4 antigen is a 59kDa protein. It interacts with class II molecules of 
the   major   histocompatibility   complex   and   is   the   primary   receptor   for   the 
Human Immunodeficiency Virus (HIV) (2, 3).

The CD45 antigen is a complex 180­220kDa transmembrane glycoprotein 
which is expressed in high levels on leukocyte cell surfaces and its presence 
distinguishes leukocytes from non­haematopoietic cells (1).

Clinical relevance
Identification of abnormal levels of CD4+ T­cells and corresponding % CD4 
have been associated with certain types of immunodeficiency disease. For 
example   infection   with   human   immunodeficiency   virus   (HIV),   results   in 
profound immunosuppression due predominantly to a selective depletion of 
the CD4+ lymphocytes that express the receptor for the virus. Progressive 
5
clinical and immunologic deterioration generally correlates with a decreasing 
CD4+ lymphocyte count. (5­8).

3. PRINCIPLE OF THE PROCEDURE

The Dry Tri T­STAT CD3/CD4/CD45 reagent consists of murine monoclonal 
antibodies that specifically recognize the human leukocyte surface antigens, 
CD3, CD4, and CD45. Each of the monoclonal antibodies is labeled with a 
unique   fluorochrome.   Specific   cell   subsets   are   stained   when   blood   is 
combined with the reagent and each monoclonal antibody binds to the binds 
to the cell determinant molecules on the cell surface. Specific cell subsets 
are identified when passed through a flow cytometer laser beam.

The Dry Tri T­STAT CD3/CD4/CD45 reagent also contains a precise number 
of fluorescent beads.  When the reagent is combined with a known volume 
of  blood the  reagent provides for the  single platform  determination  of  the 
absolute cell concentrations of the stained subsets. The volume of sample 
analyzed can be determined by multiplication of the total sample volume by 
the fraction of total beads that were detected during the analysis.

6
4. REAGENT

The Dry­Tri T­STAT CD3/CD4/CD45 reagent is formulated in buffered saline 
with   sodium   azide   and   stabilizers.   It   contains   Atto™488   labeled   CD4 
monoclonal   antibody,   clone   RPA­T4;   Phycoerythrin   (PE)   labeled   CD45 
monoclonal   antibody,   clone   HI30;   and   PE–Dyomics™649   labeled   CD3 
monoclonal antibody, clone UCHT1. The monoclonal antibodies used in the 
Dry­Tri T­STAT CD3/CD4/CD45 were assigned these specificities at the 8th 
International Workshop on Human Leukocyte Differentiation Antigens (9). A 
precise number of fluorescent counting beads are included in the Dry­Tri T­
STAT   CD3/CD4/CD45   reagent   to   allow   single­platform   determination   of 
absolute   CD4+   and   CD3+   T­cell   counts.     The   Dry­Tri   T­STAT 
CD3/CD4/CD45   reagent   is   provided   in   dried   form   and   dispensed   in   flow 
cytometer compatible sample tubes with each tube containing one ready­to­
use   test.   Fifty   (50)   tests   are   supplied   in   each   Dry   Tri   T­STAT 
CD3/CD4/CD45 package.

Precautions

1. Warning:   The   Dry­Tri   T­STAT   CD3/CD4/CD45   reagent 


7
contains Sodium azide. Sodium azide is harmful if swallowed. 
Wear suitable protective clothing. If swallowed, seek medical 
advice   immediately.   Contact   with   acids   liberates   toxic   gas. 
Azides should be flushed with large amounts of water during 
disposal to avoid deposits in lead or copper plumbing.
2. Warning:   All   blood   specimens   are   considered   biohazards. 
Handle  them as if  they  are  capable  of  transmitting  infection 
and dispose off with proper precautions and accordance with 
governmental regulations.
3. The addition of the precise volume of blood is critical to obtain 
correct results. Use a calibrated pipette and operate according 
to the manufacturer’s instructions. 

Storage and Handling

1. Store the reagent at room temperature in a dry place. Do not 
use the reagent after the expiry date on the label.
2. Do not freeze or refrigerate Dry­Tri T­STAT CD3/CD4/CD45 
reagent.
3. The Dry­Tri T­STAT CD3/CD4/CD45 reagent is light sensitive. 
8
Do   not   expose   to   direct   light   either  during   storage   or  when 
mixed with blood.
4. Use the ziplock to  reseal the  reagent pouch  after you  have 
removed the desired number of tests.

