Tema 32: Oncogenes

1. Introduccin
El cncer es una alteracin en el crecimiento normal de las clulas en cultivo
con evidentes manifestaciones morfolgicas. Se asocia a una serie de cambios
moleculares, que causan la desregulacin de los sistemas de control de la
proliferacin celular y de la apoptosis.
Se manifiestan formando cultivos multicapa e incluso tumores, la
desorganizacin del citoesqueleto, que acompaa a una cierta desdiferenciacin
morfolgica, alteraciones en la superficie celular (cambios antignicos y cambios en la
funcionalidad de la membrana), alteraciones nucleares y cromosmicas,
independencia de anclaje, disminucin de la capa externa de fibronectina, bajos
requerimientos de factores de crecimiento, aumento en la secrecin de proteasas...
Tipos de cncer:
Leucemia (glbulos blancos).
Linfoma (linfocitos).
Sarcoma (mesodermo: huesos, msculos).
Carcinoma (epitelio: piel, glndulas, mama) 85% cnceres.

Procesos en la formacin de un cncer:

1. Aparece una lesin del ADN producida por productos cancergenos, luz UV,
virus o errores de replicacin que escapan a la maquinaria de reparacin lo que
provoca que aparezca una mutacin.
2. La clula que porta la mutacin prolifera y da lugar a una poblacin de clulas
que tienen esta mutacin (expansin clonal).
3. A partir de estas clulas se puede adquirir una segunda mutacin que afecte al
crecimiento o la muerte celular (transformacin). Con cada expansin clonal
aumenta la probabilidad de otra mutacin transformante.
4. La acumulacin de mutaciones transformantes (mutaciones que afectan a
genes que controlan proliferacin, crecimiento y diferenciacin celular) conduce
a la transformacin total de la clula.
Las mutaciones transformantes se pueden dar en:
Oncogenes: promueven proliferacin celular (protooncogn). Muy
conservados evolutivamente. Patrn autosmico dominante.
Genes supresores de tumores (TS): Inhiben la proliferacin celular. Patrn
autosmico recesivo. (P53, el guardin del genoma: se expresa ante la falta de
oxgeno, toxicidad ambiental, daos DNA).
Genes mutadores: genes que aumentan la tasa de mutacin del conjunto del
genoma.

Metfora del autobs
Acelerador = protooncogn
Freno = TS genes
Saboteador = genes mutadores

Las clulas cancerosas no necesitan seales estimuladoras de crecimiento y
son resistentes a seales de inhibicin de la proliferacin o a la apoptosis. Son clulas
inmortales que no envejecen.
Podemos diferenciar dos tipos de tumores:
Un tumor benigno es un crecimiento anmalo pero lento de clulas que es
inofensivo como por ejemplo una verruga. Un tumor maligno es un crecimiento rpido
de clulas que se infiltran, invaden y destruyen el tejido que las rodea.
Los tumores tienen capacidad angiogenia, es decir, son capaces de promover
la formacin de nuevos vasos sanguneos y capilares para hacer llegar oxgeno y
nutrientes. Las clulas cancerosas pueden metastatizar, se separan de la masa
tumoral y viajan a travs de la sangre o linfa a rganos no relacionados donde forman
nuevas colonias.
Progresin del cncer:
1. Proceso multisecuencial: mutaciones en protooncogenes y genes supresores
de tumores.
2. Acumulacin de mutaciones en un nmero relativamente pequeo de
protooncogenes y genes supresores que dotan a las clulas de capacidades
adquiridas:
Crecimiento independiente de seales externas e internas.
Evasin de la apoptosis.
Capacidad de replicacin ilimitada y prdida de diferenciacin.
Cambios en el fenotipo tumoral.

