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El citoesqueleto
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(a) Microtbulos
(b) Microfilamentos
Figura15.1 Distrbucin
intracelularde microtbulos,
microfilamentosy filamentosintemedios. (a) Imagen de la
distribucin de los microtbulos en clulasde la lnea celular PtK1, de rion de rata canguro,visualizadosmediante la tincin
inmunofluorescente de la tubulina. Como referencia,seha teido
el ncleo con el colorante fluorescenterojo de ADN, ioduro de
propidio. (b) Imagen de la distribucin de los microfilamentos en
clulasde Ia lnea celular de rion de rata, visualizadosmediante
la tincin de la actina con un derivado fluorescentede la faloidina.
(c) Imagen de la distribucin de los filamentos intermedios en las
clulasPtK-1, marcadoscon la tincin inmunofluorescente de Ia
queratina. El ncleo seha teido tambin aqu con ioduro de
propidio.
(c) Filamentos
intermedios
b m
Capitulo
15
Elcitoesqueleto
y filamentos
intermedios
microfilamentos
delosmicrotbulos,
Tabla15.1 Propiedades
Filamentos
intermedios
Miclofilamentos
Microtbulos
Estructura
Dimetro
Exterior:25 nm
Interior:15nm
Tubulina a
Tubulina p
(+), (-)
Extremos
7nm
8 - 1 2n m
G-actina
E x t r e m o s( + ) , ( - )
Axonema:motilidad celular
Citoplsmica:
organizaciny mantenimiento
de la forma de la clulaanimal
Movimiento de los cromosomas
Disposiciny movimientode los orgnulos
Contraccin muscular
Movimiento ameboide
Locomocin celular
Flujos, corrientes
citoplsmica
Divisin celular
Mantenimiento de la forma
de la clula animal
Soporte estructural
Mantenimiento de la forma de Ia clula animal
Formacin de la 1mina nuclear y el andamiaje
Reforzamiento de los axones de las clulas
nerviosas (protena NF)
Mantenimiento de las fibras musculares
en registro (desmina)
Monmeros
Polaridad
Funciones
mos quitar o alterar selectivamenteIa funcin de las protenas relevantes:en el caso de la tubulina y de la actina,
podemos usar ciertas sustanciaspara alterar la funcin de
la protena en un sentido determinado. Mediante el estudio de los efectosde dichasdrogasen procesoscelularesespecficos, es posible determinar, al menos aproximadamente, las funciones que dependen de los microtbulos o
de los microfilamentos.
Por ejemplo,la colchicina(un alcaloide que se obtiene
del azafrn silvestre,Colchicum autumnale), se une a los
monmeros de tubulina, inhibiendo su ensamblajeen microtbulos y fomentando el desensamblajede los que ya
existen. Por el contrario, el taxol (del tejo americano, Taxus
Tcnicas para el estudio del
brevifolia) se une fuertemente a los microtbulos y los esque gran parte de la tubulina libre en
tabliza,provocando
citoesqueleto
la clula se asociepara formar microtbulos. Por lo tanto,
la sensibilidadde un procesocelular a la colchicina o al tahanrevolucionadoxol, es un buen indicio de que los microtbulos podran
modernas
demicroscopa
Lastcnicas
delcitoesqueleto
el estudio
intervenir en dicho procesoen la clula.De una manera similar, la sustancia citocalasinaD, un metabolito fngico y
Actualmente, el citoesqueletoes un tema de gran inters
la latrunculina A, vna toxina marina que se asla de la espara los bilogos celulares.Gran parte del progresorecienponja del mar Rojo, Latrunculia magnifica,inhiben la polite en la comprensin de la estructura del citoesqueleto,se
merizacin de los microfilamentos de actina. Por el condebe a tres tcnicas microscpicas de gran potencia: mitrario, la faloidina un pptido cclico obtenido del hongo
croscopade inmunofluorescencia,videomicroscopadigioronja verde (Amanita phalloides),bloquea la depolimerital y microscopa electrnica. La Tabla 15.2 resume cada
zacin de la actina, y estabilizando los microfilamentos.
una de estastcnicas,que se describirn ms en detalle en
Los procesosque seven interrumpidos en las clulascon el
el Apndice. Adems, se han empleado drogas y mutaciotratamiento con estassustanciasprobablementedependan
para
anIigran
utilidad
el
que
han
de
sido
nes especficas,
de alguna manera de los microfilamentos. Los usos y los
sis de la funcin del citoesqueleto.
efectosde estassustanciasse discutirn detalladamente a lo
largo del captulo.
y mutaciones
usarciertasdrogas
Sepueden
Adems del empleo de sustancias,tambin nos podeparadesorganizar
citoesquelticas
lasestructuras
mos servir de las mutaciones para estudiar el citoesqueleto. Los bilogos celulares,mediante el uso de la genticay
Aunque las tcnicas microscpicas pueden desvelarmucho
la biologa molecular, han aislado organismos mutantes o
acerca de la estructura del citoesqueleto, no nos permiten
lneas celularesen los que se han introducido mutaciones
deducir mucho acercade su funcin. Para analizar la funespecficasen una protena determinada del citoesqueleto.
cin de un filamento del citoesqueleto en particular, debe-
parael estudio
Tcnicas
delctoesqueleto 467
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que son responsables
Existendostipos de microtbulos
en la clula
de muchasfunciones
Los microtbulos(MTs) son los elementosdel citoesqueleto msgrandes(Tabla15.1).Losmicrotbulosde lasclulas eucariotaspueden ser clasificadosen dos grandes
grupos,que sedifcrens;ian*IanlqporsuJr{adode o{tn!zaEIprim grup,losmicrotbulos del axonema,incluye a los microtbulosaltamenteorganizadosy establesque
especficas,
relasubcelulares
seencuentranen estructuras
cionadascon el movimiento celular,como los cilios, los
flagelosy los corpsculosbasalesa los que se unen estos
El elementocentral,o axonemalde un ciiio o de
apndices.
un flageloestformado por un hazmuy ordenadode MTs
Debidoa su estabilidad
del axonemay protelnasasociadas.
que los MTs del axoy ordenamiento,
no essorprendente
nema fuesenel primero de los dos gruposen ser descubierto y estudiado.Yahemosvisto previamenteun ejemplo
de dicha estructura;el axonemade la cola del espermatozoidede la Figura4.12,estformadopor MTs.En el Capla estructura
ms detalladamente
tulo 16 consideraremos
del axonemay losmovimientosmediadospor losmicrotbulos.
El segundogrupo lo forma una red mslaxay dinmicade microtbulos citoplsmicos.LosMTs citoplsmicos
hastaprinen lasclulaseucariotas
no fuerondescubiertos
cipiosde la dcadade 1960,con la aparicinde mejores
de una
tcnicasde fijacin,quepermitieronla observacin
red de MTs,que hoy en da sesabeque predominanen el
A partir de
citosolde Ia mayorade las clulaseucariotas.
fluorescencia
ha
mostrado
la
microscopa
de
esemomento,
y
de
las
redes
de
MTs
en difela diversidad la complejidad
rentestiposcelulares.