Indication of Instability
The Dry Tri T­STAT CD3/CD4/CD45 reagent is a dry glassy coating at the 
bottom of the reaction tube.  Do not use if the reagents appears to be moist 
or it has become dislodged from the bottom of the reaction tube.

5. INSTRUMENT

The Dry­Tri T­STAT CD3/CD4/CD45 reagent is designed to be used on flow 
cytometers   equipped   with   a   488nm   laser,   that   are   capable   of   detecting 
forward   and   side   scatter,   and   detecting   three   color   fluorescence   in   three 
ranges: 515­545nm, 562­607nm, and >650nm. Examples of flow cytometers 
with the above features are the BD FACScan™, BD FACSCalibur™, Coulter 
EPICS­XL™ and Accuri™ flow cytometer systems. Calibrate the instrument 
9
for   setting   photomultiplier   tube   voltages,   fluorescence   compensation,   and 
checking instrument sensitivity according to the manufacturer’s guidelines.

Refer   to   the   manufacturer’s   instructions   for   setting   up   three   color 


immunophenotyping,   principles   of   operation,   operating   instructions,   and 
operating precautions, limitations, and hazards.

6. SPECIMEN COLLECTION

The   blood   sample   should   be   collected   in   a   sterile   blood   collection   tube 


containing K3EDTA. Follow the collection tube manufacturer’s guidelines for 
the minimum volume of blood to be collected.

The   anti­coagulated   blood   must   be   stored   at   room   temperature   (20°C   ­ 


25°C) and should be stained and analyzed ideally within 24 hours of draw.

Interfering conditions 
Refrigerated,   hemolyzed,   and   previously  fixed   blood   specimens   can   yield 
erroneous  results  and   should   be   rejected.   Aged   or   partially   clotted   blood 
specimens can affect flow cytometer performance.
10
7. PROCEDURE

Reagent Provided:  Dry­Tri T­STAT CD3/CD4/CD45 reagent in a dried 
format.

Reagents and Materials required but not provided
1. Blood collection tube containing K3EDTA
2. Calibrated pipettes
3. Vortex mixer
4. Lysing SolutionA or similar blood fix/lyse solution 
5. Sheath fluidB
6. 0.2µm filtered, deionized distilled water or Milli­Q waterC
7. Flow cytometer Calibration BeadsD

A. ReaLyse Lysing solution: ReaMetrix Catalog No: 25237­00

B. Sheath fluid: BD Catalog No.342003/ BC Catalog No. 8546859 or equivalent
C. Accuri Flow cytometer uses Milli­Q water/Distilled deionized water instead of 
11
Sheath fluid 
D. Calibration   Beads:   BD   Catalog   No.   340486/   BC   Catalog   No.   6605359   or 
equivalent

Assay Protocol

1. Start flow cytometer according to manufacturer’s instructions. 
(In the case of FACScan™ or FACSCalibur™, the instrument should 
be setup and calibrated using CaliBRITE™ beads and FACSComp™ 
software; For Beckman Coulter EPICS™ instruments, the instrument 
should be set up using the Flow­Check™ fluorospheres provided by 
Beckman   Coulter.   For   Accuri™   flow   cytometer   instruments,   the 
performance   of   the   instrument   should   be   checked   by   Validation 
beads provided by Accuri.)
3. Mix   blood   sample   (invert   blood   tube   at   least   10   times)   and 
reverse pipette  50µL of blood into the correctly labeled tube 
that contains the dry down reagent.
3. Gently vortex each tube for 30 seconds. Incubate for 30 
minutes at room temperature. Protect the tube from direct 
light.
4. Add 450µL of 1X ReaLyse lysing solution to each tube and 
12
vortex for 10 seconds. Return tubes to the dark for at least 15 
minutes.
5. Vortex sample tube thoroughly (at low speed) and load onto 
cytometer for analysis.

Quality Control
Commercially available quality control whole blood control cells can be run 
each day. Established values can be used to assess reagent and system 
performance.

