HOSPITAL DE ESPECIALIDADES GUAYAQUIL DR.

ABEL GILBERT
SUBPROCESO DE CONTROL DE INFECCIONES
Y VIGILANCIA EPIDEMIOLGICA


INSTRUCTIVO PARA TOMA DE MUESTRA DE CULTIVO
(Precauciones para garantizar la calidad de los cultivos)

Introduccin
El Laboratorio Clnico es el principal apoyo al diagnstico, seguimiento y
tratamiento de infecciones. Las decisiones clnicas basadas en los resultados de los
exmenes de laboratorio que se toman correctamente mejoran la calidad de la
respuesta teraputica
Ser rigurosos en los controles de calidad interno, externo y en el control de las
distintas fases del proceso: pre-analtica, analtica y post-analtica contribuir a
definicin de casos y manejo de alternativas
Con este antecedente se dispone:
1. Evitar recoleccin o conservacin inadecuada de muestras. Esto llevara a
resultados confusos y a no identificar los agentes etiolgicos de un proceso infeccioso
lo que provocara un diagnstico equivocado y uso innecesario de antibiticos
2. El manejo de identificacin debe ser estricto y regirse al protocolo de pedido
Nombre del paciente
Numero de Historia Clnica
Edad
rea
Fecha y hora de recoleccin de la muestra
Diagnstico
Esquema de antibitico utilizado (si es que lo tuviere)
Tipo de muestra.
RECOMENDACIN ESPECFICA PARA HEMOCULTIVOS
1. Recolectar 2 muestras en el lapso de 24 hs. Los intervalos entre las mismas
dependen de la urgencia de la situacin clnica, pero nunca menos de 2030 minutos
entre cada una de ellas siempre de distintos sitios de puncin.
2. Es ideal recoger la muestra en el lapso de 1h antes del pico febril, si este pudiera
predecirse. De no ser posible, hacerlo cuando comienza.
3. Realizar las extracciones antes de la administracin de antibiticos. Si no puede
evitarse, hacerlo antes de la siguiente dosis. (1h antes de la siguiente dosis)
4. El volumen de muestra debe ser de 8 a 10mlen adulto, en nios de 1 -3 ml
5. Rotular cada muestra segn las pautas establecidas, indicando el nmero de la misma
y la hora de extraccin.
6. Elegir el tipo de frasco (grmenes aerbico, anaerobio, etc.) segn la situacin clnica

Procedimiento para la toma de Hemocultivo
Higiene de manos
Eleccin del sitio de puncin.
Colocarse guantes estriles.
Luego de realizado este procedimiento, NO VOLVER A PALPAR LA VENA A
PUNZAR.
Realizar la desinfeccin de la piel con alcohol 70, seguida por aplicacin de solucin
de iodo povidona, en forma concntrica al sitio de puncin. Dejar actuar cada uno de
ellos 30"-60" y luego de punzar remover con alcohol 70 para evitar la irritacin
local.
Desinfectar el tapn de goma del frasco con alcohol al 70%.
Inocular los frascos SIN INTRODUCIR AIRE en ellos. (Invertir los frascos al realizar
esta operacin).
Agitar suavemente, sin formar espuma para homogeneizar la muestra, evitando que la
sangre coagule.
Enviar las muestras INMEDIATAMENTE al Laboratorio.
Fuera del horario de recepcin: colocar en estufa de incubacin a 35C (Laboratorio de
Guardia).
Nunca colocar los frascos de hemocultivo en refrigeracin.

