20/10/2015

Famlia Retroviridae

Retroviroses Classificao
Subfamlia Orthoretrovirinae

Felinas
Gammaretrovirus
Vrus da Leucemia felina
Lentivirus
Vrus da Imunodeficincia felina

Sueli Akemi Taniwaki Miyagi

Laboratrio de Biologia Molecular Aplicada e Subfamlia Spumaretrovirinae
Sorologia (LABMAS) Spumavirus
Departamento de Medicina Veterinria Preventiva e Vrus formador de sinccio felino (Feline Foamy Virus)
Sade Animal (VPS) At 90% infeco
FMVZ - USP No-patognico
staniwaki@usp.br

Famlia Retroviridae Famlia Retroviridae

Vrion

Hosie & Beatty, 2007

Transcriptase Reversa
DNApol-RNAd
RNaseH
DNApol-DNAd Vrus da imunodeficincia felina (FIV)
Integrase Lecollinet & Richardson, 2008

Famlia Retroviridae Famlia Retroviridae

Genoma viral Retrovrus simples
2 cpias de ssRNA(+) Apenas 1 splicing
DNA pr-viral
5 e 3 LTR (Long terminal repeats)
Regulao da expresso dos genes virais
Genes gag, pol e env
Genes acessrios (simples/complexos)

http://viralzone.expasy.org/

Vrus da Leucemia Felina (FeLV)

Flores, 2007

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Famlia Retroviridae Famlia Retroviridae

Retrovrus Complexo Replicao viral

Vrus da Imunodeficincia Humana (HIV)

Mahy & van Regenmortel, 2010

Famlia Retroviridae Famlia Retroviridae

Ligao e Fuso (FIV) Replicao viral

SU
TM

Ligao Rearranjos Exposio do peptdeo

(CD134) conformacionais TM

Ligao ao co-
Fuso
receptor CXCR4
Figueiredo, 2006
Mahy & van Regenmortel, 2010

Famlia Retroviridae Famlia Retroviridae

Replicao FIV

Flores, 2007
Kenyon & Lever, 2011

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Famlia Retroviridae
Maturao
SU/TM

Vrus da
Imunodeficincia Felina
(FIV)

http://viralzone.expasy.org/

FIV FIV
Organizao genmica complexa
Introduo

1986: Norte da Califrnia

Famlia Retroviridae
Gnero Lentivirus
105-125nm
9400 bases

Lecollinet & Richardson, 2008

Semelhante ao HIV
Filogenticas
Figueiredo & Taniwaki, 2007
Patognicas (AIDS)

FIV FIV
Epidemiologia

Distribuio mundial
Feldeos domsticos e selvagens

Prevalncia:
1 a 44%
B
Comportamento: machos, vida-livre e alta densidade
populacional

Transmisso: Alterado de Yamamoto et al., 2007

Inoculao pela mordida (brigas)
Venrea Subtipos: A, B, C, D e E
Intrauterina (antes ou durante o parto)
Transmamria Regio varivel V3-V5 gene env

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FIV FIV
Brasil
Patogenia

Tropismo celular
Linfcitos T CD4+ e CD8+
Linfcitos B Kenyon & Lever, 2011
Caxito et al., 2006
Marola et al., 2013
(1,47-13,95%)
Macrfagos
Martins et al., 2008 Astrcitos
Teixeira et al., 2010 Clulas microgliais
Subtipo B Lara et al., 2008 Reche et al., 1997
(6,5-14%)
Taniwaki et al.,
2002 (13,4%)

Caldas et al.,
2000 (37,5%)

FIV FIV
Patogenia Sinais clnicos
Fase aguda/primria
Febre
Letargia
Linfoadenopatia transitria
Neutropenia
Fase assintomtica

Lecollinet & Richardson, 2008

Hosie & Beatty, 2007

FIV FIV
Sinais clnicos Sinais clnicos
Gengivite/Estomatite

Lecollinet & Richardson, 2008

Fase secundria (pr-AIDS/AIDS)
Imunodeficincia e/ou Imunoestimulao
Diminuio CD4+/CD8+
Perda de peso e linfoadenopatia generalizada
Infeces crnicas (secundrias ou oportunistas)
Vrus, bact., fungos e protozorios
Problemas de pele (parasitas/fungos)
Neoplasias e distrbios neurolgicos
Rinite crnica Figueiredo & Taniwaki, 2007