3. Capacidad de invasin y metstasis.
4. Neovascularizacin sostenida: angiognesis.
5. Homeostasis tumoral: interacciones clulas tumorales-clulas vecinas.
2. Perspectiva histrica
Las enfermedades tumorales o proliferativas, ya sean de tipo benigno o
maligno (canceroso), han sido objeto de atencin durante muchos siglos.
En 1739, Lorenz Heister public un tratado de ciruga en el cual, refirindose al
tratamiento quirrgico de los tumores de la glndula mamaria, haca hincapi en las
precauciones necesarias para evitar la contaminacin de los tejidos sanos con la
sangre infectada por el virus del cncer. Es claro que Heister utiliz el trmino virus
en el mismo sentido que le daban los mdicos de la antigua Roma, o sea, como
sinnimo de veneno particularmente de origen animal. Sin embargo, las precauciones
recomendadas en el tratado de Heister implicaban que cuando menos algunos
tumores son de naturaleza transmisible y, por lo tanto, capaces de ser adquiridos por
contagio.
Ms de un siglo despus, en 1854, el mdico francs Velpau dedic un captulo
completo de su tratado sobre el cncer mamario a la discusin de los posibles
orgenes de tal enfermedad, poniendo particular atencin en los informes que
apoyaban la naturaleza contagiosa del cncer.
Alrededor de 1866, Goujon realiz una serie de experimentos en los cuales
implant secciones de tejido tumoral bajo el epitelio de ratas, cobayas y otros
animales, y en algunos casos observ la aparicin de pequeos tumores tanto en las
zonas adyacentes al implante como en las vsceras del animal experimental. Sin
embargo, por aquel entonces no exista ninguna teora bien estructurada concerniente
al posible modo como se efectuaba la transmisin del cncer.
A finales del siglo XIX, experimentos realizados con filtrados libres de clulas
demostraron la posibilidad de transmitir enfermedades como el mosaico del tabaco.
Tales experimentos llamaron la atencin de varios investigadores mdicos que a su
vez intentaron transmitir el cncer en animales experimentales utilizando filtrados
obtenidos a partir de tejidos tumorales. Estos tempranos intentos fracasaron, pero a
pesar de esto empez a extenderse lentamente la idea de que algunos virus filtrables
podran estar involucrados en la etiologa (causa u origen de una enfermedad) de
algunos tipos de cncer.
En 1908, los patlogos daneses Ellerman y Bang publicaron sus experimentos
que demostraban la induccin de leucemias en pollos por medio de un filtrado libre de
clulas.

Por otra parte, en los Estados Unidos, Peyton Rous haba logrado inducir
sarcomas en pollos, utilizando filtrados obtenidos a partir de extractos tumorales
pasados a travs de filtros impermeables a clulas y bacterias. El trabajo de Rous,
publicado en 1911, fue recibido con escepticismo o absoluto rechazo por la mayora de
sus contemporneos. Sin embargo, Rous nunca perdi la conviccin en la importancia
de sus resultados, los cuales eran apoyados indirectamente por el trabajo de Ellerman
y Bang, pero a principios de este siglo predominaba una actitud negativa respecto del
posible origen infeccioso de ciertos tipos de cncer y, por otra parte, las leucemias no
eran consideradas como una forma de cncer, por lo cual no existan razones
aparentes para establecer conexiones entre el trabajo de Rous y las observaciones de
los patlogos daneses.
A pesar de esto, Rous continu sus estudios y posteriormente describi otros
tipos de tumores filtrables caractersticos de gallinas y otras aves de corral. Por
fortuna, Rous tuvo una larga vida que le permiti testimoniar el reconocimiento final a
su trabajo, simbolizado por el premio Nobel de medicina que le fue otorgado en 1966,
o sea, cincuenta y cinco aos despus de haber publicado aquel informe que
estableci por primera vez una slida asociacin entre el virus y la produccin de
cncer en animales.
En Londres, durante los aos veinte, W. E. Gye realiz un estudio sobre el
sarcoma de los pollos; los resultados de este trabajo lo convencieron de que el
problema central del cncer se reducira finalmente al de una enfermedad transmitida
por virus.
Esta teora continuo siendo motivo de anatema para la mayora de los que se
dedicaban al estudio del cncer, pero algunos colegas de Rous, que tambin
trabajaban en el Instituto Rockefeller; decidieron adoptar una actitud ms positiva al
respecto. As, T. M. Rivers se dedic a estudiar los cambios patolgicos observados
en una infeccin comn a los conejos, conocida como mixomatosis. Rivers lleg a la
conclusin de que esta enfermedad mostraba interesantes paralelismos con el
sarcoma de Rous, desde el punto de vista del modo de transmisin.
En 1931, R. E. Shope examin unos pequeos tumores presentes en un conejo
recin fallecido. Shope demostr que tales tumores podan ser transmitidos a otros
conejos a partir de un filtrado obtenido del tejido tumoral. Para entonces, ya se
encontraba bien establecida la existencia de los virus como entidades bien
caracterizadas en el nivel fisicoqumico, y estudios inmunolgicos permitieron
establecer que el virus presente en los filtrados obtenido por Shope estaba
emparentado con el agente causal de la mixomatosis, a pesar de que ambas
enfermedades eran diferentes desde el punto de vista clnico y patolgico.
En 1932, Shope se dedic a estudiar unos pequeos tumores conocidos como
papilomas, que eran observados con frecuencia en conejos silvestres. Dichos
papilomas constituyen un tipo de tumor benigno y Shope pudo demostrar que eran
causados por un virus filtrable. El nuevo virus poda ser transmitido en serie a travs
de conejos silvestres y tambin poda ser transmitido a los conejos domsticos. Sin
embargo, no era posible propagar el virus a partir de conejos domsticos; este
fenmeno sugiri a Shope que el virus se encontraba en un estado enmascarado u
oculto dentro de la especie domstica.
Rous y Beard continuaron estudiando los papilomas inducidos en los conejos
domsticos a partir del virus presente en conejos silvestres, y descubrieron que estos
tumores originalmente benignos se convertan en carcinomas malignos en la especie
domstica.
En 1911, J. A. Murray haba sido el primero en sugerir que factores hereditarios
podan influir el desarrollo del cncer mamario en ratones.
3. Transformacin celular ligada a virus
Qu es lo que ha pasado en el experimento del pollo de Rous?
En el extracto de clulas estaba presente una protena codificada por el virus
que haba infectado al 1 pollo, una protena quinasa llamada Src. Al virus se le
nombr como virus del sarcoma de Rous (v-Src). Esta protena Src en el virus v-Src es
anmala, y est constitutivamente activada (autofosforilacin): actividad tirosina
quinasa independiente de ligando.
En el proceso de infeccin del virus, el ADN viral se integra en el ADN de la
clula del ave que pasa a expresar la protena Src anmala que induce la
transformacin de las clulas musculares.

