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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA LA

CERTIFICACIN FITOSANITARIA DE MATERIAL DE


PROPAGACIN DE EXPORTACIN

Cdigo: PCFMPES
Versin: 01/12/04

Capitulo 6
1

VI.- CONDICIONES DE CAPTACIN DE MUESTRAS


6.1.- Tipo de muestra

Una correcta determinacin a nivel de laboratorio, depende en gran parte de la calidad de


la muestra recibida. Los inspectores de terreno deben tomar todas las precauciones
necesarias para que la parte de la planta que ser analizada llegue en ptimas
condiciones al laboratorio.
Muestrear en lo posible plantas completas, incluyendo el sistema radicular completo. Se
debe incluir la tierra adyacente con humedad suficiente. Si el tamao de la planta no lo
permite, se deben trozar las partes comprometidas.
En el caso de plantas con fruto, ejemplo tomate, previo al despacho de la muestra retirar
los frutos.
Muestras a distancia, se sugiere enviar planta completa. Esto permite que la planta se
mantenga en mejores condiciones de turgencia hasta la llegada al laboratorio.
Existen algunas enfermedades que producen sntomas secundarios en el follaje, es decir,
los desrdenes se manifiestan en la parte area, pero el organismo causal se localiza en
otro sector de la planta como el cuello y races. Ejemplo: Phytophthora, Alternaria
radicina, Erwinia carotovara, Fusarium spp.
Para el caso de nematodos, que se soliciten determinar durante el crecimiento activo, por
ejemplo, Ditylenchus dipsaci, se debe enviar muestra de planta y no de suelo.

6.2.- Nmero de muestras

Dado que el muestreo es dirigido a captar plantas con sntomas de las plagas solicitadas,
es ms relevante tomar segn esta condicin de las plantas.

6.3.- poca de muestreo

Se debe llegar al estado fenolgico que mejor exponga los sntomas caractersticos de la
enfermedad.
En trminos generales, la primera inspeccin debiera realizarse en el periodo de
crecimiento vegetativo o prefloracin y la segunda desde el periodo de fructificacin en
adelante.

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A modo de ejemplo se recomienda:


Husped
Leguminosas (frjol, arvejas)
Cucurbitceas (zapallo, meln)
Solanceas (tomate, pimiento
Maz
Maravilla
Lechuga
Brassicas (repollo, coliflor)

Estado fenolgico
Llenado de grano
Fruto formado, antes de madurez cosecha
Fruto de pintn a maduro.
Postfloracin y grano dentado
Postfloracin y llenado de grano (ej. Sclerotinia
sclerotiorum)
Fase vegetativa antes de botn floral (ej:
Plasmopara halstedii)
Emisin de tallo floral
Formacin de silicua, Emisin de tallo floral

6.4.- Envo de muestras al laboratorio

El envo de muestras al laboratorio, debe realizarse de acuerdo a las siguientes directrices


dadas por los respectivos laboratorios de Lo Aguirre, y enviando la muestra con los datos
solicitados en el anexo 15

6.4.1.- Laboratorio de fitopatologa


Instructivo captacin y envo de muestras al laboratorio de fitopatologa
La captacin de una muestra debe ser representativa del universo y ajustarse a las
instrucciones que ms adelante se indican, teniendo en cuenta el tipo de sintomatologa,
especie vegetal o partes de ellas que se muestrea y los objetivos del diagnstico. Es
necesario enviar toda la gama de sintomatologa observada en terreno, desde plantas con
sntomas iniciales hasta aquellas muertas.
I.- Muestreo dirigido.
1.- Plantas o rboles con decaimiento general, detencin de crecimiento, marchitez,
defoliacin y/o amarillamiento general, cada de almcigo.
Muestrear en lo posible plantas enteras, incluyendo el sistema radicular completo,
sin destruir las raicillas.
Si los rboles son muy grandes, enviar muestras de races con tierra adyacente o
tejido del cuello de la planta y ramas con sntomas o presencia del agente causal.
2.- Plantas o rboles con cancros, heridas y/o gomosis.
Dirigir el muestreo a la zona con presencia de sntomas, incluyendo en la muestra
la zona de avance de dao.
Enviar ramas o ramillas ya muertas, en caso de presentar formacin de cuerpos
frutales o desarrollo de micelio.

