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INSTITUTO TECNOLÓGICO DE MORELIA

DIVISIÓN DE ESTUDIOS DE LICENCIATURA

BIOQUÍMICA
ING. BIOQUÍMICA

SEGUNDO REPORTE
TEMA:

CURVA DE TITULACIÓN DE UN AMINOÁCIDO

ALUMNO:
JUAN JOSÉ DÍAZ AGUILAR
ARTURO DÍAZ HUERTA

PROFESOR:
JUAN CARLOS GONZÁLEZ HERNÁNDEZ
MORELIA, MICHOACÁN, MÉXICO; FEBRERO 2018
INTRODUCCIÓN.

Desde un punto de vista estructural, los aminoácidos son los elementos

constituyentes de las proteínas y éstas a su vez son las estructuras que componen
cualquier tejido vivo. Las fibras musculares, las membranas celulares, los enzimas,
los elementos neuroquímicos del tejido cerebral, constituyen ejemplos de tejidos
compuestos por proteínas; no en vano, el 70% de nuestro organismo (excluyendo el
agua y el tejido graso), son proteínas. Es de tal relevancia su presencia, que a estos
nutrientes se les conoce como los ‘constructores de la vida.
Desde un punto de vista funcional, los aminoácidos cumplen importantes funciones,
entre ellas citar su intervención en el metabolismo energético, y su acción antiestrés
minimizando los efectos nocivos que provocan ciertas enfermedades.

Los aminoácidos son moléculas orgánicas que presentan, como su propio nombre
indica, un grupo amino y un grupo ácido, en concreto, un grupo carboxilo. Esto hace
que tengan un comportamiento anfótero, y que puedan comportarse como ácidos o
como bases.
En solución acuosa y a pH fisiológico, un aminoácido se encuentra normalmente
como molécula ionizada o ion dipolo, lo que se conoce como zwitterion, en la que el
grupo amino gana un protón y adquiere una carga positiva, mientras que el grupo
carboxilo pierde el protón y adquiere una carga negativa. En estas circunstancias, la
molécula sigue siendo globalmente neutra aunque presenta grupos cargados
individuales. Pues bien, como también comentamos en la entrada anterior, cada
aminoácido presenta unos valores de pKa que le identifican; es frecuente tener los
pK de los grupos ionizables de los aminoácidos en una tabla para poder predecir su
comportamiento ácido-base.
Se llama pH isoeléctrico o punto isoeléctrico al pH en el que la concentración de
Zwitterión es máxima (el aminoácido no presenta carga neta).
Otra definición de punto isoeléctrico es: pH al que la concentración de especies
protonadas y desprotonadas se igualan. El pH isoeléctrico se calcula como media de
pKa,1 y pKa,2, es decir, la media de los pKas de las etapas que forman y
descomponen el Zwitterión.
La representación gráfica de la variación del pH de una solución por la adición de
equivalentes de ácido o base se denomina curva de titulación.

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OBJETIVOS

 Por medio de una titulación con NaOH, identificar el aminoácido preparado

previamente por el equipo del laboratorio añadiendo .2 ml de solución hasta
llegar un pH de 13

 Determinar los valores de pKa del aminoácido problema mediante el método

de titulación por neutralización acido base.

 Comparar los resultados prácticos, con los teóricos.

HIPÓTESIS

Dado que ya están establecidas las curvas de titulación de diferentes aminoácidos

por medio de esta práctica se compararan los datos ya establecidos llegando a la
identificación del aminoácido utilizando nuestros datos obtenidos mediante la
titulación por neutralización acido-base con los ya conocidos de algunos
aminoácidos.

MATERIALES Y EQUIPO

 NaOH 0.1 N.
 Aminoácido problema 0.05M.
 1 Vaso de precipitado de 30 ml.
 1 Potenciómetro.
 1 Bureta.

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DIAGRAMA DE FLUJO

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RESULTADOS

Resultados Equipo 2 (Nuestro equipo)

Tabla 1) Resultados de titulación equipo 2. Volumen añadido de NaOH contra pH

obtenido.