Se compara el efecto que produce el virus del sarcoma de Rous (RSV) con el
que produce el virus de la leucemia aviar (ALV) y se empiezan a preguntar por qu
uno induce transformacin mientras que el otro no. Lo que induce la transformacin
debe estar presente en la informacin gentica de RSV que no est presente en la de
ALV.

Para contrastar esta hiptesis, se comparan las dos dotaciones genticas de
ambos virus: una comparacin directa de los genomas de los virus ALV y RSV
muestra que el ARN de RSV tiene unas 10 kb, mientras que el de ALV 8,5 kb es por
esta diferencia que ALV no induce transformacin?
En los 70s Peter Vogt y Steven Martin determinan que lo que falta en ALV es
un gen responsable de inducir transformacin aunque sin este gen el virus se replica
normalmente en clulas infectadas. Debido a que el RSV causa sarcomas, el oncogn
fue llamado Src. El estudio de virus tumorales, revel que haba determinados genes
que eran capaces de inducir transformacin celular, a estos genes se les llam
oncogenes que son genes especficos capaces de convertir una clula en cancerosa.

4. Hiptesis del oncogn
A principios del siglo XX, existe la creencia de que el cncer es una
enfermedad transmitida por un virus.
En 1936 Bittner descubre que la transmisin del cncer de mama de una cepa
de ratn a otra se realiza a travs del amamantamiento, resultando ser un virus el
responsable de esta neoplasia.
El descubrimiento de otros virus oncognicos en neoplasias de aves, ratones,
ratas, gatos, primates, bovinos incluso en peces, permiti en la dcada de los 50,
postular la etiologa infecciosa del cncer debido a un virus exgeno.
En 1959 Liberman y Kaplan demuestran que la irradiacin de ratones con rayos
X induce una leucemia y que de estas clulas leucmicas se asla un virus capaz de
reproducir la enfermedad en ratones sanos.
En la dcada de los 60 y 70 se busca el virus oncognico humano.
En 1969 Huebner y Todaro postulan que el genoma celular contiene un gen
(denominado posteriormente protooncogn) potencialmente responsable de la
transformacin neoplsica, transmitido a la descendencia en forma latente y capaz de
ser activado por agentes fsicos y/o qumicos.
Hasta ahora se han aislado ms de 40 retrovirus altamente oncognicos de
una gran variedad de animales y todos ellos contienen al menos un oncogn
responsable de la transformacin celular. Como Src muchos de estos oncogenes
codifican protenas que son componentes clave de vas de sealizacin que estimulan
la proliferacin celular.
5. Oncogenes
Identificados como los genes transformantes de los retrovirus.
Forma activada de un gen protooncogn.
Dominantes a nivel celular, lo que significa que basta la mutacin de un alelo.
Las mutaciones son somticas y nunca se heredan.
Son reguladores positivos del crecimiento celular.
Denominamos protooncogn al conjunto de genes codificantes de protenas
que tienen un papel en el ciclo celular afectando a la proliferacin y la apoptosis y que
pueden causar que clulas normales se transformen en cancerosas.
Para convertirse en oncogenes, los protooncogenes son activados, o sea
modificados ya sea por sustancias qumicas, por radiacin o por virus. Los
mecanismos conocidos son:
Alteraciones qumicas y fsicas: Mutaciones en la regin codificante del
protooncogn que causan hiperproduccin o hiperactividad de la protena o mutacin
en la regin promotora que causa excesiva expresin
Redistribucin cromosmica. Por ejemplo, translocaciones: el protooncogn
completo o una parte se mueve a otra parte del genoma que puede estar controlado
por un promotor ms activo y expresarse excesivamente. Si slo se transloca una
parte del protooncogn ste puede expresarse como una protena truncada con
propiedades alteradas o bien fusionarse con otro gen y producir una protena de fusin
con propiedades transformantes.
Ejemplo clnico: El cromosoma Philadelphia es el resultado de una
translocacin recproca entre los cromosomas 9 y 22. El gen -abl del cromosoma 9 se
