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UNIVERSIDAD DE LOS ANDES

FACULTAD DE INGENIERIA
ESCUELA DE INGENIERIA QUIMICA
AREA DE INGENIERIA AMBIENTAL

LABORATORIO DE
CONTAMINACION
AMBIENTAL

GUA DE PRCTICAS
PROF. JOS O. MAYORGA
2 EDICIN

MRIDA, 2009
Prlogo a la 1a. edicin.
Esta gua consiste de una serie de prcticas desarrolladas con el objeto de reforzar los
conceptos tericos adquiridos en las asignaturas del rea de Ingeniera Ambiental. Se ha
tratado de incluir experimentos en las tres reas donde es ms frecuente la contaminacin:
agua, aire y suelo. Podr advertirse fcilmente que hay un desbalance hacia experimentos
relacionados con el anlisis de aguas, y pocos experimentos donde la matriz es aire o suelo.

Las razones ms importantes son la facilidad de manipulacin de lquidos, el costo de los

materiales y equipos, la informacin disponible para las prcticas y la adecuacin a la
situacin econmica de la Universidad (presupuesto para la adquisicin de equipos, espacio
fsico, uso de equipos de otros laboratorios de nuestra Escuela o de otras Escuelas de la ULA,
etc.)
Aunque, para el momento en que el alumno inscribe esta asignatura, ya ha cursado un nmero
importante de Laboratorios, se ha credo conveniente incluir una serie de pautas mnimas para
el trabajo en el Laboratorio, tratando de inculcarle la idea de que debe mantener la mayor
seriedad en el trabajo a realizar, y de que tenga siempre presente que est manipulando
sustancias peligrosas para su salud. Aparece igualmente la normativa sugerida para la
redaccin de los informes, y en cada una de las prcticas, los aspectos de seguridad a
considerar para la culminacin exitosa de las experiencias. Ante cualquier duda relacionada
con el manejo de compuestos qumicos, es importante consultar la hoja de datos de seguridad
de las sustancias (MSDS por sus siglas en ingls).
Espero que este material sea de utilidad, y las crticas que tengan a bien realizar sobre el
mismo (personalmente, o al correo jmayorga@ula.ve), siempre sern bienvenidas.
El autor

Prlogo a la 2 Edicin
Despus de haber utilizado durante 3 semestres la primera edicin de la Gua, como material
de apoyo del Laboratorio de Contaminacin Ambiental, he notado que una falla recurrente en
los usuarios es en la parte de clculos. Adems, en una asignatura como sta, es natural
comparar los resultados obtenidos con las normas ambientales (nacionales y/o
internacionales), si existen.
En tal sentido, he credo conveniente reforzar ambos aspectos en esta nueva versin. Los
cambios son menores, ya que, en principio, no se puede modificar la lista de prcticas sin la
aprobacin de la Comisin Curricular de la Universidad.
Se han corregido tambin algunos errores de redaccin que han sido captados por los usuarios.
Se mantiene abierta la puerta a la crtica sobre este material, en mi direccin de correo
jmayorga@ula.ve.
Muchas gracias.
El autor

CONTENIDO
Instrucciones generales para el trabajo en el Laboratorio
Medidas de seguridad en el Laboratorio
Manejo de un extintor de incendios
Primeros auxilios
Algunas maneras de reducir riesgos
Normas de redaccin del informe
Prctica 1. Absorcin atmica y emisin de llama
Prctica 2. Coagulacin-floculacin
Prctica 3. Cloro residual
Prctica 4. Partculas totales suspendidas
Prctica 5. Oxgeno disuelto
Prctica 6. Carbono orgnico en suelos
Prctica 7. Grupo coliforme en aguas residuales
Prctica 8. Demanda qumica de oxgeno
Prctica 9. Demanda bioqumica de oxgeno
Prctica 10. Fsforo
Prctica 11. Dixido de azufre
Prctica 12. Oxidantes totales

5
6
7
9
9
10
13
23
32
39
55
65
70
83
92
101
111
120

INSTRUCCIONES GENERALES PARA EL TRABAJO EN EL

LABORATORIO
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Recordar siempre que el laboratorio es un lugar de trabajo serio.

Antes de ir al laboratorio, leer la gua de la prctica a realizar.
Es muy importante la puntualidad a la hora fijada para el inicio de la prctica.
Es condicin indispensable vestir con la bata de laboratorio.
Tener un cuaderno exclusivo para las anotaciones importantes de las prcticas.
El estudiante debe responder a los interrogatorios que se hagan durante el desarrollo de
las prcticas y efectuar los exmenes escritos (si los hubiere).
7. Debe presentarse un informe escrito de la prctica realizada, siguiendo el formato que
se especifica ms adelante.
8. Los alumnos que integran un grupo son responsables de los materiales y aparatos que
se le entregan. Cualquier material perdido o deteriorado deber ser pagado o repuesto
por los integrantes del grupo. Antes del inicio de cada prctica, el grupo chequear que
el material est completo y en buen estado.
9. Durante el desarrollo de los experimentos, no se permite la salida de los estudiantes.
Se autorizar la salida slo en casos especiales, autorizados por el profesor. Est
prohibido fumar y consumir alimentos o bebidas dentro del laboratorio
10. Slo se recupera una prctica perdida, previa justificacin, y al final del semestre, de
mutuo acuerdo con el profesor y el tcnico del laboratorio.
11. Al finalizar el trabajo de laboratorio, debe entregarse al profesor una hoja de datos,
segn formato que se entrega el primer da de clase.
Para informacin adicional, consultar las Normativas Generales de los Laboratorios
de la Escuela de Ingeniera Qumica, aprobadas por el Consejo de Escuela el
26/04/2005 y el Reglamento que regula la Evaluacin de los Aprendizajes de las
Carreras de la Facultad de Ingeniera de la ULA, aprobado por el Consejo
Universitario el 14/10/2002.

MEDIDAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO

1. Si se produce un accidente, avisarse inmediatamente al profesor o al tcnico.

2. Si alguna sustancia salpica o cae en la piel o en los ojos, lavarse inmediatamente con
agua y avisar al personal del laboratorio.
3. Realizar en la campana extractora aquellos experimentos donde se producen gases o
vapores txicos. Igualmente, utilizar la campana para la preparacin de soluciones a
partir de reactivos que desprenden olores nocivos.
4. Efectuar nicamente los trabajos especificados en la prctica.
5. No probar ningn producto qumico o solucin, ni tocar con las manos ninguna
sustancia, a menos que se indique en la prctica.
6. Para preparar una solucin diluida a partir de otra concentrada, utilizar el
propipeteador o el pipeteador automtico. Nunca succionar con la boca. Recordar que
no se debe soplar la pequea porcin de lquido que queda en el extremo de la pipeta o
bureta.
7. No utilizar toallas, pauelos o papel para manipular objetos calientes. Emplear las
pinzas apropiadas.
8. Al calentar una sustancia en un tubo de ensayo, dirigir el extremo abierto del tubo
hacia una parte que no pueda daar a ninguna persona (el contenido del tubo puede
proyectarse hacia el exterior).
9. Para preparar una solucin acuosa diluida de un cido, verterse lentamente y con
agitacin, el cido sobre el agua. Nunca el agua sobre el cido.
10. Revisar cuidadosamente las etiquetas de los frascos de los reactivos antes de
utilizarlos.
11. Para percibir un olor de un lquido o un gas que se desprende, no acercar la nariz al
recipiente. Pasar la mano suavemente sobre la boca del recipiente, para formar una
corriente hacia usted.
12. Poner especial cuidado al emplear aparatos o instrumentos de vidrio. Si estn calientes,
dejar pasar un tiempo prudencial para que se enfren, antes de manipularlos.
13. Utilizar los recipientes especiales para colocar los desperdicios slidos. No colocarlos
en el fregadero.
14. Nunca deben calentarse objetos de vidrio templado, tales como matraces o cilindros
graduados, ya que se agrietan o rompen con facilidad.
15. Cuando se va a enrasar un matraz aforado, levantar el recipiente a la altura de los ojos
y aadir la cantidad necesaria de lquido.
16. Familiarizarse con el sitio donde se encuentra el extintor de incendios y con su uso. De
producirse un pequeo incendio en un recipiente, tratar de dominarlo cubriendo el
objeto o lugar incendiado con una toalla mojada. Avisar al personal del laboratorio. En
caso extremo, utilizar un extintor de incendios. (ver ms adelante: Manejo de un
extintor de incendios)
17. Conservar limpios los aparatos y el mesn. Evitar derramar sustancias. Si ocurre un
derrame, lavar inmediatamente con agua.
18. Dejar todo el material y equipo perfectamente limpio y ordenado antes de retirarse del
laboratorio. Si hay agua sobre el mesn, secarla utilizando papel absorbente.
MANEJO DE UN EXTINTOR DE INCENDIOS:
En el mercado existe una gran variedad de extintores, cuyas normas de uso estn impresas
claramente en el equipo. Para que el extintor sea efectivo:

1. Debe estar situado en un lugar apropiado y en perfectas condiciones de

funcionamiento.
2. Al descubrirse un fuego, debe ser lo suficientemente reducido, para que el extintor
sea efectivo.
3. La persona que descubra el fuego debe estar preparada y ser capaz de utilizar el
extintor.
4. El extintor debe ser adecuado para el fuego que se desea extinguir (ver la Tabla 1
en la siguiente pgina). As, puede utilizarse agua para incendios de materiales
slidos (basura, papel, trapos, madera, tela, paja); para aceites y grasas poco
voltiles y fuegos elctricos. Se emplea un extintor de CO 2 o de espuma para
fuegos producidos por lquidos inflamables o gases combustibles (metano,
propano, butano, acetileno, etc.).
TABLA 1.CLASIFICACIN DE LOS FUEGOS Y AGENTES EXTINTORES
APROPIADOS

Las causas de los incendios pueden ser mltiples. Un incendio, al iniciarse no reviste mayor
gravedad: es el efecto multiplicador (el fuego calienta el material combustible ms prximo,
que a su vez se incendia y calienta el siguiente, etc.), el que hace que se propague
rpidamente, alcanzando proporciones difciles de controlar.

Las causas principales de un fuego son:

Qumicas: reacciones exotrmicas
Mecnicas: rozamientos
Elctricas: instalaciones defectuosas, mal uso del equipo
Trmicas: contacto de una fuente de calor con el combustible (son las ms
frecuentes).
Para que exista fuego, deben estar presentes el combustible (el que arde) y el comburente
(oxgeno del aire). A estas dos sustancias se agrega el calor:
Combustible + oxgeno + calor = Fuego
El combate de los incendios se basa en eliminar al menos uno de los tres factores
(combustible, oxgeno o calor), y actuar con rapidez para que el fuego no pueda continuar.
Entre los bomberos franceses circula el siguiente dicho:
En el primer minuto, el fuego se apaga con un vaso de agua
En el segundo, con un tobo de agua
En el tercero, con un tonel de agua
Despus, se hace lo que se puede

PRIMEROS AUXILIOS

Quemaduras de los ojos por sustancias qumicas: Lavarse inmediatamente con

abundante agua o mejor con solucin isotnica estril. Consultar al personal del
laboratorio.

Quemaduras de la piel por sustancias qumicas: Si es una sustancia alcalina: lavar

con abundante agua y tratar la parte afectada con solucin de cido actico al 2 %.

Las quemaduras producidas por cidos corrosivos deben tratarse con abundante
agua y solucin de bicarbonato de sodio.

Quemaduras de la piel por objetos calientes: Tratar con solucin de cido pcrico
o cido brico. Cubrir la parte afectada con gasa o tela adhesiva.

Incendio de la ropa o contacto considerable con bases o cidos corrosivos:

utilizar de inmediato la ducha y consultar al personal del laboratorio. Es muy
importante conocer el lugar donde se encuentra el gabinete de primeros auxilios y
las duchas.
ALGUNAS MANERAS DE REDUCIR LOS RIESGOS:

1. Leer las etiquetas de los envases de las sustancias qumicas y seguir las
instrucciones con cuidado.
2.

Encontrar sustitutos para las sustancias peligrosas, siempre que sea posible.
3.

No ignorar las reglas de seguridad

4.

Apoyar las leyes ambientales

5.

Compartir conocimientos con los dems.

Bibliografa consultada

1. Rodolfo de Gil, E y otros: Manual de Laboratorio de Qumica General. pp. 4-8.

Consejo de Publicaciones. ULA. 1984.
2. Reymundo M., M. F. Lpez y E. Prez:Prcticas (Qumica). Operador de Planta.
Unidad Didctica 2. Paraninfo. Madrid. 1976.
3. Harte,J., C. Holdren, R. Schneider y C. Shirley:Gua de las Sustancias
Contaminantes. p. 13. Grijalbo. Mxico. 1995.

10

NORMAS DE REDACCION DEL INFORME

Los informes se presentarn preferentemente escritos a computadora, en letra Times New

Roman tamao 12, a doble espacio, con pginas numeradas en la parte superior derecha.
De ser posible, evitar el uso de una misma palabra en frases consecutivas. Apoyarse en el
empleo de sinnimos.
Toda referencia citada debe ser del dominio pblico y fcilmente accesible. Las
referencias se colocan al final, ordenadas de acuerdo a su orden de aparicin en el texto.
Las llamadas a las citas se hacen con el apellido del (de los) autor(es) y el ao de la
publicacin, todo entre parntesis. Ej.: (Covenin 1996), (Gonzlez y col., 1995). Otra
opcin es colocar al final de la frase referenciada un nmero entre parntesis, Ej.: (1).
A continuacin, se muestran ejemplos de referencias a:
(1) Monografa
(2) Publicacin peridica:
(1) COVENIN. Determinacin de la concentracin de partculas totales suspendidas en la
atmsfera (PTS). Editorial Fondonorma. Norma Venezolana COVENIN 2060, 1996.
(2) Gonzlez M. y col.: Caractersticas del parque automotor venezolano y de las
gasolinas en Venezuela. Visin Tecnolgica, 1(2):2-12, 1995.

El informe se entrega a los 7 das de la fecha de realizacin de la prctica. Se descontar

un punto por da de retraso (incluyendo fines de semana).
Las partes del informe se pueden colocar en hojas separadas, o consecutivamente, como un
texto corrido. El esquema de presentacin del informe es:
CARATULA: De acuerdo al siguiente modelo (centrado):
UNIVERSIDAD DE LOS ANDES
FACULTAD DE INGENIERIA
INGENIERIA QUIMICA
LABORATORIO DE CONTAMINACIN AMBIENTAL
NMERO Y TITULO DE LA PRCTICA
(Ej.: PRACTICA 5. OXIGENO DISUELTO)
FECHA DE REALIZACION DE LA PRCTICA: dd/mm/aaaa
FECHA DE ENTREGA DEL INFORME: dd/mm/aaaa
GRUPO N:
INTEGRANTES:

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INDICE (o CONTENIDO): A dos columnas: una contiene las partes del informe y la otra la
pgina correspondiente.
RESUMEN: Es la representacin comprimida del contenido del informe, que incluye el
objetivo principal, la metodologa, los resultados y conclusiones ms relevantes (lo que se
buscaba, cmo se realiz, lo que se encontr y las implicaciones del estudio). La extensin
mxima del resumen es de 200 palabras.
Si cada parte del informe se inicia en hojas separadas, no se debe numerar la pgina del
RESUMEN. Si se prefiere el texto corrido, se puede numerar las pginas iniciando con la del
RESUMEN (que seguramente contendr tambin la primera parte de la INTRODUCCIN).
INTRODUCCION: Se refiere al objeto del estudio, haciendo referencia a los antecedentes,
evaluando su alcance, y suministrando informacin suficiente sobre el tema del estudio. No se
debe copiar textualmente la Gua de Prcticas, ni textos sacados de Internet (decir lo mismo,
utilizando palabras propias). Si en cualquier parte del informe hay Tablas o Figuras, debe
referirse a ellas en el texto (si no, no hacen falta).
PARTE EXPERIMENTAL: Resumir la metodologa seguida para obtener los resultados.
Describir equipos (marca, modelo), procesos, materiales y reactivos (concentracin), de forma
tal que el lector pueda reproducir lo realizado. Si es necesario, incluir un diagrama del equipo.
Puede utilizarse la representacin de diagrama de flujo para el procedimiento utilizado. No
copiar tampoco aqu la Gua de Prcticas.
RESULTADOS: En forma de tablas, figuras o texto. Los grficos deben llamarse figuras.
Las tablas y figuras siguen numeracin arbiga consecutiva. La leyenda para la tabla se coloca
en la parte superior y para la figura en la parte inferior. Si se utilizan ecuaciones, se numeran
tambin consecutivamente con nmeros arbigos entre parntesis en el margen derecho.
Tanto las tablas como las figuras deben mencionarse en el texto.
DISCUSION: Clara y concisamente, analizar los resultados y defender las correlaciones que
de ellos se desprendan. Comparar los resultados con los correspondientes de la bibliografa
(cuando se conozcan). Aportar evidencias sobre las proposiciones.
Algunos autores incluyen los resultados y su discusin en una misma seccin del informe, que
tiene como encabezado RESULTADOS Y DISCUSION.
CONCLUSIONES: Claras y concisas, describen las implicaciones de los resultados. No
deben constituir una repeticin resumida de la discusin. Para su redaccin, puede utilizarse
un esquema numerado o vietas.
REFERENCIAS: Ordenadas segn su aparicin en el texto, siguiendo el esquema explicado
previamente.
ANEXOS: Material adicional o de soporte, que complementa la informacin presentada en el
informe, pero es relativamente independiente de ste. Ej.: copias de decretos, parte de libros,

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artculos, informacin de Internet, etc. que no se coloca en el cuerpo del informe, pero al que
se hace referencia. (En el texto, se expresa: Ver Anexo A, o Anexo 1, etc.). Tambin se
incluyen en Anexos los datos experimentales y la muestra de clculo.
LISTA DE PRCTICAS
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.

ABSORCION ATOMICA Y EMISION DE LLAMA

COAGULACIN-FLOCULACIN
CLORO RESIDUAL
PARTICULAS TOTALES SUSPENDIDAS
OXIGENO DISUELTO
CARBONO ORGANICO EN SUELOS
GRUPO COLIFORME
DEMANDA QUIMICA DE OXIGENO
DEMANDA BIOQUIMICA DE OXIGENO
FOSFORO
DIXIDO DE AZUFRE
OXIDANTES TOTALES
Nota: El orden de realizacin de las prcticas no necesariamente corresponde al de la
lista.

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PRACTICA 1. ABSORCION ATOMICA Y EMISION DE LLAMA

Introduccin

ABSORCIN ATMICA
La tcnica de absorcin atmica tiene su fundamento en la capacidad que posee un tomo en
su estado fundamental (no excitado) de absorber radiacin de una longitud de onda particular.
Puede establecerse entonces una relacin lineal entre la concentracin del elemento que se
est analizando y la cantidad de luz absorbida.
Matemticamente, la ley de Beer (Lambert-Beer o Bouguer-Beer) establece que la
absorbancia, A, de una muestra homognea que contenga una sustancia absorbente es
directamente proporcional a la concentracin, C, masa/volumen, de la sustancia absorbente:

A = abC
Donde a es la absortividad molar del componente de inters en la solucin, y b corresponde a
la longitud de la trayectoria de la luz dentro del recipiente donde se encuentra la solucin (se
asume constante). Esta ley se aplica no slo a soluciones sino tambin a gases (como es el
caso de esta prctica) y slidos.
La produccin de tomos en el estado fundamental para la absorcin se realiza normalmente
disociando la muestra en una llama o en un horno de grafito. La lnea de emisin de radiacin
caracterstica proviene, generalmente, de una lmpara de ctodo hueco del elemento que se
desea analizar y que emite radiacin correspondiente a la energa requerida para la transicin
electrnica desde el estado fundamental hasta el estado excitado. Los gases de la llama del
quemador absorben parte de la radiacin y el resto pasa a un monocromador y a un detector.
La absorcin de la radiacin de la lmpara depende de la poblacin de tomos en estado
fundamental, que es proporcional a la concentracin de la solucin que llega a la llama. La
absorcin se mide por la diferencia en la seal transmitida en presencia y ausencia del
elemento de inters. (ver Fig. 1).

Fuente
de
energa

Lmpara de
ctodo hueco

Llama

Monocromador

Foto detector

Registrador

FIGURA 1. ESQUEMA DEL PROCESO DE ABSORCIN ATMICA.

EMISION DE LLAMA
La emisin de llama se asemeja bastante a la absorcin atmica. La principal diferencia es que
la primera mide la cantidad de luz emitida y la segunda cuantifica la luz absorbida por el
elemento atomizado en la llama. Ambos mtodos emplean la llama para la excitacin de los
tomos, pero la emisin no requiere lmpara. La llama de aire-acetileno, debido a su

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temperatura relativamente baja (unos 2300 C), posee energa suficiente para excitar slo una
docena de elementos de inters analtico frecuente. En el caso de elementos que forman
compuestos refractarios se requiere utilizar la llama de xido nitroso-acetileno (2700 C) o de
oxgeno-acetileno (3100 C), lo que implica el uso de un quemador especial.
Algunos elementos fcilmente excitables (alcalinos y alcalinotrreos) se miden fcilmente por
emisin de llama. En la emisin de llama, la variable que se mide es la intensidad de emisin
(o emisin), mientras que en la absorcin atmica se registra la absorbancia (o menos
frecuentemente, la transmitancia o el %T).
La absorcin atmica se puede aplicar directamente a unos 70 elementos, incluyendo la
mayora de los metales, pero deja fuera el azufre, el carbono, los halgenos y los gases nobles,
aunque algunos de ellos pueden determinarse indirectamente (p. ej. el azufre como sulfato de
bario). En relacin con interferencias comunes, la del fsforo en la medicin de calcio y
magnesio se reduce con la adicin de lantano y la del silicio con el hierro y manganeso se
minimiza al agregar calcio.
Las ventajas de la tcnica incluyen la especificidad, rapidez, facilidad de uso y sensibilidad
(los lmites de deteccin estn en el orden de las subpartes por billn a pocas partes por
milln) adems de equipos de costo moderado.
Las desventajas ms importantes son la vida finita de las lmparas (2 a 3 aos) y su costo (si
se van a determinar un gran nmero de elementos), adems de que se puede medir un solo
elemento a la vez.
Los equipos ms avanzados incluyen la automatizacin y el manejo de datos, con opciones
como la medicin directa de la concentracin, correccin de la curvatura y el control por
computadora. Otras posibilidades disponibles incluyen el control automtico de la longitud de
onda, la posicin de la lmpara y el manejo de gases, automuestreadores programables,
almacenamiento de tcnicas analticas, manejo simultneo de 6 a 8 lmparas y generacin
automtica de reportes.
El procedimiento que se describe a continuacin se aplica en esta prctica a la medicin de
hierro y nquel por absorcin atmica y de sodio y calcio por emisin de llama, pero puede
adaptarse con facilidad a otros elementos qumicos.
Aspectos legales

Cuando se revisan las leyes ambientales venezolanas, se puede conseguir informacin sobre
niveles mximos permisibles de algunos de los elementos que se determinan en esta prctica.
El Decreto 883 establece en su Art. 10 que las descargas a cuerpos de agua no deben contener
ms de 10 mg de hierro total por litro. Para descargas al medio marino costero, el nquel total
no debe sobrepasar los 2 mg/L, mientras que si el efluente va a redes cloacales, los lmites
para el hierro y nquel son, respectivamente, 25 mg/L y 2 mg/L.

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En cuanto al agua para consumo humano, las normas de calidad del agua potable establecen
los siguientes lmites, mg/L: dureza, CaCO3 250; sodio 200; hierro total 0.1; nquel 0.02.
En relacin al agua para uso industrial, no existen lmites mximos de contaminantes
establecidos en Venezuela. Los niveles permitidos en EUA dependen, obviamente, del tipo de
actividad a la que se destina el agua. Los valores recomendados para dos de los parmetros
medidos en el laboratorio van desde 0 hasta las 250 ppm para la dureza y desde 0,0 hasta 1,0
ppm para el hierro.
Para mayores detalles sobre normas internacionales (por ej., para los pases andinos, EUA o de
la Comunidad Europea), puede realizarse una bsqueda por Internet.
Resumen

En la espectrofotometra de absorcin atmica, se aspira un patrn o una muestra bajo la

forma de un vapor dentro de una llama, donde se convierte en un vapor formado por tomos
en estado fundamental. La llama suministra energa a los tomos para absorber radiacin
electromagntica a una longitud de onda muy especfica. La luz de la fuente (lmpara de
ctodo hueco o similar) se asla en un monocromador y se lee en un fotodetector. La radiacin
absorbida por el elemento que se determina se cuantifica al comparar la luz que pasa a travs
de la llama cuando se vaporiza una solucin de concentracin conocida de ese elemento con la
de la nebulizacin de una solucin que no contiene nada del mismo elemento (blanco).
Como se dijo previamente, la emisin de llama es similar a la absorcin atmica, con la
diferencia que en la emisin se mide la cantidad de radiacin emitida por el elemento.
Significado y uso

Deben identificarse los constituyentes elementales de las aguas blancas y servidas para
reforzar el monitoreo efectivo y de control de los programas de calidad del agua. Uno de los
procedimientos ms utilizados es la espectrofotometra de absorcin atmica (EAA). La
mayor ventaja de esta tcnica sobre la emisin atmica (EA) es la casi total ausencia de
interferencias espectrales.
Precauciones de Seguridad

Esta prctica puede involucrar el empleo de materiales, operaciones y equipos peligrosos. No

se asume que se describan aqu todos los problemas de seguridad relacionados con su uso.
Queda bajo la responsabilidad del usuario establecer las prcticas apropiadas y la aplicacin
de medidas especficas para desarrollar actividades seguras. Considerar, sin embargo, los
siguientes aspectos:
1. La mayor parte de tipos de muestras y patrones contenidos en esta prctica no tienen
peligro para el analista. Se recomienda el uso de una campana, ropa de seguridad y lentes
especiales para preparar soluciones donde hay una reaccin exotrmica entre el solvente y el
soluto, por ejemplo, la disolucin del xido de lantano en cido. Se requieren las mismas
precauciones al diluir cidos concentrados, para evitar contacto con la piel o con el aparato
respiratorio.
2. Se requiere un sistema de ventilacin para eliminar la gran cantidad de gases calientes y a
veces txicos, producidos por el quemador durante la operacin del instrumento. Siendo el

16

acetileno un gas inflamable, deben tomarse las precauciones apropiadas durante su uso. Si el
espectrofotmetro no est equipado con un vidrio de seguridad, el operador debe utilizar
lentes protectores para atenuar la luz ultravioleta emitida por la llama.
3. Los gases oxidantes deben estar separados por una pared de los gases reductores.
4. Deben seguirse las instrucciones del fabricante al optimizar los flujos de gases. Si no se
hace as, puede producirse una combustin peligrosa dentro de la cmara de mezclado.
5. Para evitar explosiones en lnea, no debe permitirse que la presin de acetileno exceda 165
psig.
6. Cuando se utiliza xido nitroso como oxidante, debe emplearse el quemador estndar de 2
pulgadas. Ocurrir una retrollama si se utiliza el quemador de 4 pulgadas. La llama de xido
nitroso-acetileno se enciende utilizando primero una combinacin aire/acetileno y cambiando
luego a xido nitroso/acetileno. El sistema se apaga utilizando el procedimiento en orden
inverso. No debe pasar xido nitroso a travs de lneas que contengan residuos de grasa o
aceite porque puede producirse una explosin.
7. Es extremadamente importante chequear que el tubo de drenaje de la cmara de mezcla se
encuentre lleno con agua antes del inicio de cualquier anlisis. En caso contrario, puede
producirse una explosin. Se recomienda para tal fin una trampa de seguridad tipo lazo (muy
frecuente) o de vlvula. Seguir las instrucciones del fabricante.
Interferencias

1. Absorcin de fondo: se produce cuando se forman especies moleculares de la muestra que

dispersan o absorben la luz emitida por la lmpara de ctodo hueco. Cuando no se corrige este
problema, las lecturas son anormalmente altas. Si no est disponible la opcin de correccin
de fondo, debe chequearse la existencia de una longitud de onda donde no haya absorcin o
debe igualarse la matriz de los patrones y las muestras. Esta correccin generalmente no es
necesaria, a menos que la concentracin de slidos en la muestra sea muy alta (>1 %) o que el
anlisis se realice a una longitud de onda muy corta (<210 nm) o ambos. Es mejor extraer las
muestras con alto contenido de slidos. Existen tres mtodos para la correccin de la emisin
de fondo: la fuente continua, la correccin de Zeeman y el sistema de Smith-Hieftje
2. Interferencia qumica: Es la ms usual. Esta interferencia puede prevenir, reducir o
incrementar la formacin de tomos en el estado fundamental en la llama. En la determinacin
de calcio, por ejemplo, la presencia de sulfato o fosfato puede producir la formacin de sales
que impiden la atomizacin de la solucin en la llama aire-acetileno. Tal interferencia se
elimina empleando la llama xido nitroso-acetileno. De manera similar, el aluminio produce
una interferencia equivalente en la medicin de magnesio. La adicin de sustancias
acomplejantes apropiadas puede reducir o eliminar la interferencia qumica, incrementando la
sensibilidad del mtodo. En esta prctica, la interferencia del fsforo en la medicin del calcio
y magnesio se reduce con la adicin de lantano y la de silicio con el hierro y manganeso, al
aadir calcio.
3. Los metales alcalinos y alcalinotrreos, grupos I y II, tales como el sodio y el potasio
pueden sufrir ionizacin en las llamas de aire-acetileno y xido nitroso-acetileno, produciendo
una disminucin en la cantidad de tomos en estado fundamental disponibles para la EAA. En
presencia de un exceso de un elemento alcalino fcilmente ionizable, como el cesio, ocurre
primero la ionizacin del elemento alcalino, disminuyendo as la del elemento de inters.
4. Si una muestra de un elemento en baja concentracin se analiza inmediatamente despus
de otra que contenga una alta concentracin, pueden obtenerse valores elevados. Para prevenir

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este problema, es recomendable aspirar agua destilada por unos 15 s entre muestras,
dependiendo de la concentracin del elemento en la ltima muestra analizada. Al aspirar agua
destilada, la lectura de absorbancia debera regresar a un valor muy prximo al de la lnea
base.
5. Las propiedades fsicas de la solucin aspirada no solo cambian la velocidad de ingreso
del lquido al nebulizador, sino que tienen un efecto importante sobre la sensibilidad. Los
solventes orgnicos usualmente incrementan la sensibilidad. Los slidos disueltos, por el
contrario, la reducen.
Aparato

Espectrofotmetro de absorcin atmica y emisin de llama con una fuente de emisin de luz
(lmpara de ctodo hueco), un dispositivo para vaporizar la muestra (usualmente una llama),
un medio para aislar la lnea de absorcin (monocromador o filtro) y un detector fotoelctrico
con su amplificador y equipo de medicin asociado (ver Fig. 1). Los gases a utilizar son aireacetileno (para nquel y hierro) y xido nitroso-acetileno (para sodio y calcio). El
procedimiento que se da a continuacin se ha extrado del Manual de Operacin del Equipo
Buch Scientific Modelo 200A. Referirse al manual apropiado del espectrofotmetro a utilizar.
Reactivos y Materiales

A. REACTIVOS:
1. Pureza de los reactivos: Todos los reactivos a utilizar deben ser de pureza para anlisis. Es
de la responsabilidad del usuario chequear la pureza de las sustancias utilizadas para esta
prctica
2. Pureza del agua: A menos que se especifique otra cosa, debe utilizarse agua bidestilada.
3. Combustible, acetileno, C2H2: La pureza mnima aceptable es de 99,5 % vol. Normalmente
se cambia el cilindro cuando la presin alcanza 75 psig, si se utiliza acetona como solvente
para el acetileno. Algunos fabricantes recomiendan diferentes presiones para la sustitucin del
cilindro. El analista debe seguir las instrucciones del fabricante. Hay cilindros de pureza ms
alta que pueden utilizarse hasta los 30 psig antes de su reemplazo. Debe evitarse el introducir
solvente dentro del EAA, porque adems de un ruido de fondo anormalmente alto en las
mediciones, puede producirse un dao irreversible en el equipo.
4. Oxidante (aire): La fuente puede ser un compresor o un cilindro de gas. El aire debe
acondicionarse, hacindolo pasar a travs de un elemento filtrante que remueva aceite, agua y
partculas. Referirse al manual del fabricante para el ajuste de las presiones mnima y mxima.
5. Oxidante (xido nitroso): para alcanzar la temperatura de llama de ciertos elementos, puede
requerirse el empleo de xido nitroso grado industrial o grado mdico.
6. Soluciones madre de los patrones: Pueden adquirirse en el mercado o prepararse a partir de
reactivos de muy alta pureza. Las soluciones deben almacenarse en frascos de polietileno de
alta densidad o vidrio, a temperatura ambiente. Debe colocarse en una etiqueta sobre el frasco
la fecha de preparacin y de vencimiento. Tales soluciones deben chequearse peridicamente
por signos de deterioro.
Nota: Puede utilizarse tambin el polipropileno para la recoleccin y almacenamiento de las muestras. Sin embargo, se han
reportado problemas de adsorcin de metales sobre las paredes del recipiente. El analista debe realizar estudios para
determinar, en su caso particular, si la adsorcin es una limitante.

Las soluciones madre de los patrones se preparan de la siguiente forma:

18

1. Calcio: A 2,4972 g de carbonato de calcio (CaCO3), aadir 50 mL de agua destilada y gota

a gota, un volumen mnimo de HCl concentrado (aproximadamente 10 mL) para la disolucin
completa. Diluir a 1000 mL con agua destilada. 1,00 mL de esta solucin equivale a 1,00 mg
de calcio.
2. Hierro: Disolver 1,0000 g de alambre de hierro en 50 mL de HNO 3 (1+1). Diluir a 1000 mL
con agua destilada. 1,00 mL de esta solucin equivale a 1,00 mg de hierro.
3. Nquel: Disolver 4,9530 g de Ni(NO3)2.6H2O en aproximadamente 200 mL de agua
destilada. Aadir 1,5 mL de HNO3 concentrado y enrasar a 1000 mL con agua destilada. 1,00
mL de esta solucin equivale a 1,00 mg de nquel.
4. Sodio: Disolver 2,5420 g de NaCl (previamente secado a 140 C por 30 minutos) y diluir a
1000 mL con agua destilada. 1,00 mL de esta solucin equivale a 1,00 mg de sodio.
Soluciones de concentracin intermedia: Diluir 10,00 mL de solucin de cada estndar a 100,0
mL con agua destilada. 1,00 mL = 100 g de cada elemento. Utilizar estas soluciones
intermedias para preparar los patrones para las curvas de calibracin de cada elemento en los
siguientes rangos:
Hierro, nquel y sodio: 0 a 10 ppm
Calcio: 0 a 100 ppm.
Solucin de lantano para calcio (SLC): Disolver 58,65 g de xido de lantano, La 2O3, en
250 mL de HCl concentrado, aadiendo el cido lentamente, hasta que el slido se
disuelva. Diluir a 1000 mL con agua destilada.
Solucin de calcio para hierro (SCH): Disolver 630 mg de carbonato de calcio, CaCO 3, en
10 mL de HCl concentrado. Aadir 250 mL de agua destilada. Si es necesario, hervir
suavemente la solucin, para obtener la disolucin total. Enfriar y diluir a 1000 mL con
agua destilada.
B. MATERIALES:
Balanza analtica
Matraces aforados de 100 y 1000 mL
Cilindros graduados de 25, 50 y 250 mL
Pipetas volumtricas de 2, 5 y 10 mL
Pipetas graduadas de 5 mL
Para la calibracin del calcio (y Mg) se mezclan 100 mL de cada patrn y de cada muestra con
25 mL de solucin de lantano (SLC) antes de la aspiracin de la solucin en la llama.
En la calibracin del hierro (y Mn) se mezclan 100 mL de cada patrn y de cada muestra con
25 mL de solucin de calcio (SCH) antes de la aspiracin de la solucin en la llama.
Todas las soluciones deben ser preparadas en el momento del anlisis. Algunas son estables.
Es la responsabilidad del analista determinar la estabilidad de los patrones. Utilizar siempre

19

pipetas volumtricas. Para la construccin de las curvas, emplear al menos tres patrones y el
blanco. La concentracin ms baja del patrn debe ser, en lo posible, menor o igual a la
anticipada para la muestra. La concentracin ms elevada corresponde al tope de linealidad,
sin sobrepasar el valor de absorbancia igual a 1,00.
Si la absorbancia de una muestra excede el rango de trabajo de los patrones, diluir con agua
destilada y analizar de nuevo.
Muestras y mtodos de muestreo

1. Manipulacin de las muestras: Para la determinacin de trazas de metales, deben

extremarse las precauciones respecto de la contaminacin y prdidas de muestra. Particular
importancia tienen la presencia de partculas en el ambiente del laboratorio, impurezas en los
reactivos y en los aparatos del laboratorio que estn en contacto con la muestra. Los
recipientes de las muestras pueden introducir errores en la medicin de trazas de metales por
lavado o desorcin de la superficie o reduccin de la concentracin por adsorcin en las
paredes.
2. Recipientes para la muestra: Deben recolectarse muestras representativas en recipientes
limpios de vidrio, polietileno de alta densidad o polipropileno. No deben emplearse
recipientes con tapa metlica.
3. Tamao de la muestra: Debe ser suficiente para el anlisis a realizar. En general, se utilizan
unos pocos mililitros. Sin embargo, si se requiere un anlisis mltiple, puede ser necesario un
volumen mayor.
4. Preservacin de la muestra: En la mayora de los casos, se preservan por la adicin de
cido ntrico a pH menor a 2. Algunos metales requieren un tipo diferente de preservacin.
Referirse al mtodo especfico. Si slo se van a determinar elementos solubles, antes de
agregar el cido, pasar la muestra a travs de un filtro de membrana de 0,45 m de dimetro.
El filtrado y preservacin deben realizarse tan pronto como sea posible, mejor al momento de
la recoleccin.
5. Almacenamiento de la muestra: Las muestras que contienen cantidades trazas del elemento
de inters deben analizarse tan pronto como sea posible, preferiblemente cuando son
recolectadas. Algunas muestras pueden almacenarse hasta por 6 meses, si se preservan
adecuadamente.
Procedimiento

Operacin del instrumento: Debido a las diferencias entre marcas y modelos, no es posible
establecer un procedimiento general, aplicable a todos los aparatos. Referirse al manual de
operacin del equipo. Normalmente, se siguen estos pasos, aplicables al equipo disponible en
el Laboratorio (Espectrofotmetro de Absorcin Atmica/Emisin de llama Buck Scientific
200A):
A. Hierro y nquel por absorcin atmica:
1. Instalar la lmpara de ctodo hueco, seleccionar la longitud de onda (ver el manual del
equipo) y alinear la lmpara.
2. Seleccionar la rendija (consultar el manual del equipo).
3. Encender el instrumento y aplicar la intensidad de corriente sugerida por el fabricante
de la lmpara.
4. Dejar el instrumento en calentamiento por 10 a 20 minutos.