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Grafica 1) Curva de titulacion del aminoacido problema del equipo 2.

Imagen 1) Curva de titulación ácido base del aminoácido básico histidina. [1]

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Resultados Equipo 1.
Tabla 2) Resultados de titulación equipo 1. Volumen añadido de NaOH contra pH
obtenido.

Grafica 2) Curva de titulacion del aminoacido problema del equipo 1.

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Resultados Equipo 3.

Tabla 3) Resultados de titulación equipo 3. Volumen añadido de NaOH contra pH

obtenido.

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Grafica 3) Curva de titulacion del aminoacido problema del equipo 3.

Imagen 1) Curva de titulación ácido base del aminoácido básico histidina. [1]

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Resultados Equipo 4.
Tabla 4) Resultados de titulación equipo 4. Volumen añadido de NaOH contra pH
obtenido.

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Grafica 4) Curva de titulacion del aminoacido problema del equipo 4.

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Resultados Equipo 5.

Tabla 5) Resultados de titulación equipo 5. Volumen añadido de NaOH contra pH

obtenido.

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Grafica 5) Curva de titulacion del aminoacido problema del equipo 5.

Imagen 2) Curva de titulación de la arginina. [2]

12
Resultados Equipo 6.

Tabla 6) Resultados de titulación equipo 6. Volumen añadido de NaOH contra pH

obtenido.

pH inicial pKa1 pKa2 pKa3 Pl Aminoácido X

1.88 2.6 9.7 12.51 11.05 Arginina

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Grafica 6) Curva de titulacion del aminoacido problema del equipo 6.

Imagen 2) Curva de titulación de la arginina. [2]

Resultados Equipo 6.

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Tabla 6) Resultados de titulación equipo 6. Volumen añadido de NaOH contra pH
obtenido.

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16
Grafica 7) Curva de titulacion del aminoacido problema del equipo 7.

17
Resultados Equipo 8.

Tabla 8) Resultados de titulación equipo 8. Volumen añadido de NaOH contra pH

obtenido.

18
Grafica 8) Curva de titulacion del aminoacido problema del equipo 8.

19
Resultados Equipo 9.

Tabla 9) Resultados de titulación equipo 9. Volumen añadido de NaOH contra pH

obtenido.

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Grafica 9) Curva de titulacion del aminoacido problema del equipo 9.

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DISCUSION DE RESULTADOS

Equipo 1
El equipo 1 empezo con un pH de 1.74 donde hicieron 25 muestras en el cual se
llego a un pH de 12.81, donde desde las muestras muestras 7 y 8 se presencio un
gran despunte del pH. Apartir de la grafica y de los pKa´s obtenidos se dedujo que el
aminoacido es tirosina.
En la tirosina el valor del punto isoeléctrico se tomó del pH medio entre los valores de
pKa, este dio como resultado 5.65

Equipo 2
Se llevaron a cabo 33 muestras, donde el pH mayor se obtuvo de 12.48 y se empezó
con un pH de 1.2, El cambio se a partir de la muestra 11 a la muestra 12 donde
aumento de 3.6 a 8.15, observando la gráfica y los pKa´s obtenidos se determinó que
el aminoácido desconocido para el equipo 2 es Histidina con pKa´s experimentales
de 2.27 y 11.34, y el punto isoeléctrico fue de 6.8083.

Equipo 3
En este equipo se contabilizaron 30 muestras, su punto de crecimiento se dio en la
muestra 12 donde se dio un incremento de 4.16 de pH en comparación a la anterior
muestra, se empezó con pH inicial de 1.47 y se terminó con uno de 12.56, al igual
que el equipo 2 se determinó que su aminoácido desconocido es Histidina.

Equipo 4
En el caso de este equipo, los jovenes que se encargaron de preparar los reactivos
de esta practica se equivocaron y le dieron a este equipo un NaOH de 0.01 N y no de
0.1 N como estaba indicado asi que se hicieron en total 103 muestras y no llegaron a
nada.