inserta en el gen vcr del cromosoma 22 (la porcin desplazada del cromosoma 22 se
encuentra en el cromosoma 9). Los genes vcr y abl se unen de tal forma que, cuando
se expresan, se forma una protena de fusin que consta de la cadena de aminocidos
de un extremo de vcr y la mayor parte o toda la protena abl. Se piensa que esta
protena tiene un papel fundamental en la produccin de la leucemia, pero an no se
sabe cmo acta.
Mutagnesis insercional. La clula se infecta con un virus que tiene un gen
promotor o un oncogn; en el primer caso si el promotor se inserta en la vecindad de
un protooncogn, este puede desregularse y convertirse en oncogn. En el segundo
caso el protooncogn se inserta en el cdigo gentico de la clula husped. Este y el
anterior forman un nico tipo pero por comprensin los he separado.
Amplificacin de genes: formacin de muchas copias de un protooncogn. Se
ha demostrado que la formacin de mltiples copias de un oncogn (de la familia erb)
est relacionada con el grado de agresividad del cncer de mama.
Estos mecanismos estn relacionados con la funcin de los factores de
crecimiento, por lo cual se cree que los oncogenes pueden aumentar la produccin de
factores de crecimiento por la misma clula, el nmero de receptores de factores de
crecimiento, la afinidad de los receptores, la sensibilidad de la clula a la seal de
proliferacin emitida por la unin del factor de crecimiento con su receptor.

5.1. Clasificacin de oncogenes
Los protooncogenes y por tanto los oncogenes pueden clasificarse de distintas
formas (su homologa, su funcin biolgica). Una de las clasificaciones ms usadas es
aquella que identifica los oncogenes en los distintos niveles de transduccin de
seales que controlan la proliferacin celular. As, la transformacin maligna de una
clula puede estar mediada por un oncogn activado a mltiples niveles en la ruta de
transduccin de seales, pero que en todos los casos, la activacin de estos
oncogenes tiene como consecuencia la induccin de la proliferacin de manera
incontrolada.
La traduccin de seales es el conjunto de procesos bioqumicos a travs de
los cuales, factores extracelulares generan una respuesta intracelular. Se trata de
eventos normales por los que hormonas, neurotransmisores y otras sustancias regulan
la funcin celular.
La proliferacin celular constituye uno de los varios procesos regulados por
mecanismos de transduccin de seales, por lo que hoy se considera que la alteracin
de tales mecanismos es responsable de la aparicin del cncer.
Los productos de los oncogenes suelen integrarse en la compleja maquinaria
que regula la proliferacin de la clula, comportndose como molculas transductora
de seales y generando, directa o indirectamente, una multiplicacin celular continua.
Por ello, se describe en la actualidad a las clulas cancerosas como clulas normales
que presentan seales de transduccin aberrantes.
Segn la funcin celular podemos diferenciar:
Factores de crecimiento.
Receptores de factores de crecimiento.
Protenas citoplasmticas:
o Quinasas.
o Activadores del Ciclo Celular (ciclinas).
o Reguladores (Rb).
o Controladores del Genoma (p53).
o Apoptosis (familia bcl-2).
Protenas Nucleares (factores de transcripcin).

5.2. Oncogenes en vas de receptores acoplados a protenas G
Mutaciones del receptor de TSH dan lugar a tumores de tiroides por una
actividad constitutiva del receptor que induce la proliferacin celular a travs de la va
de sealizacin del cAMP.
Del mismo modo, los genes que codifican protenas G puede actuar como
oncogenes en algunos tipos de clulas.
El oncogn gsp, que codifica la subunidad de Gs, se genera por mutaciones
puntuales similares a los encontrados en Ras. Estas mutaciones causan la activacin
constitutiva de la subunidad de Gs, lo que lleva a la estimulacin no regulada de la
adenilato ciclasa. El oncogn gsp est implicado en los tumores de tiroides e hipfisis,
donde cAMP estimula la proliferacin celular, as como tumores suprarrenales y
ovricos.