20

5. Instalar el quemador de aire-acetileno.

6. Encender el sistema de extraccin de gases y abrir el acetileno (sin encender la llama).
Ajustar el flujo de este gas al valor especificado por el fabricante del equipo. Cerrar el
acetileno.
7. Abrir el aire y ajustar su flujo al valor especificado.
8. Abrir el acetileno y encender la llama.
9. Atomizar agua destilada. Ajustar, si es necesario, el flujo de atomizacin a 3-5
mL/min.
10. Atomizar un estndar de concentracin intermedia y ajustar el quemador, si es
necesario, hasta obtener mxima respuesta. El instrumento est listo para analizar los
patrones y las muestras.
11. Aspirar los patrones, empezando por los de menor concentracin. Leer y anotar la
absorbancia. Entre patrones, limpiar el quemador, nebulizando agua destilada.
12. Leer la absorbancia de las muestras, siguiendo un procedimiento similar al de los
patrones. Chequear un patrn despus de haber ledo un mximo de 10 muestras. Los
valores obtenidos deben estar dentro de 3 veces la desviacin estndar de los
conseguidos inicialmente. Si ese no es el caso, recalibrar el equipo y analizar de nuevo
todo el grupo de patrones y muestras. Anotar las absorbancias de las muestras.
13. Para apagar la llama, cerrar el acetileno y dejar que la llama se extinga. Cerrar el aire.
14. Vaciar las lneas de gases, luego de cerrar las vlvulas de los cilindros. Apagar el
equipo y el sistema de extraccin de gases.
1.
2.

5.
6.
7.
8.

13.

B. Sodio por emisin de llama:

Retirar las lmparas.
Pulsar el botn EMISSION en el panel frontal del equipo.
3. Colocar el botn selector en la posicin ABS/ZERO. Los interruptores INTEG y
MAN ZERO deben estar en la posicin OUT.
4. Girar el control CURVE totalmente hacia la posicin tope contra las agujas del
reloj.
Fijar la longitud de onda y la rendija.
Encender el sistema de extraccin.
Abrir el flujo de aire.
Abrir el flujo de acetileno y encender la llama.
9. Aspirar un patrn de concentracin similar a la de la muestra y, utilizando el control
ABS/ZERO, colocar aproximadamente 0,500 en la pantalla digital. Retirar la
solucin patrn.
10. Aspirar el blanco, y utilizando ahora el control CURVE, colocar cero en la pantalla
digital.
11. Aspirar cada patrn empezando por los de menor concentracin. Leer y anotar la
absorbancia. Entre patrones, limpiar el quemador, nebulizando agua destilada.
12. Aspirar las muestras, siguiendo un procedimiento similar al de los patrones. Chequear
un patrn despus de haber ledo un mximo de 10 muestras. Los valores obtenidos
deben estar dentro de 3 veces la desviacin estndar de los iniciales. Si no, recalibrar el
equipo y realizar otra vez la medicin de patrones y muestras. Anotar las absorbancias.
Para apagar la llama, cerrar el acetileno, dejar extinguir la llama y cerrar el aire.
14. Vaciar las lneas de gases, luego de cerrar las vlvulas. Apagar el equipo y el sistema
de extraccin de gases.

21

C. Calcio por emisin de llama:

1. Los pasos 1 a 5 son idnticos al procedimiento utilizado para el sodio.
2. Instalar el quemador de xido nitroso/acetileno.
3. Encender el sistema de extraccin. Abrir el acetileno (sin encender la llama) y ajustar
su flujo al valor especificado. Cerrar el acetileno.
4. Abrir la vlvula del cilindro de xido nitroso y encender el sistema de calentamiento
del manmetro. Fijar el voltaje del calentador del manmetro al valor especificado por
su fabricante.
5. Con los suministros de aire y xido nitroso abiertos, girar la vlvula selectora de
comburente hacia xido nitroso y ajustar su flujo a las especificaciones del fabricante.
6. Girar la vlvula selectora hacia el aire. Chequear que el flujo no cambia.
7. Abrir el acetileno y encender la llama, que tendr un color amarillo brillante.
8. Con un movimiento rpido, girar la vlvula selectora hacia xido nitroso. La llama
cambia hacia un color azul-rojo-rosado.
9. Atomizar agua destilada y ajustar la velocidad de aspiracin a 3-5 mL/min.
10. Aspirar un patrn de concentracin similar a la de la muestra y, utilizando el control
ABS/ZERO, colocar aproximadamente 0,500 en la pantalla digital. Retirar la
solucin patrn.
11. Aspirar el blanco, y utilizando ahora el control CURVE, colocar cero en la pantalla
digital.
12. Aspirar cada patrn empezando por los de menor concentracin. Leer y anotar la
absorbancia. Entre patrones, limpiar el quemador, nebulizando agua destilada.
13. Aspirar las muestras, siguiendo un procedimiento similar al de los patrones. Chequear
un patrn despus de haber ledo un mximo de 10 muestras. Una vez ms, las lecturas
deberan estar dentro de 3 veces la desviacin estndar de los obtenidos inicialmente.
Si no, se debe recalibrar el equipo y analizar de nuevo todo el grupo de patrones y
muestras.
14. Atomizar un estndar de concentracin intermedia, y ajustar, si es necesario, el
quemador hasta obtener mxima respuesta. El instrumento est listo para analizar los
patrones y las muestras. Realizar las mediciones y anotar los valores.
15. Para apagar la llama, girar rpidamente la vlvula selectora de xido nitroso a aire y
cerrar el acetileno. Dejar que la llama se extinga. Cerrar el aire.
16. Vaciar las lneas de gases, luego de cerrar las vlvulas de los cilindros. Apagar el
sistema de calentamiento del xido nitroso. Apagar el sistema de extraccin de gases y
el equipo.
Curva de calibracin

Para los elementos que se miden por AA, con los valores de absorbancia obtenidos para los
patrones, se construye la curva de calibracin correspondiente. La grfica debe ser lineal sobre
el rango de operacin evaluado. En la emisin de llama, se grafica la emisin en funcin de la
concentracin. Se espera tambin un comportamiento lineal. Puede determinarse fcilmente la
ecuacin de la curva, utilizando regresin lineal.

Manejo de los datos y clculos

22

1. Construir la curva de calibracin para cada elemento: Concentracin, mg/L en el eje X y

absorbancia en el eje Y.
2. Utilizando regresin lineal, determinar la ecuacin de la lnea obtenida. Nota: Si algn
punto produjo un valor extrao de absorbancia, debe excluirse antes de obtener la lnea de
regresin.
3. Para cada elemento, determinar la concentracin en cada una de las muestras, utilizando la
curva de calibracin (si puede leerse directamente el valor en mg/L) o su ecuacin.
NOTA: Si se utiliz una dilucin de la muestra, para hallar su concentracin debe
multiplicarse la concentracin determinada mediante la curva de calibracin por el factor de
dilucin empleado. Por ej., si en la medicin de sodio, para una de las muestras se debi
realizar una dilucin de 5 mL a 1000 mL (o lo que es equivalente 1:200) para que la
absorbancia estuviese dentro del rango de los patrones, debe multiplicarse la concentracin
obtenida por el factor de dilucin (200, en este caso).
4. Comparar los resultados de cada una de las muestras con los lmites establecidos, de
acuerdo al tipo de muestra.
Bibliografa consultada

1. Annual Book of ASTM Standards D 4691-87: Standard Practice for Measuring

Elements in Water by Atomic Absorption Spectrophotometry ASTM. 1995.
2. Skoog, D. A. y D. M. West: Anlisis Instrumental Captulo 5. Interamericana.
Mxico. 1975.
3. Willard, H. H., L. L. Merritt and J. A. Dean; Instrumental Methods of Analysis. 5 th
Edition. Chapter 12. D. Van Nostrand Co. New York. 1974.
4. DECRETO 883. Normas para la Clasificacin y el Control de la Calidad de los
Cuerpos de Agua y Vertidos o Efluentes Lquidos. Gaceta Oficial de la Repblica de
Venezuela N 5.021 (extraordinario). 11-10-1995.
5. NORMAS SANITARIAS DE CALIDAD DEL AGUA POTABLE. Gaceta Oficial de
la Repblica de Venezuela N 36395. 13-02-1998.
6. Corbitt, R. A.:Manual de Referencia de la Ingeniera Ambiental. p. 5-22. McGraw
Hill. Madrid. 2003.

23

PRACTICA 2. COAGULACIN-FLOCULACIN
Introduccin

La mayora de las aguas superficiales presentan temporalmente algo de turbidez que obedece a
la presencia de materiales en suspensin, tales como arcilla, limo, materia orgnica, plancton y
otros organismos microscpicos que no se depositan por simple sedimentacin.
Para sedimentar la turbidez, es preciso agregar un coagulante al agua, mezclar ntimamente y
continuar con agitacin lenta, hasta lograr un flculo satisfactorio.
El coagulante que ms se emplea para la remocin de la turbidez es el alumbre (sulfato de
aluminio), que al disolverse en agua, forma el hidrxido de aluminio, el cual al precipitar,
arrastra una parte de las partculas suspendidas en el agua:
Al2(SO4)3 Al(H2O)63+ + SO42- Al(OH)2+ + Al(OH)2+ + Al7(OH)174+ Al(OH)3
El mecanismo postulado para la remocin de turbidez involucra dos aspectos:
1. Con dosis baja de alumbre, las especies de aluminio hidrolizadas se adsorben sobre el
coloide que produce la turbidez, desestabilizndolo. Este tipo de reaccin es muy
rpido (del orden de microsegundos).
2. Si se emplea una dosis alta de alumbre, el coloide es rodeado por el hidrxido de
aluminio que est precipitando. En este caso, se habla de coagulacin de barrido, que
es ms lenta, y ocurre de 1 a 7 s.
Es probable que la coagulacin de un agua cruda sea producto de la existencia simultnea de
ambos mecanismos.
El nico mtodo prctico para determinar la cantidad apropiada de coagulante que se debe
dosificar es la realizacin de la prueba de coagulacin-floculacin. La dosis de productos
qumicos que produzca los mejores resultados en los recipientes de prueba se tiene que
aproximar mucho a la dosis ms conveniente que se aplique en la planta potabilizadora. Es
preciso repetir esta prueba con cada cambio de turbidez del agua cruda. Si sta llega a las
instalaciones depuradoras procedente de un ro, cuya turbidez vara rpidamente en poca de
lluvia, es necesario efectuar la prueba cada hora, y ajustar la dosificacin de reactivos en la
planta potabilizadora, segn los resultados en el laboratorio.
Con un cuidadoso control de la dosis de coagulante, y con tanques de coagulacin y de
sedimentacin bien diseados, se puede obtener, despus de stas dos ltimas operaciones, un
agua muy clara.
A veces, es preciso ajustar el valor del pH, con el objeto de lograr una buena coagulacin.
Normalmente, ello supone el aumento del pH mediante la adicin de cal.
Esta prctica cubre un procedimiento general para reducir la concentracin de material
disuelto, suspendido, coloidal y no sedimentable presente en el agua por la coagulacin-floculacin qumica, seguida por sedimentacin por gravedad, y suministra una evaluacin
sistemtica de las variables involucradas en el proceso.

24

Aspectos legales

Siendo la coagulacin-floculacin una operacin intermedia dentro de las plantas de

potabilizacin, el agua producida en esta etapa no est sujeta a regulacin, aunque las Normas
de Calidad del Agua Potable de Venezuela establecen un lmite de turbidez de 1 UNT
(mximo aceptable de 5 UNT) para el agua de consumo humano. Sin embargo, en esta
prctica no se mide la turbidez del agua tratada.
Resumen

El ensayo de coagulacin-floculacin permite evaluar la dosis de productos qumicos y las

condiciones para obtener resultados ptimos. Las variables que se investigan incluyen:
Reactivos qumicos
pH
Temperatura
Orden de adicin y condiciones de mezclado.
Significado y uso

sta prctica permite evaluar los agentes coagulantes y ayudantes de la coagulacin que se
utilizan en el tratamiento de aguas blancas y residuales. As mismo, puede estudiarse el efecto
de la concentracin de ambos tipos de reactivos y el orden de adicin.
Precauciones de Seguridad

El desarrollo experimental puede involucrar el empleo de materiales, operaciones y equipos

peligrosos. No se asume que se describan aqu todos los problemas de seguridad relacionados
con su uso. Queda bajo la responsabilidad del usuario establecer las prcticas apropiadas y la
aplicacin de medidas especficas para desarrollar actividades seguras. Considerar, sin
embargo, los siguientes aspectos:
Los reactivos que se utilizan no son particularmente peligrosos. Como precaucin, utilizar
propipeteadores o pipeteadores automticos para la medicin de los volmenes. Si
accidentalmente cae solucin de cal sobre los ojos, deben lavarse inmediatamente con agua.
Para otras partes del cuerpo, emplear agua y jabn. Sobre precauciones en el manejo del
alumbre, no se ha conseguido informacin en la literatura consultada.
Interferencias

Las interferencias ms importantes son:

A. Cambios en la temperatura durante la prueba: Puede ocurrir conveccin trmica, que
produce interferencia en la floculacin de las partculas. Esto puede prevenirse
controlando la temperatura.
B. Desprendimiento de gases: Puede producirse flotacin de los flculos, debido a la
formacin de burbujas generadas por agitacin mecnica, incremento de la
temperatura o reaccin qumica.
C. Perodo de la prueba: Factores como la actividad biolgica pueden alterar las
caractersticas de coagulacin del agua despus de un reposo prolongado. Por tal
razn, debe minimizarse y registrarse el tiempo entre el muestreo del agua y el ensayo.

25

Aparato

El procedimiento se puede realizar utilizando agitacin manual (que es la tcnica que se

describe aqu, y que se denominar Prueba A), o mediante el ensayo de jarras, con un equipo
automtico (no disponible en nuestro laboratorio para el momento, pero de uso comn en las
plantas de tratamiento de agua, que tambin se describe en esta gua como Prueba B).
Reactivos y materiales

Prueba A:
A. REACTIVOS:
Solucin de sulfato de aluminio (alumbre), Al2(SO4)3.18H2O: Disolver 0,5 g de la sal
en 1 L de agua. Agitar bien antes de utilizarlo. Cualquier otro coagulante se prepara de
la misma forma, en la concentracin apropiada. 1 mL de esta solucin corresponde a
0,5 mg de sulfato de aluminio.
Solucin de cal: Agregar 0,5 g de cal a 1 L de agua clara. Esta cantidad de slido no
llega a disolverse totalmente, y parte de ella permanece en suspensin, por lo que es
necesaria la agitacin cada vez que se extraigan porciones con una pipeta, lo que se
debe hacer inmediatamente despus de la agitacin, para evitar que la cal se sedimente.
1 mL de esta solucin corresponde a 0,5 mg de cal.
B. MATERIALES:
Vasos de precipitado de 500 mL
Pipetas graduadas de 10 mL
Cilindros graduados de 500 mL
Varillas de vidrio
Agitador mltiple, manual o elctrico
Cronmetro
Balanza analtica
Termmetro
Medidor de pH (pH metro)
Prueba B:
A. REACTIVOS:
1. Pureza de los reactivos: Se asume que se utilizan reactivos grado analtico. Pueden
emplearse sustancias de otra pureza, si se conoce que la calidad es suficiente para permitir su
empleo sin reducir la exactitud de la determinacin.
2. En la siguiente lista, aparecen los coagulantes tpicos para la prueba. Todos ellos pueden
prepararse el da del ensayo, a una concentracin de 10 g/L (1 mL de esta solucin o
suspensin, cuando se adiciona sobre 1 L de muestra equivale a 10 mg/L).

Coagulantes usuales:
Alumbre, Al2(SO4)3.18H2O
Sulfato frrico, Fe2(SO4)3.xH2O
Cloruro frrico, FeCl3.6H2O

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Sulfato ferroso, FeSO4.7H2O

Carbonato de magnesio, MgCO3.3H2O
Aluminato de sodio, NaAlO2
Agentes oxidantes:
Cloro, Cl2
Dixido de cloro, ClO2
Permanganato de potasio, KMnO4
Hipoclorito de calcio, CaCl(ClO).4H2O
Hipoclorito de sodio, NaClO
lcalis:
Carbonato de calcio, CaCO3
Dolomita, (58% CaO, 40% MgO)
Cal hidratada, Ca(OH)2
xido de magnesio, MgO
Carbonato de sodio, Na2CO3
Hidrxido de sodio, NaOH
Agentes espesantes:
Bentonita
Caoln
Otras arcillas y minerales
Miscelneos:
Carbn activado en polvo.
3. Ayudantes de la coagulacin: Existe en el mercado un nmero importante de ayudantes de
la coagulacin. Dependiendo de su composicin, se clasifican en catinicos, aninicos o no
inicos. Esas sustancias tienen la habilidad de producir un flculo denso, grande y pesado que
sedimenta fcilmente, cuando se emplean solas o junto con coagulantes inorgnicos. La
adicin de una pequea proporcin de tales compuestos (menos de 1 mg/L) permite la
reduccin (y a veces la eliminacin total) de la cantidad de coagulante a aadir. En el ltimo
caso, el polielectrolito se considera como coagulante y no como ayudante de la coagulacin.
Los ayudantes se presentan bajo la forma de slidos o lquidos. Los slidos se preparan en
soluciones al 0,1 %, y se agrega la alcuota apropiada a la concentracin final que se desea. Se
debe adicionar lentamente y con agitacin siempre el slido al agua y no al revs. Los tiempos
de disolucin pueden ir de varios minutos a horas. Seguir las instrucciones del fabricante. Los
polielectrolitos lquidos se preparan con facilidad.

Ayudantes de la coagulacin:
Slice activada
Polielectrolitos catinicos
Polielectrolitos aninicos

27

Polmeros no inicos
B. MATERIALES:
Agitador mltiple. Un agitador de varias posiciones, con velocidades desde 20 a 150 rpm.
Las paletas de agitacin deben ser resistentes a la corrosin y todas del mismo tamao. Es
til una base iluminada, que permita observar la formacin del flculo. Debe tenerse
precaucin de evitar el calor que suministra el medio de iluminacin, ya que interfiere con
el proceso de sedimentacin. (ver Fig. 1).
Transvasador de reactivos: Un medio para introducir las soluciones a todas las jarras
simultneamente. (ver Fig. 2).
Vasos de precipitado de 1000 mL
Cilindros graduados de 1000 mL
Cronmetro
Balanza analtica

FIGURA 1. EQUIPO PARA LA PRUEBA DE JARRAS

28

FIGURA 2. TRANSVASADOR DE REACTIVOS PARA LA PRUEBA DE JARRAS

Muestra y mtodo de muestreo

Agua corriente. A manera de prueba, para fines didcticos, se puede preparar una suspensin
de arcilla, que contenga 1 g del slido por litro de agua.
Procedimiento

Prueba A:
1. Colocar 500 mL de muestra en cada uno de los vasos de precipitado
2. Agregar cantidades variables de solucin de sulfato de aluminio a cada uno de los
vasos. Agitar vigorosamente durante 1 minuto, y luego con lentitud durante 5 minutos
ms, permitiendo luego la sedimentacin. Se sugiere que las observaciones se registren
como en el ejemplo que sigue:
DOSIS DE ALUMBRE, ppm

mL DE SOLUCIN DOSIFICADA

10
15
20
25

10
15
20
25

pH

T, C

OBSERVACIONES
Coagulacin y sedimentacin

Deficiente
Buena
Regular
Regular

Pueden incluirse otros aspectos como: turbidez, tiempo de aparicin del flculo, aspecto
del sobrenadante, etc.
3. En la prueba anterior, la mejor dosis se acerca a las 15 ppm de alumbre, por lo que se
realiza un segundo ensayo, para obtener una cifra ms exacta.

DOSIS DE ALUMBRE, ppm

mL DE SOLUCIN DOSIFICADA

pH

T, C

OBSERVACIONES
Coagulacin y sedimentacin

29

13
15
17
18

13
15
17
19

Regular
Buena
Excelente
Regular

4. Los resultados indican que la dosis apropiada es de 17 ppm de alumbre.

5. Si el agua cruda tiene baja alcalinidad (menos de 20 ppm), puede ser necesario aadir
pequeas cantidades de cal, para contribuir a la coagulacin. Usualmente, slo se
requieren de 2 a 5 ppm de cal.
6. Trabajando ahora con la muestra que presenta mejores resultados de coagulacin,
tomar cuatro porciones de 500 mL, y aadir 17 mL de solucin de alumbre. Agregar
cantidades variables de solucin de cal. Se recomienda registrar los resultados como se
muestra en la siguiente tabla
ALUMBRE
Dosis, ppm
mL aadidos
17
17
17
17
17
17
17
17

Dosis, ppm
2
3
4
5

CAL
mL aadidos
2
3
4
5

pH

T, C

OBSERVACIONES
Coagulacin y sedimentacin
Regular
Buena
Excelente
Buena

7. En la mayora de los casos, la prueba de laboratorio es ms eficiente que la

coagulacin en la planta de tratamiento, es decir, la dosis ptima que se obtiene en la
prueba probablemente resulte ms baja que la necesaria para producir una buena
coagulacin en la planta. En algunas plantas de tratamiento se ha encontrado que, si en
la prueba de potabilizacin se logran los mejores resultados con, por ej., unos 12 mg/L
de alumbre, para conseguir una buena coagulacin en las instalaciones de la planta, se
necesita una dosis de unos 17 mg/L.
8. Una vez que se conoce esta diferencia, se puede mantener el margen debido, y cada
aumento de dosis en la prueba de laboratorio tiene que representar un incremento
correspondiente en la dosis a aplicar en la planta.
Prueba B:
1. Medir volmenes iguales (1000 mL) de muestra en cada una de las jarras de 1500 mL.
Pueden utilizarse tantas muestras como vasos hayan en el equipo. Ubicar cada jarra de
forma tal que los agitadores queden alejados del centro, y a de pulgada (6,4 mm,
aprox.) de la pared. Registrar la temperatura de la muestra al inicio de la prueba.
2. Aadir los productos qumicos a utilizar en el transvasador de reactivos. Utilizar un
transvasador para cada serie de reactivos. Agregar agua a cada tubo, hasta llegar a los
10 mL antes de emplear el transvasador. Puede haber situaciones donde se requiera un
volumen ms alto de reactivos. Si este es el caso, se llenan todos los tubos con un
volumen de agua igual al mayor volumen de reactivo en el transvasador. Al aadir
lodos, puede requerirse agitar el transvasador antes de la transferencia.
3. Encender la agitacin y colocar la velocidad flash mix (mezcla rpida), que
corresponde aproximadamente a unas 120 rpm. Agregar las soluciones o suspensiones
a ensayar en la dosis y secuencia determinadas previamente. Agitar por 1 minuto ms.
Registrar el tiempo total de agitacin y la velocidad (rpm).

30

4. Reducir la velocidad al valor mnimo requerido para mantener las partculas de

flculos uniformemente suspendidas durante el perodo de mezcla lenta. Agitar por
20 minutos. Registrar el tiempo cuando aparece el primer flculo. Durante el mezclado
lento, cada 5 minutos, registrar el tamao relativo del flculo y la velocidad (rpm).
Cuando se emplean ayudantes de la coagulacin, es crtica la velocidad de agitacin,
ya que un mezclado excesivo tiende a romper los flculos y a redispersar el ayudante
de coagulacin.
5. Despus del perodo de mezcla lenta, retirar los agitadores y observar la sedimentacin
de los flculos. Registrar el tiempo necesario para la floculacin de la mayor parte de
los slidos. En algunos casos, pueden aparecer corrientes convectivas que interfieren
con la sedimentacin. Si tal es la situacin, el tiempo de sedimentacin es aquel en el
cual las partculas que no sedimentan parecen moverse igualmente hacia arriba y hacia
abajo.
6. Despus de 15 minutos, registrar la apariencia del flculo en el fondo del vaso y la
temperatura. Si se desea, puede extraerse una porcin del sobrenadante (la mitad o
menos) para la medicin del color, pH, turbidez o cualquier otro anlisis que se
requiera.
7. Repetir las etapas 1 a 6 hasta evaluar todas las variables.
8. Los tiempos que aparecen en las etapas 3, 4 y 6 son referenciales.
9. Para reportar los resultados, se puede utilizar una tabla como la que se muestra en la
pgina que sigue (Tabla 1).
TABLA 1. DATOS DE LA PRUEBA DE JARRAS.
Muestra: __________________ pH: _________ Turbidez: __________ Fecha: _______
Ubicacin: _________________ Color: ______ Temperatura: _______C
Tamao de muestra: ___________________ mL
Producto empleado, mg/L

Nmero de la jarra
2
3
4
5

Producto A
Producto B
Velocidad de mezcla rpida, rpm
Tiempo de mezcla rpida, min
Velocidad de mezcla lenta, rpm
Tiempo de mezcla lenta, min
Temperatura, C
Tiempo de formacin del 1 flculo, min
Tamao del flculo
Turbidez
Color
pH
Indicar el orden de adicin de los productos.

31

Reproducibilidad

En esta prueba, la reproducibilidad de los resultados es muy importante. Para chequear este
parmetro, se sugiere el procedimiento 3 y 3, que consiste en tratar simultneamente
duplicados de 3 vasos con iguales cantidades de los productos qumicos en los vasos 1 y 4, 2
y 5, y 3 y 6.
Manejo de los datos y clculos

En esta prctica, los resultados son cualitativos, y no hay clculos para realizar. Indicar
solamente la temperatura y el pH en los sitios apropiados de las Tablas, y la calidad de la
coagulacin-sedimentacin.
Bibliografa consultada

1. Annual Book of ASTM Standards D 2035-80: Standard Practice for CoagulationFloculation Jar Test of Water ASTM. 1995.
2. Romero, J.: Acuipurificacin Captulos 3-5. Escuela Colombiana de Ingeniera.
Bogot. 1994.
3. Romero, J.: Acuiqumica Captulo 5. Escuela Colombiana de Ingeniera. Bogot.
1996.
4. Normas de Calidad del Agua Potable. Gaceta Oficial de la Repblica de Venezuela
N 36.395. 13/02/1998.

32

PRACTICA 3. CLORO RESIDUAL

Introduccin

El cloro se utiliza bajo la forma de gas o de derivados clorados (hipocloritos, cloraminas) en el

tratamiento del agua. El objetivo fundamental de este proceso es la desinfeccin o destruccin
de los microorganismos patgenos, pero bajo condiciones controladas, permite tambin
mejorar la calidad qumica del agua, al reaccionar con impurezas como el amonaco, hierro,
manganeso, sulfuros y protenas.
El cloro gaseoso se combina con el agua formando cido hipocloroso, HClO. Los hipocloritos,
ClO-, al disolverse en el agua se disocian, y el in hipoclorito reacciona con iones hidrgeno
libres, formando cido hipocloroso. La proporcin de in hipoclorito a cido hipocloroso
depende del pH. A medida que el pH aumenta por arriba de 4, se eleva tambin la proporcin
de HClO. Las reacciones son:
Cl2 + H2O = HClO + H+ + ClCa(ClO)2 + H2 = Ca 2+ + H2O + 2ClOClO- + H+ = HClO
El cloro en el agua puede encontrarse bajo la forma de cloro libre, representado por el cido
hipocloroso o el in hipoclorito, o bien como cloro combinado (cloraminas y otros derivados
clorados). La accin desinfectante se debe al cido hipocloroso, que acta como un poderoso
oxidante que destruye la materia orgnica (este cido es 100 veces ms poderoso como
desinfectante que el in hipoclorito).
La cantidad de cloro necesaria para destruir la materia orgnica del agua se denomina
demanda de cloro, usndose el trmino cloro residual para designar la concentracin de
cloro, ya sea libre o combinado, remanente despus del tratamiento de cloracin. La presencia
de cloro residual en el agua es indispensable para asegurar su potabilidad y para protegerla
contra una posible contaminacin post-cloracin.
El cloro residual se determina por mtodos basados en su poder oxidante, siendo los ms
comunes el iodomtrico y el de la orto-tolidina. El primero se basa en la capacidad del cloro
residual, ya sea libre o combinado, de oxidar el in yoduro a yodo libre, a pH inferior a 8, y en
la valoracin del yodo liberado con solucin de tiosulfato de sodio estndar, usando almidn
como indicador. La reaccin ocurre mejor a pH 3-4. Las reacciones qumicas involucradas
son:
Cl2 + 2I- =
I2 + 2S2O3 2- =
I2 + almidn =

I2 + 2ClS4O6 2- + 2Icolor azul

El tiosulfato de sodio que se utiliza en la determinacin del cloro residual puede

estandarizarse empleando dicromato de potasio, en presencia de un exceso de KI:

33

Cr2O7 2- + 14H+ + 6I- = 3I2 + 2Cr 3+ + 7H2O

I2 + 2S2O3 2- = S4O6 2- + 2II2 + almidn = color azul
El segundo mtodo est basado en la oxidacin de la orto-tolidina en medio cido, para formar
una holoquinona, que a pH inferior a 1,8 presenta un color amarillo, de intensidad
proporcional a la concentracin de cloro residual originalmente presente en el agua. Para
obtener buenos resultados por este mtodo, la concentracin de cloro no debe ser inferior a 10
ppm y el pH debe ser menor a 1,3.
Si se desea establecer la demanda de cloro, puede tratarse una serie de porciones de muestra
con cantidades variables y conocidas de cloro o hipoclorito, y valorar el cloro residual despus
de un determinado tiempo de contacto.
Los mtodos mencionados para el agua encuentran tambin aplicacin en la valoracin de la
concentracin de cloro en las soluciones que se emplean para desinfeccin, o para el control
de los tratamientos que se aplican a desechos industriales y aguas residuales. La mayora de
las soluciones de cloro comercial contienen entre 3 y 6% de hipoclorito de sodio en agua.
Resumen

El cloro libera iodo libre de una solucin de yoduro de potasio a pH 8 o menor. El yodo
liberado se titula con una solucin patrn de tiosulfato de sodio, empleando almidn como
indicador. La reaccin se realiza preferentemente a pH 3-4.
Aspectos legales

El Art. 6 de las Normas de Calidad del Agua Potable establece que el agua potable destinada
al abastecimiento pblico deber contener en todo momento una concentracin de cloro
residual libre en cualquier punto de la red de distribucin de 0,3 y 0,5 mg/L. Por otra parte, el
Cuadro N 2 de las mismas normas determina un valor mximo aceptable para el mismo
parmetro de 1.0 mg/L (un mximo de 3.0 mg/L aceptable provisionalmente, en casos
extremadamente excepcionales, plenamente justificado ante la Autoridad Sanitaria
Competente).
Las soluciones comerciales de cloro contienen (dependiendo de la marca) un 3 a 6 % de
hipoclorito de sodio.
En relacin con el contenido de cloro residual en el agua para piscinas, no se han establecido
lmites mximos en nuestro pas. En Mxico, el lmite permisible de cloro residual libre es de
1,0 a 5,0 mg/L. En Espaa, el decreto 193/1987 de 19 de mayo del Diario Oficial de la
Generalidad de Catalua, por la cual se aprueba el Reglamento Sanitario de Piscinas para uso
colectivo, determina en el articulo 33.1 que los lmites autorizados sern de 0,5 mg/L a 2 mg/L
de cloro residual libre. El cloro total no exceder en ms de 0,6 mg/l el nivel medio de cloro
residual libre.