8. RESULTS
For BD instruments (FACScan™ or FACSCalibur™ flow cytometers)
1. Draw three dot­plot views – Refer Figure 1
• View 1: Display CD45 PE fluorescence (FL2 ­ log scale) 
versus side scatter (SSC – Linear scale) 
• View 2: CD4 Atto488 (FL1 – log  scale)  versus  CD3  PE­
Dyomics649 fluorescence (FL3 – log scale) of events gated as 
CD45+ from the first view.

13
• View 3: CD4 Atto488 (FL1) versus CD45 PE fluorescence 
(FL2) of all events from first view. View­3 will have a gate (R2) 
to capture the fluorescent reference beads.  The beads have a 
high FL1 and FL2 Mean Fluorescence Intensity.
2. Set the instrument Threshold on FL2. Before acquisition adjust the 
FL­2 threshold to minimize debris.
3. Set  the  number of  events  to  capture  at 3000  for R­2 gate bead 
events (Figure 1; View 3) and start data acquisition. When 3000 
beads are acquired in the gate, acquisition stops.
4. Gate the brightest CD45+ cell cluster in View­1(Figure 1) and label 
the population as R­1. This CD45+ cell cluster is that population 
which   has   the   lower   SSC   intensity   and   higher   FL­2   mean 
fluorescence intensity. It represents the lymphocyte population. The 
Gate R­1 is applied on View­2. 
5. View­2 (Figure 1) cell clusters are separated using quadrant gating. 
The CD4+CD3+ cell populations can be identified in View­2 (Figure 
1)   in   the   upper   right   quadrant   as   double   positives.   Total   CD3+ 
events can be identified by adding up the cell events from both the 
upper quadrants (Upper Left and Upper Right quadrants).

14
6. The absolute count for each cell type can be calculated using the 
following equation, where the Gated Cell count and Bead count are 
obtained from the Flow Cytometer analysis and the Bead count per 
test from the test kit provided.
(Gated Cell Count) x(Bead Count per te
Absolute CellCount / µL =
(Gated Bead Count) x(Test Volumein µ

Figure 1. Dot plot views: View 1: CD45­PE fluorescence (FL2 log scale) versus 
side scatter (SSC Linear scale)  View 2:  CD4­Atto488 (FL1 log scale) versus 

15
CD3­PE­Dyomics649 fluorescence (FL3 log scale) of events gated as CD45+ 
R1   from   the   first   view.  View   3:  CD4­Atto488   (FL1)   versus   CD45­PE 
fluorescence (FL2) of all events from first view. View­3 will have a gate R2 to 
capture the fluorescent reference beads.

For Beckman­Coulter Flow Cytometer instruments (EPICS™ series)
1. Draw five dot­plot views – Refer Figure 2.
• View 1: Display CD45 PE fluorescence (FL2 ­ log scale) 
versus side scatter (SSC – Linear scale)
• View 2: side scatter (SSC – Linear scale) versus CD3 PE­
Dyomics649 (FL4 ­ log scale)
• View 3: CD4 Atto488 (FL1 – log  scale)  versus  CD3  PE­
Dyomics649 fluorescence (FL4 – log scale) of events gated as 
A (CD45+) from the first view.
• View 4: CD4 Atto488 (FL1) versus CD45 PE fluorescence 
(FL2) of all events from first view. View­4 will have a gate (D) to 
capture   the   fluorescent   reference   beads.     The   beads  have   a 
high FL1 and FL2 Mean Fluorescence Intensity.