Los MTs citoplsmicosdesempeanvarias funciones
(vaseTbla
en lasclu15.1).Por ejemplo,sonnecesarios
las animalespara el mantenimientode los axones,prolonelcgacionesde las clulasnerviosas,cuyaspropiedades
tricas hemos examinadoya en el Captulo 13. Algunas
Protofilamento
(a) Estructura
del microtbulo
(b) Microtbulos
en un axn
Figwa t5.2 Estluctula de un miclotbulo, (a) Diagrama esquemticoen el que semuestra un microtbulo como un cilindro hueco que
encierra una luz. El dimetro externo es de apromadamente 25 nm y el interno, de unos l5 nm. La pared del cilindro estformada por
13 protofilamentos, la flecha sealauno de ellos.Un protofilamento es un polmero lineal de dmeros de tubulina, cada uno de los cuales
estconstituido por dos poliptidos, tubulina n y B. Todos los heterodmerosde los protofilamentos poseenla misma orientacin,
proporcionando de estamanera la polaridad al microtbulo. (b) Microtbulos en un corte longitudinal de un axn (TEM).
Captulo
15
Elcitoesqueeto
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Protofilamento
Oligopolios
Dmeros
de tubulina
Lminasde
protofilamentos
Flnn
microtbulo
n en in
del microtbulo
Figura15.3 Modelodel ensamblajede los microtbulosin vitro. Los microtbulos seforman a partir de subunidadescompuestaspor una
molculade tubulina a y una molculade tubulina B, unidasfuertementeformando un dmero,denominadoheterodmerode tubulina aB
o, simplemente,dmero de tubulina.O En el inicio del procesode nucleacin,sepuedenagregarvarios dmerosde tubulina, en
agrupacionesdenominadasoligmeros.@ Algunos de elloscomienzana formar cadenaslinearesde dmerosde tubulina llamadas
protofilamentos.@ Los protofilamentospuedenasociarsedespusuno a1lado del otro formando lminas.@ Laslminas,que contienen13
o ms protofilamentospuedencerrarseen un tubo, formando un microtbulo.@ La elongacindel microtbulo contina con la agregacin
de subunidadesde tubulina en uno o en ambosextremos.
tiene
delosdimeros
detubulina
Laincorporacin
ums,
enlosextremos
lugarconmayorrapidez
delosmicrotbulos
La polaridad estructural inherente a los microtbulos es
debida que los dos extremos difieren qumicamente. Otra
Faseiniciallenta
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Fase
de equilibrio
Fase
de elongacin
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Microtbulos
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de los
Figura15,4 Cinticade la polimetizacin
microtbulosin vitro, La cinticadel ensamblaje
de los MT puedeseguirseobservandola cantidad
de luz dispersadapor una solucinque contiene
GTP-tubulina despusde calentarlade 0 'C a
37 "C. (La polimerizacinde los microtbulos
seinhibe por fro y seactivapor calor).Las
medidas de la dispersin de la luz reflejan
cambios en la poblacin total de MTs y no la
polimerizacin de microtbulos individuales. Si
semiden de estamanera,la polimerizacinde
los microtbulos presentatres fases:inicial lenta,
elongaciny de equilibrio. La fasede retraso
correspondea la nucleacin.Durante la fasede
elongacinlos microtbuloscrecen
rpidamente,haciendo que la concentracin de
subunidadesde tubulina libre decline. Cuando
estaconcentracin eslo suficientementebaja
como para iimitar la polimerrzacin, se alcanza
la fasede meseta,donde seaadeny eliminan
subunidadesde los microtbulos con una tasa
equivalente.
Microtbulos471
crecimientopuedeestablecerse
por su aspectodiferenteal
microscopioelectrnico;
Figura15.5).El extremode crecimiento rpido del microtbulo se denomina extremo
ms,siendoel otro, el extremo menos.
Lasdiferentestasasde crecimientoen los ertremosms
y menosreflejadiferenciasen las concentracionescrticas
que se requierenpara la polimerizacinen ambosextremos del microtbulo; la concentracincrtica en el extremo msesmenor que en el extremo menol Si la concentracin de tubulina libre es mayor que la concentracin
crtica para el extremo mspero menor que la concentra-
Extremos
ms
Extremomenos
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Corpsculo
basal
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polarde losmicrotbulos
Figura15.5 Ensamblaje
in vitro. Se
puededemostrarla polaridaden el ensamblaje
delosMTs,
aadiendocorpsculos
basales
a una solucincondmerosde
tubulina.Losdmerosdetubulinaseaadena los extremosznlsy
menosdelosmicrotbulosdelcorpsculobasal.Sinembargo,los
MTsquecrecendesdeel extremozssonmuchomslargosque
aquellosquecrecendesdeel extremomenos.
472
Captulo15
Elcitoesqueleto
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por depolimerizacin. Thnto es as que algunos microtbulos de hecho, crecena expensasde otros.
Para explicar cmo la polimerizacin y la depolimerizacin pueden ocurrir simultneamente, Tim Mitchison y
Mark Kirschner propusieron el modelo de inestabilidad
dinmica. Estemodelo supone la existenciade dos poblaciones de microtbulos, una que crece en longitud mediante la continua polimerizacin en sus extremos ms y
otra que disminuye en longitud por depolimerizacin.La
diferencia entre las dos poblacionesestriba en que los MTs
en crecimiento presentan la tubulina unida a GTP en sus
extremos ms, mientras que los MTs que estn disminuyendo en tamao, presentanGDP. Debido a que las molculas de tubulina unidas a GTP tienen mayor afinidad entre ellas que por la tubulina unida a GDR la presenciade
un grupo de molculasde tubulina unidas a GTP en el exfremo ms,da lugar a la formacin de un casquetede GTR
que proporciona un extremo estableen el microtbulo, al
que se pueden unir ms dmeros (Figura 15.7a).Se piensa
que la prdida de GTP tiene como resultado la aparicin
de un extremo inestable, en el que la depolimerizacin
puede tener lugar rpidamente.
La concentracin de tubulina unida a GTP es crucial
para el modelo de inestabilidad dinmica. Cuando hay
disponibles muchas tubulinas unidas a GTR stas se
aaden rpidamente al microtbulo, formando un gran
casquetede tubulina-GTP. Sin embargo, si Ia concentracin de tubulina-GTP disminuye, la tasade incorporacin
de tubulina decrece.Cuando la concentracin de GTP-tubulina es suficientementebaja,la tasade hidrlisis de GTP
en las subunidadesde tubulina B en las proximidades del
extremo del MT, supera Ia tasa de incorporacin de tubulina unida a GTP nueva. Esto tiene como resultado el
acortamiento del casquete de GTP. Cuando el casquete
de GTP desparece,el MT se vuelve inestable,y la prdida
de subunidades unidas a GDP se ve favorecida por su
extremo,
Tubulina-GTP
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Extremoms
Concentracin
alta
deturbina
Casquetede GTP
CRECIMIENTO
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Figura15.7 Elcasquete
deGTPy su funcin
en la inestabilidad
dinmica
delosmicrotbulos.(a)ModeloqueilustraIa funcin
delcasquete
de GTP.CuandoIa concentracin
de tubulinaesalta,
la rapidezconla queseincorporaGTP-tubulinaal extremodel
micotbuloesmayorqueconla quesehidrolizael GTP
incorporado.El casquete
de GTPresultanteestabiliza
el extremo
delMT y promueveel crecimiento.
