INSTITUTO DE EDUCACIN SUPERIOR TECNOLGICA CARLOS CUETO FERNANDINI

REA ACADMICA DE LABORATORIO CLNICO

GENERO NEISSERIA
.Las Neisseria son diplococos, que se asemejan a granos de caf al ser observados con el
microscopio ptico.
Son Gramnegativos, no esporulados inmviles, oxidasa positivos, aerobios obligadas y la
mayora catalasa positivos.
Son sensibles a los agentes fisicoqumicos como las altas temperaturas, la desecacin y
los cidos grasos y metales pesados entre otros.
Las Neisserias no patgenas crecen en medios de cultivos simples y a temperatura
ambiente. Las Neisserias patgenas necesitan para desarrollarse una atmsfera rica en CO2,
una temperatura adecuada 35-37C, y medios de cultivo enriquecidos con sangre calentada
(agar chocolate).
Son 2 especies patgenas para el hombre: N. meningitidis (meningococo) y N. gonorrhoeae
(gonococo).
Otras especies de Neisseria no patgenas, se encuentran habitualmente formando parte de la
flora normal de la oro faringe del hombre como: N. sicca, N. flava, N. subflava, N. perflava .
N. lactamicus forma parte de la flora vaginal de mujeres sanas, su observacin al microscopio
puede sugerir errneamente la presencia de gonococos

NEISSERIA GONORRHOEAE
ENFERMEDADES COMUNES
Gonorrea o blenorragia, considerada como la segunda enfermedad de transmisin sexual por
su frecuencia, en mujeres: cervicitis, salpingitis, septicemia, artritis supurativa, en varones:
uretritis, en recin nacidos conjuntivitis purulenta que puede llegar a ceguera.

CARACTERISTICAS GENERALES
Es un diplococo Gram -, de difcil cultivo, solo fermenta el carbohidrato glucosa.
En las tinciones de muestras patolgicas se observan diplococos dentro de neutrfilos.
Carecen de capsula
Catalasa y oxidasa +. Se lisan rpidamente con el aire del ambiente, desecacin, luz UV, sales
de plata, fenol y calor hmedo a 55C. Son frgiles, exigentes nutricionalmente y crecen
lentamente
FACTORES DE VIRULENCIA
Fimbrias, protenas de la membrana externa favorecen la adherencia.
El Lipopolisacaridos (endotoxina) produce una fuerte reaccin inflamatoria
IDENTIFICACION EN LABORATORIO
MUESTRAS: Productos patolgicos: Pus y secreciones de uretra, crvix, vagina, ojos, y
ocasionalmente de prstata, mucosa rectal, lquido sinovial y sangre.
EXAMEN MICROSCPICO: En las extensiones coloreadas de pus se pueden observar
diplococos arrionados gramnegativos intracelulares.
AISLAMIENTO:

Las muestras se siembran inmediatamente en placas de agar chocolate o

en el medio de Thayer - Martin que contiene vancomicina (contra los
grmenes positivos), colimicin (contra los gramnegativos),
y nistatina (contra las levaduras) y se incuban a 35 C en una atmsfera rica
en CO2 durante 24 a 48 horas.

Prueba de la oxidasa: Al igual que las dems Neisserias el gonococo es

productor de citocromo C oxidasa que oxida el reactivo
tetrametilparfenilendiamina que en estado reducido es incoloro y oxidado
vira a purpura

Pruebas de fermentacin de azcares: El gonococo slo ataca a la glucosa

NEISSERIA MENINGITIDIS
ENFERMEDADES COMUNES
Meningitis, infecciosa del tracto respiratorio como neumona, epiglotitis y otitis media. Existen
otras patologas que se dan en baja frecuencia, como artritis sptica, uretritis, pericarditis y
conjuntivitis.
CARACTERISTICAS GENERALES
Son diplococos capsulados, en muestras patolgicas se les puede observar dentro de
leucocitos, catalasa y oxidasa positivos. Fermentan los carbohidratos glucosa y maltosa.
Slo afecta a seres humanos ya que no existe ningn reservorio. Es la nica forma conocida de
meningitis bacteriana en causar epidemias
Puede originar epidemias en cuarteles e instituciones cerradas donde exista hacinamiento. Del
5 al 30% de la poblacin normal puede albergar meningococos en la nasofaringe, pero durante
las epidemias la frecuencia de portadores asintomticos sube hasta el 70 - 80%.
De la nasofaringe, los microorganismos pueden alcanzar el torrente circulatorio produciendo
una bacteriemia (meningococcemia) con fiebre elevada y exantema hemorrgico. Puede haber
una septicemia fulminante. La complicacin ms frecuente de la meningococcemia es la
meningitis.
Los sntomas se caracterizan por un inicio sbito de cefalea, fiebre, rigidez de nuca, nusea,
vmito, fotofobia y alteraciones neurolgicas que pueden incluir estupor, delirio, coma y
convulsiones. En infantes la meningitis puede tener un inicio con sntomas atpicos sin rigidez
de nuca, sin embargo, el abultamiento de la fontanela puede ser caracterstico. Adems se
acompaa de llanto inconsolable, vmito, convulsiones, rechazo al alimento e hipotona.
La meningococcemia se caracteriza por un inicio sbito de fiebre, hay un exantema purpreo o
petequial.
FACTORES DE VIRULENCIA
Adherencia: mediante pili

