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Es por ello que antes de comenzar con las actividades prácticas, todas las personas involucradas
(estudiantes y profesores) tienen la obligación de conocer cuáles son las normas de seguridad a
seguir en el laboratorio de manera tal, que el trabajo se realice con un riesgo mínimo de
exposición, tanto para las personas que lo ejecutan como para el medio ambiente.
OBJETIVOS
Reconocer y poner en práctica el uso adecuado de los equipos y materiales de uso frecuente
en el laboratorio de Microbiología.
Reconocer el uso adecuado de cada una de las partes del microscopio óptico compuesto.
Autoclave
Homo
Incubadoras
Baño serológico
Cajas de Petri estériles con Agar Nutritivo
Escobillones de algodón estéril (copitos estériles)
Pipetas
Nevera
Reactivos químicos
Porta Objetos y Cubre Objetos
Papel impreso (periódico) con letra pequeña
Tijeras y hoja de afeitar nueva
Papel y lápiz
Lápiz de colores
Lana o algodón de colores
Microscopio
Mechero bunsen
Asas bacteriológicas
Tubos de ensayo
Corcho
Polen de flor
Polvillo de ala de mariposa
Jabón antibacterial
Rollo de papel secante (toallas de papel de cocina)
Alcohol antiséptico
Encendedor
Cinta pegante de papel
TEORÍA RELACIONADA
Todos los microscopios tienen una estructura con un brazo y una base. A esta estructura se unen
las demás partes. La plataforma donde se coloca lo que se quiere observar se denomina platina.
En la base de la mayoría de los microscopios hay una fuente de luz. Su lámpara posee un
regulador de voltaje para variar la intensidad de la luz. Casi todos los microscopios disponen de
algún sistema para reducir la intensidad de la luz.
Los botones de ajuste grueso (macrométrico) y ajuste fino (micrométrico) se encuentran situados
de forma concéntrica a los lados del microscopio; se emplean para enfocar los objetos que se
observan.
¿Cómo es un microscopio?
El microscopio es un aparato que aumenta la imagen de los objetos y nos permite observar
aquello que, en un principio, es invisible para el ojo humano. Fue utilizado por primera vez,
como tal, por el holandés Anton van Leeuwenhoek el año 1675. Tiene dos partes: una óptica,
para observar, y otra mecánica, que sostiene a la primera.
40 x 15 = 600 aumentos.
El enfoque del objeto se realiza con el tornillo macrométrico, y después se afina con el tornillo
micrométrico, hasta conseguir una visión perfecta. Una vez enfocado el objeto, se pasa al
objetivo inmediatamente superior, hasta obtener el aumento deseado. Cada vez que cambies de
objetivo cuida de no tocar la preparación, el vidrio se puede romper.
Con la fijación se consigue que la muestra que queremos observar no se mueva. Se suele utilizar
diferentes líquidos: alcohol etílico 70%, ácido acético…; también se utilizan altas temperaturas
que ayudan a deshidratar la muestra. El objeto, una vez fijado, debe lavarse en un medio
apropiado como alcohol o agua.
La tinción consiste en colorar la muestra que queremos observar para, así, destacar aquellas
partes que nos interesen observar. La gama de colorantes es muy variada, y cada uno resalta una
parte diferente del objeto. Los colorantes siguientes suelen utilizarse para resaltar las partes de la
célula:
– La estructura celular: azul de metileno, orceína acética.
– El citoplasma celular: eosina, fucsina ácida, verde luz.
– El núcleo celular: fucsina básica, verde metilo.
Tipos de microscopio
La mayoría de los microscopios livianos compuestos contienen las siguientes partes: lentes
oculares, brazo, base, iluminador, tablado, resolving nosepiece, lentes de objetivo y lentes
condensadores. Detalles de las parte del microscopio. Partes del microscopio
Tomar un porta
Colocar en el porta objeto y agregar
objeto la lamina de una gota de agua
corcho. destilada.