Significado y uso

34

El ensayo permite determinar uno de los parmetros ms importantes en el proceso de

potabilizacin del agua. Puede emplearse en las plantas de tratamiento de aguas blancas o
residuales (si utilizan cloro como ltima etapa de desinfeccin) o en las redes de distribucin
de agua potable.
Precauciones de seguridad

Esta prctica puede involucrar el empleo de materiales, operaciones y equipos peligrosos. No

se asume que se describan aqu todos los problemas de seguridad relacionados con su uso.
Queda bajo la responsabilidad del usuario establecer las prcticas apropiadas y la aplicacin
de medidas especficas para desarrollar actividades seguras. Como precauciones especficas,
pueden mencionarse:
1. Debe tenerse cuidado extremo al manipular soluciones concentradas de cido sulfrico.
Para la manipulacin del cido, emplear ventilacin adecuada, gafas protectoras, mascarilla,
guantes de goma y trajes protectores Si ha habido contacto con la solucin, el tratamiento
incluye lavado de los ojos con agua, con agua y jabn de las partes contaminadas del cuerpo y
lavado gstrico si se ha ingerido.
2. El cido actico, en concentraciones elevadas en el aire, provoca irritacin de los ojos y
garganta, y deprime el sistema nervioso central. Es un irritante severo de las membranas
mucosas, la piel y los ojos. El contacto con la piel puede causar dermatitis y lceras cutneas.
Para la manipulacin del cido, deben utilizarse gafas protectoras, ventilacin adecuada,
mascarilla con adsorbente qumico y vestido protector de goma. Si ha habido contacto con la
solucin, lavar los ojos con agua, con agua y jabn las partes contaminadas del cuerpo, y
lavado gstrico con agua de cal si se ha ingerido.
3. El dicromato de potasio es un irritante y alrgeno. Como todas las sales hexavalentes de
cromo, es muy txico. Utilizar ventilacin adecuada, guantes, delantales y botas de goma,
mascarilla con filtro mecnico. Acentuar la limpieza personal. Si ha habido contacto con la
solucin, el tratamiento incluye lavado de los ojos con agua, con agua y jabn de las partes
contaminadas del cuerpo y lavado gstrico si se ha ingerido.
Interferencias

El cloro residual puede determinarse en solucin neutra o cida. Aunque la medicin en

solucin neutra minimiza el efecto interferente del Hierro (III), Manganeso (III) e in nitrito,
se prefiere la titulacin cida, ya que es ms precisa. Se emplea cido actico para la titulacin
cida (se puede utilizar cido sulfrico si se sabe que las sustancias interferentes estn
ausentes). No emplear nunca cido clorhdrico. La concentracin mnima detectable es
aproximadamente de 40 g/L Cl al emplear tiosulfato de sodio 0,01 N con una muestra de
500 mL.
Reactivos y materiales

A. REACTIVOS:
1. Solucin de KI al 10 % p/v.
2. cido actico concentrado (glacial)
3. Solucin estndar de tiosulfato de sodio 0,1N 0,01N (dependiendo de la
concentracin anticipada de cloro en la muestra). Disolver 25 g de Na 2S2O3.5H2O en 1
L de agua destilada (hervida recientemente y enfriada). Titular esta solucin con

35

dicromato de potasio luego de 2 semanas de almacenamiento. Para la preparacin del

tiosulfato, utilizar agua destilada hervida y aadir unas pocas gotas de cloroformo,
CHCl3, para minimizar la descomposicin bacteriana.
4. Titulante de tiosulfato de sodio estndar 0.01N. Realizar una dilucin 1:10 de una
solucin 0,1N envejecida y preparada como se describi previamente, utilizando para
la dilucin agua recientemente hervida y enfriada. Puede mejorarse la estabilidad de la
solucin resultante aadiendo unas pocas gotas de CHCl3 o 0.4 g de borato de sodio y
10 mg de yoduro mercrico por L de solucin. Para una mayor precisin, titular
diariamente esta solucin, de acuerdo al procedimiento descrito ms adelante (ver
Estandarizacin), utilizando K2Cr2O7 0.01N.
5. Solucin patrn de dicromato de potasio 0,1N: Disolver 4.904 g de dicromato de
potasio anhidro, K2Cr2O7, de grado reactivo (secado a 105 C por 1h), en agua
destilada y diluir a 1 L para obtener una solucin 0.1N. Almacenar en recipiente con
tapa de vidrio. Si es necesario, realizar una dilucin 1:10, para preparar la solucin
0.01N.
6. Solucin indicadora de almidn: A 5 g de almidn soluble agregar en un mortero una
pequea cantidad de agua fra para formar una pasta poco espesa. Colocar esta pasta
sobre 1 L de agua destilada hirviente, agitar y dejar sedimentar toda la noche. Utilizar
el sobrenadante claro. Para la preservacin, emplear 1.25 g de cido saliclico, o 4 g de
cloruro de cinc.
B. MATERIALES:
Erlenmeyers de 100, 250 y 500 mL
Cilindros graduados de 100, 500 y 1000 mL
Pipetas volumtricas de 1 mL
Matraces aforados de 100 mL
Pipetas graduadas de 1, 5 y 10 mL
Buretas de 10 mL
Varillas de vidrio
Soporte para la bureta
Balanza analtica
Muestra y mtodos de muestreo

b)

El recipiente para la muestra puede ser de plstico o de vidrio. La muestra debe analizarse
inmediatamente (no se puede preservar).
a) Volumen de muestra: Seleccionar un volumen de muestra que no requiera ms de 20 mL
de Na2S2O3 0.01N. Si la concentracin de cloro residual es de 1 mg/L o menos, utilizar
1000 mL de muestra. Para un rango de cloro de 1 a 10 mg/L, la muestra es de 500 mL, y
por arriba de 10 mg/L, una muestra proporcionalmente menor. En el caso de soluciones
desinfectantes, emplear 1 mL diluido a 100 mL con agua destilada.
Tipo de muestra:
Agua de chorro o de otra fuente clorada
Solucin desinfectante de cloro comercial
Procedimiento

36

a) Preparacin de la muestra para titulacin: Colocar 5 mL de cido actico glacial en un

erlenmeyer de capacidad apropiada, de acuerdo al volumen de muestra. Aadir 10 mL de
solucin de KI al 10% y agitar bien con una varilla de vidrio. Agregar la muestra en el
erlenmeyer y mezclar de nuevo con la varilla.
b) Titulacin de la muestra: La valoracin debe hacerse lejos de la luz solar directa.
Adicionar lentamente y con agitacin la solucin de Na 2S2O3 0.01N desde una bureta
hasta la casi total desaparicin del color amarillo del yodo liberado. Agregar 1 mL de
solucin de almidn y continuar la valoracin hasta la desaparicin del color azul.
c) Titulacin en blanco: Realizar una titulacin en blanco, utilizando un volumen de agua
destilada igual al de la muestra, al que se le agregan 5 mL de cido actico glacial, 10 mL
de solucin de KI al 10 % y 1 mL de solucin de almidn. La titulacin en blanco que se
efecta depende de si se obtiene o no un color azul al agregar la solucin de almidn.
1. Titulacin en Blanco 1: Si se obtiene un color azul, titular con solucin de
Na2S2O3 0.01N y reportar el resultado como Titulacin en Blanco 1.
2. Titulacin en Blanco 2: Cuando no se observa color azul, valorar con solucin de
yodo 0,0282N (ver Estandarizacin) hasta la aparicin de un color azul. Titular
luego por retroceso con Na2S2O3 0.01N y reportar la diferencia como Titulacin
en Blanco 2.
Antes de calcular el cloro residual, restar el valor Titulacin en Blanco 1 de la titulacin de
la muestra; o, si es necesario, aadir el valor neto equivalente de la Titulacin en Blanco 2.
Estandarizacin

Debe estandarizarse el tiosulfato de sodio 0,1N de acuerdo al siguiente procedimiento:

A 80 mL de agua destilada colocados en un erlenmeyer de 250 mL, aadir con agitacin
constante 1 mL de H2SO4 concentrado, 10.00 mL de K2Cr2O7 0,10N y 10 mL de solucin de
KI al 10%. Titular inmediatamente con Na 2S2O3 0.1N hasta la casi total desaparicin del color
amarillo del yodo liberado. Agregar 1 mL de solucin indicadora de almidn y continuar la
titulacin hasta que desaparezca el color azul.
Si se va a titular el tiosulfato 0,01N, se sigue el mismo procedimiento anterior, pero utilizando
solucin 0,01N de K2Cr2O7.
Reacciones:
Cr2O72- + 14H+ + 6I- = 3I2 + 2Cr3+ + 7H2O
2S2O32- + I2 = S4O62- + 2II2 + almidn = color azul
Preparacin de la solucin de yodo 0,1N: Colocar 12.7 g de yodo en un vaso de precipitado de
250 mL. Agregar 4 g de yoduro de potasio y 25 mL de agua. Agitar hasta la disolucin
completa y diluir hasta 1 litro. Guardar la solucin en un frasco con tapa de vidrio y protegerla
de la luz tanto como sea posible. Por dilucin apropiada de esta solucin, puede prepararse la
de normalidad 0,0282, que debe valorarse con tiosulfato 0,01N.

Manejo de los datos y clculos

37

1. Para la determinacin de la normalidad, N, de la solucin de tiosulfato de sodio, se

asume que la solucin de dicromato de potasio tiene una normalidad exacta, de forma
tal que, en el punto final, los equivalentes de ambas soluciones son iguales:
Ntiosulfato x Vtiosulfato = N dicromato x V dicromato
En la ecuacin anterior, se conocen los dos valores del lado derecho. El Vtiosulfato
corresponde al obtenido al alcanzar el punto de equivalencia.
2. Para la determinacin de la concentracin de cloro residual en la muestra, emplear la
ecuacin:
A B x N x 35,45 x 1000 x f
mg /L Cl
mL de muestra
A = volumen de Na2S2O3 para la muestra, mL
B = volumen de Na2S2O3 para el blanco (puede ser positivo o negativo), mL
N = normalidad del Na2S2O3 , obtenida por titulacin con el K2Cr2O7, meq/mL
35,45 = peso mili equivalente del cloro, mg/meq
1000 = factor de conversin de L a mL
f = factor de dilucin (si es el caso, f = Volumen solucin diluda/volumen alcuota
para la dilucin, ej.: para una dilucin de 5 mL de agua de cloro comercial a 500
mL, f= 500 mL/5 mL = 100).
3. Si se utiliz agua de cloro comercial como una de las muestras, no deben compararse
sus resultados con los correspondientes a las Normas para Agua Potable.
En el clculo de la concentracin de NaClO, utilizando el resultado de la valoracin de
la solucin:
mg
74.45
mg
l
NaOCl ,
=Cl ,
L
35.45
NaOCl ,

peso
NaOCl ,mg/ L
=
volumen
10.000

Bibliografa consultada

1. APHA, AWWA, WPCF: Standard Methods for the Examination of Water and
Wastewater 14th Edition. pp. 309-344. USA. 1976.
2. Sawyer, C. N. et al.: Qumica para Ingeniera Ambiental. 4 Edicin. Captulo 19.
Mc Graw Hill. Bogot. 2001.
3. Romero R., J. A.: Acuiqumica Captulo 6. Escuela Colombiana de Ingeniera.
Bogot. 1996.
4. Plunkett, E. R.: Manual de Toxicologa Industrial. pp. 22, 190. Urmo. Bilbao. 1974.
5. Kolthoff, I. M. y E. B. Sandell: Tratado de Qumica Analtica Cuantitativa. 4
Edicin. Cap. 38. Editorial Nigar. Buenos Aires. 1960.

38

6. Harte, J. et al: Gua de las Sustancias Contaminantes. p. 263. Grijalbo. Mxico.

1995.
7. Normas Sanitarias de Calidad del Agua Potable. Gaceta Oficial de la Repblica de
Venezuela N 36.395. 13/02/1998.
8. Secretaria de Salud. Anteproyecto de Norma Oficial Mexicana PROY-NOM-000SSA1-2005.
9. Decreto 193. Diario Oficial de la Generalidad de Catalua. 19 de mayo de 1987.

39

PRACTICA 4. PARTCULAS TOTALES SUSPENDIDAS

Introduccin

Las partculas arrastradas por el viento y levantadas desde el suelo, con tamaos menores a 10
m tienen tendencia a permanecer suspendidas. Puesto que esta clase de polvo es respirable y
muy perjudicial, conviene tomar muestras de aire, de manera de poder cuantificar su
concentracin. El dispositivo que se utiliza para este fin es un motor semejante a una
aspiradora, que lleva aire por succin a la zona de filtracin. Cuando se trabaja con aire
prcticamente estacionario, la geometra del equipo de alto volumen (conocido como HiVol) que se emplea, aprovecha el techo inclinado para obligar al aire que entra al dispositivo
a cambiar su direccin 90 antes de llegar al filtro horizontal (Ver Fig. 1).

FIGURA 1. CASETA DEL MUESTREADOR DE ALTO VOLUMEN (HI-VOL).

El Hi-Vol permite muestrear un gran volumen de aire (1600 a 2400 m 3, o 55000 a 85000 pie3),
utilizando una aspiradora de alta capacidad a un flujo entre 1,13 y 1,7 m3/min (40-60
pie3/min), con el cual se recolectan partculas de dimetro equivalente menor o igual a 60
m. Al emplear filtro de fibra de vidrio, el dimetro de partcula usualmente est entre 100 y
0,1 m. La muestra reunida puede ser sometida a anlisis posteriores por una variedad de
mtodos para constituyentes especficos (plomo, por ejemplo). Es recomendable utilizar el
filtro apropiado para cada caso.
Para elegir un medio de filtracin, deben considerarse al menos dos aspectos:
1. Tipo de partculas a recoger: si son finas, y la humedad del aire es elevada, pueden
absorber agua, provocando una disminucin del flujo de aire.
2. Naturaleza qumica del filtro: algunas partculas orgnicas pueden disolverse en
determinados filtros, y gases como el NO2 o SO2 pueden atacar algunos filtros de
membrana. Los filtros de fibra de vidrio no deben utilizarse para partculas a las que se
les desea analizar slice.

40

La mxima cantidad de material recolectado est determinada por el taponamiento del medio
filtrante con el material de la muestra, lo que reduce significativamente el flujo de aire. Para
atmsferas muy contaminadas, debe reducirse el tiempo de muestreo. La eficiencia se
incrementa con el tamao de la muestra, y depende de algunas variables, entre ellas:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.

Humedad relativa del aire

Tamao de partcula
Forma de la partcula y rugosidad de su superficie
Grado de aglomeracin
Carga esttica de las partculas y el filtro
Tiempo de contacto y espesor del filtro
Temperatura ambiente
Propiedades qumicas del material del filtro.

El lmite inferior del tamao de la muestra a recolectar depende de la sensibilidad de la

balanza analtica de que se disponga. El valor usual es de 3 mg (nivel de confianza de 95%).
Cuando el equipo trabaja a un flujo promedio de unos 60 pie 3/h por 24 h, este peso
corresponde a una concentracin de partculas de 1-2 g/m3. La cantidad normal est entre 3
y 10 mg de slido retenido en el filtro. El filtro puede ser:
1. Un disco circular de fibra de vidrio (o cualquier otro material apropiado) de 4 pulgadas
de dimetro.
2. Un filtro de fibra de vidrio (o de otro material adecuado) de 4 x 4 pulgadas o de 8 x 10
pulgadas.
Este ltimo es el de uso ms frecuente, y permite recoger muestras a una velocidad de aire
entre 40 y 60 pie3/min, con tiempo de muestreo normal de 24 h (lo que corresponde a unos
65.000-75.000 pie3 de aire ambiental y unos 0,5 g de partculas, aproximadamente). Operando
a un flujo de 1,1 m3/min (40 pie3/min) durante 24 1h, se pueden determinar concentraciones
de partculas suspendidas en un rango de 2,0 a 750 g/m 3. Para concentraciones mayores, se
deben realizar muestreos menores a 24 horas.
Aspectos Legales

El Art. 3 del Decreto 638 establece los lmites de calidad del aire para Partculas totales
suspendidas de acuerdo con la siguiente Tabla:

Contaminante
2. Partculas
Totales
Suspendidas

Lmite
(g/m3)
75
150
200
260

Porcentaje
excedencia
en lapso de
muestreo
50%
5%
2%
0.5%

Perodo de
medicin
(horas)
24
24
24
24

Las concentraciones de los contaminantes se calcularn para condiciones de 1 atmsfera y

298K.

41

Por otra parte, en el Art. 5 del mencionado Decreto, se establece la siguiente clasificacin de
zonas de acuerdo con los rangos de concentraciones de Partculas Totales Suspendidas (PTS),
calculadas en base a promedios anuales:
Partculas, g/m3
< 75
75-200
201-300
> 300

Zona
Aire limpio
Aire moderadamente contaminado
Aire altamente contaminado
Aire muy contaminado

Las zonas con niveles superiores a 300 g/m3 sern objeto de la implantacin de medidas
extraordinarias de mitigacin
Resumen

Se aspira aire ambiental hacia una caseta cubierta, donde se ha colocado un papel de filtro,
para recolectar las partculas con dimetro menor a 100 m en la superficie del filtro. Se pesa
la cantidad de partculas retenidas en el papel en un perodo especfico de tiempo y se mide el
flujo de aire muestreado durante ese lapso. El resultado se expresa en trminos de la masa de
partculas recolectada por unidad de volumen de aire muestreado, usualmente en microgramos
por metro cbico (g/m3). El volumen de aire muestreado se determina por un indicador de
flujo y el tiempo de exposicin. El indicador de flujo del equipo se calibra contra un kit de
referencia, que se toma como patrn, y que a su vez ha sido calibrado por su fabricante.
Las partculas retenidas en el filtro pueden analizarse por una variedad de mtodos para
constituyentes especficos.
Significado y uso

El equipo de Hi-Vol se utiliza con frecuencia para la recoleccin de partculas presentes en la

atmsfera. Algunos parmetros fsicos y qumicos de las partculas recolectadas dependen de
las caractersticas fsicas del sistema de recoleccin y del medio filtrante. El procedimiento
que se presenta mide la concentracin de partculas con buena precisin, pero los niveles de
partculas pueden variar ampliamente de un lugar a otro. Esto implica que la ubicacin del
equipo es primordial, y puede ser ms importante que la falta de precisin en el mtodo de
medicin. En particular, algunas fuentes especficas pueden tener una influencia determinante
sobre un rea prxima, tal como calles no pavimentadas, carreteras o autopistas con alto
trfico vehicular, demolicin de edificios, actividades de construccin y plantas industriales
con emisiones no controladas de partculas. En algunos casos, los niveles de partculas
medidos en tales sitios pueden ser de varios rdenes de magnitud superiores a los que tienen
las mismas comunidades si se excluyen tales fuentes.

Interferencias

Las ms importantes son:

Algunos objetos como insectos, que puedan ser arrastrados hacia el filtro, produciendo
errores de pesada.

42

Aerosoles lquidos, tales como gotas de aceite o de neblina, que puedan ser retenidos
por el filtro. Si la cantidad de lquido retenido es grande, el filtro se humedece, y se
dificulta la operacin del equipo.
Gases y vapores presentes en la atmsfera que puedan reaccionar al adsorberse sobre
el filtro o con las partculas retenidas, y pesarse como partculas.
A medida que se retienen partculas sobre el filtro, disminuye el flujo de aire. Si la
reduccin es muy importante, el flujo promedio que se calcula no produce un estimado
exacto del flujo total durante el perodo de muestreo. La magnitud de este error
depende de la reduccin observada del flujo y de la variacin de la masa de partculas
con el tiempo durante el lapso de muestreo. A manera de referencia, se considera
sospechosa una muestra si el flujo final es menor que la mitad del flujo inicial. Para
conocer la existencia de este problema, se requiere un registro continuo del flujo, o se
puede eliminar completamente tal dificultad empleando un muestreador de flujo
constante.
Existe la posibilidad de falla elctrica o de cambio de voltaje durante el lapso del
muestreo. La magnitud de este error depende de la extensin y de la duracin de la
falla. Es prudente tener un registro continuo del flujo.
No es conveniente dejar el filtro colocado sobre el equipo mucho tiempo antes o
despus de la operacin de muestreo, porque puede introducirse un error adicional. Es
recomendable su instalacin y remocin a tiempo.
Si se emplean dos o ms muestreadores en un sitio especfico, deben colocarse al
menos a 2 m uno del otro, de forma tal que un muestreador no afecte los resultados del
muestreador adyacente.
Los polvos metlicos de los motores, especialmente el cobre, pueden contaminar
apreciablemente la muestra en algunas condiciones.
En algunos casos, el SO2 y el NOx de la atmsfera pueden interferir en la
determinacin de la masa total de partculas.

Aparato

Las caractersticas esenciales del muestreador de alto volumen se muestran en las Figs. 1 y 2.
El aparato est constituido por una unidad compacta, que consiste de:
A. Caseta protectora que cumpla con las siguientes especificaciones:
Debe permitir que el filtro se mantenga en posicin horizontal al menos a 1,0
m sobre el nivel del suelo o la superficie de apoyo.
Debe tener forma rectangular, con techo a dos aguas, que cubra y proteja al
filtro y al muestreador de la lluvia y de otros agentes externos.
El techo de la caseta debe estar apoyado sobre articulaciones, de forma tal que
la separacin entre el extremo inferior y los cuatro lados del cuerpo de la
caseta proporcionen un rea libre media en un plano horizontal de 730 a 1230
cm2, para un flujo entre 1,1 y 1,7 m3/min, con velocidad de captura de 23 2
cm. /s. La distancia libre mnima entre el borde superior de la caseta y el techo
debe ser tal que garantice un rea libre de al menos, un 60% del rea de
aspiracin. (Ver Fig. 2)

43

Pantalla deflectora, que impida que la salida del aire aspirado incida
directamente sobre la superficie de apoyo del muestreador.

FIGURA 2. CASETA DEL MUESTREADOR.

B. Portafiltros, formado por una rejilla de base y marco de soporte para filtros de
abertura rectangular de 8 x 10 pulgadas, empacaduras, protector y tuercas.
C. Aspiradora, capaz de operar por perodos de 24 horas continuas a un flujo de 40 a
60 pie3/min.
D. Medidor de flujo, capaz de registrar hasta 0,03 m3/min (1,0 pie3/min)
E. Programador automtico de tiempo (timer)
F. Contador de tiempo
G. Controlador de flujo (desviacin del 2%).
Adems, se requiere una unidad de calibracin de orificio, que consiste de:

Un tubo de metal de 7,5 cm. de dimetro y 15,9 cm. de longitud, consistente de un

conjunto de 5 platos de resistencia variable al paso del flujo, curva de calibracin
y adaptador, o aquel equipo que cumpla con la misma funcin.
Placa adaptadora de la unidad de calibracin (opcional).

Materiales

1.

Medio filtrante:

44

Filtro de fibra de vidrio o de otro material no higroscpico e inerte, con un rea de 406
cm2 (20,3 x 25,4 cm.), que permita el paso de un flujo mnimo de aire de 1,1 m 3/min
(40 pie3/min) y capaz de retener partculas con dimetro igual o mayor que 0,3 m.
En general, la seleccin del medio filtrante depende del propsito del ensayo, ya que
algunas caractersticas del filtro pueden afectar su seleccin y empleo.
Los medios filtrantes de uso ms comn son:
Fibra de vidrio: Es el de uso ms frecuente, debido a la estabilidad en su peso cuando
cambia el contenido de humedad. Sus caractersticas ms importantes son: un elevado
contenido de fibra de vidrio, poco material de relleno y espesor aproximado de 0,5
mm. Las partculas recolectadas pueden ser examinadas, pero si se desea realizar un
anlisis qumico, debe emplearse el tipo sin relleno. La elevada relacin
superficie/volumen permite la extraccin de contaminantes del material del filtro,
especialmente al utilizar reactivos concentrados.
Fibra de slice: Se emplea cuando se requiere utilizar un filtro de fibra mineral, que
vaya a ser tratado luego con reactivos concentrados. Estos materiales se preparan
generalmente tratando fibra de vidrio con cidos minerales fuertes y luego con agua
desionizada. Esta fibra es muy dbil, pero puede formar hojas sin la adicin de
material de relleno. Este material es de desarrollo reciente, pero ya estn disponibles
en el comercio.
Celulosa: Para algunas aplicaciones especiales, puede ser necesario recoger las
partculas sobre un filtro de celulosa. Se prefiere emplear los filtros de papel sin
cenizas, si se va a destruir el filtro por ignicin o digestin qumica. Sin embargo, tales
filtros presentan elevada resistencia al flujo y ms baja eficiencia de recoleccin de
partculas que los de fibra de vidrio. Adems, la celulosa es muy sensible al contenido
de humedad del aire, haciendo muy difcil la pesada de las partculas recolectadas, lo
que implica el empleo de un recipiente metlico con tapa, donde se coloque el filtro
para su pesada.
2.
3.
4.
5.

Bargrafo o barmetro, capaz de medir presiones cercanas a 0,1 kPa (1 mm Hg)

Termmetro con apreciacin de 0,1 C
Reloj, capaz de indicar 24 h 2 min.
Manmetro diferencial, capaz de medir 4 kPa (40 mm Hg)
6. Desecador de tamao grande o un cuarto adaptado para el acondicionamiento del filtro,
su almacenamiento y pesada. Los filtros se almacenan y acondicionan a una
temperatura entre 15 y 27 C y humedad relativa entre 0 y 50%.
7. Balanza analtica con apreciacin de 0,1 mg y capacidad de 5 g. Es recomendable que
la balanza tenga una cmara de pesada de tamao apropiado, con un soporte que pueda
acomodar el filtro sin necesidad de doblarlo o de exponerlo a sacudidas innecesarias
durante la pesada, que puedan producir deformaciones permanentes o marcas
pronunciadas.

Muestra y mtodo de muestreo

Ubicacin del sitio de muestreo: La caseta para el muestreo debe colocarse en un sitio
protegido de acciones vandlicas, sometido a las siguientes restricciones:

45

Una altura mnima de 2 m y mxima de 15 m medidos a partir de los soportes de la

caseta.
Separada a un mnimo de 2 m de paredes, techos y similares que correspondan a la
misma estructura donde estar colocada.
Ubicacin horizontal a una distancia igual o mayor a dos veces la altura de la
edificacin ms cercana, y de forma tal que no existan restricciones al flujo libre de
aire en un ngulo mnimo de 270 de frente a la direccin predominante de los
vientos. Al aplicar esta restriccin, la distancia del muestreador a la primera
obstruccin en el cuadrante restante debe ser igual o mayor a 2 m.
Colocacin de forma tal que la salida de cualquier fuente fija no incida directamente
sobre la entrada del equipo de toma de muestras.
Lo ms alejada posible de construcciones o movimientos de tierra temporales, quemas
a campo abierto u otras actividades que generen partculas en el rea de muestreo.
Respecto a las vas de trnsito automotor, si el flujo de vehculos es menor de 3000
automotores por da, debe colocarse la caseta a ms de 5 m del borde de la va ms
cercana, y a una altura no menor a 2 m sobre el nivel del suelo. Si el flujo de trnsito
es mayor de 3000 vehculos por da, la ubicacin de la caseta debe hacerse segn los
criterios de la Fig. 3.

FIGURA 3. UBICACIN DE LA CASETA SEGN EL FLUJO DE TRNSITO

(MAYOR A 3000 VEHCULOS/DIA)

Si la caseta se va a ubicar por debajo de vas de trnsito elevadas a menos de 5 m del

nivel del suelo, se debe colocar a una distancia de 25 m a partir del borde ms cercano
de la va, independientemente del flujo de vehculos.
La caseta debe colocarse sobre reas pavimentadas o con otra cubierta que minimice
el arrastre de polvo.

Procedimiento

1. Acondicionamiento del filtro: Preparar el filtro, de acuerdo al siguiente

procedimiento:

46

Seleccin del filtro: Inspeccionar visualmente cada filtro, utilizando una mesa
traslcida iluminada y retirar las fibras sueltas, empleando una brocha suave.
Descartar los filtros que presenten alguna rotura, perforacin o cualquier otra
imperfeccin visible.
Antes de pesarlo, marcar cada filtro (para su identificacin, si es que no tiene
impreso un nmero) y acondicionarlo durante 24 h como mnimo, a una
temperatura menor a 30 C 3C y humedad relativa entre 0 y 50%, constante
dentro de 5%, utilizando un ambiente de acondicionamiento o una cmara
acondicionante. Como cmara, puede utilizarse un desecador de tamao apropiado,
con un agente desecante que asegure una humedad relativa menor del 50%,
constante dentro de 5%. Los filtros de fibra de vidrio y de slice son muy
estables, y un solo ciclo de preparacin puede ser adecuado.
2. Para el pesaje del filtro, encender la balanza y dejarla prendida hasta lograr una
lectura estable, antes de comenzar a pesar los filtros. Durante el acondicionamiento
y pesada del filtro, puede ser necesario enrollarlo, formando un tubo de unos 50
mm de dimetro, para facilitar su manipulacin. No se debe doblar el filtro. Antes
de pesar el primer filtro, debe verificarse la calibracin de la balanza, utilizando
pesas con valores entre 3 y 5 g. No debe haber diferencias en los valores medidos
mayores de 0,5 mg. En caso contrario, debe revisarse y ajustarse la balanza.
Pesar los filtros acondicionados, uno a la vez, colocndolos cuidadosamente y sin
plegar en el platillo de la balanza, de forma tal que el filtro no sufra ningn tipo de
deformacin. Si se utiliz una cmara de acondicionamiento, pesarse cada filtro
dentro de los 30 s despus de retirarlo de sta. Una vez logrado el peso constante,
registrar el valor en la planilla (Ver Anexo A) y colocar el filtro en una carpeta,
empaque o sobre, que garantice que no lleguen partculas al filtro y que no se
doble o contamine.
Anotar en la carpeta o empaque seleccionado para guardar el filtro: el nmero del
filtro, el peso y el nmero de lote o caja.
Guardar el lote de filtros, de modo que no se daen o contaminen. No se debe
plegar o doblar el filtro antes de la captacin de la muestra.
3. Cuando se va a realizar el muestreo, verificar que la caseta est ubicada de acuerdo
a lo estipulado en la pgina anterior.
Retirar el protector metlico del portafiltros, aflojar las tuercas circulares y
remover el marco rectangular. Limpiar sus componentes.
Se debe evitar que el filtro se ensucie, raye o se le adhieran partculas extraas.
Protegerlo de corrientes de aire como las producidas por ventiladores o ventanas
abiertas. De ser posible, manipular el filtro con pinzas y colocarlo en el portafiltros
limpio. Colocar el filtro con la cara ms rugosa (o con el nmero, si lo tiene) hacia
arriba y centrarlo lo mejor posible.
Instalar nuevamente el marco rectangular en su sitio, procurando que el filtro no se
mueva y que quede centrado en la rejilla del portafiltros. Ajustar las tuercas
circulares, y colocar el protector metlico.
4. Quitar el seguro y levantar la tapa de la caseta. Sujetar por detrs. Limpiar bien
todas las partes internas y externas del muestreador, con una brocha seca y/o con
un pao hmedo. Colocar el portafiltros en el muestreador (con el filtro nuevo no

47

5.

6.

7.

8.

9.

expuesto), ensamblando y sujetando bien, hasta lograr un acoplamiento. Encender

el equipo y registrar el flujo inicial, la temperatura y la presin atmosfrica. Ubicar
el portafiltros en su sitio dentro de la caseta. Cerrar la tapa de la caseta. Si no se
cuenta con programador de tiempo, es conveniente colocar y retirar los filtros de
los muestreadores entre las 06:00 AM y las 09:00 AM, para que el da indicado
como del muestreo sea representativo.
Si el equipo no posee programador de tiempo, encenderlo manualmente y anotar el
da y la hora en la hoja de datos, cuando se escuche el arranque de la aspiradora.
Cerciorarse que el flujo se mantenga estable en un rango de 10% del flujo
inicial.
Si el muestreador posee programador de tiempo (timer), colocar el horario y el da
elegido. El horario recomendado es desde las 00 horas hasta las 24 horas, para el
da seleccionado para el muestreo.
Cuando el equipo posee registrador, se debe colocar la carta circular en el
registrador de hora y flujo, y con la plumilla levantada, hacer coincidir con la lnea
correspondiente a la hora, moviendo la lnea central (utilizando un destornillador,
moneda o similar) hacia la derecha, en el sentido de las agujas del reloj. Bajar la
plumilla, hasta que haga contacto con la carta circular y verificar que el registrador
funcione correctamente.
Dejar el equipo en funcionamiento por el tiempo especificado, que es generalmente
24 h. Si es posible, registrarse durante este perodo varias lecturas de flujo,
temperatura, presin atmosfrica y tiempo. Tomar un conjunto final de lecturas
cuando culmina el perodo del ensayo. Si slo se registran las lecturas iniciales y
finales, suponer que los cambios de las mediciones son lineales en el perodo de la
prueba. Al tomar lecturas intermedias, se incrementa la exactitud de la medicin
del volumen. Es mejor un registro continuo.
Luego del tiempo de exposicin y de registrar todas las lecturas finales, apagar el
equipo y anotar inmediatamente la hora. Quitar el sujetador, levantar la tapa de la
caseta y sujetarla por atrs. Remover el portafiltros y extraer el papel con mucho
cuidado, para no perder material del filtro o partculas de la muestra. Doblar el
filtro por la mitad, de forma tal que haga contacto la parte expuesta. Colocarlo
dentro de un envoltorio ms grande, para garantizar que no haya prdida del
material retenido en el filtro. Identificar exteriormente el envoltorio. Si se observa
la presencia de insectos en el filtro expuesto, retirarlos cuidadosamente con una
pinza plstica, cuidando de no daar el filtro.
Los filtros expuestos se deben enviar al laboratorio acompaados de 2 ejemplares
de la hoja de datos (no copias al carbn) en una carpeta de cartulina o cartn,
dentro de un sobre cerrado con pegamento o cinta adhesiva. Evitar el uso de
grapas, porque accidentalmente pueden perforar los filtros. Todo el manejo de los
filtros (doblado, embalaje y transporte) debe garantizar que no haya disminucin
en la calidad del ensayo.
En el laboratorio, se saca el filtro del sobre y se acondiciona de forma similar a lo
establecido para el filtro sin exponer, colocndolo en un desecador o en un
ambiente de acondicionamiento. Despus de 24 h a la misma temperatura y
humedad utilizadas para el acondicionamiento inicial, se saca y se pesa el papel
expuesto en una balanza analtica con aproximacin del 0,1 mg. Puede ser

a.
b.
c.
d.
e.
f.

48

necesario repetir esta operacin de acondicionamiento y pesada, hasta que el peso

final sea estable. Anotar el peso. Restar ese valor del peso inicial del filtro sin
exponer. Registrar la diferencia como peso de material recolectado. Muchas
muestras son suficientemente estables para que el peso final sea razonablemente
constante. Cuando la muestra contiene una elevada proporcin de un material
altamente higroscpico, puede ser difcil obtener un peso final reproducible.
10. Los filtros expuestos se pueden guardar si se desean determinar sobre ellos algunos
contaminantes especficos, siempre que el material del filtro posea las
caractersticas apropiadas, segn el caso.
11. Guardar el filtro expuesto en una carpeta, que contiene una planilla con los
siguientes datos:
Identificacin de la estacin de muestreo
Fecha y lapso del muestreo
Flujo inicial y final del muestreo
Volumen de aire muestreado
Peso inicial y final del filtro
Temperatura y presin atmosfrica, inicial y final.
g. Observaciones: Cercanas de incendios o quemas, movimientos de tierra, reas
descubiertas de vegetacin con posibilidad de producir polvo o partculas,
trnsito vehicular y sus caractersticas, lluvia, intensidad y direccin del viento,
fenmenos meteorolgicos y cualquier otra causa que pueda alterar la toma de la
muestra.
12. Colocar en el portafiltros un nuevo filtro no expuesto, con la cara ms rugosa
hacia arriba, y centrado sobre el soporte. Anotar el nmero del filtro en la hoja de
datos, y proceder de la misma forma explicada previamente.
Calibracin

Para la calibracin del equipo, hay varios dispositivos y procedimientos. Aqu se explica el
mtodo que emplea platos perforados. (ver Fig. 4).

FIGURA 4. EQUIPO DE CALIBRACIN.

En las normas ASTM aparece una metodologa, mientras que las normas COVENIN describen
un procedimiento diferente. Se detalla cada uno de los mtodos por separado.

49

NORMAS ASTM:
Remover el soporte del filtro de la unidad de muestreo e insertar en el extremo de
acoplamiento del calibrador el plato perforado que corresponde al central de la serie
(por ej., el tercero de cinco), asegurndose que haya un empaque a cada lado del plato.
Montar el calibrador en el muestreador y conectar el manmetro.
Medir y anotar la presin y temperatura ambiente.
Encender el equipo y tomar la lectura de cada de presin. Determinar el flujo
correspondiente, utilizando la carta de calibracin. Es probable que la lectura del
rotmetro sea algo diferente. Si ese es el caso, ajustar la vlvula de control del
rotmetro hasta que corresponda con el valor ledo en la curva de calibracin. No se
debe cambiar este ajuste, a menos que el equipo vaya a ser recalibrado.
Operar el equipo, utilizando el resto de las placas perforadas y registrar el flujo (ledo
en la carta de calibracin) y la lectura del rotmetro.
Construir una tabla y elaborar la curva de calibracin. Si las lecturas son iguales para
todos los puntos de la curva, puede tomarse directamente la medicin en el rotmetro.
En caso contrario, se aplican las correcciones correspondientes.
NORMAS COVENIN:
Acoplar la placa adaptadora del cilindro de calibracin sobre la rejilla (verificar que la
placa posee empacadura rectangular en buenas condiciones)
Acoplar el cilindro de calibracin a la placa, verificando que la empacadura circular
est en buenas condiciones. No colocar ningn plato.
Poner a funcionar el muestreador por 5 minutos, para que se establezca el equilibrio
trmico antes de la calibracin.
Anotar el serial del cilindro en la hoja de datos de calibracin (ver Anexo B).
Abrir las dos conexiones del manmetro del calibrador, y verificar que el lquido (agua
destilada, que puede estar coloreada) est nivelado a ambos lados. Si no, desenroscar
ambas conexiones y soplar por una de ellas, hasta conseguir la nivelacin.
Medir y anotar la presin y temperatura ambiente.
Colocar el manmetro del calibrador en la parte exterior del muestreador. Dejar abierta
a la atmsfera una de las conexiones y conectar la otra a la manguera del cilindro del
calibrador.
Con el equipo en funcionamiento, tomar la primera lectura del manmetro del
calibrador y la primera lectura del flujo en el rotmetro. Apagar el equipo.
Instalar al calibrador el plato de menor resistencia (mayor nmero de orificios),
encender el equipo y tomar nota nuevamente de las lecturas del manmetro y del
rotmetro.
Repetir el mismo procedimiento para el resto de los platos, y anotar las lecturas
correspondientes.
Medir al final la presin atmosfrica y la temperatura ambiente, y promediarlas con las
iniciales. Anotar el resultado en la hoja de datos de calibracin.

50

Para cada lectura del manmetro, obtener el flujo equivalente en la curva patrn de
calibracin (grfica suministrada por el fabricante) y anotarlo en la casilla respectiva
de la hoja de datos de calibracin (Q cf). Este flujo corresponde al medido a las
condiciones de elaboracin de la curva patrn.
Los flujos corregidos a las condiciones de medicin, Qcm, se calculan por la ecuacin:
Qcm

T
P
Qcc x cm x cc
Tcc Pcm

1/ 2

(1)
Donde:
Qcm : Flujo a las condiciones de muestreo, m3/min (o pie3/min, si es el caso).
Qcc : Flujo a las condiciones de elaboracin de la grfica, m3/min (o pie3/min, si es el
caso), utilizando la curva de calibracin suministrada por el fabricante o por un
organismo o instituto reconocido.
Tcm : Temperatura a las condiciones de muestreo, K
Tcc : Temperatura a las condiciones de elaboracin de la grfica, K.
Pcm : Presin a las condiciones de muestreo, mm Hg.
Pcc: Presin a las condiciones de elaboracin de la grfica, mm Hg.

