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EVALUACIN DEL EMPLEO DE BIOCIDAS NATURALES EN


MEZCLAS ADHESIVAS DE BASE PROTEICA

Susana Martin-Rey, Yu Lee y Teresa Domnech-Carb


Instituto Universitario de Restauracin del Patrimonio de la Universitat Politcnica de Valncia

AUTOR DE CONTACTO: Susana Martin-Rey, smartin1@crbc.upv.es

RESUMEN: Los adhesivos naturales empleados en la consolidacin de estratos pictricos, son fcilmente deteriorados por microorganismos y bacterias
debido a su composicin orgnica. Las soluciones empleadas hasta el momento para su conservacin, se fundamentan en la adicin de un biocida, que otorgue
mayor estabilidad a la mezcla, mejorando as su estabilidad fsica y qumica.
Estos biocidas, habitualmente son agentes desinfectantes o pesticidas de amplio uso industrial, con graves problemas de toxicidad y peligrosidad para el usuario
y su entorno. Progresivamente se han ido mejorando estas formulaciones, adaptndolas a los requerimientos exigidos en intervencin del Patrimonio Cultural,
pero sin detenerse en el riesgo que su empleo supone para el restaurador.
En este estudio, se valoran diferentes bactericidas naturales como alternativa a los materiales ms txicos empleados actualmente, analizando el poder insecti-
cida o fungisttico de cada uno de ellos y su miscibilidad con consolidantes pictricos de tipo proteico. Concretamente se ha desarrollado el anlisis comparativo
entre cinco biocidas (Extracto de equincea, propleo, esencia de citronella, esencia de ajo y esencia de alcanfor), adicionados a dos tipos de gelatinas animales.
Se ha valorado su empleo para los trabajos de consolidacin de las policromas sobre madera del Templo Longshan (Lukang, Taiwn), con problemas puntua-
les de desconsolidacin en algunas zonas y en otros casos de cohesin entre sustratos. El objetivo principal se ha fundamentado en la obtencin de mezclas ad-
hesivas estables desde el punto de vista de la Conservacin y Restauracin de los Bienes Culturales, a la vez que atxicas para el restaurador y el medioambiente

PALABRAS CLAVE: adhesivos, consolidacin, biocidas, policromas sobre madera, Templo Longshan

