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GERMINACIN Y DESCRIPCIN MORFO-ANATMICA DE ESPECIES DEL

GNERO SOPHORA (S. TOROMIRO (PHIL.) SKOTTSB, S. CASSIOIDES
(PHIL.) SPARRE, S. MACROCARPA J.E.SM.)

GERMINATION AND MORPHO-ANATOMICAL DESCRIPTION OF SPECIES OF

THE GENUS SOPHORA (S. TOROMIRO (PHIL.) SKOTTSB, S. CASSIOIDES
(PHIL.) SPARRE, S. MACROCARPA J.E.SM.)

Palabras ndice
estratificacin.

adicionales:

endmico,

may,

pilo,

escarificacin,

RESUMEN
Sophora toromiro (Phil.) Skottsb corresponde a un arbusto endmico de Isla de
Pascua, extinto en su ambiente natural en la dcada de los sesenta; existe un
gran inters por reintroducir la especie a su lugar de origen. Sophora macrocarpa
J.E.Sm. y Sophora cassioides (Phil.) Sparre se distribuyen principalmente en la
zona central de Chile. Los objetivos de esta investigacin fueron determinar el
tratamiento ms efectivo para originar un mayor porcentaje de germinacin de
semillas del gnero Sophora, y describir morfo-anatmicamente el proceso de
germinacin de estas tres especies utilizando un microscopio electrnico de
barrido. Se realizaron cinco ensayos de germinacin: a) escarificacin con cido
sulfrico (98 %) a 20 y 10 oC, b) escarificacin mecnica realizando una
perforacin a la semilla a 20 y 10 oC, c) aplicacin de hormonas utilizando cido
giberlico (GA3) a 20 oC. Los resultados mostraron que no hubo diferencias
significativas en el porcentaje de germinacin entre los 30 y 60 minutos de
exposicin al cido para todas las especies a 20 oC y 10 oC. Con la perforacin se
alcanz un 98 % de germinacin en S. toromiro El mtodo ms efectivo para
incrementar el porcentaje de germinacin se obtiene con la escarificacin
mecnica y qumica. Las capas de la cubierta seminal varan solo en las
dimensiones de las clulas esclereidas y parnquima.

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SUMMARY
Sophora toromiro (Phil.) Skottsb is an endemic bush from Easter Island, extinct in
the decade of the sixties and there is great interest in reintroducing the species to
its place of origin. Sophora macrocarpa J.E.Sm. and Sophora cassioides (Phil.)
Sparre are mainly distributed in the central zone of Chile. The objectives of this
study were to determine the most effective treatment to get the highest percentage
of seed germination in the Sophora genus, and describe the morphology and
anatomy of the germination process of these three species using a scanning
electron microscope. Five germination tests were carried out: a) scarification with
(98 %) sulfuric acid at 20 oC and 10 oC, b) mechanical scarification by drilling the
seed at 20 oC and 10 oC, c) application of hormones by using gibberellic acid (GA3)
at 20 oC. The results showed no significant difference in germination percentage
between 30 and 60 minutes of acid exposure for all species at 20 oC and 10 oC.
With the drilling reached 98% germination in S. toromiro. The highest germination
percentages were obtained with mechanical and chemical scarification. The layers
of the seminal cover only vary in the dimensions of sclereids cells and
parenchyma.

INTRODUCCIN
Chile es un pas que presenta una gran diversidad de especies nativas y un alto
porcentaje de endemismo, esto forma parte de un patrimonio nico, que fortalece
nuestro entorno. Existen adems especies extintas en su lugar de origen y que
solo se encuentran en viveros y jardines botnicos, como es el caso de Sophora
toromiro (Phil) Skottsb (Gonzlez et al., 2008), arbusto nico endmico de Isla de
Pascua (Bordeu, 1992) que pertenece a las cinco especies de Sophora existentes
en nuestro pas junto con Sophora macrocarpa J.E.Sm., tambin endmica
(Rodrguez et al., 1995), Sophora cassioides (Phil.) Sparre, y dos especies
restantes endmicas del Archipilago de Juan Fernndez (Montenegro, 2002), S.
fernandeziana (Phil) Skottsb y S. masafuerana (Phil) Skottsb. Estas especies
pertenecen al orden Fabales, familia Papilionaceae (Riedemann y Aldunate, 2003).

3
Para el gnero Sophora hay descritas 45 especies (Pea y Cassels, 1996). El fruto
es una legumbre moniliforme (Rodrguez et al., 1983), llamado lomento, de
carcter

indehiscente

con

varias

semillas

separadas

por

tabiques

estrangulaciones (Donoso, 2006).