RECOMENDACIONES PARA CATETERES REMOVIBLES.
Previo a la remocin del catter, extraer 1 (una) muestra de Hemocultivo de vena
diferente a la del catter PERO NUNCA a travs del mismo. De no cumplirse con este
requisito, la muestra ser RECHAZADA.
Procedimiento para toma de muestra de punta de catter vascular
Higiene de manos.
Colocarse guantes estriles.
Realizar la desinfeccin de la zona pericatter con iodopovidona o alcohol yodado.
Dejar secar 60".
Retirar el catter, cuidando que no roce piel
En forma asptica, cortar 3-5 cm de la porcin distal (punta) y colocar en tubo seco
estril con tapa de rosca. Catteres de mayor longitud sern rechazadas.
FUERA DEL HORARIO DE RECEPCIN DE LA MUESTRA
Colocar en frasco estril con tapa de rosca con solucin fisiolgica estril de modo que
el catter quede sumergido.
Conservar en refrigeracin.
5. RECOMENDACIONES PARA CATETERES NO REMOVIBLES
Se debe extraer una muestra de sangre de una vena perifrica diferente de la de
insercin del catter (HEMOCULTIVO PERIFERICO) y otra de igual volumen a travs
del catter vascular (RETROCULTIVO)
Las muestras recogidas deben ser procesadas en forma INMEDIATA, lo que implica
que sern extradas NICAMENTE EN EL HORARIO DE RECEPCIN del
Laboratorio de Microbiologa.
Procedimiento para la toma de retro cultivo
Higiene de manos
Colocarse guantes estriles
Desinfectar la zona de extraccin tanto el catter como la piel, con idopovidona o
alcohol iodado. Dejar secar 60".
Extraer 5-8 ml de sangre en adulto 1-3ml de sangre en nios a travs del catter y
recoger en un frasco de hemocultivo
Agitar y rotular: "RETROCULTIVO". Extraer igual cantidad de sangre de vena
perifrica y recoger de igual forma que en el punto anterior. Agitar y rotular:
"HEMOCULTIVO PERIFERICO. Las tomas de muestras deben realizarse en forma
SIMULTNEA y enviarse inmediatamente al Laboratorio.

LIQUIDOS DE PUNCION
LCR
Realizar una adecuada desinfeccin de la zona a punzar con alcohol 70, seguida por
aplicacin de solucin de iodopovidona. Dejar actuar 30 a 60 segundos, y luego de
punzar, remover con alcohol 70C.
Extraer las muestras colocando en tubos estriles secos.
Los tubos estriles utilizados para el transporte de las muestras debern; en lo posible;
poseer tapa de rosca para evitar el derramamiento prdida de las mismas.
En la mayora de los casos se aconseja acompaar la toma de LCR con 2 muestras de
hemocultivo.
Recolectar el material (segn las pautas ya establecidas) en por lo menos 2(dos) tubos
secos estriles. a) estudio microbiolgico b) estudio cito qumico y un tercero si es que
lo amerita para Virus.
Remitir en forma inmediata al Laboratorio. Fuera del horario de recepcin, dejar los
tubos a temperatura ambiente. NUNCA refrigerar (excepto para estudio virolgico).
Los lquidos de origen ventricular o subdural se tratan igual que el LCR.

OTROS LIQUIDOS DE PUNCION
SINOVIAL, PLEURAL, OTICO, ASCITICO, PERITONEAL, PERICARDICO .
Generalidades:
Se aconseja enviar el mayor volumen posible de muestra ya que pueden ser infecciones
de bajo inculo.
Procedimiento para toma de muestra de lquidos de puncin
Higiene de manos
Colocacin de guantes estriles.
Realizar la limpieza de la zona a punzar con alcohol 70%
Desinfectar con iodopovidona o alcohol iodado. Dejar secar 60 segundos. Remover
con alcohol 70 luego de punzar.
Punzar y recolectar una porcin en frasco seco estril con tapa de rosca y otra en un
frasco de hemocultivo.
Enviar en forma INMEDIATA al Laboratorio.

MUESTRA DE PIEL Y TEJIDOS BLANDOS

Generalidades
En estas muestras es crtica la correcta descontaminacin de la piel.
Siempre indicar si la muestra proviene de una cavidad abierta o cerrada.
Describir precisamente el sitio anatmico del cual se obtiene.
De tratarse de heridas, es crtico diferenciar entre muestras superficiales y profundas,
siendo estas ltimas las nicas tiles para el cultivo de anaerobios, si son recolectadas
en forma adecuada



ABSCESOS CERRADOS Y HERIDAS QUIRURGICAS:
El mtodo de eleccin es la puncin a travs de piel sana. Si es una herida, realizarla lo
ms prximo a ella, llegando hasta el lecho de la misma
Procedimiento de toma de muestra con debida asepsia
Lavado de manos.
Colocacin de guantes estriles.
Limpieza de la piel con alcohol 70C.
Desinfeccin con iodopovidona Dejar secar 60 segundos.