1. INTRODUCCIN Como puede imaginarse, la salud y la seguridad del restaurador,


se ha visto seriamente afectada por la toxicidad de este tipo de
El importante desarrollo industrial de los ltimos siglos ha materiales. La exposicin prolongada a los vapores nocivos
provocado impactos muy dainos para el medio ambiente, emitidos por estas primeras sustancias conservantes (y tambin
agravando de forma preocupante el entorno del hombre y los por las empleadas en la actualidad), no es una excepcin. Este
seres vivos. La destruccin de la capa de ozono, la alteracin de la es el motivo por el desde 2006 se estn desarrollando diferentes
biodiversidad y la peligrosa contaminacin del aire, agua y suelo, ha estudios desde proyectos y lneas de investigacin en el rea de
inducido a riesgos saludables en el bienestar de la sociedad, por lo intervencin de Pintura de Caballete del Instituto Universitario de
que da a da debemos preocuparnos por preservar nuestro entorno Restauracin del Patrimonio (IRP) de la Universidad Politcnica
medioambiental. de Valencia. Estos trabajos permiten ya hoy, evaluar, controlar
y erradicar parmetros de toxicidad en diferentes procesos
Hasta hace unas dcadas, se prefera el uso de adhesivos sintticos restaurativos, que hasta el momento llevan implcito el empleo en
por su estabilidad ante agentes patgenos, sin valorar el dao que mayor o menor medida de materiales muy nocivos para la salud
stos producan en el restaurador y su hbitat. Vistos los problemas del restaurador.
de la salud que muchos de estos materiales han ocasionado, los
restauradores se han ido posicionando de nuevo ante el empleo Mediante la lnea de investigacin del IRP, Estudio de alternativas
de sustancias naturales de tipo orgnico, aunque estabilizadas de no carcingenas en tratamientos restaurativos en pintura de caballete, se
forma habitual mediante plaguicidas txicos como conservantes de evalan diferentes opciones de baja toxicidad tanto en materia de
las mezclas adhesivas. Los desinfectantes empleados inicialmente disolventes, adhesivos y biocidas, que permitan el trabajo seguro del
eran pesticidas de uso industrial, hasta que de forma progresiva restaurador, minimizando los riesgos provocados por la emisin de
se fueron reformulando para ser adaptados en su empleo en la vapores dainos en su entorno laboral y medioambiental.
Conservacin y Restauracin de obras artsticas.
Somos conscientes de que la erradicacin de biocidas txicos
En su mayora, los conservantes empleados por los restauradores a favor de otros inocuos, debe ser impulsada y promovida por
han sido siempre de efecto txico, provocando graves riesgos de los restauradores, quienes juegan un papel fundamental en la
tipo cancergeno. Se ha tratado en su mayora de plaguicidas de eliminacin de estas sustancias, si bien este esfuerzo esfuerzo no
uso no agrcola, cuya mezcla de sustancias que los componen, ser efectivo si no est apoyado por la empresa o los responsables del
pueden provocar diferentes efectos adversos en la salud de los centro de trabajo. En primer lugar, este cambio a favor de materiales
seres vivos. No debe obviarse, que en su diseo se persigue su ms inocuos debe producirse por nuestra propia seguridad y salud,
potencia y resistencia ante virus y bacterias, lo cual les otorga y en segundo lugar, no debe pasarse por alto que los restauradores
grandes proporciones de peligrosidad para el hombre y el medio tenemos la posibilidad de participar de forma activa en los intereses
ambiente. Los ms empleados han sido compuestos qumicos de ms importantes del conjunto de la sociedad, en cuanto a la
tipo organometlico, fenoles, derivados de amonio cuaternario y sostenibilidad y reduccin de residuos peligrosos se refiere.
grupos nitrogenados.

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2. LOS BIOCIDAS Y EL MARCO LEGAL ACTUAL aspergillus. De forma general en ambos casos se ocasiona una alta
produccin de enzimas degradadoras, y una fuerte acidificacin del
La Legislacin Europea supervisa el empleo de sustancias tejido en el que se asienten, derivado de la alta concentracin de
conservantes txicas mediante diferentes cdigos y normativas, cido glucnico.
destacando entre ellos la DIRECTIVA 98/8/EC del Parlamento y
Consejo Europeo del 16 de Febrero de 1998, valorando la necesidad Penicillium chrysogenum: Se trata de un tipo de hongo filamentoso que
del control de organismos perjudiciales para la salud del hombre y presenta ramificados finales con forma de botella. El aspecto de la
de los animales, pero analizando el riesgo que estos conservantes colonia es blanco azulado o verde azulado, crecen pobremente por
pueden implicar en los seres vivos y su medio ambiente. Se evaluaban debajo de 37C, teniendo como temperatura ptima de crecimiento
sus propiedades especficas y su forma de empleo. Posteriormente, los 23C. En ocasiones presentan gotas de exudado sobre la
esta normativa se revis y mejor mediante el REGLAMENTO CE superficie de la colonia y una esporulacin abundante. Los caros
N 1896/2000 (Comisin de 7 de Septiembre de 2000), relativo a Siro y Tyrophagus pultrescentiae, mantienen una estrecha relacin
la primera fase del Programa sobre comercializacin de biocidas, trfica con este tipo de hongos. Puede provocar riesgos txicos en
(apartado 2 del artculo 16 de la Directiva 98/8/CE del Parlamento humanos, al producir alergia en las vas respiratorias e irritacin
Europeo y del Consejo sobre biocidas). cutnea de la epidermis.

En la actualidad, en Espaa se regula el proceso de registro y 4. FISIOLOGA Y RIESGO TOXICOLGICO EN EL


marketing de biocidas, mediante el REAL DECRETO 1054/2002 de EMPLEO DE BIOCIDAS
11 de octubre (BOE de 15 de octubre de 2002), donde se especifican
de forma detallada los conservantes autorizados en nuestro pas. Debe atenderse a la estructura y funcionamiento que permite el
Tambin se determinan las condiciones de su empleo, composicin ingreso, transformacin y excrecin del txico en el organismo del
interna, etc, no estando autorizada la comercializacin o empleo en individuo. Corrientemente las vas de acceso que tendrn los txicos
el mbito espaol de cualquier otro plaguicida de uso no agrcola emitidos por los biocidas, son los pulmones (mediante la respiracin)
que no se encuentre registrado en este documento. y la epidermis (por contacto o impregnacin de vapores nocivos).

