DATOS REALIZADOS:

ANALISIS MICROBIOLOGICO Y FISICOQUIMICO DEL AGUA DE PISCINAS

DE SANTA CRUZ -PERU
Las piscinas constituyen uno de los establecimientos pblicos en los que ms
atencin deben poner los servicios de Salud Pblica, ya que los elementos que
se conjunta un riesgo potencial para la salud de la comunidad, riesgo cada da
ms acentuado por el uso multitudinario que se hace de este tipo de
instalaciones . Indudablemente el aspecto ms importante a controlar dentro
de la vigilancia epidemiolgica de estas zonas recreativas, es la calidad
fisicoqumica y microbiolgica de sus aguas, ya que la primera condicion que
debe cumplir un agua de piscina es la de su pureza bacteriologica, esto es,
estar exenta de microorganismos patgenos capaces de alterar la salud de los
baistas. Asimismo, han de controlarse aquellos parmetros fisicoqumicos que
puedan dar lugar a cualquier tipo de trastorno o molestia. Si tenemos en cuenta
que su uso est sometido a una demanda incesante y creciente por parte de la
poblacin, no slo como lugares de esparcimiento, sino tambin para la
prctica del deporte e incluso para la recuperacin de ciertas patologas, est
suficientemente justificada la necesidad de llevar un control riguroso de la
calidad de sus aguas. Ademas dicho control debe ser el adecuado para realizar
una evaluacin correcta del estado del agua y de los mtodos de tratamiento a
los que es sometida *. Debido al clima templado que caracteriza a las islas
Canarias, el uso que de las piscinas hacen, tanto nuestra poblacin como la
visitante, es constante durante todo el ao, tanto con fines recreativos como de
prctica del deporte. De ah que merezcan una atencin especial por parte de
los profesionales de la salud. El presente trabajo surgi de la necesidad, por un
lado, de conocer el estado higinico de las aguas de las piscinas de mayor
afluencia de Santa Cruz de Tenerife y, por otro, de establecer que indicadores
microbiolgicos 3 seran los adecuados para realizar un control de la calidad
microbiolgica de dichas aguas, pudiendo derivarse modificaciones en las
normativas ante la inclusin de nuevos microorganismos indicadores que
repercutan en la salud de los usuarios. Asimismo se pretende estudiar las
relaciones existentes entre los parmetros microbiolgicos y fisicoqumicos
estudiados.

2. MATERIAL Y METODOS
2.1. Seleccin de las piscinas De entre las piscinas existentes en Santa
Cruz de PERU, hemos escogido las que registran mayor afluencia de baistas
durante todo el ao. En la tabla 1 se resumen las caractersticas ms
importantes de cada uno de los vasos, del agua de llenado, tratamiento de la
misma y uso al que se destinan. El agua de llenado de la piscina A, procedente
de la red de abastecimiento pblico, es sometida a una desinfeccin por
cloracin y filtracin por arena con una duracin por ciclo de 9 horas; sin
embargo, en la piscina B el agua, captada del mar, no se somete a tratamiento
alguno, simplemente se realiza el vaciado y llenado cada 3 das,
respectivamente.
TABLA1
Caractersticas del vaso, agua de llenado, tratamiento y uso de las piscinas
estudiadas
Piscina
A
B

