PRACTICA DE MICROBIOLOGIA

1. Denominación de la Práctica: observación de células en muestra de Papanicolaou

2. GENERALIDADES

Dé las neoplasias que afectan a la mujer las mas frecuentes son los que se localizan en el
cuello del útero.
Cuando aun están circunscritas al epitelio origen, estas formas no dan sintomatología
clínica (preclinico) si el diagnostico se hace en esta fase y se aplica una terapia adecuada
las perspectivas de curación se elevan a un 100% de los casos; si la exploración para el
diagnóstico se verifica para el carcinoma ha invadido ya profundamente el cuello del útero
pero no ha sobrepasado aun los limites anatómicos del órgano las posibilidades de una
curación definitiva baja 75% .
El papanicolaou es un examen citológico de los exudados vaginales aislados que nos
permite reconecer las células cancerosas separadas dé la zona neoplásica, siendo el medio
más fácil para discriminar
El frotis de PAP es parte importante de la exploración ginecológica la frecuencia con la que
debe
Realizarse esta prueba es una vez por año para un diagnostico precoz de cualquier
neoplasia.

3. OBJETIVO
 conocer las técnicas de la obtención de muestra de Papanicolaou
 Que conozca sobre los criterios empleados en la interpretación de resultados del PAP.
 Montar en el microscopio la muestra de Papanicolaou y observar células en distintos
aumentos
 Identificar las células presente en el la muestra de Papanicolaou

4. MATERIAL PARA LA TOMA DE MUESTRAS

 El Material necesario para realizar la toma de muestra para el examen citológico es el

siguiente:
 Especulo vaginal
 Espátula de Aire de extremidad cóncava para la medida de la portio por medio de abrasión
superficial.
 Cono de Myller de metal con aletas laterales para tomas de la zona liminal y del endo-cervix
.
 Cánulas de Norvak para las aspiraciones del material celular y eventualmente biopsia del
endometrio.
 Portaobjetos
 Frascos conteniendo la solución idónea para la fijación del material extendido en las portas
compuestas de alcohol de 95° y éter etílico a partes iguales.
 Estuche para la conservación y envío de los portas al laboratorio.
 5. PROCEDIMIENTO PARA LA TOMA DE MUESTRA

Para obtener una muestra adecuada para la prueba: La paciente no deberá bañarse bajo la
regadera cuando menos 24horas.
No deberá estar menstruando.
No deberá tener relaciones sexuales 48 horas antes del examen.
La extracción se puede realizar:
• Con una cánula provista de una perita de goma con la que se aspira el material para examen
del fornix posterior donde se acumula la mayor parte de las células exfoliadas.
• Con la espátula de Ayre se recoge el material mediante abrasión superficial, directamente de
las zonas de la portio mayormente atacadas por el cáncer. La extracción se realiza imprimiendo
a la espátula aplicada sobre el contorno del orificio externo con un movimiento circular de 360°.
• La extracción con el cono de Myller se realiza introduciendo este en el orificio externo del
cuello del útero por medio de este dispositivo se realizan las extracciones de la zona liminal y
la del endo-cervix imprimiéndole un movimiento de rotación que consienta a recoger el
material celular por medio de los relieves de su aleta.
Con la cánula de Norvak se absorbe por aspiración el material del canal cervical o de la
cavidad uterina.
En caso de mujeres solteras como el himen impide
La buena toma de muestra entonces se realiza mediante, un especulo virginal desplazando lo
mas posible con dedos la vagina y con un porta algodones humedecido con solución
fisiológica se toma la muestra de la vagina.

PROCEDIMIENTO PARA EL EXTENDIDO

El extendido debe ser lo más uniforme y delgado posible(evitando grumos), para luego fijarlo por lo
menos por 15 minutos en una solución del alcohol de 95° y éter etílico a partes iguales en esta forma
es en que se puede enviar al laboratorio de citología donde los portas serán teñidos e interpretados.

APLICACIONES DEL PAP

El frotis de papanicolaou solo es una prueba de selección, las pruebas positivas constituyen una
indicación para ulteriores procedimientos diagnósticos como:
 Citodiagnostico funcional.
 Control citológico de la gestación
 Control de hormonoterapia ginecológica.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

La coloración de Papanicolaou es un método basado en la diferenciación de color de los diversos

componentes celulares, se aplica a los diversos tipos celulares para el diagnóstico de cambios
malignos y la tipificación celular. Los núcleos son coloreados con la hematóxilina de Harris
(coloración básica), el citoplasma con un colorante de naturaleza alcohólica y
policromática:coloración de eosina (coloración acida);y la queratina citoplasmática , cuando esta
presente, se colorea con orange G.
En el frotis vamos a encontrar: "
• Células superficiales de naturaleza eosinofila: anaranjados.
• Células Superficiales en etapa de maduración de la capa intermedia: cianofilas.
• Mucus, leucocitos, posibles infecciones por tricomonas, candidas o en proliferación excesiva
bacteriana.
Si existe atipia celular se refiere a criterios citológicos de degeneración maligna donde se observan
células con modificaciones en núcleo, citoplasma, etc.
Que son alteraciones patológicas.
La lectura de los preparados hace clasificar a los extendidos en:
• Hiperestrogenismo: con células superficiales y 50% de células eosinofilas.
• Eutrófico: indica funcionamiento normal del útero ovárico.
• Hipotrófico:
• Cuando hay deficiencias de estrógenos y puede ser ligera, moderada, acentuada y atróficas.