Endotoxinas de la pared celular

La N. meningitidis posee antgenos capsulares compuestos de

polisacridos que permiten su tipificacin en grupos (A, B, C, D, X, Y, Z)
mediante reacciones de aglutinacin, clnicamente las ms importantes son
A, B, C, Y, W135:

IDENTIFICACION EN LABORATORIO
MUESTRAS:
Sangre (meningococcemia) LCR (meningitis), y exudado nasofarngeo
(encuestas de portadores). Se puede obtener material por puncin de
las petequias para frotis y cultivo. El suero puede utilizarse en pruebas
serolgicas.

EXAMEN MICROSCPICO: En las extensiones coloreadas de sedimento del LCR o del

material aspirado de las petequias pueden observarse diplococos gramnegativos arrionados
dentro de los leucocitos polimorfonucleares.
AISLAMIENTO: Las muestras sembrados inmediatamente en placas de agar chocolate o en el
medio de Thayer - Martin e incubadas a 37C en una atmsfera que contenga de 5 a 10 % de
CO2 (mtodo de la vela), durante 24 a 48 horas. El medio de Thayer - Martin favorece el
crecimiento de meningococos y gonococos al inhibir el de muchas otras bacterias.
Prueba de la oxidasa: Cuando el crecimiento en los medios de cultivos se roca con una
solucin de clorhidrato de dimetilparafenilendiamina, las colonias de meningococos (y dems
Neisserias) se ennegrecen rpidamente, por accin de la indofenoloxidasa, que poseen estos
microorganismos, sobre el reactivo.
Pruebas de fermentaciones de azcares: El meningococo ataca a la glucosa y a
la maltosa, pero no a la sacarosa; lo que permite la identificacin de especie.
Determinacin de grupos serolgicos: Se lleva a cabo por pruebas de aglutinacin
en lmina con sueros especficos.
Pruebas serolgicas: Se puede determinar la presencia de anticuerpos a los
polisacridos meningoccicos en el suero del paciente, mediante las pruebas de
hemaglutinacin, por la aglutinacin de partculas de ltex o por su actividad
bactericida
MORAXELLA CATARRHALIS
NEISSERIA CATARRHALIS
BRANHAMELLA CATARRHALIS
Su nomenclatura sigue en discusin. Es considerada como parte de la flora
normal, aunque se ha relacionado como agente causante de infecciones pulmonares y de
odo medio.
ENFERMEDADES COMUNES
Otitis, bronquitis, sinusitis y laringitis, conjuntivitis en neonatos, bronconeumona.

FACTORES DE VIRULENCIA
Lipopolisacaridos, fimbrias, protenas reguladoras de Fe, resistencia al complemento.
IDENTIFICACION EN LABORATORIO
Aislamiento en medios agar chocolate o Tayer Martin
Diplococos Gram negativos, oxidasa positiva, catalasa negativos. Aerbicos No fermenta
azucares. Reduce nitratos a nitritos, Produce DNAsa

Crecimiento
en agar
sangre
Colonia en
Agar
chocolate

N
meningitidis

N
catharralis

N
gonorrhoea
e
+

N
sicca

N
lactamica

N
flavescens

Beige a gris
transparent
e lisa 1 a 3
mm

Rosada
opaca seca 1
a 3 mm

Beige a gris
transparente
lisa 0,5 a 1
mm

Beige
Transpare
nte lisa
1 a 3 mm

Beige
Transpare
nte lisa
1 a 3mm

Beige
Transpar
ente lisa
1 a3
mm
+

Glucosa

Maltosa

Lactosa

Sacarosa

Fructosa
Reduccin
de Nitratos
DNAsa

DESARROLLAR EL CUESTIONARIO PARA EL 12

o 13 DE SETIEMBRE E ACUERDO AL HORARIO
DE CADA GRUPO

CUESTIONARIO
1.-Dibuje las Neisserias vistos en el microscopio ptico? Dibuje
N meningitidis

N. gonorrhoeae

2.- Mencione 4 caractersticas de las Neisserias

Es un diplococo gran negativo

Es aerobio
descomponen la glucosa por oxidacin
Son muy sensible a los agentes externos

3- Mencione 2 especies de Neisseria de importancia clnica y que

enfermedades producen?
Neisseria gonorrhoeae (llamada tambin gonococcus),
causante de la gonorrea.