Glomerulonefrite imuno-mediada

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FIV FIV
Sinais clnicos Sinais clnicos
Dermatofitose Conjuntivite

Figueiredo & Taniwaki, 2007

Paparotto & Taniwaki, 2007

FIV FIV
Sinais clnicos Diagnstico

Achados laboratoriais
Inespecficos
Reflexo da doena concomitante
Neutropenia
Linfopenia (CD4+)
Anemia
Figueiredo & Taniwaki, 2007 Hiperglobulinemia
Azotemia
Contagem de CD4+/ CD8+

FIV FIV
Diagnstico Diagnstico direto

Isolamento viral
Hosie & Beatty, 2007
No usado de rotina
Deteco do vrus Co-cultivo de linfcitos do sangue
Isolamento viral 2-3 semanas
PCR Confirmao pela deteco de protenas virais no
Deteco de anticorpos sobrenadante
ELISA
Western blotting
Taniwaki, S.A. IFA

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FIV FIV
Diagnstico direto Diagnstico direto
Reao em Cadeia pela Polimerase (PCR) Reao em Cadeia pela Polimerase (PCR)
Deteco
DNA pr-viral
Vantagens:
RNA viral (RT-PCR)
Deteco 5-10 dias ps-infeco
Mtodo Fase terminal
Convencional s/ interferncia de Ac. Maternos
PCR em tempo-real (qPCR) Vacinao...
Desvantagens:
Variabilidade gentica
Subtipos existentes
Mutao/recombinao
Fase assintomtica
Padronizao Hosie & Beatty, 2007
Taniwaki, S.A.

FIV FIV
Diagnstico indireto Diagnstico indireto

Imunofluorescncia indireta (IFA)

CrFK/linfcitos infectados
ELISA/Imunocromatografia
Teste de triagem
Western blot (WB) Antgenos virais/recombinantes
www.microvet.arizona.edu/.../ToolBox/elisa.html

Vrus purificado p24 (CA)

Separao em gel p15/17 (MA)
Deteco Ac especficos para cada TM
protena viral Soro/plasma
Confirmatrio sangue

Poli et al., 2001

Diagnstico indireto FIV FIV

ELISA/Imunocromatografia Diagnstico indireto

Interpretao de testes sorolgicos

Prevalncia na populao
Baixa x Alta
Fase da infeco
Vantagens
Inicial ou terminal x Assintomtica
Rpido e fcil
Anticorpos circulantes = infeco
Lecollinet & Richardson, 2008
Estado clnico do animal
Produo de anticorpos alta Saudvel x doente

Desvantagens Filhotes
Fase aguda Ideal aps 6 meses
Fase terminal Retestar aps 2 meses
Filhotes (12 semanas-Ac maternos) Vacinao
Vacinao Ac. Vacinais x infeco

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FIV
Vacinao
Vrios tipos testados
sem proteo de 100%
Subunidades
Recombinantes


Atenuadas
Inativadas
Vrus da Leucemia
Uso comercial
Felina (FeLV)
Fel-O-Vax FIV (Fort Dodge Animal Health)
Vrus inteiro inativado
Proteo heterloga?
Variabilidade gentica
Interferncia no diagnstico sorolgico

FeLV FeLV
Introduo Subgrupos do FeLV
Baseada no gene env/receptores de entrada
1964: gato com linfoma Subgrupos
Famlia Retroviridae FeLV-A (nico transmissvel)
Gnero Gammaretrovirus FeLV-B (50%)
Recombinao FeLV-A seq. retrovrus endgenos
Linfomas e neuropatogenicidade
FeLV-C (raro)
Mutao no gene env do FeLV-A
Anemia fatal
FeLV-T
Dunham & Graham, 2008 Mutao na seq. SU do FeLV-A
Tropismo por linfcitos T / Imunodeficincia