La tasade crecimientoa
menoresde tubulinadisminuve.aumentandola
concentraciones
(sincasquete
hidrlisisdelGTP.Seformaasun extremoinstable
de GTP)quefavorece
la depolimerizacin
delMT. La existencia
de
la inestabilidad
dinmicaestapoyadapor datosexperimentales.(b)
Lasfasesde crecimientoy acortamientosealternanen un MT
individualobservado
conmicroscopa
ptica.Losextremoszs y
(c) La frecuencia
menoscreceryseencogenindependientemente.
dela catstrofe
y el rescate
delmicrotbulodependendela
concentracin
de tubulina.La catstrofe,
el cambiode crecimiento
a acortamiento,
esmenosfiecuentecon concentraciones
de
tubulinaelevada.
El rescate,
el pasode acortamientoa crecimiento,
esmsfrecuenteconconcentrciones
altasde tubulina.
30
l\,4inutos
FRECUENCIA
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FRECUENCIA
DECATSTROFEI
OTRESCATE
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Extremo
menos
Extremo
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(mM)
Concentracin
de tubullna
Microtbulos 473
(a)
(c)
Losmicrotbulos
se orginandentrode la clula
en centrosorganzadores
de microtbulos
En los apartadosanterioreshemos analizadoprincipalmentelas propiedadesde la tubulina y los MTs in vitro, lo
que nos ha proporcionadola basepara entendercmo
funcionan en la clula.Sin embargo,la formacin de MTs
in vivo esun procesoms ordenadoy regulado,que produce grupos de MTs en lugaresdeterminadosde la clula
para funcionesceliilaresespecficas.
Los microtbulosnormalmenteseoriginan a partir de
una estructura celular denominadacentro organizador
microtubular (MTOC). Un MTOC sirvecomo un lugar en
el que seinicia el ensamblaje
de los MTs, alavez queproporcionaun punto de anclajepara uno de los extremosde
estosMTs. Muchasclulasdurante la interfasetienen un
MTOC llamado gglpgry
que est situado cerca del
ncleo.En las clulasanimales,el centrosomaestcompuesto normalmente po, dosfftrrodeados
por un
material granulosodifuso conocido como material pericentriolar (Figura15.9a).En micrograffas
electrnicas
del
centrosoma,se puede observarque los MTs se forman a
partir del materialpericentriolar(Figura15.9b).La estructura simtricade los centrioloses extraordinaria(Figura
15.9a).En la mayor parte de los casos,los centriolosse
orientanperpendicularmente
uno con respectoal otro:la
raznde estacolocacinno seconocean.Sesabequelot
centriolosestnimplicadosen la formacin de los corprisculos hasales,que son importantespara la formacin de
los cjqsy los.flagelos(vaseCapitulo 16).El papelde los
centriolosen las clulasno ciliadasesmenosclaro.En las
clulasanimales,los centriolospuedenservirpara reclutar
el materialpericentriolaral centrosoma,que servirposteriormente como ncleo para el crecimientode los MTs.
474
Capitulo15
Elcitoesqueleto
(e)
(f)
1orm---r
Figura15.8 La inestabllidad
dinmicade los microtbulos
in vivo.
Los microtbulos de una clula viva, observadospor microscopa
de contrasteinterferencial-diferencial (DIC), mejorada
digitalmente, presentaninestabilidad dinmica in vivo. Los MTs,
indicados aqu con varios tipos de flechas,se han registrado a lo
largo del tiempo, desde(a) hasta (f). Los MTs crecenhasta el borde
de la clula y despusseacortan rpidamente.Para una explicacin
del microscopio DIC, consultar el Apndice.
Material
pericentriolar
Centriolos
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Microtbulos
quese
Figura15.10 ltubulina en la basede losmicrotbulos
od$nandesdeel centrosoma.Micrograflaelectrnicade un MT
queseoriginadesdeel centrosoma.
La tubulina7 fuemarcadaaqul
partlculasde metal,En la
unidosa pequeas
con anticuerpos
estosanticuerpos
aparecen
comoesferas
micrografaelectrnica,
brillantes(TEM).
Centrosoma
desdeel centrosoma.En el centrosomatambin se encuentran otras protenas, como la pericentrina. Aparte del centrosoma, ciertos tipos celularesposeenotros MTOCs. Por
ejemplo, los corpsculos basalesde la base de cada cilio en
las clulas ciliadas funcionan tambin como un MTOC.
y polarzan
organzan
losmicrotbulos
LosMTOCs
enla clula
microtubuladesempea
El centrosoma
u organizador
un
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Microtbulo
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Extremoapical
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de microtbulos
(polaridadmixta)
Extremobasal
(a) Clulanerviosa
( b ) C l u l ae p i t e l i acli l i a d a
(c) Eritrocito
Centrosomas
(MTOC)
Centrosoma
Interfase
ffi
Profasetemprana
( d ) C l u l ae n d i v i s i n
Cromosomas
Metafase
Figuta15.11 Efectosde la poladadde los microtbulosen su orientacindentrode las clulasanimales. En la clula,la distribucin de la
mayoriade los microtbulos,viene determinadapor el centro organizadorde microtbulos (MTOC), que en muchasocasionesesun
centrosoma.La orientacinde los MTs en una clulapuedevariar con 1afuncin de esaclula.Los microtbulossesealanen naranja.
(a) Lasclulasnerviosasposeendos grupos de MTs, aquellosque seencuentranen el axn y aquellosque estnen la dendrita.Los MTs
axonalesestnunidos al centrosomapor su extremo meno5 con susextremosmsen el extremodel axn.Por su parte,los MTs de la
dendrita no estnasociadoscon el centrosomay tienen polaridadesmi-xtas.(b) Lasclulasepitelialesciliadastienen muchos MTOCs
denominadoscorpsculosbasales,
uno en la basede cadacilio. Los MTs ciliaresseoriginan con su extremo menosen los corpsculosbasales
y sealargancon su extremo mshaciael extremodel cilio. (c) Los eritrocitoshumanosmadurosno poseenni ncleo ni MTOC. No
obstante,tienen MTs, cuyapolaridadesmixta y forman una banda circular en la periferiade la clula.Estabanda ayudaa mantenersu
forma discoidal(d) A lo largo del procesode la mitosis,los MTs de una clulaen divisin estnorientadoscon susextremosmenosanclados
en el centrosomay susextremosms apwlando lejos de 1.La divisin celularestprecedidapor la divisin del centrosoma.Despuslos dos
centrosomasseseparan,y forman cadauno un polo del huso mittico. En la metafase,los centrosomasseencuentranen ladosopuestosde
la clula.Cadacentrosoma,o polo del huso,forma la mitad de los MTs del huso,algunosde los cualesseextiendendesdeel polo hastalos
cromosomas,mientrasqr,reotros 1ohacendesdeun polo hastael otro.
