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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

VICERRECTORADO ACADMICO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE LABORATORIO CLNICO E HISTOPATOLGICO

TCNICAS HISTOLGICAS
INFORME DEL LABORATORIO

TEMA: RECONOCIMIENTO DE UN LABORATORIO DE ANATOMA


PATOLGICA

ESTUDIANTE: Aguilar Balseca Mario Alexander


DOCENTE: Lic. Ivn Peafiel Mndez
CURSO: 3 Laboratorio Clnico e Histopatolgico
FECHA: 04/11/2015

Octubre 2015 Febrero 2016

OBJETIVOS
Objetivo general:
Identificar el rea de Anatoma Patolgica.
Objetivos especficos:
Realizar reconocimiento del rea total requerida y distribucin para un laboratorio
de Anatoma Patolgica.
Observar los equipos y materiales necesarios en cada rea de trabajo en un
laboratorio de Anatoma Patolgica.
Clasificar cada uno de los desechos generados dentro del rea de Anatoma
Patolgica.

FUNDAMENTO TERICO

FIJACIN

La fijacin es el paso ms importante al llevar acabo las tcnicas de preparacin de


muestras histolgicas, No importa el cuidado con el que procese y seccione la muestra de
tejido, los detalles morfolgicos esenciales solo se mostraran si el tejido se fija de manera
adecuada y rpida.
Casi siempre es ms difcil seccionar las muestras mal fijadas que aquellos que estn bien
fijadas.
Los tejidos mal fijados siempre mostraran menos caractersticas morfolgicas, aunque se
hayan procesado de manera ptima y con cuidado.

PROCESAMENTO DE TEJIDOS

Un bloque de parafina ser difcil de seccionar, a no ser que una muestra bien fijada sea
procesada de manera adecuada utilizando un programa adecuado.
Las muestras pueden ser poco procesadas (muestra demasiado grande, programa
demasiado breve) o demasiado procesadas (programa demasiado largo para el tamao y
naturaleza de la muestra). E n ambos casos, puede ser difcil o imposible realizar un corte.

Existen varias tcnicas que se pueden utilizar para obtener secciones de bloque difciles.
Si es difcil seccionar el bloque porque el tejido es duro, la superficie externa puede
empaparse en agua fra o un agente reblandecedor, como una solucin de detergente
blando, suavizante.
Para muestras clasificadas, puede aplicar un agente descalcificador, durante 10 min o
ms, en el tejido expuesto, ello le permitir obtener varias secciones. Enjuague bien los
bloques antes de montarlos en el porta muestra del micrtomo y de volver a cortarlos, y
que los rastros del agente de descalcificacin dearan la placa de presin del corta
cuchillas.
Evitar aquellas secciones de bloques difciles en lo que la fijacin, el procesamiento o la
infiltracin puede ser errneas y los mtodos de corte normales no se realizan con xito.
Cuando es imposible obtener secciones de un bloque porque la muestra ha sido
incorrectamente procesada en primea instancia puede ser posible reprocesarlo.

INCLUSIN DE TEJIDOS EN PARAFINA

Realice la inclusin de muestras con cuidado.


La inclusin es un paso importante que precisa una aproximacin cuidadosa. Una
inclusin poca cuidadosa puede hacer la microtoma mucho ms difcil.
No llenar lo suficiente el molde de inclusin puede dar lugar a una sujecin inestable en
el micrtomo y originar cortes de distinto espesor uno grueso y despus otro fino y otros
problemas.
Evitar llenar excesivamente los moldes de inclusin, porque esto puede interferir con la
alineacin correcta de la cara del bloque durante el corte.
Cualquier exceso de parafina en la parte exterior del molde de inclusin debera ser
eliminado antes de sujetarlo, para asegurarse de que el bloque est sujeto con firmeza
durante el seccionamiento.

MICROTOMA

La posicin del microtoma en el laboratorio es importante.

Coloque el micrtomo en un lugar estable, lejos de rfagas de aire, puertas y puntos de


paso. Cualquier movimiento del aire debido a los equipos de aire acondicionado u otras
cosas puede hacer que el tratamiento de la seccin sea muy difcil.
Es preferible utilizar un banco ajustable en altura y una silla ergonmica.
Es muy importante que el personal no este distrado al usar el micrtomo por los riesgos
de lesionarse con cuchillas extremadamente filas. Al colocar los micrtomos en el
laboratorio debera considerarse el potencial para interactuar con otros miembros del
personal.
Es preferible tener un suelo antideslizante en las inmediaciones de los micrtomos porque
inevitablemente, los fragmentos de parafina caern al suelo y pueden originar una
superficie resbaladiza. Muchos laboratorios utilizan esterillas anti deslizantes para que el
entorno sea ms seguro.

