Professional Documents
Culture Documents
Thng 6. 2005
TRNG I HC AN GIANG
KHOA NNG NGHIP TI NGUYN THIN NHIN
Ch tch Hi ng
DUYT
BAN CH NHIM KHOA NN - TNTN
TIU S C NHN
Con lun khc ghi cng n cha m chu bao gian lao kh
nhc nui dy con c nh ngy hm nay.
TM LC ii
iii
MC LC
vi
DANH SCH HNH
vii
DANH SCH BNG
1
Chng 1: GII THIU
1
1.1. t vn
1
1.2. Mc tiu nghin cu
2
Chng 2: LC KHO TO LIU
2
2.1. Thnh phn ha hc ca sa ti
2
2.1.1. Nc
2
2.1.2. Protein
4
2.1.3. Lipid
5
2.1.4. Carbohydrat
5
2.1.5. Vitamin v cht khong
6
2.1.6. Enzyme
7
2.2. H vi sinh vt trong sa
7
2.2.1. H vi sinh vt bnh thng trong sa
8
2.2.2. H vi sinh vt t gp trong sa
8
2.2.3. Cc vi sinh vt gy bnh trong sa
9
2.3. Cc yu t nh hng n thnh phn v sn lng sa
9
2.3.1. Nhn t di truyn
9
2.3.2. Cc yu t v mi trng
10
2.3.3. Cc yu t sinh l
10
2.3.4. Cc nhn t khc
10
2.4. c tnh vt l ca sa
10
2.4.1. T trng
11
2.4.2. Cht kh tng s
11
2.4.3. im nng chy 11
2.4.4. pH 11
2.4.5. Kh nng m v acid chun 12
2.4.6. nh nhit 13
2.5. Cht lng sa ti 13
2.5.1. Trng thi bn ngoi cu sa 13
2.5.2. Mi v ca sa 13
2.6. Nhng bin i ca sa trong qu trnh thanh trng 14
2.7. Sa ln men yaourt 14
2.7.1. Ngun gc 15
2.7.2. Qui trnh sn xut yaourt tri cy tham kho 16
2.7.3. Thuyt minh qui trnh 17
2.8. Qu trnh ln men lactic trong sa 17
2.8.1. Vi sinh vt trong sn xut yaourt 18
2.8.2. Qu trnh sinh ha trong sn xut yaourt 20
2.8.3. Cc ch tiu cht lng chnh ca yaourt 20
2.8.4. Chun b chng vi sinh vt trong sn xut yaourt 21
2.9. Mt da nhuyn 22
2.10. Cc phng php o lng s tng trng ca vi sinh vt 22
2.10.1. Mt s vi sinh vt 22
2.10.2. Cc phng php m vi sinh vt 24
2.10.3. S tng trng ca vi sinh vt 25
Chng 3 PHNG TIN V PHNG PHP NGHIN CU 25
3.1. Phng tin th nghim 25
3.1.1. a im v thi gian th nghim 25
3.1.2. Nguyn liu 25
3.1.3. Thit b - dng c th nghim 25
3.1.4. Ha cht s dng 25
3.2. Phng php th nghim 26
3.3. Ni dung v b tr th nghim 26
3.3.1. Phn tch thnh phn c bn ca nguyn liu 27
3.3.2. Th nghim 1 30
3.3.3. Th nghim 2 31
3.3.4. Th nghim 3 32
3.4. Phng php x l kt qu 33
Chng 4 KT QU V THO LUN 33
4.1. Thnh phn c bn ca sa ti
4.2. nh hng ca lng ging s dng v nhit ln men n cht lng 33
yaourt tri cy
4.2.1.nh hng ca lng ging s dng n s hnh thnh acid lactic v
thi gian ln men ca dch sa khi ln men cc nhit khc nhau 33
4.2.2. nh hng ca lng ging s dng v nhit ln men n thi gian
ln men, tc hnh thnh acid lactic trong thi gian n nh 38
4.2.3. nh hng ca nhit ln men v t l men n s pht trin ca vi
khun lactic trong qu trnh ln men 42
4.2.4. nh hng ca lng ging s dng v nhit ln men n cht
lng yaourt tri cy 44
4.3. nh hng ca t l mt khm b sung n cht lng cm quan ca
sn phm yaourt tri cy 46
4.4. nh hng ca nhit ln men kt thc n thi gian ln men v cht
lng cm quan ca sn phm 47
Chng 5 KT LUN V NGH 49
5.1. Kt lun 49
5.2. ngh 50
DANH SCH BNG
Bng s Ta bng Trang
1 Thnh phn ho hc ca 1 lt sa ti 2
2 T trng ca sa t cc ngun ng vt khc 11
3 Cc bin i sinh ho ch yu xy ra trong qu trnh ln men 20
4 Phng php phn tch thnh phn c bn nguyn liu 27
5 B tr th nghim 1 28
6 Bng im m t i vi ch tiu cu trc, trng thi, mi v sn 29
phm
7 B tr th nghim 30
8 B tr th nghim 3 32
9 Thnh phn c bn sa nguyn liu 33
10 nh hng ca lng ging s dng v nhit ln men n thi 34
gian ln men v tng acid trong qu trnh ln men
11 im trung bnh nh gi cm quan theo lng ging s dng 44
cc nhit ln men khc nhau
12 im trung bnh nh gi cm quan theo t l mt khm b sung 46
13 im trung bnh nh gi cm quan theo cc nhit ln men 47
khc nhau
DANH SCH HNH
Hnh s Ta hnh Trang
1 Qui trnh sn xut yaourt tri cy tham kho 15
2 Qu trnh sinh ho trong sn xut yaourt 18
3 Qui trnh sn xut yaourt tri cy d kin 27
4 S b tr th nghim 1 28
5 Qu trnh ln men yaourt 30
6 Yaourt c ln men 300C n acid dng 31
7 Yaourt c ln men 370C n acid dng 33