Laestabilidad
delosmicrotbulos
estestrechamente
regulada
enlasclulas
La capacidad de nuclear de los MTOCs, como el centrosoma, tiene una consecuenciaimportante para la dinmica
de los microtbulos en las clulas.Debido a que los extremos menosde muchos MTs estn ancladosal centrosoma,
el crecimiento y acortamiento dinmico de estosmicrotbulos en sus extremos msliende a sucederen la periferia
de las clulas.
476
Capitulo
15
Elcitoesqueleto
Ya hemos visto que los microtbulos celularespresentan una inestabilidad dinmica: crecen desdeel centrosoma y despusse desensamblan.Esteprocesopuede ocurrir
asen los MTs de vida corta, distribuidos a\ azar en la clula, pero no en los grupos organizadosy estables.Los MTs
son generalmentedemasiado inestablespara permanecer
intactos durante mucho tiempo y se colapsansi no se estabilizan de alguna manera. Una forma de estabilizar los MTs
es (capturar> y proteger sus extremos mas en crecimiento.
Durante la mitosis se puede observar un buen ejemplo
de cmo esta captura de los microtbulos, produce un
conjunto de MTs ordenados de una manera precisa (Figura 15.11d),como analizaremosen el Captulo 19.Antes
de la profase, el centrosoma se replica, dando lugar a dos
El taxol, que tambin ha sido presentado anteriormente en estecaptulo, tiene el efecto contrario en los microtbulos: cuando se une a los MTs, los estabiliza. Dentro de las
clulas, provoca que la tubulina libre se una, formando
MTs y secuestrandoa las clulas en mitosis. As, tanto el taxol como la colchicina bloquean a las clulas en la mitosis,
pero lo hacen produciendo efectosopuestosen los MTs, y
por tanto, en las fibras del huso mittico. El taxol se usa
tambin en el tratamiento de algunos tipos de cncer, en
especialen el de cncer de mama.
Losmicrotbulos
estnreguladosen toda su longitud
por protenasasociadasa microtbulos
Sesabeque ciertasprotenasmodulanla estructura,el ensamblajey la funcin de los microtbulos.Estasprotenas
asociadasa los microtbulos (MAPs) representanel 10l5o/ode la masade MTs aisladosde las clulas.LasMAPs
confierenun nivel de regulacinextra a la organizaciny
funcionesde losMTs.ParamodularIa funcindelos MTs.
muchasMAPs se unen a ellosa intervalosregulares,
fordesdela pared,quepermitenla intermandoproyecciones
accin con otros filamentosy estructurascelulares.Las
MAPs son tambin importantesen la regulacindel ensamblajede los MTs,probablementeunindoseal extremo
msen crecimientode un microtbulo y estabilizndoloy
previniendoassu desensamblaje.
Seha demostradoquela
mayorade lasMAPs aumentanla estabilidadde los MTs,y
Lasdifealgunaspuedeninclusoestimularsu ensamblaje.
rentesMAPs difierenprincipalmenteen la forma en la que
y en cmosereunenMTs entres o con otrasestructuras,
gulan susefectosen los MTs.
La funcin de las MAPs ha sido muy estudiadaen las
ya que constituyenla fuenteprincipal de
clulascerebrales,
estasprotenas.Sepuedendistinguirdos clasesde MAPs
las protenas
asociadasa los MTs de las clulascerebrales:
a los MT (MAPsmotoras)y las MAPs
motorasasociadas
no motoras.LasMAPs motoras sedenominanasl porque
usanAIP para dirigir el transportede vesculasu orgnulos o para generarfuerzasde deslizamientoentreMTs.Entre ellasseencuentranla quinesinay la dinena.Estudiareen el Captulo 16.
mos estasprotenasms detalladamente
Las MAPs no motoras parecencontrolar la organizaUn ejemplollacin de los microtbulosen el citoplasma.
en lasneuronas.
mativo de dichafuncin puedeobservarse
El correctofuncionamientodel sistemanerviosodepende
de las conexionesque establecenlas neuronasentre s, y
con otros tipos celulares.Paraello, las neuronasemiten
prolongacionesllamadasneuritas,que se encuentranreforzadaspor hacesde MTs.Lasneuritasal final sediferencian en axones,que transportansealeselctricasdesdeel
cuerpo celular de Ia neurona,y en dendritas,que reciben
sealesde lasclulasvecinasy lastransportanal cuerpocelular. Loshacesde MTs sonparticularmentemsdensosen
los axonesque en las dendritas.
Microtbulos 477
Microfilamentos
Con un dimetrocercanoa los 7 nm, los microfilamentos
(MFs) son los filamentosms pequeosdel citoesqueleto
(vaseTabla
15.1).El aspectomejor conocidode los microfilamentosesla funcin que desempeanen lasbps
contr"rilesdelasclulasmrtscrll^""",dondeinteraccionan
con filamentos de miqsila, ms gruesos,para provocar las
contraccincaracterstiCa
del msculo. Sin embargo,los
MFs no sonexclusivosde lasclulasmusculares;estnpresentesen casitodaslas clulaseucariotasy participan en
muchos otros fenmenos,que incluyen varias funciones
locomotorasy estructurales.
Algunos ejemplos de los movimientos celularesen
los que participan los microfilamentos son el movim.ientaryeboide, movimiento de las clulassobreun sustrato
al que estn unidas, y las corrientescitoplsmicas,trn
patrn de flujo citoplsmico regular de algunasclulas
vegetalesy animales.Los MFs tambin producen los surcosde segmentacin
que dividen el citonlasmade las clulas animalesdurante la citocinesis.Trataremoscon ms
detalletodosestosfenmenosen el Capltulo16.LosMFs
tambin estnpresentesen los lugaresde unin de una
clula con otra y con la mat"rizextracelular(vaseCapitulo 17).
Ademsde mediar algunostipos de movimientoscelulares,los MFs ta
mantenimientode lu fogq" ..lolut Por ejemplo,casitgdas
rincadared de microfilamentosjusto debajode la membranaplasmticaque se
denomjnacrleixcelular.El crtex aporta rigidez estructural en la superficiede la clulay facilita los cambiosde
forma y el movimiento celular.Por otra parte, el ncleo
478
Gaptulo
15
Ecitoesqueleto
estructuralde lasmicrovellosidades,
lasextensiones
en forma de dedo que seencuentranen la superficiede muchas
clulasanimales,estformado por hacesparalelosde MFs
(vaseFigura
4.2).