FeLV FeLV
Epidemiologia Brasil
Hagiwara et al., 2007 (6,2%)
Figueiredo et al., 2009 (5,3%)
Distribuio mundial
Feldeos domsticos e selvagens

Prevalncia:
1-8% (gatos saudveis)
Barbosa et al., 2001
21% (gatos doentes)
(12,6%)
Diminuio com teste e separao/vacinao Teixeira et al., 2007
Grupo de risco: contato social Souza et al., 2002 (32,5%)
(17,4%) Coelho et al., 2008
Transmisso: (47,5%)
Filhotes + susceptveis
Contato
Eliminao pela saliva
Intrauterina (antes ou durante o parto)
Meinerz et al., 2010
Transmamria
(38,3%)

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FeLV FeLV
Patogenia Sinais clnicos
Replicao na orofaringe
FeLV-A
(linfcitos e macrfagos)
Desenvolvimento de tumores
Imunidade
1. Infeco abortiva celular/humoral Viremia
s/ DNA pr-viral Mutagnese insercional
s/ RNA viral < 4 sem
s/ p27 > 4 sem Ativao de oncogenes celulares
s/ isolamento 2. Infeco regressiva
Medula DNA pr-viral moderado
ssea RNA viral moderado/ausente Transduo
p27 indetectvel/transiente
Incorporao de oncogene no provrus do FeLV-A
Vrus recombinante (FeLV-B, FeSV)
Receptores Pit 1 e 2
3. Infeco latente 4. Infeco progressiva
Ausncia p27 DNA pr-viral
Ausncia RNA viral e DNA pr-viral RNA viral
(sangue) p27
Potencial reativao na medula Isolamento constante

FeLV FeLV
Sinais clnicos Sinais clnicos

Desenvolvimento de tumores Anemia

Linfomas FeLV-C (raro)
Mediastnico (timo) Receptor FLVCR1
Alimentar Inibe produo de eritrcitos
Multicntrico Acmulo fatal de heme
Extra-nodal Imuno-mediada
Pele, olhos, rins, SNC
Secundria
Doenas mieloproliferativas
Desordens Mieloproliferativas Doenas mielossupressivas
Leucemias Outros agentes
Mielofibrose Mycoplasma haemofelis
Fibrossarcoma

FeLV FeLV
Sinais clnicos Diagnstico

Desordens reprodutivas ELISA/Imunocromatografia

Aborto, reabsoro fetal, infertilidade
Deteco de p27 solvel (viremia)
Natimortos
Infeco progressiva
Infeco regressiva (?)
Enterite associada ao FeLV Soro/plasma
Diarria, hematemese, anemia
4 semanas ps-infeco
Triagem
Disfuno neurolgicas
Teste rpido

Imunossupresso
Pr-AIDS/AIDS

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FeLV FeLV
Diagnstico Diagnstico

Imunofluorescncia direta (IFA) DNA pr-viral

Granulcitos, linfcitos e plaquetas Convencional x tempo-real
Viremia 1 semana ps-infeco
Infeco progressiva
Deteco de protenas do gag RNA viral
Convencional x tempo-real
Isolamento viral Replicao ativa
Detecta vrus infectantes 1 semana ps-infeco
Viremia
Infeco progressiva

FeLV FeLV
Diagnstico Vacinao
1. Infeco abortiva 2. Infeco regressiva
s/ DNA pr-viral DNA pr-viral moderado Infeco abortiva
s/ RNA viral RNA viral moderado/ausente Ac. Neutralizantes contra FeLV-A
s/ p27 p27 indetectvel/transiente
s/ isolamento s/ isolamento
Imunidade celular
No h proteo esterilizante
3. Infeco latente 4. Infeco progressiva
Ausncia p27 DNA pr-viral No previne a infeco
Ausncia RNA viral (sg) RNA viral Baixos nveis de RNA e DNA pr-viral
Ausncia DNA pr-viral (sg) p27
Potencial reativao na medula Isolamento constante Previne antigenemia persistente
Menor doenas associadas ao FeLV
Antigenemia Maior sobrevida
Reteste aps 4-12 semanas No interfere com diagnstico
Antigenemia/DNA pr-viral