Sophora toromiro (Phil.) Skottsb., corresponde a un arbusto nativo de Isla de
Pascua extinto en su ambiente natural en la dcada de los sesenta, (Gonzlez et
al., 2008). En 1955-1956 el arquelogo Noruego Thor Heyerdahl colect las
ltimas semillas de esta especie (Mackinder y Staniforth, 1997), stas fueron
llevadas al jardn Botnico de Via del Mar, donde se han obtenido ejemplares de
esta especie que sobreviven repartidos en otros jardines botnicos y viveros
(Maunder et al., 2000). Los ejemplares que se han reintroducido en la Isla de
Pascua, se encuentran bajo la supervisin del Parque Nacional Rapa Nui en
estructuras ancestrales de cultivos o granjas tradicionales de la zona utilizando un
manejo convencional. Esta especie ha presentado una gran variabilidad gentica
en los ejemplares distribuidos en distintos viveros (Maunder et al., 2000), por lo
que es importante conocer las diferencias entre las especies del mismo gnero
existentes en Chile. Crece hasta 2 m de altura, sus flores son hermafroditas con
un cliz campanulado, corola de color amarillo, estambres libres, ovario
pubescente y estigma casi no caracterizado (Rodrguez et al., 1983). Sus hojas
son perennes, compuestas y foliolos ovalados de 7 a 21, de ramas cortas y
torcidas (Gonzlez et al., 2008). La sobreexplotacin ocurri por su valiosa
madera con un dimetro de 20 a 30 cm, que serva como material de edificacin
para los hogares, artesana e incluso se utilizaban para la construccin de canoas
(Mackinder y Staniforth, 1997).
Sophora cassioides (F. Phil) Sparre, cuyo nombre vulgar es pel, pilo, pilo-pilo
(Donoso, 2006), mayu-monte, se distribuye desde la Regin del Maule hasta la
Regin de Aysn del General Carlos Ibez del Campo (Riedemann y Aldunate,
2003), desarrollndose en semisombra y en suelos con alta humedad. Es un
arbusto perenne de hasta 10 m de altura y 25 cm de dimetro (Stark, 2009), su
floracin se inicia entre el cuarto y quinto ao, floreciendo desde agosto hasta
octubre. Sus hojas son siempreverdes imparipinadas compuestas por 10 a 12

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foliolos (Riedeman y Aldunate, 2004), stos son aovados de 7 a 10 mm de largo y
ms pequeos que Sophora macrocarpa (Rodrguez et al., 1995). Debido a que su
madera es dura y resistente a la putrefaccin, se usa principalmente en
carpintera, adems de utilizarse como ornamental debido a su floracin
(Hoffmann, 1982).
Sophora macrocarpa J.E.Sm., conocido vulgarmente como may o mayo
(Hoffmann, 1978) es un arbusto endmico que se desarrolla principalmente en la
zona centro de Chile, desde la Regin de Coquimbo hasta la Regin de la
Araucana (Gonzlez et al., 1991), en la zona cordillerana y costera, en suelos de
pH neutro o levemente cido con buen drenaje, ya sean hmedos o secos, donde
hay ms humedad crece a pleno sol, es tolerante a sequas y heladas (Riedeman
y Aldunate, 2004). Es un arbusto siempre verde, perenne que mide hasta 3 m de
altura (Stark, 2009), sus hojas son compuestas, ovales, coriceas e imparipinadas,
con 9 a 10 pares de foliolos ms uno terminal (Riedeman y Aldunate, 2004).
Florece desde el invierno hasta principios del verano, de aqu su valor ornamental
por su abundante floracin (Stark, 2009), adems desde el punto de vista
medicinal

presenta

flavonoides

con

caractersticas

anti-inflamatorias

espasmolticas (Ruiz et al., 1999).

Con respecto a los lomentos, existen diferencias entre las tres especies; S.
macrocarpa no presenta alas y sus semillas son de color marrn y tienen una
longitud mayor de 8 a 12 mm (Donoso, 2006), S. cassioides presenta alas
denticuladas con margen irregular (Rodrguez y Marticorena, 2001) y su semilla es
de 6 a 8 mm de longitud de color amarillento, S. toromiro presenta un fruto
pubescente, con semillas elptico - rectangulares de 4 a 5 mm de longitud
(Rodrguez et al., 1983), a diferencia de S. cassioides el fruto presenta alas con
margen liso. Las semillas de estas especies presentan una cubierta seminal y un
vulo maduro el cual contiene al embrin (Esau, 1982).
En las semillas de estos arbustos se encuentra una estructura llamada hilo,
esta hendidura tiene como funcin impedir la entrada de agua cuando existe alta
humedad relativa (Niembro, 1988), por lo que acta como una vlvula
higroscpica que se abre cuando la semilla se rodea de aire seco y se cierra

5
cuando el aire est hmedo (Esau, 1982).
Las semillas del gnero Sophora carecen de endospermo (Rossini et al.,
2006), su germinacin es hipogea donde los cotiledones permanecen enterrados,
solo la plmula emerge por sobre el suelo y el hipoctilo es prcticamente nulo
(Donoso, 2006).
La temperatura para las semillas en letargo es una condicin primordial, este
factor es decisivo en el proceso de germinacin debido a la capacidad de influir
sobre las enzimas que regulan la velocidad de las reacciones bioqumicas que
ocurren en la semilla tras su hidratacin (Prez y Martnez-Laborde, 1994). Al
respecto Sophora cassioides no se distribuye en altitudes cordilleras donde
existen condiciones de extremas temperaturas (Donoso, 2006) a diferencia de
Sophora macrocarpa la que tiene resistencia a bajas temperaturas (Rodrguez et
al., 1995), Sophora toromiro en cambio tolera altas temperaturas (Mackinder y
Staniforth, 1997).
El tiempo que transcurre entre la recoleccin de las semillas y su siembra es
fundamental, ya que a menor tiempo, mayor es el porcentaje de germinacin
(Norton et al., 2002).
Para estimular la germinacin las semillas son sometidas a diversos
tratamientos, como la escarificacin qumica que consiste en modificar la testa
(cubierta seminal) dura de la semilla, que es el mtodo ms utilizado (Rodrguez
et al., 1995), exponindola en cido sulfrico a una concentracin de acuerdo al
grosor de la testa para no daar el embrin. Otro tratamiento realizado es una
perforacin a la semilla y una posterior exposicin al agua, el cual es similar a un
corte, tal como lo describe Donoso, (2006). Tambin se utiliza la aplicacin de
hormonas como el cido giberlico (GA3) para estimular la maduracin del
embrin (Hartmann y Kester, 1987).
De acuerdo a estos antecedentes, los objetivos de esta investigacin fueron
determinar el tratamiento ms efectivo para originar un mayor porcentaje de
germinacin de semillas del gnero Sophora, y describir morfo-anatmicamente el
proceso de germinacin de estas especies.