ESTUDIE EL DISEO DE SU MICRTOMO Y APRENDA A UTILIZARLA


Los micrtomos con retraccin estn diseados para que la muestra se retire de la cuchilla
en carrera ascendente. Es importante saber si su micrtomo tiene esta presentacin.
La posicin retrada es una caracterstica de diseo que proporciona distintas ventajas
durante el corte y prolonga la vida de la cuchilla.
Al usar un micrtomo de retraccin, el almacenamiento de la cara del bloque al borde de
la cuchilla debe ser efectuado con un bloque en la cerrera ascendente.
Si un bloque est alineado cerca del borde de la cuchilla, mientras el brazo de la muestra
est en la posicin retrada, en la siguiente vuelta del volante, el bloque avanzara en
funcin del valor de la posicin retrada ms el grosor de la seccin seleccionada. Esto
provocara que se cortara un trozo grueso que podra daar tanto la muestra como la
cuchilla.

Los micrtomos tambin pueden ser manuales, semiautomatizados o motorizados.

Los equipos motorizados reducen los movimientos repetitivos que pueden contribuir a
desarrollar enfermedades musculo- esquelticas.
MATERIALES Y EQUIPOS

Microscopia

Equipo o estacin de inclusin de tejidos en parafina

Plancha fra 5C

Micrtomo

Bao de flotacin

Estufa de histopatologa

Batera de tincin

PROCEDIMIENTO
1. El estudiante recibir informacin sobre el rea, distribucin y elementos que
deben integrar el Laboratorio de Anatoma Patolgica.
2. El estudiante observara, conocer y pondr en prctica los protocolos de
generacin y eliminacin de desechos.
3. El estudiante elaborara su propio manual de desechos aplicado en un laboratorio
de Anatoma Patolgica.

TCNICA
Al momento que entramos al laboratorio de Anatoma Patolgica debamos estar con las
barras de proteccin para uno mismo tambin nos pudimos dar cuenta que cumplen con
las normas de bioseguridad y pictogramas que tena todos los recipientes rotulados en los
cuales debamos desechar los materiales utilizados en la prctica.
Hablamos sobre los equipos necesarios para el procesamiento de tejidos, distribuidos en
diferentes reas del laboratorio.
Vamos hablar de lo observado en el laboratorio de Anatoma Patolgica que tiene la
Universidad Nacional de Chimborazo. Como nombre anteriormente se debe tomar
medidas de barrearas de proteccin para nuestra integridad y salud a continuacin unos
puntos que nos van ayudar en el laboratorio:
Mandil limpio y planchado.

Guantes de manejo colocado encima de las mangas del mandil.


La mascarilla debe ser de las N90 ya que son ms eficaces.
Colocarnos el gorro sin que quede cabellos hacia fuera y para las mujeres
deben recogerse en cabello con una trenza, verificando que este tape hasta las
orejas para ambos gneros.
Las botas deben cubrir la superficie del calzado
Debemos recordar que estas barreras poseen un solo uso lo cual debemos
desecharlas despus de realizar la prctica.
Para hacer los cortes de los rganos debemos tener una tablilla de disecciones anatmicas
que est diseada de la siguiente manera:
Una tabla triple con tamao de 30 cm alto y 20 cm ancho cubierto por una laminilla de
corcho en la cual se va realizar los cortes y que posee una gradilla de madera en un
extremo que nos permite tener una inclinacin, esto nos ayudar a que los fluidos de
nuestro rgano resbalen por la lmina para evitar que los fluidos queden atrapados.
CLASIFICACIN DE LOS DESECHOS
Los desechos y subproductos pueden ser de muy diversa ndole, como se desprende de la
siguiente lista (los porcentajes corresponden a valores aproximados).
Comunes: No han tenido contacto con fluidos
Infecciosos: Desechos contaminados con sangre o derivados sanguneos y fluidos.
Especiales: Contenedores.
Corto punzantes: jeringas, agujas, bistures y cuchillas desechables,

REAS QUE ENCONTRAMOS EN EL LABORATORIO DE ANATOMA


PATOLGICA
ESTACIN DE INCLUSIN DE TEJIDOS EN PARAFINA
Es una tcnica de perfusin de la misma en los tejidos para crear un medio homogneo,
que permita la realizacin de los cortes de menor grosor con gran facilidad.
El objetivo es lograr un bloque consistente en el que est incluido el tejido procesado
previamente para poder obtener cortes finos (de 4 a 6 micras de grosor) con el micrtomo.
ELEMENTOS

Dispensador de parafina

Recipiente con parafina lquida para depositar las muestras que no se van a recubrir
con parafina por el momento

Placa fra para que se endurezcan los bloques ya recubiertos

Apartado para los recipientes de metal en los que se ponen los tejidos.

Un protocolo comn de inclusin en parafina es el siguiente:


Equipo modular con un sistema de 2 piezas: centro de inclusin, placa fra y que
pueda agregarse una placa fra adicional.
Encendido automtico.
Capacidad de Tanque de parafina: mnimo 5 litros.
rea de almacenamiento para 200 moldes, la placa fra para un mnimo de 72
moldes convencionales.
Mximo de 10 cm de altura.
Pantalla Tctil que permita ajustar la temperatura y visualizar la misma.
Punto fro que permita enfriado rpido para orientar el espcimen.
Sistema dispensador de parafina controlada por gravedad u caudal de
dispensacin de parafina totalmente ajustable activado con pedal y manualmente.
Iluminacin mediante lmpara algena de 10 vatios con configuraciones de brillo.
Lupa estndar para orientar los especmenes
Fuente de alimentacin integrada para frceps electrocalefactados.