Posteriormente, aos despus se incorporaron mejoras al Real Cuando la va de acceso se encuentra en los pulmones, bronquios
Decreto anterior, mediante la ORDEN PRE/1982/2007, de 29 y bronquiolos, stos se encargan de mover el aire hacia dentro y
de junio, por la que se modifican los anexos IVA y IVB del Real fuera, producindose una absorcin de los gases existentes en los
Decreto 1054/2002 de 11 de octubre, por el que se regula el proceso vapores de los lquidos (como ocurre con el empleo de sustancias
de evaluacin para el registro, autorizacin y comercializacin de como por ejemplo benceno, tetracloruro de carbono, fenol...), de ah
biocidas. De igual forma, se indica que siempre debe evitarse el la necesidad de erradicar el empleo de este tipo de productos.
empleo de conservantes peligrosos por otros de menor riesgo, y en el
caso de no ser posible su sustitucin, su empleo se realizar siguiendo Sern el hgado y los riones, los rganos del cuerpo ms involucrados
de forma escrupulosa las normas de proteccin y seguridad de las en la transformacin y expulsin de nuestro organismo de este tipo
personas involucradas en su uso. de agentes deletreos. El hgado estar directamente implicado
en la metabolizacin de estas sustancias para evitar su toxicidad,
3. BIOQUMICA Y MECANISMOS DE DETERIORO EN LOS transformndolas en metabolitos hidrosolubles expulsados
COMPUESTOS PROTEICOS mediante la orina (transportada por la circulacin sangunea hacia
los riones y la vejiga urinaria) o las heces (secretada por medio de
Los procesos vitales por los que puede pasar un material de la bilis hacia el intestino grueso).
tipo orgnico, son muy numerosos e significativos, debido a la
interaccin de sustancias que proporcionan importantes reacciones Al tratarse de entorno laboral, debe tenerse en cuenta que el tipo
coordinadas. En los materiales adhesivos de tipo proteico, ser de exposicin al que se somete el individuo es el enmarcado dentro
su carcter enzimtico el que le determine su mayor o menor del grupo de tipo crnico (exposicin entre un 10 y un 100% del
capacidad para llevar a cabo reacciones de tipo bioqumico en la periodo de su vida), al desarrollarse a lo largo de toda su trayectoria
mezcla adhesiva. profesional, por lo que la erradicacin de biocidas txicos debe ser
un factor esencial.
Compuestos endgenos o metabolitos
De igual forma, debe resaltarse que cada individuo tiene una
En los materiales de tipo orgnico se producen numerosas reacciones estabilidad gentica distinta ante la misma exposicin y absorcin
bioqumicas provocadas por el entorno que rodee al material y los de sustancias nocivas, de tal forma que no puede generalizarse
diferentes compuestos endgenos o metabolitos (como bacterias la capacidad de reaccin de cada uno de nosotros ante un mismo
y animales superiores), que al generar estas reacciones obtienen riesgo txico, mostrando respuestas biolgicas muy diferentes.
la energa necesaria para sus procesos vitales de supervivencia. Hay estudios que han verificado como en algunos casos, ante
Mediante estos procesos de sntesis se produce la biotransformacin exposiciones iguales se han observado respuestas idnticas, pero
del material, modificando sustancialmente sus propiedades en otros casos no. Por lo que ser la diferencia metablica de cada
iniciales. organismo, la que determine su mayor o menor tenacidad ante un
agente txico.
En las mezclas adhesivas de tipo proteico, bsicamente hablaremos
de microorganismos de tipo hetertrofo, que necesitan como medio Actualmente se desarrollan las denominadas reas de Restauracin
de cultivo fuentes de carbono orgnico para su desarrollo. Los Ambiental (ERLB), que tienen como fin reducir y/o eliminar los
hongos sern descomponedores generales de este tipo de materiales, riesgos existentes para la salud humana y su medioambiente.
manteniendo relaciones simbiontes con otros organismos y parsitos,
cuya alianza suponga un beneficio mutuo. Pero no puede obviarse 5. MATERIALES TESTADOS
su funcin como descomponedores de la materia, al cumplir as una
labor ecolgica de relevancia, garantizando el reciclaje de residuos Conservantes analizados
orgnicos del ecosistema.
La aplicacin de biocidas de origen natural a partir de extractos
Los adhesivos de tipo proteico empleados habitualmente en vegetales, surge en este estudio como alternativa saludable para el
consolidacin de policromas en pintura de caballete, pueden control del deterioro microbiano en las mezclas adhesivas de tipo
manifestar frecuentemente ataques de penicillium chrysogenum y orgnico, con el fin de prolongar su estabilidad y comportamiento

