B.

PHN NG TA CA PROTEIN
I.1. Cch lm:
-Cho vo ng nghim 3ml lng trng trng nguyn cht,
thm vo 3ml dd (NH
4
)
2
SO
4
bo ha , lc u. 5 pht,
lc qua giy lc thm t bng dd (NH
4
)
2
SO
4
bo ha.
Cho vo dch lc mt t tinh th (NH
4
)
2
SO
4
. Lc u.
I. TA THUN NGHCH
Cho vo dch lc mt t tinh th (NH
4
)
2
SO
4
. Lc u.
I.2. Quan st:
-Khi cho dd (NH
4
)
2
SO
4
bo ha vo protein trng thy
xut hin kt ta trng.
- Khi lc, kt ta trng b gi li (chnh l globulin)
- Dung dch nc lc khi cho tinh th (NH
4
)
2
SO
4
vo c
hin tng kt ta tr li (chnh l albumin).
I.3. Gii thch:
-Trong protein trng c c albumin v globulin. y l
nhng protein mang tnh axit yu. iu kin bnh
thng, trong trng thi dung dch, phn t P tch in -,
bn ngoi c bao bi mt lp o nc vi u + quay
vo v u quay ra, nn l lng trong mi trng.
R - COOH
Thy phn
R COO
-
H
+
, OH
-
Lp o nc
-Khi cho cc mui (NH
4
)
2
SO
4
c nng cao vo, th
mui s to cc ion NH
4
+
v SO
4
2-
. Cc ion ny s trung
ha cc tiu phn t protein trng ng thi ly lp o
nc bn ngoi to ra hin tng ta.
- S d globulin to kt ta trc v n c trng lng
phn t ln, lp o nc bn ngoi ln nn to cc ion
NH
4
+
v SO
4
2-
d v nhanh dn n s trung ha in gy NH
4
+
v SO
4
2-
d v nhanh dn n s trung ha in gy
ra ta.
- Khi lc, ta c dung dch bn bo ha albumin. Nn
khi cho tinh th (NH
4
)
2
SO
4
vo tc lm cho dung dch lc
trng thi bo ha, lc ny albumin c hin tng kt
ta.
I.4. Kt lun:
-Phn ng ta bng phng php mui kt ch thc hin
c trong mi trng axit yu hoc kim yu.
- Dng phn ng ta thun nghch ny chit protein
di dng tinh khit, iu ch nhng sn phm men, ni
tit t. V trong qu trnh, mui kt protein khng mt i
cc tnh cht vt l, ha hc v sinh hc c hiu. cc tnh cht vt l, ha hc v sinh hc c hiu.
II.1.1. Cch lm: cho vo 5 ng nghim mi ng 5 git
dd protein trng.
- ng nghim 1: un si.
- ng nghim 2: thm 1 git axit axetic 1%, un si.
II. TA KHNG THUN NGHCH
II.1. TA PROTEIN BNG PP UN SI
- ng nghim 3: thm 5 git axit axetic 1%, un si.
- ng nghim 4: thm 5 git axit axetic 1% v 2 git dd
NaCl bo ha, un si.
- ng nghim 5: thm 2 git NaOH 10%, un si.
II.1.2. Quan st:
- ng nghim 1: dd c mu trng trong, khng ta.
- ng nghim 2: c kt ta trng c.
- ng nghim 3: dd trong sut, khng ta.
- ng nghim 4: kt ta trng
- ng nghim 5: khng ta. - ng nghim 5: khng ta.
I.1.3. Gii thch:
- ng nghim 1: dd c mu trng trong, khng ta v cc
tiu phn t protein b mt lp o nc bao bn ngoi
nhng vn cn tch in.
- ng nghim 2: c kt ta trng c v khi cho 1 git axit
axetic 1% s to nn mi trng axit yu. Nhm -COO
-
b
c ch s phn ly nn tiu phn t protein mt in tch.
pH ca mi trng t gn ti im ng in.
R - COOH
Thy phn
R COO
-
H
+
Axit yu
R COO
-
- ng nghim 3: khi cho 5 git axit axetic 1% s to nn
mi trng axit mnh. Do tnh ho nc ca axit v mi
trng axit mnh c nhiu ion H
+
nn protein b kh nc.
Cc nhm -COO
-
c trung ha cn cc nhm NH
3
+
khng c trung ha. Phn t protein vn cn tch in
dng. Do khng to kt ta.
R - COOH
Thy phn
R COO
-
2H
+
Axit mnh
R COOH
-ng nghim 4: khi cho 5 git axit axetic 1% v 2 git
NaCl bo ha s to nn mi trng trung ha v in. Do
to kt ta.
- ng nghim 5: khi thm 2 git NaOH 10% s gy mi
trng kim. Nhm NH
3
+
c trung ha. V vy khi un
si in t m cuat tiu phn t protein vn cn. Protein
tch in m khng to ta. tch in m khng to ta.
II.1.4. Kt lun:
-Phn ln protein b ong t khi un trong mi trng
trung tnh hay axit yu.
- Trong mi trng kim mnh hay axit mnh, protein cn
tch in nn khng to ta.
- Protein d dng to ta khi pH mi trng t im ng - Protein d dng to ta khi pH mi trng t im ng
in.
- Nng mui v pH mi trng ng vao tr quan
trng trong to ta ca protein.
II.2.1. Cch lm: cho vo 2 ng nghim
- ng nghim 1: 5 git dd protein trng 1%, 15-20 git
ru etylic 96
0
, thm 2 git NaCl bo ha. Lc u.
- ng nghim 2: 5 git dd protein trng 1%, 15-20 git
II. TA KHNG THUN NGHCH
II.2. TA PROTEIN BNG DUNG MI HU C
- ng nghim 2: 5 git dd protein trng 1%, 15-20 git
axeton, thm 2 git NaCl bo ha. Lc u.
II.2.2. Quan st:
- ng nghim 1: dd trong ng nghim khi thm ru
etylic 96
0
c mu hi c nhng khng to ta. Nhng
khi thm NaCl bo ha th xut hin kt ta trng.
- ng nghim 2: tng t nh ng 1 nhng c mu c
hn v c kt ta nhiu hn.
I.2.3. Gii thch:
- Cc phn t protein b mt nc v km bn trong dung
dch l do ru etylic v axeton l nhng cht ho nc.
Chng s ly nc ca protein.
- Khi cho NaCl bo ha, ay l cht in gii mnh, to
ion Na
+
v Cl
-.
Cc ion ny s trung ha in t ca cc
tiu phn t protein, to ta. tiu phn t protein, to ta.
- S d ng nghim 2 c ta nhiu hn l v axeton ho
nc hn ru etylic. N ly lp o nc ca protein d
dng nn to nhiu ta hn.
II.2.4. Kt lun:
iu kin to ta l protein phi trung tnh hay
c tnh axit yu v tt nht l phi c cht in gii mnh.
II.3.1. Cch lm: cho vo 2 ng nghim
- ng nghim 1: 5 git dd protein trng 1%, 2 git axit
sunfoxalisilic 20%.
II. TA KHNG THUN NGHCH
II.3. TA PROTEIN BNG AXIT HU C
sunfoxalisilic 20%.
- ng nghim 2: 5 git dd protein trng 1%, 2 git axit
tricloaxetic 10%
II.3.2. Quan st:
- ng nghim 1: dd trong ng nghim c kt ta c.
- ng nghim 2: tng t nh ng 1 nhng c kt ta t
hn.
I.3.3. Gii thch:
- Khi cho cc axit hu c vo dd protein trng s to nn
mi trng axit yu, c kh nng gy ta.
-V axit sunfoxalisilic c th ta protein, polypeptit v axit
amin, cn axit tricloaxetic ch c kh nng ta protein.
Nn ng nghim 1 nhiu ta hn.
II.3.4. Kt lun:
Mt ln na chng minh iu kin to ta l
protein phi trung tnh hay c tnh axit yu.
II.4.1. Cch lm: cho vo 3 ng nghim
- ng nghim 1: 5 git HNO
3
- ng nghim 2: 5 git H SO
II. TA KHNG THUN NGHCH
II.4. TA PROTEIN BNG AXIT V C MNH
- ng nghim 2: 5 git H
2
SO
4
- ng nghim 3: 5 git HCl