8 Yaourt c ln men 420C n acid dng 34
9 S b tr nghim 2 34
10 S b tr th nghim 3 43
11 th biu din hm lng acid hnh thnh theo thi gian (nhit 35
300C)
12 th biu din hm lng acid hnh thnh theo thi gian (nhit 35
370C)
13 th biu din hm lng acid hnh thnh theo thi gian (nhit 36
420C)
14 th biu din thi gian ln men theo lng ging s dng 37
t acid dng (nhit 300C)
15 th biu din thi gian ln men theo lng ging s dng 37
t acid dng (nhit 370C)
16 th biu din thi gian ln men theo lng ging s dng 37
t acid dng (nhit 420C)
17 th biu din thi gian ln men theo nhit ln men t 38
acid dng (t l men ging l 1%)
18 th biu din thi gian ln men theo nhit ln men t 38
acid dng (t l men ging l 3%)
19 th biu din thi gian ln men theo nhit ln men t 39
acid dng (t l men ging l 5%)
20 th biu din hm lng acid hnh thnh trong thi gian n 39
nh theo lng ging s dng (nhit 300C)
21 th biu din hm lng acid hnh thnh trong thi gian n 40
nh theo lng ging s dng (nhit 370C)
22 th biu din hm lng acid hnh thnh trong thi gian n 40
nh theo lng ging s dng (nhit 420C)
23 th biu din tng acid trong thi gian n nh theo 41
lng ging s dng (nhit 300C)
24 th biu din tng acid trong thi gian n nh theo 41
lng ging s dng (nhit 370C)
25 th biu din tng acid trong thi gian n nh theo 41
lng ging s dng (nhit 420C)
26 th biu din tng acid trong thi gian n nh lnh 43
theo nhit ln men (t l men 1%)
27 th biu din tng acid trong thi gian n nh lnh 43
theo nhit ln men (t l men 3%)
28 th biu din tng acid trong thi gian n nh lnh 43
theo nhit ln men (t l men 5%)
29 th biu din mt vi sinh vt giai on bt u qu trnh 45
ln men, giai on dng trc khi phi mt qu, v giai on
sau qu trnh ln men (nhit 300C)
30 th biu din mt vi sinh vt giai on bt u qu trnh 45
ln men, giai on dng trc khi phi mt qu, v giai on
sau qu trnh ln men (nhit 370C)
31 th biu din mt vi sinh vt giai on bt u qu trnh 46
ln men, giai on dng trc khi phi mt qu, v giai on
sau qu trnh ln men (nhit 420C)
32 th biu din thi gian ln men theo nhit ln men trong 46
thi gian n nh lnh
33 Sn phm yaourt tri cy 48
34 Qui trnh sn xut yaourt tri cy t sa b ti 49
Chng 1 GII THIU
1.1. t vn
Sa l thc phm t nhin c gi tr dinh dng hon ho. Sa cha hu ht
cc cht dinh dng cn thit cho ngi nh: protein, lipid, cc vitamin, cc mui
khong. T sa, c th lm ra nhiu sn phm b dng, c a chung nh: b,
phomai, sa chua
Yaourt, mt sn phm c ln men t sa, l loi thc phm c tc dng tt
i vi c th v c dng rt ph bin. Do trong qu trnh ln men yaourt, to ra
acid lactic c kh nng ngn chn bnh ung th v hn ch vi sinh vt hot ng phn
gii lipid, protein, gip bo qun sa. Sn phm s c tiu ho cao bi cc cht
chuyn sang dng c th d hp th, t bit l i vi ngi gi v tr em.
p ng nhu cu th hiu ngi tiu dng, mt trong nhng cch a
dng ho sn phm l b sung tri cy vo yaourt. Bn cnh tc dng lm tng hm
lng vitamin v cht khong, tri cy cn to hng, v c trng, mu sc hp dn
hn i vi sn phm.
1.2. Mc tiu nghin cu
Xut pht t nhng yu cu trn ti tp trung nghin cu nhng vn sau:
- Kho st nh hng ca t l ging vi khun s dng v nhit ln men
n cht lng ca yaourt tri cy.
- Kho st nh hng ca t l mt khm b sung n cht lng yaourt tri
cy.
- Kho st nh hng ca nhit ln men kt thc n cht lng yaourt tri
cy.
Chng 2 LC KHO TI LIU
Phi trn
C c
ng ho
Thanh trng
Lm ngui
Ging VK Cy ging
Ln men
Lm lnh
Bo qun lnh
Khuy trn
Sn phm
Hnh 1: Qui trnh sn xut yaourt tri cy tham kho
(Dng Th Phng Lin ,2000)
2.7.3. Thuyt minh qui trnh
Nguyn liu: Yaourt c sn xut t sa nguyn kem, sa tch bo hoc tch
bo mt phn, 25% sa ti. Hn hp sa dng ch bin phi cha 12 15% cht
kh khng bo. tng hm lng cht kh trong sn phm, b sung thm 2 3%
sa bt tch bo. Yu cu sa bt s dng b sung l: d phn tn vo pha nc,
ho tan hon ton khng li cc ht th, khng c nhng ht b chy xm li
mu nu cho sn phm.