FeLV
Vacinao

Quando vacinar
Fatores de risco
Contato com animais infectados
Filhotes Controle, Tratamento
e Preveno de
Testar antes de vacinar
Esquema vacinal
Primo-vacinao
8-9 semanas
Retroviroses felinas
12 semanas
Reforo
Anual
Aps 3-4 anos de idade
a cada 2-3 anos

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FIV e FeLV FIV e FeLV

Tratamento de suporte
Cuidados
Animais doentes
Isolamento Diagnstico e tratamento especfico rpido
Castrao Tratamento prolongado e agressivo
Acompanhamento clnico peridico Corticides com cuidado!!
exames laboratoriais (6-12meses) Gengivite/estomatite grave (ideal extrair dentes)
Doenas imuno-mediadas
Vacinao de rotina Neoplasias
PFV, FHV-1, FCV e Raiva Griseofulvina no em gatos FIV
Vacinas inativadas Supresso da medula-ssea (panleucopenia grave)
Resposta imune adequada? Itraconazol (5-10mg/kg VO/q12-24hs)
Estgio de imunossupresso Dermatofitose
FIV: estimulao da produo viral? Criptococose
Avaliar risco-benefcio

FIV e FeLV FIV e FeLV

Tratamento de suporte Tratamento antiretroviral

Animais doentes
Eritropoietina (100UI/kg SC/q48hs)
Insuficincia renal crnica
Doxiciclina (5-10mg/kg VO/q12-24hs/21dias)
Mycoplasma haemofelis (anemia)
Quimioterapia
Linfoma
Leucemias
Cirurgias

FIV e FeLV FIV e FeLV

Tratamento antiretroviral
Zidovudina/AZT (3-azido-2,3-dideoxythymidine)
Anlogo de nucleosdeo
Inibe a transcrio reversa
Timina
Tratamento antiretroviral (no disponvel no Brasil)
Zidovudina/AZT (3-azido-2,3-dideoxythymidine)
5-10mg/kg VO/q12hs
Melhora dos sinais clnicos
Estomatite
Aumento da qualidade de vida
Reduo da carga viral
FeLV
Reduo na antigenemia
FIV
Aumento da razo CD4+/ CD8+
Hemograma (anemia no-regenerativa)
AZT Ht<20%
Resistncia: Mutao

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FIV e FeLV FIV e FeLV

Tratamento antiretroviral (no disponvel no Brasil) Tratamento imunomodulador

AMD3100 (Bicyclams) Interferon- (recombinante humano)

Atividade antiviral
FIV
Alta-dose: 104-106UI/kg SC/q24hs
Inibe a entrado do vrus
Prod. Ac. anti-IFN-
Antagonista seletivo do quimioreceptor CXCR4 Diminui eficcia
0,5mg/kg SC/q12hs/ 6meses Baixa-dose: 0,5-50UI/kg VO/q24hs/sem. alternadas
Melhorou sinais clnicos 30UI/gato
Reduziu DNA pr-viral Sem reao adversa
Europa apenas imunomodulador Resultados controversos
Melhora dos sinais clnicos
Aumento da sobrevida
FeLV: Diminui p27 circulante?

FIV e FeLV FIV e FeLV

Tratamento imunomodulador Preveno e Controle
Gatis e abrigos
Diagnstico
Interferon- felino Antes da introduo de novos animais
Atividade antiviral Separao infectado/no-infectados
106UI/kg SC/ q24hs/ 5 dias Desinfeco simples
Sem efeitos colaterais Fatores de risco
Resultados controversos Gatos de vida-livre
FeLV
Melhora sinais clnicos
Hospitais veterinrios
Aumento da sobrevida Desinfeco simples
FIV Vacinao
Ao antiviral in vitro FIV: no recomendada
1 estudo controlado: sem efeitos
FeLV: fatores de risco

Muito Obrigada!!!
staniwaki@usp.br

www.catvets.com (American Association of Feline Practitioners)

www.abcd-vets.org (European Advisory Board on Cat Diseases)

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