Los flujos corregidos a las condiciones del Decreto 638 (298 K, 760 mm Hg)
(condiciones estandarizadas) se obtienen con la expresin:
Test Pcc

x
Tcc Pest

Qest = Qcm x
(2)
Construir una grfica con los valores obtenidos de flujos corregidos estandarizados vs.
la lectura del rotmetro y obtener la ecuacin de la recta de mnimos cuadrados que
mejor se adapta a esos valores.
El muestreador debe calibrarse cada 6 meses, despus del cambio de las escobillas del
motor, o cuando se observe una variacin mayor del 10% entre la lectura inicial y la
obtenida despus de 15 minutos en el dispositivo medidor del flujo.

La norma COVENIN sugiere el siguiente procedimiento para los clculos:

Qcm se calcula utilizando la ecuacin (1):
Qcm

T
P
Qcc x cm x cc
Tcc Pcm

1/ 2

(ver ms arriba)

Los flujos corregidos a las condiciones del Decreto 638 (298 K, 760 mm Hg)
(condiciones estandarizadas) se obtienen con la expresin:

Test Pcc

x
Tcc Pest

Qest = Qcm x

Volumen de aire corregido a las condiciones estandarizadas (298 K, 1 atm): El clculo

se realiza utilizando la siguiente expresin:

51

Vest = Qest x t
Donde:
Vest : volumen corregido a las condiciones estandarizadas (Decreto 638), m3
Qest : flujo corregido a las condiciones estandarizadas, m3/min.
t : tiempo de muestreo, min.

Concentracin de partculas totales suspendidas:

La concentracin de partculas totales suspendidas, g/m3, se calcula a travs de la
expresin:
Pf Pi
PTS
x10 6
Vest

Manejo de los datos y clculos

Se explica el procedimiento que se sigue cuando se ha realizado la calibracin con los discos
perforados:
1.

Se dispone de una Tabla de datos de calibracin (ANEXO B), como la siguiente:

Disco

Lectura del
manmetro
Pulg. H2O

Lectura del
Rotmetro
Pie3/min

[1]
18
13
10
7
5

[2]

[3]

Flujo a
Condiciones
de fabricacin
Qcf, m3/min
[4]

Flujo a
condiciones
de medicin
Qcm, m3/min
[5]

Flujo a
Condiciones
Estndar
Qest, m3/min
[6]

En la Tabla, se conocen los datos de las columnas [2] y [3] (lectura del manmetro y lectura
del rotmetro, respectivamente). Adems, en la calibracin, se registr la temperatura y
presin atmosfrica y para la muestra, se tom nota de la temperatura y presin al inicio y
final del lapso de muestreo y del tiempo de muestreo.
2. Para obtener los flujos Qcf, (columna [4]), apoyarse en la hoja de datos de calibracin
del fabricante, suministrada por el profesor.
3. Los valores de Qcm (columna [5]) se calculan con la ecuacin (1), conocidos los
valores de Tcf y Pcf (temperatura y presin a las condiciones de calibracin,
respectivamente, que aparecen en la hoja de calibracin del fabricante), y de T cm =
temperatura a las condiciones de medicin, K, y P cm = presin atmosfrica a las
condiciones de medicin.
4. Utilizando la ecuacin (2), se determina Qest, (columna [5]) para cada disco, ya que
Test = 298 K y Pest = 1 atm (o su equivalente en otras unidades).

52

5. Se grafica, para cada disco, el flujo a condiciones estndar (m 3/min) (columna [6]) en
funcin de la lectura del rotmetro (pie 3/min) y se determina la ecuacin de la lnea
de regresin lineal.
6. Con el flujo promedio entre el inicio y final del muestreo, pie 3/min y utilizando la
ecuacin o la grfica obtenida en el paso anterior, se encuentra el flujo estndar para
el muestreo realizado.
7. El volumen de aire muestreado, Vest, es igual al flujo estndar, m3/min, del paso 6
multiplicado por el tiempo de muestreo en minutos.
8. La masa de partculas se calcula por la diferencia de pesada entre el filtro con
muestra y sin ella.
9. Finalmente, para obtener la concentracin de partculas totales suspendidas, PTS, se
emplea la expresin:
Pf Pi
PTS , g / m 3
x10 6
Vest
Donde:
PTS: concentracin de partculas totales suspendidas, g/m3
Pf: Peso final del filtro, g
Pi: Peso inicial del filtro, g
Vest: Volumen corregido a las condiciones estndar, m3
106: Factor de conversin de g a g.
Bibliografa consultada

1. Annual Book of ASTM Standards: D 4096-89: Standard Practice for Application of

the Hi-Vol (High Volume) Sampler Method for Collection and Mass Determination of
Airborne Particulate Matter ASTM. 1995.
2. Norma COVENIN 2060:1996: Determinacin de la concentracin de partculas
totales suspendidas en la atmsfera (PTS)(1 revisin). Fondonorma. 1996.
3. Warner, P.:Anlisis de los Contaminantes del Aire. Captulo 5. Paraninfo. Madrid.
1981.
4. Decreto 638 Normas Sobre Calidad del Aire y Control de la Contaminacin
Atmosfrica. Gaceta Oficial de la Repblica de Venezuela N 4.899 (Extraordinario).
19/05/1995.

53

ANEXO A

HOJA DE DATOS DE MUESTREO

MUESTREO:
CIUDAD_______________________ DIRECCIN : __________________________
ESTACIN N _________________________________________________________
NMERO DEL FILTRO: _______________________
NMERO DE IDENTIFICACIN DEL MUESTREADOR: _____________________
FECHA DE LA LTIMA CALIBRACIN: __________________________________
HORAS DE OPERACIN ACUMULADAS DESDE QUE SE CAMBIARON POR
LTIMA VEZ LAS ESCOBILLAS: ______________
TOMA DE MUESTRA:
INICIAL: FECHA: ____________ DIA DE LA SEMANA: ___________
HORA:___________ OPERADOR: _________________ FLUJO: _______(F1, pie3/min)
FINAL:
FECHA: ____________ DIA DE LA SEMANA: ___________
HORA:___________ OPERADOR: _________________ FLUJO: _______(F2, pie3/min)
ANLISIS:
FECHA: ________________
IDENTIFICACIN DEL FILTRO (en lugar de nmero de filtro): ___________________
PESO INICIAL DEL FILTRO: __________________________ g
PESO FINAL DEL FILTRO: ____________________________ g
PESO NETO DE LA MUESTRA: ________________________ g
TIEMPO DE MUESTREO TOTAL: ______________________ min
VOLUMEN DE AIRE: _________________________________ m3
CONCENTRACION DE PARTCULAS TOTALES SUSPENDIDAS (PTS): ____________ g/m3
ANALISTA: _________________________________________
OBSERVACIONES:_________________________________________________
________________________________________________________________

54

ANEXO B

HOJA DE DATOS DE CALIBRACIN

CIUDAD:
FECHA DE CALIBRACIN:
ESTACION:
CALIBRACIN EFECTUADA POR:
PRESIN BAROMTRICA Pcm =
TEMPERATURA AMBIENTE Tcm = C =

ENTIDAD FEDERAL:

mm Hg
K

SERIAL N:

PRESION A LA QUE SE REALIZ LA CALIBRACIN DEL SISTEMA DE PLATOS , Pcf =

TEMPERATURA A LA QUE SE REALIZ LA CALIBRACIN DEL SISTEMA DE PLATOS ,

Disco
18
13
10
7
5

Lectura del
manmetro
Pulg. H2O

Lectura del
Rotmetro
Pie3/min

Flujo a
Condiciones
de fabricacin
Qcf, m3/min

mm Hg
Tcf =
C =

Flujo a
condiciones
de medicin
Qcm, m3/min

Flujo a
Condiciones
Estndar
Qest, m3/min

55

PRACTICA 5. OXGENO DISUELTO

Introduccin

El anlisis de oxgeno disuelto, OD, es un ensayo clave en las actividades de control de la

contaminacin del agua y en los procesos de tratamiento de aguas residuales, y sirve como
base para cuantificar los niveles de D.B.O., aerobicidad de los mtodos de tratamiento, tasas
de aireacin y grado de polucin de los ros.
Las aguas naturales contienen de 0 a 14 ppm de oxgeno disuelto segn la temperatura y
estado de saturacin. Hay una relacin inversa del OD con la temperatura. Cuando la
concentracin disminuye por debajo de 3 ppm, los peces mueren o abandonan la zona. Los
niveles del gas en aguas naturales y residuales dependen de la actividad fsica, qumica y
bioqumica del cuerpo de agua.
En el caso del agua para calderas, los metales de la tubera se disuelven en el rea de ms bajo
potencial, para dar iones y liberar electrones de acuerdo a la siguiente ecuacin:
Fe = Fe2+ + 2 e-

En el nodo:
En el ctodo:

O2 + 2 H2O + 4 e- = 4 OH-

Los iones OH- (oxidrilos) formados en el ctodo migran hacia el nodo donde completan la
reaccin con la formacin de hidrxido ferroso que precipita de la siguiente forma:
Fe 2+ + 2 OH- = Fe(OH)2
Si la concentracin de hidrxido ferroso es elevada, precipitar como flculos blancos. Por tal
razn, debe reducirse prcticamente a cero el contenido de oxgeno disuelto del agua, por
tratamiento con sustancias como la hidracina o el sulfito de sodio.
El OD en el agua puede determinarse por una variedad de mtodos, a saber:
Rango de O2, mg/L
1.
2.
3.
4.

Colorimtrico
Titulomtrico, concentracin baja
Titulomtrico, concentracin alta
Instrumental (analizador de oxgeno)

< 0.06
< 1.0
> 1.0
0,05 a 20

En esta prctica, se describe el mtodo 3 (titulomtrico, concentracin alta). Para detalles de

los otros 3 procedimientos, ver las normas ASTM (consultar la seccin de Bibliografa, al
final de esta prctica).
La tcnica titulomtrica, tambin conocida como mtodo de Winkler, tiene diversas
modificaciones, dependiendo del tipo de muestra. Este procedimiento utiliza una solucin
alcalina de yoduro de potasio como agente oxidable, la cual libera, en medio cido al oxidarse,
una cantidad de yodo proporcional a la concentracin de oxgeno disuelto. El yodo liberado

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puede titularse con una solucin estndar de tiosulfato de sodio, en presencia de almidn
como indicador. De esta forma, se pueden determinar concentraciones de OD entre 0,005 y 8
ppm. Para eliminar la interferencia producida por los nitritos, se emplea una solucin de
yoduro con azida de sodio (mtodo de Alsterberg o de la azida). El nitrito frecuentemente est
presente en los efluentes tratados biolgicamente y en las muestras incubadas para la DBO:
NaN3 + H+ = HN3 + Na+
HN3 + NO3- + H+ = N2 + N2O + H2O
El procedimiento que se detalla a continuacin puede aplicarse estando presentes una variedad
de sustancias interferentes. Es una combinacin del mtodo de Winkler, el de Alsterberg, la
modificacin de Rideal-Stewart (permanganato) y la modificacin de Pomeroy-KirshmanAlsterberg, y se basa en el hecho de que el OD oxida el in Mn 2+ a un estado superior de
valencia en condiciones alcalinas. Este Mn puede oxidar el in I- a yodo libre, I2, en
condiciones cidas. La cantidad de yodo liberado se mide con solucin estndar de tiosulfato
de sodio y es equivalente a la cantidad de OD originalmente presente en la muestra. La
interferencia de nitritos se evita al emplear nitruro de sodio y la del hierro ferroso con
permanganato de potasio.
Las reacciones que ocurren son:
1. Entre el sulfato de manganeso y el hidrxido de potasio, para formar hidrxido
manganoso:
MnSO4 + 2KOH = Mn(OH)2 + K2SO4
2. Oxidacin del hidrxido manganoso a hidrxido mangnico por el oxgeno disuelto en
el agua:
4Mn(OH)2 + O2 + 2H2O = 4Mn(OH)3
Precipitado carmelita
3. Disolucin del precipitado de hidrxido mangnico por el cido sulfrico. En este
punto, la muestra se considera fijada y se reduce la importancia de introducir
oxgeno adicional:
2Mn(OH)3 + 3H2SO4 = Mn2(SO 4)3 + 6H2O
4. Oxidacin del yodo presente en el yoduro de potasio por el sulfato mangnico. Como
la aparicin de sta ltima sustancia proviene de la reaccin del oxgeno disuelto
presente en la muestra original, la cantidad de yodo liberado es directamente
proporcional a la de oxgeno disuelto:
Mn2(SO4)3 + 2KI = 2MnSO4 + K2SO4 + I2
5. La etapa final es la titulacin del yodo liberado con tiosulfato de sodio en presencia de
almidn. Este ltimo reactivo produce una coloracin azul oscura con el I 2, que va
desapareciendo con el progreso de la valoracin, hasta que se desvanece
completamente en el punto final:
I2 + almidn = color azul

57

I2 + 2S2O32- = S4O62- + 2IAspectos Legales

Las Normas de Calidad de Agua Potable de Venezuela no establecen niveles (en este caso
mnimos) de OD en el agua para consumo humano.
En el Decreto 883, el Art. 4 fija los lmites del gas, segn el tipo de agua:
Niveles de Oxgeno disuelto segn el tipo de agua
TIPO
1A
1B
3
4
6
7

Valor mnimo (% saturacin)

> 4 mg/L (> 50%)
> 4 mg/L (> 50%)
> 5 mg/L (> 60%)
> 5 mg/L (> 60%)
> 4 mg/L (> 50%)
> 3 mg/L

Resumen

El ensayo se basa en la adicin de solucin divalente de manganeso en medio alcalino fuerte,

a la muestra en un recipiente de vidrio tapado. El oxgeno disuelto presente oxida rpidamente
una cantidad equivalente del precipitado de hidrxido de manganeso a hidrxidos de mayor
estado de oxidacin. En presencia de yodo y en medio cido, el manganeso oxidado regresa al
estado divalente, liberando una cantidad de yodo equivalente al contenido original de oxgeno
disuelto en la muestra. El yodo se titula con una solucin estndar de tiosulfato de sodio. El
punto final se determina con indicador de almidn.
Significado y uso

El oxgeno disuelto es necesario para la supervivencia y el crecimiento de los peces y muchos

otros organismos acuticos. Este parmetro tambin puede estar asociado con la corrosividad
y la actividad fotosinttica. La ausencia de oxgeno permite la descomposicin anaerbica de
la materia orgnica y la produccin de sustancias txicas e indeseables en el agua.
El oxgeno disuelto es perjudicial en el agua para la produccin de vapor en calderas, ya que
su presencia acelera la corrosin (sobre todo si est acompaado de CO 2). Un nivel mayor a
0,01 mg/L es inaceptable para la mayora de estos equipos. Para medir la eficiencia de
remocin de OD (por medios qumicos o mecnicos) en el agua que alimenta a una caldera se
requiere su medicin antes y despus del proceso de eliminacin. Tal comprobacin tambin
es til para revisar una posible entrada de aire al sistema.

Precauciones de seguridad

Esta prctica puede involucrar el empleo de materiales, operaciones y equipos peligrosos. No

se asume que se describan aqu todos los problemas de seguridad relacionados con su uso.

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Queda bajo la responsabilidad del usuario establecer las prcticas apropiadas y la aplicacin
de medidas especficas para desarrollar actividades seguras. Considerar, sin embargo, los
siguientes aspectos:
1. Debe tenerse cuidado extremo al manipular soluciones concentradas de cido sulfrico.
Emplear ventilacin adecuada, gafas protectoras, mascarilla, guantes de goma y trajes
protectores. Si ha habido contacto con la solucin, el tratamiento consiste en lavar los ojos con
agua, con agua y jabn las partes contaminadas del cuerpo y lavado gstrico si se ha ingerido.
2. El dicromato de potasio es un irritante y alrgeno. Como todas las sales hexavalentes de
cromo, es muy txico. Utilizar ventilacin adecuada, guantes, delantales y botas de goma,
mascarilla con filtro mecnico. Acentuar la limpieza personal. Si ha habido contacto con la
solucin, el tratamiento incluye lavado de los ojos con agua, con agua y jabn de las partes
contaminadas del cuerpo y lavado gstrico, si se ha ingerido.
3. La azida de sodio es un compuesto irritante. Utilizar ventilacin adecuada, gafas de
seguridad y mascarilla con filtro mecnico. Emplear vestidos protectores de goma al manejar
soluciones. Acentuar la limpieza personal. Si ha habido contacto con la solucin, el
tratamiento incluye lavado de los ojos con agua, con agua y jabn de las partes contaminadas
del cuerpo y lavado gstrico, si se ha ingerido, seguido por un purgante salino.
4. Las soluciones de hidrxido sdico son altamente corrosivas. Al contacto con los ojos,
producen conjuntivitis y quemaduras de la crnea. En la piel, ocasionan quemaduras
profundas. Por ingestin, causan quemaduras de boca y esfago, dolor abdominal y diarrea.
Para su manipulacin, emplear ventilacin adecuada, gafas protectoras o pantalla para la cara,
mascarilla, guantes, delantales y botas de goma y acentuar la limpieza personal. Si hay
contacto con la solucin, lavarse inmediatamente los ojos con agua, con agua y jabn las
partes contaminadas del cuerpo y lavado gstrico con solucin de cido actico al 5%, si se ha
ingerido. El dao corneal puede ser permanente, lo mismo que la estrechez del esfago y
estmago.
Interferencias

La interferencia de ms de 50 g/L de nitrito se elimina utilizando azida de sodio. Puede

tolerarse un mximo de 100 a 200 mg/L de hierro frrico, adicionando 1 mL de solucin de
fluoruro de potasio. La interferencia de hierro ferroso (no ms de 1 ppm) se elimina agregando
permanganato de potasio y la de materia orgnica puede atenuarse empleando soluciones
concentradas de solucin de yoduro-azida.
Aparatos

1. Botellas para la muestra: De 250 a 300 mL de capacidad, con tapa de vidrio

esmerilado. Hay disponibles en el mercado algunos recipientes especiales (botellas de
Winkler), pero las convencionales son satisfactorias.
2. Pipetas de 10 mL, graduadas en divisiones de 0,1 mL.
3. Bureta de 10,0 mL
Reactivos y materiales

A. REACTIVOS:
1) Solucin alcalina de yoduro:
a. Solucin alcalina de yoduro: Se usa si se conoce que el in nitrito se encuentra
ausente, y se van a hacer ajustes a la interferencia del in ferroso. Disolver 500 g de
hidrxido de sodio, NaOH, o 700 g de hidrxido de potasio, KOH, y 135 g de yoduro

59

2)
3)
4)

5)
6)

de sodio, NaI, o 150 g de yoduro de potasio, KI, en agua y diluir a 1 L. Las sales de
sodio y potasio son equivalentes. La solucin final no debe producir color con almidn
cuando se diluye y acidifica. Almacenar esta solucin en un recipiente de vidrio oscuro
y tapado.
b. Solucin alcalina de azida-yoduro de sodio I (para muestras normales): Se
emplea cuando no se considera la interferencia del in ferroso: Disolver 500 g de
hidrxido de sodio, NaOH, o 700 g de hidrxido de potasio, KOH, y 135 g de yoduro
de sodio, NaI, o 150 g de yoduro de potasio, KI, en agua y diluir a 950 mL. Enfriar.
Agregar lentamente una solucin de 10 g de azida de sodio, NaN 3, disuelta en 40 mL
de agua. Las sales de sodio y potasio son equivalentes. La solucin final no debe
producir color con almidn cuando se diluye y acidifica. Almacenar esta solucin en
un recipiente de vidrio oscuro y tapado.
c. Solucin alcalina de azida-yoduro de sodio II: Se utiliza cuando existe elevada
concentracin de materia orgnica, o si la concentracin de oxgeno disuelto excede
los 15 mg/L. Disolver 400 g de hidrxido de sodio, NaOH, en 500 mL agua
recientemente hervida y enfriada. Enfriar la solucin resultante y disolver 900 g de
yoduro de sodio, NaI. Agregar lentamente una solucin de 10 g de azida de sodio,
NaN3, disuelta en 40 mL de agua. Enrasar a 1 L.
Solucin de sulfato manganoso (364 g/L): Disolver 364 g de sulfato manganoso,
MnSO4.H2O, en agua. Filtrar y diluir a 1 L. No deben liberarse ms que trazas de yodo
cuando esta solucin se aade sobre una solucin acidificada de yoduro de potasio, KI.
Solucin de dicromato de potasio 0,025 N: Secar el K2Cr2O7 a 103 C por 2 h antes de
preparar la solucin. Pesar 1,226 g de la sal, disolver y enrasar a 1 L con agua
destilada.
Solucin de tiosulfato de sodio 0,1 N: Disolver 24.82 g de Na 2S2O3.5H2O en agua
destilada recientemente hervida y fra y diluir a 1 L. Preservar esta solucin agregando
5 mL de cloroformo. Para preparar una solucin diluida (0,005 N), transferir 25,00 mL
del Na2S2O3 0,1 N a un matraz volumtrico de 500 mL. Enrasar con agua destilada y
mezclar. Esta solucin no debe prepararse antes de 12 a 15 horas de su uso.
Solucin de tiosulfato de sodio 0,025 N: Diluir 250 mL de solucin estandarizada de
Na2S2O3 0,1 N a 1 L con agua destilada. 1 mL de solucin de tiosulfato 0,025 N es
equivalente a 0,2 mg de oxgeno (1 mL x 0,025 meq/mL x 8 mg/meq = 0,2 mg).
Solucin indicadora de almidn: Mezclar 6 g de almidn soluble con un poco de agua
destilada en un mortero para formar una pasta. Colocar esta pasta sobre 1 L de agua
hirviendo. Enfriar. Agregar 20 g de hidrxido de potasio y mezclar. Dejar en reposo
por 2 h. Agregar 6 mL de cido actico glacial (99,5 %). Mezclar

completamente. Aadir suficiente HCl (de densidad 1,19 g/mL) para ajustar el pH de
la solucin a 4. Almacenar la solucin en una botella con tapa de vidrio. Esta solucin
es estable por 1 ao.
7) Acido sulfrico concentrado (densidad 1,84 g/mL).
8) Solucin de cido sulfrico (1+9): En un vaso de precipitado de 250 mL, colocar
cuidadosamente 10 mL de cido sulfrico concentrado (g. e. = 1,84) en 90 mL de agua.
Enfriar a temperatura ambiente.
9) Solucin de fluoruro de potasio (400 g/L): Disolver 40 g de fluoruro de potasio,
KF.2H2O, en agua y diluir a 100 mL. Almacenar en botella plstica. Esta solucin se
utiliza para eliminar la interferencia por hierro frrico.

60

10) Solucin de oxalato de potasio (20 g/L): Disolver 2 g de oxalato de potasio,

K2C2O4.H2O en 100 mL de agua. 1 mL de esta solucin reduce 1,1 mL de solucin de
KMnO4. Esta solucin se emplea para eliminar la interferencia del hierro ferroso.
11) Solucin de permanganato de potasio (6,3 g/L): Disolver 6,3 g de permanganato de
potasio, KMnO4, en agua y diluir a 1 L. Con concentraciones muy elevadas de hierro
ferroso, 1 mL de la solucin de KMnO4 es suficiente para eliminar tal interferencia.
12) Yoduro de potasio slido, KI.
B. MATERIALES:
Botellas de vidrio con tapa esmerilada de 250 o 300 mL
Termmetro
Barmetro
Pipetas graduadas de 1, 2 y 5 mL
Pipetas volumtricas de 2 y 10 mL
Cilindro de 250 mL
Bureta de 10, 25 50 mL (recomendada la de 10 mL)
Balanza analtica
Soporte para la bureta
Muestra y mtodos de muestreo

La recoleccin de la muestra para OD debe hacerse con extremo cuidado. Pueden utilizarse
recipientes de vidrio o de DBO. Generalmente, el anlisis se realiza inmediatamente, sin
preservacin ni almacenamiento (ver Preservacin de las muestras). El procedimiento
especfico de muestreo depende de la fuente y del mtodo de anlisis. No se debe dejar que la
muestra permanezca en contacto con el aire o que se someta a agitacin, porque cualquiera de
las dos condiciones produce un cambio en el contenido de gases. El muestreo de ros, lagos,
reservorios, y del agua para calderas necesita precauciones especiales para evitar cambios de
presin y temperatura. Se han desarrollado equipos especiales para tales fines.
Las muestras de agua superficial se recolectan en botellas de vidrio de 300 mL, de cuello
angosto y con tapa de vidrio. Debe evitarse la entrada de oxgeno de la atmsfera.
Para el muestreo de agua a presin, conectar un tubo de material inerte (acero inoxidable 304
o 316 o vidrio con conexiones cortas de neopreno) y extender su extremo hasta el fondo de la
botella de muestreo. No debe utilizarse tubo de cobre o conexiones largas de neopreno u otro
tipo de polmero. Si el agua a muestrear se encuentra a temperatura superior a la ambiente,
colocar un serpentn de enfriamiento en la lnea de muestreo, para enfriarla a 16-18 C. El
flujo de muestreo debe ajustarse para que se llene el recipiente en 40 a 60 s, y permitir un flujo
suficiente de lquido para suministrar un mnimo de 10 cambios en el recipiente de muestreo.
Evitar la retencin de burbujas de aire.
Preservacin de las muestras

Debe determinarse inmediatamente el OD en todas las muestras que tienen una cantidad
apreciable de demanda (o nivel) de oxgeno o de yodo. Las muestras que no tienen demanda
de yodo pueden almacenarse durante unas pocas horas sin cambios importantes, luego de
agregar las soluciones de sulfato de manganeso, lcali-yoduro y cido sulfrico, seguido por

61

agitacin del modo usual. Las muestras almacenadas en tales condiciones deben protegerse de
la luz solar directa, y titularse tan pronto como sea posible.
Para muestras con demanda de yodo, se preservan por 4 a 8 h agregando 0,7 mL de H 2SO4
conc y 1 mL de solucin de azida de sodio (que contiene 2 g NaN 3/100 mL de agua destilada)
a la botella de OD. Al realizar esto, se inhibe la actividad biolgica y se mantiene el OD si el
recipiente que contiene la muestra se mantiene a la temperatura de recoleccin o mediante un
sello de agua (invirtiendo la botella en agua) y mantenindola a una temperatura de 10 a 20
C. Tan pronto como sea posible, debe completarse el procedimiento de determinacin de OD.
Procedimiento

1. Eliminacin de la interferencia de in ferroso (si es necesario): Colocar la muestra en

un frasco de tapa esmerilada de 250 o 300 mL. Aadir (utilizando una pipeta de 1 mL
con divisiones de 0,1 mL), 0.70 mL de H 2SO4, seguido por 1,0 mL de solucin de
KMnO4. Si hay hierro frrico, agregar tambin 1,0 mL de solucin de KF. Tapar y
mezclar por inversin. La cantidad de KMnO4 debe ser suficiente para mantener un
ligero color violeta durante 5 min. Si el color desaparece antes, adicionar ms solucin
de KMnO4, pero evitar un gran exceso. Cuando se necesite ms de 5 mL de la solucin
de permanganato, es mejor emplear una solucin ms concentrada de este reactivo
para evitar la dilucin de la muestra.
2. Despus de 5 min, destruir completamente el color del permanganato agregando 0,5 a
1,0 ml de solucin de K2C2O4. Mezclar completamente y dejar en reposo en la
oscuridad. La adicin de un exceso de oxalato produce resultados bajos de OD, por lo
que debe agregarse slo suficiente solucin para la completa decoloracin del
permanganato, sin un exceso mayor de 0,5 mL. La desaparicin del color debera
ocurrir dentro de los 2 a 10 minutos. Si la muestra se decolora solo con un gran exceso
de oxalato, los resultados de OD deben considerarse dudosos.
3. Adicionar 2,0 mL de solucin de MnSO4, seguido por 2,0 mL de la solucin de lcaliyoduro-azida por debajo de la superficie del lquido.
Nota: Emplear la solucin alcalina de yodo apropiada para cada caso: Solucin a para cuando el in nitrito est
ausente o el in ferroso fue oxidado; Solucin b para uso normal; Solucin c si la concentracin de materia
orgnica o de oxgeno disuelto es elevada. Utilizar 2,0 mL de la solucin lcali-yoduro-azida para asegurar mejor
contacto con la muestra, con menos agitacin. Con recipientes de 250 mL, puede emplearse 1,0 mL de la solucin
de lcali-yoduro-azida. Todos los reactivos, menos el cido sulfrico deben adicionarse bien debajo de la superficie
del lquido.

La temperatura de la muestra no debe exceder los 30 C, para evitar prdidas por la

volatilidad del yodo. Colocar cuidadosamente la tapa, para excluir las burbujas de aire,
y mezclar, invirtiendo la botella varias veces. Repetir el mezclado por segunda vez
luego que el flculo ha sedimentado, dejando un sobrenadante claro. Las aguas con
alto contenido de cloro necesitan un perodo de contacto de 10 min con el precipitado.
Cuando el flculo ha sedimentado, dejando al menos 100 mL de sobrenadante claro,
quitar la tapa y agregar 2,0 mL de H2SO4 conc, dejando que el cido caiga por el lado
interno del cuello. Tapar de nuevo y mezclar otra vez por inversin, hasta que el
precipitado se disuelva completamente. Titular inmediatamente 203 mL de muestra

62

original. Se requiere una correccin debido a los 4 mL de reactivos adicionados (2 mL

de solucin de MnSO4 y 2 mL de solucin de lcali-yoduro-azida:
200 mL x [300/(300 4)] = 203 mL.
Nota: Si se ha eliminado la interferencia del in ferroso, se adicionaron un total de 6,7 mL de reactivos (0,7 mL de
cido, 1 mL de solucin de KMnO4, 2 mL de solucin de MnSO4 y 3 mL de solucin alcalina de yoduro). El
volumen de muestra para la titulacin es de 203 mL. Ocurre un pequeo error debido al OD de la solucin de
KMnO4, pero este error se puede ignorar.

4. Titular rpidamente los 203 mL de la muestra con la solucin 0,025 N de tiosulfato de

sodio, hasta la aparicin de un color amarillo plido. Aadir 1 a 2 mL de solucin de
almidn y continuar la titulacin hasta la desaparicin del color azul. Desechar una
reaparicin posterior del color azul, que puede deberse al efecto cataltico de la materia
orgnica o a trazas de sales metlicas.
Estandarizacin

Para la estandarizacin del tiosulfato de sodio 0,025N emplear el dicromato de potasio

0,025N. Para ello, en un erlenmeyer de 250 mL, mezclar 10,00 mL de solucin de dicromato
de potasio, 50 mL de agua destilada, 1 g de KI y 2,5 mL de cido sulfrico (1+9). Tapar y
mantener en un lugar oscuro por 10 min. Diluir con 50 mL de agua y titular con la solucin de
tiosulfato de sodio, hasta obtener un color amarillo plido. Agregar 1 mL de solucin de
almidn, y continuar la titulacin hasta que desaparezca el color azul del almidn (siempre
queda un tenue color azul celeste del cromo). Calcular la normalidad de la solucin de
tiosulfato de sodio igualando los equivalentes de oxidante y reductor en el punto de
equivalencia (Nox*Vox= Nred*Vred).
Las reacciones que ocurren son:
2S2O32- + I2 = S4O62- + 2ICr2O72- + 14H+ + 6I- = 3I2 + 2Cr3+ + 7H2O
I2 + almidn = color azul
Manejo de los Datos y Clculos

a. Como 1 mL de tiosulfato de sodio 0,025N equivale a 0,2 mg de O 2, lo que significa

que, si se utilizan 200 mL de muestra, la concentracin, mg/L, de oxgeno disuelto es:

T x 0,2
Oxgeno disuelto, mg/L = 200

x 1000 T

donde: T = mL de solucin de tiosulfato de sodio 0,025N requerido para la

titulacin de la muestra.
b. Lo usual es que la normalidad de la solucin de tiosulfato de sodio no sea exactamente
0.025. En la estandarizacin, se conoce el volumen de solucin de dicromato de
potasio (10,00 mL) y su normalidad (0,025 N). En el punto de equivalencia:
Vdicromato * Ndicromato = Vtiosulfato * Ntiosuilfato

c.

63

Sabiendo el volumen gastado de la solucin de tiosulfato, y utilizando la ecuacin

anterior, se calcula su normalidad, Ntiosulfato.
Para la muestra, se calcula la concentracin de O2 disuelto, utilizando la ecuacin:
Vtiosulfato xNtiosulfato x 8
Oxgeno disuelto, mg/L =

mg
meq

0,2 L

donde Vtiosulfato = volumen de solucin de tiosulfato, mL, para la muestra (se asume que
se valoran 203 mL de muestra, que corresponden a 200 mL sin reactivos adicionados).
d. Para expresar el resultado en mL de O2/L a 0 C y 760 mm Hg, multiplicar mg/L de O 2
por 0,7.
e. Para expresar los resultados como % saturacin a 760 mm Hg, utilizar las Tablas X1.1
y X1.2 (ver ms adelante).
f. Si se desea calcular la solubilidad del oxgeno en agua destilada a cualquier presin
atmosfrica P ,mm Hg, temperatura t, C, y presin de vapor de agua U, mm Hg,
Para temperaturas entre 0 y 30 C, puede emplearse la ecuacin:
0,678 ( P U )
35 t
mg/L OD =
y entre 30 y 50 C por la expresin:
0.827 ( P U )
49 t
mg/L OD =

Anexo

64

Bibliografa consultada

1. Annual Book of ASTM Standards: D 1252-88: Standard Test Methods for Chemical
Oxygen Demand (Dichromate Oxygen Demand) of Water ASTM. 1995.
2. APHA, AWWA, WPCF: Standard Methods for the Examination of Water and
Wastewater 14th Edition. pp. 550-555. USA. 1976
3. Plunkett, E.: Manual de Toxicologa Industrial. pp. 360, 92, 190. Urmo. Bilbao. 1974.
4. Kolthoff, I. y E. Sandell: Tratado de Qumica Analtica Cuantitativa. 4 Edicin. Cap.
38. Editorial Nigar. Buenos Aires. 1960.
5. Decreto 883 Normas para la Clasificacin y el Control de la Calidad de los Cuerpos de
Agua y Vertidos o Efluentes Lquidos. Gaceta Oficial de la Repblica de Venezuela N
5.021 (Extraordinario). 18/12/1995.