2. Letra impresa.
Buscar en el
Seleccionar la más
periodico la letra
pequeña y cortarla.
"e".
Tomar un porta
Colocar la letra "e" objeto y agregarle
en el portobjeto. una gota de agua
destilada.
Observar en el
microscopio usando el
Cubrir el porta
objetivo debil y seco
objeto
fuerte y hacer sus
esquemas.
3. Fibra de lana
Seleccionar
varias fibras de
Tomar lana.
lana de diferentes
colores .
Tomar un porta
Colocar las fibras objeto y agregarle
en el porta una gota de agua
objetos. destilada.
4. Grano de polen.
Colacar granos de
Tomar una flor polen en un porta
objeto.
Tomar el porta
Cubrir el porta objeto y agregarle
objetos una gota de agua
destilada.
1. CHARLA DE BIOSEGURIDAD
El docente da una charla de bioseguridad, donde nos da a conocer las normas básicas en un
laboratorio de microbiología. Aquí entendimos que la peligrosidad que tienen los agentes está
directamente relacionada con el tipo de microorganismo y la manipulación a la que es sometido.
Por ello es básico:
Utilizar siempre bata blanca de tela gruesa, manga larga y limpia, y zapatos cerrados. Esto
preserva la ropa de muchos deterioros y le protege contra quemaduras de la piel con ácidos
fuertes o sustancias corrosivas. La limpieza, cuidado al trabajar, empleo correcto de las
técnicas, interés y actitud, son factores esenciales que contribuyan definitivamente al éxito de
la práctica de laboratorio.
Leer cuidadosamente las guías de laboratorio correspondientes antes de cada sesión de
trabajo. Nunca llegar al laboratorio sin estar enterado de qué es lo que se va hacer.
Llevar un equipo personal de trabajo deben proveerse de: alcohol, lápiz negro, lápices de
colores, borrador, sacapuntas, antibacterial, cinta de enmascarar, cuchillas, tijera, fósforos
y una libreta de apuntes para registrar los datos y observaciones.
Evitar tomar alimentos o fumar dentro del laboratorio, sus manos pueden estar
impregnadas de sustancias tóxicas o nocivas que pueden afectar su salud, o causar
accidentes. Los peligros en un laboratorio no son el fuego y las descargas eléctricas, sino
el descuido y la irresponsabilidad.
Entrar al laboratorio en forma ordenada, dejar las carteras, libros y otros objetos
personales en el lugar que se les indique para tal fin.
Limpiar y desinfectar las superficies de trabajo, antes de comenzar y al finalizar la sesión
práctica.
Lavar las manos con agua y jabón antes de realizar las actividades programadas, antes de
salir del laboratorio y siempre después de manejar materiales que se sabe o se sospecha
que son contaminantes.
Trabajar cerca del mesón, adoptando una buena postura y estando físicamente cómodo.
Evitar llevar en el laboratorio accesorios que podrían ser fuente de contaminación (por
ejemplo joyas)
Evitar desplazamientos innecesarios, movimientos bruscos. Hablar sólo lo indispensable.
Conocer el manejo de todos los equipos y reactivos a emplear antes de iniciar las
actividades indicadas en la práctica. Si usted tiene alguna duda, diríjase al profesor.
Mantener el área de trabajo ordenada, libre de libros, cuadernos u objetos personales,
exceptuando aquellos equipos y materiales necesarios para la realización del trabajo
práctico.
Tener cuidado con el alcohol cuando manipule el mechero. Nunca debe dejar éste
desatendido.
También realizamos un reconocimos de todos los materiales y equipo que están en el laboratorio.
Notamos que el laboratorio de la universidad de Córdoba cuenta con las señales de advertencias
requerido en los laboratorios de microbiología.
2. MICROSCOPI PARTES Y FUNCIONES
En esta segunda parte de la práctica hicimos un reconocimiento de la parte óptica y
mecánica del microscopio.
