ANALISIS DE SEROTIPOS SANGUINEOS POR MEDIO DE AGLUTINACION

HInestroza.A.R.

ABSTRAC

The blood serotypes perform useful importance so much clinical so much

immunology provided that the study of them same is very eloquent as for the
transfusions of blood transplants of organs or individual determinations. These
blood serotypes decide and are described thanks to the components of the
such cells as red blood cells who present in the top part of his membranes.
Antigens that can be Ay B being the group that does not possess antigen. They
are named these blood groups for having very important factors which are the
presence of a genotype and a phenotype which determines the factor Rh which
is very important in the blood agglutination. Those who were not reacting Rh
(-)That if Rh was rushing (+) The analysis of the group of the blood group in the
technology of hemagglutination, it is necessary to generate the reaction of
agglutination, THIS TYPE of procedure elaborates adding antitheism wing
shows making react anti To, anti B.o anti D with his respective antigen. The
agglutination or not of the hemates tested opposite to each of the respective
reagents they indicated the presence or not of the certain antigens the samples
that we analyze seles realized the technical test it was possible to analyze
correctly the blood group and factor Rh that indicates the individual that they
possess it

RESUMEN reaccionaban Rh (-) las que si se

Los serotipos sanguneos son de til
importancia tanto clnica tanto
inmunologa dado que el estudio de los
mismo es muy elocuente en cuanto a
las transfusiones de sangre trasplantes
de rganos o determinaciones
individuales.
Estos serotipos sanguneos se
determinan y se describen gracias a los
componentes de las clulas tales como
glbulos rojos quienes presentan en la
parte superior de sus membranas.
Antgenos que pueden ser Ay B siendo
el grupo que no posee antgeno. Estos
grupos sanguneos se denominan por
tener factores muy importantes los
cuales son la presencia de un genotipo
y un fenotipo el cual determina el factor
Rh el cual es muy importante en la
aglutinacin sangunea. Las que no
precipitaban Rh (+)
El anlisis del grupo del grupo
sanguneo en la tcnica de
hemaglutinacin, es necesaria para
generar la reaccin de aglutinacin,
ESTE TIPO de procedimiento se
elabora agregando antisueros ala
muestra haciendo reaccionar anti A,
anti B.o anti D con su respectivo
antgeno. La aglutinacin o no de los
hemates ensayados frente a cada uno
de los respectivos reactivos indicaron la
presencia o no de los antgenos
determinados
Las muestras que analizamos seles
realizaron la prueba tcnica se pudo
analizar correctamente el grupo
sanguneo y factor Rh que indica el
individuo que la poseen
INTRODUCCIN
Un grupo sanguneo es una
clasificacin de la sangre de acuerdo
con las caractersticas presentes o no
en la superficie de los glbulos rojos y
suero de la sangre.
La nomenclatura de los grupos
sanguneos se ha hecho de modo
fragmentario, emplendose varios
sistemas:
a. Sistema ABO: propuesto por
Landsteiner y colaboradores, los cuales
comprobaron que la sangre de todo
individuo pertenece a uno de cuatro
tipos diferentes, que se distinguen uno
de otros segn el resultado de una
reaccin
de aglutinacin. Plantearon la
existencia de cuatro fenotipos ABO
principales conocidos como grupos O,
A, B y AB; en donde los individuos del
grupo A poseen el antgeno A (Anti A)
en sus hemates, los del grupo B el
antgeno B (Anti-B), los del grupo AB
presentan ambos antgenos y los del
grupo O carecen de ambos (ver tabla
N 12.1). El patrn de herencia de
estos grupos sanguneos, corresponde
a la interaccin de alelos mltiples en
los cuales el gen O es recesivo frente a
los dominantes A y B1.
b. Sistema MN: Introducido por
Landsteiner y Levine en 1927, luego de
inyectar hemates humanos en conejos,
logrando la formacin de anticuerpos
contra aquellos. El suero inmune de los
conejos permita diferenciar distintas
clases de hemates humanos, los
cuales denominaron M y N, de
frecuencia aproximadamente igual, los
cuales producan tres genotipos (MM,
Mn y NN) y sus respectivos fenotipos
(M, MN y N). Este sistema es de
escasa importancia en la transfusin
sangunea o en la incompatibilidad
materna fetal, pero sus frecuencias
relativas y su tipo codominante de
herencia los hacen especialmente
tiles para resolver problemas de
identificacin.
c. Sistema Rh: Estos grupos tienen un
inters clnico similar a los grupos ABO,
dada su relacin con la enfermedad
hemoltica del recin nacido y su
importancia en la transfusin. El
sistema Rh es genticamente
complejo, pero a manera de
introduccin se puede describir en
trminos de un nico par de alelos D y
d; donde las personas Rh (+) son DD o
Dd y el Rh (-) son dd.
Durante esta prctica los estudiantes
podrn determinar sus grupos
sanguneos, empleando los sistemas
ABO y Rh
Aglutininas: Cuando el aglutingeno de
tipo A no est presente en los hemates
de una persona, aparecen aglutininas
anti-A en el plasma. Adems, cuando el