C c: c tc dng lm gia tng hm lng cht kh tng s trong sa, ngoi
ra cn c tc dng dit trng.
ng ho: ch thch hp nht cho ng ho sa l tin hnh 550C, p sut
200 atm. ng ho sa c tc dng ch yu nh sau: ngn chn s phn li ca kem
trong qu trnh ln men, gim ng knh trung bnh ca cc ht bo, tng nht
nh s gia tng kh nng hp ph ca nhng git bo vo trong micell casein, m
bo trn c mt hn hp ng nht cc thnh phn c b sung t bn ngoi vo
X l nhit ( thanh trng ): ch x l nhit tt nht l 85 900C trong 20
pht hoc tit trng 1200C trong 5 pht. Mc ch chnh ca qu trnh ny l: tiu
dit cc vi sinh vt khng cn thit hin din trong sa, lm sa c mi trng dinh
dng tinh khit thch hp cho s pht trin ca vi sinh vt yu cu, to sn phm c
nht yu cu, ui oxy t hn hp to iu kin thch hp cho vi sinh vt ging
yu cu. Khi thanh trng Pasteur, protein nht l -lactose globulin b bin tnh. Khi
nhit trn 1000C, phn ln cc protein ca lactoserum c th trng thi lin kt
vi cc micell casein. Mc d vi hm lng nc cao, vic thanh trng cng ko
theo phn ng Maillard, gy ra mu nu v c th gy cho sa c mi nu cho sa.
Mi nu tng ln ph thuc vo thi gian v nhit thanh trng v lng oxygen
trong sa.
Lm lnh: mc ch chnh ca qu trnh ny l iu khin acid trong sn
phm dng li nng thch hp, tc lm lnh c th nh hng n cu trc
ca khi ng. Lm lnh qu nhanh s xy ra hin tng phn ly nc sa do s co
li qu nhanh ca protein c nh hng n c tnh ht nc, i vi yaourt b sung
mi, nn lm lnh yaourt n nhit 15 200C trc khi b sung mi hay dch qu
sau khi bao gi s lm lnh tip n <50C.
Bao gi: mc ch chnh ca vic bao gi l ngn chn sn phm b nhim bn,
nhim vi sinh vt t mi trng ngoi, ngn chn tip xc vi khng kh, nh sng.
Vt liu bao gi khng c cha c t, khng c nhng phn ng ha hc xy ra gia
vt liu v bao gi.(Dng Th Phng Lin,2000)
2.8. Qu trnh ln men lactic trong sa
2.8.1. Vi sinh vt trong sn xut yaourt
Cht lng sa chua ph thuc rt nhiu vo cht lng ca chng. i vi
tng loi sa chua, ngi ta dng cc chng khc nhau, m bo sao cho sa chua c
mi v c trng.
Mt s chng vi sinh vt thng dng: Streptococcus lactic, Streptococcus
cremoric, Streptococcus diacetyl lactic, Streptococcus thermophilus, Lactobacillus
bulgaricus
Trong qu trnh ln men, cc chng vi sinh vt ny khng ch sn sinh ra acid
lactic m cn cc acid bay hi, kh CO2, este, diacetyl. Kt qu to cho sn phm c
mi thm c trng. Vi khun cn thit trong qu trnh ch bin yaourt l
Streptococcus Thermophilus v Lactobacillus Bulgaricus. Streptococcus
thermophilus pht trin nhanh hn Lactobacillus bulgaricus v nhit thch hp cao
hn mt t. n khi s pht trin ca Streptococcus thermophilus b chm li do acid
sinh ra, lc ny Lactobacillus bulgaricus s pht trin v lm acid tng ln n khi
t cn bng gia 2 loi. Khi sn phm c n nh.
Nhiu ngi cho rng Streptococcus to ra acid lactic cn Lactobacillus quyt
nh mi v v cu trc sn phm, nhng cng c gi thuyt cho rng Streptococcus
thc y nhiu qu trnh sinh ho to hng thm c trng.
Khi ly tng ging ring l th mi v v cu trc khng bng s kt hp cn
i gia 2 loi. Do , t l gia 2 ging thch hp nht l 1:1.
Lactobacillus bulgaricus l vi khun ln men in hnh, pht trin tt nhit
45 500C trong mi trng c acid cao v c th to n 2,7% acid lactic t
ng lactose.
Streptococcus thermophilus l vi khun lactic chu nhit ln men in hnh,
pht trin tt nhit 500C v sinh sn tt nhit 37 400C nhng ch pht
trin c trong mi trng c acid thp hn Lactobacillus bulgaricus.(Nguyn
Th Xun, 2001)
2.8.2. Qu trnh sinh ho trong sn xut yaourt
Qu trnh sinh ho ch yu trong ln men sa chua l ng lactose u tin
c chuyn ho thnh glucose v galactose, sau , cc ng n ny chuyn
thnh acid pyruvic v cui cng chuyn thnh acid lactic theo s :
Lactose
Glucose Galactose
CH3CHO
CH3COCOOH
Acetoin
CH3COCHOHCH3
ng th)
Hnh 2: Qu trnh sinh ho trong sn xut yaourt
Acid lactic lm gim gi tr pH ca sa n im ng in ca protein sa
gy nn hin tng ng t ca chng.
Ngoi ra, do casein hin din trong sa di dng caseinate, cht ny di tc
dng ca acid lactic c sinh ra to thnh acid caseinic v lactat calcium. Acid
caseinic t do khng ho tan do to thnh khi ng.
Ngoi sn phm chnh l acid lactic, qu trnh ln men ng lactose cn cho
nhiu sn phm ph khc l cc acid d bay hi, ru, ete, aceton v diacetyl. Cc
bin i sinh ho ch yu trong qu trnh ln men yaourt c tm tt trong bng 3.
Bng 3: Cc bin i sinh ho ch yu xy ra trong qu trnh ln men
Cht tham gia Cc bin i
1. Trao i cht 1. Lactose b thu phn bn trong t bo vi khun bng enzim - D
Cacbohydrat Galactosidase to thnh glucose v galactose. Glucose c s
dng ch yu chuyn ho thnh acid lactic.