Parte óptica
Partes mecánicas
También conocimos y colocamos en práctica cada uno de los pasos que hay que tener en cuenta
al momento de realizar enfoques con el microscopio. Estos pasos son:
1. PREPARACIÓN DE CORCHO:
Inicialmente hicimos varios cortes delgados de corcho con la ayuda de una hoja de afeitar y
escogimos el corte más fino. Seguidamente en un porta objetos, colocamos una gota de agua
destilada, le adicionamos el corte de corcho escogido, y le colocamos el cubre objetos,
procurándonos de que no le quedaran burbujas de aire.
4X 10X 40X
Logramos observar que, en el objetivo de menor aumento, se aprecian celdas muy unidas entre
sí, en forma de panal, y se delimitan con delgados filamentos. Sin embargo, al ir cambiando el
objetivo a uno de mayor aumento logramos visualizar mejor las células vegetales del corcho a
través del microscopio ya que en el objetivo de mayor aumento (40X) donde el campo visual se
reduce y aumenta el objeto a observar. Gracias a este objetivo se pudo evidenciar la pared celular
con cavidades amplias y dobles, es notable que esta le da sostén y la forma a la célula, además de
que esta estructura prevalece a pesar de que la célula está muerta. Del mismo modo en la
observación se aprecia la pared celular, ya que no se hace evidente otra estructura y es
observable el campo vacío entre una pared celular y otra donde se encontraba el citoplasma, pero
a causa de que la célula está muerta no se logró apreciar ningún otro organelo.
2. LETRA IMPRESA
Finalmente, a simple vista la letra se ve en su posición real, sin ninguna textura, nítida y
mucho más pequeñita que a través del microscopio, no se establece una ampliación de
aumento y presenta mayor dificultad de observación, ya que el ojo humano necesita una
mayor resolución para poder identificar detalles que solo el microscopio es capaz de
reconocer.
¿Qué diferencias encuentra entre la observación microscópica y la observación a simple
vista?
La diferencia es que a simple vista se ve nítida, en su posición real, y es más difícil observar
detalles de su textura y por el microscopio se ve borrosa, invertida y se ven más detalles de la
textura de la tinta de la letra.
Ahora mueva el carro o la lámina portaobjetos hacia atrás ¿Hacia dónde se mueve la
imagen?
Al mover la lámina hacia atrás, la imagen ahora se mueve de alante hacia atrás y al invertir el
movimiento de la platina se mueve en sentido contrario, cuando se mueve la platina hacia
atrás parece que la imagen se desplazara hacia el lado contrario porque es el efecto que
causan las lentes convergentes sobre la retina del ojo humano.
10X
4X 40X
Podemos decir que con el objetivo de 4X se ven tres hilos más visibles que a simple vista
(amarillo, azul y rojo) muy compactos, donde su textura es fibrosa pero poco visible. Por otro
lado, en el objetivo de 10X el hilo de la lana se aprecia en tamaño más amplio donde cada hilo
está formado por unas fibras aún más delgadas, sin embargo, con el objetivo de 40X se logran
apreciar en gran medida las micro fibrillas de cada una de las fibras de estos hilos.
4. GRANOS DE POLEN
Para iniciar colocamos algunos granos de polen de una flor en el porta objetos, seguidamente
le agregamos una gota de agua y le colocamos el cubre objetos para luego observarlo al
microscopio.
Las observaciones fueron las siguientes:
4X 10X 40X
Observamos el grano de polen la exina, podemos ver los poros que son pequeños puntos negros
en la imagen, dentro del grano de polen podemos ver el núcleo con menos intensidad.
En el objetivo de 40x podemos apreciamos el grano de polen muchos más grande, la exina se la
ve más clara, observamos los poros que son orificios de color oscuro, dentro podemos ver un
núcleo color amarillo, teniendo en cuenta que dentro de los granos de polen pueden haber hasta 5
núcleos.