La actinaes la protenacon la quese construyen
los microfilamentos
La actina es una protena extremadamenteabundanteen
prcticamentetodaslas clulaseucariotas,incluyendolas
clulasde las plantas,las algasy los hongos.La actina se
sintetizacomo un nico polipptido de 375 aminocidos,
con un peso molecular aproximado de 42 kDa. Una vez
sintetizada,sepliegatomando una forma similar a una U,
con una cavidad central que une AIP o ADP (Figura
15.12).Lasmolculasindividualesde actinasedenominan
actina-G(actinaglobular).Bajo las condicionesapropiadas,las molculasde actina-Gpolimerizanpara formar
microfilamentos;
estaforma,seconocecomoactina-F(actina filamentosa).La actina,tanto en su forma G como Fis,e
une a muchasotras protenas.Estasprotenasde unin a
actina bien regulany modican la funcin de la actina,
bien son reguladasu organizadasellasmismaspor la asociacincon la actina.
polimedzan
deactna-G
Losmonmeros
deactna-F
enmicroflamentos
De maneraparecidaa losdmerosdetubulina,losmon-
ATP
ADp
l<-36
en
merosde actina-Gpuedenpolimerizarreversiblemente
filamentos,con una fasede iniciacinlentaque corresponde a la nucleacindel filamento,seguidapor una fasems
rpidade crecimientodel polmero.La cinticade la polimerizacindela actinapuedeestudiarseen una disolucin,
Sepuedemedir la fluoresutilizandoactina-Gfluorescente.
cenciade la actina-Fmarcada,para obtenerdatosmuy similaresa los de la tubulina. Los filamentosde actina-Fque
se forman, estncompuestospor dos hebraslinealesde
actina-Gpolimerizada,unidasuna a la otra formando una
hlice,con ms o menos 13,5monmerosde actinapor
vuelta(Figura15.13).
Todoslos monmerosde actinaestnorientadosen la
misma direccin dentro de un mismo microfilamento,
por lo que el MR al igual que el microtbulo,poseeuna
polaridad inherente,con un extremo que difiere del otro
Dicha polaridad
tanto qumica como estructuralmente.
puedeserfcilmentedemostradaincubandoa MFs con el
subfragmentolde la miosina (S1),un fragmentoproteoItico de la miosina (Figura15.14).Los fragmentosS1 se
a los MFs de actinasiguiendoun paunen,o <decoran>,
flecha,
con todaslas molculasde Sl
trn en forma de
apuntandoen la mismadireccin(Figura15.14c).Basndoseen estepatrn en forma de flecha,frecuentementese
utilizan los trminos extremopuntiagudoy extremobarbado,para identificar los extremosmenosy ms,respectivamente,de un MF. La polaridaden el MF esimportante
porquepermiteuna regulacinindependientede la poli-
nm----l
-t
(a) Ensamblaje
del MEF
(b) Actina-Fpurificada
Fj-dlrm-f
Figura15.13 Modelodel ensamblajede los microfilamentosin vitro. (a) Los monmeros de actina-G polimerizan en filamentos largos de
actina-F con un dimetro aproximado de 7 nm. La hlice da una lrrelta cada36-37 nm, y serequieren cercade 13,5monmeros para una
vuelta completa. La incorporacin de cadamonmero de actina-G estacompaadao seguidade la hidrlisis de la molcula de ATP,que
lleva fuertemente unida el monmero. De todas formas, no se requiere la energade hidrlisis del ATP para llevar a cabo la reaccin de
polimerizacin. (b) Micrograffa electrnicade actina-F purificada (TEM).
Microfilamentos479
Extremo
menos
Extremomenos(apuntado)
Miosina
Subunldad
de actina
Cabezas
K+
Segmento
de miosina
Meromiosina
ligera
(LN/M)
(b) Tratamlento
posteriorc. +';^^i^^
Aq
OOOOI +
Subfragmento
2
(s2)
Subfragmento
1
(s1)
^mfl
-v
Subfragmentol
( S t
Extremo ms l--------------0,25um
'
Extremorns(barbado)
Captulo
15
Elcitoesqueleto
puedentambinelongarse
conADP-actina-G
o a partirde
anlogos
no hidrolizables
deAlP-actina-G.
pueden
Lasclulas
regular
dinmicamente
la manera
y el lugardondeseensambla
la actina
Como acabamosde ver, al igual que ocurre con los microtbulos, las clulaspueden regular dinmicamente dnde
y cmo debe ensamblarseIa actina-G, para formar los microfilamentos. Las clulasque se desplazanpor un sustrato, tienen estructuras especializadasen su extremo de
avance,denominadas lamelipodiosy filopodios,queles permiten caminar sobre la superficie (trataremos con ms detalle estasestructurasespecializadasen el Captulo 16). El
tipo de protrusin parece depender de la naturaleza del
movimiento celular y de Ia organizacin de los filamentos
de actina en la clula. En aquellas clulas que estn fuertemente adheridas al sustrato y que no se mueven bien, existen unos hacesde actina, denominado s fibras de estrso de
refuerzo, que se extienden desdela cola de la clula, o esteIa hastael frente (Figura 15.15a).Las clulasque semueven
Fibra de estrs
Crtexcelular
Filopodio
(b) Gel
Haces de actina
en los filopodios
Ciertasproteinasy drogasespecficasafectan
a la dinmicadel polimetoen los extremos
de los mictofilamentos
Lasclulascontrolanel procesode polimerizacindel MF
en variospuntos,incluyendola nucleacinde nuevosMFs
tambincontrolan
yla elongacinde los MFsya existentes;
la tasade depolimerizacinde actina.Tanto las protenas
como los lpidos de membranaregulanla formacin' estabilidady la rupturadelosMFs.Aqu participanvariasprotenasde unin a actina,fosfolpidosde inositol,que seencuentranen la carainterna de la membranaplasmtica,y
RAc,Rho y Cdc42,que son protenasreguladoraspequeasqueliganGTP (protenasG monomricas).
En ausenciade otros factores,el crecimientode los microfilamentosdependede la concentracinde actina-G
Red de
actnaen el
lamelipodio
Microfilamentos481
Captulo
15
Elcitoesqueleto
Laramificacin
porel
dela actnaestcontrolada
complejoAtp2/3
Ademsde los filamentosindividualesde actinaque se
alargan o encogen,existen otras redes de actina en las clulas. Por ejemplo, los lamelipodios contienen filamentos de
actina que constituyenuna red en forma dendrticao de rbol (Figura 15.I7a). Ya hemos comentado anteriormente
que los extremos barbados de las ramas rectas formadas
por la polimerizacin de monmeros de actina por medio
de la profilina, se encuentran probablemente bloqueados
por protenascasquete.En el lamelipodio intervienen adems protenas adicionales.El complejo complejo Arp2l3,
constituido por protenasrelacionadascon la actina,participa en la ramificacin mediante la nucleacin de varias
ramas en los lados de filamentos ya existentes,fenmeno
demostrable cuando se aade actina-G fluorescente (por
ejemplo, monmeros marcados con un colorante rojo
fluorescente)a microfilamentos formados por actina marcada con una sealfluorescentediferente (por ejemplo, un
colorante verde). Se observaque brotan ramas rojas de los
microfllamentos verdesexistentescuando se aaden complejos Arp 213 activados(Figura 15,17b). Si se examinan
las ramas utilizando anticuerpos que detectan Arp2l3, se
observa que los complejos Arp2l3 se encuentran en los
puntos de ramificacin (Figura l5.l7c). Los miembros de
una familia de protenas, que incluye ala protena del sndrome de Aldrich o WASP, activan la ramificacin a travs
de Arp2l3. Los enfermos que no pueden producir WASP
funcional, tienen un dficit en la capacidadde sus plaquetas de cambiar de forma, y como consecuenciatienen problemas de coagulacinsangunea.