65

PRACTICA 6. CARBONO ORGNICO EN SUELOS

Introduccin

La materia orgnica de los suelos incluye:

a. Los residuos de animales, plantas y microorganismos vivos o muertos, capaces de
descomponerse rpidamente, que pierden su identidad y desprenden ciertos
nutrientes.
b. El humus, formado por residuos de animales, plantas y microorganismos alterados
y bastante resistentes, que representa la mayor parte de la materia orgnica, capaz de
absorber una gran proporcin de cationes y de mejorar la estructura del suelo. El
humus no constituye un compuesto nico.
c. Formas inertes de carbono, como carbn vegetal, hulla o grafito, que pueden estar
ocasionalmente presentes en cantidades importantes.
El carbono orgnico comprende las dos primeras formas. La ltima, si est presente en una
muestra, puede eliminarse por lavado con un cido diluido, antes de la determinacin.
En el caso de suelos contaminados por hidrocarburos (petrleo y sus derivados), la
determinacin de carbono orgnico a muestras sin y con contaminacin puede dar una idea
bastante aproximada de la magnitud del problema. La contaminacin de suelos puede
producir:
- Deterioro de flora y fauna.
- Contaminantes de cultivos.
- Afectar a los seres humanos en contacto con el material contaminado.
- Daos importantes de reas recreativas (balnearios, playas, etc.).
El carbono es el principal elemento de la materia orgnica que puede medirse
cuantitativamente. En los suelos (y tambin en las aguas), el C orgnico, que se determina
principalmente por dos mtodos:
1. Por combustin en un horno a alta temperatura, conversin a CO 2 y medicin de este
gas por espectrofotometra infrarroja.
2. Reduccin del in dicromato, Cr2O72-, por la materia orgnica, y medicin del
dicromato que no ha reaccionado por titulacin (mtodo de Walkley y Black) o
mediante colorimetra.
Materia orgnica + Cr2O72- + H+ = 2Cr3+ + CO2 + H2O
Cr2O72- + 14H+ + 6Fe2+ = 2Cr3+ + 6Fe3+ + 7H2O
En esta prctica, se utiliza este ltimo procedimiento, con valoracin por retroceso.
En la tcnica de Walkley y Black, la oxidacin del carbono es rpida y, probablemente no
completa, por lo que es necesario utilizar un factor de correccin que permita correlacionar
sus resultados con los de la combustin. El valor que se utiliza normalmente como factor es
1,33. Sin embargo, el procedimiento tiene la ventaja de que al utilizar una calefaccin baja

66

(producida por el calor de dilucin del cido sulfrico), se excluyen las formas inorgnicas del
carbono. En la determinacin, el punto final se alcanza cuando el indicador de
ortofenantrolina-hierro (II) vira de azul a marrn rojizo.
Se ha criticado el empleo de este indicador, debido a que algunos suelos tienden a adsorberlo,
y por la turbidez producida por otros suelos, lo que oscurece el cambio de color en el punto
final. Por tales razones, algunos investigadores prefieren filtrar la suspensin de suelo antes de
la valoracin, utilizando un pequeo filtro de Bchner, y un papel de filtrado rpido, para
obtener un punto final fcilmente observable.
Los valores del carbono orgnico total pueden expresarse como tal, o reportarse como materia
orgnica total, multiplicando por el factor de Van Bemmelen de 1,724, que asume que el suelo
contiene 58% de carbono. Muchos estudios realizados sobre este factor indican que es, cuando
mucho, una aproximacin. Investigaciones cuidadosas muestran que el factor debera ser de
1,9. Algunos autores utilizan 2,5 para subsuelos. Debido a la controversia, es mejor expresar el
resultado como C orgnico.
Aspectos legales

En Venezuela, hasta la fecha, no se han establecido lmites mximos de contenido de

hidrocarburos en el suelo. En los Estados Unidos, cada gobierno estatal ha desarrollado sus
propios lmites permisibles. Para un mismo parmetro, existe una gran discrepancia por
ejemplo para HTP (hidrocarburos totales del petrleo), el lmite vara de 40 a 2000 mgKg-1.
Resumen

El carbono orgnico del suelo se oxida utilizando un exceso de in Cr2O72- .La reaccin es
promovida por el calor desarrollado cuando se mezclan 2 volmenes de cido sulfrico
concentrado con 1 volumen de solucin de K2Cr2O7 1N. Se titula por retroceso el exceso de
agente oxidante, utilizando sulfato ferroso amoniacal con ortofenantrolina como indicador. El
C orgnico se calcula por la cantidad de Cr2O72- reducido.
Significado y uso

Siendo el carbono el elemento ms significativo de los suelos, es de mucha importancia su

determinacin cuantitativa. La medicin del C orgnico tiene distintas aplicaciones, entre las
que se pueden mencionar:
En estudios de fertilidad de suelos, que tiene una relacin directa con el contenido de
materia orgnica.
Cuando ocurre un derrame de hidrocarburos o de otro material que contenga C
orgnico. Tomando muestras en sitios apropiados, puede realizarse una evaluacin
cuantitativa del derrame.
En procedimientos de remediacin de suelos.
Precauciones de seguridad

Esta prctica puede involucrar el empleo de materiales, operaciones y equipos peligrosos. No

se asume que se describan aqu todos los problemas de seguridad relacionados con su uso.
Queda bajo la responsabilidad del usuario establecer las prcticas apropiadas y la aplicacin
de medidas especficas para desarrollar actividades seguras. Considerar, sin embargo, los
siguientes aspectos:

67

1. Debe tenerse cuidado extremo al manipular soluciones concentradas de cido sulfrico.

Emplear ventilacin adecuada, gafas protectoras, mascarilla, guantes de goma y trajes
protectores. Si ha habido contacto con el cido, el tratamiento consiste en lavar los ojos con
agua, con agua y jabn las partes contaminadas del cuerpo y lavado gstrico si se ha
ingerido.
2. El dicromato de potasio es un irritante y alrgeno. Como todas las sales hexavalentes de
cromo, es muy txico. Utilizar ventilacin adecuada, guantes, delantales y botas de goma,
mascarilla con filtro mecnico. Acentuar la limpieza personal. Si ha habido contacto con la
solucin, el tratamiento incluye lavado de los ojos con agua, con agua y jabn de las partes
contaminadas del cuerpo y lavado gstrico si se ha ingerido.
Interferencias

Este mtodo es sensible a la presencia de otras sustancias fcilmente oxidables. El in cloruro,

algunos xidos de Mn y el hierro (II) pueden interferir bajo ciertas condiciones, pero su efecto
puede reducirse tomando algunas precauciones. El Fe2+ y el Cl- producen interferencia positiva
(valores ms elevados que el real) y los xidos de Mn dan resultados negativos (menores).
La reaccin entre el dicromato y el cloruro es:
Cr2O7 2- + 14H+ + 6Cl- =

3Cl2 + 2Cr 3+ + 7H2O

La forma ms conveniente de eliminar la interferencia del cloruro es precipitarlo como AgCl,

agregando AgSO4 al aadir el cido. Otros investigadores utilizan el lavado del suelo hasta
eliminar los cloruros antes del anlisis.
El MnO2 compite con el Cr2O72- cuando se calienta en medio cido para oxidar otras
sustancias. La extensin de la interferencia es funcin de la cantidad presente.
Afortunadamente, la mayora de los suelos contienen proporciones muy bajas de xidos de
Mn, y diversos estudios sugieren que el efecto del Mn sobre la determinacin del C es menor
del 6%.
El Fe2+, si est presente, puede ser oxidado por el Cr 2O72- y producir un error positivo. Se
pueden tener cantidades apreciables de este in en suelos ricos en materia orgnica, pero si
estn suficientemente aireados, sus niveles se reducen apreciablemente. Si se piensa que en
una muestra en particular puede haber cantidades importantes de hierro ferroso, se pueden
secar al aire 1 o 2 das antes del anlisis, con lo que la cantidad de Fe 2+ baja a niveles
insignificantes, en comparacin con el C orgnico. Finalmente, es recomendable no utilizar
morteros de hierro o acero para moler las muestras, para evitar su contaminacin con hierro
metlico.

Reactivos y materiales

A. REACTIVOS:
1) Dicromato de potasio, K2Cr2O7, 1N: Disolver en agua, exactamente 49,04 g de la sal
grado reactivo (secado a 105 C por 1h), y diluir a 1L.
2) cido sulfrico, H2SO4, concentrado (no menor del 96%)

68

3) Complejo ferroso-ortofenantrolina: Disolver 1,485 g de orto-fenantrolina

monohidratada y 0.695 g de FeSO4.7H2O en agua y diluir a 100 mL.
Nota: Este complejo est disponible comercialmente con el nombre de ferrona.

4) Solucin ferrosa 0,5 N: Disolver 196,1 g de Fe(NH 4)2(SO4)2.6H2O en 800 mL de agua

que contenga 20 ml de cido sulfrico concentrado. Diluir hasta 1 L.
B: MATERIALES:
Balanza analtica
Matraces erlenmeyer de 500 mL
Pipetas volumtricas de 10,0 mL
Cilindros graduados de 25 mL y de 250 mL
Frasco gotero
Embudo y papel de filtro
Soporte para el embudo
Bureta de 10, 25 o 50 mL
Muestra

Secar la muestra de suelo y hacerla pasar a travs de un tamiz no ferroso de 0,2 mm.
Procedimiento

Transferir a un matraz erlenmeyer de 500 mL una muestra de 0,5 g de suelo (0,05 g en el caso
de turba o 2 g para suelos con menos del 1% de materia orgnica). Aadir, mediante una
pipeta 10,0 mL de K2Cr2O7 1 N sobre la muestra, mezclando bien mediante un movimiento de
giro. Luego, agregar 20 mL de cido sulfrico concentrado y seguir mezclando con un giro
suave durante 1 minuto, para asegurar el contacto ntimo del reactivo con el suelo, pero
cuidando que el suelo no quede adherido a las paredes del matraz, lejos del contacto con la
solucin. Dejar la mezcla en reposo durante 20 a 30 minutos.
Aadir 200 mL de agua y filtrar si se cree que el punto final no puede ser visto claramente sin
filtracin. Agregar 4 gotas del indicador de orto-fenantrolina y titular con solucin ferrosa 0,5
N. Al aproximarse el punto final, la solucin toma un color verde oscuro. En este punto, debe
agregarse la solucin ferrosa gota a gota, hasta que el color cambie rpidamente de azul a
marrn rojizo (punto final).
Repetir la determinacin con menor cantidad de muestra si se consume ms del 75 % del
dicromato.

Estandarizacin

Para la determinacin de la normalidad del sulfato ferroso amnico se realiza una

determinacin en blanco, con 10,0 mL de K2Cr2O7 siguiendo igual procedimiento que el
empleado para la muestra de suelo, pero sin incluirla.
Reaccin:
Cr2O72- + 14H+ + 6Fe2+ = 2Cr3+ + 6Fe3+ + 7H2O

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Manejo de los Datos y Clculos

El % de materia orgnica se calcula por la frmula:

T
12 1,724 100

10 1 x 1,0 N x
x
x
S
4000 0,77 W
% M. O. =

S = mL de solucin ferrosa para el blanco

T = mL de solucin ferrosa para la muestra
W = Peso de la muestra, g
1,724 = Factor de conversin de carbono orgnico a materia orgnica
12/4000 = Peso meq del carbono
0,77 = Factor de recuperacin
1,0N = Normalidad de la solucin de dicromato
Para calcular el % de C orgnico, se utiliza la misma ecuacin, sin multiplicar por 1,724.
Bibliografa consultada

1. Jackson, M.:Anlisis Qumico de Suelos. Cap. 9. Ediciones Omega. Barcelona.

Espaa. 1964.
2. Black, C. (ed):Methods of Soil Analysis. Part 2. Chap. 90. American Society of
Agronomy. Madison, Wisconsin, USA, 1965.

PRACTICA 7. GRUPO COLIFORME EN AGUAS RESIDUALES

Introduccin

El agua contiene suficientes sustancias nutritivas para permitir el desarrollo de diferentes

microorganismos. Muchas de las bacterias del agua provienen del contacto con el aire, suelo,
animales y plantas vivas o en descomposicin, minerales y materia fecal.
La transmisin de organismos patgenos a travs del agua ha sido la fuente ms importante de
epidemias de algunas enfermedades, entre las que se pueden mencionar (entre parntesis el
organismo causante): Fiebre tifoidea (Salmonella Typahi), Clera (Vibrio cholera), Disentera
(Shigella), Hepatitis (virus), Amibiasis (Enatomeba hys), infecciones del odo (Pseudomonas
AE).

70

El anlisis bacteriolgico del agua confiere al usuario un margen importante de seguridad para
su uso. Sin embargo, en el caso de aguas residuales, no se busca en dicha prueba la existencia
de organismos patgenos, sino un grupo especfico de bacterias llamado Grupo Coliforme,
que est presente en muchas aguas servidas, y se asume que todas las aguas contaminadas con
las cloacales son potencialmente peligrosas, por la presencia de contaminacin fecal.
La prueba bacteriolgica del agua generalmente implica dos ensayos: la estimacin del
nmero de bacterias mediante el conteo en placa, y la determinacin de la presencia o
ausencia de miembros del grupo coliforme. En esta prctica se desarrolla el segundo mtodo.
El grupo coliforme incluye bacterias de forma bacilar, aerbicas (requieren oxgeno) o
anaerbicas facultativas (pueden vivir en presencia o ausencia de oxgeno), Gram negativas
(no cambian la coloracin de la solucin de Gram), no producen esporas, y fermentan la
lactosa con formacin de gas en 48 h a 35-37 C. El nmero de organismos coliformes en los
excrementos humanos es muy grande (125 a 400 x 109 colonias de bacterias por persona por
da). Sin embargo, su fuente no es solo humana, sino tambin pueden originarse en animales
de sangre caliente o fra y en el suelo. Existe un ensayo para diferenciar los coliformes fecales
y los del suelo. Hay otra que permite distinguir entre coliformes totales y fecales.
Para el ensayo de coliformes, puede utilizarse uno de los siguientes procedimientos:
Tubos mltiples (presuntivo, confirmativo, completo)
Filtro de membrana
Prueba de presencia-ausencia
Colilert (o MMO-MUG)
En el primer mtodo, que se utiliza en esta prctica, el grupo Coliforme se caracteriza por su
capacidad de fermentar soluciones de lactosa, con formacin de cido y gas. El ensayo
comprende dos pruebas: presuntiva y confirmativa. (ver Fig. 1).
La Prueba presuntiva utiliza medio caldo lactosado y los resultados permiten presumir la
presencia de organismos coliformes. La produccin de gas se observa en un pequeo tubo
invertido que
se coloca dentro de los tubos donde se vierte la muestra y diluciones de ella, luego de su
incubacin a 35 0,5 C por 48 2h. (ver Fig. 2).

71

FIGURA. 1. ESQUEMA DEL PROCESO PARA DETERMINAR COLIFORMES EN AGUA. 1. MUESTRA. 2.

ENSAYO PRESUNTIVO. 3. ENSAYO CONFIRMATIVO. 4. ENSAYO COMPLETO.5. IDENTIFICACIN.

Para la prueba confirmativa, se emplean los tubos con gas del ensayo anterior y se siembra
una pequea porcin de lquido en medio caldo bilis-verde brillante (que es especfico para
coliformes). Se incuban por el mismo tiempo y temperatura que en el caso anterior. Al cabo de
ese tiempo, si se observa la formacin de cualquier cantidad de gas, el ensayo se considera
positivo.

FIGURA. 2. DETERMINACIN DEL NDICE COLIFORME DEL AGUA

Para hallar el ndice coliforme (o NMP/100 mL) se utiliza una tabla, donde aparecen las
diluciones utilizadas y los posibles resultados cuando se siembran 3 5 tubos por dilucin
(ver Anexo 1). No olvidar, sin embargo, que ste es slo un nmero que representa el ndice
de bacterias coliformes que se obtendra con mayor probabilidad que cualquier otro nmero,
como resultado del anlisis microbiolgico.

72

El trmino NMP es un estimado, basado en una frmula probabilstica. Se ha demostrado

suficientemente que, an despus de una agitacin vigorosa, la distribucin de bacterias en el
agua es muy irregular. Es posible dividir un volumen dado de agua en varias porciones y
encontrar que los microorganismos estn ausentes en alguna porcin, o quizs menor que el
promedio que podra obtenerse al analizar toda la muestra.
La exactitud del mtodo depende del nmero de tubos utilizado. El nmero de porciones a
emplear es funcin de la exactitud deseada. Cuando se analiza agua potable, es necesario
utilizar 5 tubos de fermentacin de 10 mL por dilucin para las dos pruebas.
En el caso de aguas que no han sido potabilizadas, el objetivo de esta prueba es generalmente
estimar la densidad de contaminacin bacterial o la fuente de polucin. Para esto, pueden
utilizarse rplicas por triplicado o por quintuplicado de la muestra.
Este procedimiento puede aplicarse tambin al anlisis de muestras de salmueras, lodos y
sedimentos, siguiendo las pautas sealadas previamente. Las muestras slidas o semislidas
deben pesarse y disolverse con un volumen igual de diluyente, homogeneizndose la
suspensin en un agitador esterilizado antes del anlisis.
Aspectos Legales

El Art. 8 de las Normas Sanitarias de Calidad del Agua Potable establece que el ente
responsable del sistema de abastecimiento de agua potable debe asegurar que sta no contenga
microorganismos transmisores o causantes de enfermedades, ni bacterias coliformes
termoresistentes (coliformes fecales) siguiendo como criterio de evaluacin de la calidad
microbiolgica la deteccin del grupo coliforme realizada sobre muestras representativas
captadas, preservadas y analizadas segn lo establecido en las presentes Normas.
En el Art. 9 de las mismas Normas, se estipula que Los resultados de los anlisis
bacteriolgicos del agua potable deben cumplir los siguientes requisitos:
a. Ninguna muestra de 100 mL deber indicar la presencia de organismos coliformes
termoresistentes (coliformes fecales).
b. El 95% de las muestras de 100 mL, analizadas en la red de distribucin no deber
indicar la presencia de organismos coliformes totales durante cualquier perodo de 12
meses consecutivos.
c. En ningn caso deber detectarse organismos coliformes totales en dos muestras
consecutivas de 100 mL, provenientes del mismo sitio.
Por otra parte, El Art. 4 del Decreto 883 especifica los criterios microbiolgicos de calidad
exigibles para las aguas, de acuerdo al uso a que se destinen:
1. Las aguas del sub-tipo 1A son aquellas cuyas caractersticas corresponden con los lmites y
rangos siguientes:
Parmetro
Organismos coliformes totales

Lmite o rango mximo

Promedio mensual menor a 2000
NMP por cada 100 mL

73

2. Las aguas del sub-tipo 1B son aquellas cuyas caractersticas corresponden con los lmites y
rangos siguientes:
Parmetro
Organismos coliformes totales

Lmite o rango mximo

Promedio mensual menor a 10000
NMP por cada 100 mL

5. Las aguas del sub-tipo 2A son aquellas cuyas caractersticas corresponden con los lmites y
rangos siguientes:
Parmetro
Organismos coliformes totales
Organismos coliformes fecales

Lmite o rango mximo

Promedio mensual menor a 1000
NMP por cada 100 mL
Menor a 100 NMP por cada
100 mL

6. Las aguas del sub-tipo 2B son aquellas cuyas caractersticas corresponden con los lmites y
rangos siguientes:
Parmetro
Organismos coliformes totales
Organismos coliformes fecales

Lmite o rango mximo

Promedio mensual menor a 5000
NMP por cada 100 mL
Menor a 1000 NMP por cada
100 mL

8. Las aguas del tipo 3 son aquellas cuyas caractersticas corresponden con los lmites y
rangos siguientes:
Parmetro
Organismos coliformes totales(**)

Lmite o rango mximo

a) Promedio mensual menor
a 70 NMP por cada 100
mL
b) El 10% de las muestras
puede exceder de 200
NMP por cada 100 mL

(**) Las muestras deben ser representativas de la calidad del cuerpo de agua a ser
aprovechado. De existir fuentes de contaminacin, las muestras debern ser tomadas en las
zonas afectadas. En ambos casos, se muestrear bajo las condiciones hidrogrficas ms
desfavorables, a juicio del Ministerio del Ambiente y de los Recursos Naturales Renovables.

9. Las aguas del Sub-tipo 4A son aquellas cuyas caractersticas corresponden con los lmites y
rangos siguientes:
Parmetro

Lmite o rango mximo

74

Organismos coliformes totales

a) menor a 1000 NMP por cada

100 mL en el 90% de una serie
de muestras consecutivas.
b) menor a 5000 NMP en el 10%
restante.
Organismos coliformes fecales a) menor a 200 NMP por cada
100 mL en el 90% de una serie
de muestras consecutivas.
b) menor a 400 NMP en el 10%
restante.
10. Las aguas del Sub-tipo 4B son aquellas cuyas caractersticas corresponden con los lmites
y rangos siguientes:
Parmetro
Organismos coliformes totales

Lmite o rango mximo

a) menor a 5000 NMP por cada
100 mL en el 80% de una serie
de muestras consecutivas.
b) menor a 10000 NMP en el
20% restante.
Organismos coliformes fecales menor a 1000 NMP por cada
100 mL en la totalidad de las
muestras.
En el Art. 10, SECCIN III, De las Descargas a cuerpos de agua, del citado Decreto 883 se
seala:
Parmetros biolgicos:
Nmero ms probable de organismos coliformes totales no mayor de 1.000 por cada 100 mL,
en el 90% de una serie de muestras consecutivas y en ningn caso ser superior a 5.000 por
cada 100 mL.

Art. 12, SECCIN IV, De las Descargas al medio marino-costero:

Parmetros biolgicos:
Nmero ms probable de organismos coliformes totales no mayor de 1.000 por cada 100 mL,
en el 90% de una serie de muestras consecutivas y en ningn caso ser superior a 5.000 por
cada 100 mL.

Resumen

Se utilizan tubos de fermentacin con caldo lactosado para sembrar la muestra y sus
diluciones. Se incuban a 35 0,5 C por 48 2h. De los tubos donde se observa la formacin
de gas, se saca una pequea porcin y se coloca en tubos con bilis-verde brillante,
incubndose tambin a 35 0,5 C por 48 2h. Para la estimacin del NMP/100 mL, se

75

considera la mayor dilucin que produce resultados positivos en todos los tubos y las dos
diluciones siguientes.
Significado y uso

El examen bacteriolgico del agua indica su calidad sanitaria y la posibilidad de su uso,

adems de sealar el grado de contaminacin microbiana con desechos humanos o de
animales. Tradicionalmente, se ha utilizado el grupo coliforme como organismo indicador, a
pesar de no ser patgeno.
El significado de la prueba y la interpretacin de los resultados han sido suficientemente
certificados, y se han utilizado desde hace mucho tiempo como la base de un patrn de calidad
bacteriolgica de los suministros de agua.
Interferencias

Ciertos agentes humectantes, presentes en los detergentes pueden contener sustancias

inhibidoras. Debe lavarse todo el material de vidrio con un detergente apropiado y agua
caliente, enjuagar con agua caliente y realizar un lavado final con agua destilada. No utilizar
tubera de cobre para distribuir el agua destilada. Las conexiones deben ser de acero
inoxidable o cualquier otro material no txico.
Debe utilizarse un removedor de cloro residual para los recipientes que se emplean para el
anlisis de aguas que hayan sido sometidas a clorinacin. El tiosulfato de sodio es
satisfactorio. Aadir 0,1 mL de una solucin al 10% de la sal a una botella de muestreo de 120
mL. Tapar, colocar una corona, y esterilizar como se describi previamente.
Las muestras que tengan elevadas concentraciones de Cu o Zn, y las aguas residuales con
altos niveles de metales pesados deben recogerse en recipientes que tengan un agente quelante
que reduzca la toxicidad del metal. Pueden emplearse 0,3 mL de una solucin al 15% de
EDTA para un recipiente de 120 mL, que se agrega separadamente al envase o se combina con
la solucin de tiosulfato de sodio antes de la esterilizacin.
Reactivos y materiales

A. REACTIVOS:
1. Caldo deshidratado de extracto de carne lactosado: Pesar la cantidad necesaria de
caldo, siguiendo las instrucciones del fabricante. Agregar el slido a 1 L de agua
destilada, y agitar hasta que se disuelva completamente.
2. Caldo deshidratado de bilis y verde brillante: Seguir, para su preparacin, un
procedimiento anlogo al del reactivo anterior.

3. Amortiguador de KH2PO4. Disolver 17,0 g de la sal en 250 mL de agua destilada.

Ajustar el pH a 7,2, agregando lentamente y con agitacin la cantidad necesaria de
solucin de NaOH 0,1 N. Ajustar a un volumen final de 500 mL.
4. Tiosulfato de sodio al 10%. Pesar 10 g de Na 2S2O3.5H2O y disolver en 100 mL de
agua destilada.
5. Diluyente: Agregar 1,25 mL de amortiguador de KH2PO4 a 1L de agua destilada.

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B. MATERIALES:
Balanza analtica
Esterilizador de autoclave
Estufa
Incubadora con control de temperatura
Pipetas bacteriolgicas de 1,0 mL.
Tubos de cultivo de 150 mm x 18 mm y de 75 mm x 12 mm
Medidor de pH
Muestra y mtodos de muestreo

Slo se utilizan muestras instantneas. Si el agua contiene cloro residual, aadir a cada frasco
suficiente solucin de tiosulfato de sodio para destruirlo en el momento del muestreo (0,1 mL
de Na2S2O3 al 10% neutraliza una muestra que contenga 15 mg/L de cloro residual). Todas las
muestras deben analizarse tan pronto como sea posible. Los recipientes de vidrio se esterilizan
por calentamiento a 160 C durante 1 h.
Al recolectar la muestra, dejar un espacio de aire (al menos de 2,5 cm) en la botella o envase,
para facilitar el mezclado antes del ensayo. No abrir el recipiente de muestreo hasta el
momento de la recoleccin. Debe tenerse el cuidado de tomar una muestra representativa, y
evitar su contaminacin en el momento de su recoleccin o en el perodo previo al anlisis.
El nmero de muestras a analizar depende del objetivo del estudio. Para medir contaminacin
cclica, debe muestrearse tan frecuentemente como sea posible, en un sitio inmediatamente
debajo de la fuente. Si se desea estimar contaminacin promedio, el sitio de muestreo se ubica
a una distancia suficiente aguas abajo, para asegurar el mezclado del contaminante con el
agua. La frecuencia no tiene que ser tan alta como la del muestreo para contaminacin cclica.
El volumen de la muestra debe ser de 100 mL o ms. Si no puede realizarse el anlisis dentro
de la hora siguiente a la recoleccin, debe utilizarse refrigeracin para el transporte de la
muestra al laboratorio, manteniendo su temperatura por debajo de 10 C durante un tiempo
mximo de 6 horas. Al llegar al laboratorio, refrigerar y procesar las muestras dentro de las 2
horas siguientes. En ningn caso, se deben analizar muestras que hayan excedido las 30 h
entre su recoleccin y anlisis. Todas las muestras deben estar acompaadas de los datos de
identificacin y descripcin
Procedimiento

A. Preparacin de los recipientes para la muestra y de las pipetas: Antes de la esterilizacin,

verter en cada frasco 0,1 mL de solucin de tiosulfato de sodio al 10%. Si el frasco tiene tapa
esmerilada, insertar un trozo de cinta entre el tapn y su asiento, para evitar que se pegue
durante la esterilizacin. Cubrir el tapn o la tapa con papel ordinario o de aluminio, y atarlo
con una cuerda. Esterilizar los frascos y las pipetas en una estufa a 170 C durante 1 h.
Si el frasco es de plstico, se puede esterilizar en autoclave durante 15 min a 121 C. Dejar la
tapa ligeramente floja, para evitar que el recipiente se rompa durante el calentamiento. No
abrir el esterilizador antes de que se haya enfriado. Apretar las tapas de los frascos de plstico.
Para los envases plsticos que no soportan las condiciones del autoclave, utilizar la
esterilizacin con xido de etileno gaseoso.

77

B. Preparacin de los tubos de fermentacin para las pruebas: Preparar 21 tubos de

fermentacin para la prueba de caldo lactosado, colocando en cada tubo de 150 mm x 18 mm
un tubito invertido de 75 mm x 12 mm. Agregar 10 mL de caldo lactosado. Insertar tapones de
algodn, y colocar los tubos boca arriba en una canasta. Seguir igual procedimiento para la
preparacin de los tubos con medio bilis-verde brillante. Esterilizar todos los tubos,
calentndolos en autoclave durante 15 min a 121 C (1 kg o 15 lb). Dejar enfriar el equipo
hasta la temperatura ambiente antes de abrirlo. El tiempo total durante el calentamiento,
esterilizacin y enfriamiento no debe exceder de 40 min.
C. Preparacin de los diluyentes. Preparar los diluyentes en tubos de ensayo de 150 mm x 18
mm, agregando una cantidad suficiente para que queden 9 mL en cada tubo despus de la
esterilizacin (esto se determina por tanteo). Tapar los tubos con algodn y esterilizar en
autoclave por 15 min a 121 C.
D. Prueba presuntiva: Agregar 1 mL de muestra bien agitada a un tubo con 9 mL de diluyente,
utilizando una pipeta estril de 1 mL. Mezclar bien el tubo, cuidando de no mojar el tapn.
Marcar esta dilucin 1-10.
Agregar 1 mL de muestra a cada uno de tres tubos de fermentacin con caldo lactosado. No es
necesario agitar el tubo para mezclarlo. Marcar los tubos como 1-1, 1-2 y 1-3,
respectivamente.
Usando la dilucin marcada como 1-10, y con una pipeta esterilizada, hacer otra dilucin del
mismo modo que la primera, y marcarla como dilucin 1-100.
Empleando como muestra la dilucin 1-10, agregar a cada uno de tres tubos con caldo
lactosado, volmenes de 1 mL, marcndolos como 1-10-1, 1-10-2 y 1-10-3, respectivamente.
Seguir el mismo procedimiento para continuar la serie, preparando primero la dilucin
siguiente, y despus los tubos de fermentacin para una dilucin determinada. En principio, la
serie se contina hasta que la dilucin final produzca resultados negativos en tres tubos. Para
muestras desconocidas, es conveniente llevar la serie hasta la dilucin de 1 millonsimo. (11.000.000 o 1-106).
Colocar los tubos de fermentacin inoculados en un incubador a 35 0,5C durante 24 2 h.
Desechar los tubos de las diluciones de la muestra.
Al terminar el perodo de incubacin, anotar las observaciones particulares de cada tubo de
fermentacin. Si no se nota gas en la parte superior del tubo interior, colocar un cero (0) en el
espacio previsto. Cuando se observa cualquier cantidad de gas (as sea una pequea burbuja),
marcar con un signo positivo (+).
Continuar con la prueba confirmativa (o confirmada) sobre todos los tubos que muestren gas,
marcndolos con ( ) para indicar este hecho, despus del signo (+), quedando as: (+ ).

78

Colocar nuevamente en el incubador aquellos tubos que no mostraron gas, dejndolos durante
un perodo adicional de 24 h. El tiempo total para estos tubos ser entonces de 48 2 h.
Nuevamente observar y registrar la presencia o ausencia de gas. La aparicin de gas en
cualquier tubo de fermentacin inoculado con una porcin de la muestra o una dilucin de la
misma, en cualquier momento dentro de las 48 2 h es una prueba presuntiva de la presencia
de bacterias coliformes en ese tubo. Inversamente, la ausencia de gas es una prueba definitiva
de la ausencia del grupo de bacterias coliformes en ese tubo.
E. Prueba confirmativa (o confirmada): Seguir la prueba en todos los tubos de fermentacin
que produjeron gas en la prueba presuntiva (los marcados como (+ )), utilizando un hisopo o
una asa de alambre de platino esterilizada. Pasar un momento el asa por la llama y sumergirla
en el medio de cultivo de la prueba presuntiva. Llevar el asa o el extremo del hisopo a un tubo
que contenga caldo con bilis y verde brillante. Marcar el nuevo tubo inoculado con el mismo
nmero que lo identific durante la prueba presuntiva. Una vez realizada la transferencia, ya
no hay necesidad del tubo de fermentacin de la prueba presuntiva, pero es aconsejable
guardarlo hasta obtener las lecturas finales de la prueba confirmada.
Colocar los tubos en el incubador a 35 0,5 C. Observar los tubos despus de 24 2 h de
incubacin. Si hay gas en el tubo interior en cualquier cantidad, registrar un signo (+) en el
espacio correspondiente. Cuando no se observa gas, marcar un cero (0) e incubar el tubo
durante otras 24 h, lo que hace un total de 48 2 h. Examinar nuevamente los tubos y
registrar la presencia o ausencia de gas.
La aparicin de gas dentro de las 48 2 h en un caldo con bilis y verde brillante, inoculado
con el caldo lactosado de la prueba presuntiva es un testimonio confirmado de la presencia de
bacterias coliformes en el tubo de la prueba presuntiva. La ausencia de gas en el tubo de la
prueba confirmada es un testimonio definitivo de la ausencia de bacterias coliformes en el
tubo correspondiente de la prueba presuntiva. Sin embargo, no es una evidencia definitiva de
la ausencia de bacterias coliformes en la muestra original, pues es posible que otros tubos
produzcan resultados positivos en la prueba confirmada.
Manejo de los Datos y Clculos

En esta prctica, los resultados se obtienen una vez que se conoce el nmero de tubos
positivos en la prueba Confirmativa, y apoyndose en la Tabla 1 (ver ms adelante).
Utilizando para el anlisis diferentes volmenes de muestra, mltiplos decimales de 1 mL (10,
100, 1000, etc.), es posible hacer una estimacin aproximada del nmero de bacterias
coliformes presentes en la muestra, utilizando el nmero de tubos de las diferentes diluciones
que produjeron resultados positivos. La estimacin se hace en forma del Nmero Ms
Probable, NMP, que es la concentracin de bacterias coliformes (expresada como nmero de
bacterias/100 mL de muestra) que con mayor probabilidad se encuentran en la misma
combinacin de tubos positivos y negativos que la obtenida en el examen de la muestra.
Cuando se utilizan para el examen ms de tres diluciones en serie decimal, solamente son
significativos los resultados de tres de ellas. Seleccionar la mayor dilucin que produce
resultados positivos en los 3 tubos y las siguientes dos diluciones mayores, y utilizar para el

79

cmputo del NMP los resultados de esas tres diluciones. El valor del NMP es igual al ndice
que se obtiene en la Tabla 1 (ver ms adelante), multiplicado por un factor que es igual al
denominador de la mayor dilucin que haya dado resultados positivos en los tres tubos. Como
ejemplo, los nmeros en el numerador de las fracciones en la siguiente Tabla representan el
nmero de tubos positivos, y el del denominador el total de tubos. La combinacin de
positivos es el nmero de tubos positivos por dilucin.
Ejemplo

Original

1-10

1-100

1-1000

(a)
(b)
(c)

3/3
3/3
0/3

3/3
2/3
1/3

2/3
2/3
0/3

0/3
0/3
0/3

Combinacin
de positivos
3-2-0
3-2-2
0-1-0

Puede presentarse el caso (d), donde ocurre un resultado positivo en una dilucin mayor que
las tres escogidas de acuerdo a la regla. Si ese es el caso, se incorpora al resultado de la mayor
dilucin seleccionada, como en (e):
Ejemplo

Original

1-10

1-100

1-1000

(d)
(e)

3/3
3/3

2/3
2/3

1/3
2/3

1/3
0/3

Combinacin
de positivos
3-2-2
3-2-2

El nmero ms probable para una variedad de resultados aparece en la Tabla 1. Se muestra

tambin el intervalo de confianza del 95 % para cada valor de NMP.
TABLA 1. NDICE DE NMP Y LMITES DE CONFIANZA DEL 95 % PARA VARIAS COMBINACIONES
DE RESULTADOS DE TUBOS POSITIVOS. (PORCIONES DE 10 ml, 1 ml y 0,1 ml)

Combinacin
de positivos

NMP/100 mL

Tubos por dilucin

3
Lmite de confianza
del 95%
NMP/100 mL
Inferior
Superior
<2
<0.5
9
2
<0.5
13
2
4

0-0-0
0-0-1
0-1-0
0-2-0

<3
3
3
-

1-0-0
1-0-1
1-1-0
1-1-1
1-2-0

4
7
7
11
11

<0.5
1
1
3
3

20
21
23
36
36

2-2-0
2-0-1
2-1-0
2-1-1
2-2-0
2-2-1
2-3-0

9
14
15
20
21
28
-

1
3
3
7
4
10

36
37
44
89
47
150

5
Lmite de confianza
del 95%
Inferior
Superior
<0.5
<0.5
<0.5

7
7
11

2
4
4
6
6

<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5

7
11
11
15
15

5
7
7
9
9
12

<0.5
1
1
2
2

13
17
17
21
21

28

80

3-0-0
3-0-1
3-0-2
3-1-0
3-1-1
3-1-2
3-2-0
3-2-1
3-2-2
3-3-0
3-3-1
3-3-2
3-3-3

23
39
64
43
75
120
93
150
210
240
460
1100
2400

4-0-0
4-0-1
4-1-0
4-1-1
4-1-2
4-2-0
4-2-1
4-3-0
4-3-1
4-4-0
5-0-0
5-0-1
5-0-2
5-1-0
5-1-1
5-1-2
5-2-0
5-2-1
5-2-2
5-3-0
5-3-1
5-3-2
5-3-3
5-4-0
5-4-1
5-4-2
5-4-3
5-4-4
5-5-0
5-5-1
5-5-2
5-5-3
5-5-4
5-5-5

4
7
15
7
14
30
15
30
35
36
71
150

120
130
380
210
230
380
380
440
470
1300
2400
4800

8
11
11
14
14
17
-

1
2

19
25

2
4

25
34

4
5

34
46

13
17
17
21
26
22
26
27
33
34
23
31
43
33
46
63
49
70
94
79
110
140
180
130
170
220
280
350
240
350
540
920
1600
2400

3
5
5
7
9
7
9
9
11
12
7
11
15
11
16
21
17
23
28
25
31
37
44
35
43
57
90
120
68
120
180
300
640

31
46
46
63
78
67
78
80
93
93
70
89
110
93
120
150
130
170
220
190
250
340
500
300
490
700
850
1000
750
1000
1400
3200
5800

Para utilizar la Tabla 1, al emplear porciones diferentes a las especificadas, se aplican los
valores obtenidos en la columna correspondiente multiplicando por la relacin 10/volumen de
muestra (10 es la porcin original para desarrollar los NMP de la Tabla).

