PRÁCTICA 4

EXTRACCIÓN DE ALCALOIDES PRESENTES EN LA GUANÁBANA

Annona muricata
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Daniela Santoyo Alemán, Profesor: Fernando Agudelo Aguirre, Universidad del
Quindío, Facultad de Ciencias Básicas y Tecnologías, Programa de Química
19 de abril de 2016

RESUMEN

En esta práctica de laboratorio se realizó la extracción de los alcaloides presentes en la

planta annona muricata por medio de varios procedimientos, primero se realizó el
desengrasado, en donde se pesaron 55,5 g de material vegetal seco y pulverizado y se
realizó una extracción Soxhlet con 400 mL de éter de petróleo durante 8 horas, después se
realizó una lixiviación con etanol al 95%. El extracto etanólico se concentró por medio de
un ventilador durante 8 días. El extracto obtenido se acidificó con HCl 0,5 N y se realizó la
extracción con CHCl3 separando así las fases, se guardó en la nevera durante 8 días.
Seguido a esto, los alcaloides en su forma ácida se basificaron con NaOH al 15% y se
realizó una extracción liquido-liquido con CH2Cl2, de esta forma y por concentración de la
fase clorofórmica se pudieron realizar las pruebas de Mayer, Dragendorff y Bouchardat
para las cuales los resultados fueron positivos a excepción de la prueba de Mayer.

INTRODUCCIÓN

La Guanábana pertenece a la familia de las Annonáceas, y se caracterizan por ser plantas

leñosas de hojas enteras, sin estípulas, de flores hermafroditas y frutos por lo general en
baya, frecuentemente reunidas formando frutos colectivos de los que forma parte el eje
floral carnoso. Es un árbol siempre verde de unos 10 m de altura, las hojas son alternadas,
simples, enteras, de superficie exterior coriácea y color verde brillante, muy atractuva y de
forma alargada. El tronco es recto y de color grisaceo. El fruto es un sincarpo verde,
ovoide, con frecuencia de forma oblicua o curvada, de 10–35 por 7–15 cm, cubierta de
espinas suaves y pulpa blanca comestible, peso comprendido entre 2 y 4 kilos.

La cáscara es de color verde oscuro brillante que se vuelve verde mate cuando está madura,
y está cubierta de espinas. La pulpa es blanda, generalmente de color blanco, puede ser
ligeramente amarillenta, de una textura carnosa y jugosa y un sabor marcadamente ácido.
El fruto alberga en su interior numerosas semillas de color negro que se desprenden
fácilmente. También se emplea en la elaboración de postres como merengues y mousses.
La Guanábana es muy apreciada en todos los países Centroamericanos y con su pulpa se
preparan deliciosos helados, bebidas y confituras.
La guanábana es originaria de las regiones tropicales de América del Sur. En Costa Rica,
hasta hace pocos años sólo había árboles dispersos; sin embargo, la importancia que ha
adquirido el fruto en el mercado agroindustrial, tanto nacional como internacional, ha
despertado el interés para desarrollar el cultivo comercialmente.

Desde el año 1999, circulan por Internet anuncios publicitarios, afirmando sin fundamento
científico, que el té de guanábana cura el cáncer. No se han realizado pruebas in vivo que
demuestren que la guanábana o algún compuesto de ésta sea efectiva contra algún tipo de
cáncer en humanos.
Existen diversos estudios sobre la anonacina, el compuesto de la guanábana que
presuntamente tendría efectos anticancerígenos, pero esos estudios fueron realizados in
vitro o in vivo en animales, no existiendo aún ningún estudio clínico en humanos. Un
motivo citado para la falta de estudios clínicos en humanos es el hecho de que no se puede
patentar una planta, lo que lleva a ciertos laboratorios, que patrocinan los estudios, a
concentrar las investigaciones en los principios activos, acetogeninas anonáceas, en vez de
la planta.
Del lado positivo, un estudio in vitro realizado en conjunto por la facultad de farmacia y
bioquímica de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos y la Universidad Peruana
Cayetano Heredia demostró que un extracto etanólico de hojas de Annona muricata tiene
un efecto citotóxico sobre los tipos C678 y H460 de cultivos de líneas
celulares deadenocarcinoma gástrico y pulmonar.