Forma
del Vas0
Olmpic
o
Irregular

s* (mZ)
600
3
.
10^4

Fuente
de agua
Pblica
Mar

Tratamient
o del agua
Cloracin
Filtracion
--------------

C**

uso

900

P***
(m)
2,60

1. 10^3

1,70

Recreativ
o

Deportivo

2.2 MUESTREO
Se procesaron un total de 60 muestras, recogidas en botes estriles de boca ancha de
1000 ml de capacidad. Previamente a la esterilizacin y a aquellos destinados a la
toma de muestras de agua clorada, se les aadi una cantidad de tiosulfato sdico
(Na,S,OJ de tal manera que la concentracin final fuera de 100 mg/l 4
Para la determinacin de aerobios totales se emple el recuento en placa, utilizando
dos medios de cultivo (tabla 2): PCA (Oxoid CM 463) y el R2A4, Al medio utilizado
para el estudio de los coliformes totales y fecales, Tergitol-7 agar (Scott 4900-4510), se
le aadi 1 ml de cloruro 2,3,5-trifeniltetrazlico al 1% (Difco 3112-67-9) por litro.
El aislamiento y recuento de estreptococos fecales se realiz sobre KF-Streptococtus
agar (Oxoid CM 701).
o

Para el gnero Staphylococcus plearon dos tcnicas analiticas: se

emplearon dos tcnicas analiticas:

a) Tubos mltiples (tabla del N&JP 3-3- 3), usando como medio presuntivo el
mStaphylococcus broth (Difco 0649-01-6) adicionado de 0,049 mg de azida sodica y,
como medio de confirmacin, el Lipovitellin Salt Mannitol agar 4.
b) Filtracin por membrana, con incubacin sobre Baird-Parker medium (Oxoid CM
275) para el recuento de Staphylococtus spp.

Para el aislamiento de P. aeruginosa se emplearon tambin dos tcnicas

analticas:

a) Filtracin por membrana con incubacin sobre Pseudomonas Isolation agar (Difco
0927-01-9) y Cetrimide Agar Base (Difco 0854-02-5).
b) Tubos mltiples (Tabla del NMP 5- 5-5) con caldo de asparragina como medio
presuntivo y medio de acetamida inclinado como confirmativo 4.
o

En el caso del gnero Mycobacterium,

La membrana filtrante se lav con lo-15 ml de agua destilada estril. El agua de lavado
se someti a descontaminacin, segn la tcnica de Tacquet-Tison 6. El sedimento
resultante se transfiri, mediante pipeta Pasteur estril, al medio de cultivo Lowenstein
Jensen (Difco 0444-01-3). Las colonias desarrolladas en este medio que manifestaron
cido alcohol resistencia (Tincin de ZielhNielsen) 7, se incubaron durante 7 das en el
medio Dubos Broth Base (Difco 0385-17-6) y durante el tiempo necesario para
crecimiento positivo en Dubos Oleic Agar Base (Difco 0373-17). Este ltimo medio nos
permite visualizar la morfologa y pigmentacin de las colonias.
A continuacin al crecimiento en Lowenstein Jensen y en Dubos Broth Base, se le
realizaron las pruebas bioqumicas especficas para la determinacin de la especie
micobacteriana 8.
Para el anlisis estadstico de los resultados se utiliz un programa estadstico que
permitiera el clculo de los coeficientes de correlacin, el valor de la t-student y la
significacin.

3. RESULTADOS
3.1. Determinaciones fisicoquimicas
En la Tabla 3 se representan las medias aritmticas y el rango de los parametros
fisicoqumicos determinados para las dos piscinas estudiadas.
3.2. Determinaciones microbiolgicas
Se han encontrado diferencias significativas entre los recuentos de Aerobios mesfilos
totales realizados sobre P.C.A. y R2A en ambas piscinas (Tabla 4). Basndonos en
estos resultados los recuentos de Aerobios mesofilos totales estarn referidos a los
realizados sobre el medio R2A.

TABLA3
Media e intervalo de variacin de los parmetros fisicoqumicos determinados

TABLA4
Comparacin de los resultados obtenidos para recuento de Aerobios mesfilos
totales sobre P.C.A. y R2A

INTERPRETACION DE RESULTADOS
FIGURA 1
Distribucin de los recuentos de Aerobios mesfilos totales en tas 60 muestras
de agua procedentes de las dos piscinas A Y B

En la figura 1 se representa
el nmero de muestras que
se
encuentran
en
los
distintos intervalos indicados
para ambas piscinas. Como
puede observarse la mayor
parte de las muestras se
encuentran por encima de las
200 UFC/ml para las dos
piscinas,
destacando
la
piscina B por un mayor
nmero de muestras, con
recuentos superiores a las
300 UFC/ml.