2. Phc h calcium- caseinate- phosphate b mt n nh do s
hnh thnh acid lactic dn n s to thnh khi ng yaourt.
3. S to thnh nhng thnh phn mi trong yaourt do bi qu
trnh ln men ca ng sa nh: acetaldehyde (2,4 4,1 ppm),
aceton (1 4 ppm), acetoin (2,5 4 ppm), diacetyl (0,4 13 ppm).
2. Thu phn 1. Ging vi khun trong sn xut yaourt c kh nng thu phn
protein protein mc thp to thnh cc peptid v acid amin, cc cht
ny tham gia vo cc phn ng ha hc v phn ng enzim to
thnh nhng hp cht mi.
2. C Streptococcus thermophillus v Lactobacillus bulgaricus u
to c enzim peptidase phn gii protein to thnh cc peptid
gy ng. Kt qu ca qu trnh thu phn protein l to thnh
nhiu acid amin t do
3. Thu phn Ging vi khun ln men yaourt cng c th phn gii lipid mc
cht bo no (c bit i vi cc triglyceride mch ngn) v sn
phm phn gii ny gp phn c ngha vo mi sn phm cui
cng.
4. Cc cht Thnh phn niacin, acid pholic gia tng nhng cc vitamin khc
khc nh vitamin B1, B12, B6, B5 b phn hy tng i nhiu.
2.8.3. Cc ch tiu cht lng chnh ca yaourt
Ch tiu cht lng chnh ca yaourt l cu trc hnh thi, mi v ca sn
phm. sn phm c th chp nhn c cc ch tiu ny cn phi m bo cc yu
cu sau:
Mi: sn phm phi c mi thm c trng ca yaourt cng vi mi ca qu
b sung, ht mi sa, khng c mi l.
V: sn phm c v chua va phi, khng qu chua cng khng qu ngt.
Cu trc v hnh thi: sn phm c cu trc chc chn, khng tch nc,
khng ng , mt ct mn, qu phn tn u, bo khng b phn lp, lin kt rt tt.
(Dng Th Phng Lin, 2000)
2.8.4. Chun b chng vi sinh vt trong sn xut yaourt
Chun b chng l khu quan trng, quyt nh cht lng ca cc sn phm sa
ln men. Chng ging thng gm Streptococcus thermophilus v Lactobacillus
bulgaricus. tng hot tnh chng rt ngn thi gian ln men trong sn xut, cn
cy chuyn tip vi ln.Chng ging c chun b nh sau: sa ti c x l
nhit, sau d lm ngui n nhit ln men, cy ging vo, ln men, sau lm
lnh v bo qun.
Kluyver chia vi khun lactic thnh 2 nhm c bn ty theo sn phm ca
qu trnh chuyn ha glucose. Loi vi khun sinh ra phn ln acid lactic sau qu trnh
chuyn ha glucose l vi khun ln men lactic ng hnh. Loi vi khun ny sinh ra
nng lng gp 2 ln vi khun ln men d hnh. Chng s pht trin ty vo nng
glucose, pH v hm lng cht dinh dng trong mi trng. Bn cnh vi khun ln
men lactic ng hnh, loi vi khun ln men lactic d hnh trong qu trnh ln men s
sinh ra mt lng nh acid lactic, cc cht thm nh acetyl-aldehyt, diacetyl. Mt s
vi khun ln men d hnh thng gp l: Leuconostoc, Carnobacterium,
Lactosphaera Vi khun Lactobacillus c chia lm 3 nhm nh: Betabacterium,
Streptobacterium, Thermobacterium. Nhm Streptobacteria (nh Lactobacillus casei
v Lactobacillus plantarum) sinh ra khong 1,5% acid lactic v nhit pht trin ti
u l 300C, trong khi nhm Thermobacteria (nh Lactobacillus acidophilus v
Lactobacillus bulgaricus) c th sinh ra lng acid lactic khong 3% v nhit pht
trin ti u l 400C.(James M.Jay,2000)
2.9. Mt da nhuyn
Da l loi thc vt lp mt l mm (Monocotyledones). Cy c thn ngn
mang mt b l mc thnh hnh hoa th. L dy khng cung, c gai mp, phin l
cong hnh lng mng theo chiu gn gia, m ly thn. Da c trng nhiu cc
vng trung du, qu nh, thm, ngon. Sn lng da ti ca th gii khong 10 triu
tn trn nm, trong Chu khong 5,5 triu tn. Da thng c dng ch
bin cc loi nc qu, mt da ming, hoc mt da nhuyn...
Khi ch bin mt da nhuyn c th s dng ring tng ging da hoc pha
ln c hai loi. Yu cu v chn ca da nh i vi ch bin nc da, nu da
cha chn th sn phm c mu xu v hng v km thm ngon. Da tiu
chun chn (khng cn phn loi theo kch thc) em ra trn my ra bn chi,
ri ct hai u, t li, gt v, ra mt ging nh sn xut hp da nc ng.