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futuro. Estos materiales 100% naturales, aventajan a los elaborados Se valor el grado de actuacin de un grupo de cinco biocidas
en laboratorio en importantes aspectos: son totalmente respetuosos naturales (Esencia de alcanfor, esencia de citronella, esencia de ajo, extracto
con el medioambiente, son fcilmente accesibles y de bajo coste, de equincea y propleo), su nivel de inhibicin, la capacidad de
y no resultan peligrosos por acumulacin. De forma general no disuasin ante microorganismos y la conservacin de las mezclas
presentan efectos secundarios, ni reacciones alrgicas en nuestro adhesivas.
organismo, si bien en determinados individuos pueden provocar
leves reacciones alrgicas en la epidermis. Las esencias testadas o aceites esenciales son una mezcla de
componentes voltiles producto del metabolismo secundario de las
Mediante estas sustancias se ha perseguido el control preventivo plantas. Las esencias son ms o menos complejas en funcin a la
sobre los hongos, microbios y bacterias que puedan destruir o porcin de hidrocarbruos de serie polimetilnica que presenten. Se
alterar las propiedades iniciales de las mezclas adhesivas empleadas les denomina aceites por su apariencia fsica y consistencia (muy
en la consolidacin de policromas al aceite. Los requerimientos semejante a los aceites grasos), pero se distinguen de ellos al tener
fundamentales exigidos fueron los siguientes: una alta capacidad voltil y evaporarse sin dejar huella ni marcas
grasas en la superficie donde se depositen.
- Nula toxicidad y estabilidad ante la actividad antimicrobiana.
- Homogeneidad y buena capacidad de miscibilidad con los A continuacin se detalla formalmente cada uno de los insecticidas
materiales adhesivos consolidantes. analizados y sus principales compuestos:
- Estabilidad colorimtrica y fsico-mecnica.

Figura 2. Espcimen IE (2g cola de pescado en 20ml H 2O + 1ml Equinacea . 48H HR


Figura 1. Espcimen I (2g cola de pescado en 20ml H 2O 48H HR 87% Ta 27,5oC) 87% Ta 27,5oC)

Imagen4. Espcimen IIE (2g Gelatina tcnica en 20ml H 2O + 1ml Equinacea . 48H HR
Figura 3. Espcimen II (2g gelatina tcnica en 20ml H 2O 48H HR87% Ta 27,5oC)
87% Ta 27,5oC)

