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CLASE 12 DE AGOSTO

ESTRUCTURA Y FISIOLOGIA BACTERIANA


Principales estructuras bacterianas (esenciales y accesorias)
Estructuras esenciales (constantes): vitales, tienen que estar siempre
o Citoplasma
o Nucleoide (cromosoide): material gentico
o Ribosomas: sntesis de protenas
o Membrana citoplasmticas (mesosoma)
o Pared celular
Estructuras no esenciales (accesorias): solo a veces
o Flagelos: movilidad
o Fimbrias (Pili)
o Capsula (glicoclix)
o Esporas
o Vesculas o grnulos de almacenamiento
Citoplasma bacteriano
- Carece de compartimentos.
- En la bacteria no hay organelos membranosos (sistema de endomembrana)
- Constituido principalmente por agua 70%
- 30% macromolculas biolgicas: protenas, lpidos, carbohidratos y cidos nucleicos.
- En l se encuentra el material nuclear, cromosomoide (parecido al cromosoma).

Nucleoide bacteriano: cromosoma bacteriano


Contiene toda la secuencia gentica, genmica de la bacteria que requiere para dividirse, infectar, etc.
Longitud de 4,8 millones de pares de bases, mediante tratamiento con detergente cuando se libera
tiene una longitud de aprox 1 milmetro.
Una bacteria mide 1 micrmetro: 1 milmetro = 1000 micrmetros. ADN estirado ocupa una extensin
de mil veces ms grande que la bacteria.
ADN circular de doble hebra (sobreenrollado)
nico
Mapeado: como los genomas estn secuenciados pero adems cartografiado, mediante enzima de
restriccin se sabe las zonas genmicas y esto permite usarlas como herramientas biotecnolgicas: para
clonar o para expresarlos.
En si no es cromosoma porque no tiene histonas. No tiene la misma estructura empaquetada de la
cromatina, tiene un mecanismo diferente.
Sper enrollado y empaquetado, comprimido dentro de la bacteria.

Genoma bacteriano: Los plasmidios


- Otro tipo de secuencia gentica que puede estar dentro de la bacteria
- ADN de doble hebra, circular.
- De tamao variable, menor al cromosoma
- Pueden estar en copias mltiples. Puede tener 1, millones o ninguno. Depende de la experiencia sexual
de la bacteria.
- Contienen genes que permiten a la bacteria adaptarse a los ambientes hostiles. Mediante genes que
estn en los plasmidios se hacen resistente a los antibiticos, accin de los metales pesados, contienen
rutas metablicas, pueden codificar para una toxina o para un factor de virulencia.
- Se replican de manera autnoma al cromosoma.
- Se pueden transferir mediante un proceso llamado conjugacin: transmiten ese plasmidio a otra
bacteria. Es por esto que adquieren con tanta facilidad factores de resistencia. Uno aprende y se lo da a
otro que no lo tiene.

Membrana citoplasmtica
En las bacterias es igual a la que se conoce, responde al modelo del mosaico fluido: una bicapa de
fosfolpidos con protenas integrales de membrana, algunas perifricas (solo en una hoja) y otras
integrales (atraviesan toda la membrana). Cabezas polares quedan hacia afuera y las colas hidrofbicas
interaccionan entre ellas formando la bicapa.
Carece de esteroles: colesterol. Este en eucariontes controla la fluidez, pero en bacteria no se cumple.
Excepto los micoplasmas que tienen hopanoides, que son molculas parecidas al colesterol.
Semipermeable, separa medio externo del interno, tiene permeabilidad selectiva permitiendo el paso
de sustancias a travs de ella.
Las bacterias no tienen mitocondria. En su hoja interna de la membrana contiene las enzimas de la
cadena respiratoria y la ATPsintetasa. Aqu ocurre la fosforilacin oxidativa. Tiene actividad
metablica.
Tambin en la membrana estn las enzimas para la fabricacin de lpidos. En eucarionte lo hace el REL.
Cumple el papel de los organelos membranosos presentes en las clulas eucariticas.
Tiene una serie de receptores que le permiten censar o hacer sealizacin.
Puede hacer quimiotaxis: pueden censar el ambiente cuando hay alimento, un metabolito, cuando hay
peligro, etc.
Como es semipermeable, hay transforme que es regulado por la membrana. Protenas integrales
muchas son canales, parte hidrofbica por fuera interacciona con la bicapa y su lumen permite el paso
de solutos o iones (es hueca).
Se describen tres tipos de canales:
o Sistema uniportador: solo mueve un tipo de molculas. Ej.: potasio.

