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Instituto Politcnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas


Departamento de Fisiologa
Fisiologa General
Prctica No. 1
Aspectos generales del manejo de animales
de laboratorio y vas de administracin.
Equipo No. 3
Cruz Garca Diego
Fuentes Cantero Francisco Miguel
Flores Vega Adrian
Lpez Granados Jorge Alberto
Ramos Coln Israel
13-Octubre-2015
INTRODUCCIN.

El animal de laboratorio es cualquier especie animal que, mantenido bajo determinadas


condiciones controladas es utilizado como instrumento de medida en experimentacin
cientfica, pruebas de laboratorio y docencia, para generar datos, los cuales son utilizados
como informacin. Por ley es obligacin del personal que lo cuida, mantiene y utiliza
(investigar), dar tratos bioticos a estos animales destinados a la experimentacin.
La Norma oficial Mexicana NOM-062-ZOO-1999, Especificaciones tcnicas para la produccin,
cuidado y uso de los animales de laboratorio, tiene como objetivo establecer y uniformar las
especificaciones tcnicas para la produccin, cuidado y uso de los animales de laboratorio que
deben cumplir las personas fsicas o morales relacionadas en todos los campos con este tipo
de animales. La vigilancia de esta Norma corresponde a la Secretara de Agricultura,
Ganadera y Desarrollo Rural, as como a los Gobiernos de los Estados y del Distrito Federal.
Para la correcta aplicacin de esta Norma se deben consultar las siguientes normas oficiales
mexicanas:
NOM-003-ZOO-1994, NOM-029-ZOO-1994, NOM-033-ZOO-1994, NOM-046-ZOO-1994, NOM051-ZOO-1994, NOM-087-ECOL-1995, NOM-008-SCFI-19993, NOM-018-SCFI-1993 yNOM028-STPS-1994 .
El pentobarbital es un barbitrico que se utiliz como anestsico desde el ao 1930.
El pentobarbital sdico pertenece al grupo de los barbitricos (uredos cclicos), compuestos de
accin hipntica muy destacada, por ser eficaces y presentar muy pocos efectos colaterales.
Son sustancias sintticas que resultan de la condensacin de la Urea y del cido malnico.
Est clasificado como barbitrico de accin corta; es decir menos de 3 horas.
Su accin fundamental es la depresin no selectiva del sistema nervioso central, (parlisis
descendente), que segn la dosis puede ir desde la sedacin hasta la anestesia general o el
coma, y an la muerte por parlisis del centro respiratorio.
El pentobarbital, disminuye la transmisin de la acetilcolina y aumenta la transmisin de
neurotransmisores inhibidores. Acta a nivel del sistema reticular activador. Deriva del cido
barbitrico. Es un hipntico y anticonvulsivante. Su administracin es intravenosa. Protector
cerebral. Induce enzimas hepticas pudiendo producir porfiria aguda intermitente
(Ergonomix.com, 28 de Septiembre del 2015).

Fig. 1 Estructura qumica del pentobarbital sdico. ( R. Gennaro, 2003)

La inyeccin intraperitoneal se utiliza para administrar volmenes relativamente grandes de


sustancias solubles. Su utilizacin es muy comn en pequeos roedores y peces. La
penetracin debe cesar tan pronto como el fluido inyectado comience a fluir libremente en la
cavidad abdominal. Se debe medir la profundidad de penetracin de la aguja. Introduzca la
aguja con un ngulo de 30, ligeramente a la izquierda de la lnea media del ombligo, a medio
camino de la snfisis pubiana y el apndice xifoides del esternn.

La inyeccin subcutnea se utiliza para la administracin de compuestos que no irritan los


tejidos, se debe introducir de forma perpendicular atravesando la piel, la velocidad de absorcin
que presenta esta va es a menudo bastante lenta para mantener un efecto sostenido. (Sanz,
1993).

La va intragastrica tiene como ventaja es que los frmacos interaccionan de una manera
fisiolgica con las enzimas digestivas permitiendo la administracin segura del frmaco.

La informacin sensitiva recogida por los correspondientes receptores integra el componente


sensitivo de los nervios y entra en la mdula espinal por su raz dorsal, hasta llegar a los
cuerpos neuronales correspondientes, situados en las astas posteriores medulares.

Entendemos por reflejo de enderezamiento: Cualquier reflejo que tiende a devolver a un animal
a su posicin corporal normal en el espacio cuando ha sido desplazado desde dicha posicin y

que ajusta la cabeza a la posicin del cuerpo o al contrario. De este modo, la cabeza y el tronco
se mantienen alineados.