FIGURA 2
Distribucin de los recuentos de Coliiormes totales y fecales en Ias 30 muestras
de agua procedentes de ia piscina B
Ninguna de las muestras
procedentes de la piscina A
ofreci recuentos positivos
de Coliformes totales o
fecales. La distribucin de los
recuentos encontrados en las
muestras correspondientes a
la piscina B se presenta en la
figura 2.

FIGURA 3
Distribucin de los recuentos de Estreptococos fecacales en las 30 muestras de
agua procedentes de la piscinas B.

En la figura 3 se puede
observar
el
nmero
de
muestras que presentaron
contaminacin
por
Estreptococos fecales para la
piscina B. En el caso de la
piscina Ano se encontr
presencia de Estreptococos
fecales en ninguna muestra de
las analizadas

FIGURA 4
Distribucin de los recuentos de Staphylococcus ssp p. en Ias 30 muestras de
agua procedentes de la piscina A.

La distribucin de los recuentos de

Staphylococcus spp. en la piscina A se
presenta en la figura 4. En ningn
caso se demostr la presencia de St.
aureus

FIGURA 5
Distribucin de los recuentos de
Sthaphylococcus spp. y St. uureus
en las 30 muestras de agua
procedentes de la piscina B.

Los
recuentos
de
Staphylococcus spp. fueron
mayores de 1 UFC/lOO ml
para 26 de las 30 muestras
tomadas de la piscina B. De
estas en un 88,5 % se aisl
la especie St. aureus.
La distribucin de los
recuentos
para
ambas
determinaciones
se
representa en la figura 5.

INTERPRETACION GENERAL:
No se aisl la especie Pseudomonas aeruginosa en ninguna de las muestras
analizadas y por ninguno de los mtodos analticos empleados. En 4 de las muestras
procedentes de la piscina Ase aisl el gnero Mycobacterium, identificndose la
especie M. chelonae subsp chelonae en dos de las muestras. Las otras dos especies
identificadas fueron M. vaccae y M. aurum. No se demostr la presencia de este gnero en las muestras provenientes de la piscina B.

TABLAS Coeficiente de correlacin de Pearson entre los distintos parmetros

estudiados para ambas piscinas

Caracterizacin de calidad de agua en el ciclo de

consumo del municipio de Guaimaca,

MATERIALES Y MTODOS
El estudio se realiz en el municipio de Guaimaca en el departamento de Francisco
Morazn. Guaimaca colinda al norte con los municipios de Orica, San Ignacio y
Guayape, al Sur con los municipios de Teupasenti y San Juan de Flores, al este con
los municipios de campamento y concordia y al Oeste con los municipios de Talanga y
Cedros. Tiene una extensin territorial de 7,461 Km2 y una poblacin de 29,004
habitantes segn el Sistema Nacional de Informacin Municipal (SINIMUN).

CARACTERIZACIN FISICOQUMICA Y BACTERIOLGICA

o Anlisis bacteriolgico de agua potable

Se utiliz el mtodo de membrana filtrante, para lo que se utilizaron membranas
de filtracin estriles (47 mm de dimetro, 0.45 m tamao de poro), platos petri
(60 mm de dimetro), m-Coli Blue 24, mecheros, pinzas pequeas y grandes,
beaker, sistema de filtracin e incubadora.
Previo a la realizacin de los anlisis se desinfect el laboratorio, para asegurar un
rea de trabajo limpia y en orden, luego se esterilizaron todos los instrumentos a
utilizar, flamendolos o colocndolos en el horno. Se rotularon los platos petri (al
reverso) con el nombre del sitio, la fecha y hora de incubacin, se les coloco la
ampolla de solucin mColiBlue24 como medio de cultivo para la formacin de las
colonias de bacterias.
Se hizo pasar el agua en el sistema de filtracin utilizando una membrana estril
en un plato petri la membrana se coloc sobre el medio de cultivo y luego en la
incubadora a 350.5 C por 24 horas. Despus de 24 horas se procedi al conteo
de colonias de bacterias, diferenciando entre bacterias coliformes fecales y no
fecales. Se reportaron los resultados como UFC en 100 ml