o
o

Sistema simportador: paso de dos molculas diferentes simultneamente, hacia adentro o


hacia afuera. Ej.: fosfato y protones, sulfato y protones.
Sistema antiportador: ingresa una y sale otra diferente. Ej.: protones y sodio.

Mesosoma: organelo presente en la membrana.


- Estructura bacteriana que se une a una zona del cromosomoide bacteriano cuando se va a duplicar.
- Cuando se duplica la bacteria tiene dos cromosomoide y el proceso de divisin de llama biparticin
o fisin binaria, empieza a crecer pegada al mesosoma y cuando est casi listo para separarse se
forma un tabique o septo.
- Asegura que cada clula hija reciba una copia del cromosomoide.
- Segregacin de los cromosomas bacterianos.
- Es lo que hace el centriolo con el uso huso mittico en eucarionte, en metafase.

Ribosomas
- Se encargan de la sntesis de protenas.
- Constituidos por dos subunidades:
o Una menor de 30S:
5S: aprox 120 nucletidos
16S: aprox 1500 nucletidos. Unidad ribosomal que se ha secuenciado en todos los
microorganismos y es el que evolutivamente ha variado menos entre las bacterias, se usa
para estudios evolutivos para encasillar una bacteria. Se clasifican segn similitud gentica.
23S: aprox 2900 nucletidos.
o Una mayor de 50S
- se encuentran libres en el citoplasma. No hay endomembrana, ni RER
- formado por una molcula de cido ribonucleico: ARN ribosomal y est constituido por protenas que
se unen a esta estructura. Forma asociaciones internas o LUP. ARN de cadena simple y lineal, pero en
este caso es largo y se asocia entre s mismo formando estructuras secundarias y se le van pegando
protenas que son ribonucleoproteinas. Esto le da la estructura.
- Cuando se le agrega detergente se puede ir fraccionando los componentes y las subunidades.
- En comparacin con los eucariontes: de menor tamao.
- Ribosomas de los cloroplastos y de las mitocondrias son similares a los de ribosomas procariontes
(pequeo 70S). Uno de las razones para decir que pudieron haber sido bacterias antes teora
endosimbiotica, fueron atrapados por una clula de mayor volumen.

Hasta la membrana plasmtica todas las bacterias se parecen


De la pared hacia afuera empiezan las diferencias importantes.
Pared celular
Formada por una molcula que se llama peptidoglicano o peptidoglican. Es un polisacrido.
Existen dos tipos de paredes, que permiten clasificarlas a travs de un mtodo qumico que es una
tincin que se conoce como la tincin de Gram:
o Gram (+): color violeta/morado/purpura
o Gram (-): color rosado
Diferencia de color viene dado por su distinta estructura.