81

As, si se emplea una combinacin de porciones de 100, 10 y 1 mL, el valor de NMP es 0,1
veces el que se obtiene de la Tabla 1 (10/100 = 0,1).
En el caso ms frecuente que se trabaja con porciones de 1 mL de la muestra original y sus
diluciones 1:10, 1:100, 1:1000, etc., el NMP ser 10 veces (10/1 = 10) el valor de la Tabla.
A manera de ejemplo prctico, si tal es la situacin, y son positivos todos los tubos de
triplicados de todas las diluciones hasta llegar a la dilucin 1:1.000, 1:10.000 y 1:100.000,
donde se obtienen los siguientes resultados de tubos positivos y negativos para estas tres
diluciones:
DULUCIN
1:1.000
1:10.000
1:100.000

RESULTADO
3+
2+
0+

013-

Se toman los resultados de la mayor dilucin que dio positiva en los 3 tubos (1:1.000) y las
dos diluciones siguientes, y al consultar la Tabla 1, con el valor 3-2-0 (nmero de tubos
positivos), se encuentra el valor 93. El NMP es entonces:
NMP/100 mL = Valor de la Tabla x 10 x 1000 = 930.000
Intervalo de confianza del 95 % = 150.000 - 3.800.000 NMP/100 mL
Nota: El factor 10 es por haber utilizado rplicas por triplicado de 1 mL de muestra original (y
no 10 mL, como se emple para elaborar la Tabla 1) y sus diluciones. El factor 1.000 es el
denominador de la mayor dilucin que produjo resultados positivos en 3 tubos.
El procedimiento descrito para el grupo coliforme, y la determinacin de su NMP puede
aplicarse a cualquier otro organismo siempre que se haya utilizado un mtodo apropiado.
Bibliografa consultada

1. APHA, AWWA, WPCF: Standard Methods for the Examination of Water and
Wastewater 14th Edition. pp. 875-927. USA. 1976.
2. Garassini, L.: Microbiologa Tecnolgica. Cap. 2. Ediciones de la Biblioteca.
Universidad Central de Venezuela. Caracas. 1964.
3. Romero, J.: Acuiqumica. Cap. 4. Editorial Escuela Colombiana de Ingeniera.
Bogot. 1996.
4. Departamento de Sanidad del Estado de Nueva York: Manual de Tratamiento de
Aguas Negras pp. 187-192. Limusa. Mxico. 1989.
5. Normas Sanitarias de Calidad del Agua Potable. Gaceta Oficial de la Repblica de
Venezuela N 36.395. 13/02/1998.
6. Decreto 883 Normas para la Clasificacin y el Control de la Calidad de los Cuerpos
de Agua y Vertidos o Efluentes Lquidos. Gaceta Oficial de la Repblica de
Venezuela N 5.021 (Extraordinario). 18/12/1995

82

PRACTICA 8. DEMANDA QUMICA DE OXGENO

Introduccin

Las protenas y los carbohidratos constituyen el 90% de los contaminantes orgnicos de las
aguas residuales domsticas. Las fuentes ms importantes de estas sustancias biodegradables
son los excrementos y orina humanos, residuos de alimentos, polvo y suciedad de los baos y
del lavado de la ropa, jabones, detergentes y otros productos de limpieza.
Se utilizan diversos parmetros para medir la concentracin de materia orgnica de las aguas
residuales. Uno de ellos cuantifica el carbono orgnico de los residuos (ver la prctica de
Carbono Orgnico). Otros mtodos frecuentes se basan en la cantidad de oxgeno que se
necesita para convertir los compuestos oxidables en productos finales estables. Si el oxgeno
que se consume es proporcional a la materia orgnica presente, su reduccin permite
establecer una relacin cuantitativa de la concentracin orgnica de las aguas residuales. Los
mtodos ms usuales para determinar los requerimientos de oxgeno son la demanda qumica
de oxgeno, DQO, y la demanda bioqumica de oxgeno, DBO.
La DQO de las aguas residuales es la cantidad de oxgeno necesario para oxidar qumicamente
(empleando sustancias oxidantes fuertes en medio cido) las sustancias orgnicas presentes.
Es entonces, un parmetro de polucin que mide el material orgnico contenido en una
muestra lquida mediante oxidacin qumica. La DQO representa as una medida de la

83

cantidad de oxgeno consumido por la porcin de materia orgnica de la muestra que es

oxidable por un agente qumico fuerte (dicromato de potasio en medio cido sulfrico).
La oxidacin de la mayora de las formas de materia orgnica se efecta por ebullicin a
reflujo por 2 h con cantidades conocidas de dicromato de potasio, K 2Cr2O7, y H2SO4. El
material orgnico reduce una cantidad equivalente de dicromato, y el remanente de esa
sustancia se determina por titulacin con sulfato ferroso amnico estndar. La cantidad de
dicromato reducida (inicial remanente) es una medida de la cantidad de materia orgnica.
Materia orgnica + Cr2O72- + H+ = 2Cr3+ + CO2 + H2O
O tambin:
Donde

CnHaOb + cCr2O72- + 8cH+ = nCO2 + [(a/2) + 4c]H2O + 2cCr3+

c = (2n/3) + (a/6) (b/3)

En la reduccin del dicromato remanente

6Fe2+ + Cr2O72- + 14H+ = 6Fe3+ + 2Cr3+ + 7H2O
Para el ensayo de la DQO, deben controlarse adecuadamente los siguientes factores:
1. Establecer correctamente, antes de la prueba, la concentracin del dicromato de
potasio y del sulfato ferroso amnico.
2. Medirse exactamente el volumen de la muestra, de K2Cr2O7 y de H2SO4.
3. Mantener un tiempo de reflujo suficiente para permitir la oxidacin completa de la
materia orgnica. Generalmente, son 2 h.
En la determinacin interfieren los Cl-, los NO3- y otros iones inorgnicos, como Fe2+, Mn2+
SO32- y S2-. En general, en las aguas residuales, la interferencia de cloruro es la ms
importante, ya que consume dicromato:
6Cl- + Cr2O72- + 14H+ = 3Cl2 + 2Cr3+ + 7H2O
El sulfato mercrico que se agrega a la muestra antes de los otros reactivos evita la
interferencia de cloruros Se inhibe as la oxidacin de hasta 1000 mg/L de in cloruro, al
formarse un complejo de cloruro mercrico estable y soluble:
:
2Cl- + Hg2+ = HgCl2
(complejo poco reactivo)
Despus de la digestin de la materia orgnica con dicromato, se mide la cantidad residual del
reactivo mediante sulfato ferroso amnico. El punto final se determina usando ferrona como
indicador. La ferrona contiene 1,10 fenantrolina, que forma un complejo de color rojo con el
in ferroso. A medida que el dicromato anaranjado se reduce a Cr 3+ de color verde, los iones
Fe2+ forman un complejo con el indicador de color carmelita rojizo. El viraje es muy claro, de
un color azul verdoso a rojo carmelita (color caf o tabaco).

84

Existe otro mtodo para medir la DQO, llamado microespecrofotomtrico, que es similar al
que se describe aqu (denominado de digestin por reflujo), pero con cantidades mucho ms
bajas de todos los mismos reactivos, que se colocan en una ampolla sellada y la DQO se mide
espectrofotomtricamente, luego de la digestin.
La reaccin qumica involucrada entre la materia orgnica y el dicromato puede ilustrarse al
considerar la descomposicin del ftalato cido (o biftalato) de potasio (KC8H5O4):
2KC8H5O4 + 10K2Cr2O7 + 41H2SO4 = 10Cr2(SO4)3 + 11K2SO4 + 16CO2 + 46H2O
Si 10 moles de dicromato oxidan 2 moles de biftalato, la reaccin equivalente, con oxgeno
molecular como oxidante en presencia de cido sulfrico puede representarse por la ecuacin:
2KC8H5O4 + 15O2 + H2SO4 = K2SO4 + 16CO2 + 6H2O
De la ecuacin anterior se deduce que la DQO terica del biftalato de potasio (peso frmula =
204) es:
15 moles de O2
32 g O2 1 mol KC8 H 5 O4
g O2
x
x
1,176
2 moles de KC8 H 5 O4
mol
204 g
g KC8 H 5 O4

Por tanto, una solucin que contenga 0,851 g de biftalato de potasio por litro tiene una DQO
de 1,176 x 0,851 = 1 g/L = 1 mg/mL. Si se toma una alcuota de 25 mL de esa solucin
(equivalente a 25 mg O2) y se diluye a 50 mL, la DQO terica es de 25 mg/0,05 L = 500
mg/L.
Debe tenerse en cuenta que no todos los compuestos orgnicos son oxidables por dicromato.
Sustancias como algunos hidrocarburos aromticos y la piridina no son oxidadas bajo ninguna
circunstancia. (ver Tabla 1). Otros compuestos orgnicos, como los alcoholes y aminocidos
no reaccionan con el dicromato a menos que haya un catalizador. Los iones Ag + cumplen
efectivamente esa funcin, por lo que se adiciona sulfato de plata.
TABLA 1. RECUPERACIN DE LA DQO TERICA PARA VARIOS COMPUESTOS ORGNICOS (1)
Componente
Compuestos alifticos
Acetona
cido actico
Acrolena
cido butrico
Dextrosa
Dietilenglicol
Acetato de etilo
Metil-etil-cetona
Compuestos aromticos
Acetofenona
Benzaldehido

1
98
92
62
89
95
93
95
98

Reactividad, % del valor terico

2b
3c
4d
96
94
92
98
93
70
85
90

89
80

5e

85

Benceno
cido benzoico
Ftalato de dioctilo
Difenilo
o-cresol
Tolueno
Biftalato de potasio
Compuestos nitrogenados
Acrilonitrilo
Adenina
Anilina
Butilamina
Piridina
Quinolina
Trimetilamina
Triptofano
cido rico

60-98
98
83
81
95
83
100

41
100
95
45

48

44

80
57
0

74

59
1

2
87

1
87
61
a, b, c, d, e

: Autor del trabajo (ver Referencia 1)

No puede establecerse una relacin fija entre la DQO y la DBO, mientras no se establezcan
ambos parmetros para una muestra. Si existe un predominio de materia qumicamente
oxidable en la muestra que no reaccione biolgicamente (como en algunas aguas residuales
crudas, textiles y de procesadoras de papel), la DQO ser mayor que la DBO. Cuando
predomina el material oxidable biolgicamente, la DBO ser ms alta que la DQO. Como
ejemplo est el de algunas destileras.
La DQO se usa mucho en el anlisis de aguas residuales. Junto con el de la DBO, permite
establecer las condiciones de biodegradabilidad y la proporcin de sustancias txicas en una
muestra, y la eficiencia de las unidades de tratamiento.
Aspectos Legales

En relacin con la DQO, la Seccin III del Decreto 883 establece los lmites mximos de
calidad de los vertidos, dependiendo del sitio a donde se dirigen:
Sitio a donde descarga el
vertido (Art. del Decreto)
Ros, estuarios, lagos o
embalses (Art. 10)
Medio marino-costero
(Art. 12)
Redes cloacales (Art. 15)

Lmite mximo DQO,

mg/L
350
350
900

Resumen

Se coloca en reflujo por 2 h la muestra junto con un volumen conocido de dicromato de

potasio y cido sulfrico. Se determina el exceso de dicromato despus de la digestin,
utilizando una solucin estndar de sulfato ferroso amnico, con un complejo de
ortofenantrolina-hierro ferroso como indicador.

86

Significado y uso

Este mtodo se utiliza para determinar qumicamente la cantidad de oxgeno que consumen
ciertas impurezas del agua. Tpicamente, la DQO se emplea para monitorear y controlar
contaminantes inorgnicos y orgnicos que consumen oxgeno en aguas residuales domsticas
e industriales. Puede establecerse una relacin entre la DQO y otros parmetros como el
carbono orgnico total.
Precauciones de seguridad

Esta prctica puede involucrar el empleo de materiales, operaciones y equipos peligrosos. No

se asume que se describan aqu todos los problemas de seguridad relacionados con su uso.
Queda bajo la responsabilidad del usuario establecer las prcticas apropiadas y la aplicacin
de medidas especficas para desarrollar actividades seguras. Considerar, sin embargo, los
siguientes aspectos:
1. Debe tenerse cuidado extremo al manipular soluciones concentradas de cido sulfrico.
Emplear ventilacin adecuada, gafas protectoras, mascarilla, guantes de goma y trajes
protectores. Si ha habido contacto con el cido, el tratamiento consiste en lavar los ojos con
agua, con agua y jabn las partes contaminadas del cuerpo y lavado gstrico si se ha
ingerido.
2. El dicromato de potasio es un irritante y alrgeno. Como todas las sales hexavalentes de
cromo, es muy txico. Utilizar ventilacin adecuada, guantes, delantales y botas de goma,
mascarilla con filtro mecnico. Acentuar la limpieza personal. Si ha habido contacto con la
solucin, el tratamiento incluye lavado de los ojos con agua, con agua y jabn de las partes
contaminadas del cuerpo y lavado gstrico si se ha ingerido.
3. El sulfato de plata es venenoso. Evitar el contacto con la sustancia slida o sus soluciones.
Utilizar ventilacin adecuada. Todo lo que se vierta debe recogerse rpidamente. No comer ni
fumar en el rea de trabajo. Deben emplearse trajes protectores para el manejo de la sal. Si ha
habido contacto con la solucin, el tratamiento incluye lavado de los ojos con agua, con agua
y jabn de las partes contaminadas del cuerpo. Si se ha ingerido, debe realizarse un lavado
gstrico, empleando cloruro de sodio para precipitar la plata, y luego un purgante salino.
4. El sulfato de mercurio es muy venenoso. Evitar el contacto con la sustancia slida o sus
soluciones. Cuanto mas grave es la intoxicacin, mayor la probabilidad de lesiones
permanentes. Utilizar ventilacin adecuada. Todo lo que se vierta debe recogerse rpidamente.
No comer ni fumar en el rea de trabajo. Deben emplearse trajes protectores para el manejo de
la sal. Si se ha ingerido, debe procederse al lavado gstrico. Si ha habido contacto con la
solucin, deben lavarse inmediatamente los ojos con agua, y con agua y jabn las partes
contaminadas del cuerpo
Interferencias

El in cloruro, la interferencia ms frecuente, se oxida cuantitativamente por el dicromato en

solucin cida. Esta reaccin puede minimizarse por la adicin de sulfato mercrico.
La reaccin con dicromato no es especfica para los compuestos orgnicos, sino que tal
sustancia puede oxidar los iones inorgnicos presentes, como el nitrito, hierro ferroso, sulfito
y sulfuro. Algunas sustancias orgnicas son muy resistentes a la oxidacin, mientras que otras

87

(como los carbohidratos), reaccionan fcilmente. Para una gua de reactividades, consultar la
Tabla 1.
Puede ocurrir la prdida parcial de compuestos orgnicos difciles de oxidar antes del inicio de
la reaccin. Deben extremarse las precauciones para mantener una temperatura baja (unos 40
C) que permita la oxidacin a baja temperatura por un cierto perodo, antes de iniciar el
reflujo.
Aparatos

1. El aparato de reflujo consiste de un erlenmeyer de 500 mL o un frasco de fondo

redondo de 300 mL, de vidrio resistente al calor, conectado a un condensador Allihn de
300 mm por medio de cuello esmerilado. Puede utilizarse cualquier otro aparato de
reflujo que sea equivalente, siempre que haya una conexin de vidrio esmerilado entre
el frasco y el condensador, y que sea de vidrio resistente al calor.
2. Aparato para el calentamiento de la muestra: Una manta de calentamiento o una
plancha caliente, capaz de suministrar calor suficiente al aparato de reflujo, para
asegurar la ebullicin de su contenido.
3. Aparato para mezclar u homogeneizar la muestra: Una batidora casera es satisfactoria.

Reactivos y materiales

A. REACTIVOS:
1. Solucin patrn de sulfato ferroso amnico 0,25 N. Disolver 98,0 g de
Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O en agua destilada. Aadir 20 mL de cido sulfrico concentrado
(g. e. 1,84), enfriar y diluir a 1 L. Estandarizar esta solucin diariamente antes de usar.
(ver Estandarizacin).
2. Solucin patrn de sulfato ferroso amnico 0,025 N: Diluir 100 mL de solucin de
sulfato ferroso amnico 0,25 N a 1 L. Estandarizar esta solucin con dicromato de
potasio 0,025 N, utilizando el mtodo que aparece en Estandarizacin. Esta solucin
se necesita slo si se va a determinar la DQO en el rango de 10 a 50 mg/L.
3. Sulfato mercrico, HgSO4, en polvo.
4. Solucin indicadora de fenantrolina-sulfato ferroso (ferrona): Disolver 1,48 g de 1,10(orto)-fenantrolina (monohidrato) junto con 0,70 g de sulfato ferroso (FeSO 4.7H2O) en
100 mL de agua destilada.
5. Solucin estndar de ftalato cido de potasio (o biftalato de potasio) (1 mL = 1 mg
DQO): Disolver 0,851 g de ftalato cido de potasio, KC 8H5O4, grado analtico, en agua
destilada y diluir a 1 L.
6. Solucin estndar de dicromato de potasio (0,25 N): Disolver 12,259 g de K 2Cr2O7
grado analtico (previamente secado a 103 C por 2 h) en agua destilada y diluir a 1 L.
7. Solucin estndar de dicromato de potasio (0,025 N): Diluir 100,0 mL de solucin de
dicromato de potasio 0,25 N a 1 L. Esta solucin se necesita slo si para determinar la
DQO en el rango de 10 a 50 mg/L.
8. Sulfato de plata, AgSO4, en polvo.
9. cido sulfrico (g. e. 1,84): H2SO4 concentrado

88

10. Solucin de cido sulfrico-sulfato de plata: Disolver 15 g de sulfato de plata en polvo

en 300 mL de cido sulfrico (g. e. 1,84) y diluir a 1 L con cido sulfrico concentrado
(g. e. 1,84).
B. MATERIALES:
Pipetas volumtricas de 5, 10, 25 y 50 mL
Matraces aforados de 1000 mL
Cilindros graduados de 50 y 100 mL
Baos de hielo
Perlas de ebullicin
Vasos de precipitado de 100 mL
Matraces erlenmeyers de 500 mL
Frasco gotero para el indicador
Bureta de 10 o 25 mL
Balanza analtica
Muestra y mtodos de muestreo

Para muestras inestables, debe realizarse el ensayo sin retraso. Homogeneizar muestras que
contengan slidos sedimentables, utilizando una batidora, para permitir un muestreo
representativo. Si va a haber un retraso en el anlisis, preservar la muestra mediante
enfriamiento a 4 C si va a ser analizada dentro de las 24 h siguientes al muestreo, o por
acidificacin con 2 mL/L de cido sulfrico concentrado en el momento de la recoleccin, si
el anlisis se realizar en los prximos 7 das. Para muestras con DQO muy elevada, realizar
diluciones previas utilizando matraces aforados, para reducir el error inherente a la medicin
de volmenes pequeos.
Procedimiento

1. Colocar 50,0 mL de muestra en el matraz de reflujo. Si se utilizan menos de 50 mL,

aadir primero la cantidad necesaria de agua de dilucin al recipiente de reflujo,
agregar la muestra y mezclar. Las muestras que contienen ms de 800 mg/L de DQO
deben diluirse previamente y colocar luego 50,0 mL de muestra diluida en el matraz de
reflujo.
Nota: Las muestras diluidas deben consumir al menos 5 mL del dicromato. Diluir la muestra si se
consumen ms de 20 mL del dicromato.

2. Para la determinacin en blanco, colocar 50 mL de agua destilada en otro recipiente de

reflujo
3. Para chequear la validez de la prueba, realizar una determinacin estandarizada,
utilizando la solucin de ftalato cido de potasio. Debera obtenerse una DQO de 500
mg/L, cuando se utiliza una alcuota de 25 mL de esta solucin estndar diluida a 50
mL. Por lo tanto, en un tercer recipiente de reflujo colocar 25,0 mL de solucin de
ftalato cido de potasio y agregar 25 mL de agua destilada.
4. Colocar los 3 frascos de reflujo en un bao de hielo y agregar a cada uno 1 g de sulfato
mercrico slido, 5,0 mL de cido sulfrico concentrado y varias perlas o piedras de
ebullicin. Mezclar bien, para la completa disolucin.
5. Manteniendo los frascos en el bao de hielo, aadir lentamente y con agitacin, 25,0
mL de solucin estndar de dicromato de potasio 0,25 N

89

6. Con los frascos todava en el bao de hielo, agregar lentamente 70 mL de la solucin

de la solucin de cido sulfrico-sulfato de plata, tratando que la temperatura se
mantenga lo ms baja posible (mejor por debajo de 40 C).
7. Unir el frasco al condensador e iniciar el flujo de agua de enfriamiento
Nota: Asegurarse que el contenido del frasco se encuentra bien mezclado, para evitar
sobrecalentamiento que produzca la expulsin del lquido por el extremo abierto del condensador.

8. Cubrir el extremo abierto del condensador con un pequeo vaso de precipitado

invertido, para prevenir el ingreso de materiales extraos a la mezcla en reflujo.
9. Aplicar calor a los recipientes y reflujar por 2 h.
10. Permitir que los frascos se enfren y lavar el condensador con aproximadamente 25 mL
de agua destilada. Si se utiliz un recipiente de fondo redondo, transferir la solucin a
un erlenmeyer de 500 mL, lavando el frasco de reflujo 3 a 4 veces con agua. Diluir a
300 mL con agua y dejar que se enfre a temperatura ambiente.
11. Aadir 8 a 10 gotas del indicador de fenantrolina-sulfato ferroso y titular el exceso de
dicromato con la solucin de sulfato ferroso amnico 0,25 N. El cambio de color en el
punto final es neto desde un azul-verdoso hasta un marrn rojizo. Si la solucin vira
inmediatamente a marrn rojizo al agregar el indicador, repetir el anlisis con una
alcuota ms pequea.
12. Para muestras con baja DQO (10 a 50 mg/L), utilizar soluciones 0,025 N de dicromato
de potasio y de sulfato ferroso amnico. Cuando la DQO se encuentra que es mayor a
50 mg/L empleando tales reactivos a esa concentracin, debe analizarse de nuevo la
muestra, utilizando los reactivos ms concentrados.
Estandarizacin

1. Titulacin del Fe(NH4)2(SO4)2 0,25 N: En un erlenmeyer de 500 mL, diluir 25,0 mL de

solucin de dicromato de potasio 0,25N, con agua destilada, a aproximadamente 250
mL. Aadir 20 mL de cido sulfrico concentrado (g. e. 1,84) y dejar enfriar. Agregar
8 a 10 gotas del indicador de fenantrolina-sulfato ferroso y titular con la solucin de
sulfato ferroso amnico a estandarizar. El cambio de color en el punto final es
fcilmente visible desde un azul-verdoso hasta un marrn rojizo.
Calcular la normalidad as:
N = (A x B)/C
Donde:
N = normalidad de la solucin de sulfato ferroso amnico.
A = volumen de solucin de dicromato de potasio, mL
B = normalidad de la solucin de dicromato de potasio.
C = Volumen de la solucin de sulfato ferroso amnico, mL
2. Titulacin del Fe(NH4)2(SO4)2 0,025 N: Utilizar igual procedimiento que para la
solucin 0,25 N, pero empleando como titulante la solucin de dicromato de potasio
0,025 N. La normalidad de la solucin de sulfato ferroso amnico se calcula con la
misma frmula.
Manejo de los Datos y Clculos

1. Calcular la DQO de la muestra en mg/L mediante la ecuacin:

90

DQO , mg / L

( A B) N
x 8 x 1000
S

(1)

Donde:
A = mL de solucin de sulfato ferroso amnico para el blanco.
B = mL de solucin de sulfato ferroso amnico para la muestra.
N = normalidad de la solucin de sulfato ferroso amnico.
8 = peso miliequivalente del oxgeno
1000 = factor de conversin de L a mL
S = mL de muestra utilizada en la prueba
2. Para la DQO de la solucin de biftalato de potasio, como se dijo antes, la solucin
contiene 0,851 g de la sal por litro, y tiene una DQO de 1 mg/mL. Utilizando una
alcuota de 25 mL de esa solucin (equivalente a 25 mg O 2) diluda a 50 mL, la DQO
terica es de 25 mg/0,05 L = 500 mg/L. Calcular el valor experimental utilizando la
ecuacin (1).
Bibliografa consultada

1. Annual Book of ASTM Standards: D 1252-88: Standard Test Methods for Chemical
Oxygen Demand (Dichromate Oxygen Demand) of Water ASTM. 1995.
2. APHA, AWWA, WPCF: Standard Methods for the Examination of Water and
Wastewater 14th Edition. pp. 550-554. USA. 1976
3. Plunkett, E.: Manual de Toxicologa Industrial. pp. 360, 437. Urmo. Bilbao. 1974.
4. Romero, J.: Acuiqumica. Cap. 3. Editorial Escuela Colombiana de Ingeniera.
Bogot. 1996.
5. Decreto 883 Normas para la Clasificacin y el Control de la Calidad de los Cuerpos
de Agua y Vertidos o Efluentes Lquidos. Gaceta Oficial de la Repblica de
Venezuela N 5.021 (Extraordinario). 18/12/1995

91

PRACTICA 9. DEMANDA BIOQUMICA DE OXGENO

Introduccin

La demanda bioqumica de oxgeno, DBO5,20 o simplemente DBO, se define como la cantidad

de oxgeno consumida durante la descomposicin natural de la materia orgnica presente en
un volumen dado de agua en condiciones aerbicas durante 5 das a 20C. Puesto que la
reaccin contina indefinidamente, la prueba de la DBO ltima se ha limitado arbitrariamente
a 20 das, cuando se ha consumido un 95% o ms del oxgeno necesario. Como este perodo es
demasiado largo para que sea til, una medicin que se realiza en 5 das a 20 C se ha
convertido en la norma.
El ensayo de la DBO mide el oxgeno consumido por los microorganismos vivos
(esencialmente bacterias) al utilizar la materia orgnica de un residuo en condiciones similares
a las de la naturaleza, y puede considerarse como una oxidacin hmeda, donde los
microorganismos oxidan la materia orgnica a CO2 y agua.
Hay una relacin cuantitativa de la cantidad de oxgeno necesaria para convertir una cantidad
definida de un compuesto orgnico dado a CO2, H2O y NH3 (este ltimo proviene del nitrgeno contenido en la materia orgnica):
CnHaObNc + (n + a b c) O2 n CO2 + ( a c) H2O + c NH3
Para las aguas residuales ordinarias, el valor de la DBO a 5 das (conocido frecuentemente
como DBO5,20) representa aproximadamente un 68 al 70 % de la materia orgnica, que
requiere unos 100 das para su descomposicin total. Las reacciones involucradas incluyen
hidrlisis, fermentacin, oxidacin y putrefaccin por microorganismos que consumen
oxgeno en cantidad proporcional a la materia orgnica que descomponen (o estabilizan).
La DBO se expresa en partes de oxgeno por milln de partes de desecho. Los efluentes
domsticos tienen una concentracin prxima a las 200 ppm, mientras que los efluentes de la
industrial de alimentos presentan valores que con frecuencia exceden las 1500 ppm de DBO.
La determinacin de la DBO se efecta midiendo la concentracin de oxgeno disuelto en la
muestra antes y despus de su incubacin en frascos sellados por 5 das a 20C. Con muestras
que no exceden las 7 ppm de DBO, se puede determinar tal parmetro directamente, midiendo
el oxgeno disuelto inicial y final (despus de incubar una muestra a 20C durante 5 das) y
calculando la diferencia como DBO (mtodo directo).
Desafortunadamente, la mayora de las muestras tiene una DBO mayor de 7 ppm, por lo que
es necesario utilizar el mtodo de dilucin, que se basa en suponer que la velocidad de
degradacin bioqumica de la materia orgnica sigue una cintica de primer orden,
proporcional a la cantidad de alimento remanente disponible. Por ejemplo, una dilucin al
10% utiliza el oxgeno a una velocidad que es la dcima parte de la de una muestra al 100%.

La experiencia ha demostrado que la mejor agua para dilucin en el ensayo de la DBO se

prepara a partir de agua destilada con una pequea proporcin de un buffer y unas sales que

92

aseguran condiciones osmticas apropiadas, as como las condiciones para el crecimiento y

metabolismo de los microorganismos. La funcin del buffer es mantener un pH favorable
(usualmente entre 6,5 y 8,5 aunque se prefiere 7 a 7,2).
El agua de dilucin tiene todos los elementos necesarios para medir la DBO, excepto los
microorganismos. Para suministrar las bacterias que aseguren la descomposicin de las
sustancias orgnicas se utiliza una siembra. Las aguas residuales domsticas (especialmente
las de alcantarillado) suministran una poblacin balanceada de microorganismos, y es
suficiente una cantidad de 2 a 5 mL de stas por litro de muestra.
Utilizando la tcnica de la dilucin, se puede admitir que el agua de dilucin junto con el
material de siembra contiene materia orgnica, y que la adicin de agua de dilucin a la
muestra aumenta la cantidad de materia orgnica oxidable, por lo que debe realizarse una
correccin. Se mide el oxgeno disuelto en el agua de dilucin en el da cero, para tener una
medida de la eventual cantidad de materia orgnica que posee. En algunos estudios, se
recomienda incluir al menos tres blancos en cada grupo de muestras a las que se va a medir la
DBO.
En la prctica, se determina el oxgeno disuelto, OD, en 6 muestras:

Muestra original diluida (si es necesario), control de siembra y agua de dilucin

(blanco), sin haber sido incubados.
Tres muestras idnticas a las anteriores (original, control de siembra y agua de
dilucin), luego de su incubacin a 20 C por 5 das.

Para los clculos de la DQO se toman aquellas muestras que producen un consumo de oxgeno
mayor de 2 mg/L, y que poseen un contenido de OD final mayor de 0,5 ppm. Cuando se desea
establecer el tamao apropiado de la muestra, se puede consultarse una tabla donde aparezca
el intervalo de DBO que se puede medir con diferentes diluciones. En la Tabla 1 (ver pgina
siguiente), se presenta esa informacin.
Si los recipientes para la DBO son de 300 mL, un 1% de muestra significa un volumen de 3
mL de muestra. Si para una muestra particular se anticipa una DBO prxima a 1000 ppm,
debera emplearse una dilucin al 0,5% (1,5 mL de muestra en recipientes de 300 mL). Si se
incluye adems una dilucin al 0,2% (0,6 mL) y otra al 1% (3 mL), el intervalo de DBO que
se puede medir se extiende desde 200 hasta 3500 mg/L, lo que puede compensar cualquier
error en el clculo original.
A manera de referencia, las diluciones se pueden preparar segn el tipo de efluente: 0,1 a 1%
para aguas de mataderos industriales o aguas cloacales concentradas, 1 a 5% para aguas
cloacales sedimentadas, 5 a 25% para efluentes parcialmente oxidados y 25 a 100% para
aguas de ros contaminados.

TABLA 1. MEDICIN DE LA DBO CON MUESTRAS DE DIFERENTES DILUCIONES

% de la muestra

Margen de la DBO, ppm

93

0.01
0.02
0.05
0.1
0.2
0.5
1.0
2.0
5.0
10.0
20.0
50.0
100

20.000-70.000
10.000-35.000
4.000-14.000
2.000-7.000
1.000-3.500
400-1.400
200-700
100-350
40-140
20-70
10-35
4-14
0-7

Aspectos Legales

Al igual que con la DQO, los lmites de DBO que aparecen en el Decreto 883 dependen del
destino final de los vertidos lquidos:
Sitio a donde descarga el
vertido (Art. del Decreto)
Ros, estuarios, lagos o
embalses (Art. 10)
Medio marino-costero
(Art. 12)
Redes cloacales (Art. 15)

Lmite mximo DBO,

mg/L
60
60
350

Resumen

Para cuantificar la cantidad de materia orgnica biodegradable se mide la cantidad de oxgeno

que consume una poblacin microbiana en crecimiento para oxidar la materia orgnica a CO 2
y H2O en un sistema cerrado.
Significado y uso

La DBO es el parmetro ms importante en el estudio del control de la polucin del agua, y se

utiliza como una medida de la contaminacin orgnica, como base para estimar los
requerimientos de oxgeno para los procesos biolgicos y como un indicador del rendimiento
de los mtodos de tratamiento.
Precauciones de seguridad

Esta prctica puede involucrar el empleo de materiales, operaciones y equipos peligrosos. El

procedimiento a utilizar se basa en el empleo de sustancias que se utilizan para medir el
oxgeno disuelto, con las correspondientes medidas de seguridad establecidas para esa
experiencia. No se asume que se describan aqu todos los problemas de seguridad
relacionados con su uso. Queda bajo la responsabilidad del usuario establecer las prcticas
apropiadas y la aplicacin de medidas especficas para desarrollar actividades seguras.
Considerar, sin embargo, los siguientes aspectos:

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1. Debe tenerse cuidado extremo al manipular soluciones concentradas de cido sulfrico.

Emplear ventilacin adecuada, gafas protectoras, mascarilla, guantes de goma y trajes
protectores. Si ha habido contacto con la solucin, el tratamiento consiste en lavar los ojos con
agua, con agua y jabn las partes contaminadas del cuerpo y lavado gstrico si se ha ingerido.
2. El dicromato de potasio es un irritante y alrgeno. Como todas las sales hexavalentes de
cromo, es muy txico. Utilizar ventilacin adecuada, guantes, delantales y botas de goma,
mascarilla con filtro mecnico. Acentuar la limpieza personal. Si ha habido contacto con la
solucin, el tratamiento incluye lavado de los ojos con agua, con agua y jabn de las partes
contaminadas del cuerpo y lavado gstrico si se ha ingerido.
3. La azida de sodio es un compuesto irritante. Utilizar ventilacin adecuada, gafas de
seguridad y mascarilla con filtro mecnico. Tambin vestidos protectores de goma al manejar
soluciones. Acentuar la limpieza personal. Si ha habido contacto con la solucin, el
tratamiento incluye lavado de los ojos con agua, con agua y jabn de las partes contaminadas
del cuerpo y lavado gstrico si se ha ingerido, seguido por un purgante salino.
4. Las soluciones de hidrxido sdico son altamente corrosivas. Al contacto con los ojos,
producen conjuntivitis y quemaduras de la crnea. En la piel, ocasionan quemaduras
profundas. Por ingestin, producen quemaduras de boca y esfago, dolor abdominal y diarrea.
Para su manipulacin, emplear ventilacin adecuada, gafas protectoras o pantalla para la cara,
mascarilla, guantes, delantales y botas de goma y acentuar la limpieza personal. Si hay
contacto con esta solucin, lavarse inmediatamente los ojos con agua, con agua y jabn las
partes contaminadas del cuerpo y lavado gstrico, si se ha ingerido, con solucin de cido
actico al 5%. El dao corneal puede ser permanente, lo mismo que la estrechez del esfago y
estmago. Utilizar gafas protectoras, ventilacin adecuada, guantes y delantales. Acentuar la
limpieza personal.
Interferencias

Al estar basada la medicin de la DBO en la determinacin del contenido de oxgeno disuelto

inicial y luego de 5 das, lo relacionado con las interferencias corresponde a lo establecido
para el caso del O2 disuelto. Se transcribe a continuacin lo explicado en aquel experimento.
La interferencia de ms de 50 g/L de nitrito se elimina utilizando azida de sodio. Puede
tolerarse un mximo de 100 a 200 mg/L de hierro frrico, adicionando 1 mL de solucin de
fluoruro de potasio. La interferencia de hierro ferroso (no ms de 1 ppm) se elimina agregando
permanganato de potasio. La interferencia de materia orgnica puede adecuarse empleando
soluciones concentradas de solucin de yoduro-azida.
Aparatos

a.
b.
c.
d.

Frascos de incubacin para DBO de 250 a 300 mL de capacidad, con tapa esmerilada
Estufa de incubacin o bao controlado termostticamente a 20 1C
Equipo de vidrio individual
Algodn o lana de vidrio
Reactivos y materiales

A. REACTIVOS:
1) Solucin alcalina de yoduro:
a. Solucin alcalina de yoduro: Se utiliza si se conoce que el in nitrito se encuentra
ausente, y se van a hacer ajustes a la interferencia del in ferroso. Disolver 500 g de

95

2)
3)
4)

5)
6)

7)
8)
9)

hidrxido de sodio, NaOH, o 700 g de hidrxido de potasio, KOH, y 135 g de yoduro

de sodio, NaI, o 150 g de yoduro de potasio, KI, en agua y diluir a 1 L. Las sales de
sodio y potasio son equivalentes. La solucin final no debe producir color con almidn
cuando se diluye y acidifica. Almacenar esta solucin en un recipiente de vidrio oscuro
y tapado.
b. Solucin alcalina de azida-yoduro de sodio I (para muestras normales): Se
emplea cuando no se considera la interferencia del in ferroso: Disolver 500 g de
hidrxido de sodio, NaOH, o 700 g de hidrxido de potasio, KOH, y 135 g de yoduro
de sodio, NaI, o 150 g de yoduro de potasio, KI, en agua y diluir a 950 mL. Enfriar.
Agregar lentamente una solucin de 10 g de azida de sodio, NaN 3, disuelta en 40 mL
de agua. Las sales de sodio y potasio son equivalentes. La solucin final no debe
producir color con almidn cuando se diluye y acidifica. Almacenar esta solucin en
un recipiente de vidrio oscuro y tapado.
c. Solucin alcalina de azida-yoduro de sodio II: Se utiliza cuando existe elevada
concentracin de materia orgnica, o si la concentracin de oxgeno disuelto excede
los 15 mg/L. Disolver 400 g de hidrxido de sodio, NaOH, en 500 mL agua
recientemente hervida y enfriada. Enfriar la solucin resultante y disolver 900 g de
yoduro de sodio, NaI. Agregar lentamente una solucin de 10 g de azida de sodio,
NaN3, disuelta en 40 mL de agua. Enrasar a 1 L.
Solucin de sulfato manganoso (364 g/L): Disolver 364 g de sulfato manganoso,
MnSO4.H2O, en agua. Filtrar y diluir a 1 L. No deben liberarse ms que trazas de yodo
cuando esta solucin se aade sobre una solucin acidificada de yoduro de potasio, KI.
Solucin de dicromato de potasio 0,025 N: Secar el K2Cr2O7 a 103 C por 2 h antes de
preparar la solucin. Pesar 1,226 g de la sal, disolver y enrasar a 1 L con agua
destilada.
Solucin de tiosulfato de sodio 0,1 N: Disolver 24.82 g de Na 2S2O3.5H2O en agua
destilada recientemente hervida y fra y diluir a 1 L. Preservar esta solucin agregando
5 mL de cloroformo. Para preparar una solucin diluida (0,005 N), transferir 25,00 mL
del Na2S2O3 0,1 N a un matraz volumtrico de 500 mL. Enrasar con agua destilada y
mezclar. Esta solucin no debe prepararse antes de 12 a 15 horas de su uso.
Solucin de tiosulfato de sodio 0,025 N: Diluir 250 mL de solucin estandarizada de
Na2S2O3 0,1 N a 1 L con agua destilada. 1 mL de solucin de tiosulfato 0,025 N es
equivalente a 0,2 mg de oxgeno (1 mL x 0,025 meq/mL x 8 mg/meq = 0,2 mg).
Solucin indicadora de almidn: Mezclar 6 g de almidn soluble con un poco de agua
destilada en un mortero para formar una pasta. Colocar esta pasta sobre 1 L de agua
hirviendo. Enfriar. Agregar 20 g de hidrxido de potasio y mezclar. Dejar en reposo
por 2 h. Agregar 6 mL de cido actico glacial (99,5 %). Mezclar completamente.
Aadir suficiente HCl (de densidad 1,19 g/mL) para ajustar el pH de la solucin a 4.
Almacenar la solucin en una botella con tapa de vidrio. Esta solucin es estable por 1
ao.
Acido sulfrico concentrado (densidad 1,84 g/mL).
Solucin de cido sulfrico (1+9): En un vaso de precipitado de 250 mL, colocar
cuidadosamente 10 mL de cido sulfrico concentrado (g. e. = 1,84) en 90 mL de agua.
Enfriar a temperatura ambiente.
Solucin de fluoruro de potasio (400 g/L): Disolver 40 g de fluoruro de potasio,
KF.2H2O, en agua y diluir a 100 mL. Almacenar en botella plstica. Esta solucin se
utiliza para eliminar la interferencia por hierro frrico.