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MATERIALES Y MTODOS
Para llevar a cabo el estudio se utilizaron los laboratorios de Ciencias Bsicas,
Laboratorio de Cultivos de la Facultad de Agronoma, Campus Chilln y
Laboratorio de microscopia electrnica de la Universidad de Concepcin, durante
el ao 2011-2012.
Los lomentos de Sophora macrocarpa se obtuvieron en Chilln, sector Los
Lleuques (36 51' 18" S, 71 38' 34" O), Provincia de uble, Regin del Bo-Bo.
Las lomentos de S. cassioides fueron recolectados en la Facultad de Agronoma
(36 49 39 S, 73 2 20 O), Campus Chilln y por ltimo los lomentos de S.
toromiro se obtuvieron de un vivero (Las Brujas) con ubicacin en Talagante (33
40 00 S, 70 56 00 O), Regin Metropolitana. Todos fueron recolectados en el
mes de octubre del ao 2011. A los lomentos recolectados se les extrajo las
semillas y stas fueron guardadas en bolsas de papel a temperatura ambiente
para su posterior utilizacin.
Previo al ensayo se determin, el peso de 1000 semillas.
Germinacin
Se utilizaron 1.560 semillas en total, 520 de cada especie, las que fueron
sometidas a 5 ensayos, para romper la dormancia. Las semillas fueron colocadas
en placas Petri previamente lavadas y esterilizadas en autoclave por 30 min a 121
o

C. Despus de realizados los tratamientos, las semillas fueron distribuidas en

cmara de germinacin y cmara de refrigeracin. Previo a esto, cada semilla fue

tratada con fungicida (Benlate 0.7 g + Captan 1.5 g en 1 litro de agua) para su
desinfeccin. A continuacin se describen los tratamientos (T) a los cuales fueron
sometidas las semillas para romper la dormancia:
Ensayo I. Para la escarificacin qumica con cido sulfrico comercial
concentrado al 98 %, se utilizaron 120 semillas de cada una de las especies, las
semillas se depositaron en un vaso precipitado por 0, 30 y 60 min de exposicin al
cido (Tabla 1). Transcurrido el tiempo, stas se lavaron con agua destilada
durante 15 minutos para eliminar residuos de cido. Despus del lavado fueron
puestas en la cmara de germinacin 20 C, en oscuridad por 30 das.

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Tabla 1. Escarificacin qumica con cido sulfrico (98 %) a 20 C en semillas del
gnero Sophora.
Especie

H2SO4 al 98%
(min)
S. toromiro

S. cassioides

S. macrocarpa

T1

T4

T7

30

T2

T5

T8

60

T3

T6

T9

Ensayo II. Se utilizaron 80 semillas de cada especie a las que se les realiz una
perforacin utilizando un punzn al lado contrario del hilo y dos ms, una en
sentido opuesto a la otra. Esta perforacin debe ser fina de no ms de 1 mm, de
tal manera de solo atravesar la cubierta seminal y no daar el embrin. Luego de
la perforacin, las semillas se dejaron en agua destilada por 24 horas, lo que
permite hidratar la semilla, finalmente se llevaron a la cmara de germinacin a 20
C en oscuridad por 30 das (Tabla 2).
Tabla 2. Escarificacin mecnica a 20 C en semillas del gnero Sophora.
Especie
Perforacin de semilla
S. toromiro

S. cassioides

S. macrocarpa

No (Testigo)

T1

T3

T5

Si

T2

T4

T6

Ensayo III. Se tomaron 120 semillas de cada especie, las que se expusieron por
24 horas en giberelina en concentraciones de 500 y 2.000 mg L-1 (Tabla 3), luego
se realiz un enjuague con agua destilada. Una vez aplicado el tratamiento se
llev a cmara de germinacin a 20 C en oscuridad por 30 das.

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Tabla 3. Aplicacin de giberelina (GA 3), a distintas concentraciones a 20 C en
semillas del gnero Sophora.
Especie

Giberelina
(mg L-1)

S. toromiro

S. cassioides

S. macrocarpa

T1

T4

T7

500

T2

T5

T8

2 2.000

T3

T6

T9

Ensayo IV. Para la escarificacin qumica se procedi de igual forma que el

ensayo 1 a 20 C con cido sulfrico comercial concentrado al 98 %. Se utilizaron
120 semillas de cada una de las especies, las semillas se sumergieron en un vaso
precipitado por 0, 30 y 60 min de exposicin al cido (Tabla 4). Una vez expuestas
al cido, stas se lavaron con agua destilada durante 15 minutos para eliminar
residuos de cido. Despus del lavado fueron puestas en la cmara de
refrigeracin a 10 C, en oscuridad por 60 das.
Tabla 4. Escarificacin qumica con cido sulfrico (98 %) a 10 C en semillas del
gnero Sophora.
Especie

H2SO4 al 98%
(min)

S. toromiro

S. cassioides

S. macrocarpa

T1

T4

T7

30

T2

T5

T8

60

T3

T6

T9

Ensayo V. Para este ensayo se procedi de igual manera que en el ensayo II, con
la diferencia que en lugar de la cmara a 20 C se utiliz una cmara de
refrigeracin a 10 C, en oscuridad por 60 das (Tabla 5).