aglutingeno de tipo B no est presente
en los hemates, aparecen unos
anticuerpos, conocidos como
aglutininas anti-B, en el plasma. De
este modo, refirindonos a la tabla
siguiente, ntese que el grupo
sanguneo O, aunque no contiene
aglutingenos, contiene aglutininas
anti-A y anti-B; el grupo sanguneo A
contiene aglutingenos de tipo A y
aglutininas anti-B; el grupo sanguneo
B contiene aglutingenos de tipo B y
aglutininas anti-A. Finalmente, el grupo
sanguneo AB contiene aglutingenos A
y B, pero no aglutininas. Genotipos
Imagen1. Cuadro con los genotipos y
los diferentes aglutingenos grupos
sanguneos facultad de medicina
U.A.E.M
Inmediatamente despus del
nacimiento, la cantidad de aglutininas
en el plasma es casi nula. Dos a ocho
meses despus del nacimiento, el agrupaciones taponan los pequeos
lactante empieza a producir aglutininas, vasos sanguneos por todo el sistema
aglutininas anti-A cuando los circulatorio. Durante las horas o das
aglutingenos A no estn presentes en siguientes, la distorsin fsica de las
las clulas y aglutininas anti-B cuando clulas o el ataque por parte de los
no hay aglutingenos de tipo B en las leucocitos
clulas. Se suele alcanzar un ttulo
mximo a los 8-10 aos de edad, que
declina de forma gradual a lo largo de
los aos restantes de vida. origen de
las aglutininas en el plasma3. Las
aglutininas son globulinas gamma,
como los otros anticuerpos, y son
producidas por las mismas clulas que
producen los anticuerpos frente a otros
antgenos. La mayor parte de ellas son
molculas de inmunoglobulinas IgM e
IgG. Pero por qu se producen estas
aglutininas en las personas que no
tienen los respectivos aglutingenos en
sus hemates? La respuesta a esto es
que en el organismo entran pequeas
cantidades de antgenos A y B en los
alimentos, en las bacterias y de otras
formas, y estas sustancias ponen en PALABRAS CLAVE:
marcha la aparicin de aglutininas anti- Hemaglutinacin, serotipos, Rh,
A y anti-B. Por ejemplo, la Anticuerpos comerciales, hemates
administracin intravenosa de antgeno
del grupo A en un receptor que no tiene
el tipo sanguneo A provoca una
respuesta inmunitaria tpica con la
formacin de mayores cantidades de
aglutininas anti-A que nunca. Adems,
el recin nacido tiene pocas METODOLOGA
aglutininas, si es que tiene alguna, lo
que demuestra que la formacin de
aglutininas se produce casi por
completo despus del nacimiento. Para el inicio de la parctica se
Proceso de aglutinacin en las nesesitaron
reacciones transfusionales Cuando las
sangres se emparejan mal, de forma Laminillas porta objetos
que se mezclan aglutininas plasma- Laminillas cubre objetos
ticas anti-A o anti-B con hemates que Lansetas
contienen aglutingenos A o B, Isopailes
respectivamente, los hemates se Palillos
aglutinan por el siguiente proceso: las
Lpiz de cera
aglutininas se unen a los hemates.
Debido a que las aglutininas tienen dos Anticuerpos (anti-A, anti-B y
lugares de unin (tipo IgG) o diez (IgM), anti-D)
una sola aglutinina puede unirse a dos Suero salino fisiolgico (NaCl
o ms hemates diferentes al mismo 0.9%)
tiempo, haciendo que las clulas se Alcohol etlico de 70
adhieran entre s. Esto hace que las
clulas se agrupen, lo que constituye el
proceso de aglutinacin. Estas
Con un lpiz de cera, dividir la laminilla Ala cual sele depositaron los Anticuerpos
determinados Foto. Luisa Bedoya:
porta-objetos en tres compartimientos y Laboratorio de Microbiologia Universidad Libre de
marcarlos como A, B y D. - Se deben Pereira. Foto tomada con movil hawei
colocar en el porta-objetos tres gotas P8 camara 12 MP

de sangre obtenidas por puncin

capilar o venosa. - A cada una de ellas
se aade una gota del respectivo
antisuero. - Preferiblemente la lmina
debe estar a 37C, temperatura ptima
para la aglutinacin para el Rh. - Las
muestras se homogenizan con un
palillo y se observa en cul de ellos se
ha producido la aglutinacin (unin) de
glbulos rojos que hace que estos se
precipiten dando un aspecto grumoso. -
La presencia de aglutinacin indicar
que los glbulos rojos poseen ese
determinado antgeno en su superficie. Figura 2. Fotografia de las muestras de sangre de una
En una laminilla portaobjetos deposite campanera AB+
dos gotas de sangre. En una de ellas Ala cual sele depositaron los Anticuerpos
determinados Foto. Luisa Bedoya:
vierta una gota de agua, en la otra Laboratorio de Microbiologia Universidad Libre de
vierta suero fisiolgico. Cbralas con Pereira. Foto tomada con movil hawei
P8 camara 12 MP
laminillas cubreobjetos. - Observe en el
microscopio y establezca las
diferencias
CONCEPTO DE Rh POSITIVO
Rh positivo indica la presencia de Rho
(D) en el fenotipo. Rh negativo indica
ausencia de Rho (D) en el fenotipo.
Existe la posibilidad del Rh nulo {Rh
null), rarsimo; esta sangre no
reacciona con ninguno de los
antisueros Rh descritos y puede
considerarse como ausencia de estos
antgenos en los eritrocitos de la
Procedimiento de la limpieza del dedo persona como lo podemos ver en la
siguiente imagen2 (imagen 3)