Peptidoglicano
- Es un polisacrido.
- Componente principal de la pared.
- Tiene muchas propiedades biolgicas:
o Antifagocitico: la inhibe, por la tanto es factor de virulencia.
o Inmunognico: crea respuesta inmunolgica.
o Mitgenico (linfocitos): estimula la proliferacin celular (mitosis)
o Pirgeno: produce fiebre o incremento de temperatura.
o Inductor de inflamacin crnica.
- Funciones:
o Proteccin osmtica (citoplasma de la bacteria es hipertnico)
o Mantencin de la forma bacteriana: por su rigidez
o Precursor de su propia biosntesis.
o Papel fundamental en la divisin celular.
- Qumicamente formado por unas subunidades repetitivas de dos azucares:
N-acetil glucosamina (NaG)
Acido N-acetil murmico (Mur).
- Una capa del peptidoglicano es una secuencia de NaG y Mur, mediante un enlace -1-4 glucosidico.
Desde la molcula de cido N-acetil muramico emerge tetrapeptido, con una combinacin de 4
aminocidos. Las capas se cruzan entre si y linealmente estn unidas por -1-4 glucosidico y entre las
capas la enzima transpeptidasa bacteriana (PBP: penicillin binding protein/protena de unin a

penicilina) se encarga de unir el tercer aminocido de una cadena con el cuarto de la otra mediante un
enlace peptdico (uno de los ms resistentes). Formando una red alrededor de la bacteria, lo que le da
una gran resistencia. Transpeptidacion.
En las secreciones se tiene una enzima llamada lisozima que est presente en las lgrimas, en la saliva,
en la sangre y los fluidos en general. Esta enzima es un antibitico natural porque es una -1-4
glucosidasa, es decir, rompe los enlaces -1-4 glucosidicos. Cuando entra una bacteria en el ojo la
bacteria no se instala porque las lgrimas tienen un efecto microbicida (cloruro de sodio y lisozimas).
Peptidoglicano resistente, cuesta romperlo. Cuando se necesita romperlo se puede estar casi 3-4 horas.
En un medio de cultivo se le agrega un curso de ultrasonido, para que no se caliente el lquido se tiene
en un pocillo con hielo para lograr romper el cultivo.
La bacteria siempre se quiere reventar. Se estima que la presin dentro de la bacteria es como 2
atmosfera, ya que tiene muchas cosas en su interior y es el peptidoglicano el que lo contiene, entonces
si falla se rompe.
Antibiticos betalactamicos: penicilinas, cefalosporinas (amoxicilina, ampicilina, cefradina, etc.) y estos
inhiben a la transpeptidasa bacteriana. Inhibe sntesis de la pared. Peptidoglicano se torna laxo, dbil y
bacteria se revienta. Inhibicin competitiva. Betalactona (del peptidoglicano) de los betalactamicos
tiene mayor afinidad a los transpeptidasa.

Biosntesis del peptidoglicano


Monmeros se sintetizan en el citoplasma de la bacteria a travs de una va metablica.
Los componentes ensamblados NaG y Mur son transportados hacia el exterior por un lpido que se
conoce como bactoprenol (carrier lpido) que se une a las subunidades y logra atravesar a travs de la
membrana para dejarlos dispuestos en el exterior de la bacteria donde se requiere.
Gram (+)
- Gruesa capa de peptidoglican con enlaces tetrapeptidos (transpeptidacion)
- Algunas protenas que se asocian a la pared celular en algunas bacterias (ej. A y M)
- Dos tipos de molculas:
o cidos teicoicos: nacen desde el peptidoglicano. Polmero de ribitol fosfato (metilo y fosfato)
o cidos lipoteicoicos: nacen desde la membrana. Polmero de glicerol fosfato que est anclado a
lpido de la membrana
Funciones:
Estabilizan el peptidoglicano
2+
Permiten la captura de magnesio (Mg ): cofactor enzimtico importante para varias
enzimas bacterianas.
Permiten la adhesin celular: adhesina, se puede unir a un epitelio por ejemplo.

Receptores para bacterifagos/fagos (virus de bacterias)


Receptores para bacteriocinas: antibiticos fabricados por las mismas bacterias que usan
para inhibir a otra especie.
Le dan la carga negativa a la pared
Son PAMPs (asociado a patgeno).
Autolisinas: enzimas que participan en el proceso de modelamiento, sntesis y degradacin del
peptidoglican. Para reproducirse, crecer o dividirse necesita romperlo. Forman parte del ciclo vital de la
bacteria. Ej.:
o Glucosidasas: hidrolizan uniones entre NaG y Mur.
o Amidasas: liberan el tetrapeptido del Mur.
o Endopeptidasas: hidrolizan (rompen) enlaces peptdicos dentro de tetrapeptidos puente.