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Tabla 5. Escarificacin mecnica a 10 C en semillas del gnero Sophora.
Especie
Perforacin de semilla
No (Testigo)
Si

S. toromiro

S. cassioides

S. macrocarpa

T1

T3

T5

T2

T4

T6

En los ensayos a 20 C se efectuaron registros de semillas germinadas cada 2

das y cada 4 das para los ensayos realizados a 10 C, los datos se registraron en
una tabla que contena el nmero de semillas germinadas por da

por

repeticin. Se consider como germinada la semilla cuando su radcula traspas la

testa. El porcentaje de semillas germinadas (PG) se calcul con la siguiente
frmula:
PG = (N de semillas germinadas) / (N de semillas sembradas) x 100
Descripcin morfolgica de semillas y cambios durante la germinacin
La descripcin morfoanatmica se realiz con fotografas obtenidas con el
microscopio electrnico de barrido en el Laboratorio de Microscopa Electrnica de
la Universidad de Concepcin. Las muestras previamente fijadas en formaldehido
(alcohol al 70%, acido actico, formalina), fueron llevadas a una serie de etanol en
concentraciones crecientes cada 10 min (30, 50, 70, 80, 90 y 100% de etanol)
hasta llegar a los 60 min, con el propsito de deshidratar la semilla para un
posterior secado punto crtico, finalmente se metalizaron con vapores oro dejando
un espesor de 450 angstrom (), para as obtener las fotografas a lo largo del
proceso de germinacin considerando el da 0 para una mejor evaluacin.
Para esta descripcin se consideraron las semillas de los tratamientos
realizados por 30 das a 20 C, donde se caracterizaron las estructuras
anatmicas observadas.
Diseo experimental y anlisis estadstico
Los ensayos se realizaron con un diseo completamente aleatorio con arreglo

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factorial de 2 x 3 para los tratamientos con escarificacin mecnica y de 3 x 3 para
los tratamientos con escarificacin qumica y aplicacin de giberelina, con 4
repeticiones y una unidad experimental de 10 semillas.
Para el anlisis estadstico se utiliz el programa INFOSTAT realizndose
anlisis de varianza (ANOVA) y Test de Tukey (Balzarini et al., 2008), para
determinar las diferencias entre tratamientos, con un nivel de significancia de 0,05
entre las medias. Los porcentajes de germinacin obtenidos para cada tratamiento
fueron transformados utilizando la siguiente expresin (% germinacin + 0,5) 1/2
(Little y Hills, 1976).
RESULTADOS Y DISCUSIN
Peso de 1000 semillas
Para S. toromiro el peso de 1.000 semillas fue 37,6 g, para S. cassioides fue de
68,8 g y para S. macrocarpa fue de 354,5 g, esto lleva a que en 1 kilogramo hay
aproximadamente 2.800 semillas de S. macrocarpa, 14.500 semillas de S.
cassioides y 26.500 semillas de S. toromiro.
Germinacin
Efecto de escarificacin qumica sobre la germinacin a 20 C
Al analizar los resultados se observ que no existen diferencias significativas entre
las especies para cada tratamiento en el porcentaje de germinacin (P>0,05). Sin
embargo existen diferencias significativas entre tratamientos, ya que el porcentaje
alcanzado por los tratamientos con escarificacin qumica a los 30 y 60 minutos de
exposicin al cido fue estadsticamente superior con respecto al testigo (P<0,05).
Entre los tratamientos con 30 y 60 minutos de exposicin al cido no hay
diferencia significativa segn el test de Tukey, que a su vez indica que no existe
interaccin entre ambos tratamientos (Tabla 6).
La incidencia del cido sulfrico como tratamiento pregerminativo, mostr
resultados favorables debido a que las semillas grandes de la mayora de las
especies de leguminosas responden al tratamiento simple con cido y que
adems al tratarse de semillas con cubierta seminal gruesa, el tiempo de remojo
en cido es ms largo (Hartmann y Kester, 1987). No obstante la mayora de estas

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especies poseen cubiertas que presentan una gran resistencia a la abrasin y son
impermeables al agua (Besnier, 1989), por ello al utilizar cido al 98 % alcanza
mayor grado de hidratacin y seguridad de germinacin.
Para todas las especies el mayor porcentaje de germinacin fue obtenido con
escarificacin por 60 minutos (Tabla 6), lo que coincide con lo descrito por
Rodrguez et al. (1995), quienes mencionan una capacidad germinativa de un 90
% utilizando escarificacin qumica. Esto tambin concuerda con lo observado por
Lhrs (1996) que entre los 25 y 125 minutos de exposicin con cido al 98 %
encontr que el porcentaje de germinacin de semillas de S. cassioides es entre
un 80 a 90 %, lo que no ocurri en lo realizado por Vergara (2005) para S.
macrocarpa, donde el porcentaje de germinacin a 20 C estuvo muy por debajo
del 90 %. Al exponer las semillas de S. toromiro en

cido con un 98 % de

concentracin por 60 min se logr un alto porcentaje de germinacin (80%),

resultados que son superiores a lo encontrado por Gonzlez et al. (2008) quienes
utilizaron una concentracin de cido al 90 % sumergiendo las semillas por 15, 30
y 45 min y que no alcanz ms que el 40 % de germinacin, por esto la
concentracin del cido es fundamental para estas especies ya que poseen una
testa gruesa.
Tabla 6. Porcentajes de germinacin de semillas del gnero Sophora con
escarificacin qumica. Ensayo 1.
Escarificacin H2SO4 al 98%
(min)