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3.- Frutos, vegetales carnosos, bulbos, tubrculos, etc., con manchas o pudriciones
descartando los con avanzado estado de descomposicin.
Seleccionar muestras que presenten todas las etapas de infeccin.
4.- Hojas, brotes, flores y otras partes vegetales con coloracin anormal, deformacin,
desarrollo de micelio, pstulas, carbones, brotacin anormal, quemaduras o
manchas, tizones o necrosis.
Captar la rama o ramilla completa, incluyendo madera de 2 o 3 aos. En el caso de
cultivos anuales enviar la planta completa incluyendo sistema radicular.
Considerar que existen enfermedades cuyo sntoma secundario se manifiesta en el
follaje, como es en enfermedades de races, cuello o vasculares de la planta.
En caso de deformaciones, brotacin anormal o vasculares, considerar dentro de la
muestra los pices de las ramillas o brotes nuevos cercanos al dao.
5.- Plantas o rboles con agallas o tumores.
En lo posible enviar la planta completa o el sector comprometido, incluyendo tejido
sano. Enviar solamente la agalla no es suficiente para realizar un buen anlisis.
6.- Plantas o rboles con pudricin de la madera, tallo y/o races.
En lo posible enviar la planta completa o la zona afectada, incluyendo la zona de
avance del dao.
En el caso de plantas ya secas, se pueden adjuntar stas o sus partes afectadas, a
objeto de verificar estados avanzados del agente causal (cuerpos frutales, micelio,
etc.).
7.- Plntulas con sntomas de damping-off, csped, empastadas, etc.
Seleccionar sectores con distintos grados de dao y muestrear las plantas enteras
con el cubo de tierra correspondiente, cuidando que la humedad sea suficiente.
8.- Semillas o granos.
Obtener la muestra de acuerdo a las normas ISTA, procurando que sta considere
sntomas de necrosis, manchado o deshidratado.
II.- Envo de muestras
La muestra una vez colectada no debe ser expuesta al sol y en el menor tiempo posible
(minutos) colocarla en una condicin fra (nevera con geles de fro).
Si la muestra no va a ser enviada inmediatamente, se debe guardar a 4C, mximo dos
das y el transporte debe ser a baja temperatura o durante la noche.
Embalado de la muestra

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1. Envueltas en papel absorbente humedecido y luego en bolsas dobles de polietileno.


a. Tozos de corteza de tronco o cuello.
b. Trozos de ramas y tallos.
c. Ramillas con hoja.
2. Envueltas en papel absorbente humedecido con el sistema radical y cuello separado
del sistema areo, mediante bolsa, insertado todo en bolsa doble de polietileno.
a. Plantas herbceas o leosas enteras.
b. Races y raicillas.
c. Plntulas con tierra.
d. Plantas suculentas.
3. Envueltas en papel absorbente seco, cuidando previamente de eliminar la humedad
superficial de la muestra y luego colocar en envase de cartn o papel.
a. Tubrculos.
b. Partes suculentas (frutos, bulbos, etc.)
c. Partes vegetales con pudriciones acuosas.
d. Brotes tiernos.
4. En envase doble de polietileno
a. Semillas.

6.4.2.- Laboratorio de Nematologa


Nematologa: Instructivo de captacin y envo de muestras
Obtencin de muestras de suelo y partes de plantas para determinar la presencia de
nemtodos:
Los nemtodos son organismos pluricelulares, generalmente microscpicos y
vermiformes pertenecientes al reino animal. La mayor parte de los fitoparsitos mide entre
0,3 y 2,5 mm. Los sntomas generales de dao causados por nematodos son: disminucin
del crecimiento de las plantas, prdida de raicillas, ndulos o agallas radiculares,
amarillamiento, decoloracin, defoliacin, tendencia a la marchitez y bajos rendimientos.
El objetivo del muestreo de suelo y de tejido vegetal, es determinar por medio de anlisis,
la presencia de nematodos, en forma cualitativa y cuantitativa.
Una muestra recolectada en forma correcta, es un factor muy importante en la obtencin
de un resultado confiable.
Materiales requeridos para el muestreo:
- Pala o barreno para el suelo
- Bolsas plsticas
- Etiquetas
- Lpiz indeleble

- Cinta adhesiva
- Balde de 15 litros de capacidad
- Cuchillo o tijera podadora
- Envase aislante para colocar las muestras de
suelo y tejido de las plantas (races, tubrculos, bulbos,
hojas).