Gram (-)
Tienen doble membrana: una citoplasmtica y una externa.
Entre las membranas queda un espacio: espacio periplasmico. Aqu se encuentra una delgada capa de
peptidoglicano.
En el espacio periplasmico ocurren reacciones bioqumicas, ya que es un ambiente oxidante
Membrana externa asimtrica:
o Hoja interna: contiene fosfolpidos (como todas las biomembranas)
o Hoja externa: existe un lpido llamado LPS o LOS (lipopolisacaridos y lipooligosacarido).
o Porinas: protenas transmembrana huecas que permiten el paso de solutos por su lumen.

Espacio periplasmico
- Ocurren reacciones bioqumicas
- contiene tres tipos de protenas:
o Enzimas hidrolticas (metablicas, detoxificantes)
o protenas de unin para sustratos especficos (carriers) sistemas de transporte.
o Quimiorreceptores: involucrados en la quimiotaxis (capacidad de reaccionar frente a
estmulos qumicos, acercndose o alejndose)
- Ambiente altamente oxidante, ocurren reacciones de oxidacin, formacin de puentes disulfuros
intra e inter molecular.
- Representa entre un 20 a 40% del volumen total de la clula.
- Contiene una delgada capa de peptidoglicano.
Lipoprotena
- Protena de bajo peso molecular 7kDa.
- La protena ms abundante de la bacteria, 700 mil molculas por bacteria.

Une la membrana externa al peptidoglicano. Se une a uno de los aminocidos del tetrapeptido y
por el otro se inserta no covalentemente (por atraccin hidrosttica, hidrofbica, Van der Waals >
dbiles) por la membrana externa.

Porinas
- Configuracin de barril (16 a 18 hebras empacadas antiparalelas) > secundaria.
- Cara externa alberga todos los aminocidos hidrofbicos que interaccionan con los lpidos. Solutos
hidrofbicos pasan por la membrana externa, pero si son hidrofilicas pasan por las porinas.
- Por dentro es hidrofilica (por sus aminocidos).
- Ejemplo: vancomicina, se usa para infecciones intrahospitalarias, para bacterias Gram(+)
multiresistentes a todos los antibiticos. Tiene efecto sobre el peptidoglican (bloquea su sntesis).
La molcula es muy grande entonces no pasa por las porinas, por lo que no se puede usar para
Gram(-). El tratamiento cuesta alrededor de 5 millones.

Lipopolisacaridos (LPS)
- En la hoja externa de la membrana externa.
- Altamente antignica
- Factor de virulencia ms poderoso de las bacterias Gram(-)
- Tiene una porcin unida a la membrana que se conoce como lpido A o endotoxina bacteriana,
luego tiene un core polisacrido con subunidades repetitivas y una cola que emerge de la bacteria
que se conoce como antgeno O u antgeno somtico.
- Ejemplos: escherichia spp., salmonella spp., shigella spp. Y klebsiella spp. (SPP > todas las especies).
- Lpido A o endotoxina bacteriana, tiene efectos de:
o fiebre
o hipotensin
o CID (coagulacin intravascular diseminada)
o Shock endotoxico > infeccin por sepsis (falla multiorganica, muerte). Infeccin por
septicemia.
*si se trata con antibitico de amplio espectro, la bacteria se muere rpidamente, se rompe y
se liberan millones de molculas de polisacridos de endotoxina, la persona se puede morir si
no se elimina toda esta molcula. Va a necesitar dilisis, recambio sanguneo.
- Antgeno O u Antgeno somtico: altamente antignico y se usa para identificar a las bacterias, ya
que cada especie tiene su antgeno O.