Especie
S. toromiro

S. cassioides

S. macrocarpa

5,0 b A

2,5 b.A

7,5 bA

30

47,5 a A

60,0 a.A

65,0 aA

60

80,0 a.A

92,5 a.A

82,5 aA

Tratamientos con letras maysculas distintas

en sentido horizontal
indican diferencias
significativas entre especies; tratamientos con letras minsculas distintas en sentido vertical
indican diferencias significativas entre mtodo de escarificacin segn Test de Tukey (P < 0,05).

Efecto de escarificacin mecnica sobre la germinacin a 20 C

Al igual que en la escarificacin qumica el anlisis de varianza (ANDEVA)

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determin que no existen diferencias significativas al comparar el porcentaje de
germinacin de las tres especies, tanto para el tratamiento testigo como para la
perforacin (P>0,05). Sin embargo existen diferencias significativas entre el testigo
y la perforacin para cada una de las especies (Tabla 7).
Con este mtodo de escarificacin mecnica se logr un alto porcentaje de
germinacin para las tres especies, especialmente en S. toromiro donde se logr
un porcentaje del 98 % de germinacin. Un rol fundamental fue la exposicin en
agua destilada por 24 horas posterior a la perforacin, la cual permiti que el
embrin se hidratara, esto coincide con lo descrito por Donoso (2006) en Sophora
cassioides quien obtuvo sobre un 90 % de germinacin realizando un corte fino a
la semilla de no ms de 1 mm por el lado contrario del hilo y exponindolas en
agua por 24 horas. Pulido y Tendero (2001) demostraron que al utilizar un corte se
llega incluso a un 100 % de germinacin en Sophora japonica y Robinia
pseudacacia, especies de la misma familia. Guerrero (2000) observ que
utilizando escarificacin mecnica como tratamiento pregerminativo en semillas de
Robinia pseudacacia, se obtena un mayor porcentaje de germinacin respecto a
la escarificacin qumica. La hidratacin es una condicin indispensable para
activar el metabolismo (Besnier, 1989), por lo que en este tratamiento el comienzo
de la hidratacin (imbibicin) se hizo mucho ms uniforme al realizar
perforaciones.
Tabla 7. Porcentajes de germinacin de semillas del gnero Sophora con
escarificacin mecnica. Ensayo 2.
Especie
Perforacin de semilla
S. toromiro
No (Testigo)
Si

S. cassioides

S. macrocarpa

bA

2,5 bA

7,5 bA

98

aA

90,0 aA

63,0 aA

Tratamientos con letras maysculas distintas

en sentido horizontal
indican diferencias
significativas entre especies; tratamientos con letras minsculas distintas en sentido vertical
indican diferencias significativas entre tratamientos segn Test de Tukey (P < 0,05).

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Efecto de la aplicacin de giberelina sobre la germinacin
Al analizar los resultados no existi diferencias significativas tanto para las
comparaciones entre especies como para los niveles de tratamientos (P>0,05).
(Tabla 8). Segn Hartmann y Kester (1987) debe ser mediante una exposicin por
12 horas en solucin de GA3 de 500 a 1.000 mg L -1 para semillas grandes, lo que
no coincide con esta investigacin para ninguna de las tres especies, donde los
porcentajes de germinacin fueron muy bajos y muy similares al testigo, aunque
se utiliz una exposicin de 24 horas y 2.000 mg L -1 como mxima concentracin
no fue suficiente para lograr una alta capacidad de germinacin. Esto se debera a
que el endospermo juega un rol fundamental al ser un tejido de reserva, el cual es
necesario para la degradacin y as liberar azcares y aminocidos importantes
para el desarrollo del embrin, es as como el endospermo es necesario para
transportar giberelinas endgenas presentes en el embrin (Azcn-Bieto y Taln,
2008), y que cuando son insuficientes se realizan las aplicaciones externas que a
su vez suplen los requerimientos de luz o fro que necesitan algunas semillas para
germinar, pero en este caso al no existir endospermo en las semillas no es posible
que las GA3 acten eficazmente.
Tabla 8. Porcentajes de germinacin de semillas del gnero Sophora con
aplicacin giberelina. Ensayo 3.
Giberelina
(mg L-1)

Especie
S. toromiro

S. cassioides

S. macrocarpa

aA

2,5 aA

7,5 aA

500

aA

aA

aA

2.000

aA

aA

aA

Tratamientos con letras maysculas distintas

en sentido horizontal
indican diferencias
significativas entre especies; tratamientos con letras minsculas distintas en sentido vertical
indican diferencias significativas entre concentracin de giberelinas segn Test de Tukey (P <
0,05).