96

10) Solucin de oxalato de potasio (20 g/L): Disolver 2 g de oxalato de potasio,

K2C2O4.H2O en 100 mL de agua. 1 mL de esta solucin reduce 1,1 mL de solucin de
KMnO4. Esta solucin se emplea para eliminar la interferencia por hierro ferroso.
11) Solucin de permanganato de potasio (6,3 g/L): Disolver 6,3 g de permanganato de
potasio, KMnO4, en agua y diluir a 1 L. Con concentraciones muy elevadas de hierro
ferroso, 1 mL de la solucin de KMnO4 es suficiente para eliminar tal interferencia.
12) Yoduro de potasio slido, KI.
13) Solucin de sulfito de sodio 0,025N: Disolver 1,575 g de Na 2SO3 anhidro en 1000 mL
de agua destilada. Esta solucin no es estable, y debe prepararse diariamente.
14) Solucin buffer de fosfato: Disolver 8,5 g de fosfato dicido de potasio, KH 2PO4;
21,75 g de fosfato cido de potasio, K2HPO4; 33,4 g de fosfato cido de sodio,
Na2HPO4.7H2O y 1,7 g de cloruro de amonio, NH4Cl, en aprox. 500 mL de agua y
diluir a 1 L. El pH de esta solucin debe ser de 7,2 sin ajuste posterior.
15) Soluciones de cloruro frrico (0,25 g de FeCl3.6H2O/L), cloruro de calcio (27,5 g de
CaCl2/L) y sulfato de magnesio (22,5 g de MgSO4.7H2O/L).
16) Agua de dilucin: Para preparar el agua de dilucin, utilizar agua destilada que
contenga menos de 0,01 mg de Cu/L, y se encuentre libre de cloruros, cloraminas,
alcalinidad custica, materiales orgnicos y cidos. Airear una cantidad suficiente de
esta agua (segn el nmero de muestras a analizar), agitando una botella parcialmente
llena o mediante aire comprimido limpio. Utilizar esta agua a 20 1 C. Agregar, por
cada litro de agua aireada 1 mL de cada una de las soluciones de buffer, cloruro
frrico, cloruro de calcio y sulfato de magnesio.
17) Siembra: El propsito de la siembra es introducir dentro de la muestra una poblacin
biolgica capaz de oxidar la materia orgnica en el agua residual. Cuando tales
microorganismos ya estn presentes, como en aguas residuales domsticas y efluentes
industriales no clorados, no es necesaria la siembra, y no debe utilizarse. En otras
situaciones, puede utilizarse para la siembra un agua residual domstica que se ha
almacenado a 20 C por 24 a 36 h.
B. MATERIALES:
Botellas de vidrio con tapa esmerilada de 250 o 300 mL
Termmetro
Barmetro
Pipetas graduadas de 1, 2 y 5 mL
Pipetas volumtricas de 2 y 10 mL
Cilindro de 250 mL
Bureta de 10, 25 o 50 mL (recomendada la de 10 mL)
Balanza analtica
Soporte para la bureta
Muestra

Deben utilizarse muestras de agua residual cruda. Pueden emplearse muestras instantneas,
pero son ms representativas las muestras integradas. La prueba no debe realizarse sobre
efluentes clorados. El almacenamiento previo no debe ser mayor a 6 h y siempre bajo
refrigeracin.
Procedimiento

97

Tratamiento previo de la muestra:

1. Muestras que contienen acidez o alcalinidad: Neutralizar la muestra utilizando
solucin de H2SO4 o NaOH 1N y un medidor de pH.
2. Muestras que contienen cloro residual: Si se dejan en reposo por 1 a 2 h, el
cloro residual a menudo desaparece. Para destruir cantidades grandes de cloro
residual, debe utilizarse sulfito de sodio. Para conocer la cantidad necesaria del
reactivo, tomar una porcin de 100 mL del agua a analizar y agregar 10 mL de
solucin de cido actico 1+1 o de cido sulfrico 1+10, seguidos por 10 mL
de solucin de KI (10 g/100 mL) y titular con solucin de Na 2SO3 0,025N,
utilizando almidn como indicador. Aadir al volumen apropiado de muestra la
cantidad de solucin de sulfito de sodio determinada por la prueba anterior,
mezclar y luego de 10 a 20 min, chequear la ausencia de cloro residual.
3. Muestras que contienen otras sustancias txicas: Las muestras que provienen
de algunos desechos industriales, como las que contienen metales txicos,
frecuentemente requieren estudios y tratamientos especiales.
b. Tcnica de dilucin: En un frasco de 250 o 300 mL, de tapn esmerilado colocar unos
150 mL de agua de dilucin. Agregar la cantidad apropiada de muestra y 1 mL de
siembra. Llenar el frasco hasta el cuello con agua de dilucin y taparlo, de manera que
no queden atrapadas burbujas de aire, creando un sello de agua. Incubar por 5 das a 20
C. Preparar otro frasco siguiendo el mismo procedimiento para la determinacin del
oxgeno disuelto, OD, inicial de la muestra. Para la valoracin, utilizar 200 mL de agua
del frasco y seguir el procedimiento utilizado para el OD.
c. Llenar dos frascos ms con agua de dilucin solamente, uno para su incubacin por 5
das a 20 C y otro para medir el OD inicial del agua de dilucin. Utilizar los valores de
OD de estas dos muestras para chequear la calidad del agua de dilucin. La diferencia no
debera ser mayor de 0,2 mg/L y preferiblemente no ms de 0,1 mg/L de OD.
d. Control de siembra: Llenar 2 frascos ms con agua de dilucin + 3 mL de siembra.
Incubar uno de ellos a 20 C durante 5 das y medir al otro su nivel de OD inicial.
e. Pasado el tiempo de incubacin, determinar el OD de cada uno de los 3 frascos
incubados, valorando otra vez 200 mL de solucin.
f. Descartar aquellos resultados de muestras que consuman menos del 50% o ms del 70%
del OD presente en la muestra diluida antes de incubar. Por ello, deben prepararse varias
diluciones, y escogerse los resultados que cumplan con tal condicin. Son ms
confiables los que muestran un OD residual de al menos 1 mg/L y una reduccin no
menor a 2 mg/L de OD.
Calibracin

La prueba de la DBO es un bioensayo cuyos resultados dependen mucho de la presencia de

sustancias txicas o del uso de siembras no apropiadas. A veces, el agua destilada est
contaminada con sustancias txicas y algunas siembras no son reactivas, lo que hace que los
resultados sean bajos, y se requiere chequear la calidad del agua de dilucin, la efectividad de
la siembra y la tcnica del analista. Para ello, se prepara un patrn que contiene 150 mg/L de
glucosa y 150 mg/L de cido glutmico (ambos de grado analtico, secados a 103 C por 1 h).
Se pipetean 5 mL de esta solucin en un frasco de DBO, se llenan con agua de dilucin y
siembra y se sigue el mismo procedimiento que para la muestra.

98

Los resultados varan dependiendo del tipo de siembra y con su calidad. El valor medio para
este patrn se encuentra entre 207 y 225 mg de DBO/L, con desviacin estndar de 7 a 13
mg/L.
Manejo de los Datos y Clculos

Al realizar la valoracin de las 6 muestras (3 iniciales y 3 a los 5 das), se tienen 6 valores de

datos de niveles de oxgeno disuelto.
Para el clculo de la DBO, se utiliza la frmula:

DBO , mg / L

( D1 D2 ) ( B1 B2 ) f
P

(1)

Donde:
DBO : Demanda bioqumica de oxgeno, mg/L
D1 : Oxgeno disuelto inicial de la muestra diluida, mg/L
D2 : Oxgeno disuelto de la muestra diluida despus de la incubacin, mg/L
B1 : Oxgeno disuelto de la dilucin del control de siembra antes de la incubacin, mg/L
B2: Oxgeno disuelto de la dilucin del control de siembra luego de la incubacin, mg/L
P: Fraccin volumtrica decimal de muestra utilizada = Volumen de muestra/volumen del
frasco de DBO.
f: Relacin de volumen de siembra en la muestra a volumen de siembra en el control de
siembra.
Los trminos as definidos pueden calcularse empleando un ejemplo prctico. Los siguientes
resultados corresponden a una prueba de DBO con frascos de 300 mL, para una muestra con
siembra sobre las botellas de DBO:

Vol. Muestra, mL
Vol. Siembra, mL
OD inicial, mg/L
OD final, mg/L
Consumo de OD, mg/L

Frascos de
Agua de dilucin
0
0
9.2
9.2
0

Frascos de
Muestra
10
1
9.2
5.1
4.1

Frascos de
Control de siembra
0
3
9.2
7.1
2.1

1. Se calcula el consumo de oxgeno por la siembra:

(9.2 7.1) mg / L
0.7 mg / L. mL
3 mL
La correccin por siembra es entonces:
(0.7 mg/L . mL siembra) . 1 mL siembra = 0.7 mg/L
2. Por lo tanto, en la frmula para el clculo de la DBO:
P = Vol. muestra / Vol. frasco = 10 mL /300 mL = 10/300

99

f = 1 mL siembra en muestra/3 mL siembra en control de siembra = 1/3

D1 D2 = (O2 disuelto inicial O2 disuelto final) de la muestra
= 9.2 mg/L 5.1 mg/L = 4,1 mg/L
B1 B2 = Oxgeno disuelto del control de siembra (inicial final)
= 9.2 mg/L 7.1 mg/L= 2,1 mg/L
3. Finalmente, utilizando la ecuacin (1):
DBO , mg / L

4,1 2,1 x 1 / 3 mg / L 102

10 / 300

El clculo de la DBO se puede visualizar ms fcilmente con la ecuacin:

DBO , mg / L

Consumo de OD de la muestra Correccin por siembra

mL de muestra
DBO , mg / L

300 mL

4,1 0,7 mg / L x300 102

10

Bibliografa consultada

1. APHA, AWWA, WPCF: Standard Methods for the Examination of Water and
Wastewater 14th Edition. pp. 543-549. USA. 1976
2. Henry, J. y G. Heinke.: Ingeniera Ambiental. 2 Edicin. pp. 425, 474.
Pearson. Mxico. 1996.
3. Romero, J.: Acuiqumica. Cap. 3. Editorial Escuela Colombiana de
Ingeniera. Bogot. 1996.
4. Departamento de Sanidad del Estado de Nueva York: Manual de Tratamiento
de Aguas Negras pp. 182-184. Limusa. Mxico. 1989.
5. Decreto 883 Normas para la Clasificacin y el Control de la Calidad de los
Cuerpos de Agua y Vertidos o Efluentes Lquidos. Gaceta Oficial de la
Repblica de Venezuela N 5.021 (Extraordinario). 18/12/1995

PRACTICA 10. FSFORO

Introduccin

Considerando la importancia del fsforo como nutriente, es necesaria su determinacin en

estudios relacionados con la contaminacin de ros, lagos y embalses, as como en los
procesos de purificacin qumica y biolgica de las aguas residuales. A manera de ejemplo,
cuando se descarga 1 g de fsforo en un lago, pueden formarse ms de 100 g de biomasa, que
representan ms de 150 g de DBO para su oxidacin aerbica completa, adems de los
problemas de eutrofizacin y crecimiento del fitoplancton.

100

En la prctica de la Ingeniera Ambiental aparece una gran variedad de formas de fsforo. Las
ms importantes se muestran en la Tabla 1.
TABLA 1. COMPUESTOS DE FSFORO QUE SE ENCUENTRAN FRECUENTEMENTE EN LA
PRCTICA DE LA INGENIERA AMBIENTAL

Nombre
Ortofosfatos:
Fosfato trisdico
Fosfato disdico
Fosfato monosdico
Fosfato diamnico
Polifosfatos:
Hexametafosfato de sodio
Tripolifosfato de sodio
Pirofosfato tetrasdico

Frmula
Na3PO4
Na2HPO4
NaH2PO4
(NH4)2HPO4
Na3(PO3)6
Na5P3O10
Na4P2O7

Las formas frecuentes del fsforo en las aguas son: ortofosfato, tripolifosfato, pirofosfato,
metafosfato y fsforo orgnico. En algunas aguas residuales, puede aparecer fsforo elemental
o fosfito. Todas las formas de fsforo pueden existir como solucin verdadera o como material
suspendido.
En las aguas naturales, generalmente la concentracin de fsforo es baja (de 0,01 a 1 mg/L).
En las aguas residuales domsticas, usualmente est entre 1 y 15 mg/L, en aguas agrcolas
entre 0,05 y 1,0 mg/L y en aguas superficiales de lagos entre 0,01 y 0,04 mg/L. Una
composicin tpica de las formas del elemento en un agua residual domstica puede ser:
ortofosfatos, 5 mg/L; tripolifosfatos, 3 mg/L; pirofosfatos, 1 mg/L y otras formas de fsforo,
menos de 1 mg/L.
Se utilizan cantidades importantes de fosfatos en el agua para calderas, a objeto de evitar la
formacin de incrustaciones. Cuando se emplean fosfatos complejos, se hidrolizan
rpidamente a ortofosfato, debido a las altas temperaturas.
Si se desea diferenciar las formas de fsforo presentes en una muestra, puede utilizarse el
esquema que se muestra en la Fig. 1.

101

MUESTRA TOTAL SIN FILTRAR

MUESTRA
SIN DIGESTION

FILTRACION CON
MEMBRANA 0,45

DIGESTIN CIDA

ORTOFOSFATO

RESIDUO
(PARTCULAS)

DIGESTIN CIDOPERSULFATO

ORTOFOSFATO + P HIDROLIZABLE
FSFORO TOTAL RECUPERABLE

FILTRADO

SIN DIGESTION

ORTOFOSFATO
DISUELTO

DIGESTIN CIDA

ORTOFOSFATO DISUELTO
+ P HIDROLIZABLE

DIGESTIN CIDOPERSULFATO

FSFORO DISUELTO TOTAL

FIGURA 1. ESQUEMA ANALTICO PARA LA DIFERENCIACIN DE LAS FORMAS DE FSFORO.

Se puede cuantificar el ortofosfato sin interferencia a partir de los polifosfatos, debido a su

estabilidad al pH, tiempo y temperatura que se utilizan en el ensayo. Los polifosfatos y formas
orgnicas de fsforo deben convertirse a ortofosfatos para su medicin.
Los polifosfatos se utilizan en la formulacin de los detergentes y en el tratamiento de las
aguas, para prevenir la precipitacin del carbonato de calcio en soluciones sobresaturadas. En
el agua, tienden a hidrolizarse a ortofosfato, que constituye un nutriente importante de los
organismos fotosintticos. La composicin de los detergentes comerciales es variable, y
depende de la marca. Las proporciones de los constituyentes de un detergente son,
aproximadamente: tensoactivo: 15%, polifosfato + silicato: 30%, perborato sdico: 20%,
fluorescente: 0.1%, sulfato sdico: 20%, enzimas: 0,5%, agua: 15%.
Para determinar el ortofosfato, se utilizan tres mtodos colorimtricos, que se basan
esencialmente en el mismo principio, pero se diferencian en la naturaleza del agente que se
agrega para el desarrollo del color final. Se puede emplear cloruro estannoso, metavanadato de
amonio o cido ascrbico. Las normas ASTM (1) recomiendan este ltimo mtodo, y es el que
se describe aqu.

102

El procedimiento que se va a utilizar se basa en la reaccin del molibdato de amonio y el

tartrato de antimonio y potasio con ortofosfato en solucin cida, para formar un complejo de
antimonio-fosfato-molibdato:
PO43- + (NH4)2MoO4 + K(SbO)C4H4O6 Complejo antimonio-fosfato-molibdato
El complejo se reduce por el cido ascrbico, para formar un nuevo complejo azul, de
intensidad proporcional a la cantidad de ortofosfato presente en la muestra:
Complejo antimonio-fosfato-molibdato + cido ascrbico Complejo de azul de molibdeno
La concentracin mnima detectable es de 10 g/L (0.01 mg/L). El rango depende de la
longitud del camino de luz. Para tubos de 1 cm de espesor, se ha establecido un rango lineal
aproximado entre 0.15 y 1.30 mg de fsforo por litro.
Aspectos Ambientales

El Decreto 883 establece un lmite del contenido de fsforo total (expresado como fsforo) de
10 mg/L, para las descargas a cuerpos de agua (Art. 10), medio marino-costero (Art. 12) y
redes cloacales (Art. 15).
Con respecto a los detergentes, existen tres grandes organismos que han tomado iniciativas en
lo referente al medio ambiente.
1. AISE (Asociacin de Jabonera, Detergencia y Productos de Mantenimiento)
Agrupa a unos 1.200 fabricantes de detergentes convencionales, que cubren un 90%
del mercado. En 1997 dise el programa Wash Right ("Lavar bien"), para reducir el
impacto ambiental de los detergentes. Las empresas adheridas pueden poner el
logotipo Wash Right en los paquetes de detergente. Los objetivos del programa son
que el consumo de detergentes, el peso de los envases y el uso de ingredientes poco
biodegradables sean, a finales del 2002, un 10% inferiores a los de 1996, y que el
consumo de energa en cada lavado sea un 5% menor que en aquel ao. Como algunos
de los objetivos no dependen de los fabricantes, el programa incluye una serie de
acciones para educar a los ciudadanos. Entre sus consejos estn: "usted puede reciclar
los envases si su ciudad dispone de la infraestructura necesaria", aunque el programa
no tiene prevista ninguna accin para reciclar los envases.
En el ao 2000, se realiz una auditora del programa, y se observ una evolucin
positiva (excepto en el caso del consumo de energa por lavado, que no se evalu).
Algunos de los resultados del estudio son sorprendentes: el peso de los envases se
haba reducido en un 20% en Grecia, y se haba incrementado en un 22.6% en
Finlandia.

103

Distintivo del programa

Wash Right

2. ComisinEuropea
En 1998 adopt el programa Wash Right como recomendacin para todos los
fabricantes. En 1999 redact el pliego de condiciones que deben cumplir los
detergentes para poder otorgarles el Ecolabel, la etiqueta ecolgica europea.
Del pliego de condiciones, pueden destacarse:

No excluye el uso de fosfatos, ni de ingredientes sintticos no biodegradables, ni de

componentes clasificados por la legislacin europea como muy txicos para los
organismos acuticos o que pueden producir efectos nefastos a largo plazo para el
medio ambiente acutico. Pero no pueden estar en ms de una cierta cantidad, por lo
que se considera que los detergentes que reciban el Ecolabel tienen un impacto
ambiental reducido.

Permite el uso de enzimas obtenidas de cultivos de bacterias transgnicas.

Los detergentes deben ser concentrados.

El distintivo Ecolabel

3. EDMA
(Asociacin
de
Fabricantes
de
Detergentes
Ecolgicos)
Segn dicen ellos mismos, agrupa a los fabricantes de detergentes "realmente verdes"
(actualmente son cinco, y dos ms estn en trmite de incorporarse). A pesar de haber
participado en el proceso de definicin de condiciones para el Ecolabel, cree que stas
son demasiado blandas, y que la concesin de la etiqueta a detergentes poco
respetuosos con el medio ambiente confunde al consumidor. Esta asociacin propone
un sistema de etiquetado por estrellas (similar al que se usa para los hoteles), para que
se puedan distinguir los detergentes "un poco ecolgicos" de los "ms ecolgicos".

104

La EDMA no tiene un sello propio, pero pide a los fabricantes que la integran que
especifiquen en los envases todos los ingredientes que contienen los detergentes (la legislacin
slo obliga a especificar algunos).

Resumen

El molibdato de amonio y el tartrato de antimonio y potasio reaccionan con el ortofosfato para

formar un complejo antimonio-fosfato-molibdato, que se reduce con cido ascrbico para
formar otro complejo fuertemente coloreado de azul de molibdeno cuya intensidad es
proporcional a la concentracin de fsforo.
Este mtodo es especfico para el ortofosfato, pero las otras formas de fsforo pueden
convertirse a ortofosfato por tratamientos preliminares de la muestra.
Significado y uso

El fsforo se encuentra ampliamente distribuido en la naturaleza, tanto en su forma inorgnica

como orgnica. Las fuentes incluyen los fertilizantes, productos de limpieza de las
lavanderas, acondicionadores de agua para calderas y coadyuvantes en el tratamiento de agua
potable. Como este elemento es un nutriente para los organismos fotosintticos, puede ser
importante monitorear y controlar las cantidades que se vierten al medio ambiente.
Precauciones de seguridad

Esta prctica puede involucrar el empleo de materiales, operaciones y equipos peligrosos. No

se asume que se describan aqu todos los problemas de seguridad relacionados con su uso.
Queda bajo la responsabilidad del usuario establecer las prcticas apropiadas y la aplicacin
de medidas especficas para desarrollar actividades seguras. Considerar, sin embargo, los
siguientes aspectos:
1. Puede ocurrir contaminacin por inhalacin con la manipulacin del persulfato de
amonio, produciendo rinitis. Utilizar mascarilla de respiracin y ventilacin adecuada.
2. Los compuestos de antimonio pueden producir irritacin local o lesiones hepticas,
conjuntivitis, quemaduras y dermatitis. Emplear gafas protectoras y guantes, delantales
y botas de goma. Si ha cado accidentalmente en los ojos, lavarse abundantemente con
agua. Igual tratamiento debe seguirse para las partes contaminadas del cuerpo,
empleando agua y jabn. Si se ha ingerido, realizar lavado gstrico. Seguir el
tratamiento usual para las quemaduras.
3. El hidrxido sdico es una sustancia extremadamente peligrosa y muy corrosiva. La
contaminacin local produce conjuntivitis y quemaduras de la crnea y de la piel. Su
inhalacin causa irritacin del tracto respiratorio, y la ingestin provoca quemaduras
de boca y esfago, nuseas y vmitos. Para su manipulacin, emplear ventilacin
adecuada, gafas protectoras o pantalla para la cara, mascarilla, guantes, delantales y
botas de goma. Acentuar la limpieza personal. Si ha habido contacto con la sustancia,
deben lavarse rpidamente los ojos con abundante agua, y con agua y jabn las partes
contaminadas del cuerpo. Debe realizarse lavado gstrico si se ha ingerido. Tanto el
dao de la crnea como el del estmago y esfago pueden ser permanentes.
4. Debe tenerse cuidado extremo al manipular soluciones concentradas de cido
sulfrico. Para la manipulacin del cido, emplear ventilacin adecuada, gafas
protectoras, mascarilla, guantes de goma y trajes protectores. Si ha habido contacto

105

con la solucin, el tratamiento consiste en lavar los ojos con agua, con agua y jabn las
partes contaminadas del cuerpo y lavado gstrico si se ha ingerido.
Interferencias

Concentraciones tan altas como 50 mg/L de hierro frrico, 10 mg/L de cobre y 10 mg/L de
silicio no interfieren. Niveles ms elevados de silicio producen interferencia positiva de la
siguiente magnitud: para 20 mg SiO2/L, los resultados son ms altos en 0,005 mg/L de
fsforo; 0,015 mg/L de fsforo para 50 mg/L de SiO 2 y 0,025 mg/L de fsforo para 100 mg/L.
Concentraciones salinas tan altas como 20% producen un error menor al 1%.
El arsnico se determina siguiendo un procedimiento similar al del fsforo, por lo que debe
considerarse su presencia cuando sus niveles son superiores a los del fsforo. La interferencia
por nitritos y sulfuros pueden eliminarse aadiendo a la muestra un exceso de agua de bromo
o una solucin saturada de permanganato de potasio.
Aparato

Fotmetro: Un espectrofotmetro capaz de medir a 880 nm. El color puede medirse tambin a
625 - 650 nm, pero con una prdida de sensibilidad de aproximadamente un 33%.
Reactivos y materiales

A. REACTIVOS:
1. Persulfato de amonio. Cristales de persulfato de amonio, (NH4)2S2O8.
2. Mezcla de solucin: Disolver 0.13 g de tartrato de antimonio y potasio,
K(SbO)C4H4O6.H2O en un matraz volumtrico de 1 L que contiene
aproximadamente 700 mL de agua destilada. Aadir 5,6 g de molibdato de amonio,
(NH4)6Mo7O24.4H2O y agitar el frasco para la disolucin de las sales. Aadir con
cuidado 70 mL de cido sulfrico concentrado (g. e. 1.84), mientras se agita el
contenido del frasco. Enfriar la solucin y enrasar con agua destilada. Esta solucin es
estable por 1 ao si se almacena en botella de polietileno y se mantiene alejada del
calor.
3. Reactivo combinado: Disolver 0,50 g de cido ascrbico, C 6H8O6, en 100 mL de
mezcla de solucin. Este reactivo es estable por 1 semana si se almacena a 4 C. Si es
necesario, preparar la solucin cada da.
4. Indicador de fenolftalena (5 g/L): Disolver 0,5 g de fenolftalena en una mezcla de 50
mL de alcohol etlico (o isoproplico) y 50 mL de agua.
5. Solucin estndar de fsforo (1.00 mL = 0,0025 mg P): Se prepara primero una
solucin madre (1.0 mL = 0.05 mg de fsforo), disolviendo 0,2197 g fosfato dicido de
potasio, KH2PO4, (que ha sido secado 1 h en un horno a 105 C), en agua destilada y
diluyendo a 1 L. La solucin estndar se prepara diluyendo 50,0 mL de la solucin
madre a 1 L con agua destilada. Cada mL de esta ltima solucin contiene 0.0025 mg
de fsforo.
6. Solucin de hidrxido de sodio (40 g/L): Disolver 20 g de hidrxido de sodio, NaOH,
en aproximadamente 400 mL de agua destilada. Enfriar la solucin a temperatura
ambiente y diluir a 500 mL.
7. cido sulfrico (31+69): Aadir lentamente 310 mL de H 2SO4 concentrado (g. e. 1.84)
a aproximadamente 600 mL de agua destilada. Enfriar la solucin y diluir a 1 L.

106

B. MATERIALES:
Pipetas volumtricas de 1, 2, 5 y 10 mL
Matraces aforados de 50 mL
Matraces erlenmeyers
Esferas de ebullicin
Celdas para el espectrofotmetro.
Muestra y mtodos de muestreo

Si se va a determinar solamente el fsforo disuelto, filtrar la muestra a travs de un filtro de

membrana de 0,45 m, tan pronto como sea posible. Un retraso en la filtracin puede producir
una alteracin en la relacin entre el fsforo disuelto y el que est bajo la forma de partculas.
Lavar previamente el filtro de membrana, ya que puede contener cantidades apreciables de
fsforo. Se puede sumergir en 1 L de agua por 1 da, o en tres cambios de agua por 1 h cada
uno.
El anlisis se realiza mejor inmediatamente luego de la recoleccin de la muestra, lo que
minimiza posibles cambios. Si la prueba no se puede efectuar el mismo da en que se recolecta
la muestra, preservarla agregando 40 mg de cloruro mercrico por L de muestra y refrigerando
a 4 C. Para prevenir la precipitacin del mercurio, puede aadirse antes a la muestra
suficiente cloruro de sodio (si es necesario) para tener un contenido de cloruro de al menos 50
mg/L. Nunca se deben preservar las muestras utilizando cidos o cloroformo. No se requiere
preservar la muestra si slo se va a medir fsforo total recuperable. Se sugiere el
almacenamiento de las muestras en recipientes de vidrio.
Usualmente, en aguas superficiales, la concentracin de fsforo como partculas es varias
veces superior a la de fsforo disuelto. Cuando se recogen muestras en ros y lagos, los niveles
de fsforo recuperable pueden variar con la profundidad, flujo y distancia de la orilla. Una
muestra simple puede tomarse en el medio de la corriente y a profundidad media. En el caso
de muestras compuestas, si se dispone del equipo apropiado, pueden tomarse del tope al fondo
en el medio de la corriente.
Las muestras que contienen cantidades bajas de fsforo no deben almacenarse en recipientes
plsticos, porque el fosfato tiende a adsorberse en las paredes de las botellas. Todo el material
de vidrio debe enjuagarse primero con HCl diluido caliente, y luego varias veces con agua
destilada. No utilizar nunca detergentes comerciales que contengan fosfatos para limpiar el
material de vidrio que se utiliza en la determinacin de fsforo.
Procedimiento

1. Ortofosfato:
1.
Pipetear un volumen de muestra no mayor de 50 mL (suponiendo que contiene
menos de 0,25 mg de fsforo como ortofosfato) en un erlenmeyer de 125 mL. Si es
necesario, diluir la muestra a 50 mL.
Nota 1: Con frecuencia, si la muestra contiene hierro frrico o aluminio, algunos de los compuestos de fsforo se
pierden, ya que se adhieren a las pelculas de los hidrxidos de estos elementos en las paredes del recipiente, sobre
todo cuando el anlisis no se realiza con prontitud luego de la recoleccin de la muestra. Si se sospecha tal

107

situacin, aadir suficiente solucin de H 2SO4 (31+69) a la muestra para reducir el pH aproximadamente a 2
justamente antes del anlisis. Se consigue as la disolucin de la pelcula de hidrxidos y se evita la eventual
prdida de fsforo. Agitar bien la muestra y neutralizar la porcin acidificada agregando solucin de NaOH (40 g/L)
en presencia de fenolftalena. El color rosado del indicador puede eliminarse aadiendo H 2SO4 (31+69) gota a gota.
En los clculos, es necesario corregir la dilucin de la muestra si se emplean volmenes importantes de H 2SO4 y
NaOH.

b) Aadir una gota de la solucin del indicador de fenolftalena. Si se desarrolla un color

rojo, agregar H2SO4 (31+69) hasta justo la desaparicin del color.
c) Aadir 10 mL del reactivo combinado a la muestra y mezclar agitando el erlenmeyer.
Nota 2: El color puede desarrollarse lenta e incompletamente si la temperatura de la muestra es menor de 20 C.
Una temperatura tan elevada como de 50 C no afecta los resultados.

d) Despus de los 10 min, pero antes de los 30 min, leer la absorbancia del color azul a
880 nm, utilizando un blanco como referencia, que tiene 50 mL de agua y un
tratamiento similar al de la muestra.
Determinar los mg/L de fsforo, utilizando la curva de calibracin.
f) Realizar un procedimiento similar para la muestra de detergente comercial
disuelto en agua, utilizando un volumen apropiado de solucin. Preguntar al
tcnico el peso de muestra de detergente empleado.
2. Fsforo hidrolizable (Polifosfato+ ortofosfato):
a)
Pipetear un volumen de muestra estimado que contenga no ms de 25 g de fsforo
hidrolizable + ortofosfato en un erlenmeyer de 125 mL (ver Nota 1).
b)
Aadir 1 mL de solucin de H2SO4 (31+69) y unas pocas esferas de ebullicin y llevar
a ebullicin en una plancha caliente por 30 min. Si es necesario, agregar agua a la muestra
durante la ebullicin, para mantener un volumen entre 10 y 50 mL. Permitir que el volumen se
reduzca a 10 mL al final de la ebullicin, pero no dejar que se seque totalmente. Enfriar.
c)
Agregar una gota de la solucin del indicador de fenolftalena a la muestra y ajustar su
color a un rosado tenue aadiendo solucin de NaOH. Normalmente, se necesitan unos 11
mL. Adicionar una gota de H2SO4 (31+69) para la desaparicin del color.
d)
Enfriar la muestra a unos 30 C y transferirla cuantitativamente a un matraz
volumtrico de 50 mL. Seguir el procedimiento 1 desde la etapa c).
3. Fsforo total:
a) Analizar de acuerdo al procedimiento indicado para fsforo hidrolizable + ortofosfato,
pero aadiendo 0,4 g de persulfato de amonio en el paso a).
Curva de calibracin

a) Pipetear 0, 2, 5, 7 y 10 mL de solucin estndar de fsforo en una serie de erlenmeyers

de 125 mL y diluir cada uno con agua destilada a 50 mL, para preparar patrones que
contienen 0, 0.10; 0.25; 0.35 y 0.50 mg/L de fsforo.
b) Agregar 10 mL del reactivo combinado a cada patrn y agitar.

c) Despus de 10 min, pero antes de 30 min, medir la absorbancia en un fotmetro a 880

nm, utilizando el blanco como referencia para la calibracin inicial del instrumento y
para el cero del equipo.

