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UNIVERSIDAD ESTATAL AMAZNICA

LABORATORIO DE QUIMICA
ESCUELA DE INGENIERIA AMBIENTAL

ANLISIS AMBIENTAL

PRCTICA N 3

NOMBRE: EDISON SALAZAR

4to ambiental D 21/04/2017

TEMA: ANLISIS DE AZUL DE METILENO POR ESPECTROFOTOMETRA VISIBLE

INTRODUCCIN:
La espectrofotometra UV-Vis es un mtodo ptico de anlisis basado en la absorcin
molecular. El compuesto se irradia con luz de energa suficiente como para provocar
transiciones electrnicas, es decir promover un electrn desde un orbital de baja energa a
uno vacante de alta energa. El espectrmetro UV-Vis registra las longitudes de onda
donde se registra y cuantifica la absorcin. El espectro se registra como Absorbancia (A)
vs. longitud de onda (). La Ley de Bouguer-Lambert-Beer: A = c l, expresa
matemticamente la relacin directa y lineal entre la absorbancia, la absortividad molar,
la concentracin y el camino ptico. Con base en que la Absorbancia guarda una relacin
lineal con la concentracin, se comprende la existencia de una relacin de
proporcionalidad entre ambas, lo cual permite la cuantificacin de analitos. La
espectrofotometra UV-Vis se ha empelado ampliamente en el anlisis de muestras
biolgicas y/o ambientales.
El azul de metileno, cuyo nombre cientfico es Cloruro de Metiltionina, es un colorante
que se usa para tratar una enfermedad llamada metahemoglobinemia. Es un compuesto
qumico heterocclico aromtico con frmula molecular: C16H18ClN3S.

La empresa farmacutica TauRx Therapeutics ha comprobado que el uso del azul de


metileno (Rember) retrasa el deterioro de las funciones cognitivas de los enfermos de
Alzheimer. De todas maneras, la formulacin empleada en los ensayos clnicos no es la
utilizada para teir las clulas y, por tanto, no debe utilizarse.
Se usa en acuicultura de peces tropicales para tratar las infecciones fngicas. Tambin
puede ser efectivo para tratar peces infectados con el parsito protozoa ich:
Ichthyophthirius multifiliis.
Esta sustancia tiene forma de cristales o polvo cristalino y presenta un color verde oscuro,
con brillo bronceado. Es inodoro y estable al aire. Sus soluciones en agua o en alcohol son

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Dr. Marlon Nuez
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de color azul profundo. Es fcilmente soluble en el agua y en cloroformo; tambin es
moderadamente soluble en alcohol. Tambin sirve para los hongos de las uas, otro uso
es para tintar la ropa blanca cuando se vuelve amarillenta.

El 26 de julio de 2011, la Administracin de Alimentos y Medicamentos de los EE.UU.


(FDA) recibi informes sobre reacciones graves del sistema nervioso central (SNC) al
administrarse azul de metileno a pacientes que toman ciertos medicamentos psiquitricos
que trabajan a travs del sistema de serotonina del cerebro (medicamentos psiquitricos
serotoninrgicos).

OBJETIVOS:
Conocer la metodologa analtica para la cuantificacin de azul de metileno por
espectrofotometra visible.

MATERIALES:

EQUIPOS E MATERIALES MUESTRAS REACTIVOS


INSTRUMENTOS
Balanzas Pipetas graduadas Disoluciones de azul
Espectrofotmetro Celda de vidrio para de metileno
UV-Vis lectura

PROCEDIMIENTO:

Disolucin estndar (patrn) de azul de metileno.


a) Disolver 0,0250 g de azul de metileno en 50 mL de agua destilada.
b) Tomar 0,5 mL, transferir a un matraz aforado de 25 mL y enrasar con agua destilada.
Procedimiento analtico:
- Realizar un espectro en el intervalo 450 700 nm realizando mediciones de
absorbancia cada 20 nm.
- Dibujar el espectro en una hoja de Excel y determinar la longitud de onda de mxima
absorcin.
- Leer las absorbancias de patrn y muestra problema a la longitud de onda
determinada.
- Calcular la concentracin de azul de metileno en la muestra por el mtodo del patrn
externo.

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PRECAUCIONES: Se debe tener cuidado con el manejo de TODOS los reactivos y trabajar
con todas las normas de bioseguridad en el laboratorio para evitar accidentes.

Azul de metileno
Txico Txico y corrosivo. Corrosivo

QUEDA TOTALMENTE PROHIBIDO DESECHAR REACTIVOS U OTRO TIPO DE DISOLUCIN


POR LOS SUMIDEROS.
Si sobra algn reactivo consultar con el DOCENTE O COORDINADOR DE LABORATORIO su
disposicin adecuada.

OBSERVACIONES:

Durante el procedimiento se observ que la longitud de onda y la absorbancia son


proporcionales, hasta alcanzar el punto mximo y de all empieza a descender.
Al momento de manipular la celda de vidrio de lectura tenamos que tomar por el
lado ms carrasposo, una vez traspasado los lquidos de la muestra en la celda para
poner el espectrofotmetro lo limpiamos con un papel filtro.
Los materiales de las celdas donde se pone la muestra son de diferentes materiales
en este caso fue de vidrio.

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RESULTADOS:

ABS.
ABS MUESTRA
450 0,0260
470 0,0750
490 0,0990
510 0,1100
530 0,1380
550 0,2320
570 0,4000
590 0,7200
610 1,1460
630 1,1710
650 1,6140
670 1,7290 0,557
690 0,4740
710 0,1100

Datos:
M Soluto = 0,0250g azul metileno
V. Solvente = 50ml agua destilada
V1 de la disolucin =0,5ml (0,0250g +50mc)
V2 de la disolucin = 25ml (soluto + solvente)

C1=

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C1*V1=C2*V2

0, 5ml*0,5mg/ml=25ml*C2 C2=V1*C1
V2

C2=0, 5ml*0,5mg/ml
25ml

C2=0,01mg/ml
DATOS:
Cp. = 0,01mg/L
Ap. = 0,1792
Am = 0,557
Cm2 =?

= 0,0311 mg/L

CONCLUSIONES:

La espectrofotometra se refiere a los mtodos, cuantitativos, de anlisis qumico


que utilizan la luz para medir la concentracin de las sustancias qumicas.
El conocer el adecuado uso del espectrofotometro permitio obtener en el
laboratorio resultados con alta calidad analitica en las emiciones que son emitidas
por este.
Se identifico que el equipo presenta una adecuada precision y exactitud
determinando que las mediciones realizdas en este pueden ser confiables.
A mayor concentracin en las soluciones, mayor ser la cantidad de soluto
adsorbida cuando se mantiene la cantidad de adsorbente constante.
Nos permiti darnos cuenta de la precisin y la dedicacin que se debe tener al
manipular o realizar el proceso de absorbancia, ya que cualquier error en el
mtodo nos dar un resultado equivoco.

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Dr. Marlon Nuez

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