TAXONOMÍA
Reino Plantae
División Magnoliophyta
Clase Magnoliopsida
Orden Magnoliales
Familia Annonaceae
Subfamilia Annonoideae
Tribu Annoneae
Género Annona
Especie A. muricata
L., 1753
Figura 1. Guanábana (Annona muricata) Tabla 1. Taxonomía de la Annona muricata
METODOLOGÍA

Material Vegetal
seco y pulverizado
Extracción
Éter de petróleo

Fase Etérea Extracto

Lixiviación
Desecha Etanol 95%

Extracto
Etanólico
a) HCl 0.5 N, O ºC
Agitación magnética 3 h.
b) Centrifugación

Insoluble en Solución acuosa

HCl 0.5 N ácida

a) Basificar a pH 10
b) Extracción con CHCl3

Solución acuosa Extracto clorofórmico

pH 10
Fracción A
a) HCl 2 N pH 2-3
b) Reactivo de Reinecke
 Precipitado de Solución ácida
Reineckato

Disolución en
Acetona: Metanol (1:1)

Columna
Dowex-2-Cloruro

Cloruro de Alcaloides
Cuaternarios
Fracción B

RESULTADOS

Se realizó el desengrasado por medio de una extracción Soxhlet con 55,5 g de la planta
Annona muricata (guanábana) y 400 mL de éter de petróleo, el sifón se realizó durante 8
horas, esto con el fin de retirar del material vegetal los lípidos, taninos y carotenoides
presentes en la planta. Después se realizó la lixiviación con etanol al 95%, esto se llevó a
cabo en una bolsa de suero con su respectiva manguera, este proceso se realizó durante 1
semana, permitiendo un mayor contacto del solvente con el extracto desengrasado.

Después de transcurrido este tiempo se realizó la concentración de la fase etanólica, esto

con la ayuda de un ventilador, debido a que el etanol posiblemente no se encontraba al
95%, por lo que con el rotavapor no se podía concentrar la fase, sin calentar demasiado,
para evitar este calentamiento, que dañaría los alcaloides presentes, se realizó la
concentración durante 1 semana con ventilador.

Se acidificó el extracto con HCl 0,5 N y se agitó para separar los alcaloides de otras
sustancias que se encuentren en el extracto como pigmentos, esteroles y otras impurezas. Se
realizó una extracción líquido-líquido con la ayuda de un embudo con CHCl3, se separaron
las fases y se guardó en la nevera durante 1 semana. Los alcaloides que se encuentran en
forma ácida (alcaloides solubles en HCl) se basificaron con aproximadamente 16 mL de
NaOH al 15% hasta pH de 12. En este punto los alcaloides presentan un olor desagradable.
Los alcaloides fueron extraídos con CH2Cl2 por medio de una extracción líquido-líquido
por medio de un embudo de decantación. La fase que contenía diclorometano se recolectó
en un Erlenmeyer y seguidamente se agregó más CH2Cl2, para una correcta extracción de
los alcaloides. Una vez obtenidos, para poder realizar las pruebas para la identificación se
acidificaron con 0,5 mL de HCl y se concentró en una estufa.

Para la realización de las pruebas se agregó aproximadamente 1 mL de etanol, y se

realizaron las pruebas de Mayer, Bouchardt y Dragendorf por duplicado, para esto se utilizó
una placa excavada y se agregaron 2 gotas del concentrado de alcaloides, seguidamente se
agregaron 3 gotas de cada uno de los reactivos.

La tabla 2 muestra los resultados de las pruebas realizadas, y la figura 2 la coloración

obtenida.

Reactivo Resultado
Mayer -
Bouchardat ++
Draguendorff ++
(++): Prueba positiva
(-): Prueba negativa
Tabla 2. Resultados obtenidos por los reactivos de coloración.