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Esencia de alcanfor: Se trata de un terpenoide slido, cristalino y Esencia de ajo (Allium cepa Alliaceae): Para su obtencin, se aisla
voltil procedente de la madera del rbol alcanforero (Cinnamomum al agente activo bsico del ajo (la alliina), que cuando es liberada
camphora (L.) Presl) y otras plantas laurceas. La qumica del alcanfor es interacta con una enzima llamada allinasa. De esta forma se genera
muy compleja, siendo empleado con asiduidad como antimicrobiano y la allicina, que es la sustancia que contiene el olor caracterstico y
agente balsmico anestsico leve. En 1980 la Agencia internacional de penetrante del ajo. Otro principio activo en su composicin es el
Alimentos y Medicamentos (FDA), alert del peligro de su empleo en disulfuro de alipropilo, que permite controlar las larvas de plagas de
alimentacin ya que su ingesta puede provocar hiperactividad neuro diferentes cultivos en agricultura. Se contabilizan hasta ms de 20
muscular. S que se ha seguido empleando en medicamentos de uso componentes con propiedades antivirales y casi 40 componentes
tpico (como talcos), debido a sus buenas propiedades antispticas. antibacterianos (Alicia, ajoeno, acido cafeico, acido ascrbico,
acido clorognico, quercitina, etc.)
Esencia de citronella (Cymbopogon nardos): Esta especie de la familia
de las gramineas se produce a partir de dos variedades. Una de ellas Extracto de equincea (Equincea angustifolia): El extracto se
conocida como lana batu, suministra un aceite relativamente pobre obtiene de las races de esta planta de la familia de las asterceas
en geraniol (55-65 %). La otra conocida es la variedad maha pangiri, (nativa de norteamrica), con un fuerte componente txico con
de mejor calidad por su alto contenido en geraniol (hasta el 90 %). funciones disruptoras y repelentes en determinados insectos. Su
Los principales compuestos son el citronelal y el geraniol, l-limoneno, rasgo principal radica en sus ptimas propiedades antimicrobianas
canfeno, dipenteno, citronelol, borneol, nerol, metileugenol, los cuales contra bacterias, hongos y virus, configurando este material como
son utilizados en la preparacin de insecticidas a base de aceites una autentica alternativa a los antibiticos qumicos. Presenta en
esenciales, o como aromatizante de algunos insecticidas empleados su composicin un aceite esencial que supone el 1,5% del peso de
como repelentes de insectos para animales. la planta, compuesto principalmente por humuleno. Tambin se

Figura 5 Espcimen IIA (2g gelatina tcnica en 20ml H 2O + 1ml Esencia de Alcanfor Figura 6 Espcimen IIC (2g gelatina tcnica en 20ml H 2O + 1ml Esencia de Citronella
288H) 288H)

Figura7 Espcimen IIAO (2g gelatina tcnica en 20ml H 2O + 1ml Esencia de Ajo 288H) Figura 8 Espcimen IIE (2g gelatina tcnica en 20ml H 2O + 1ml Equinacea 288H)

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encuentran polisacridos de peso molecular elevado, compuestos A continuacin se describe someramente cada uno de los tipos de
fundamentalmente por ramosa, arabinosa, xilosa y galactosa, con colas testadas:
un contenido fenlico total de 10.49 mg/g.
Gelatina pura de pescado CTS : Adhesivo proteico que proviene
Propleo (Propolis): Sustancia resinosa que se obtiene de las del lavado, desecado y coccin de capas internas de la vejiga natatoria
colmenas y productos de las abejas, proveniente principalmente y espinas de los peces. De adhesin moderada en comparacin con
de los brotes del lamo y de las conferas. Est constatado su uso otras colas de origen animal.
medicinal desde la poca aristotlica, siendo usado ya entonces
como medicina antisptica para heridas y tumores. Es un buen Gelatina tcnica CTS : Sustancia adhesiva de pura piel
agente antioxidante y biocida ante organismos unicelulares tipo pulverizada, obtenida de tendones, huesos, cartlagos y lminas
fungi. Su composicin qumica es compleja (con ms de 250 basales. Despus de desengrasar los residuos, stos se someten a
elementos constitutivos), siendo rico en bioflavonoides, minerales, una fuerte ebullicin obteniendo as una cola de buena calidad, con
aminocidos y aceites esenciales, pudiendo variar sustancialmente propiedades muy adherentes, con un porcentaje muy reducido de
en funcin a la flora y clima de cada lugar. residuos.