REPORTE DE PAPANICOLAU

• Las lesiones precancerosas se clasifican según uno u otro de dos esquemas: el término más
utilizado es "displacía" que significa forma anormal, alteración del desarrollo que se divide en leve
moderada y grave; según la proporción del grosor total del epitelio que esta afectado por las células
atípicas. Cuando una afección es total, el cuadro es de una carcinoma in situ. Otro enfoque esta
basada en que las alteraciones displásicas representan aspecto de la misma alteración básica o
Neoplasia Intra epitelial Cervical (NIC).
- NIC, grado I: Afección inferior a un tercio de grosor del epitelio.
- NIC grado II: afección entre uno y dos tercios del grosor del epitelio se considera como cáncer.
- NIC grado III: afección de dos tercios a más del grosor de epitelio es decir carcinoma in situ.
Precursor del carcinoma.
La neoplasia interepitelial cervical se inicia casi siempre en la unión escamocilindrica es decir en la
zona de transformación, el grado I puede progresar al siguiente grado posterior a lo largo de un
periodo de diez años y lo mismo sucede con el grado I y II.
Cuando mayor sea el grado de displasia mas corto será el intervalo necesario para el desarrollo de
un carcinoma in situ, la velocidad del desarrollo no es uniforme por lo que es prácticamente
imposible predecir la evolución de la enfermedad en cada paciente.

Lesión Escamosa intraepitelial (LEÍ)

Comprende un espectro de anormalidades epiteliales no invasivas, que tradicionalmente se han

clasificado como condiloma plano, displasia, carcinoma in situ y NIC.
El reporte llamado LEÍ esté basado en el método de Bethesda donde las lesiones se dividen en
lesiones bajo grado y alto grado.En las de bajo grado, se agrupan las alteraciones celulares asociadas
a infección por papiloma Virus Humano (PVH), el llamado coilocito y la displasia leve/NIC I.Las
lesiones de agrupan a la displasia moderada/NIC II, displasia severa/NIC III y el carcinoma in situ.

CRITERIOS CITOLOGICOS

LEÍ de Bajo Grado.

- Las células aparecen agrupadas en forma aislada.
- Las anormalidades nucleares generalmente se observan en células superficiales o maduras.
- Hay agrandamiento nuclear por lo menos tres veces el tamaño del núcleo de una célula normal
intermedia, dando como resultado un incremento de la relación núcleo/citoplasma.
- Moderada variación en tamaños y formas de los núcleos.
- Con frecuencia se observa binucleación o Multinucleación.
- Hay hipercromasia, con cromatina uniformemente
distribuida.
- La membrana nuclear muestra leves irregularidades es poco distinguible.
LEÍ de Alto Grado
- Las células epiteliales se agrupan en forma de mantos.
- Marcado agrandamiento nuclear semejante a las lesiones de bajo grado, pero hay una
disminución del área citoplasmatica, trayendo como consecuencia un incremento mayor de la
relación núcleo/citoplasma.
- En general el tamaño celular en las LEIAG es menor que en las LEIBG.
- Hay marcada hipercromasia y la cromatina es granular, gruesa y de distribución irregular.
- El nucléolo esta generalmente ausente.
- Los bordes nucleares son irregulares.

6. RESULTADOS

Se observaron en los microscopio las láminas ya preparadas donde se lograron identificar :

