MIO Medio.

Medio usado para la identificacin de Enterobacteriaceae en base a su movilidad, actividad de ornitina decarboxilasa y
produccin de indol.

Fundamento
Medio de cultivo semislido, altamente nutritivo debido a la presencia de extracto de levadura, peptona y triptena. Adems,
la triptena aporta grandes cantidades de triptofano, sustrato de la enzima triptofanasa, para la realizacin de la prueba del
indol. La dextrosa es el hidrato de carbono fermentable, la ornitina es el sustrato para la deteccin de la enzima ornitina
decarboxilasa, el prpura de bromocresol es el indicador de pH, que en medio alcalino es de color prpura y en medio cido
es amarillo.
Por su composicin, es posible detectar 3 reacciones en un mismo tubo: movilidad, presencia de ornitina decarboxilasa e
indol.
La movilidad se demuestra por un enturbiamiento del medio o por crecimiento que difunde mas all de la lnea de
inoculacin.
La reaccin positiva a la ornitina est dada por un color prpura del medio. Debido a la fermentacin de la glucosa se reduce
el pH produciendo una condicin cida y originando que el indicador de pH prpura de bromocresol vire al amarillo. La
presencia de acidez, otorga condiciones ptimas para la actividad de la enzima ornitina decarboxilasa, la cual decarboxila la
ornitina presente. Por decarboxilacin, se alcaliniza el medio, con el consecuente viraje del indicador hacia el color prpura.
El indol, es producido a partir del triptofano por los microorganismos que contienen la enzima triptofanasa. El desarrollo de
un color rojo luego de agregar unas gotas de reactivo de Kovacs o de Erlich, indica un resultado positivo.

Frmula (en gramos por litro) Instrucciones

Dextrosa 1.0
Extracto de levadura 3.0
Peptona 10.0 Suspender 31 g del polvo en un litro de agua
destilada. Calentar a ebullicin hasta completa
Triptena 10.0
disolucin. Distribuir en tubos y esterilizar 15
Clorhidrato de L-ornitina 5.0 minutos a 121C.
Agar 2.0
Prpura de bromocresol 0.02
pH final: 6.5 0.2

Siembra
A partir de un cultivo puro del microorganismo en estudio, inocular por puncin profunda con ansa recta.

Incubacin
En aerobiosis, durante 18-24 horas a 35-37 C.

Resultados
1-Movilidad:

-Resultado positivo: presencia de turbidez o crecimiento mas all de la lnea de siembra.

-Resultado negativo: crecimiento solamente en la lnea de siembra.

2-Ornitina decarboxilasa:

-Resultado positivo: color prpura.

-Resultado negativo: color amarillo. A veces se puede desarrollar un color violceo en la superficie del medio.

3-Prueba del indol:

La prueba de indol se realiza una vez que se ha determinado la movilidad y la prueba de ornitina.
-Resultado positivo: color rojo al agregar el reactivo revelador.
-Resultado negativo: el color del reactivo revelador permanece incoloro-amarillento.

Microorganismo Crecimiento Movilidad Indol Ornitina decarboxilasa

E. coli ATCC 25922 Bueno + + +
K. pneumoniae ATCC 700603 Bueno - - -
P. mirabilis ATCC 43071 Bueno + - +

Caractersticas del medio