You are on page 1of 4

Các phương pháp xác định urea hiện nay

1. Phương pháp so màu


a. Nguyên lý
Phương pháp so màu được thực hiện dựa trên phản ứng
giữa 4-dimethyl-amino-benzaldehyd (4-DMAB) và urea có
trong mẫu tạo phức chất màu vàng (đo được ở bước sóng
435 hoặc 420 nm). Phương pháp này được áp dụng để xác
định urea trong thức ăn gia súc theo AOAC 2006 (967.07)
trong sữa bột, thủy hải sản, nước tiểu và trong máu.
b. Ưu điểm
Ưu điểm của phương pháp này là việc tiến hành khá nhanh
và đơn giản.
c. Nhược điểm:
Tuy nhiên, phương pháp này ít chọn lọc do không loại trừ
hết được ảnh hưởng của nền mẫu. Đây là phương pháp đã
được một số phòng thí nghiêm nghiên cứu và phân tích
urea trong nước mắm.

2. Phương pháp test kit (Urease)


a. Nguyên lý
Nguyên lý của phương pháp testkit là dùng enzym urease
phản ứng với urea sinh ra nitrogen ammonia và hợp chất
nitrogen ammonia được xác định bằng phương pháp cất
Kjeldahl. Phương pháp này dùng để xác định urea trong
nước tiểu, rượu và trong thức ăn gia súc.
b. Ưu điểm: phương pháp này nhanh và đơn giản
c. Nhược điểm: phương pháp này còn nhiều hạn chế do
việc sử dụng và bảo quản enzym này. Mặt khác do phương
pháp này không nhạy nên giới hạn phát hiện cao, sai số
lớn khi xác định urea do bản thân mẫu có nitrogen
ammonia

3. Phương pháp tủa với Xanthydrol:


a. Nguyên lý
Nguyên lý của phương pháp tủa với xanthydrol là cho
Urea phản ứng với xanthydrol trong môi trường acid
acetic đậm đặc để tạo thành tủa di N-9H-xanthen-9-ylurea.
Phương pháp này được áp dụng nhiều trong việc xác định
urea trong phân bón và hóa chất.
b. Ưu điểm
Phương pháp tủa với xanthydrol tiến hành đơn giản, chính
xác cho hợp chất có hàm lượng cao, tinh khiết.
c. Nhược điểm
Phương pháp tủa với xanthydrol không áp dụng được cho
việc xác định urea ở hàm lượng vết.
2. Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao
2.1. Nguyên lý
Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao cho phép Urea
(hoặc hợp chất tạo dẫn xuất của urea) được tách trên cột
thích hợp của sắc ký lỏng hiệu năng cao và được đo bằng
đầu dò UV, huỳnh quang. đầu dò khúc xạ và đầu dò khối
phổ. Phương pháp này thường được ứng dụng để xác định
urea trong nước tiểu, rượu và phân bón. Trong phạm vi đề
tài nghiên cứu này, tác giả sử dụng phương pháp sắc ký
lỏng hiệu năng cao để xác định hàm lượng urea có trong
nước mắm sau khi tạo dẫn xuất với xanthydrol.
2.2. Ưu và nhược điểm của phương pháp sắc ký lỏng hiệu
năng cao
a. Ưu điểm
+ Loại được ảnh hưởng của nền và có độ tin cậy cao
+ Chọn lọc và có độ nhạy cao
+ Xác định được hàm lượng urea ở dạng vết
b. Nhược điểm
Nhược điểm của phương pháp này là giá thành cao và đầu
tư lớn.
3.
Sơ lược về phương pháp xác định urea trong nước mắm
bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao
Hiện nay chưa có phương pháp tiêu chuẩn để xác định
urea trong nước mắm. Một số nghiên cứu xác định urea
trong nước mắm theo phương pháp TCVN6600:2000,
AOAC2006 (967.07). Phương pháp này xác định urea này
dựa trên phản ứng tạo màu đặc trưng giữa 4-dimethyl-
amino-benzaldehyd (4-DMAB) và urea có trong mẫu tạo
phức chất màu vàng (đo được ở bước sóng 435 nm).
Phương pháp này thích hợp để xác định urea trong các sản
phẩm thức ăn gia súc. Tuy nhiên trong nền mẫu nước mắm,
do bản chất của sản phẩm nước mắm trong quá trình tự
thuỷ phân hình thành các acid amin tự do, các acid amin tự
do này có khả năng cũng phản ứng với thuốc thử nên gây
sai số thừa khi áp dụng phép thử. Vì vậy phương pháp này
chịu ảnh hưởng rất nhiều của nền mẫu nước mắm và
không phù hợp cho việc áp dụng trong phân tích.
Ngoài phương pháp trên, một số nhà phân tích đã sử dụng
phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao - đầu dò huỳnh
quang để xác định urea. Nguyên lý của phương pháp này
là cho urea tạo dẫn xuất với thuốc thử xanthydrol tạo
thành hợp chất N-9H-xanthen-9 -ylurea và được đo bằng
đầu dò huỳnh quang ( ex =213 nm; em=308 nm) sau khi
tách bằng cột sắc kí pha đảo (C18) trên thiết bị HPLC.
Phương pháp này ưu việt hơn so với phương pháp so màu
và các phương pháp khác do tính chọn lọc, độ nhạy và khả
năng phát hiện cao.

You might also like