Efecto de escarificacin qumica sobre la germinacin a 10 C

Mediante el anlisis de varianza se observ que existe diferencia significativa

14
entre las especies con 30 min en H2SO4 entre S. cassioides y S. macrocarpa con
respecto a S. toromiro (P < 0,05).En la escarificacin por 60 min existe diferencia
significativa entre S. toromiro y S. macrocarpa. Del mismo modo, hay diferencias
significativas entre el testigo y los tratamientos con cido sulfrico (P > 0,05)
(Tabla 9). El tratamiento pregerminativo de escarificacin qumica es necesario
para las especies con testa dura que presentan latencia fsica como es el caso de
las semillas estudiadas. El tipo de tratamiento y su duracin depende de la
latencia (Donoso, 2006), por lo que si se realiza una exposicin por mayor tiempo
asegura una buena germinacin.
Tabla 9. Porcentajes de germinacin de semillas del gnero Sophora con
escarificacin qumica. Ensayo 4.
H2SO4 al 98%
(min)

Especie
S. toromiro

S. cassioides
0

S. macrocarpa

bA

bA

bA

30

35

aA

80,0 aB

92,5 aB

60

68

aB

92,5 aAB

97,5 aA

Tratamientos con letras maysculas distintas

en sentido horizontal
indican diferencias
significativas entre especies; tratamientos con letras minsculas distintas en sentido vertical
indican diferencias significativas entre tratamientos segn Test de Tukey (P < 0,05).

Efecto de escarificacin mecnica sobre la germinacin a 10 C

Se observ diferencias significativas entre S. toromiro (87,5 %) y S. macrocarpa
(50 %) en el tratamiento con escarificacin mecnica (P < 0,05) (Tabla 10). La
temperatura no tuvo mayor incidencia en la capacidad de germinacin de las
especies, ya que los porcentajes se asemejan con los obtenidos a 20 C. Tambin
se observan diferencias significativas entre el testigo y los tratamientos con
escarificacin mecnica. Al igual que a 20 C la exposicin al agua destilada
posterior a la utilizacin de cido fue fundamental para la hidratacin de la semilla
y su germinacin. El porcentaje de germinacin al realizar una perforacin a la

15
semilla fue mayor con respecto a lo realizado por Vergara (2005), quien utilizando
lija obtuvo un porcentaje inferior (50 %).
Tabla 10. Porcentajes de germinacin en escarificacin mecnica con perforacin
para cada especie. Ensayo 5.
Especie
Perforacin de semilla
S. toromiro
No (Testigo)
Si

3,0 bA
87,5 aA

S. cassioides
0

b.A

72,5 aAB

S. macrocarpa
0 bA
50 aB

Tratamientos con letras maysculas distintas en sentido horizontal indican diferencias significativas
entre especies; tratamientos con letras minsculas distintas en sentido vertical indican diferencias
significativas entre tratamientos segn Test de Tukey (P < 0,05).

Germinacin acumulada
Mediante el registro realizado durante los 30 y 60 das se obtuvo la germinacin
acumulada para cada especie considerando los tratamientos testigos y
escarificacin qumica (cido sulfrico por 0,30 y 60 min de exposicin) y
mecnica (perforacin) a 20 C y 10 C. Cuando la temperatura a la que se
someten las semillas es baja se retrasa la germinacin (Besnier, 1989), por lo
tanto a 10 C fue ms lenta que a 20 C (Apndice 2), por ello tambin se dejaron
por 60 das a diferencia de los tratamientos a 20 C que solo fueron por 30 das
(Apndice 2). Sin embargo, los porcentajes de germinacin obtenidos a ambas
temperaturas son similares, lo que no concuerda con los resultados obtenidos por
Vergara (2005), donde a 20 C obtuvo un bajo porcentaje respecto a 12 C para S.
macrocarpa con 45 min de exposicin al cido.
La germinacin comenz a los 7 das para todas las especies sometidas a 20
C (Apndice 1) y a partir del da 28 para los tratamientos a 10 C (Apndice 2).
Para S. cassioides concuerda con lo descrito por Donoso (2006) donde las
semillas germinan a los 7 das en cmara germinadora. Tambin coincide para S.
toromiro donde Gonzlez et al. (2008) obtuvieron que las primeras semillas
germinaron a los siete das de iniciado el ensayo. Las semillas de S. macrocarpa

16
comenzaron su germinacin a los 7 das, lo que se contrapone con lo obtenido por
Vergara (2005), donde las semillas germinaron a partir del da 15 desde la
siembra.
Descripcin morfolgica y descripcin morfo - anatmica de los estados
fenolgicos durante la germinacin
S. toromiro presenta sus flores hermafroditas solitarias con una corola papilionada
de color amarillo, con un cliz campanulado, pentadentado (Figura 1 a). Su fruto
es un lomento indehiscente, con alas de margen liso, ste posee de 4 a 12 cm de
largo y 5 a 7 mm de ancho con 1 a 9 artejos (Figura 1 b), las semillas de forma
ovoidea globosa de color caf-amarillo (Mackinder y Staniforth, 1997) (Figura 1 c).
En la semilla el hilo se presenta como una hendidura en forma elptica
aparentando una cicatriz ubicada en la regin lateral de la semilla (Figura 1 d).
Figura 1. S. toromiro. a. Flor. b. Fruto Lomento. c. Semillas. d. Semilla, hilo.