Sau , x ti v ch trn my ch c l ry 1 1,5mm thu c pur da, em c
c vi nc ng 70% theo t l sau:
Pur da : 300kg
Nc ng 70% : 100 lt
hoc vi ng tinh th theo t l:
Pur da : 300kg
ng trng : 100kg
Lc u ht mt na nc ng vo ni c c chn khng, nng nhit nc
ng ln 85 900C, ht dn pur da vo v tin hnh c c nhit 60 800C
chn khng 5,88 7,84.104 N/m2 (0,6 0,8 at). Khi kh ca hn hp trong ni
c c t khong 50%, li ht nt nc ng cn li vo ni, ri tip tc c c n
kh 63 64% th ph chn khng nng nhit sn phm ln khong 1000C
tit trng. Khi kh t ti 66 67%, cho sn phm ra khi ni. Rt mt c nhit
khng di 700C vo hp st s 8 sn vecni, sau ghp np v thanh trng theo
cng thc 20-30-20.(Nguyn Vn Tip, Quch nh, Ng M Vn,nm)
1000C
2.10. Cc phng php o lng s tng trng ca vi sinh vt
2.10.1. Mt s vi sinh vt
L s vi sinh vt y trong mt n v khng gian cha chng. Thng thng ta
dng s vsv/1ml trong trng hp m vi sinh vt trong mi trng nui cy lng,
trong nc hoc trong sa,Trong trng vi sinh vt trong t, chng ta thng
dng s vsv/1g t. Trong trng hp si nm, c th dng n v l mg/100g dung
dch hoc dng tc tng trng l cm/ngy.
2.10.2. Cc phng php m vi sinh vt
2.10.2.1 Phng php m trc tip
m t bo sng: dng mt knh ng vt c bit c vch vung vi din
tch c bit r (hemacytometer). Ta nh ln khong dnh m mt git huyn
ph cha vi sinh vt mun m vo. y knh ng vt li, c mt th tch nht nh
cha trong khong vung m. Chng ta dng knh hin vi m s vi sinh vt
nm trong khong vung m y, t suy ra mt s. Phng php ny cho
php m c vi sinh vt cn sng ln cht v ch p dng cho cc vi sinh vt khng
cn nhum mu.
m vi sinh vt nhum (smear count): nh mt th tch nht nh ca
huyn ph mun m ln mt din tch nht nh trn knh ng vt. nh hnh v
nhum mu, thng l vi xanh metylen hoc vi loi mu ph hp vi vi sinh vt
y. Sau m s vi sinh vt trn mt n v th tch, suy ra mt s vi sinh vt y.
Phng php ny p dng cho trng hp phi m cc vi sinh vt kh quan st phi
nhum mu. m tng s vi sinh vt sng v cht trong huyn ph.
m vi sinh vt trn mng lc (membrane filter count): c th cho huyn ph
cha vi sinh vt mun m i qua mt phim dinh dng vi sinh vt mc thnh
khun lc v m s khun lc, suy ra mt s vi sinh vt trong huyn ph. Vi cch
ny chng ta ch m s vi sinh vt cn sng m thi. Chng ta ch c th m trc
tip s vi sinh vt trn mng lc bng cch nhum mu vi sinh vt v lm cho mng
lc trong sut vi immersion oil v m s vi sinh vt di knh hin vi.
Phng php pha long: nguyn tc ca phng php ny l pha long huyn
ph ra nhiu ln. Xong, cho vi sinh vt hin ln bng khun lc m s vi sinh vt
trn huyn ph pha long, t suy ra mt s vi sinh vt trn huyn ph gc.
Kt qu ca phng php ny cho chng ta con s gn ng nht (Most probable
number) ca mt s huyn ph ch khng c c con s chnh xc. Phng php
ny cho php m vi sinh vt sng, khng m c vi sinh vt cht. Do sai s
thng rt ln, do phi thc hin m 2 hoc 3 ln v ly tr s trung bnh,
gim bt sai s.
2.10.2.2 Phng php m gin tip
Phng php o c ca huyn ph vi sinh vt: thng c dng m
bo t nm trong huyn ph. Nguyn tc ca phng php ny l dng chm tia sng
n sc chiu xuyn qua huyn ph cha vi sinh vt mun o, vi sinh vt lm phn
tn chm tia sng nhiu hoc t ty theo mt s ca chng trong huyn ph. S tia
sng cn li sau khi xuyn qua huyn ph s kch thch mt t bo quang in
(photoelectric cell). Ty theo cng cn li ca chm tia sng m t bo quang
in nhn c, mt cy kim di ng v ch s phn trm tia sng b phn tn trn
bng ch th. Nu dch em m khng cha vi sinh vt no (th d nh nc ct) th
tt c tia sng xuyn qua v kch thch t bo quang in ti a. Ta iu chnh cho
kim ch th s 100. a huyn ph o vo v c vi sinh vt trong huyn ph nn
mt s tia sng b phn tn i. Ch cn li mt s t xuyn qua v kch thch ln t bo
quang in. Kim ch th s lng tia sng xuyn qua c. So snh vi bng chun s
bit c mt s trong huyn ph. Chng ta c th p dng bin php ny i chiu
vi phng php m trc tip lp mt bng chun tng loi vi sinh vt.
u im: l phng php m vi sinh vt n gin v mau l nht.
Khuyt im: kt qu l mt s ca vi sinh vt cht ln sng, phi lm cho vi
sinh vt phn phi u trong huyn ph.
My m in t (electronic counter): vi loi my m ny, chng ta c th
m c hng ngn t bo vi sinh vt trong vng vi giy. Nguyn tc l vi sinh vt
c a qua tia sng ca mt in t (electronic eye). Vi sinh vt cn tia sng v
ghi du hiu trong b m ca my.
o trng lng kh ca vi sinh vt: y l phng php o cc vi sinh vt a
bo (th d si nm nui trong mi trng dinh dng lng v trong mi trng ny
chng ta thng so snh mc tng trng hn l m mt s). Thng thng,
chng ta trch ly nm bng cch li tm hoc lc, k ra sch, sy kh v cn trng
lng kh. S gia tng trng lng so vi lc u chng t c s tng trng v cho
bit tc tng trng ca nm y.
2.10.3. S tng trng ca vi sinh vt
Trong mt m nui cy thch hp, vi sinh vt thng tng trng theo 4 giai
on chnh:
Giai on chun b (latent phase): trong giai on ny, tc l ngay sau khi nui
cy, vi sinh vt cha tng mt s, c th y l giai on vi sinh vt lm quen vi mi
trng nui cy mi v chun b cho s tng trng vt bc sau .