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Identificacin de la muestra:
En la etiqueta deben consignarse los siguientes datos:
- Regin
- Cultivo anterior
- Oficina
- Cultivo actual
- Localidad
- Fecha de muestreo
- Nombre del predio
- Observaciones (aplicacin de nematicidas
- Nombre del agricultor
u otros agroqumicos
- Tipo de anlisis nematologico solicitado (formas mviles o enquistadas)
Metodologa de muestreo
Recomendaciones generales:
Las muestras de suelo pueden extraerse en cualquier poca del ao, en lo posible
cuando el terreno no este muy seco ni muy hmedo.
Las muestras deben conservarse hmedas, para lo cual se recomienda usar
bolsas de polietileno grueso.
Cuando se trate de muestras para determinar nematodos formadores de quistes,
se puede obtener la muestra del suelo seco.
La recoleccin de muestras debe hacerse por especie vegetal.
Las muestras deben conservarse a una temperatura no mayor de 7C.
En el caso de muestras de raicillas, ests deben colocarse entre papel absorbente
hmedo y dentro de una bolsa plstica, con su identificacin, sin exponerlas a los rayos
del sol.
La etiqueta debe quedar aislada para que no se humedezca y no se borren los
antecedentes.
El transporte al laboratorio respectivo, debe hacerse lo ms rpido posible,
considerando los aspectos antes descritos.
Muestreo de suelos para detectar nemtodos formadores de quistes:
Se considera una hectrea como unidad de muestreo, y se colecta siguiendo hileras
paralelas, 8 a 10 grs. de suelo cada 8, 4 o 2 pasos entre y sobre la hilera, segn la
intensidad de muestreo requerida, de manera de cubrir toda la superficie. El muestreo
debe realizarse a la profundidad del cultivo actual o del anterior, si el suelo est limpio.
Las submuestras se homogeneizan en un recipiente adecuado y se coloca 500 grs. en
una bolsa plstica, con su identificacin, para enviar al laboratorio.
Muestreo de suelos destinados a viveros de plantas:
El muestreo debe hacerse tomando como superficie mxima, media hectrea. Cada 15 o
20 metros se extrae muestras de 50 grs. cada una, a unos 10 a 20 cm. de profundidad,
con barreno muestreador de suelo, haciendo aproximadamente un total de 25
submuestras. Las submuestras deben cubrir completamente la superficie a analizar.

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Se mezcla las 25 submuestras en un balde y se separan 500 grs. en una bolsa, con su
identificacin, para su anlisis.
Muestreo de suelos cultivados con frutales o vides:
Las plantas que presentan sntomas tales como: clorosis, detencin del crecimiento o
defoliacin, se muestrean extrayendo suelo alrededor del tronco, bajo la proyeccin de la
copa, por lo menos en tres lugares y a la profundidad en que se encuentre la mayor
densidad de raicillas, pertenecientes al frutal o vid (no incluir races de malezas), las que
deben incluirse en la muestra. Se mezclan las submuestras y se colocan 500 gramos de
este suelo en una bolsa, con su identificacin. El muestro debe hacerse por especie
vegetal.
Aquellos sectores que presenten plantas sanas, deben muestrearse en forma separada
de los sectores, siguiendo La misma metodologa.
Muestreos de cultivos de alfalfa y de frutillas:
En general, para analizar plantas afectadas por nematodos del follaje, se toman hojas y
trozos de tallos y brotes con sntomas de dao, provenientes de unas 10 plantas por
hectrea, se envasan en bolsas plsticas, se identifican y se envan al laboratorio.
6.4.3.- Laboratorio de Taxonoma de malezas
Instructivo de captacin y envo de muestras al laboratorio de taxonoma de
malezas
El siguiente instructivo, del Laboratorio de Taxonoma de Malezas en el Nivel Central
resume las condiciones que deben presentar las muestras vegetales al momento de su
ingreso referida a los siguientes puntos:
I.- Seleccin
Se seleccionaran las muestras en terreno de diferente ndole, tales como:
a. Especies vegetales que estn interfiriendo en algn sistema agronmico en forma
negativa (cultivos, sistema de riego, vivero, etc.).
b. Resumen de dudosa identificacin taxonmica.
c. Especies vegetales nunca antes visualizadas en un determinado lugar.
II.- Toma de muestra:
1) Toda muestra a analizar deber estar constituida por tres ejemplares cuando esto
sea posible.
2) La muestra debe ser representativa de la existente en el terreno, en cuanto a
caractersticas morfolgicas.
3) Toda muestra deber tener similares caractersticas vegetativas, en cuanto a color,
altura, vigor, estado fenolgico y ser colectada en el mismo predio o lugar.
4) El ejemplar debe venir con:

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a. Todas sus estructuras vegetales completas: vegetativa y reproductiva, raz,


tallo, hoja, flor y fruto. En plantas grandes que no se pueda extraer raz,
describir sistema radicular que presenta el ejemplar colectado.
b. La muestra no debe presentar daos fsicos, qumicos, fitopatolgicos,
entomolgicos ni de otro tipo.
c. La muestra debe ser colectada con sumo cuidado evitando dao a
estructuras vegetales.
III.- Envo de muestra
1) La muestra una vez colectada en terreno debe ser enviada lo ms rpido posible.
Si esto no ocurre, debe ser guardada en fro.
2) Venir limpia de polvo o partculas de suelo.
3) Venir envuelta en toalla nova protegiendo principalmente las races.
4) Enviar la muestra en bolsas plsticas individuales totalmente selladas con huincha
de embalaje cada una y a su vez en una gran bolsa comn en caso de varios
ejemplares.
5) Cada muestra debe venir con su formulario de envo, con copia en el interior de la
bolsa plstica sellada.
6) El formulario de envo debe indicar todas las caractersticas ecolgicas del terreno
en donde fue colectada la muestra. Se debe indicar el lugar preciso: cerco,
acequia, orilla de camino, etc. Adems del predio, indicar cultivo en que interfiere,
dao que realiza en terreno, etc.

6.4.4.- Laboratorio de Virologa


DIRECTRICES PARA TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS AL LABORATORIO DE
VIROLOGIA (No incluye frutilla)
Tipo de Muestra:
La muestra deber consistir en brotes o follaje verde, en activo crecimiento y deber
incluir tanto pices de crecimiento como hojas adultas. No es necesario incluir races ni
frutos. La eleccin del brote o planta deber siempre estar dirigida hacia los sntomas
observados. Si los sntomas se encuentran en los frutos, igualmente tomar muestras de
follaje.
Preparacin de la Muestra:
La muestra deber ser envuelta en papel absorbente y dispuesta dentro de una bolsa
plstica de un tamao lo suficientemente grande como para que la muestra quede suelta
dentro de ella. Deber incluir adems la clave y los datos necesarios. La muestra deber
siempre ser manejada en condiciones refrigeradas o frescas (conservadora o caja
Aislapol) utilizando Ice Pack o un medio para mantenerlas a una baja temperatura.
Envo de muestras:

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Las muestras debern ser enviadas lo ms pronto posible al laboratorio, de una forma que
se mantengan las condiciones refrigeradas de las mismas. Se podr almacenar por un
mximo de 2 das en refrigerador esperando el envo al Laboratorio. En el caso de envo
va bus, tener la precaucin de usar una caja de Aislapol dentro de la cual se coloquen las
muestras ms ice pack y rotular la caja como FRAGIL para evitar el deterioro de las
muestras por maltrato en el viaje. Marcar cajas y ice pack con nombre de Oficina o regin
o responsable para efectuar devolucin.

6.5.- Identificacin

Cada muestra debe identificarse por medio de una clave, formada por el nmero de
identificacin de la Regin, seguido del cdigo de la comuna y el nmero correlativo de la
muestra.
EJ. 13-50-0001: RM, comuna de Buin, primera muestra.

6.6.- Informacin a enviar (formulario)

Se debe solicitar la determinacin solo de plagas solicitadas como DA y que estn


categorizadas como presentes en Chile.
La solicitud de determinacin de plagas no requeridas como DA, se debe realizar como
prospeccin (Vigilancia Fitosanitaria)

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