S. cassioides al igual que S. toromiro exhibe sus flores de color amarillo formando
racimos colgantes con un cliz campanulado y corola papilionada (Riedeman y

17
Aldunate, 2003) (Figura 2 a). El lomento indehiscente madura a comienzos del
otoo tiene de 10 a 15 cm de largo y 6 a 8 mm de ancho, posee de 3 a 8 artejos
unidos o separados y presenta alas con margen irregular (Figura 2 b). La semilla
es ms bien de forma elptico aplanada, de color amarillo (Figura 2 c).
La regin hilar es elptica y ubicada lateralmente en la base de la semilla.
(Figura 2 d).
Figura 2. S. cassioides. a. Flor. b. Fruto Lomento. c. Semillas. d. Semilla, hilo.

S. macrocarpa tambin presenta las flores de color amarillo y de igual morfologa

que las especies descritas anteriormente, solo que dispuestas en racimos cortos
(Rodrguez et al., 1983) (Figura 3 a).
El lomento es indehiscente no alado a diferencia de S. toromiro y S.
cassioides, posee de 3 a 5 artejos separados por estrangulaciones (Figura 3 b).
Las semillas son de color caf, de forma ovoide (Figura 3 c).

18
El hilo es de forma elptica ubicado lateralmente en la base de la semilla.
(Figura 3 d).
Figura 3. S. macrocarpa. a. Flor. b. Fruto Lomento. c. Semillas. d. Semilla, hilo.

Da 0. Al realizar un corte longitudinal se observ que el dimetro de la semilla es

variable de acuerdo a la especie, S. toromiro es la que presenta menores
dimensiones (5,6 mm de longitud y 4,38 mm de dimetro aproximadamente)
(Figura 4 a), en cambio S. macrocarpa es la semilla que posee un mayor tamao
(entre 10,6 mm de longitud y 7,6 mm de dimetro) (Figura 4 c). S. cassioides
posee dimensiones que varan entre (6,2 mm de longitud y 4 mm de dimetro
aproximadamente) (Figura 5 e). La cubierta seminal de las especies de Sophora
poseen una primera capa de esclereidas columnares o macroesclereidas de forma
muy alargada (Dimitri y Orfila, 1985), esta primera capa proviene del tegumento
externo y est asociada tambin a un mayor grado de dureza e impermeabilidad.
Una segunda y tercera capa provienen tambin del tegumento externo, donde se

19
encuentran clulas pilares (22,2 m) y el parnquima formado por clulas grandes.
Por otro lado, el tegumento interno desaparece durante el desarrollo de la semilla
(Esau, 1982). La longitud de estas estructuras vara segn la especie, la capa de
empalizada mide hasta 0,2 mm y el parnquima hasta 0,25 mm aproximadamente
(Figura 4 b, d y 5 f).
Figura 4. Corte longitudinal de semillas de S. toromiro (a y b) y S. macrocarpa (c y
d). a. Semilla. b. Cubierta seminal. c. Semilla. d. Cubierta seminal.

c: cutcula, d: dimetro, l: longitud. esc: esclereidas columnares, cp: clulas parenquimticas, em:
embrin, cep: clulas pilares.

Figura 5. Corte longitudinal de semilla de S. cassioides. e. Semilla. f. Cubierta

seminal.

c: cutcula, d: dimetro, l: longitud, esc: esclereidas columnares, cp: clulas parenquimticas, em:
embrin.

20
Considerando que las semillas de las especies varan solo en las dimensiones y
espesor de los tejidos, se utiliz solo una de las especies en cuestin (S.
toromiro), a contar del da 11 para la descripcin de los estados fenolgicos
siguientes.
El dimetro de la semilla de un corte transversal es de 8,1 mm
aproximadamente (Figura 6 a). Estas semillas tiene la caracterstica de mantener
una baja proporcin de humedad, esta condicin est ligada a la estructura
llamada hilo que presenta un dimetro de 2,3 mm aproximadamente (Figura 6 b).
La regin hilar consta de un tejido funicular y dos capas de empalizada, donde la
ms externa deriva de dicho funculo, tambin existe un grupo de traqueidas, que
tiene como funcin la conduccin de agua y sales diluidas (Dimitri y Orfila, 1985)
(Figura 6 c). El embrin de la semilla es de forma folial inverso (Niembro, 1989),
donde la radcula no sobresale de los cotiledones y tiene una funcin fundamental
para la semilla, emerge primero y es la encargada de generar las races posee un
dimetro aproximado de 1,62 mm. (Figura 6 d).
Figura 6. Corte transversal de semilla de S. macrocarpa. a. Semilla. b. Hilo. c.
Regin hilar. d. Radcula.

21

d: dimetro, hi: hilo, ah: arilo hilar, hh: hendidura hilar, tf: tejido funicular, ce: capas en empalizada,
t: traqueidas, em: embrin, r: radcula.

Da 1 10. Al sptimo da comenz la germinacin, cuando la radcula atraves la

cubierta seminal (Figura 7 a, b y c), la longitud de la radcula vari entre 1,7 y 2,6
mm aproximadamente, los cotiledones se separaron (Figura 7 d) y la cofia alcanz
una longitud de 0,6 mm (Figura 7 a).
La cofia presenta clulas que tienen como funcin la proteccin del meristemo
apical. Las clulas que se encuentran posterior a la cofia son las encargadas del
crecimiento en longitud de la radcula (Jensen, 1988).
Figura 7. Estado fenolgico de semillas de S. toromiro (a), S. cassioides (b) y S.
macrocarpa (c y d). a. Radcula emergiendo de la semilla. S. cassioides. b.
Radcula emergiendo de la semilla. S. macrocarpa. c. Radcula emergiendo de la
semilla. d. Cotiledones.