Giai on tng trng nhy vt (logarithmic phase, exponential phase): vi sinh
vt sau khi am hp vi mi trng mi v chun b cho s tng trng vt bc
sau , bt u nhn mt s ln vi tc rt nhanh theo cp s nhn. Trong giai
on ny mt s tng cng v mt s vi sinh vt sng khng chnh lch nhau nhiu v
trong giai on ny cn nhiu cht dinh dng cung ng nhu cu, nn s vi sinh
vt cht cha tng cao.
Giai on an nh (stationary phase): y l giai on m mt s vi sinh vt
khng tng thm m gi an nh mt mc. Lc ny mt s vi sinh vt cht c tng
nn mt s tng cng chnh lch so vi mt s vi sinh vt sng. Giai on ny c
th do vi sinh vt thu ht v lm cn dn mt vi thnh phn dinh dng hoc l do
tc ng ca vi cht i khng do chnh vi sinh vt y tit ra trong qu trnh tng
trng.
Giai on cht (death phase): mt s vi sinh vt sng gim dn trong khi
mt s vi sinh vt tng cng c hi tng nh. y l giai on trng hp vo lc m
dng cht trong mi trng b hao mn dn hoc do s tch ly cc cht i khng
ngy cng nhiu.(Phm Vn Kim, 2000)
Chng 3 PHNG TIN V PHNG PHP NGHIN CU
Phi ch
Gia nhit
ng ho
Thanh trng
Lm ngui
Ln men kt thc
Bao b, bo qun
Hnh 3: Qui trnh sn xut yaourt tri cy t sa b ti d kin
Cc th nghim c b tr cc giai on : ln men, phi trn mt khm v
giai on ln men kt thc. Mi th nghim lp li 3 ln v kt qu nh gi cm quan
c thng k bng chng trnh Minitab.
3.3. Ni dung v b tr th nghim
3.3.1. Phn tch thnh phn c bn sa nguyn liu
3.3.1.1 Mc ch
Nhm xc nh c hm lng m tng s, cht bo, cht kh, pH, tng s
coliform trong sa nguyn liu.
3.3.1.2 Cch tin hnh
Sa nguyn liu sau khi thu mua v c lc nhm loi b tp cht, sau
tin hnh phn tch theo cc phng php c m t trong bng 4
pH Dng pH k in t
(Phm Vn S,1991)
Phi ch
A1 A2 A3
B1 B2 B3 B 1 B2 B3 B1 B2 B3
Ln men kt thc
(150C, acid dng 0,9 1% acid lactic)
Bao b, bo qun(40C)
Hnh 4: S b tr th nghim 1
B tr th nghim theo 2 nhn t c m t trong bng 5
Bng 5: B tr th nghim 1
Nhit (0C) Men ging (%)
1 (A1) 3 (A2) 5 (A3)
30 (B1)
B A1B1 A2B1 A3B1
37 (B2)
B A1B2 A2B2 A3B2
42 (B3)
B A1B3 A2B3 A3B3
3.3.2.4 Tin hnh th nghim:
Chun b ging: Ging c ly t sa chua do Vinamilk sn xut, c hot
ha, sau dng chng vo yaourt.
Chun b dch sa ln men v cch tin hnh:
Hn hp sa sau khi phi ch vi ng, sa bt tch bo n khi t kh l
18%, c gia nhit n nhit 65 700C, tin hnh ng ha vi p sut 250
kg/cm2 trong thi gian 4 pht. Sau , ln men vi t l men ging v nhit ln
men thay i c trnh by trn s . Trong qu trnh ln men theo di hm lng
acid lactic sinh ra theo thi gian, n khi acid t 0,7% 0,75% th dng li, tin
hnh phi trn mt khm (10%) v tip tc ln men cho n khi t hm lng acid
lactic l 0,9 1%. Sau , bo qun lnh 40C.
Th nghim c lp li 3 ln v c b tr mt cch hon ton ngu nhin.
3.3.2.5 Ch tiu cn xc nh:
cu trc, trng thi, mi v ca sn phm, thi gian ln men. Cc ch tiu c nh
gi bng phng php cho im vi thang im c m t trong bng sau:
Bng 6: Bng im m t i vi ch tiu trng thi, cu trc, mi v sn phm
Ch tiu im M t
5 Khng tch nc, mt ct mn, qu phn tn u, bo khng
b tch lp, lin kt rt tt
4 Tch nc rt t, mt ct mn, qu phn tn u, bo khng
Trng phn lp hoc phn lp t, lin kt tt
thi (cu
3 Tch nc, mt ct hi mn, qu hi b lng, bo b phn lp,
trc)
lin kt tng i tt
2 B tch nc, mt ct khng mn, qu b lng nhiu, b phn
lp r, lin kt khng tt
1 Tch nc hon ton, qu lng ht xung y, bo b phn lp
r, lin kt khng chp nhn c
5 Mi thm v v chua rt c trng ca yaourt v tri cy
4 t c mi thm ca yaourt v tri cy, v chua c trng
3 t c mi thm ca yaourt v tri cy, v hi chua hoc qu
chua
Mi v
2 Khng cn mi thm c trng, v rt chua
1 Sn phm c mi v l
Phi ch
C1 C2 C3
Ln men kt thc
0
(15 C, acid dng 0,9 1% acid lactic)
Phi ch
D1 D2
Bao b, bo qun (40C)
Hnh 6: S b tr th nghim 3
0.8
0.7
0.6
acid (%)
0.5 1 (%)
0.4
3 (%)
0.3
5 (%)
0.2
0.1
0
2 4 6 8 10 11 12
Thi gian ln men (gi)
Hnh 7: th biu din hm lng acid hnh thnh theo thi gian (300C)
0.8
0.7
0.6
acid (%)
0.5 1 (%)
0.4 3 (%)
0.3 5 (%)
0.2
0.1
0
2 4 6 7 8
Thi gian ln men (gi)
Hnh 8: th biu din hm lng acid hnh thnh theo thi gian (370C)
0.9
0.8
0.7
acid (%)
0.6
1 (%)
0.5
3 (%)
0.4
0.3 5 (%)
0.2
0.1
0
2 3 4 5 6 7
Thi gian ln men (gi)
Hnh 9: th biu din hm lng acid hnh thnh theo thi gian (420C)
Bng 10: nh hng ca lng ging s dng v nhit ln men n thi gian
ln men v tng acid trong qu trnh ln men
Nhit (0C) T l ging (%) Thi gian ln men (gi) acid tng (%)
30 1 16 0,050
30 3 15 0,060
30 5 14 0,070
37 1 12 0,065
37 3 11 0,075
37 5 10 0,080
42 1 9 0,070
42 3 8,5 0,080
42 5 8 0,090
T kt qu bng 10 cho thy: cng iu kin nhit , nu lng ging s
dng nhiu th lng vi khun lactic sinh trng v pht trin mnh, gia tng s
lng nhanh hn, lng acid lactic sinh ra nhiu hn v do dch sa t acid
dng trong thi gian ngn hn.