PREGUNTAS DE CONSULTA
1. Cuáles son los poderes del microscopio y como pudo comprobarlos en su trabajo
práctico.
R/: Poder separador: también se lo conoce como poder de resolución y es la distancia mínima
entre dos puntos que pueden verse separados. En un microscopio óptico este valor es de 0,2
décimas de micrómetro mientras que en el electrónico es de 10 A.
Poder de definición: es la nitidez de las imágenes que se obtiene. Esto depende de la calidad de
las lentes.
Poder de penetración o profundidad: permite visualizar los diferentes planos de una preparación
o está dado por el ajuste de precisión que se logra con el tornillo micrométrico.
R/: Como bien se sabe, un microscopio es un instrumento compuesto de varias lentes, que al
actuar en conjunto magnifican en miles de órdenes de magnitud el tamaño de los objetos,
haciendo posible que podamos ver objetos y seres vivos sumamente pequeños, que no podemos
ver a simple vista, tal es el caso de las bacterias, las levaduras, las algas unicelulares, etc.
La importancia del microscopio reside en que nos permite ver a las células y a ciertas estructuras
intracelulares. También podemos hacer cortes histológicos de tejidos animales o vegetales para
ver su disposición en detalle, caracterizar la epidermis de un animal o de una hoja, y visualizar
un sinnúmero de estructuras más.
3. ¿Qué relación existe entre el poder de aumento de los objetivos y el área del campo
visual?
R/: la relación que existe entre el poder de aumento de los objetivos y el área del campo visual es
que este último varía de acuerdo al número de aumento del objetivo que se está utilizando.
4. Explique porque en la medida en que aumenta el objetivo disminuye el número de alas
de mariposa y granos de polen observados
R/: En la medida en que se aumentan los objetivos el número de alas disminuye debido al poder
separador del microscopio lo que permite una mayor definición pero de un área de campo más
pequeña puesto que la lente del objetivo es más convexa y registra un campo menor de visión.
R/: Un microscopio compuesto es un aparato óptico hecho para agrandar objetos, consiste en un
número de lentes formando la imagen por lentes o una combinación de lentes posicionados cerca
del objeto, proyectándolo hacia los lentes oculares u el ocular. El microscopio compuesto es el
tipo de microscopio más utilizado.
Un microscopio digital tiene una cámara CCD adjunta y está conectada a un LCD, o a una
pantalla de computadora. Un microscopio digital usualmente no tiene ocular para ver los objetos
directamente. El tipo triocular de los microscopios digitales tienen la posibilidad de montar una
cámara, que será un microscopio USB.
6. ¿Cuáles pueden ser las causas de daños de los lentes del microscopio?
R/: causas del daño de los lentes de un microscopio: suciedad, hongos, ralladuras o bien
desajustes ópticos (desplazamiento del lente), mala colocación del lente
R/: El lente objetivo de un microscopio compuesto tiene una corta longitud focal. Después de
que la luz pasa a través de la muestra, pasa la lente objetiva y pasa el punto focal del lente
objetivo, así la imagen formada se invertirá. Esta imagen es el objetivo que se ve a través de la
lente del ocular. Éste actúa como un aumentador sencillo y alarga la imagen creada por el lente
objetivo. Como resultado, la imagen que se ve a través de un microscopio compuesto se invierte
al compararla con la muestra que se está examinando.
El objeto se coloca a una distancia ligeramente mayor que el foco del objetivo, lo que
proporciona una imagen real e invertida. Esta imagen se debe formar a una distancia del ocular,
menor que la distancia focal del mismo.
•Los virus: infectan otras células, modifican su metabolismo, son específicos a veces (solo
infectan a un tipo de células).
•Los hongos: provocan infecciones cutáneas y mucosas.
•Las bacterias: pueden invadir el organismo y liberar toxinas.
