1.- Describa para cada experimento el blanco que Ud. utilizara para calibrar el espectrofotmetro.

Efecto de la concentracin de cloroplastos = Volumen de cloroplastos correspondiente y

completando con amortiguador de resuspensin hasta 10ml sin colorante.
Efecto del tiempo de exposicin = Volumen de cloroplastos escogido y completando con
amortiguador de resuspensin hasta 10ml sin colorante.
Efecto de la intensidad de luz = Volumen de cloroplastos escogido y completando con
amortiguador de resuspensin hasta 10ml sin colorante (para cada intensidad lumnica).
Efecto inhibitorio del DCMU = Volumen de cloroplastos escogido, ms 1ml del DCMU
correspondiente y completando con amortiguador de resuspensin hasta 10ml (sin colorante).

2.- Cules son las ventajas de utilizar el colorante DCFIF?
Las ventajas son que los cloroplastos cuando son aislados cuidadosamente son capaces de
reducir el colorante 2,6-Diclorofenol-Indofenol (DCFIF), lo cual puede ser medido
espectrofotomtricamente comparando con una muestra control. La reduccin se debe a que este
capta los electrones en lugar del NADP
+
en la fotofosforilizacin no cclica de la fotosntesis ya
que este acta como un aceptor de electrones cambiando su cloracin de azul a incoloro,
dependiendo de la cantidad de electrones que acept

3.- Describa las evidencias experimentales que apoyan la existencia de dos fotosistemas en
plantas superiores.
Emerson y colaboradores descubrieron que la velocidad de la fotosntesis en presencia de luz roja
aumentaba enormemente si se administraba luz de dos longitudes de onda diferentes y que ms
importante an esta facilitacin se mantena cuando las dos longitudes de onda eran
administradas en destellos alternativos separados por hasta varios segundos. Esto sugiri a
Emerson y Duysen la existencia de dos sistemas operantes en la fotosntesis y que la energa
absorbida por uno de ellos se una de alguna forma a la energa aportada por el otro. Adems el
largo intervalo de tiempo permisible entre los destellos de distinta longitud de onda, sin que se
modificase la intensidad de la respuesta, indicaba que la conexin entre los dos sistemas ocurra
en la forma de intermediarios qumicos antes que en una trasferencia directa del estado excitado,
dado que el retorno al estado basal por fluorescencia o calor ocurre rpidamente, a menos que los
electrones de alta energa sean transferidos a orbitales estables de un aceptor qumico estable.
En este caso los efectos aditivos permanecan aunque ambos destellos estuviesen separados por
varios segundos. Duysen llamo a los dos sistemas de absorcin de luz fotosistema I y II.
Obviamente estos resultados provocaron un notable inters en la investigacin de las
caractersticas de cada fotosistema en particular y las formas en que ellos interactan. As se
descubri que la conexin entre ambos fotosistemas est dada por cadenas de transportadores
de electrones similares al sistema de transporte de electrones de las mitocondrias.




4.- Qu productos de la reaccin fotoqumica de la fotosntesis espera obtener en un sistema de
cloroplastos tipos II en los siguientes casos:
- Presencia de DCFIF


- Ausencia de CO
2


- En presencia de una sustancia que oxide continuamente al P700 (PSI)