Sau nh cn thn theo thnh mi ng nghim 5 git

protein trng. Cho thm vo mt lng d cc axit tng
ng.
II.4.2. Quan st:
- ng nghim 1: xut hin vng ta trng c gia .
Khi cho thm lng d axit vo vng ta vn khng tan.
- ng nghim 2: xut hin ta nhng khi cho thm axit
d vo th ta tan to dd c mu trng trong.
- ng nghim 2: xut hin ta nhng khi cho thm axit
d vo th ta tan to dd c mu vng nu. d vo th ta tan to dd c mu vng nu.
I.4.3. Gii thch:
- Khi cho cc axit v c mnh vo, cc axit ny c tnh
ho nc, s ly nc ca dd protein trng lm cho
protein b bin tnh, protein b kh nc v trung ha in
tch gy ta.
-Nhng khi thm lng d axit tng ng vo ta s tan
ra nhng ng 1 khng tan v khi HNO vo protein s to ra nhng ng 1 khng tan v khi HNO
3
vo protein s to
hp cht nitro khng tan.
II.4.4. Kt lun:
Protein ta do mt lp o nc v trung ha in
tch.
II.5.1. Cch lm: cho vo 3 ng nghim, mi ng 5 git
protein trng, 2 git NaCl bo ha v thm vo:
- ng nghim 1: 3 git dd FeCl 5%
II. TA KHNG THUN NGHCH
II.5. TA PROTEIN BNG MUI KIM LOI NNG
- ng nghim 1: 3 git dd FeCl
3
5%
- ng nghim 2: 3 git (CH
3
COO)
2
Pb 5%
- ng nghim 3: 3 git CuSO
4
5%
Sau thm vo mt lng d cc mui tng ng.
II.5.2. Quan st:
- ng nghim 1: xut hin ta mu vng nu, khi cho
thm lng d mui vo ta tan.
- ng nghim 2: xut hin ta mu trng c, khi cho
thm mui d vo th ta tan t t.
- ng nghim 2: xut hin ta mu xanh nht, nhng khi
cho thm mui d vo th ta tan. cho thm mui d vo th ta tan.
I.5.3. Gii thch:
- Cc mui kim loi nng tc dng vi protein to cc
phc cht khng tan trong nc nhng tan tr li khi
clng mui d tng ng (tr AgNO
3
, HgCl
2
).
-Hin tng ny xy ra do s hp thu ion kim loi nng
trn b mt cc tiu phn t protein lm chng cng tch
in dng. in dng.
- Mui kim loi nng to ta v lm bin tnh protein do
s ph hy su sc cu trc bc 2,3 ca phn t protein.
II.5.4. Kt lun:
Kh nng to t khng tan ca protein vi cc mui
kim loi nng c s dng trong nhng trng hp ng
c mui Hg, Cu, Pb khi c th cha hp thu. Protein
sa, trng thng c dng gii c.