Figura 2. Resultados de las pruebas de Dragendorf, Mayer y Bouchardat respectivamente.

ANÁLISIS DE RESULTADOS

En el proceso de desengrasado se llevó a cabo la extracción de los componentes insolubles.

Los alcaloides se encuentran combinados con ácidos orgánicos o compuestos como los
taninos. Cuando se encuentra formando este tipo de sales, son solubles en agua, alcohol e
insolubles en solventes orgánicos. Aprovechándose esta propiedad se llevó a cabo una
extracción Soxhlet con un solvente orgánico, la fase sólida contiene los alcaloides que son
extraídos posteriormente.

Teniendo los alcaloides en forma soluble en esta fase sólida, se llevó a cabo el proceso de
lixiviación. Esta extracción sólido-líquido permite el flujo de etanol a través de la biomasa
desengrasada. Se separaron los alcaloides de otras sustancias que se encuentran en el
extracto como pigmentos, esteroles y otras impurezas restan en la fase orgánica por medio
de centrifugación. El sobrenadante es alcalinizado para obtener los alcaloides en su forma
básica, los cuales son extraídos con fracciones de diclorometano por medio de un embudo
de decantación.

Los reactivos de Mayer, Dragendorff y el reactivo Bouchardat, son agentes que ayudan a
identificar cualitativamente la presencia de alcaloides y dan características especiales
mediante el cambio de color o la formación de precipitados, para este caso el reactivo de
Mayer dio negativo, el reactivo de Dragendorf formó un precipitado de color naranja, el
reactivo de Bouchardat precipitó un compuesto de color marrón-naranja.

Las pruebas de Dragendorff y Bouchardat dieron positivas indicando la presencia de

alcaloides.

Reactivo de Mayer:

Es una solución de mercurio tetrayoduro de potasio, utilizado para la identificación no

específica de alcaloides. Los alcaloides se detectan como un precipitado blanco o de color
crema soluble en ácido acético y etanol.

Reactivo de Bouchardat:

Es una solución yodo-yoduro de potasio. La prueba positiva se da por formación de un

precipitado floculento de color marrón, naranja que cambia con el tiempo.

Reactivo de Dragendorf:

Es una solución ácida de yodobismutato de potasio. Precipitado rojo-naranja indica prueba

positiva en la presencia de alcaloides.
Espectro infrarrojo obtenido:

Figura 3. Espectro Infrarrojo del alcaloide.

Longitud de onda (cm-1) Grupo funcional

3417,52 Enlace N-H
2922,91 - 2851,15 C-H Alifáticos
1612,49 Enlace C=O, C=C
1328,08 Enlace C-N
771,54-517,10 Bandas de aromáticos
Tabla 3. Análisis de las bandas del espectro Infrarrojo del alcaloide.

CONCLUSIONES

 Se identificó, estudió y aplicó de manera satisfactoria el procedimiento para la

extracción de los alcaloides presentes en la guanábana (Annona muricata).

 Este método de extracción constituye un buen procedimiento para la separación de

alcaloides importantes a nivel farmacológico, en la preparación de medicamentos a
gran escala que posean alcaloides como componentes activos.

 Mediante la utilización de los reactivos de coloración, se aseguró la presencia de

alcaloide en las hojas de la planta, ya que 2 de las pruebas realizadas indicaron
prueba positiva.
BIBLIOGRAFÍA

 Aspectos Técnicos sobre Cuarenta y Cinco Cultivos Agrícolas de Costa Rica.

Dirección General de Investigación y Extensión Agrícola. Ministerio de Agricultura
y Ganadería. San José, Costa Rica. 1991.
 Arango, T. Favio. La Guanábana, Revista Esso Agrícola Vol. 21 Años 2 (Abril-
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 Yesid Flórez Londoño, Elizabeth Martínez Muñoz. Obtención y evaluación de
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Universidad Tecnológica de Pereira.2010.
 Hernández, Ramón Luis. El cultivo de la Guanábana Serie Tecnología INA No. 3.
San José, Costa Rica. 1985. Pág 18.