La polimerizacin de actina puede regularseindependientementedel complejo Arp2l3,a travsde protenasconocidas como forminas. Las forminas son necesariaspara
ensamblar ciertas estructuras de F-actina, como los haces
compactos y el anillo contrctil de la divisin celular (vaseCaptulo l9).
Rho,Racy Cdc-42
regulanla polimerizacin
dela actina
La clulasen migracindebenregularcundoy dnde
forman expansiones, organizando redes de actina en dichos lugares y desorganizndolas cuando ya no se necesiten ms. Un caso llamativo de dicha regulacin es el
cambio dramtico que experimenta el citoesqueletoen clulas expuestas a determinados factores de crecimiento.
Por ejemplo, los fibroblastos crecen,se dividen y forman
extensionesmembranosas ricas en actina, similares a los
'0,2pm
f
^rPlo
(b)
por
Crecimiento
los extremos
barbados
t-crotelnao" t
,t
?.
;=t=-'
en loslaterales
Las protenasde la
familiaWASPactivan
al complejoArp2/3
de losfilamentos
Protenas
casquete
L, protena
casquere
la
flnaliza
elongacin
o tO
CITOSOL
t'
Reservoriode profilina-actina
(d)
Figun 15.12 El complejo Atp2/3 y las redesramificadasde actina. Las redesde actina, como las que seencuentran en las clulasen
migracin, presentanun patrn de ramificacin caracterstico.(a) Filamentos de actina ramificados en un queratocito de una rana. Los
filnentos e actina ramificados estncoloreadospara facilitar su identificacin (TEM de criograbado profundo). (b) La actina polimeriza
formando ramas cuando se aaden monmeros d actina marcadosfluorescentemente(rojo), y protenasWASP y Arp2l3, a filamentos de
actina preexistentesmarcadoscon fluorescencia(verdes).Algunas ramas forman filamentos nuevos de actina (medio), mienttas que otras
,u-", i. forman en los lateralesde filamentos de actina preexistentes(parte superior) (microscopa de fluorescencia).(c) La protelna Arp2l3
(detectadamediante el uso de anticuerpos conjugadoscn partculas de oro, en amarillo), selocalizan en los puntos de ramificacin (TEM
iriograbado profundo). (d) Modelo de ramificacin depenientede Arp2l3. Las protenas de la familia WASP estimulan Ia ramificacin; las
protenas casqueteparticipan en la regulacin de la longitud de las nuevasramas.
A ne x o
puEDENMovERSE
Los vrrcRooRcANrsMosrNFECCrosos
DENTRO DE LAS CTUTNS USANDO (COLAS) DE ACTINA
Uno de los hallazgosmsnotablesen la investigacinde la movilidad celular,esel descubrimientode que ciertosmicroorganismos que causrn
las enfermedades,
pueden aprovecharse
de los
sistemasde adhesiny movilidad de una clulapara sortearsus
defensase introducirse en ellas(vaseCaptutoiZ. Et ejemplo
msestudiadoesel de la bacteriagram-positivaListeriamonocytogenes.
Una de las formas de adhesinListeria es mediantela
protelnainternalinaA,,que seune ala cadherinaE,protelnade la
superficiede la clulahusped.(Parasaberms sobrelas cadheri:nas,vaseel Capltulo 17.) Una vez unida, Listeriaseintroduce
en la clula,se muevepor ella a una velocidadde 1l pmlmn y
avanzahacialasclulasvecinassin infectar,dondecontinuarsu
ciclo infectivo (Figura 15.Ala).Desdela bacteriairradian pequeos filamentosde actina,formando <colasde cometa>de actinaF ramificada(Figura 15.A1b).Seha descubierto,utilizando actina marcadafluorescentemente,
que las colasse forman por la
polimerizacinde actinadependientede Arp2l3,quecomienzaa
nuclearcercade la superficiede la bacteriainternalizada.La pro-
Acoplamiento
despusde la
uninposterior
de la bacteria
a
(
Internalizacin
.$
Infeccin
de la clula
vectna
\)
\
\
\
La bacteriapuede
dividirsedentro
de la clula infectada
(a)
Formacin
de la "cola"
(b)
0.1m
Figuta154.1 fnfeccinde un mactfagopot Listeriamonocytogenes. (a) Ciclo vital de Listeria.Una bacteria seacopla a la superficie de una
clula sin infectar. La bacteria despussemueve dentro de la clula,donde puede dividirse y producir ms bacteriaspara postriormente
dispersarsea una clula vecina a travs de Ia formacin de <colasde cometa>de actina polimirizada. (b) Micrograf elecirnica de
transmisin, qne muestra una clula de Listeria dentro de un macrfago infectado y la <colade cometa>de filamentos de actina, en la parte
posteriorde la bacteria.
484
Captulo
15
Elcitoesqueleto
Fibrasde estrs
Filopodios
Lamelipodio
lo rrf
2l
oooo
ffi
Filamentos
reforzados
Protenasde unin
a los monomeros
oaoo
''
r
-7
Complejos
de G-actinaproTerna
...:.-l
-o-
Ir
Haz de filamentos
I \
Monmeros
de actina Filamento\
de actina \
1
T'
t
Filamento
encasquetado
de los
medianteel reforzamientoy/o el encasquetamiento
protena
puede
desemla misma
MFs;en algunasocasiones
y
pearambasfunciones.Una de estasprotenasreforzantes
cuyafuncin esromper los
esla gelsolina,
encasquetadoras
los extremosms rccin exMFs de actinay encasquetar
puestos,impidiendo su polimerizacinposterior.La gelsolina esotra protenade unin de actinaquepuedeserregulada mediante su unin a polifosfoinostidos;cuando la
ya no es
gelsolinaseune a un polifosfoinostidoespecfico,
el extremomsde un MR permitiencapazde encasquetar
do al extremosin encapucharsufrir cambiosen sulongitud.
Loshacesde filamentosde actinaformanel ncleo
de las microvellosidades
(gel)
Redde filamentos
Figura15.19 Relaciones
entre las pdncipalesfotmasestructuales
de actina. Las protenas de unin a actina (verde,morado y
canela)son las responsablesde la conversin de los filamentos de
actina de una forma a otra.
el papelopuesto,rompienOtrasprotenasdesempean
do la red de microfilamentosy provocandoque el gelcortical de actinaselicue y ablande.Llevana caboestafuncin
quepresentala actina
A diferenciade la pocaorganizacin
en el crtexcelular,otrasestructurasformadaspor actina
en clulasno migradoraspuedenestaraltamenteorganizadas.El ejemplomejor estudiadode polmerosde actinaal=
tamenteorganizadosesel de los hacesde filamentosque se
encuentranen las microvillosidades.Las microvillosidades (o is6yilli; en singular:microvillus) son un rasgo
muy importantede lasclulasde la mucosaintestinal(Figura15.20a).