16
• View 5: CD4 Atto488 (FL1 – log  scale)  versus  CD3  PE­
Dyomics649 fluorescence (FL4 – log scale) of events gated as 
D  (Beads) from the fourth view. View­5 will have a gate (E) to 
capture the fluorescent reference beads
2. Set the instrument Discriminator on FL2. Before acquisition adjust 
the FL­2 Discriminator to minimize debris.
3. Set the number of events to capture at 3000 for E gate bead events 
(Figure 2; View 5) and start data acquisition. When 3000 beads are 
acquired in the gate E, acquisition stops.
4. Gate the brightest CD45+ cell cluster in View­1(Figure 2) and label 
the   population   as  A.   This   CD45+   cell   cluster   is   that   population 
which   has   the   lower   SSC   intensity   and   higher   FL­2   mean 
fluorescence intensity. It represents the lymphocyte population. The 
Gate A is applied on View­2 and 3. 
5. View­2 (Figure 2); CD3+ cell clusters are separated using gate B. 
The CD3+ cell population has the lower SSC intensity and higher 
FL­4 mean fluorescence intensity.
6. View­3 (Figure 2) cell clusters are separated using quadrant gating 
C.   The   CD4+CD3+   cell   populations   can   be   identified   in   View­3 
17
(Figure 2) in the upper right quadrant (C2) as double positives.
7. View­4 (Figure 2); fluorescent reference beads are separated using 
gate  D. The beads have a high FL1 and FL2 Mean Fluorescence 
Intensity. The gate D is applied on View­5.
8. View­5 (Figure 2); fluorescent reference beads are separated using 
gate  E. Set the number of events to capture at 3000 for  E  gate 
bead events.
9. Enter the Calibrator (CAL) value in the Region E on the template to 
generate  absolute   cell  counts.   The  Calibrator  value  is  calculated 
using bead count per test from the test kit provided.
Bead Count per Test
Calibrator (CAL) =
Test Volume (µL)

18
Figure 2. Dot plot views: View 1: CD45­PE fluorescence (FL2 log scale) versus side 
scatter   (SSC   Linear   scale)  View   2:   CD3­PE­Dyomics649   fluorescence   (FL4   log 
scale) versus side scatter (SSC Linear scale)  View 3:  CD4­Atto488 (FL1 log scale) 
versus   CD3­PE­Dyomics649   fluorescence   (FL4   log   scale)   of   events   gated   as  A 

19
(CD45+)   from   the   first   view.  View   4:  CD4­Atto488   (FL1)   versus   CD45­PE 
fluorescence (FL2) of all events from first view. View­4 will have a gate D to capture 
the   fluorescent   beads  View   5:   CD4­Atto488   (FL1   log   scale)   versus   CD45­PE 
fluorescence (FL2) of events gated as D (Beads) from the fourth view. View­5 will 
have a gate E to capture the fluorescent reference beads

For Accuri™ Flow Cytometer Instruments

1. Draw four dot­plot views – Refer Figure 3.
• View 1: Display CD45 PE fluorescence (FL2 ­ log scale) 
versus side scatter (SSC – Linear scale)
• View 2: Side scatter (SSC – Linear scale) versus CD3 PE­
Dyomics649 (FL3 ­ log scale) of events gated as P1 (CD45+) 
from the first view.
• View 3: CD4 Atto488 (FL1 – log  scale)  versus  CD3  PE­
Dyomics649 fluorescence (FL3 – log scale) of events gated as 
P1 (CD45+) from the first view.
• View 4: CD4 Atto488 (FL1) versus CD45 PE fluorescence 
(FL2) of all events from first view. View­4 will have a gate P2 to 
20
capture   the   fluorescent   reference   beads.   The   beads   have   a 
high FL1 and FL2 Mean Fluorescence Intensity.
Following table (Table­1) represents the Plot Specification Value to 
set the scales:
Table­1: Dot Plot View X & Y­Axis Scale Specifications
Dot Plot 
Axis Scale Min Value Max value
Views
X­Axis FL2­Log scale 800 1,000,000
View 1
Y­Axis SSC­Linear scale 0 180,000
X­Axis FL3­Log scale 300 600,000
View 2
Y­Axis SSC­Linear scale 0 150,000
X­Axis FL1­Log scale 1000 200,000
View 3
Y­Axis FL3­Log scale 100 5,000,000
X­Axis FL1­Log scale 1000 10,000,000
View 4
Y­Axis FL2­Log scale 500 2,000,000