Tng t, lng ging s dng nh nhau, nhit cng cao (37 420C),
gn nhit ti u ca vi khun lactic, th vi khun lactic pht trin nhanh v sinh ra
acid lactic nhiu hn, thi gian ln men ca dch sa s ngn hn. Ngc li, vi
lng ging s dng thp v ln men nhit thp, vi khun lactic pht trin chm,
sinh ra acid lactic vi s lng t, thi gian ln men s di hn. Cc th 10, 11, 12;
13, 14, 15 s biu din s nh hng ca lng ging s dng v nhit ln men
n thi gian ln men theo cc thng s o c c.
0.8
0.7
0.6
acid (%)
0.5
0.4 1 (%)
0.3 3 (%)
5 (%)
0.2
0.1
0
2 4 6 8 10 11 12
Thi gian (gi)
Hnh 10: th biu din thi gian ln men theo lng ging s dng t
acid dng (300C)
0.8
0.7
0.6
acid (%)
0.5
0.4 1 (%)
0.3 3 (%)
5 (%)
0.2
0.1
0
2 4 6 7 8
Thi gian (gi)
Hnh 11: th biu din thi gian ln men theo lng ging s dng t
acid dng (370C)
0.9
0.8
0.7
0.6
acid (%)
0.5
1 (%)
0.4
3 (%)
0.3
5 (%)
0.2
0.1
0
2 3 4 5 6 7
Thi gian (gi)
Hnh 12: th biu din thi gian ln men theo lng ging s dng t
acid dng (420C)
12
10
Thi gian (gi)
8
6
4
2
0
30 37 42
0
Nhit ln men ( C)
Hnh 13: th biu din thi gian ln men theo nhit ln men t acid
dng (t l men ging l 1%)
12
10
Hnh 14: th biu din thi gian ln men theo nhit ln men t acid
dng (t l men ging l 3%)
10
9
8
Thi gian (gi)
7
6
5
4
3
2
1
0
30 37 42
0
Nhit ln men ( C)
Hnh 15: th biu din thi gian ln men theo nhit ln men t acid
dng (t l men ging l 5%)
1
0.9
0.8
0.7
acid (%)
0.6 1 (%)
0.5 3 (%)
0.4 5 (%)
0.3
0.2
0.1
0
10 11 12 13 14 15 16
Thi gian ln men (gi)
Hnh 16: th biu din hm lng acid hnh thnh trong thi gian n nh
theo lng ging s dng (nhit 300C)
1.2
1
acid (%)
0.8
1 (%)
0.6 3 (%)
5 (%)
0.4
0.2
0
6 7 8 9 10 11 12
Thi gian ln men (gi)
Hnh 17: th biu din hm lng acid hnh thnh trong thi gian n nh
theo lng ging s dng (nhit 370C)
1
0.8
acid (%)
0.6 1 (%)
3 (%)
0.4 5 (%)
0.2
0
5 6 7 8 9
Thi gian ln men (gi)
Hnh 18: th biu din hm lng acid hnh thnh trong thi gian n nh
theo lng ging s dng (nhit 420C)
0.07
0.06
0.05
acid (%)
0.04
0.03
0.02
0.01
0
1 3 5
Lng ging (% )
Hnh 19: th biu din tng acid trong thi gian n nh theo lng
ging s dng (nhit 300C)
0.08
0.07
0.06
acid (%)
0.05
0.04
0.03
0.02
0.01
0
1 3 5
Lng ging (% )
Hnh 20: th biu din tng acid trong thi gian n nh theo lng
ging s dng (nhit 370C)
0.1
0.09
0.08
0.07
acid (%)
0.06
0.05
0.04
0.03
0.02
0.01
0
1 3 5
Lng ging (%)
Hnh 21: th biu din tng acid trong thi gian n nh theo lng
ging s dng (nhit 420C)
Da vo th, cng nhit ln men, nu s dng lng ging nhiu th
qu trnh n nh lnh s din ra trong thi gian ngn hn. Do khi s dng lng
ging nhiu, mt s vi sinh vt nhiu hn, chng s sinh ra nhiu acid lactic, tng
acid s ln hn nn sn phm s t acid dng trong thi gian ngn. Vi kt
qu o c c, s dng lng ging l 5%, tng acid trong qu trnh n nh
lnh cao nht, ngc li, vi lng ging l 1%, tng acid trong qu trnh n
nh lnh thp nht.