Adhesivos naturales testados 6. EXPERIMENTAL

En cuanto a las colas proteicas analizadas, se realiz un estudio Para conseguir un amplio espectro de identificacin se realiz un
comparativo entre colas de pescado y gelatinas animales, para estudio de la resistencia antibacteriana de los biocidas, utilizando la
valorar cul de ellas mostraba una estabilidad mayor frente a tcnica del vertido en placa. Para ello se realizaron los vertidos de
microorganismos y bacterias. A la vez que una buena compatibilidad adhesivo por duplicado, con la adicin o no de biocida. Se emplearon
con los biocidas naturales testados. dos vertidos testigo sin fungicida (I, II), para poder establecer
relaciones entre los grados de deterioro observados.
En este estudio las dos colas analizadas son sustancias proteicas
cuyo componente principal es el colgeno tipo I, de composicin y Las muestras se introdujeron en una cmara de control climtico,
estructura algo diferente, pero con tropocolgeno como asociacin con condiciones ambientales constantes de humedad relativa de
estructural bsica comn. Y con una red de protenas fibrosas 85% 5 y temperatura de 25C 3, con una exposicin total de 288
(colgeno y elastina principalmente) en un gel de polisacridos horas.
hidratados. Cuentan en su composicin con un 15% de agua, entre
un 1-4% de sales inorgnicas y un pequeo porcentaje de grasa. Durante el transcurso de polimerizacin del film, se fue analizando
la infestacin gradual de agentes contaminantes. De esta forma
Es su estructura secundaria en triple hlice, el ensamblado de las se pudo determinar la actividad antibacteriana concordante de
unidades en fibras y su entrecruzamiento qumico, lo que le confiere los inhibidores, y su resistencia o sensibilidad frente a agentes
a este material ptimas propiedades adhesivas y de resistencia biticos de deterioro. Finalmente se cuantific el ataque biolgico
mecnica. Son capaces de formar soluciones coloidales acuosas de obtenido, con el fin de fijar la efectividad de dichos extractos como
tipo reversible, lo que les hace muy ptimas en tratamientos fijativos antispticos.
del color en la Conservacin de pinturas. Se trata de materiales
muy estables frente la oxidacin medioambiental, pero con gran En la tabla adjunta se muestran las mezclas realizadas y el tipo de
sensibilidad a su deterioro por hongos y bacterias, en entornos biocida empleado en cada caso:
medioambientales hmedos.

Discusin

De acuerdo con los resultados obtenidos, se tiene que el empleo de


determinados biocidas naturales como agentes bactericidas en la
formulacin de films adhesivos consolidantes, puede ser considerado
vlido como alternativa de prevencin de ataque biolgico, frente a
los conservantes patgenos empleados por los restauradores en la
actualidad.

Cada uno de los biocidas testados ofrecen diferentes grados de


resistencia, de esta forma el porcentaje de descomposicin, en las
muestras de cola de pescado (IE) es mayor que el de otros materiales,
independientemente de la adicin de un tipo de fungicida u otro.
(Foto1, 2) Las cepas de hongos aparecen en tiempos menores (48h),
frente a adhesivos ms resistentes al ataque fngico como gelatina
tcnica (96h), con el mismo conservante (Equinacea) y tiempo de
exposicin. (Foto 3, 4)

De igual forma, se observ como cuatro de los films adhesivos


Figura 9 Espcimen IIP (2g gelatina tcnica en 20ml H 2O + 1ml Propleo 288H) testados, no manifestaron crecimiento de hongos transcurridas

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las 288h del ensayo, permaneciendo totalmente estables ante el BIBLIOGRAFA


ataque biolgico. Concretamente nos referimos a los especmenes
IIA (Gelatina tcnica + Esencia de Alcanfor), IIC (Gelatina tcnica Seydim, A. C., Sarikus. G. (2006): Antimicrobial activity of whey protein
based edible films incorporated with oregano, rosemary and garlic essential
+ Esencia de Citronela), IIAO (Gelatina tcnica + Esencia de ajo), IIP
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- En general, puede decirse que los conservantes que mejores
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propiedades han aportado a los films adhesivos, han sido Esencia Series, 387. 1-10.
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Aprecindose un mejor estado de conservacin, debido por Arnason, J.T., Philogene, B.J.R. and Morand, P., (eds.) (1989): Insecticides
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De Billerbeck, V.G., Roques, C.G., Bessire, J.M., Fonvieille, J.L. and


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Dargent, R. (2001): Effects of Cymbopogon nardus (L.) W. Watson essential
naturales como biocontroladores de las mezclas adhesivas. El oil on the growth and morphogenesis of Aspergillus niger Canadian Journal
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peligrosidad en el entorno laboral del restaurador, y los niveles de
contaminacin en su ecosistema.

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