Introduo

Com esta actividade prtica de laboratrio pretendeu-se observar o efeito do processo de

transporte transmembranar em clulas vegetais (da epiderme da ptala vermelha de
sardinheira), a osmose, em que a gua destilada transportada do meio extracelular, um
meio hipotnico, para o interior do vacolo, um meio hipertnico, ou vice-versa, de
modo a diminuir ou aumentar a concentrao do vacolo, ficando a clula ou trgida ou
plasmolisada, respectivamente, dependendo do sentido do transporte da gua, se do
exterior ou do interior da clula.
Nesta actividade laboratorial, a ptala de sardinheira foi preparada em 3 meios de
montagem distintos, na soluo de Ringer (meio de montagem isotnico relativamente
ao meio intracelular), na soluo de NaCl a 15% (meio de montagem hipertnico em
relao ao meio interno da clula) e na gua destilada (meio de montagem hipotnico
em relao ao meio intracelular).
Fundamento Terico
Segundo a Teoria Celular, a clula a unidade bsica estrutural e funcional de todos os
seres vivos (vida), ou seja, todos os seres vivos so constitudos por clulas, onde
ocorrem os processos vitais.
As ptalas vermelhas de sardinheira so compostas por inmeras clulas eucariticas
vegetais, isto , so clulas que possuem um ncleo bem definido e organizado, sendo
que este delimitado por um invlucro. Osconstituintes das clulas eucariticas
vegetais so: o nuclolo, o ncleo, o retculo endoplasmtico, os ribossomas, o
complexo de Golgi, o vacolo, as mitocndrias, os cloroplastos, o citoplasma, a
membrana plasmtica e a parede celular. Nas clulas da epiderme das ptalas, o vacolo
, normalmente, desenvolvido e contm pigmentos dissolvidos na gua, sendo estes
responsveis pela cor caracterstica das ptalas.
De todos os constituintes da clula eucaritica vegetal apresentados acima, a membrana
plasmtica aquela que tem mais importncia para o transporte de substncias entre o
meio intracelular e o meio extracelular, pois constitui uma barreira selectiva, atravs da
qual a clula processa trocas de substncias e de energia com o meio. As substncias
transportadas atravs da membrana plasmtica so transportadas de forma desigual, pois
a membrana pode facilitar, dificultar ou impedir a passagem dessas substncias porque
tem uma propriedade que lhe permite escolher as substncias que quer permitir que
passem do meio interno da clula para o meio externo da clula ou vice-versa, sendo
essa propriedade designada por permeabilidade selectiva. Existem 4 tipos de transportes
transmembranares, a osmose, a difuso simples, a difuso facilitada e o transporte
activo. Destes 4 tipos de transportes transmembranares, a osmose o tipo de transporte
que ocorreu entre as clulas das ptalas vermelhas de sardinheira e os 3 diferentes meios
de montagem em que estiveram as ptalas preparadas.
A osmose a passagem de gua atravs da membranacelular, sendo a gua uma
substncia constituda por pequenas molculas polares que tem extrema importncia em
determinadas funes da clula, pois essas molculas atravessam a membrana
plasmtica nos dois sentidos com muita facilidade. A osmose pode ser tambm definida
como a difuso de molculas de gua entre dois meios separados por uma membrana

que pouco permevel ou mesmo impermevel ao soluto e permevel gua, sendo

assim explicada pela diferena de concentrao de soluto nos dois meios, intra ou
extracelular. Na osmose, a gua passa sempre do meio com menor concentrao de
soluto (meio hipotnico relativamente ao outro meio) para o meio com maior
concentrao de soluto (meio hipertnico relativamente ao outro meio). Quando a
concentrao de soluto igual nos dois meios, estes dizem-se isotnicos e o fluxo de
gua igual e mesma velocidade nos dois sentidos.
A osmose pode originar 3 estados diferentes nas clulas, os quais vo proporcionar um
nome diferente mesma. Quando a clula preparada num meio de montagem
hipotnico em relao ao meio intracelular, como por exemplo, a gua destilada, ocorre
entrada de gua do meio extracelular para o vacolo, este incha, ou seja, aumenta de
volume, comprimindo, consequentemente, o citoplasma e o ncleo contra a parece
celular, impedindo esta ltima que as clulas rebentem, isto , que ocorra lise celular,
neste caso diz-se que a clula ficou trgida, alterando a sua cor para um tom mais claro
devido menor concentrao dos pigmentos existentes no vacolo, que conferem
sptalas (vermelhas de sardinheira, neste caso) a sua cor. Quando ocorre sada de gua
do vacolo para o meio extracelular, devido grande concentrao do meio de
montagem, por exemplo, se este for uma soluo concentrada de cloreto de sdio, o
vacolo desincha, isto , diminui de volume e fica com uma cor mais intensa e forte, a
membrana plasmtica desprende-se parcialmente da parede celular, nesta situao diz-se
que a clula ficou plasmolisada.
Procedimento Experimental
Material
Microscpio ptico Composto (MOC);
Lmina;
Lamela;
Bisturi;
Agulha de dissecao;
Pina;
Conta-gotas;
Tiras de papel de filtro;
gua destilada;
Soluo de Ringer;
Soluo de NaCl a 15%;
Flores vermelhas de sardinheira;