El reflejo extrnseco, tpicamente polisinpticos, es en el que participan un gran nmero de


neuronas, el ejemplo ms caracterstico son los reflejos de retirada frente a la estimulacin
dolorosa o trmica: pinchazo o quemadura: Flexin de extremidad excitada, reflejo flexor.
(Barbany, 2002)

Cuando las ratas se aclimatan a 30C, tienen muy pequea capacidad de termognesis
(generacin de calor en el organismo) sin temblor y utilizan principalmente el temblor para
mantener su temperatura corporal cundo estn en reposo expuestas al fro, la temperatura
promedio de las ratas oscila entre los 38C y 39C. (Hill, 2007)

HIPTESIS.
Dado que el pentobarbital sdico es un sedante del sistema nervioso central, si se administra al
animal de laboratorio la dosis adecuada de pentobarbital sdico entonces este presentara una
disminucin significativa de sus reflejos, tanto el reflejo flexor como el reflejo de
enderezamiento.
OBJETIVOS.
General:
Aprender a manejar y transportar a los animales de laboratorio para su correcto uso.
Aprender a marcar a los animales para la realizacin de diferentes pruebas.
Determinar en cual va el frmaco tiene un efecto ms rpido sobre la rata.
Calcular las diferentes dosis de administracin
Personal:
Aprender a usar el programa sigmastat para los clculos estadsticos.
Controlar el temor hacia los animales de laboratorio.
FUNDAMENTOS.
Los animales de laboratorio son biomodelos experimentales que tienen la cualidad necesaria
para dar respuesta al cuestionamiento de cmo estudiar las enfermedades que afectan al
hombre, a la especie que est estudiando, y a las dems especies productivas y domsticas,
las ratas y ratones estn entre los que responden ms uniformemente a esos requerimientos,
son de fcil manejo y poseen las caractersticas zootcnicas adecuadas.

La temperatura: este es una de las similitudes de la rata con el humano, ya que su


temperatura se comporta muy similar al de un humano, su temperatura tiene que ser
regulada, el valor es un poco arriba de la de los humanos en comparacin. Las ratas
tienen una temperatura central de entre 38-39 C . Al ser uno de nuestros objetivos
analizar el efecto del frmaco pentobarbital sdico, sobre las ratas, y sabiendo que su
efecto de accin consiste en inactivacin del sistema nervioso central, donde se lleva a
cabo la termorregulacin. Es por eso que se emple la temperatura como objeto de
estudio.

As mismo, con la accin de inhibir el sistema nervioso central, as como tambin un


potente relajante muscular, se midieron los reflejos, para comprobarlo, se sabe tambin
que al recibir un estmulo este tiene que llegar al sistema nervioso central para que este
envi una respuesta lo cual no ser posible si esta inhibido por el frmaco

Se midi el efecto de este frmaco a diferentes intervalos de tiempo (5 min) para ver qu tan
rapado acta sobre la rata el frmaco dependiendo de cada rata, ya que el efecto depende del
metabolismo de cada una de estas.

Metodologa

Fig. 2 Diagrama de flujo de los pasos que se deben llevar a cabo en la realizacin de
la prctica Aspectos generales del manejo de animales de laboratorio y vas de
administracin.

Resultados

Efecto del pentobarbitol sodico en diferentes vias de administracion


38.5
38
37.5
37
36.5
36
35.5
Temperatura Intragastrica
colonal
35
34.5
34
33.5
33
32.5
32

38.5
38
37.5
37
36.5
Intraperitonial

36

Subcutanrea

35.5
35
34.5
34
0

10

15

20

25

30

33.5

Tiempo

Fig. 3: En la grfica se muestra la disminucin de la temperatura contra el tiempo


en ratas a las que se les administro una dosis promedio de 0.4mL de pentobarbital
sdico en diferentes vas siendo; IP: intraperitoneal, SC: subcutnea, IG:
intragastrica. Las letras diferentes indican una diferencia significativa en la misma

va con una probabilidad < 0.05. n = 6. El anlisis estadstico utilizado fue una
ANOVA bifactorial de medidas repetidas, seguido de un anlisis student newman
kelvs.

Reflejo flexor
100
90
80
70
60

Porcentaje de reflejo flexor

50
40
30
20
10
0

10

15

20

25

30

Tiempo

Fig. 4. Porcentaje de ratas (n = 6) que presentan el reflejo flexor respecto al tiempo


despus de administrarles una dosis promedio de 0.4mL de pentobarbital sdico en
diferentes vas siendo; IP: intraperitoneal, SC: subcutnea, IG: intragastrica.

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