Porejemplo,una solacluladelintestinodelcadauna de ellas
gado,tienecientosde microvellosidades,
Complejosde
MicrovellosidadesG-actina-protena
electrn-densa
Mlcrofilamentos
de actrna
Entrecruzamientos
laterales
Protenasformadoras
oe naces
Membrana
plasmtica
(b) Estructura
de una microvellosidad
(a) Intestinal
microvilli
486
15
Captulo
0,2L,m
Elcitoesqueleto
Figura15.20 Estructurade un
microvellosidad. (a) Micrografa
electrnicade las microvellosidadesde las
clulasde la mucosa intestinal (TEM).
(b) Diagrama esquemticode una nica
micovellosidad, que muestra el ncleo de
microfilamentos que confiere a la
microvellosidad su particular rigidez. El
ncleo estformado por varias docenasde
hacesde microfilamentos orientados con
susextremosmshaciala punta y con el
extremo menoshactalaclula.Los
extremos ms esfnembebidosen una
olaca amorfa electrn-densa.Los MFs
stn unidos fuertemente uno a otro a
travs de protenas formadoras de haces
(entrecruzadoras)
y seconectana la
superficie interna de la membrana
plasmticamediante entrecruzamientos
Iaterales.
Red terminal
0,2 p'm
Glucoforina
Actinay
Banda4.1 Espectrina Anquirina
ol lm
Filamentos intermedios
Los filamentos intermedios (IFs) tienen un dimetro aproximado de 8-12 nm, 1o que les confiere un tamao intermedio entre los microtbulos y los microflamentos (vase
Tabla 15.1),o entre los filamentos finos (actina) y gruesos
(miosina) en las clulasmusculares,donde se describieron
por primera vez. Hasta la fecha, la mayora de las investigaciones se han centrado en las clulas animales,donde los
488
Captulo
15
Elcitoesqueleto
(a)
(b)
200 nm
200nm
Figura15'23 Filamentosintemedios. Micrograffas electrnicasde filamentos intermedios reconstituidos in vitro y teidos mediante
tincin negativa(a) Filamentosformadospor queratina5 y la. (b) filamentosde vimentina (TEM).
Tabla15.3 Clases
defilamentos
intemedios
Clase
I
II
ProteinadellF
III
Citoqueratinascidas
Citoqueratinas
bsicas
Vimentina
III
Desmina
ProtenaGFA
Protenas
de los
neurofilamentos
NF-L (ligeros)
IV
NF-M (intermedios)
NF-H (pesados)
Lminasnucleares
VI
Peso
(kDa)
molecular
40-56,5
53-67
54
50
Funcin
Teiido
Clulasepiteliales
Clulasepiteliales
Fibroblastos;clulasde origen
mesenquimal;cristalino
Clulasmusculares,especialmente
del msculoliso
Clulasglialesy astrocitos
Sistemanerviosocentraly perifrico
Resistenciamecnica
Resistencia mecnica
Mantenimiento de la forma celular
Soporte estructural para la
maquinaria contrctil
Mantenimiento de la forma celular
Rigidez axonal. Determinan
el tamao del axn
OL
t02
110
Todoslos tiposcelulares
LminaA
70
LminaB
LminaC
Nestina
67
60
240
Clulasmadrenerviosas
Desconocida
Losfilamentos
intermedios
se formana partir
desubunidades
flamentosas
Todos los IFs son producto de una familia de genesrelacionadosyposeen rasgoscomunes,aunque presentandiferencias significativas en el tamao y en las propiedades
qumicas. A diferencia de la actina y la tubulina, que son
protenas globulares, los IFs son protenas filamentosas.
Todas las protenas de los IFs tienen un dominio central en
Filamentos
intermedios 489
mecnica
a losteiids
Los filamentosintermediosseconsideranimportantesdeterminantesestructuralesen muchasclulasy tejidos.Los
filamentosintermediosselocalizancon frecuenciaen lugaresde la clulasometidosa estrsmecnico,por lo que
se cree que desempeanuna funcin de resistenciaa la
tensin.Por ejemplo,en las clulasepiteliales,lostonofilamentoscompuestosde queratina,rodean unas placascoque son puntos de unin fuernocidascomodesmosomas,
tes entre dos clulasvecinas(vaseFigwa 17.18).Otra
establece
coestructuraalgo diferente,el hemidesmosoma,
nexionesentrela superficiebasalde una clulaepitelialy la
matrizextracelular(vaseFigwa17.17).El sistemade dey tonofllamentossoportala
mosomas,hemidesmosomas
mayorpartede la tensinmecnicacuandoel epitelioseve
sometidoa un estiramiento.La modificacin genticade
los filamentosde queratinade los queratinocitosen un ratn transgnico,tiene como consecuenciaque las clulas
epidrmicasseanfrgilesy serompan fcilmente.En el ser
humano, existenmutacionesnaturalesen las queratinas,
que provocanuna enfermedaden la que seproducenfrebucuentesampollasen la piel,denominadaepidormolisis
la existenciade dellosasimple(EBS).Tambinsesospecha
patolgicas,
comola
fectosen los IFs en otrascondiciones
lateralamiotrfica(ALS),yen ciertostipos de caresclerosis
que seoriginanpor defectosen la organizadiomiopatas,
cin del msculocardaco.
Aunque nuestroanlisisde los IFs puedadar la impreestono escierto.Por
sin de que son estructurasestticas,
losIFssontransportados
y remoejemplo,en lasneuronas,
deladosde una maneradinmica.OtrosIFs forman el andamiajeestructuralen la superficieinternadela membrana
nucleardenominadolmina nuclear(setratardetalladamenteen el Captulo19).La lminanuclearestcompuesta por tresIFs diferentesllamadoslmina nuclearA, B y C.
de estaslminasforman
La fosforilaciny el desensamblaje
partedel procesode desorganizacn
de la eruueltanuclear
al inicio de la mitosis.Despusde la mitosis,las fosfatasas
de laslminaseliminan los gruposfosfato,y permiten que
de nuevo.
la envueltanuclearpuedaagregarse
tl
Dominior^^_,^,amini
Ntefminal
I
t^
helicoidales
Segmentos
r.-uo
o
n.itl|
Segmentos
de unin
ll
'
Tinn
c-o-
H"N*
-ll^
ll /nrroreiinac
hciac
r na rtrac\
o
desminay proteaGFA)
_O_ Tipolll (vimentina,
H^N"
ii"
n,N-
f-o_
Tipo|V(protena
NF)
,tO
i
H3N*C-O-"vv
'l
Ii^
\v/ / l m i n r e
'q"""qu
nr r.laaraa\
"uv'vqrvu/
Figura15.24 Similitudesestructuralesen las protenasde los filamentosintemedios. Los seistipos de protenasde los filamentos intermedios
tienen un dominio central en forma de bastn formado por cuatro segmentoshecoidalesque estninterrumpidos por tres segmentos
enlazadores.Secreeque el dominio central desempeaun papel importante en el ensamblajedel IF. Estedominio estaltamenteconservadoen
tamao, estructurasecundariay secuencia,si bien las homologasserestringena las regioneshelicoidales.En los tipos del I al IV los segmentos
helicoidalespresentan276 aminocidosy los segmentosde unin no son helicoidales.En los del tipo V, los segmentoshelicoidalescontienen
318 aminocidosy sussegmentosde unin son tambin helicoidales.Los dominios N- y C-terminal que flanqueanla parte central no son
helicoidalesy son mucho ms variablestanto en tamao como en secuencia.(La estructuradel sextotipo, nestina,no semuestra.)