o Anlisis bacteriolgico de aguas residuales

Para el anlisis bacteriolgico de aguas residuales se utilizaron Placas Petrifilm
para Recuento de coliformes E. coli. Se diluy 1ml de muestra en 20-30 ml de
agua libre de bacterias para que favorecer el conteo de las colonias de bacterias.
Luego se inocul con 1ml de la dilucin la placa Petrifilm utilizando un pipeta de
1ml y despus se incub la muestra en la incubadora a 350.5 C por 24 horas. 24
horas despus de la inoculacin se procedi a contar las colonias de bacterias.
Los resultados del conteo de bacterias de los anlisis bacteriolgicos se reportan
como cantidad de UFC (Unidad Formadora de Colonia) sobre el volumen filtrado.

RESULTADOS
PARAMETROS BACTERIOLOGICOS

Coliformes fecales y totales

En los resultados obtenidos se observa que todos los valores estn por encima del
valor mximo permisible de 3 UFC/100 ml de agua que ser sometida a procesos de
tratamiento. El valor ms alto encontrado fue en la fuente de agua de la microcuenca
la Marmajosa 380 UFC Totales y 360 UFC fecales.

Figura 6. Resultados de coliformes totales y coliformes fecales en los sitios de

captacin de agua potable.

Temperatura

En los resultados de las mediciones de temperatura se observaron temperaturas entre

20 y 22 C. Se observan valores normales para las condiciones de temperatura
ambiental de la zona y todos ellos dentro del rango permisible por la Secretara de
Salud de Honduras.
Temperatura en C obtenida en los anlisis realizados en el perodo de muestreo

RESULTADOS
PARMETROS FISICOQUMICOS

o Turbidez
Los resultados de los anlisis mostraron que 4 de las muestras analizadas estaban
fuera de norma, el valor ms alto encontrado fue de 250 UNT en la quebrada la
Marmajosa debido al arrastre de sedimentos de las laderas ya que por los niveles altos
de precipitacin hay prdida de suelos por escorrenta. El ms bajo de 0.58 UNT en la
quebrada el Destino. Se observa, como es de esperarse, valores de turbiedad
relacionados con las condiciones hidroclimticas durante el periodo de estudio y las
condiciones de manejo de las microcuencas.
Turbidez en UNT obtenida en los anlisis realizados en el perodo de muestreo

Conductividad Elctrica

Los resultados obtenidos estaban por debajo del mximo permisible siendo el valor
ms alto de 198.4 S/cm en la quebrada el Destino debido a las actividades agrcolas
de la zona que demanda el uso de sales minerales en los fertilizantes sintticos y al
arrastre de sedimentos y otros materiales en suspensin. El nivel ms bajo encontrado
fue de 59.2 S/cm. Cuadro 4.
Datos de conductividad elctrica en S/cm obtenidos en anlisis realizado en el
perodo de muestreo