9. Qué características les permiten a los microorganismos tener una amplia distribución.
R/: características: su ciclo vital es relativamente corto y muy simple en comparación con el de
organismos más desarrollados y tienden tanto a vivir formando colonias como a generar una
abundante descendencia.
ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA
1. Consultar la función de los materiales de laboratorio mencionados en la práctica #1 adiciona aquellos que no fueron
colocados en el listado y realiza los esquemas correspondientes.
Descripción Nombre Nombre Evidencia Función Referencia
(inglés) Bibliográfica
Equipo Balanza Analytical Instrumento que sirve para medir la masa, https://www.tplabo
Analítica balance principalmente para medir pequeñas ratorioquimico.com
masas. Este tipo de balanza es uno de los /laboratorio-
instrumentos de medida más usados en quimico/materiales-
laboratorio y de la cual dependen e-instrumentos-de-
básicamente todos los resultados un-laboratorio-
analíticos. quimico/balanza-
analitica.html
Equipo Baño Serological Éste equipo se utiliza para transferir calor https://blog.acequil
Serológico bath indirectamente, por convección térmica abs.com.co/como-
del medio a una sustancia. Se basa en un se-utiliza/bano-de-
método empleado para conferir la maria-para-
temperatura uniforme a una sustancia laboratorio-usos/
liquida o sólida. La cual es sumergida en
un recipiente mayor, en este caso el baño,
con agua o aceite que se lleva hasta la
ebullición.
Equipo Autoclave Autoclave Es un dispositivo que sirve para http://www.equipos
esterilizar material de laboratorio, ylaboratorio.com/si
utilizando vapor de agua a alta presión y tio/contenidos_mo.
temperatura, evitando con las altas php?it=1498
presiones que el agua llegue a ebullir a
pesar de su alta temperatura. El
fundamento del autoclave es que coagula
las proteínas de los microorganismos
debido a la presión y temperatura, aunque
recientemente se ha llegado a saber de
algunas formas acelulares, tal como los
priones, que pueden soportar las
temperaturas de autoclave.
Vórtex o Vortex shaker Es un dispositivo simple utilizado https://www.tplabo
agitador comúnmente en los laboratorios para ratorioquimico.com
Equipo mezclar pequeños viales de líquido. /laboratorio-
quimico/materiales-
e-instrumentos-de-
un-laboratorio-
quimico/agitador-
vortex-agitador-
tubos-vortex.html
Material Porta objetos Carry objects Utilizada para almacenar muestras y https://www.tplabo
objetos con el fin de observarlas bajo el ratorioquimico.com
microscopio. /laboratorio-
quimico/materiales-
e-instrumentos-de-
un-laboratorio-
quimico/portaobjet
os.html
Material Escobillones Brush Se utiliza para lavar los instrumentos del http://www.fullqui
laboratorio. mica.com/2010/11/
escobilla.html
Material Beaker Beaker Se utiliza para contener distintos tipos de https://iquimicas.co
líquidos, para obtener precipitados a m/beaker-vaso-
partir de la reacción entre determinadas precipitado-
sustancias, para recoger los distintos instrumentos-
líquidos utilizados para luego desecharlos laboratorio/
correctamente, para calentar, disolver, o
para preparar reacciones químicas.
Material Asa Bacterial loop Sirve para la siembra por estrías e http://microbiologia
bacteriana inoculaciones en general. 3bequipo5.blogspot
.com.co/2014/10/as
as-microbiologicas-
y-su-uso.html
Material Mechero de Alcohol Se utiliza para calentar objetos que sean http://www.protoki
alcohol Burner necesarios para calentar, porque si no mica.com/tienda/eq
pueden explotar y pude hacer reaccionar uipos-para-
químicos dañinos. laboratorios/mecher
o-alcohol-vidrio/
Material Tubo de Test Tube Es un instrumento de laboratorio que se http://instrumentos
ensayo utiliza principalmente como contenedor delaboratorio.org/tu
de líquidos y sólidos a las cuales se les va bo-de-ensayo
a someter a reacciones químicas u otras
pruebas.