 Células intermedias: e originan en el estrato medio del epitelio y son las células más
frecuentes en la fase postovulatoria. Representa la célula más constante y numerosa
en los frotis vaginales.
Son células también grandes (30-50 µm) aunque algo menos que las superficiales,
con citoplasma transparente, poligonal y de bordes plegados. La tinción suele ser
pálida verde-azulada (cianófila). Los núcleos son redondos u ovales, mayores que los
de las células superficiales (9-11 µm), de apariencia vesicular y cromatina fina.
Ocasionalmente muestran una barra o surco longitudinal y en él puede identificarse la
cromatina sexual o corpúsculo de Barr (estructura planoconvexa de aproximadamente
1 µm de diámetro adherida a la cara interna de la membrana nuclear). (Anexo N° 01)
 Células superficiales: Se originan de la capa superficial del epitelio escamoso no
queratinizado, son las más comunes de la fase preovulatoria y reflejan el mayor grado
de madurez.
Las células son grandes (40-60 µm), poligonales, de bordes citoplasmáticos bien
definidos e irregulares. El citoplasma es translúcido, homogéneo, preferentemente
eosinófilo y ocasionalmente puede mostrar gránulos de queratohialina alrededor del
núcleo. Los núcleos son pequeños (5-7 µm), centrales y redondos, la mayoría
picnóticos. El criterio decisivo para la identificación de la célula superficial es
la picnosis, independientemente de la tinción del citoplasma. Las células superficiales
son las observadas durante la madurez sexual cuando el efecto estrogénico es más
intenso (fase ovulatoria) y en casos de acción hormonal hiperestrogénica (persistencia
del folículo y tumores funcionantes, entre otras causas). (Anexo N° 02)
 Células endometriales mostrar un núcleo central constituidos por células estromales
pequeñas, elongadas, muy agrupadas, y una zona periférica formada por células
glandulares que a veces se ordenan concéntricamente alrededor del núcleo central de
células estromales. Otras veces pueden aparecer como grupos de células
endometriales glandulares, sin células estromales (Anexo N° 03)
7. Discusión

Una citología cérvico-vaginal consiste en la toma de una muestra de la secreción vaginal y cuello del
útero con una espátula especialmente diseñada para ello para estudiar al microscopio
posteriormente las células que se encuentran en esta secreción.
La realización del test de Papanicolau es similar a la de cualquier exploración ginecológica.
La prueba de Papanicolaou se realiza como parte de un examen ginecológico. ¨La paciente se
acuesta sobre una mesa y coloca las piernas en los estribos con el fin de ubicar la pelvis para el
examen. Se introduce un espéculo (instrumento utilizado para dilatar las paredes de la cavidad
vaginal con el fin de examinar el interior) en la vagina y se abre ligeramente¨Dr. Aldo garcia .
Se toma una muestra de células del exterior y del canal del cuello uterino raspando suavemente su
exterior con una espátula de madera o plástica e insertando posteriormente un pequeño cepillo,
que parece un limpiador de tubos, en el canal.
Las células se colocan sobre una laminilla de vidrio y se rocían con un fijador o se colocan en una
botella que contiene un conservante para enviarlas luego al laboratorio para su análisis.
El objetivo de un frotis de Papanicolaou es encontrar un cambio o anomalía en el cuello uterino
antes de que se vuelva canceroso por tal La citología cérvicovaginal o test de Papanicolau es el
método más efectivo en el cribado del cáncer cervical. Consiste en la triple toma de células del tracto
genital (vaginal, endocervical y ectocervical) con el fin de sospechar la existencia de displasias antes
de que se haya producido invasión del estroma por células neoplásicas. Tiene una baja sensibilidad
(50-60%), debida fundamentalmente a errores en la toma y errores en laboratorio, y un alto
porcentaje de falsos negativos que puede llegar al 30%. Sin embargo, en el adenocarcinoma
disminuye la sensibilidad. Debe realizarse de manera sistemática a todas las mujeres desde el inicio
de relaciones sexuales o desde los 18 años, de manera anual durante 3 años consecutivos y a partir
de entonces, si los resultados son negativos, se repetirá la citología cada 2-3 años en caso de no
haber factores de riesgo (promiscuidad sexual, ETS, HPV, etc.) o anualmente si existen dichos
factores de riesgo, hasta los 65-70 años. Su uso ha reducido las muertes por cáncer de cerviz en más
del 50%.

8. Conclusiones:
 Se conoció las técnicas de la obtención de muestra de Papanicolaou en mujeres
 Aprendimos sobre los criterios empleados en la interpretación de resultados del PAP.
 Se monto en el microscopio la muestra de Papanicolaou asi observando a las células
cervico-vaginales y endo-vaginales en distintos aumentos
 Ser identifico las células presente en el la muestra de Papanicolaou

BIBLIOGRAFÍA

 Métodos de análisis clínico y su interpretación Dr Aldo A. Garcia 4º Edicion

 www.cancerquest.org/.../pics/cervix_cin123.jpg El cáncer cevicouterino o cervical: NIC y la
Etapificación del Cáncer.
 http: //www.dmedicina.com/salud/infección html.
ANEXO

Imagen n° 01: celulas intermedias en muestra de papanicolau

Imagen N°02: células superficiales en muestra de Papanicolaou

Imagen N°03: células superficiales en muestra de Papanicolaou
 FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MEDICINA

PRACTICA DE OBSERVACION DE CELULAS DE PAPANICOLAU

AUTOR:

CHRISTIAN PIERRE SALDAÑA AGURTO

DOCENTE :

Blga. BRENDA MORALES

CURSO:

FUNDAMENTOS DE AYUDA AL DIAGNOSTICO

PIURA – PERU