22

co: cotiledones, r: radcula.

Da 11 20. El hipoctilo creci muy poco, adems existe poca diferencia entre la
raz primaria y el hipoctilo, que midieron 9,3 mm y 1,3 mm de longitud,
respectivamente (Figura 8 a). Los cotiledones se encuentran ya bien separados
uno de otro (Figura 8 a y b). La germinacin de estas especies es hipogea, por lo
que solamente la plmula atraviesa el suelo, para dar origen a los primeros
rganos fotosintetizadores de la planta (Besnier, 1989). La plmula con sus hojas
embrionarias aparece con sus hojas inversas (Besnier, 1989) (Figura 8 c y d).
Figura 8. Estado fenolgico de semilla de S. toromiro. a. Raz primaria. b.
Cotiledones. c. Cotiledn. d. Plmula.

23

c: cutcula, co: cotiledones, pl: plmula, rp: raz primaria, hp: hipoctilo.

Da 21 30. A partir del da 25 ya se encuentran formadas la raz principal y las

secundarias, adems de la extensin de la plmula. An el hipoctilo y epictilo se
mantienen con menor longitud. (Figura 9 a, b y c).
El embrin se desprendi

de

la cubierta

seminal

a los 21 das

aproximadamente (Figura 5 b), permitiendo diferenciar claramente los cotiledones

(Figura 9 b y c). La ruptura ocurre en el sector basal de la semilla, permitiendo la
salida de los cotiledones y el resto de la cubierta seminal queda intacto (Figura 9
a).
En la cubierta seminal las clulas parenquimticas se extienden debido a la
imbibicin de agua al pasar lo das llegando a una longitud de 0,4 mm (Figura 9 d).
Los cotiledones cuando ya han crecido son ms gruesos y carnosos,
caractersticas de las semillas que no poseen endosperma (Niembro, 1988).Estos
cotiledones funcionan solo como rganos de reservas y material nutricio en la
germinacin.

24

Figura 9. Estado fenolgico de semilla de S. toromiro. a. Semilla germinada. b.

Cotiledones. c. Cotiledones. d. Cubierta seminal.

co: cotiledones, rp: raz primaria, rs: raz secundaria, hp: hipoctilo, ep: epicotilo, esc: esclereidas
columnares, cp: clulas parenquimticas, em: embrin.

Da 31 40. Se pueden distinguir los primordios foliares los que darn origen a la
actividad fotosinttica, con ello tambin se pueden distinguir pelos epidrmicos
que tienen como funcin la proteccin (Figura 10 a y b) y tienen una longitud de
0,5 milmetros aproximadamente.
En la Figura 10 c se puede observar la superficie del primordio foliar, la cual
presenta estomas a nivel de la epidermis. La longitud promedio que presentan los
estomas es de 25 m y un dimetro de 16,7 m aproximadamente con clulas
oclusivas muy evidentes (Figura 10 d).
Figura 10. Estado fenolgico de semilla de S. toromiro. a. Primordios foliares. b.
Pelos epidrmicos. c. Clulas superficiales. d. Detalle de estomas.

25

pf: primordios foliares, pe: pelos epidrmicos, ces: clulas en superficie de primordio foliar, es:
estoma, os: ostiolo, ceo: clulas oclusivas.

CONCLUSIONES
Las conclusiones obtenidas de los resultados de esta investigacin son las
siguientes:
1. El mtodo ms efectivo para incrementar el porcentaje de germinacin se
obtiene con la escarificacin mecnica y la escarificacin qumica con cido
sulfrico, para las tres especies de Sophora en estudio.
2. Para las tres especies la temperatura tanto 10 C como 20 C no incide
mayormente en el porcentaje de germinacin, pero si en el tiempo requerido
para el proceso.
3. Las tres especies no respondieron al tratamiento con cido giberlico para
estimular la germinacin.
4. Las capas de la cubierta seminal varan solo en las dimensiones de las clulas
esclereidas, clulas pilares y parnquima.
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26
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APNDICES
Apndice 1. Germinacin acumulada a 20 C para los tratamientos de
escarificacin por especie.

29

Germinacin (%)

Sophora toromiro
100
83
67
50
33
17
0
0

13

17

21

26

30

21

26

30

Das

Germinacin (%)

Sophora cassioides
100
83
67
50
33
17
0
0

13

17
Das

Germinacin (%)

Sophora macrocarpa
100
83
67
50
33
17
0
0

13

17

21

26

30

Das
Ac.sulfrico 30'
Perforacin

Ac.sulfrico 60'
Testigo

Apndice 2. Germinacin acumulada a 10 C para los tratamientos de

escarificacin por especie.

30

Germinacin (%)

Sophora toromiro
100
83
67
50
33
17
0
0

17

26

34

43

51

60

43

51

60

51

60

Das

Germinacin (%)

Sophora cassioides
100
83
67
50
33
17
0
0

17

26

34
Das

Sophora macrocarpa

Germinacin (%)

100
83
67
50
33
17
0
0

17

26

34

43

Das
Ac.sulfrico 30'
Perforacin

Ac.sulfrico 60'
Testigo