Equipo 5
El equipo 5 empezo con un pH de 1.59 donde hicieron 53 muestras en el cual se
llego a un pH de 12.34, donde desde las muestras muestras 17 y 18 se presencio un
gran despunte del pH. Apartir de la grafica y de los pKa´s obtenidos se dedujo que el
aminoacido es Arginina.
En la Arginina el valor del punto isoeléctrico se tomó del pH medio entre los valores
de pKa, este dio como resultado 10.605.

Equipo 6
El equipo 6 realizo 36 muestras donde el pH inicial fue de 1.88, el despunte de pH se
llevó en las muestras 11 y 12 aumentando de 4.1 a 8.3, donde se dio otro despunte
entre las muestras 18 y 19, por lo tanto se obtuvieron 3 pKa´s que fueron de 2.6, 9.7
y 12.51, y el punto isoeléctrico se dio de 11.05, en base a estos resultados y
comparándolos a los teóricos se llegó a la conclusión que el aminoácido desconocido
es Arginina.

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Equipo 7
Se llevaron a cabo 191 muestras debido al error cometido de haber cambiado el
NaOH de 0.01 N a 0.1 N, donde el pH mayor se obtuvo de 10.37 y se empezó con un
pH de 1.14, El cambio se a partir entre las muestra 150 a la muestra 156 donde el
aumento fue de 4.9, observando la gráfica y los pKa´s obtenidos se determinó que el
aminoácido desconocido para el equipo 7 fue Metionina con pKa´s experimentales de
1.895 y 9.55, y el punto isoeléctrico fue de 5.72.

Equipo 8
En este equipo se contabilizaron 80 muestras, su punto de crecimiento se dio en la
muestra 74 donde se dio un incremento de 3.4 de pH en comparación a la anterior
muestra, se empezó con pH inicial de 1.07 y se terminó con uno de 9.22, sus pKa´s
fueron de 1.4754 y 8.6183 y en base a estos resultados y a la gráfica se determinó
que el aminoácido desconocido se asemeja mucho a la Cisteína.

Equipo 9
El ultimo equipo hizo un total de 127 muestras, teniendo un pH inicial de 0.41, el
despunte de pH se dio en las muestras 107 a 109 de 1.57 a 1.96, su pKa que se
obtuvo fue de 1.81, y en base a los datos y a la gráfica se dedujo que es Cisteína.

CONCLUSIÓN

Esta práctica, aunque su desarrollo fue sencillo, es una práctica muy larga debido a
que entre muestra y muestra es muy poco tu avance y en ocasiones este se queda
atascado en un pH, pero en algunos laboratorio se cuenta con equipos para que esto
sea aún más fácil y menos cansado, esta práctica nos deja conocimientos amplios,
sobre todo las curvas de titulación, que son herramientas muy poderosas, ya que a
través de éstas pudimos determinar, por ejemplo, el pKa´s, y por medio de éstos, el
punto isoeléctrico de un aminoácido, y poder identificar a este con estas
propiedades.

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REFERENCIAS

Christopher K. Mathews (2013). Bioquímica. Madrid: Pearson Educación.

Ehu.eus. (2018). AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS:

http://www.ehu.eus/biomoleculas/buffers/buffer3.htm [Consultado 12 Feb. 2018].

Fernández</a>, &. (2018). Aminoácidos - Punto Isoeléctrico. [online]

Quimicaorganica.org. http://www.quimicaorganica.org/aminoacidos-peptidos/528-
aminoacidos-punto-isoelectrico.html [Consultado 13 Feb. 2018].

Quimitube.com. (2018). Cómo determinar los pKa de un aminoácido | Quimitube.

[online]: http://www.quimitube.com/determinar-pk-aminoacido-valoracion-acido-base
[Consultado 12 Feb. 2018].

[1] Tema 4. Curvas de titulación de aminoácidos. Departamento de Bioquímica y

Biología molecular de la Universidad de Salamanca. Verónica González Núñez.

[2] Ehu.eus. (2018). AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS:

http://www.ehu.eus/biomoleculas/buffers/buffer3.htm [Consultado 12 Feb. 2018].

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