UNIVERSIDAD DE CORDOBA

PROGRAMA DE LICENCIATURA EN CIENCIAS NATURALES

GENÉTICA PRÁCTICA
OCTAVO SEMESTRE.

PRACTICA DE LABORATORIO Nº1

EXTRACCIÓN DE ADN VEGETAL

INTRODUCCIÓN

El ácido desoxirribonucleico, frecuentemente abreviado ADN (y también

DNA, del inglés Deoxyribonucleic Acid) constituye el principal componente del material genético de
la inmensa mayoría de los organismos, junto con el ARN, siendo el componente químico primario
de los cromosomas y el material en el que los genes están codificados.
En las bacterias, el ADN se encuentra en el citoplasma mientras que en organismos más complejos,
tales como plantas, animales y otros organismos multicelulares, la mayoría del ADN reside en el
núcleo celular.
Se conoce desde hace más de cien años. El ADN fue identificado inicialmente en 1868 por Friedrich
Miescher, biólogo suizo, en los núcleos de las células del pus obtenidas de los vendajes quirúrgicos
desechados y en el esperma del salmón. Él llamó a la sustancia nucleína, aunque no fue reconocida
hasta 1943 gracias al experimento realizado por Oswald Avery.
Su función principal es codificar las instrucciones esenciales para fabricar un ser vivo idéntico a aquel
del que proviene (o casi similar, en el caso de mezclarse con otra cadena como es el caso de la
reproducción sexual o de sufrir mutaciones).

Materiales:

• 1 banano.*
• 1 trozo de tela para poder filtrar.(paño)* o papel filtro
• 1 pipeta de Pasteur.
• 1 Licuadora
• 1 tubo de ensayo con tapa.
• Alcohol etilico
• 1 varilla de vidrio.
• 1 embudo.
• Agua destilada.
• Beaker de 500 ml.
Beaker de 50 ml
• Sal de mesa.*
• Lavalozas (líquido). O shampoo de color claro*
• Microscopio.
• Portaobjetos y cubreobjetos.
• Azul de metileno.
Hielo*
Una cuchara plástica*
El material marcado con asterisco es aportado por los estudiantes.

PROCEDIMIENTO

1. En un tubo de ensayo vierte cierta cantidad de alcohol etílico y luego deja enfriar, si es
necesario rodéalo de hielo.
2. En una licuadora, mezclar una banana por taza de agua destilada (250ml).
3. Licuar por 15-20 segundos, hasta que la solución se mezcle.
4. En un beaker pequeño, preparar una solución consistente en una cucharadita pequeña de
shampoo y dos pizcas de sal.
5. Agregar 20 ml (4 cucharaditas) de agua destilada.
6. Disolver la sal y el shampoo revolviendo lentamente con la cuchara de plástico evitando
formar espuma.
7. A la solución preparada en el paso 4, agregar tres cucharaditas de la mezcla de banana del
paso 2.
8. Mezclar la solución con la cuchara por 5-10 minutos.
9. Mientras uno de los miembros del grupo mezcla la solución de banana, otro miembro
pondrá el filtro Nº 2 de café dentro de otro beaker. Doblar el borde del filtro alrededor del
beaker para que el filtro no toque el fondo del beaker.
10. Filtrar la mezcla vertiéndola dentro del filtro y dejar que la solución drene por algunos
minutos hasta que sean 5 ml aproximadamente de filtrado para testear.
11. Tomar un tubo de ensayo con alcohol frío. Para mejores resultados el alcohol debe estar
tan frío como sea posible.
12. Llenar la pipeta Pasteur con la solución de banana y agregarla al alcohol. El ADN no es
soluble en alcohol. Cuando el alcohol se agrega a la mezcla, los componentes, excepto el
ADN, permanecen en la solución mientras el ADN precipita en la capa de alcohol.
13. Dejar la solución reposar por 2 a 3 minutos sin mover. Es importante no batir el tubo de
ensayo. Se puede observar el ADN blanco el cual precipita en la capa de alcohol. Extrae un
poco de la mezcla y deposítala en el portaobjetos con un poco de azul de metileno tíñela
durante unos tres minutos. Lleva el portaobjetos con la mezcla de banano y observa en el
microscopio.
14. Cuando se obtienen buenos resultados, habrá suficiente ADN para levantar con una varilla
de vidrio (el ADN se enrolla a la varilla). O usando una pipeta de Pasteur que haya sido
calentada en la punta para formar un gancho, se puede recuperar (tomar) algo de ADN. El
ADN tiene la apariencia de mucus blanco y fibroso.

Preguntas para analizar la experiencia.

1. ¿Por qué se puede suponer que la banana contiene ADN?

2. ¿Dónde se encuentra ese ADN?
3. ¿Qué otro tipo de sustancias es posible encontrar entre los componentes de la banana?
4. ¿Por qué es necesaria la acción del detergente?
5. ¿Cuál es la función de la sal en la experiencia?
6. ¿Cuál es la función del alcohol en la experiencia?
7. ¿Pará qué se realiza el licuado?
8. Al finalizar la experiencia se obtiene un mucus blanco y fibroso que sería el ADN. ¿Es posible que
la molécula de ADN se visualice a simple vista? ¿Por qué?
9.A partir de la respuesta anterior, ¿qué creen que contiene “el ADN” obtenido en la experiencia?.
10. Averigua las técnicas moleculares que se pueden emplear para el análisis del ADN luego de haber
realizado la extracción del mismo.
11. Realiza dibujos de lo observado al microscopio.
12.Consulta otra técnica para extracción de ADN.
13. Cómo crees que esta práctica pueda contribuir en el desarrollo de competencias en tus
estudiantes de bachillerato?