Imagen 3. Aglutinacin Instituto de Biotecnologa

Universidad nacional de Mxico

La prueba utiliza antgenos

Figura 1. Imagen de la desafeccin del pulpejo del
dedo previo a la puncin del mismo comerciales que han revelado mucha
variacin en la titulacin serolgica
Estos Anti-sueros de clase IgM
secretados por lneas celulares de
hibridoma de ratn en una solucin
tamponada conteniendo < 1 g/l de
azida sdica como conservante. Estos
antisueros se caracterizan por su alta
potencia, avidez y especificidad. Al no
ser de origen humano, no existen
riesgos de infeccin por HIV, HBV o
HCV.4
Imagen3. Antgenos Comerciales. a. Anti D, b. Anti B,
c Anti A. Foto: Luisa Bedoya: Laboratorio
Microbiologa Universidad Libre Seccional Pereira
Sede Belmonte. Foto tomada con Mvil, Huawei P8
12MP
Asi se ven las muestras sanguineas con
su correspondientes anticuerpos
imagen 5. Resultados. Muestra de sangre Foto. Luisa
Bedoya:
Laboratorio de Microbiologia Universidad Libre de
Pereira. Foto tomada con movil hawei
P8 camara 12 MP
RESULTADOS Y DISCUSION
Se determinaron el tipo de grupo
sanguneo de cada uno de los 4
individuos analizado. La reaccin
antgeno-anticuerpo determino
correctamente el tipo sanguneo
afirmado por los individuos.
La determinacin adecuada de cada
uno de estos grupos sanguneos se
debe a la funcin especfica que
cumplen los anti-sueros con el sistema
ABO que, segn la teora, se efecta,
enfrentando los glbulos rojos del
paciente con anticuerpos monoclonales
Anti-A, Anti-B o Anti-AB4.
Los eritrocitos humanos pueden o no
tener en su superficie alguna
combinacin de los antgenos del
sistema ABO y Rh. De la misma forma,
algunos individuos tendrn en el suero
isoanticuerpos dirigidos contra alguno
de los antgenos del sistema ABO;
solamente tendrn en el suero
isoanticuerpos anti-D aquellos
individuos que hayan sido previamente
sensibilizados a este antgeno. En
consecuencia, los sueros que
contengan isoanticuerpos anti-A
aglutinarn a los eritrocitos que tengan
al antgeno A y suceder lo propio en
otros casos5.
La aglutinacin o no de los hemates
ensayados frente a cada uno de los
reactivos indica la presencia o ausencia
de los correspondientes antgenos.4
CONCLUSIONES
Esta prctica fue de las de las ms
importantes para m, porque
aprendimos el fundamento de la
hemaglutinacin, y en general la
prctica fue satisfactoria se realiz
segn los estndares y descrito por la
gua de trabajo observamos las
precipitaciones correspondientes
cuando reaccionaban las muestras
sanguneas con los anticuerpos
comerciales
ANEXOS
1. Cuales son los grupos
sanguineos que se
consideran donadores y
receptores universales y
porque?
R/ El grupo O es considerado como
donador universal porque no presenta
Anti A , Anti B en la superficie de sus
globulos rojos.
El grupo AB es considerado como
receptor universal. Los individuos con
sangre del grupo AB poseen ambas
proteinas en sus globulos rojos, y no
generan anticuerpos frente a la
proteina A ni a la B de los globulos
rojos de la sangre donada.6
2. Un nio grupo AB y con su
madre grupo AB es posible
que el padre sea grupo O ?
No es posible, ya que el grupo AB es
codominante y O es recesivo, por tanto,
para que el nio sea AB requiere que
ambos padres tengan el mismo grupo
de sangre, en este casos seria AB.
3. Complete el siguiente cuadro
Grupo Antigeno Anticuerpos Genotipo
de en el suero
superficie
A A Anti B IA IA IA i
B B Anti A IB IB IB i
AB AB IA IB
O Anti A Anti B ii
D DD Dd dd
REFERENCIAS
1. Grupos Sanguneos Universidad Libre Seccional Pereira
2. Tamayo F. Fundamentos de la Inmunologa. Universidad Nacional Autnoma
de Mxico
3. Manual de Procedimientos de laboratorio Inmunologa, Universidad Mariano
Glvez Facultad de Ciencias mdicas y de salud
4. Anti-A, Anti-B o Anti-AB monoclonal. Wiener Laboratorios S.A.I.C. Rosario.
Argentina
5. Guia de tcnicas immunological 2008 -