MICRTOMOS
Los micrtomos son instrumentos de corte para la elaboracin de preparados que se usan
en la microscopa. Para cumplir con las altas exigencias de tales preparados, los
micrtomos permiten realizar cortes extremadamente finos.
Las cuchillas del micrtomo estn extremadamente afiladas y pueden causar lesiones de
carcter grave a no ser que se actu con el cuidado pertinente al trabajar con ellas.
Componentes
Un porta bloques con orientacin regulable que avanza sobre una cuchilla
discontinuamente
Un porta cuchillas con un sistema para regular la inclinacin de la cuchilla
Una palanca que acta de tornillo macromtrico que acerca o aleja el porta
bloques a la cuchilla
Un tornillo micromtrico que mueve el porta bloques de arriba hacia abajo
hacindolo incidir sobre la cuchilla y un tornillo en donde pone el grosor de los
cortes.
Use pinzas o pincel en lugar de los dedos para coger las secciones o los
fragmentos de parafina de la cuchilla o de la cara del bloque.
Los micrtomos de rotacin estn equipados con una proteccin de seguridad
(proteccin de la cuchilla o proteccin del dedo), un bloqueo del volante y un
freno del volante para garantizar que se trabaja con seguridad.
La proteccin de seguridad puede estar colocada para cubrir toda la longitud del
filo.
El bloqueo del volante inmovilizara el porta muestras en la parte superior de la
carrera de corte; se debe utilizar al cambiar los bloques.
La proteccin debe estar colocada y el bloqueo del volante activado cuando un
bloque est siendo colocado o eliminado de la pinza porta bloques, o cuando se
est realizando cualquier manipulacin del bloque mientras la cuchilla est
colocada.
La proteccin tambin debe ser utilizada cuando el micrtomo se deja sin
supervisin.
El freno del volante bloqueara el micrtomo en cualquier posicin del mango; se
utiliza al realinear la cara del bloque o al ajustar el avance de desbaste. (1)

BAO DE FLOTACIN
Es un paso que se utiliza para observar tejidos (estudio histolgico), es parte del corte
(microtoma) y se hace de la siguiente manera:
Un tejido baado en parafina (con anterioridad) se pone en agua a 40C, se pone en un
portaobjetos y se aade alcohol para extender y deslizar el tejido, ya deslizado ste, se
levanta y coloca sobre una laminilla. Entonces se pasa a desparasitacin sobre una platina
o estufa a ms de 60C para pasar luego a la tincin (coloracin de tejidos). (2)
BATERA DE TINCIN
Hay muchos tipos de tinciones para diferenciar en los tejidos las diferentes estructuras o
sustancias.
La tincin ms usada o tambin llamada "de rutina" es la de hematoxilina y eosina (H&E).
Se usa un colorante llamado hematoxilina que tie las sustancias cidas o que las
contengan, como el ncleo que contiene cido desoxirribonucleico (ADN) La eosina
amarillenta

tie

las

estructuras

bsicas

como

el

citoplasma

dems

orgnulos eosinoflicosde la clula. (1)

CONCLUSIONES
Pudimos identificar las normas de bioseguridad que debemos aplicar en el
laboratorio de Anatoma Patolgica.
Reconocimos como es un Laboratorio de Anatoma patolgica sus reas.
Identificamos los diferentes equipos y materiales que son necesarios en el rea de
Anatoma Patolgica.
Clasificar cada uno de los desechos que se utilizaron en el laboratorio de
Anatoma Patolgica.

RECOMENDACIONES
Usar

todas las barreras de bioseguridad ya que esto nos ayudar a evitar

accidentes.
Debemos reconocer los diferentes tipos de desechos y ubicarlos en su contenedor
adecuado.

Debemos tener e conocimiento del rea, instrumentos y equipos que se vaya a

utilizar en el rea del laboratorio de Anatoma para trabajar con responsabilidad y


adecuado uso.

Bibliografa
1. Eruditos. Eruditos. [En lnea] [Citado el: 01 de 11 de 2015.]
http://www.eruditos.net/index.php?option=com_content&view=article&id=695:microtomo
&catid=64&Itemid=97.
2. Facmed. Facmed. [En lnea] [Citado el: 02 de 11 de 2015.]
www.facmed.unam.mx/deptos/biocetis/PDF/.../3_tecnica_histologica.pdf.
3. Wikipedia. Wikipedia. [En lnea] [Citado el: 02 de 11 de 2015.]
https://es.wikipedia.org/wiki/T%C3%A9cnica_histol%C3%B3gica.

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