Bài 6:

HIỆN TƯỢNG ỨC CHẾ SỰ PHÂN BÀO

1. MỤC ĐÍCH THÍ NGHIỆM.

Tìm hiểu hiện tượng ức chế phân bào dưới tác dụng của colchicine.
+ Yêu cầu:
- Thực hiện ức chế phân bào dưới tác dụng của colchicines 0,03% trên rễ hành
- Quan sát các giai đoạn của quá trình phân chia nguyên nhiễm ở rễ có tác động colchicine
2. DỤNG CỤ VÀ HÓA CHẤT
2.1. Dụng cụ:
- Lọ chứa mẫu vật
- Đĩa đồng hồ
- Lame
- Lamelle
- Kim mũi giáo
- Kẹp
- Dao lam
- Giấy thấm
- Kính hiển vi
2.2. Hóa chất:
- Colchicine 0,03%
- Dung dịch cố định carnoy
- Alcool 900 và alcool 700
- Dung dịch HCl 1N
- Thuốc nhuộm hematoxyline
- Dung dịch kali 10%
- Nước cất.

3. TIẾN HÀNH THÍ NGHIỆM

3.1. Chuẩn bị mẫu:
- Xử lý mẫu đang phát triển tốt với cochicine có nồng độ 0,03% trong thời gian là 2 tuần để
quan sát mitose – C.
- Cố định rễ trong carnoy trong 12 giờ.
- Rửa mẫu 2 lần trong alcool 900, mỗi lần rửa 10 phút.
 - Giữ mẫu trong alcool 700.
2.2. Cách làm tiêu bản tạm thời.
- Rửa mẫu với nước cất, sau đó cho mẫu vào trong đĩa đồng hồ.
- Cho dung dịch HCl 1N vào đĩa đồng hồ với lượng đủ ngập các mẫu trong 15 phút.
- Nhuộm mẫu bằng hematoxyline trong 15 phút.
- Nhỏ một giọt Kali 10% trên lame sạch, sau đó chuyển mẫu vào trong giọt kali.
- Đậy mẫu bằng lamelle và dung đầu bút tán mẫu cho tới khi các tế bào tách rời nhau.
- Quan sát mẫu dưới kính hiển vi ở vật kính x10 và x40.

4. KẾT QUẢ.
Các giai đoạn của quá trình phân chia nguyên nhiễm ở rễ có tác động colchicines 0,03% trong
2 tuần.

anaphase

telophase
Tế bào đa bội Tế bào bình thường