 Papel de limpeza.
Metodologia (Procedimento)
Primeiro comecei por colocar uma gota de gua numa lmina de vidro. De seguida,
retirei uma ptala da flor e, com o auxlio de uma pina, rasguei na diagonal, de modo a
destacar-se a epiderme superior, coloquei imediatamente a epiderme destacada na
soluo de Ringer para evitar que enrolasse. Depois, com a ajuda da pina e do bisturi,
cortei uma pequena poro da epiderme e rejeitei o restante material biolgico. Em
quarto lugar, coloquei a lamela, sem pressionar, e observei a preparao ao microscpio,
utilizando vrias ampliaes. Antes de prosseguir com a actividade, chamei aprofessora.
Depois, esquematizei algumas clulas observadas com a ampliao de 400x. Chamei
novamente a professora, antes de continuar com a actividade. De seguida, retirei a
preparao do microscpio e substitu o meio de montagem por soluo de NaCl a 15%,
tendo reccorrido ao mtodo de irrigao. Depois observei novamente e esquematizei
algumas clulas observadas com a ampliao de 400x. Em dcimo lugar, mantive a
preparao no microscpio e substitu o meio de montagem por gua destilada, tendo
recorrido outra vez ao mtodo de irrigao, tendo usado, no mnimo, 2 ou 3 gotas de
gua, este passo foi executado cuidadosamente, de maneira a no molhar o MOC.
Observei durante alguns minutos e registei, por escrito, o que observei. Por ltimo,
limpei, com cuidado, a platina do MOC e a objectiva de 40x.
Interpretao dos Resultados
Na observao do processo de osmose em clulas da epiderme de ptalas vermelhas de
sardinheira em que o meio de montagem a soluo de Ringer (meio isotnico em
relao ao meio intracelular), as clulas dizem-se normais porque o fluxo de gua
atravs da membrana celular o mesmo nos dois sentidos e ocorre mesma velocidade,
tendo o vacolo um tamanho intermdio, ou seja, o seu volume considerado normal,
pois tem um tamanho maior que o de um vacolo de uma clula plasmolisada, mas
menor do que o de uma clula trgida. Apresenta uma cor relativamente clara, isto ,
intermdia (nem muito clara nem muito escura), pois a concentrao dentro do vacolo
igual concentrao no meio extracelular, devido ao meio demontagem ser isotnico,
como referido acima.
Ao substituir o meio de montagem (soluo de Ringer) por soluo de NaCl a 15%,
meio de montagem hipertnico em relao ao meio intracelular, ou seja, a gua vai
passar do meio intracelular (vacolo) para o meio extracelular, de modo a diminuir a
concentrao do meio de montagem (soluo de NaCl a 15%), verifiquei que ocorreu
sada de gua dos vacolos para o meio extracelular, tendo, por consequncia,
diminudo o volume dos vacolos, pois perderam gua, ficando estes mais pequenos, a
membrana plasmtica de algumas clulas desprendeu-se parcialmente da parede celular,
ficando o vacolo de cada clula com maior concentrao, e sendo o vacolo da clula
que contm os pigmentos que do cor s ptalas, se estes ficam mais concentrados do
que estavam anteriormente, ento vo tornar a cor das ptalas mais intensa do que
estava antes, o que aconteceu de facto, quando a clula adquire estas caractersticas
passa a chamar-se plasmolisada.
Ao ter substitudo o meio de montagem (soluo de NaCl a 15%) por gua destilada,

meio de montagem hipotnico em relao ao meio interno da clula, isto provocou a

passagem de gua pela membrana plasmtica, do meio de montagem (gua destilada)
para o meio intracelular (vacolo), diminuindo desta forma a concentrao dos
vacolos, ficando estes maiores, inchados, tendo alguns, acabado por rebentar devido
ao excesso de gua no seu interior. A membrana celular e o ncleo (apesar de ter sido
muito difcil observar o ncleo de cada clula, pois no foramutilizados quaisquer
corantes, que teriam a funo de tornar o ncleo da sua cor para que fosse fcil
identific-lo) de cada clula foram comprimidos contra a parede celular, devido ao
grande tamanho do vacolo, passando este a ocupar a grande maioria da rea que,
inicialmente, era ocupada pelo citoplasma. As clulas apresentam uma cor muito clara,
relativamente cor que apresentavam nas observaes microscpicas anteriores.
Concluso
Com esta actividade experimental foi possvel verificar o processo de osmose nas
clulas da epiderme de ptalas vermelhas de sardinheira, ou seja, consegui perceber o
efeito da gua na concentrao dos vacolos, o que determina depois a cor das ptalas,
se tm uma cor mais intensa e forte ou uma cor mais clara, dependendo se o movimento
de gua ocorre entre o meio intracelular e um meio hipertnico, relativamente ao meio
interno da clula, ou se ocorre entre um meio hipotnico, em relao ao meio
intracelular, e o meio interno da clula. Apercebi-me tambm de que a membrana
plasmtica tem a propriedade selectiva que lhe permite fazer uma seleco das
substncias que quer deixar entrar ou sair atravs dela mesma.
Verifiquei tambm que nas clulas vegetais, como o caso das clulas da epiderme das
ptalas vermelhas de sardinheira, no ocorre lise celular, ou seja, as clulas nunca
rebentam porque tm parede celular, que impede que o vacolo aumente o seu volume
continuamente sem parar at ao seu rebentamento.
Bibliografia
Matias, O.; Martins, P. (2009). Biologia 10. Porto: Areal Editores, S.A.