Material Succionador Suction Permite el ascenso del líquido a través del http://aparatostecni
tubo sin necesidad de utilizar “aspiración cos.blogspot.com.c
manual”. o/2015/06/aspirado
r-de-pipetas.html
Material Cubre objetos Covers objects Sirve para cubrir los objetos que estén en https://educalingo.c
el portaobjetos que a su vez está en un om/es/dic-
equipo llamado microscopio. es/cubreobjetos
Nº Mal Bien
1 Reactivos regados en el piso El piso del laboratorio debe estar completamente limpio,
sin ninguna clase de líquidos en el.
2 Mirar de cerca el montaje en el Al trabajar con el mechero se debe tener el cabello
mechero (mujeres) totalmente recogido, y mantener una distancia
prudente.
3 Verter los reactivos en un Los montajes deben estar a una altura igual de la de
montaje que se encuentre a una nosotros para evitar que al momento de agregar el
altura máxima que nosotros reactivo este nos caiga encima.
4 El docente se concentra solo en El docente encargado del laboratorio debe estar
los estudiantes que están a su pendiente a todos los estudiantes que en este se
alrededor encuentren, para evitar accidentes.
5 Enchufar cualquier equipo Al momento de conectar cualquier equipo eléctrico se
mientras tiene agua alrededor deben percatar que a su alrededor no haya ningún
líquido que conduzca corriente eléctrica.
6 Ubicar reactivos en su puesto Solo el auxiliar o el docente deben ubicar los reactivos es
de forma inadecuada sus respectivos puestos.
7 Utilizar la pipeta con la boca Para utilizar la pipeta es necesario usar un succionador o
una pera.
8 Los bolsos y demás pertenecías Los bolsos y demás pertenecías deben estar guardados
de los estudiantes cerca del en las gavetas correspondientes o alejados del mesón de
mesón de trabajo trabajo.
9 Reactivos ubicados en el suelo Los reactivos siempre deben estar ubicados en sus
puestos o al alcance de la vista para evitar romperlos por
accidente.
10 Líquidos regados por todo el El laboratorio debe ser un lugar completamente seco.
laboratorio
CONCLUSIÓN
Con el desarrollo de esta práctica pudimos entender que las normas de bioseguridad son
esenciales en los laboratorios, ya que nos permiten obtener un mayor aprovechamiento del
entorno y nos ayudan a reducir riesgos a la hora de manipular objetos, sustancias o elementos
necesarios para un buen desarrollo de la práctica, para esto es fundamental conocer los temas o
procedimientos que se van a trabajar dentro del laboratorio, esto permite un mayor
aprovechamiento educativo. Además se llegó a la conclusión que el microscopio es la
herramienta principal en un laboratorio de microbiología, el cual nos permite ampliar nuestra
realidad y nos hace ver cosas que a simple vista no vemos. Sin embargo debemos adecuar el
microscopio según la persona que lo esté utilizando, debido a que se presenta variaciones en
varios aspectos como: la medida de los ojos, la falta o abundancia de luz.
REFERENTES BIBLIOGRAFICOS
http://www.medigraphic.com/cgi-bin/new/resumen.cgi?IDARTICULO=37329
http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0187-
893X2013000100006
http://www.euroschool.lu/prof.montilla/ficheroactivi/actividades3/El%20microscopi
o.pdf
https://www.minsalud.gov.co/salud/Documents/observatorio_vih/documentos/preve
ncion/promocion_prevencion/riesgo_biol%C3%B3gico-
bioseguridad/b_bioseguridad/BIOSEGURIDAD.pdf
http://redlagrey.com/files/Microbiologia_Medica_Jawetz_25_www.rinconmedico.sm
ffy.com.pdf
https://biolprocariotas.files.wordpress.com/2010/03/microbiologia-general.pdf