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Objetivos:
Marco terico:
El glucgeno es un polmero a travs del cual los animales almacenan glucosa. El glucgeno puede
ser sintetizado o degradado en la mayora de las clulas animales y solo dos tejidos lo contienen en
grandes cantidades: msculo e hgado. En el hgado puede ocupar hasta un 10% de su peso y en
msculo, un 1%. En situacin de ayuno, el glucgeno es la primera reserva que se moviliza para
mantener la glucemia, al menos durante dos horas.
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INSTITUTO TECNOLGICO SUPERIOR DE SANTIAGO PAPASQUIARO UNIDAD
EVALUACIN SENSORIAL TEMTICA I
PRCTICA No. 3 AISLAMIENTO DE GLUCGENO, HIDRLISIS Y DETERMINACIN DE
GLUCOSA
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EVALUACIN SENSORIAL TEMTICA I
PRCTICA No. 3 AISLAMIENTO DE GLUCGENO, HIDRLISIS Y DETERMINACIN DE
GLUCOSA
Materiales y Sustancias.
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EVALUACIN SENSORIAL TEMTICA I
PRCTICA No. 3 AISLAMIENTO DE GLUCGENO, HIDRLISIS Y DETERMINACIN DE
GLUCOSA
Procedimiento Experimental.
a) Extraccin del glucgeno de una muestra heptica fresca (ratn, pollo o res).
2. Introducir los fragmentos de hgado en dos tubos de ensayo (de 10 ml, de vidrio o de plstico
translcido).
4. Incubar los tubos en un bao de agua hirviendo durante 20 minutos con agitacin ocasional, hasta
la completa digestin del tejido (que no queden partculas en suspensin). PRECAUCION:
ALCALI HIRVIENDO!!
5. Enfriar y centrifugar 5 minutos a 3000 rpm para eliminar los restos de tejido no digerido.
6. Pasar cuidadosamente los sobrenadantes (con una pipeta o por decantacin) a dos tubos de
vidrio graduado y previamente pesados, a los que se les aaden 0,2 ml de Na2SO4 al 15%, se agita
fuertemente y dejar reposar 5 min
7. Se precipita el glucgeno que est en solucin por adicin de 7 mL de etanol al 95%. Se agita y
deja en fro en un bao de hielo durante 5 minutos.
8. Dejar reposar en hielo durante un periodo de 5 a 10 minutos, para provocar la precipitacin del
glucgeno extrado.
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PRCTICA No. 3 AISLAMIENTO DE GLUCGENO, HIDRLISIS Y DETERMINACIN DE
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10. Desechar con cuidado el sobrenadante y retener el precipitado o sedimento de color marrn-
blanco, que es el que contiene el glucgeno.
Nota.- La purificacin completa del glucgeno implicara tres o cuatro precipitaciones alcohlicas y
una precipitacin cida, pero en esta prctica haremos slo una precipitacin alcohlica.
11. Secar cuidadosamente con papel filtro y pesar el precipitado de glucgeno de cada tubo. Anotar
el resultado.
2. Ajustar a 2 ml con agua destilada y aadir de 2 a 3 gotas de fenolftalena como indicador para la
posterior neutralizacin.
3. Aadir gota a gota NaOH 5N y agitar bien hasta que se obtenga un pH 8 o superior. Se debe
comprobar el pH de la muestra con papel indicador o potencimetro.
1. Se disponen de dos tubos de ensayo en los que se introduce 0,5 ml del hidrolizado de glucgeno
de cada muestra, deposite 2.5 ml de reactivo de Benedict. Coloque los tubos en un bao de agua
hirviendo por 5 minutos. Tenga cuidado de no quemarse.
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PRCTICA No. 3 AISLAMIENTO DE GLUCGENO, HIDRLISIS Y DETERMINACIN DE
GLUCOSA
2. Observe cualquier cambio de color durante calentamiento. Saque el tubo y pngalo en una
gradilla y despus de un corto tiempo observe si se ha formado un precipitado, el cual puede ser
rojo, anaranjado o verdoso. Observar y anotar lo que ocurre en cada tubo.
Resultados y discusin.
Registra tus resultados en una tabla. Realizar la discusin luego del anlisis de los
resultados en funcin de los objetivos particulares y del objetivo general de la prctica
Conclusiones.
Anexos.
Bibliografa.
Harry R M., Richard A F., Roger L M. 1997. Biochemistry - A Short Course. John Wiley
& Sons, Chapter 12.
Clark JM (1966): Bioqumica Experimental, 1 ed. Editorial Acribia (Zaragoza,
Espaa), pp 42-45.
Nelson DL, Cox MM (2001): Principios de Bioqumica, 3 ed. Editorial Omega
(Barcelona, Espaa), pp 304-305.
Stryer L, Berg JM, Tymoczko JL (2003): Bioqumica, 5 ed. Editorial Revert
(Barcelona, Espaa), pp 577-580.
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EVALUACIN SENSORIAL
PRCTICA No. 3 AISLAMIENTO DE GLUCGENO, HIDRLISIS Y DETERMINACIN DE GLUCOSA
Rbrica
TEMA: Funcin biolgica de los carbohidratos
EVIDENCIA DE APRENDIZAJE No. 3: Reporte de Prctica (10% de la calificacin final del curso)
El propsito de esta herramienta es orientar a los estudiantes sobre la funcin biolgica de los carbohidratos para la comprensin de la utilizacin
y almacenamiento de energa a nivel celular.
10 puntos 0 puntos
Estructura: Contiene
los elementos, hoja de Contiene todos los Contiene al menos 5 Contiene al menos Contiene al menos 3 Contiene menos de
presentacin, elementos elementos 4 elementos. elementos 3 elementos,
resultados, discusin,
cuestionario,
conclusiones,
bibliografa.
20 puntos 15 puntos 10 puntos 5 puntos 0 puntos
Limpieza y orden: Esta Tiene limpieza y No tiene limpieza y
presentado sin orden orden
borrones,
enmendaduras,
manchas y en hojas de
igual tamao y conforme
la secuencia establecida
15 puntos 0 puntos
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EVALUACIN SENSORIAL
PRCTICA No. 3 AISLAMIENTO DE GLUCGENO, HIDRLISIS Y DETERMINACIN DE GLUCOSA
Cuestionario:
Tiene los dos Tiene ms del 50% de los dos Tiene menos del 50% de los dos No tiene los dos
Responde las
requisitos requisitos, pero no est requisitos requisitos
cuestiones de una
completo o tiene errores
manera amplia y
correcta
15 puntos 10 puntos 5 puntos 0 puntos
Resultados y
discusin de los Argumenta Argumenta Argumenta Argumenta dbilmente No contiene
resultados: presenta la plenamente, y claramente, y dbilmente , y , y compara resultados o
informacin de acuerdo compara sus compara sus compara sus brevemente sus discusin de
a lo solicitado, resultados con los resultados con los resultados con los resultados
resultados con los
argumenta y compara existentes en la existentes en la existentes en la
bibliografa bibliografa existentes en la bibliografa
sus resultados con los
bibliografa
existentes en la
bibliografa
15 puntos 12 puntos 8 puntos 4 puntos 0 puntos
15 puntos 0 puntos
Buena caligrafa:
Los reglones estn Tiene buena No tiene buena
Tiene una caligrafa
alineados, se caligrafa caligrafa
aceptable
comprende lo escrito y
elaborado con bolgrafo
5 puntos
10 puntos 0 puntos
COMENTARIOS GENERALES