Heridas
Aspirar el sitio elegido y recoger en frasco seco estril con tapa de rosca.
Si no se obtuviera material por este procedimiento: inyectar 0,5-1ml de solucin
fisiolgica estril y aspirar nuevamente. (Puncin - aspiracin).
Descartar la aguja y cubrir la jeringa con el capuchn de la aguja

Absceso
Introducir la aguja en distintas direcciones en forma radiada, manteniendo el vaco
en la jeringa, cuidando de no producir el ingreso de aire al retirar la jeringa luego de
aspirar el contenido.
Descartar la aguja y cubrir la jeringa con el capuchn de la jeringa.
Remitir las muestras al Laboratorio en forma INMEDIATA

ABSCESOS Y HERIDAS ABIERTAS:
Heridas:
Remover la flora superficial antes de obtener la muestra con abundante solucin
fisiolgica y gasas estriles retirando el exudado o material purulento.
Proceder a tomar una biopsia de tejido de aproximadamente 0.5 x 0.5 cm y
profundidad necesaria para involucrar la totalidad del espesor de la herida.
Colocar en un recipiente estril de plstico con tapa rosca.
Remitir INMEDIATAMENTE al Laboratorio de Microbiologa.
FUERA DEL HORARIO DE RECEPCION:
Colocar 2 cm de solucin fisiolgica en el recipiente estril. Conservar refrigerado
En caso de querer investigar anaerobios se deber remitir inmediatamente en horario de
funcionamiento de la seccin Microbiologa.
Si por algn motivo no se pudiese obtener una biopsia de tejido se deber tomar una
aspiracin del fluido en la profundidad de la herida.
Para ello se proceder como para la puncin de abscesos cerrados pero punzado en piel
sana adyacente a los bordes de la herida, con una inclinacin de 30 a fin de llegar al
fondo de la herida o directamente por el orificio de la misma sin tocar los bordes
externos.

TOMA DE MUESTRA DE TRACTO URINARIO

Pacientes con sonda vesical
Procedimiento para recoleccin de muestra de urocultivo en paciente con senda
vesical permenente
Pacientes con sonda vesical permanente
De ser posible, cambiar la sonda vesical por una nueva para la toma de urocultivo
En caso de no poder realizarse con sonda nueva deber clampearse la sonda 2-3 hs.
Desinfectar la tubuladura con iodopovidona o alcohol iodado.
Punzar con aguja mosquito y jeringa estril a 10 cm del meato urinario y de la
conexin del tubo de la bolsa recolectora.
Colocar el material obtenido en el frasco
Nunca tomar material de la bolsa recolectora ni enviar la punta de la sonda vesical
Puncin supra pbica
Los pacientes deben tener la vejiga llena para poder realizar la puncin.
Realizar asepsia de la piel con alcohol 70, luego aplicar solucin de iodopovidona en
forma concntrica en el sitio de puncin. Luego de realizada la misma, remover con
alcohol 70.
Punzar piel sana (evitando escaras o dermatitis) con aguja y jeringa estril. Recolectar
en el frasco adecuado.
COPROCULTIVO
Generalidades:
Para la investigacin de patgenos entricos, se debe remitir muestra de materia fecal
recin emitida o en medio de transporte adecuado( frasco de orina). Debe tratarse de
heces diarreicas
Nunca se recolectar la muestra del inodoro y no se debe permitir la contaminacin de
la misma con orina.
Se aceptarn hisopados rectales solo si estos presentan materia fecal y de pacientes muy
comprometidos con enfermedad diarreica. NUNCA se utilizarn para deteccin de
toxina de Clostridium difficile.