2. In the Run Limit section of the Instrument template panel, set the 
instrument   Threshold   on   FL2   and   set   the   value   to   2000. 
Before/After   acquisition   adjust   the   FL­2   Threshold   value   to 
minimize debris.
21
3. In the Run Limit section of the Instrument template panel, set the 
fluidics flow rate on MEDIUM. Set the number of events to capture 
at 3000 for P2 gate bead events (Figure 3; View 4).
4. Click on the Set Colour Compensation to open the compensation 
matrix and set the compensation as per Figure 4.
5. Vortex  sample   tube   thoroughly  at   low  speed   and   load   onto   flow 
cytometer for acquisition. When 3000 bead events are acquired in 
the gate P2, acquisition stops.
6. Gate the brightest CD45+ cell cluster in View­1(Figure 3) and label 
the   population   as  P1.   This  CD45+   cell  cluster   is  that   population 
which   has   the   lower   SSC   intensity   and   higher   FL2   mean 
fluorescence intensity. It represents the lymphocyte population. The 
Gate P1 is applied on View­2 and 3. 
7. CD3+ cell clusters are separated using gate R1 (View­2, Figure 3). 
The CD3+ cell population has the lower SSC intensity and higher 
FL3 mean fluorescence intensity.
8. In View­3 (Figure 3) cell clusters are separated using quadrant gate 
Q1. The CD4+CD3+  cell  populations  can  be  identified  in  View­3 
(Figure 3) in the upper right quadrant Q1­UR as double positives.

22
9. View­4 (Figure 3); fluorescent reference beads are separated using 
gate P2. The beads have a high FL1 and FL2 Mean Fluorescence 
Intensity.
10. The absolute count for each cell type can be calculated using the 
following equation, where the Gated Cell count and Bead count are 
obtained from the Flow Cytometer analysis and the Bead count per 
test from the test kit provided. 

(Gated Cell Count) x(Bead Count per test)


Absolute CellCount / µL =
(Gated Bead Count) x(Test Volumein µL)

23

View 1 View 2
            
                                        View 3                                                                 View 4

Figure 3. Dot plot views: View 1: CD45­PE fluorescence (FL2 log scale) versus side 
scatter   (SSC   Linear   scale)  View   2:   CD3­PE­Dyomics649   fluorescence   (FL3   log 
scale) versus side scatter (SSC Linear scale)  View 3:  CD4­Atto488 (FL1 log scale) 
versus CD3­PE­Dyomics649 fluorescence (FL3 log scale) View 4: CD4­Atto488 (FL1 
log scale) versus CD45­PE fluorescence (FL2 log scale)

24
Figure 4: Accuri Flow cytometer Compensation settings for Dry­Tri T­STAT 

25
CD3CD4CD45 Reagent

9. LIMITATIONS

1. The  Dry­Tri T­STAT CD3/CD4/CD45  reagent  has  only  been 


validated with K3EDTA treated whole blood.
2. Laboratories should establish their own reference ranges for 
the   absolute   counts   obtained   using   the   Dry­Tri   T­STAT 
CD3/CD4/CD45 reagent.

10. PERFORMANCE CHARACTERISTICS

Accuracy
The   absolute   counts   for   CD4+CD3+   and   CD3+   T­Cells  determined   using 
Dry­Tri   T­STAT   CD3/CD4/CD45   reagent   were   compared   with   a 
commercially available ReaPan 34845 reagent. Aliquots of the same blood 
samples were analyzed with the two reagents at the same time. Regression 
26
analysis reported in the Table­2 below and the plots in Figures 5 ­ 8 indicate 
that the results are substantially equivalent.

Table­2. Regression analysis

T­Cell Subset n Slope Intercept R Range


CD3+CD4+ T­Cells (cells/µL) 53 1.09 ­19 0.99 9 ­ 1786
Total T lymphocytes ­ CD3+ (cells/µL) 53 1.00 71 0.96 243 ­ 3577
CD3+CD4+ T­Cells (%) 53 1.00 ­1.1 0.99 3.3 – 55.6
Absolute lymphocyte count (cells/µL) 53 1.03 65 0.96 280 ­ 4069

27
Figure 5.  Correlation  of  absolute  CD4+CD3+  Figure   6.   Correlation   of   %   CD4   determined 
T­Cell counts determined using the Dry­Tri T­ using   the   Dry­Tri   T­STAT   CD3/CD4/CD45 
STAT CD3/CD4/CD45 reagent and compared  reagent   and   compared   to   ReaPan   34845 
to ReaPan 34845 reagent reagent