0.07
0.06
0.05
acid (%)
0.04
0.03
0.02
0.01
0
30 37 42
0
Nhit ( C)
Hnh 22: th biu din tng acid trong thi gian n nh lnh theo nhit
ln men (t l men 1%)
0.08
0.07
0.06
acid (%)
0.05
0.04
0.03
0.02
0.01
0
30 37 42
0
Nhit ( C)
Hnh 23: th biu din tng acid trong thi gian n nh lnh theo nhit
ln men (t l men 3%)
0.1
0.09
0.08
0.07
acid (%)
0.06
0.05
0.04
0.03
0.02
0.01
0
30 37 42
0
Nhit ( C)
Hnh 24: th biu din tng acid trong thi gian n nh lnh theo nhit
ln men (t l men 5%)
Khi s dng t l ging nhiu v nhit ln men cao, sn phm s t acid
dng nhanh hn, c giai on ln men v giai on n nh lnh. Trong qu trnh n
nh lnh, s pht trin ca vi khun lactic b c ch, qu trnh trao i cht chm li,
lng acid lactic c sinh ra gim dn v vi tc chm. T kt qu o c c,
cng nhit ln men, acid gia tng trong thi gian n nh lnh cng gim dn
theo lng ging s dng. Tng t, cng lng ging s dng, nhit ln men
cng cao, acid gia tng trong qu trnh n nh lnh cng nhiu. l do trong qu
trnh ln men nhit cao (nhit 420C, l nhit m vi khun lactic pht trin
mnh) vi khun lactic s pht trin vi tc cao nht (so vi khi ln men hai nhit
cn li), nn mt ca chng trong dch sa cao. Nn trong qu trnh n nh
lnh, nhit vn cn duy tr trong dch sa trong thi gian u nn lng acid c
sinh ra thm trong giai on ny nhiu hn so vi mu ln men nhit thp.
Do , vi cc thng s o c c, nhit 420C v t l men l 5%, qu
trnh ln men din ra mnh m nht, vi khun lactic pht trin nhanh, sinh ra acid
lactic vi tc cao nht, ln men trong thi gian nhn nht.
4.2.3 nh hng ca nhit ln men v t l men n s pht trin ca vi
khun lactic trong qu trnh ln men
Da vo th, s pht trin ca vi khun lactic khc nhau r rt cc giai
on ln men. Giai on u l giai on m chng cn thch nghi vi mi trng, do
tc pht trin ca chng s chm, mt s ca chng khng nhiu, sau khi
lm quen vi mi trng, chng bt u gia tng mt s, ng thi sinh ra acid lactic
vi tc nhanh hn, khi sn phm t acid dng, mt vi sinh vt tng i
nhiu. Tuy nhin, sau giai on ny, trong qu trnh n nh lnh, vi khun lactic pht
trin chm, t gia tng mt s v tc sinh ra acid lactic chm hn.
cng nhit ln men, khi s dng lng ging nhiu (5%), mt vi
khun lactic nhiu, gia tng mt s nhanh v sinh ra nhiu acid lactic, thi gian ln
men s ngn hn. Khi ln men nhit cao (420C), vi khun lactic s pht trin
mnh, sinh ra acid lactic vi tc nhanh, sn phm t acid dng trong thi gian
ngn. Ngc li, nhit ln men thp (300C), vi khun lactic pht trin chm, gia
tng mt s vi tc chm hn, sinh ra acid lactic t hn, sn phm t acid dng
trong thi gian di hn. Cc th i y s biu din mt vi khun lactic cc
giai on ln men.
9
10
30
25
Mt (cfu/ml) 20
15 1 (%)
3(%)
10 5 (%)
0
Giai on u Giai on Giai on sau
dng ln men
25
Mt (cfu/ml)
20
15 1 (%)
3 (%)
10 5 (%)
0
Giai on u Giai on Giai on sau
dng ln men
9
10
30
25
Mt (cfu/ml)
20
15 1(%)
3 (%)
10
5 (%)
5
0
Giai on Giai on Giai on sau
u dng ln men
1
0.9
0.8
0.7
acid (%)
0.6
0.5
0.4 15
0.3 30
0.2
0.1
0
11 12 13 14 15 16
Thi gian ln men (gi)
Hnh 32: th biu din thi gian ln men theo nhit ln men trong thi
gian n nh lnh.
Sa b ti
Phi ch
Lm ngui
3. L Vn Lin, L Khc Huy, Nguyn Th Lin.1997. Cng ngh sau thu hoch i
vi cc sn phm chn nui.NXB Nng nghip H Ni
---------------------------------------------------------------------
Method: 95.0 percent LSD
MEN Count LS Mean Homogeneous Groups
---------------------------------------------------------------------
1 17 0.514822 X
3 14 0.589129 X
5 12 0.655738 X
---------------------------------------------------------------------
--------------------------------------------------------------------
Method: 95.0 percent LSD
NHIETDO Count LS Mean Homogeneous Groups
--------------------------------------------------------------------
30 18 0.473363 X
37 12 0.606945 X
42 13 0.679383 X
--------------------------------------------------------------------
---------------------------------------------------------------------
Method: 95.0 percent LSD
MEN Count LS Mean Homogeneous Groups
---------------------------------------------------------------------
1 14 0.824428 X
3 15 0.869883 X
5 14 0.931135 X
----------------------------------------------------------------------
Method: 95.0 percent LSD
NHIETDO Count LS Mean Homogeneous Groups
----------------------------------------------------------------------
30 14 0.689966 X
37 15 0.916613 X
42 14 1.01887 X
----------------------------------------------------------------------