1. PROCEDIMIENTO
FSICOQUMICO.

DE

TOMA

DE

MUESTRA

PARA

ANLISIS

1.1 MUESTRAS SIMPLES

1.1.1
1.1.2
1.1.3
1.1.4
1.1.5

1.1.6

Utilizar frascos de vidrio plstico con tapa, limpios y de preferencia

proporcionados por el laboratorio.
Enjuagar el frasco por lo menos tres veces con la muestra.
Tomar porciones individuales del cuerpo de agua en estudio en frascos de
boca ancha, y tapar inmediatamente.
Colocar la muestra en contenedores (hieleras) a menos de 10C, no
requiere de preservantes.
El tiempo de recoleccin de la muestra hasta el inicio del anlisis no debe
exceder de 48 horas (leer las recomendaciones para cada anlisis), por lo
que se recomienda enviar las muestras de inmediato al laboratorio.
Identificar el lugar, fecha y hora de muestreo, tipo de muestra, persona
encargada de tomar la muestra y otras observaciones adicionales en el
formato de cadena de custodia.

1.2 MUESTRAS COMPUESTAS

1.2.1

Utilizar frascos de vidrio plstico con tapa, limpios y de preferencia

proporcionados por el laboratorio.
1.2.2 Enjuagar el frasco por lo menos tres veces con la muestra.
1.2.3 Tomar porciones individuales del cuerpo de agua en estudio en frascos de
boca ancha (en algunos casos cada media hora o incluso cada 5 minutos) y
mezclarlas al final del perodo del muestreo o combinarlas en un solo frasco
al momento de tomarlas y tapar inmediatamente.
1.2.4 Colocar la muestra en contenedores (hieleras) a menos de 10C, no
requiere de preservantes.
1.2.5 El tiempo de recoleccin de la muestra hasta el inicio del anlisis no debe
exceder de 48 horas (leer las recomendaciones para cada anlisis), por lo
que se recomienda enviar las muestras de inmediato al laboratorio.
1.2.6 Identificar el lugar, fecha y hora de muestreo, tipo de muestra, persona
encargada de tomar la muestra y otras observaciones adicionales en el
formato de cadena de custodia.
El volumen final de muestra para anlisis de agua es suficiente en volumen de 2.5 a 3
litros.

2. MUESTREO EN UN SISTEMA DE DISTRIBUCION O BOMBA PARA

ANLISIS BACTERIOLGICO

1. Retirar del chorro cualquier suciedad que pueda existir.

2. . Abrir el chorro por dos minutos para que corra el agua
3. Cerrar el chorro, esterilizarlo tomando un pedazo de algodn empapado de
alcohol, sostenindolo con una pinza; o utilizando un encendedor o mechero
4. Abrir el chorro que fluya el agua, de uno a dos minutos, disminuir el volumen
del agua.
5. Abrir el frasco esterilizado, desamarrar el cordn que ajusta la cubierta
protectora de papel y desenroscar el tapn.
6. La tapa protectora se toma con la mano izquierda hacia abajo, poner el frasco
bajo el chorro con la mano derecha, y se llena el frasco, dejando un breve
espacio libre.
7. Colocar el tapn y la cubierta protectora al frasco.
ANEXO 1

REQUISITOS PARA TOMA

DE
MUESTRAS PARA ANLISIS
QUMICOS
Y
BACTERIOLGICOS
PARAMETRO
Alcalinidad
Bacterias heterotrficas
Cloro residual
Cloruros
Coliformes fecal
Coliformes total
Color
Conductividad
DBO
DQO

TIPO DE
FRASCO

CANTIDAD PRESERVACIN
MINIMA
DE
MUESTRA
(ml)

TIEMPO
MXIMO DE
ALMACENAJE

P, V
P, V
P, V
P, V
V
V
P, V
P, V
P, V
P, V

200
250
100
200
250
250
50
50
1000
100

48 horas
24 horas
30 min.
28 das
24 horas
24 horas
48 horas
28 das
24-30 horas
7 das

Dureza
Escherichia
Fluoruros
Metales

P, V
V
P
P

200
250
100
1000

Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C
No requiere
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C,
pH<2
Agregar
ac.
Sulfrico 1ml/l
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C
Refrigerar a 4C,
pH<2
Agregar
ac.
Ntrico c1ml/l

28 das
24 horas
28 das
30 das