Neisseria meningitidis (llamada tambin meningococcus), una

de las ms comunes causas de meningitis bacteriana y agente
causal de sepsis meningocccica.

4.- Que muestran se necesita para el diagnstico de enfermedades

producidas por Neisserias?

Expectoracin
Aspirado traqueal
Lavado bronquial
Boncoscopa (cepillado bronquial, lavado broncoalveolar)
Biopsia bronquial
Biopsia pulmonar
recoleccin
de
muestras de
orina
recoleccin
de hisopados
recoleccin
de
especmenes
no
urogenitales

Sangre (meningococcemia) LCR (meningitis), y exudado

nasofarngeo (encuestas de portadores). Se puede obtener material
por puncin de las petequias para frotis y cultivo.
El suero puede utilizarse en pruebas serolgicas. Productos
patolgicos: Pus y secreciones de uretra, crvix, vagina, ojos, y
ocasionalmente de prstata, mucosa rectal, lquido sinovial y
sangre.

5- Que medios de cultivo se emplea para el aislamiento de las

Neisserias y por qu?
Medio selectivo de Thayer-Martin para el aislamiento de
neisserias patgenas. Las dificultades que presenta la recuperacin
de N. gonorrhoeae y N. meningitidis de los materiales clnicos, se
deben a las exigencias nutricionales de estos microorganismos, y
en los materiales de origen genital, oral o anal, al desarrollo
invasor de la abundante flora saprfita. El medio de Thayer-Martin
permite el correcto aislamiento y recuperacin de las neisserias
patgenas dentro de las 24 h, con una ausencia casi total de
contaminantes. El medio de cultivo se prepara a partir del Agar
Base GC, con el agregado de hemoglobina, un suplemento de
enriquecimiento (Britalex) y una mezcla antimicrobiana (VCNT:
Vancomicina, colistina, nistatina y trimetoprima).

Medio de cultivo empleado como medio basal para la

preparacin del medio Thayer-Martin original o modificado, y como
agar chocolate con o sin enriquecimiento.

Es til para la recuperacin de N. gonorrhoeae, N. meningitidis y

otros microorganismos exigentes en sus requerimientos culturales.
Es un medio altamente nutritivo. La pluripeptona (es una mezcla en
partes iguales de peptona de carne y peptona de casena) es la
fuente de nutrientes para el desarrollo de microorganismos, el
almidn soluble absorbe sustancias txicas indeseables para el
desarrollo de ciertos microorganismos, las sales de fosfato forman
un sistema buffer y el cloruro de sodio mantiene el balance
osmtico.
Este medio de cultivo, puede ser suplementado con otros
nutrientes o con antimicrobianos, logrndose un medio mas
enriquecido o selectivo segn el aditivo.
El agar base GC, en combinacin con hemoglobina y el suplemento
estril de enriquecimiento Britalex (B03-600-21), se usa para el
aislamiento de microorganismos exigentes.
Si se desea un medio selectivo para N. gonorrhoeae, se puede
adems aadir mezcla antimicrobiana VCNT (B03-605-21) para
inhibir el desarrollo de microorganismos Gram positivos y Gram
negativos, excepto N. gonorrhoeae.
Medio para propsitos generales, para el aislamiento y
cultivo de numerosos microorganismos.
Con la adicin de sangre, el medio es til tanto para el aislamiento
y cultivo de microorganismos aerobios y anaerobios
nutricionalmente exigentes a partir de una gran variedad de
muestras, como para la observacin de reacciones de hemlisis.
Tambin, este medio de cultivo, puede utilizarse como medio base
para preparar el medio agar chocolate.
La infusin de msculo de corazn y la peptona, otorgan al medio
un alto valor nutritivo, que permite el crecimiento de una gran
variedad de microorganismos, an de aquellos nutricionalmente
exigentes. El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico.
El agregado de sangre al medio de cultivo, en concentracin final
de 5-10 %, aporta nutrientes para el crecimiento bacteriano, y
permite detectar hemlisis.

6.- Que pruebas confirmatorias se realiza para identificar las

especies de Neisserias.

N meningitidis

N. gonorrhoeae

7.- Mencione las diferencias entre N. gonorrhoeae y N

meningitidis?
N meningitidis
Infecciones en el aparato
respiratorio superior
Poseen capsula de
polisacridos
Algunas veces poseen
plsmidos
Causan meningitis

N. gonorrhoeae
Infecciones genitales
No poseen capsula de
polisacrido
La mayor parte poseen
plsmido
Causa gonorrea