5.3. Oncogenes en vas de factores de crecimiento
Las protenas oncognicas pueden actuar
como factores de crecimiento (por ejemplo, EGF),
receptores del factor de crecimiento (por ejemplo,
ErbB), y molculas de sealizacin intracelular
(Ras y Raf) y factores de transcripcin como Fos.
La mayora de las protenas oncognicas
funcionan como elementos de vas de sealizacin
que regulan la proliferacin y supervivencia celular en
respuesta a la estimulacin del factor de crecimiento.
La accin de factores de crecimiento como
protenas oncognicas resulta de su expresin
anormal, llevando a una situacin en la que una
clula tumoral puede producir un factor de
crecimiento al que tambin responde. El resultado es
la estimulacin autocrina de clulas productoras del
factor de crecimiento que lleva a la proliferacin
anormal de clulas y contribuye al desarrollo de
tumores.


Ejemplo oncogn c-erbB2/HER2/neu
Los oncogenes activados pueden dar receptores alterados que prescinden de
la accin del ligando. Ejemplo: si c-erbB es activado, pierde el dominio extracelular del
EGFR. Este cambio produce una activacin constitutiva de la tirosn quinasa en el
dominio citoplasmtico, imitando a un EGFR siempre ocupado por un ligando y
estimulando la proliferacin celular
El oncogn c-erbB2/HER2/neu puede ser activado por una mutacin puntual
que cambia una valina por glutamina en el dominio transmembrana del receptor HER2
(similar a EGFR) que conduce a dimerizacin y autofosforilacin en ausencia de
ligando.
Se expresa en aproximadamente en el 25-30% de las pacientes con cncer de
mama. La expresin de este oncogn est asociada a la progresin y evolucin
desfavorable del cncer de mama.

Ejemplo oncogn Ras
La protena ras se asocia a GEF (factor intercambiador de Guanina) que facilita
la disociacin de la molcula de GDP. La mayora de las mutaciones puntuales que
afectan a Ras anulan la actividad GTPasa de Ras, la cual es mediada a travs de la
accin de la protena activadora de GTPasa o GAP (GTPasa activiting protein).
Cuando Ras est unida a GTP est activa por tanto este oncogn produce una
protena que est siempre activa.
Las mutaciones caractersticas de Ras tienen el efecto de mantener las
protenas Ras constitutivamente en la forma activa unida a GTP. Esto es el resultado
de anular la respuesta de Ras a GAP (protena activadora de GTPasa).
Ras activa a Raf que activa a MEK que activa a MAPK que fosforila a protenas
citoslicas y nucleares, como resultado se da un aumento en la expresin de c-myc y
fos dos factores de transcripcin (que son tambin protooncogenes).

Ejemplo oncogn Raf
La familia est formada por tres onco-protenas con un alto grado de
homologa. La prdida por deleccin de la regin amino terminal conlleva una
activacin constitutiva del dominio cataltico.


Ejemplo va Akt
Las protenas oncognicas que intervienen en la supervivencia celular incluyen
factores de crecimiento y sus receptores as como PI y Akt quinasas. La va PI3-
quinasa/Akt regula miembros de la familia Bcl-2, caspasa-9, varios factores de
transcripcin y GSK-3 que facilitan la supervivencia celular al inhibir la liberacin de
citocromo c por la mitocondria.

5.4. Factor de transcripcin AP-1
Fos y el producto de otro protooncogn, Jun, son los componentes del factor de
transcripcin AP-1, que activa la transcripcin de una serie de genes diana en clulas
estimuladas por factores de crecimiento.
La activacin constitutiva de AP-1, que resulta de la expresin no-regulada de
cualquiera de las protenas oncognicas Fos o Jun, es suficiente para la proliferacin
anormal de clulas, dando lugar a la transformacin celular.

5.5. Protooncogenes ciclina D1 y ciclina E1
El gen que codifica la ciclina D1 es un protooncogn que puede ser activado a
oncogn (llamado D1) por translocacin cromosomal o amplificacin gnica. Estas
alteraciones dan lugar a la expresin constitutiva de ciclina D1 que desencadena la
proliferacin celular en ausencia de factores de crecimiento.
Los factores de crecimiento regulan la progresin del ciclo celular a travs del
punto de restriccin en G1 induciendo la sntesis de ciclinas tipo D por la va de
sealizacin Ras/Raf/ERK.