Instituto Tecnolgico de Celaya

Ing. Bioqumica

Proyecto final: Obtencin de Tiofeno por cultivo

de clulas vegetales

Ingeniera de Proyectos
M.C. Simen Bautista Prez

Presenta:
Gonzlez Reyna Ftima

Celaya, Gto., a 09 de diciembre de 2014

INTRODUCCION
Si el siglo XX fue el de la biotecnologa microbiana, el siglo XXI es ya el de la
biotecnologa vegetal y animal que, en el caso de la agricultura, reemplazar
los logros (y corregir los errores) de la Revolucin Verde.
El potencial que ofrecen las plantas como fuente de compuestos de inters
comercial es enorme ya que ellas sintetizan una gran variedad de compuestos
qumicos (4 veces ms que la que producen los microorganismos). Sin
embargos, solamente se ha analizado la actividad biolgica de un reducido
porcentaje (5 al 10%) de todas las especies existentes en la planta.
Por estas causas se incrementaron, en los ltimos aos, las investigaciones
para la bsqueda de compuestos de inters comercial a partir de los vegetales.
La mejora biotecnolgica mediante ingeniera gentica tiene cuatro objetivos
prioritarios diferentes:
Modificar la expresin de genes naturalmente presentes en el
organismo;
Actuar como herramienta auxiliar de las tcnicas de hibridacin
convencionales, introduciendo genes de inters en genotipos mejorados
evitando los problemas del retrocruzamiento;
Introducir genes nuevos a partir de especies vegetales con las que no es
posible obtener hbridos; y
Conseguir la produccin de compuestos de inters independientemente
de cul sea su origen.

ANTECEDENTES
Entre los logros ms importantes de las primeras generaciones de cultivos
transgnicos se encuentra la obtencin de variedades tolerantes a herbicidas,
la generacin de plantas resistentes a diversos virus e insectos, la utilizacin
de los cultivos como birreactores para la obtencin de productos farmacuticos
y aditivos alimentarios, la modificacin de las propiedades nutricionales de
diferentes productos vegetales y la produccin industrial de materiales de
inters, como aceites o plsticos.
Para conseguir una transformacin eficiente de un tejido vegetal es preciso
satisfacer, en principio, los siguientes requisitos:
Debe ser tcnicamente posible la propagacin y la regulacin del tejido
diana;
Debe existir un mtodo eficiente de introduccin de ADN en el tejido
vegetal;
Debe existir un marcador que permita seleccionar eficientemente los
tejidos transformados;

 Debe ser posible regenerar plantas frtiles a partir del tejido transgnico
con una frecuencia de xito suficientemente elevada para ser
econmicamente viable;
El proceso de transferencia debe ser simple, eficaz, reproducible,
econmico e independiente del genotipo del organismo utilizado; y
El proceso de regeneracin no debe ser muy dilatado en el tiempo, para
prevenir la variacin somaclonal de los tejidos transformados y la
esterilidad.
METABOLITOS SECUNDARIOS
Se definen como metabolitos o productos secundarios aquellos compuestos
que no tienen una funcin reconocida en el mantenimiento de los procesos
fisiolgicos fundamentales de los organismos que los sintetizas.
Las plantas superiores son una importante fuente de metabolitos secundarios
los cuales han despertado mayor inters por su funcin biolgica y aplicacin,
utilizados por el hombre en diversas
industrias, tales como la farmacutica,
alimentaria, agroqumica y cosmtica,
entre otras.
Los
metabolitos
secundarios
desempean funciones importantes en
la planta como protegerlas contra los
depredadores,
permitirles
competir
ventajosamente por el hbitat con
otras plantas, atraer polinizadores y
simbiontes y, tal vez, brindarles
proteccin
contra
diferentes
condiciones de estrs. (Loyola-Vargas,
1985)
Existe evidencia de que los metabolitos
secundarios se encuentran bajo una
estricta regulacin metabolica (Reyes
et al., 1985; Loyola-Vargas et al., 1984)
y que su sntesis est regulada tambin
por factores como la luz (Endress et al.,
1984; Hagimori et al., 1982), los
reguladores del crecimiento (Hagimori
et al., 1982; Elliot, 1983) y la
temperatura (Lipskii et al., 1982).
En la actualidad se dispone de un
esquema general sobre la biosntesis
de los metabolitos secundarios (Figura 1), pero se desconocen en gran medida
los pasos intermedios y las estrategias que siguen las clulas para regularla.
Fig. 1 Principales vas del metabolismo secundario en las clulas vegetales.

CULTIVO DE CELULAS VEGETALES

La gran complejidad de los metabolitos vegetales (muchas veces con presencia
de varios carbonos quirales) hace que su sntesis qumica sea poco eficiente y
costosa.
Durante los ltimos 30 aos se ha buscado como estrategia alternativa el
cultivo in vitro de tejidos vegetales para la produccin de metabolitos
secundarios en lugar de utilizar los sistemas tradicionales de cultivos a campo.
El cultivo in vitro ofrece algunas ventajas potenciales:
Suministro planificado de acuerdo con la demanda, independencia del
clima, suelo, enfermedades y problemas sociopolticos.
Cultivo bajo condiciones controladas y optimizadas, lo que posibilita una
calidad estable.
Cortos periodos de tiempo.
Uso de las mismas instalaciones para distintos metabolitos.
Mejores condiciones para la extraccin y purificacin.
La causa por la cual pocos procesos se han llevado a escala industrial es su
baja productividad, en parte debido a que se ha trabajado con clulas con
clulas indiferenciadas (callos y cultivos es en suspensin). El proceso de
desdiferenciacin generalmente lleva a una prdida de la capacidad de
producir metabolitos secundarios, lo que puede deberse a prdida de la
expresin de los genes responsables de las rutas metablicas en clulas no
especializadas, prdida de sitios de almacenamiento que slo estarn
presentes en cultivos diferenciados, o a desregulacin del catabolismo del
compuesto sintetizado. Ante estas dificultades el cultivo in vitro de tejidos
diferenciados (tallos y races) se presenta como una estrategia muy atractiva.
Los cultivos in vitro de races aplicados al estudio y produccin de metabolitos
secundarios se comenzaron a utilizar hace 40 aos; estos sistemas
generalmente obtenidos a travs de un balance hormonal en el medio de
cultivo, son difciles de establecer, y adems las races presentan un
crecimiento lento. Este inconveniente pudo ser solucionado por medio del
cultivo de races transformadas, obtenidas a travs de la infeccin con cepas
patognicas de Agrobacterium rhizogenes (races en cabelleras o hairy
roots).
El sistema de races transformadas es excelente para el estudio de rutas
metablicas, interaccin de plantas con microorganismos, estudios de
produccin, entre otros.
Tagetes laxa Cabrera es una especie productora de tiofenos (compuestos
heterocclicos azufrados derivados de los poliacetilenos que poseen una gran
actividad biocida especialmente contra nematelmintos e insectos). Por ser
estas ltimas molculas fcilmente degradables son una alternativa eficaz para
reemplazar a los insecticidas usados en la actualidad.