490
Capitulo15
Elcitoesqueleto
-{
B-12nm
(a) Dmero
El citoesqueletoes unaestlucturantegrada
mecncamente
En los apartadosanteriores,hemos consideradolos diferentescomponentesdel citoesqueletocomo entidadesseparadas.Cuandoobservamospor primera vezlas fotograffas del citoesqueleto,pareceuna red enmaraadapoco
organizada.En realidad,la arquitecuracelulardependede
las propiedadesnicasde los diferentescomponentesdel
actuandode una maneraconjunta.Normalcitoesqueleto,
mentesepiensaquelos microtbulosresistenla distorsin
cuandosecomprimea una clula,mientrasquelos microfilamentosfuncionancomo elementoscontrctilesque generan tensin.Los filamentosintermediosson elsticosy
puedenresistirfuerzasde tensin.
La integracinmecnicade los filamentosintermedios,
los microfilamentosy los microtbulosesposiblegraciasa
la accinde protenasde unin que los conectanentre s.
y los hemisdesmosomas
esRecuerdeque los desmosomas
6,T;;
Figura15.26 Conexionesentre los filamentosintermediosy otros
componentesdel citoesqueleto, Los filamentos intermedios estn
conectadostanto a los microtbulos como a los filamentos de
actina a travs de una protelna llamada plectina. La plectina (en
rojo) une los IFs (en verde) a los MTs (en naranja). La plectina est
marcada con partculas de oro (en amarillo). Las plectinas pueden
unir tambin MFs de actina (no se muestra). Los IFs sirven aqu
como conectoresfuertes alavezque elsticos,entre los diferentes
filamentos del citoesqueleto.
Filamentos
intermedios
49r
Problemas
estnmarcados
conun..
Losproblemas
demayor
dificultad
15.1 Filamentosy tribulos. Indique si lassiguientes
paralos microtbulos(MT),los
afirmaciones
sonverdaderas
(MF),los filamentosintermedios(IF) o para
microfilamentos
ninguno de ellos(N). Alguna de lasafirmacionespuedetener
msde una respuesta.
(a) Implicadosen la contraccinmuscular.
(b) Iimplicadosen el movimiento de cilios y flagelos.
(c) Ms importante para el movimiento de los cromosomas
queparala citocinesis.
(d) Ms importante parala citoquinesisque para el
movimientode los cromosomas,
en lasclulasanimales.
(e) El que probablementeresistanal tratamientode las clulas
con detergentes
no inicoso con solucionesde elevada
f:uerzainca.
(0 Seencuentranen lasbacterias.
(e)Tienendiferentecomposicinen lasclulasmuscularesy
en las clulasnerviosas.
( h ) Puedendetectarse
con microscooade inmunofluorescencia.
492
Captulo
15
Elcitoesqueleto
(i)
Lasfuncionesquedesempean
en el movimientocelular
sonbien conocidas.
(j) Seensamblan
a partir de protofilamentos.
L5,2 Verdadero,falso o depende.Indique cul de las
afirmaciones
esverdadera(V), falsa(F), o depende
siguientes
(D), entendindose
comodependeuna afirmacinquepuede
serverdaderao falsadependiendode las circunstancias.
Expliquepor qu,en loscasosquerespondaVo F.
(a) El extremomenosde Iosmicrotbulosy de los
microfilamentossellama asporque en 1,lassubunidades
sepierdeny no seaaden.
(b) La energanecesariaparala polimerizacinde la tubulina y
de la actinala proporcionala hidrlisis de un nuclesido
trifosfato.
(c) Los microtbulos,los microfilamentosy los filamentos
intermedioscoexisten,en una clulaeucariotatpica,en un
equi-libriodinmico con un reservoriode subunidades
proteicas.
(d) El tratamientocon latrunculinaA bloquearalos
movimientosintracelularesde Listeria.
.(g
o
c
O
a
c)
l
tr
Tiempo
por
de la polimerizacin
Figwa15.27 Cintica
dela actinamedida
la incorporacin
deactinaunidaa pirenos,
envariascondiciones
(Vase
Problema
15.5.)
experimentales.
(c) Adicinde actinaunida a pirenos,junto con protenas
purificadasdel complejo Arp2l3 y un fragmentoproteico
purificadoque corresponde
a N-WASPactivo(una
protenade la familia WASP)
.15.6 Actina esponjosa.Supongamos
queustedest
en los efectosprecisosde la citocalasina
D sobrelos
interesado
microfilamentos,
a lo largodel tiempo.Basndose
en lo que
conoceacercadel mecanismode accinde iascitocalasinas,
de lo quelessucedea los microfilamentos
dibujediagramas
en
lasclulastratadascon la droga.En particular,expliquepor qu
los polmerosde actinaya existentes,
sedespolimerizan
al final.
.15.7 Una nuevaarruga.Losfibroblastos
sepuedenmeteren
normales,los
lminasfinasde silicona.En condiciones
fibroblastos
ejercenla suficientetensinsobrela silicona,para
quesearrugue.Expliquecmo sepodracompararIa capacidad
de los fibroblastosde arrugarla silicona,con la de lasclulas
normales,bajolassiguientes
condiciones.
(a) Lasclulasseinyectancon grandescantidadesde gelsolina
purificada.
(b) Lasclulasprovienende un ratn modificadopor
quecarecede filamentosintermedios
ingenieragentica,
de vimentina.
(c) Lasclulassetratancon taxol.
(d) Lasclulassetratancon colchicina,la drogaseelimina
y lasclulasseobservanperidicamente.
mediantelavados,
15.8 Activa, gusteo no. Sepuedenconstruir por ingeniera
gentica,formasconstantemenete
activasde lasprotenasG
monomricas(<constitutivamente
activas>),
o queactencomo
<dominantes
negativas).
El efectode estasltimasprotenasG
permanentede la va de sealizacin
esla desactivacin
asociada
con esaprotenaG pequea.
(a) ExpiiquequIe suceder
a un fibroblastoen reposoen
sueronormal cuandosele introduce un dominante
negativode Rho.
(b) Expiiquequ le sucederal mismo fibroblasto,si seIe trata
con el factor de crecimientoderivadode plaquetas
(PDGF).
(c) Expliquequ le sucedera un fibroblastoal que sele ha
introducido Rho constitutivamenteactivocuandosele
trata con cidolisofosfatdico(LPA).
Problemas 493
Bibliografa recomendada
Lasreferencias
histrica
estnmarcadas
conimportancia
con..
parael estudiodelcitoesqueleto
Tcnicas
.Bridgman,P.C. y T. S.Reese.
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494
Capitulo
15
Elcitoesqueleto