Lipooligosacaridos (LOS)
- Poseen la misma estructura base del LPS, solo que presenta pocas unidades repetidas de un
monmero compuesto por distintos hidratos de carbono.
- Ejemplo: Haemophilus influenzae y Neisseria spp.

ESTRUCTURAS ACCESORIAS
Por fuera de todo lo antes mencionado.
Exopolisacridos (glicoclix)
Capa o cubierta de polisacrido que se dispone por fuera de la pared celular de bacterias Gram(+) y Gram(-).
Cpsula
No todos lo tienen.
Factor de virulencia importante
Ms resistentes a la accin del complemento, a la fagocitosis.
Polisacrido que se une firmemente a la bacteria
Rgida y compacta
Importante en la patogenicidad > se puede defender del sistema inmunolgico, ya que inhibe la
fijacin de complemento (una de las primeras etapas en la respuesta innata).
Facilita adherencia a superficies inertes.
Inhibe la fagocitosis ya que se defiende.
Reserva de mucopolisacaridos.
Propiedades antignicas (genera respuesta).
Ejemplo: meningococo w135, klebsiella pneumoniae.
Capa mucoide
Capsula pequea
Es como el glicoclix de las bacterias
Se une dbilmente a la bacteria, es ms flexible, mas laxo
Solo se forma in vivo (bacterias dentro del cuerpo)
Capacidad de promover la adherencia, pueden formar bio pelculas o biofilm > se adhieren a
superficies inertes. Ej. biofilm: placa bacteriana (esmalte dental).
Inhibe el complemento, la fijacin de anticuerpos y antibiticos.

Apndices proteicos
Fimbrias
Pelos proteicos que emergen desde el cuerpo de la bacteria. Apndices o microfibrillas.
Actan como factores de adherencia.
Definen tropismo en tejidos y rganos (infecciones son especificas).
Bacteria se puede pegar al epitelio que est infectando.
Protena fimbrillina (hper variable, hacen mutacin para que los anticuerpos sean ineficientes).
Ejemplo salmonella.
Pilus (Pili)
Apndice nico de mayor longitud
Polmero de protena retrctil > protena Pilina (hper variable, hacen mutacin para que los
anticuerpos sean ineficientes).
Intervienen en el proceso de conjugacin bacteriana > intercambio gentico o sexual que hacen las
bacterias de plasmidios. Una bacteria acta como donante y la otra receptora, enva todos los
plasmidios que se replican. De esta manera logran hacerse ms resistentes.

Flagelo
- Permite la movilidad
- Diferente al eucarionte: no tiene microtubulos
- Pequeo nanomotor
- Movilidad le da el factor de virulencia.
- Depende de su ubicacin tiene importancia taxonmica: la disposicin en la clula se usa para poder
identificar a la bacteria:
o Pertricos: Tiene muchos flagelos alrededor de su cuerpo. Se mueven lento de manera
elegante, como barco egipcio. Ejemplo escherichia coli
o Polar: en un solo extremo, es muy rpida. Ejemplo listeria
o Loftricos o anfitricas: tiene un penacho de flagelos. Movimiento desordenado.
- Tiene una estructura que se diferencia en:
Filamentos: hlice, lo que sale del cuerpo de la bacteria. Formado por una protena llamada
flagelina (hipervariable).
Gancho: se sujeta a la membrana externa
Cuerpo basal: motor propiamente tal.
Gram (-) > cuatro anillos: dos lo anclan a la membrana plasmtica (S-M), uno al
peptidoglican (P) y otro al lipopolisacarido (L). Lo que gira es lo de adentro (filamento).
Gram (+) > dos anillos: S y M anclados a la membrana y al peptidoglican.
- Se mueve en un solo sentido: de izquierda a derecha o viceversa.
- Para moverse ocupa la cadena respiratoria: no necesita hidrolizar ATP, lo hace por los protones que se
van acumulando en la cara interna de la membrana (pasndolos a travs del lumen del motor por el
cuerpo basal) y esto le permite girar. En una sola vuelta se necesitan mil protones.

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