RECOMENDACIONES PARA MUESTRA CERVICAL/ENDOCERVICAL:
Colocar el espculo. NO usar lubricante.
Remover moco o secreciones.
Comprimir el cuello con los bordes del espculo y recolectar la descarga o insertar el
hisopo en el cuello, rotarlo 30" para obtener el material.
Repetir la operacin para : extendidos, cultivos especiales.
Colocarlos en los medios de transporte adecuados.
Remitir al Lab. o conservar a Temperatura Ambiente. NO refrigerar

VIAS RESPIRATORIAS BAJAS:
Generalidades:
Especificar precisamente al paciente, las instrucciones de toma de muestra para la
obtencin de un espcimen til.
Muestras tales como: esputo, secrecin traqueal, aspirado nasofarngea y lavado
bronquial, generalmente se contaminan con la flora del tracto respiratorio superior.
Las ms tiles para diagnstico de patgenos del tracto respiratorio inferior, tanto
aerobio como anaerobio son aquellas obtenidas por mtodos fibroendoscpicos, tales
como: lavado broncoalveolar (BAL), cepillo protegido (CEP)
La de mayor sensibilidad y especificidad es la biopsia de pulmn a cielo abierto, pero
por tratarse de un mtodo tan invasivo se reserva para situaciones especiales.
Para la correcta evaluacin de la muestra es necesaria la informacin provista por el
mdico solicitante que debe incluir:
Si se presume neumona intra o extra hospitalaria.
Si el proceso es agudo o crnico ya que en el ltimo caso debern buscarse agentes
involucrados en estos procesos.
Si el paciente est sometido o no a ARM.
Si es inmunodeprimido tiene alguna patologa de base (por ejemplo enfermedad
fibroqustica)
Es importante tomar la muestra antes de la administracin de antibitico
En todos los casos:
-Utilizar para la recoleccin frascos de plstico estriles.
-Deben ser enviadas las muestras INMEDIATAMENTE, como mximo entre 30
minutos a 2h, conservadas a temperatura ambiente
Procedimiento para toma de muestra de esputo
-Enjuagarse la boca al levantarse con solucin de bicarbonato, a fin de disminuir la flora
de la boca.
-Recolectar el esputo producto de una expectoracin profunda en un envase de plstico
estril, de boca ancha, con cierre hermtico
Rotular el frasco y remitirlo al Laboratorio INMEDIATAMENTE
Para toma de muestra de esputo inducido
En caso de no tener produccin de expectoracin espontanea, se obtiene la muestra
despus de instilar solucin salina hipertnica en aerosol (nebulizacin). Luego los
pacientes suelen toser y producir muestras adicionales de buena calidad.
Recolectar la muestra siguiendo los pasos descriptos para el Esputo
Remitir INMEDIATAMENTE al Laboratorio.
FUERA DEL HORARIO DE RECEPCION: Conservarlo en refrigeracin NO
ms de 24 hs.

ASPIRADO TRAQUEAL O TRANSTRAQUEAL
Esta muestra se utiliza fundamentalmente para valorar la colonizacin del tracto
respiratorio en el paciente ventilado. Tiene valor anlogo al esputo por su
contaminacin con la flora orofarngea. No obstante un resultado de cultivo
semicuantitativo de 3 o 4 cruces ( desarrollo en 3 o 4 cuadrantes de la placa de Petri ) se
correlaciona bien con la etiologa de la neumona en el paciente ventilado.
Esta muestra se obtiene con sonda de aspiracin o trampa de moco por personal de
enfermera debidamente entrenado o los tcnicos de terapia respiratoria.
Se enviar al laboratorio en tubo estril o en tubuladura de suero.
Tiene las mismas consideraciones que la expectoracin.




Vigilancia epidemiolgica y control de infecciones

Dra Sandra Quispe Dr. Tomas Rodrguez L
Infectologa Epidemilogo
Lcda Maria del Carmen Rodriguez Lcda Roselbia Denis Torres
Cooperacion cubana