28
Figure 7. Correlation of absolute CD3+ T­Cell  Figure   8.   Correlation   of   Absolute 
counts  determined   using   the   Dry­Tri   T­STAT  Lymphocyte counts (ALC) determined using 
CD3/CD4/CD45   reagent   and   compared   to  the Dry­Tri T­STAT CD3/CD4/CD45 reagent 
ReaPan 34845 reagent and compared to ReaPan 34845 reagent

29
Precision 

The   repeatability   of   measurement   was   determined   for   three   samples 


representing  high,  medium  and  low  CD3+CD4+  and  CD3+  T­cells  counts 
were   analyzed   by   performing   triplicates   per   level.   These   results   are 
summarized in Table­3.

Table­3. Repeatability of CD4+CD3+ and CD3+ T­Cell enumeration

Cell Type Level Mean SD CV (%)


High 917 67.5 7.3
CD4+CD3+ T­Cells Medium 378 9.5 2.5
Low 147 4.7 3.1
High 1812 104.0 5.7
CD3+ T­Cells Medium 891 29.9 3.2
Low 361 31.7 3.1

Specificity

30
The antigen specificities for the CD3, CD4, and CD45 monoclonal antibodies 
used in the Dry Tri T­STAT CD3/CD4/CD45 reagent were confirmed by the 
Human   Leukocyte   Differentiation   Antigens   (HLDA)   Workshops.   After 
conjugation of the antibodies no additional cross­reactivity was observed.

11. BIBLIOGRAPHY

1. Knapp W, Dorken B, Gilks WR, Rieber EP, Schmidt RE, Stein H, & 
von   dem   BorneAEGKr,   eds.  Leukocyte   typing   IV.     White   cell 
differentiation antigens.  Oxford university press 1989
2. Reinherz   EL,   Meuer  SC,   and   Schlossman   SF.  The   delineation   of 
antigen   receptors   on   human   T   lymphocytes.   Immunology   Today, 
1983, 4:5­8.
3. Fauci AS: The human deficiency virus: Infectivity and mechanism of 
pathogenesis. Science, 1988, 239:617­622.
4. Reinherz EL and Schlossman SF. The differentiation and function of 
human T lymphocytes. Cell, 1980, 19:821­827.
5. Phillips A, Lee C, Elford J, et al.  Serial CD4 lymphocyte counts and 
the development of AIDS.  Lancet 1991, 337:389­392.
6. Nicholson J.  Use of flow cytometry in the evaluation and diagnosis 
31
of primary and secondary immunodeficiency diseases.  Arch. Pathol. 
Lab. Med.  1989, 113:598­605.
7. Yarchoan R, Venzon D, Pluda J, et al.   CD4 count and the risk of 
death in patients infected with HIV receiving antiretroviral therapy. 
1991, 115:184­189.
8. Giorgi   J   &   Detels   R.     T­cell   subset   alterations   in   HIV­infected 
homosexual   men:   NIAID   multicenter   AIDS   cohort   study.     1989, 
52:10­18.
9. Heddy   Z,   Swart   B,   Nicholson   I,   &   Voss   E,   eds.   Leukocyte   and 
stromal cell molecules; the CD markers.  John Wiley & Sons 2007

12. WARRANTY

This product is warranted only to conform to the quantity and contents 
stated on the label at the time of delivery to the customer. There are no 
warranties, expressed or implied, that extend beyond the description on 
the   label   of   the   product.   ReaMetrix’s   sole   liability   is   limited   to 
replacement of the product. ReaMetrix is not liable for property damage, 
personal injury, or economic loss caused by the product. 
32
Note: FACScan, FACSCalibur, CaliBRITE, FACSComp are all registered trade  
names of Becton­Dickinson;  EPICS, Flow­Check are all registered trade names of 
Beckman Coulter, Accuri C6 flow cytometer is the trade name of Accuri.

33
Manufactured by ReaMetrix India Pvt. Ltd.
Manufacturing License Number: KTK/25/519/2006
50­B, II Phase, Peenya Industrial Area
Peenya, Bangalore 560058, India
Ph: +91­80­28378693/5, 
Fax: +91­80­41172451
E­mail: info@reametrix.com, 

34
www.reametrix.com
Rev No. 4.0, 22­Sep­09

35