108

d) Graficar los mg/L (ppm) de fsforo en la abcisa y la absorbancia en la ordenada de

papel milimetrado. Debera obtenerse una lnea recta que pasa a travs del origen. Para
asegurar la reproducibilidad de los resultados, debe chequearse peridicamente la
curva de calibracin.
Manejo de los Datos y Clculos

1. Construir la curva de calibracin (mg/L de fsforo en el eje X y absorbancia en el eje

Y). A partir de los datos para los patrones, determinar la ecuacin de la lnea.
2. Calcular la concentracin de las diferentes formas de fsforo en mg/L (ppm) aplicando
la siguiente ecuacin al ortofosfato determinado segn 1, 2 y 3:
Ortofosfato, mg / L de fsforo

A x 50
B

Donde:
A = mg/L de fsforo, de la curva de calibracin
B = Volumen de muestra analizada, mL.
Fsforo hidrolizable = (Fsforo hidrolizable + fsforo ortofosfato) (Fsforo
ortofosfato) = 2 1
Fsforo orgnico = Fsforo total - (Fsforo hidrolizable + fsforo ortofosfato) = 3 2
Fsforo como partculas = Fsforo total Fsforo disuelto
3. En el caso del detergente, una vez obtenida la concentracin de fsforo en la muestra,
el contenido del elemento en el detergente se calcula as:

Masa de fsforo, mg = ppm fsforo * 0.05 L* (Vol. matraz, mL/Vol. alcuota, mL)

% peso de fsforo

Masa de fsforo, mg
x 100
Masa de muestra, mg

Bibliografa consultada

1. APHA, AWWA, WPCF: Standard Methods for the Examination of Water and
Wastewater 14th Edition. pp. 466-483. USA. 1976
2. Sawyer, C., P. McCarty y G. Parkin: Qumica para Ingeniera Ambiental. 4 Edicin.
Cap. 29. Mc Graw Hill. Bogot. 2000.
3. Romero, J.: Acuiqumica. Cap. 3. Escuela Colombiana de Ingeniera. Bogot. 1996.
4. Annual Book of ASTM Standards: D 515-88: Standard Test Methods for Phosphorus
in Water ASTM. 1995.
5. Plunkett, E.: Manual de Toxicologa Industrial. pp. 22, 45, 190, 331. Urmo. Bilbao.
1974.
6. Decreto 883 Normas para la Clasificacin y el Control de la Calidad de los Cuerpos
de Agua y Vertidos o Efluentes Lquidos. Gaceta Oficial de la Repblica de
Venezuela N 5.021 (Extraordinario). 18/12/1995

109

110

PRCTICA 11. DIOXIDO DE AZUFRE

Introduccin

Una de las definiciones de aire contaminado considera aquel en el cual estn presentes ciertas
sustancias en concentraciones tales que pueden producir efectos desfavorables sobre las
personas y el ambiente. Tales compuestos incluyen gases, como los xidos de azufre y
nitrgeno, monxido de carbono, ozono, hidrocarburos y partculas como el polvo, aerosoles
smog, materiales radiactivos y muchos otros.
El dixido de azufre, SO2, es uno de los contaminantes ms frecuentes en las atmsferas
industriales, uno de los protagonistas de la lluvia cida, y se caracteriza por su olor a cerilla
quemada en concentraciones inferiores a 0,1 ppm, aunque no es inflamable. Por arriba de 0,3
ppm, se detecta por el sabor. A niveles superiores a 1 ppm, produce una sensacin de acre
ataque a la nariz. Este gas se encuentra normalmente en la atmsfera en concentraciones que
varan entre 0.02 y 0.1 ppm.
La medicin del SO2 puede realizarse utilizando mtodos manuales o automticos. Los
mtodos manuales aprobados por el MARN incluyen la colorimetra (pararosanilina) y la
conductimetra. Los procedimientos automticos autorizados son la fotometra de llama,
fluorescencia y conductimetra.
De los mtodos manuales, el ms comn es el procedimiento colorimtrico de West y Gaeke
(que se describe en esta prctica), que la mayora de los qumicos ambientales consideran
como tcnica patrn o de referencia. Este procedimiento est diseado para utilizarse en el
campo o en el laboratorio, ya que es selectivo y muy sensible para el SO 2 y puede utilizarse
para mediciones del gas en perodos de muestreo entre 30 minutos y 24 horas.
Aspectos Legales

La normativa ambiental de nuestro pas ha establecido en el Art. 3 del Decreto 638, los
siguientes lmites de calidad del aire para el dixido de azufre:

Contaminante

Lmite
g/m3

1. Dixido
de azufre

80
200
250
365

Porcentaje
excedencia
en lapso de
muestreo
50%
5%
2%
0.5%

Perodo de
medicin
(horas)
24
24
24
24

Las concentraciones de los contaminantes se calcularn para

condiciones de 1 atmsfera y 298 K

Resumen

111

Se hace pasar la muestra de aire ambiental a travs de una solucin de tetracloromercurato

sdico (o potsico) 0.1M (preparada a partir de cloruro mercrico y cloruro de sodio o
potasio). El SO2 se absorbe en este reactivo y forma un complejo de
diclorosulfitomercurato(II), (HgCl2SO3)2- que acta como SO32- fijado en solucin. Este in
reacciona con formaldehido, pararosanilina y cido sulfmico en solucin cida para producir
el cido pararosanilinametilsulfmico de color prpura. La intensidad de color de este cido a
548 nm y pH 1,6 0,1 es proporcional a la concentracin de SO 2 absorbido en el rango de
0.002 5 ppm. El lmite de deteccin es de 25 g/m3, pero puede reducirse a 5 g/m3
utilizando alcuotas ms grandes.
Significado y uso

El SO2 y el SO3 junto con sus cidos correspondientes y sus sales son contaminantes
frecuentes de las atmsferas urbanas e industriales. Tales sustancias se producen sobre todo en
los procesos de combustin de materiales fsiles (carbn, petrleo, gas) con elevados
contenidos de azufre. La conversin del SO2 a SO3 ocurre tanto mediante procesos catalticos
(por xidos de nitrgeno y ciertos compuestos de hierro y manganeso), como no catalticos
(donde interviene el ozono y la luz solar). En lo relativo a la contaminacin del aire, es
importante la capacidad del gas de reaccionar con otros contaminantes para producir SO 3,
H2SO4 (uno de los responsables de la lluvia cida)y diversas sales de este cido.
Precauciones de seguridad

Esta prctica puede involucrar el empleo de materiales, operaciones y equipos peligrosos. No

se asume que se describan aqu todos los problemas de seguridad relacionados con su uso.
Queda bajo la responsabilidad del usuario establecer las prcticas apropiadas y la aplicacin
de medidas especficas para desarrollar actividades seguras. Considerar, sin embargo, los
siguientes aspectos:
1. El cloruro mercrico es venenoso. Puede ocurrir contaminacin por inhalacin,
contaminacin drmica o ingestin, produciendo quemaduras de boca y garganta,
nuseas, vmitos, dolor abdominal y diarrea si se ingiere. Al inhalarse causa exceso de
salivacin, sabor metlico, tos y disnea. Utilizar mascarilla de respiracin, trajes
protectores, guantes de plstico y ventilacin adecuada. Si se ha ingerido, realizar
lavado gstrico. Si cae sobre la piel, lavar rpidamente con agua.
2. El formaldehido es txico. La absorcin puede ocurrir por inhalacin o ingestin. Los
sntomas locales incluyen conjuntivitis y quemaduras de la crnea. Por inhalacin
puede producir rinitis, faringitis, tos y edema pulmonar, dolor de cabeza y debilidad.
La ingestin causa quemaduras de la boca y esfago, dolor abdominal y diarrea. Para
la manipulacin de la sustancia, emplear gafas protectoras y guantes, delantales, botas
de goma y ventilacin adecuada. Si ha cado accidentalmente en los ojos, lavarse
abundantemente con agua. Utilizar igual tratamiento para las partes contaminadas del
cuerpo, empleando agua y jabn. Si se ha ingerido, realizar lavado gstrico.

Interferencias

El hierro y otros metales producen interferencia negativa, ya que sus sales pueden ser
oxidadas por el SO2 antes de la formacin del complejo coloreado. Frecuentemente, se agrega
EDTA para eliminar tales interferencias. El NO2 (que tambin interfiere) puede eliminarse

112

agregando una pequea cantidad de cido sulfmico para destruir el in nitrito, antes del
desarrollo del color.
Aparatos

Para la recoleccin de muestras de 30 min a 1 h se utiliza un burbujeador de vidrio.

Para muestras de 24 h, se ensambla un equipo que consta de:
o Tubo de absorcin de polipropileno de 164 mm de longitud por 32 mm de dimetro
interno, con tapn del mismo material.
o Dispensador de vidrio, de aproximadamente 8 mm de dimetro interno, 152 mm de
longitud y contraccin de 0,3 mm en la parte inferior, cuyo extremo debe estar entre 3 y
5 mm del fondo del tubo de absorcin.
o Bomba capaz de mantener una presin diferencial de aire de no menos de 0,7 cm a
travs del controlador de flujo.
o Dispositivo de control de flujo, capaz de mantener el flujo a travs de la solucin. Se
pueden utilizar orificios crticos, tales como agujas hipodrmicas calibradas.
Algunas capacidades son:
Muestreo
30 min
1h
24 h

Calibre
22
23
27

Dimetro, cm
0.394
0.318
0.1

Longitud, cm
2.5
1.5
0.9

Flujo, L/min
1
0.5
0.2

o Filtro de membrana porosa de 0.8 a 2 m o de fibra de vidrio, para la remocin de

partculas de la corriente de aire, a objeto de proteger el dispositivo de control de flujo.
Puede utilizarse un burbujeador dentro del cual se ha colocado lana de vidrio.
o Equipo de calibracin de flujo, del tipo medidor de burbuja o de gas hmedo o seco, que
permita medir un flujo de aire entre 0.2 y 1 L/min, y un cronmetro.
o Espectrofotmetro, para medir absorbancia a 548 nm, con ancho efectivo de banda
espectral menor a 15 nm.
o Termmetro.
o Las lneas de conexin deben ser de vidrio o tefln.
Reactivos y materiales

A. REACTIVOS:
1. Reactivo absorbente (tetracloromercurato potsico 0.04 M): Disolver 10.86 g de cloruro
mercrico, HgCl2, junto con 5.96 g de cloruro de potasio (o 4.68 g de cloruro de sodio)
y 0.066 g de la sal sdica del EDTA en agua destilada y enrasar a 1 L. Medir el pH de la
solucin, que debe ser aproximadamente de 4, pudiendo utilizarse si se mantiene entre 3
y 5. Desecharla si el valor est fuera de este rango. Este reactivo es estable hasta por 6
meses, pero se descarta si se observa la formacin de un precipitado. (Ver en Anexo 1 la
forma de desechar esta solucin).
2. Solucin de cido fosfrico, H3PO4, 3M.
3. Alcohol 1-butanol.

113

4. Solucin de cido clorhdrico, HCl, 1N

5. Solucin stock de pararosanilina: Colocar 100 mL de 1-butanol y 100 mL de HCl 1N en
un embudo de separacin de 250 mL y permitir el equilibrio. Separar el cido
equilibrado (parte inferior del embudo) y el 1-butanol equilibrado (parte superior). Pesar
0.1000 g de clorhidrato de pararosanilina en un vaso pequeo. Agregar 50 mL del cido
equilibrado y disolver. En un embudo de separacin de 125 mL, verter 50 mL de 1butanol equilibrado. Transferir la solucin de pararosanilina y extraer. Transferir la fase
inferior (acuosa) a otro embudo de separacin, y agregar 20 mL de 1-butanol. Extraer de
nuevo. Repetir el proceso de extraccin. Finalmente, filtrar la solucin cida a travs de
un algodn en un frasco volumtrico de 50 mL. Enrasar con solucin de HCl 1N. Este
reactivo debe tener un color rojo amarillento.
6. Reactivo de pararosanilina: Utilizando un matraz aforado de 250 mL, colocar 20 mL de
la solucin stock y agregar 25 mL de solucin de cido fosfrico 3M. Enrasar con agua
destilada. Si se guarda en recipiente de vidrio, este reactivo es estable hasta por 9 meses.
7. Formaldehido al 0,2%. Diluir 5,0 mL de formaldehido al 36-40% en 1 L de agua
destilada. Guardar en recipiente bien tapado mientras no se utiliza. La solucin es
estable por 1 a 2 das.
8. Solucin de yodo 0,01N: Colocar 1.27 g de yodo (calidad reactivo) en un vaso de
precipitado de 50 mL. Agregar 0,4 g de yoduro de potasio y 25 mL de agua destilada.
Agitar para asegurar la disolucin del yodo, y cuando todo se ha disuelto, trasvasar a un
matraz aforado de 100 mL y enrasar. Guardar la solucin en un frasco con tapa de vidrio.
Proteger de la luz tanto como sea posible.
9. Solucin de tiosulfato de sodio 0,01 N: Pipetear 100 mL de solucin de tiosulfato de
sodio 0,1 N (ver Anexo 2 para su preparacin y estandarizacin) en un frasco
volumtrico de 1000 mL y diluir a volumen con agua destilada hervida y enfriada.
10. Solucin patrn de sulfito: Disolver 0.4000 g de sulfito de sodio o 0,3000 g de
metabisulfito de sodio en 0,5 L de agua destilada recientemente hervida y enfriada o
bidestilada. Esta solucin, que contiene aproximadamente 406 g de SO 2/mL, se debe
calibrar aadiendo un exceso de yodo, y valorar por retroceso el exceso de yodo con
solucin de tiosulfato de sodio 0,1 N calibrada con yodato de potasio hasta el punto final
con almidn, de acuerdo al procedimiento que aparece en el Anexo 3.
11. Solucin diluida de sulfito: Una vez que se ha valorado la solucin de sulfito, pipetear
2,0 mL de solucin normalizada en un matraz aforado de 100 mL y llevar hasta el aforo
con solucin de tetracloromercurato potsico 0.04 M. Esta solucin es estable por 30
das, si se mantiene refrigerada a 5 C, en caso contrario, debe prepararse diariamente.
12. Solucin acuosa de cido sulfmico: Pesar 0,6 g del cido sulfmico, HSO 3NH2, disolver
en agua destilada y diluir a 100 mL con agua. Preparar diariamente.
13. Solucin indicadora de almidn: Triturar 0.4 g de almidn soluble y 0.002 g de yoduro
mercrico, HgI2, (que acta como preservativo) en un poco de agua destilada, y aadir
lentamente la pasta a 200 mL de agua destilada. Agitar hasta disolucin completa y
enrasar a 1 L en frasco volumtrico. Mantener la solucin en frasco mbar de vidrio,
tapado y en lugar fro.
B. MATERIALES:
Matraces aforados de 25, 50, 250, 500 y 1000 mL

114

Vasos de precipitado de 100 mL

Pipetas volumtricas de 5, 10, 25 y 50 mL
Embudos de separacin de 125 y 250 mL
Borboteadores o burbujeadores
Tubo secador de gel de slice
Bomba
Rotmetro
Procedimiento
Antes del muestreo

Limpiar los absorbedores como sigue: Lavar primero con agua caliente y luego con una
solucin cida (1 parte de HNO3 conc, 2 de HCl conc y 4 de agua destilada). Enjuagar con
agua destilada y secar con aire a presin. Marcar los absorbedores y los orificios,
identificndolos con el nmero de la estacin donde se va a utilizar. Calibrar cada orificio
crtico antes de su uso.
Muestreo

Montar el tren de muestreo, (ver Fig. 1) en el siguiente orden:

o Sonda
o Burbujeador con lana de vidrio
o Burbujeador o borboteador con 10 mL de solucin absorbente de
tetracloromercurato (envuelto con papel aluminio para evitar la degradacin
oxidativa del reactivo por el contacto con la luz solar). Utilizar guantes
desechables al manipular el reactivo.
o Tubo secador de gel de slice
o Bomba
o Rotmetro

Burbujeador
Lana de vidrio

Burbujeador
Sol. Absorb.

Tubo de slice

Bomba

Rotmetro

FIGURA 1. ESQUEMA DEL TREN DE MUESTREO.

Todas las conexiones deben ser de vidrio o tefln. Una vez instalado el tren de muestreo,
encender la bomba y el cronmetro y ajustar el flujo de muestra, de modo que el aire fluya a
un caudal entre 0.5 y 2.5 L/min. El tiempo de muestreo depende de la concentracin esperada
de SO2. Registrar la temperatura y la presin atmosfrica.

Despus de recogida la muestra, conviene refrigerarla si se va a tardar ms de 1 da en realizar

el anlisis. Centrifugar, si se observa cualquier precipitado al reposar.
Despus del muestreo

115

Las muestras recolectadas deben mantenerse a 5 C hasta el anlisis. Para muestras de 24 h,

descartar las que hayan operado ms de 25 o menos de 23 h. Verificar la tasa de flujo, y
descartar la muestra si hay una desviacin mayor al 10% (mantener un registro del flujo).
Notificar cualquier invalidacin de las muestras.
Anlisis de la muestra

Emplear guantes desechables. Si la muestra ha sido refrigerada, se debe permitir que alcance
la temperatura del laboratorio. Arrastrar el contenido del borboteador con no ms de 5 mL de
agua destilada hasta un matraz de 25 mL. Aadir 1 mL de cido sulfmico al 0,6% y dejar en
reposo durante al menos 10 min. Aadir exactamente 2,0 mL de solucin de formaldehido al
0.2 % y despus 5,0 mL de pararosanilina. Diluir hasta el aforo con agua. Si se van a analizar
varias muestras a la vez, hacer esta dilucin final a intervalos de 1 a 2 min entre la primera y
la ltima muestra. Si la temperatura del laboratorio es suficientemente estable durante el
anlisis, no se requiere bao de Mara. En caso contrario, colocar todos los frascos en un bao
de Mara a 20 2 C. Despus de 30 min, medir la absorbancia de las muestras y de un blanco
siguiendo el orden en que se hayan diluido, a 548 nm. Colocar las soluciones a desechar en un
frasco para su disposicin de acuerdo al procedimiento del Anexo 1.(No echarlas en el
desage).
Cuando la absorbancia es mayor que 1,0 diluir la muestra con un volumen igual de blanco y
leer despus de 3 a 5 min. Las soluciones con demasiado color se pueden llegar a diluir 1:6 si
es necesario.
Curva de calibracin

Utilizar guantes desechables. Pipetear 0, 1, 2, 3 y 4 mL de solucin diluida de sulfito en una

serie de matraces de 25 mL. Diluir hasta 10 mL con solucin de tetracloromercurato potsico
0,04 M. Aadir 1,0 mL de cido sulfmico al 0,6 % y dejar reaccionar durante 10 min al
menos. Agregar 2 mL de formaldehido al 0,2 % y 5,0 mL de pararosanilina. Diluir todos los
patrones hasta el enrase con agua destilada. Colocar los frascos en bao de Mara a 20 2 C
por no menos de 30 ni ms de 60 minutos. Si la temperatura del laboratorio es estable
mientras se hace el anlisis, no se requiere bao de Mara. Leer la absorbancia de todos los
patrones a 548 nm, utilizando cubetas de 1 cm.
Nota: no desechar las soluciones en el desage, ya que contienen mercurio. Reunirlas en un solo vaso y
entregarlas al tcnico o al profesor, para su disposicin segn lo indicado en el Anexo 1.
Manejo de los Datos y Clculos

1)

Calcular la concentracin verdadera de la solucin de sulfito, Csulfito,

(expresada como SO2), a partir de los datos de su valoracin, de acuerdo al
procedimiento y la frmula que aparecen en el Anexo 3 (ver ms adelante):

SO2 , g / mL B A x N x 32
25

x 10 3

donde:
B = volumen de solucin de tiosulfato ~ 0.01N para el blanco, mL
A = volumen de solucin de tiosulfato ~ 0.01N para la muestra, mL

116

N = normalidad verdadera de la solucin de tiosulfato, meq/mL (Anexo 2)

32 = peso miliequivalente del SO2, mg/meq
25 = volumen de la solucin de sulfito, mL
103 = factor de conversin de mg a g
2)

La concentracin de la solucin diluida de sulfito, C diluda, (Reactivo

N 11) es, en consecuencia:
2 mL x C sulfito
C diluida , g / mL
100 mL
3)
Las masas de sulfito (expresadas como SO2) requeridas para la
preparacin de los patrones son:
Masa sulfito = Cdiluida, g/mL x volumen, mL
4)

Construir la curva de calibracin, para lo cual se debe graficar la

absorbancia de cada patrn frente a los correspondientes microgramos de SO2 (no
olvidar incluir el valor 0,0).

5)

Apoyado en la curva de calibracin, determinar la cantidad de SO 2

en g en la(s) muestra(s).

6)

El volumen de aire muestreado, L, es igual al flujo volumtrico

multiplicado por el tiempo de muestreo.
V aire = V1 = Flujo (L/min) * Tiempo
(minutos)

7)

Este volumen se corrige a las condiciones del Decreto 638 (1 atm,

298K), utilizando la ley del gas ideal:
P T
V , m 3 V1 x 1 x 2 x 10 3
P2 T1
donde:
P1: Presin medida en el sitio donde se realiza el muestreo
P2: 1 atm (o su equivalente en otras unidades)
T1: Temperatura medida en el sitio donde se realiza el muestreo, K
T2: 298 K

8)

La concentracin ambiental de SO2 viene dada por:

SO2 , g / m 3

g SO2 en la muestra
V

El numerador de esta expresin se obtuvo en el paso 5, y su denominador en el paso 7.

Para la conversin de unidades, suponiendo comportamiento ideal y tomando P como 1 atm, T
como 298 K y R = 0.08206 (atm L/mol K), puede utilizarse la expresin:

117

g / m 3

ppm x peso molecular

(10 3 )
24.5

Anexos

ANEXO 1. Remocin del mercurio de la solucin absorbente:

Agregar, por cada litro de solucin absorbente, alrededor de 10 g de Na 2CO3 y 10 g de Zn
granular (que puede sustituirse por magnesio). Agitar la solucin por 24 h bajo campana.
Despus de ese tiempo, se forma un material slido en el fondo que queda como una capa, a
pesar de la agitacin. Decantar el lquido, hasta que el precipitado empiece a fluir. Agitar el
precipitado en un tubo y dejarlo secar. Utilizando un cepillo para tubos de ensayo, quitar el
material adherido a las paredes del recipiente. El recipiente se puede lavar con agua, filtrando
luego esta agua de lavado para recuperar el precipitado. Despus del enjuague, se une el
precipitado del tubo al del filtro. Colocar el material en un recipiente apropiado y dejarlo
secar. Este procedimiento remueve ms del 99% del Hg de la solucin absorbente.
ANEXO 2. Preparacin y valoracin de la solucin madre de tiosulfato de sodio 0.1N:
El in yodato reacciona rpidamente con yoduro en solucin cida para dar yodo:
IO3- + 5I- + 6H+ = 3I2 + 3H2O
El yodo formado reacciona con tiosulfato:
I2 + 2S2O32- = S4O62- + 2ISe observa que cada mol de yodato produce 3 moles de yodo para la estandarizacin del
tiosulfato, por lo que su peso equivalente es 1/6 del peso frmula (214/6 = 35.67)
Preparacin de la solucin de tiosulfato de sodio 0,1 N:
Disolver 25 g de tiosulfato de sodio, Na2S2O3.5H2O, en 1 L de agua destilada recin hervida y
filtrada. Agregar 0.1 g de carbonato de sodio a la solucin y dejar en reposo 1 da antes de la
estandarizacin.
Preparacin de la solucin de yodato de potasio 0,0841N:
Pesar 1,5000 g de yodato de potasio para anlisis, KIO 3, (luego de secado a 180 C por 3 h en
horno y enfriado en un desecador). Disolver en agua y enrasar a 500 mL. La normalidad de
esta solucin es 0,0841.
La estandarizacin se realiza as: En un erlenmeyer de 250 mL, pipetear 50 mL de la solucin
de yodato y agregar 2 g de yoduro de potasio y 10 mL de HCl 1N. Despus de 5 min, titular
con la solucin madre de tiosulfato hasta color amarillo plido. Agregar 5 mL de solucin de
almidn, y continuar la titulacin hasta la desaparicin del color azul. Calcular la normalidad
de la solucin de tiosulfato de sodio.
Puede sustituirse el KIO3 por el K2Cr2O7 0,1 N(ver p. 62). Para ello, en un erlenmeyer de 250
mL, mezclar 10,00 mL de solucin de dicromato de potasio, 50 mL de agua destilada, 1 g de
KI y 2,5 mL de cido sulfrico (1+9). Tapar y mantener en un lugar oscuro por 10 min. Diluir

118

con 50 mL de agua y titular con la solucin de tiosulfato de sodio, hasta obtener un color
amarillo plido. Agregar 1 mL de solucin de almidn, y continuar la titulacin hasta que
desaparezca el color azul del almidn (siempre queda un tenue color azul celeste del cromo).
Calcular la normalidad de la solucin de tiosulfato de sodio igualando los equivalentes de
oxidante y reductor en el punto de equivalencia. (Nox*Vox= Nred*Vred)
ANEXO 3. Valoracin de la solucin de sulfito de sodio 0.1N:
Las sustancias que tienen un potencial de oxidacin muy inferior al del sistema yodo/yoduro
(como los sulfitos), se oxidan con el yodo y se pueden titular con una solucin valorada de
esta sustancia:
SO32- + I2 + H2O = SO42- + 2I- + 2H+
El exceso de yodo aadido puede oxidar el tiosulfato a tetrationato:
2S2O32- + I2 = S4O62- + 2IComo el yodo tiene un color amarillo intenso a marrn, hace evidente su presencia aun en
grandes diluciones. Por otra parte, el yoduro es incoloro, por lo que podra servir como
indicador propio. Sin embargo, se obtiene un viraje ms pronunciado en el punto final si se
usa almidn como indicador. Esta sustancia reacciona con el yodo en presencia de yoduro
formando un complejo de adsorcin de color azul intenso. La desaparicin de este color indica
la ausencia de yodo y el punto final de la valoracin.
Procedimiento para la valoracin: Pipetear 50 mL de solucin de yodo 0.01 N en cada uno
de dos frascos de 250 mL, A para la muestra y B para el blanco. Agregar 25 mL de solucin
de sulfito al frasco A y 25 mL de agua destilada al frasco B. Colocar un tapn a cada frasco y
esperar 5 minutos para la reaccin. Titular luego con solucin de tiosulfato de sodio 0.01N
hasta un color amarillo plido. Agregar 5 mL de solucin de almidn y agitar vigorosamente,
continuando la titulacin hasta la desaparicin del color azul. Guardar la solucin
estandarizada en frasco de vidrio con tapn.
Calcular la concentracin de la solucin de sulfito, utilizando la ecuacin:

SO2 , g / mL B A x N x 32

x 10 3

25
donde:
B = volumen de solucin de tiosulfato ~ 0.01N para el blanco, mL
A = volumen de solucin de tiosulfato ~ 0.01N para la muestra, mL
N = normalidad verdadera de la solucin de tiosulfato, meq/mL (Anexo 2)
32 = peso miliequivalente del SO2, mg/meq
25 = volumen de la solucin de sulfito, mL
103 = factor de conversin de mg a g

119

Bibliografa consultada

1. Warner, P.:Anlisis de los contaminantes del aire. pp. 129-134. Paraninfo.

Madrid. 1981.
2. Kolthoff, I. y E. Sandell:Tratado de Qumica Analtica Cuantitativa. 4 edicin.
Cap. 34. Editorial Nigar. Buenos Aires. 1960.
3. Decreto 638 Normas Sobre Calidad del Aire y Control de la Contaminacin
Atmosfrica. Gaceta Oficial de la Repblica de Venezuela N 4.899
(Extraordinario). 19/05/1995.
4. Plunkett, E.:Manual de Toxicologa Industrial. pp. 288, 360. Ediciones Urmo.
Bilbao. 1974.

PRCTICA 12. OXIDANTES TOTALES

Introduccin

Los oxidantes atmosfricos son contaminantes secundarios que se producen por reacciones
fotoqumicas en fase gaseosa y en aerosoles, a partir de los contaminantes primarios, como los
NOx, hidrocarburos y CO. De los oxidantes, el ms importante es el ozono (50-300 g/m 3),
aunque tambin son muy reactivos el perxido de hidrgeno y los perxidos orgnicos, como
metilhidroperxido, CH3OOH, etilhidroperxido, C2H5OOH, hidroximetilhidroperxido,
OHCH2OOH, etc.
Se considera que los oxidantes son indicadores primarios de la calidad del aire y por tanto, se
requiere su control rutinario en atmsferas urbanas. Estas sustancias son los principales
responsables de la oxidacin de compuestos de azufre (IV) a azufre (VI), que contribuyen a la

120

formacin de la lluvia cida, adems de tener efectos importantes en la reduccin de la

visibilidad y actuar como precursores del ozono troposfrico, sustancia que ataca a las
personas, vegetales y materiales (especialmente al hule y los neumticos).
La medicin de los oxidantes totales puede realizarse utilizando mtodos manuales o
automticos. El Art. 7 del decreto 638 establece como procedimiento manual la colorimetra
por reaccin del ozono con yoduro potsico en medio neutro (que se emplea en esta prctica)
y como tcnica automtica la quimiluminiscencia.
El mtodo colorimtrico (o de Saltzman) se basa en la absorcin de los oxidantes en una
solucin neutra y tamponada de yoduro potsico al 1 %, midiendo colorimtricamente el yodo
producido (como I3) a 352 nm.
Las reacciones son:
O3 + 2I- + 2H+ = I2 + O2 + H2O

(1)

I2 + I- = I3-

(2)

Aspectos Legales

En relacin con el ozono y oxidantes, el Art. 3 del Decreto 638, establece los siguientes
lmites:

Porcentaje
Contaminante
Lmite
Perodo de
3
excedencia
g/m
medicin
en lapso de
(horas)
muestreo
5. Oxidantes
Totales
expresados
como ozono

240

0.02%

Las concentraciones de los contaminantes se calcularn para

condiciones de 1 atmsfera y 298 K
Resumen

La determinacin se basa en la capacidad que tienen los oxidantes atmosfricos en oxidar el

KI a I2 en medio neutro. La corriente de aire se pasa a travs de una solucin de KI que retiene
por reaccin qumica a los oxidantes, y la cantidad de I 2 producido se mide fotomtricamente
a 352 nm.
Significado y uso

Los oxidantes fotoqumicos, como el ozono, O 3, el nitrato de peroxiacetilo, NPA, y el nitrato

de peroxibencilo, NPB, estn relacionados directamente con los efectos perjudiciales del smog
fotoqumico, que incluyen una notable reduccin en la visibilidad, ataque a los materiales
sintticos, daos a la vegetacin e irritacin a la nariz y garganta. Es, por tanto, muy
importante conocer los niveles ambientales de este tipo de sustancias.
Precauciones de seguridad

121

Esta prctica puede involucrar el empleo de materiales, operaciones y equipos peligrosos. No

se asume que se describan aqu todos los problemas de seguridad relacionados con su uso.
Queda bajo la responsabilidad del usuario establecer las prcticas apropiadas y la aplicacin
de medidas especficas para desarrollar actividades seguras.
Interferencias

Este mtodo se puede aplicar a la medicin de ozono ambiental en el rango de 0.01 a 10 ppm.
Al instalar un filtro de fibra de vidrio con trixido de cromo, puede eliminarse hasta un exceso
de 100 veces de SO2 (que produce una interferencia negativa). No se requiere el filtro cuando
la concentracin de SO2 no llega al 10% de la del NO (situacin que es normal, a menos que
la estacin se encuentre prxima a una fuente conocida de SO 2). Como el sistema de filtro
oxida una parte del NO a NO 2, se debe aplicar un factor de correccin de 10 NO x, que se resta
de la medicin final del oxidante. Para lograrlo, se mide simultneamente y en paralelo el
valor de NOx, utilizando un filtro idntico al utilizado en la medicin del ozono. No ser
necesario utilizar el filtro cuando la concentracin de SO 2 sea menor de 0.02 ppm, y en tal
caso, se puede medir directamente el ozono sin determinar simultneamente el NO 2 o el NOx.
Otra interferencia la constituye la debida al NPA, que origina una respuesta equivalente a
hasta un 50% de la producida por un equivalente molar de ozono. Sin embargo, debido a la
alta dependencia que muestra la respuesta producida al tiempo de retencin del NPA en
solucin, es difcil estimar el grado de su interferencia. Este problema no es crtico, excepto en
reas donde se sabe que existen niveles altos de oxidantes fotoqumicos orgnicos.

Aparato

El tren de muestreo (ver Fig. 1) consiste de:

Arrastrador
de Cr2O3
Cr2O3

Absorbedor
1

Absorbedor
2

Tubo de
desecacin

Rotmetro

FIGURA 1. ESQUEMA DEL PROCESO DE ABSORCIN.

Arrastrador de trixido de cromo

2 absorbedores (impingers)
Tubo de desecacin
Rotmetro
Bomba de aire
Reactivos y materiales

A. REACTIVOS:

Bomba de
aire

122

1. Solucin absorbente: Disolver 5.0 g de yoduro potsico en 20 mL de agua destilada.

Aadir esta solucin con agitacin a la mezcla tampn preparada disolviendo 6.8 g de
fosfato dicido de potasio, KH2PO4, y 7.1 g de fosfato cido disdico, Na2HPO4, en
500 mL de agua destilada. Luego de agregar la solucin de yoduro, diluir a 1 L y dejar
reposar por lo menos 1 da. Medir el pH y ajustarlo a 6.8 0,2 utilizando NaOH o
KH2PO4. Esta solucin es estable durante varias semanas si se mantiene refrigerada en
un frasco opaco.
2. Arrastrador de xido crmico: Llenar un tubo en forma de U con tiras de 0.6 cm de
papel de filtro de fibra de vidrio (de los utilizados para el equipo de medicin de
partculas totales suspendidas), que se preparan y tratan de la manera siguiente:
Utilizando unas tijeras, se corta por la mitad un papel de fibra de vidrio rectangular y
se sumerge durante 10 min en una solucin preparada disolviendo 5 g de dicromato
sdico, Na2Cr2O7, y 5 g de H2SO4 conc en 200 mL de agua, o disolviendo 125 g de
xido crmico y 35 ml de H2SO4 conc en 750 mL de agua.
Se sacan los filtros de la solucin y se secan en una estufa a 93 C. Los filtros
preparados de esta forma deberan tener un color marrn rosado. Su vida activa va
desde unos pocos das hasta 1 mes, cuando se halla en ambientes de baja humedad
(<20%). El filtro est gastado cuando se observa una apariencia de humedad o un
color
verdoso.
3. Solucin estndar de yodo: Disolver 0.0200 g de I 2 slido en 5 mL de etanol y verter la
solucin en un matraz aforado de 100 mL. Enrasar con agua destilada. Esta solucin
contiene 200 ppm de I2. Se considera que el yodo es un estndar primario.
4. Solucin de trabajo de I2: Pipetear 10 mL de la solucin estndar de yodo en un matraz
de 100 mL. Diluir a volumen con solucin absorbente. La solucin final contiene 20
ppm de I2.

B. MATERIALES:
Matraces aforados de 25 y 100 mL
Burbujeadores
Tubo desecador de gel de slice
Bomba
Rotmetro
Tubo en U
Procedimiento

Montar el equipo captador que se muestra en la Fig. 1. Aadir 10.0 mL de solucin absorbente
en cada tubo borboteador. Llenar el tubo en U con arrastrador de xido crmico y el tubo
desecador con gel de slice.
Encender la bomba y mantener un flujo de 0,5 L/min. La toma de muestra se realiza durante
un lapso de 15 min a 2 h. Anotar el tiempo exacto y controlar de vez en cuando el flujo, para
asegurar que se mantenga invariable. Medir la temperatura ambiente y la presin atmosfrica,
para corregir el volumen de muestra a las condiciones del Decreto 638.

123

Transferir la solucin absorbente expuesta a un matraz aforado de 10 mL. Si es necesario,

enrasar a volumen con agua destilada. Dentro de a 1 h de la toma de la muestra, leer la
absorbancia a 352 nm, utilizando como blanco el reactivo absorbente sin exponer.
Curva de calibracin

Pipetear 0, 0.5, 1, 2 y 3 mL de solucin de 20 ppm de I 2 en matraces aforados de 25 mL.

Enrasar cada matraz con solucin absorbente. Leer la absorbancia a 352 nm y preparar la
grfica absorbancia en funcin de ppm de I 2 (si se desea, puede elaborarse como g de
O3/mL solucin absorbente vs. absorbancia, de acuerdo con la estequiometra 1:1 propuesta
para la reaccin). Construir la curva de calibracin. Utilizar, si es necesario, el mtodo de
mnimos cuadrados.
Manejo de los Datos y Clculos

El procedimiento es similar al utilizado en la prctica de dixido de azufre:

1. Obtener, para los patrones, la curva de calibracin, con la absorbancia en el eje X y la
concentracin de Yodo (ppm) en el eje Y. No olvidar incluir el valor (0,0). Para la
concentracin de yodo, recordar que se realiz la dilucin de la solucin de 20 ppm a
25 ml, as, por ejemplo, para 0.5 ml de solucin, su concentracin en el patrn es
Cpatrn

0.5 ml20 ppm

=0.4 ppm
25 ml

Un clculo similar se realiza para los dems patrones, obteniendo concentraciones de

0.8; 1.6 y 2.4 ppm, respectivamente.
Ayodo = a Cyodo, ppm + b
2. A partir de la medicin de absorbancia para las muestras en los dos tubos
borboteadores, utilizando la ecuacin anterior, determinar la concentracin de yodo en
cada recipiente.
3. Conociendo el volumen de solucin captadora en cada borboteador (10 mL), se calcula
la cantidad de yodo medida. g:
Masa de yodo = Cyodo, g /mL x 10 mL
La masa total es la suma de las masas en los 2 borboteadores.
4. Apoyndose en la estequiometra, (Ecuacin (1)), se calcula la masa de ozono
equivalente, g:
48 g O3
Masa O3 , g Masa total de I 2 , g x
254 g I 2
NOTA: Alternativamente, se puede determinar la ecuacin de absorbancia medida vs
concentracin de ozono. Este ltimo parmetro se calcula as:

124

ppm O3 , g

ppm I 2 x

48 g O3
0.189 ppm I 2
254 g I 2

En este caso, se calcula directamente la masa de ozono en cada borboteador:

Masa de ozono borboteador 1, g = (g O3/ml)borboteador 1 * 10 ml
Masa de ozono borboteador 2, g = (g O3/ml)borboteador 2 * 10 ml
Masa de ozono, total, g = Masa borboteador 1 + borboteador 2
5. El volumen de aire muestreado es:
Volumen , m 3 Flujo,

1m3
m3
x t , min x
min
1000 L

6. Este volumen se corrige a las condiciones del Decreto 638 (1 atm, 298 K), utilizando
la ley del gas ideal:
P T
V , m 3 V1 x 1 x 2
P2 T1

Donde:
P1: Presin medida en el sitio donde se realiza el muestreo
P2: 1 atm (o su equivalente en otras unidades)
T1: Temperatura medida en el sitio donde se realiza el muestreo, K
T2: 298 K
7. La concentracin de ozono es su masa, g, (calculada en el paso 4), dividida por el
volumen de aire (corregido a 298 K y 1 atm).
Bibliografa consultada

1. Warner, P.:Anlisis de los contaminantes del aire. pp. 154-158. Paraninfo. Madrid.
1981.
2. Decreto 638 Normas Sobre Calidad del Aire y Control de la Contaminacin
Atmosfrica. Gaceta Oficial de la Repblica de Venezuela N 4.899 (Extraordinario).
19/05/1995.